Orientador: Wirley Gonçalves Assunção / Resumo: A utilização de biomateriais que visam devolver o volume ósseo perdido após a perda dentária tem se expandido. O osso é um tecido conjuntivo altamente especializado, possuindo dinâmica aposicional onde o equilíbrio entre neoformação e reabsorção envolve a interação de fatores endócrinos, parácrinos e autócrinos. Diversas associações de materiais diversos e substitutos ósseos têm sido estudadas, porém, o MTA (Agregado Trióxido Mineral) ainda carece de informações acerca da sua utilização como substituto ósseo ou em associação com demais substitutos. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a influência da presença do MTA Angelus Branco® nas proprorções de 5%, 10% e 15% em associação com substituto ósseo de Hidroxiapatita e β- Tricálcio Fosfato na citotoxicidade, resposta tecidual e reparo ósseo, em defeito crítico em calvária de ratos. Para tanto, utilizou-se cultura celular da SAOS-2 para avaliação citológica e ensaio MTT do contato direto e eluentes. Também foram utilizados 112 ratos machos Wistar distribuídos em 7 grupos e avaliados em 2 tempos (7 e 28 dias). Após eutanasiados foram submetidos à microtomografia e por coloração de hematoxilina e eosina para análise histológica e histomorfométrica. A análise da homocedasticidade foi realizada pelo teste Shapiro-Wilk, para distinção dos dados paramétricos e não paramétricos. Para análise dos dados paramétricos, foi realizada análise de variância One-Way (ANOVA One-Way) e realizado o pós-teste de Tukey para os parâmetros micr... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The use of biomaterials that aim to return lost bone volume after tooth loss has expanded. Bone is a highly specialized connective tissue with appositional dynamics where the balance between neoformation and resorption involves the interaction of endocrine, paracrine and autocrine factors. Several associations of different materials and bone substitutes have been studied. However, the MTA (Mineral Trioxide Aggregate) still lacks information about its use as bone substitute or in association with other substitutes. Thus, the aim of this study was to evaluate the influence of presence of MTA Angelus Branco® in the 5%, 10% and 15% proportions in association with Hydroxyapatite and β-Tricalcium Phosphate bone substitute in cytotoxicity, tissue response and bone repair in critical defect in rat calvaria. For this, SAOS-2 cell culture was used for cytological evaluation and MTT assay of direct contact and eluents. We also used 112 male Wistar rats distributed into 7 groups and evaluated at 2 distinct times (7 and 28 days). After euthanasia, the specimens were submitted to microtomography and hematoxylin and eosin staining for histological and histomorphometric analysis. The analysis of homoscedasticity was performed by the Shapiro-Wilk test for distinction of parametric and non-parametric data. For analysis of parametric data, one-way analysis of variance (One-Way ANOVA) was performed and Tukey's post-test was performed for the microtomographic parameters and for the cytotoxicity t... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Ana Fabrícia Braga Magalhães / Resumo: ABSTRACT – Preweaning calf mortality is one of main causes of economic losses in beef cattle, since most of economic incomes are represented by the number of weaned calves available for sale. It is also detrimental for genetic progress due to the reduction of young candidates for selection. The inclusion of molecular markers in genetic analysis allows a better understanding of genetic mechanisms underlying calf mortality. The objectives of this study were: i) to estimate direct and maternal heritability of preweaning calf mortality in Nellore cattle and ii) to seek for genomic regions and candidate genes affecting direct and maternal effects of preweaning calf mortality in Nellore cattle. Variance components were estimated via Bayesian Inference using a threshold animal model, that included the systematic effects of contemporary group, birth weight as linear covariate, and age of dam at calving as linear and quadratic covariates. The direct and maternal genetics, and the residual were fitted as random effects. The final dataset used contained phenotypic records on 67,196 animals, offspring of 1,469 sires and 30,970 dams. The SNPs effects were estimated based on the weighted single-step GBLUP approach, using information of 8,443 genotyped animals with 410,936 SNPs. Direct and maternal heritability estimates were of 0.2143±0.0348 and 0.0137±0.0066, respectively. The top 10 genomic regions accounted for 13.61 and 14.23% of direct and maternal additive genetic variance and harbor... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Submitted by ZULEIKA DE ANDRADE CAMARA PINHEIRO (zuleikacamara@yahoo.com.br) on 2018-10-18T15:46:33Z No. of bitstreams: 1 TESE FINAL - Para Repositório.pdf: 9030020 bytes, checksum: c5c1efeb5f8d2617556259d2bdd56edb (MD5) / Approved for entry into archive by Satie Tagara (satie@marilia.unesp.br) on 2018-10-18T19:23:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 pinheiro_zac_dr_mar.pdf: 9030020 bytes, checksum: c5c1efeb5f8d2617556259d2bdd56edb (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-18T19:23:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pinheiro_zac_dr_mar.pdf: 9030020 bytes, checksum: c5c1efeb5f8d2617556259d2bdd56edb (MD5) Previous issue date: 2018-08-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Esta etnografia foi realizada a partir de cenários de circulação de homens em situação de rua; Praça do Ferreira no centro de Fortaleza/Ce e o Centro POP (política pública para a população em situação de rua). A tese trata de apreender um modo específico de “olhar fronteiriço” para a relação contemporânea entre às margens, os chamados moradores de rua e o centro chamadas de “pessoas de bem”. Tendo como pano de fundo essa relação, o objetivo central deste texto é etnografar os estilos de masculinidades forjadas pelos homens em situação de rua com suas identidades abjetas e performatizações de gênero com fins de sobrevivência. Os homens em situação de rua, como categoria plástica de rejeição, acusação e desvinculação social e econômica, evocam e questionam zonas de fronteiras simbólicas, espaciais, sociais, corporais, morais e políticas. Consequentemente, incitam nas “pessoas de bem” uma defesa de ações para a sua retirada dos espaços urbanos pelos quais circulam. Com expressões limites de degradação humana por estarem abaixo na escala social e por subverterem o espaço público, os homens que moram na Praça do Ferreira criam alteridades, gestam territorialidades, acionam o Estado e incitam políticas urbanísticas sanitárias e repressivas, além de provocarem saberes e classificações. A pesquisa foi realizada em dois registros empíricos distintos: i) convivência com os homens no Centro POP e participação nas oficinas socioeducativas; ii) convivência em suas sociabilidades no espaço da Praça do Ferreira e ruas do centro de Fortaleza. As descrições e análises das cenas do campo procuram circunscrever o funcionamento e a dinâmica das manobras e deslocamentos das masculinidades, no sentido de iluminar seus fluxos, violência, tensões mais frequentes, interesses em disputa e atores que as controlam. Do debate e das análises apresentadas no corpo da tese, destaco cinco argumentos centrais: i) o urbano produz diferenças sociais, e iluminar os cruzamentos entre as relações “nós”/“eles”, pessoas/cidade, vidas possíveis/rejeição, viver/sobreviver, vida/morte é evidenciar as conexões de força que atravessam as questões políticas e sociais que envolvem o fenômeno população em situação de rua; ii) os homens forjam uma masculinidade exacerbada tendo na virilidade seu atributo de engrenagem para a violência e a constituição de um macho exacerbado; iii) performatizam gênero em práticas de masculinidade negociada que são mais dependentes, indolentes e apáticas, pelas quais os homens lançam mão de acordos tácitos ou explícitos de cooperação e coadjuvação e atitudes subservientes e condescendentes, um estilo de masculinidade menos agressivo; iv) as formas de sobrevivência nas ruas instigam alguns hábitos distintos dos hábitos sociais aos quais estamos acostumados, ao que chamou-se de masculinidade animalesca, por entender que tais comportamentos observados mais se assemelhavam aos de um macho animal do que de um humano; v) os homens praticavam atos de violência sexual contra as mulheres, estuprando as que se encontravam solteiras; a estas práticas chamou-se de masculinidade desviante. No sentido de se livrarem dos atos de violência sexual, as mulheres performatizam gênero, incorporando atitudes, posturas, aparências e comportamentos masculinos, práticas essas que se chamou de masculinidades deslocadas. Por fim, as análises sugerem que as experiências das ruas estão norteadas não apenas por marcadores sociais de diferença, como raça, classe social e gênero, mas também pela ideia de masculinidades e performatizações de gênero como manobras de sobrevivência. Essas masculinidades produzem normas, gestões, tensões, violências e territorialidades, onde os corpos em suspensão são a última fronteira para sobrevivências nessa “terra de ninguém”, ou seja, as ruas. / This ethnography was made from scenarios of circulation of street men; the Ferreira Square in the center of Fortaleza/CE and the POP Center (public policy for the street population). The thesis is about apprehending a specific mode of "frontier look" for the contemporary relationship between the margins (street men) and the center ("good people"). Against this background, its central goal is to ethnograph the styles of masculinities forged by street men with their abject identities and their gender performations in order to survive. Street men, as a plastic category of rejection, prosecution and social and economic untying, evoke and enquire areas of symbolic, spatial, social, corporeal, moral, and political frontiers. Consequently, they incite in the "good people" an avid defense of actions for their withdrawal from the urban spaces through which they circulate. With bordering expressions of human degradation, as they are below in the social scale and because they subvert the public space, street people in Praça do Ferreira create alterities, generate territorialities, trigger the State and incite sanitary and repressive urban policies, besides to provoke knowledge and classifications. The research was conducted in two different empirical registers: i) coexistence with the men in the POP Center and participation in socio-educational workshops; ii) coexistence in their sociabilities in the space of the Square of Ferreira and streets of the Fortaleza’s center. The descriptions and analysis of the field’s scenes seek to circumscribe the functioning and dynamics of the ploy of masculinities, in order to clarify their flows, violence, most common tensions, the interests in dispute and the actors that control them. From the debate and analysis presented in the thesis, I highlight five central arguments: i) the urban areas produces social differences, and clarify the crossroads between "us"/"them", people/city, possible lives/rejection, live/survive and life/death relations is to emphasize the forces that pervades the political and social issues that involve the phenomenon of population in street situation; ii) the men forge an exacerbated masculinity, with virility as their violence device and constitution of an exacerbated male; (iii) they performatize gender in negotiated masculinity practices that are more reliant, indolent e apathetic, by which men resort to tacit or explicit agreements of cooperation and coadjuvation and subservient, and condescending attitudes; a less aggressive masculinity style; iv) the forms of survival in the streets instigate some habits different from the social habits to which we are accustomed, to what was called animalistic masculinity, appearing these behaviors more to those of an animal male than a human’s; v) men practiced acts of sexual violence against women, raping those who were single; to these practices I called deviant masculinity. In order to get rid of acts of sexual violence, women performatized gender by incorporating male attitudes, posture, appearance and behaviors, which I called displaced masculinities. Finally, the analyzes suggest that the experiences of the streets are guided not only by social markers of difference, as race, social status and gender, but also by the idea of masculinities and gender performations as survival device. These masculinities produce norms, managements, tensions, violence, territorialities and alterities, where the bodies are the last survival frontier in no man's land: the streets.

Orientador: Sandra Aidar de Queiroz / Coorientador: Sabrina Luzia Caetano / Banca: Janaina Della Torre da Silva / Banca: Patricia Tholon / Banca: Danísio Prado Munari / Banca: Isabel Cristina Boreli / Resumo: O estudo dos comportamentos de imobilidade tônica (IT) e de reintegração social (CRS) pode revelar as interações homem-animal e animalanimal, refletindo no bem-estar dos animais no ambiente de cativeiro, acarretando, assim, em respostas positivas ou negativas para a produção e lucratividade do sistema de criação. Visando entender o nível de medo e a manifestação de sociabilidade em perdizes (Rhynchotus rufescens), a metodologia de análise de sobrevivência foi utilizada para estimar o tempo de permanência em IT e o tempo transcorrido para um animal se unir com seu conspecífico. Para isto, perdizes criadas no Setor de Animais Silvestres - FCAV - Unesp submetidas às avaliações de IT e de CRS, no período de 2006 a 2010, foram utilizadas. As observações de IT foram realizadas em 539 aves e os resultados revelaram que os efeitos de ano de nascimento, mês e peso corporal da ave na época da medida de IT foram importantes fontes de variação na duração do tempo em catatonia. Além disso, aves com maior peso corporal tenderam a permanecer maior tempo em IT. Observações de CRS realizados em 503 aves mostraram que as mais velhas levaram mais tempo para unir-se ao conspecífico. O efeito aleatório de pai foi significativo (p < 0,05) para IT e a herdabilidade estimada (h2) empregando-se o software Survival Kit foi igual a 0,37. A h2 para CRS foi 0,31, entretanto supõe-se alto erro-padrão associado a esta estimativa devido ao efeito aleatório de pai não ter sido significativo (p < 0,05). A correlação entre os valores genéticos de IT e de CRS foi 0,0598 (p = 0,1491), evidenciando a inexistência de genes de efeito aditivo comuns entre estes dois comportamentos na população analisada. É possível aplicar a seleção nas aves para diminuir o tempo de permanência em IT, sem alterar o nível de socialização / Abstract: The study of tonic immobility (TI) and social reinstatement behavior (SRB) can reveal interactions between man-animal and animal-animal. Those interactions reflect on the welfare of captive animals and may result in positively or negatively effects on the production and profitability of production system. Aiming at understanding the level of fear and the manifestation of sociability in red-winged tinamou (Rhynchotus rufescens), the survival analysis was applied to estimate the time in TI and also the time expent to an animal join with its conspecific. For this, redwinged tinamous reared in the Setor de Animais Silvestres - FCAV - Unesp hatched from 2006 to 2010 underwent TI and SRB evaluations. The observations of TI were performed in 539 birds and the results revealed that the effects of year of birth, month, and body weight of the bird at the time the measure of TI were important sources of variation for the time in catatonia; furthermore, birds with higher body weight tended to remain longer in TI. The SRB observations made in 503 birds showed that the older birds spent more time then the younger to join with their conspecific. The random effect of sire was significant (p < 0.05) for TI and the estimated heritability (h2) by Survival Kit software was equal to 0.37. The h2 for SRB was 0.31, however the estimate is supposed to have a high standard error associated with due to the random effect of sire being not significant. The correlation between the predicted breeding values of TI and SRB was 0.0598 (p = 0.1491), evidencing the non existence of common additive genes between these two traits in the studied population. Therefore, selection to decrease the time in TI could be applied on TI, without changing the level of socialization in this population / Doutor

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Sociais, Departamento de Sociologia, 2007. / Submitted by Luis Felipe Souza (luis_felas@globo.com) on 2008-12-12T18:06:41Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_2007_FlaviaGieselerAssis.pdf: 547236 bytes, checksum: acdce5f5ddcc5c64f9d26d716111e9c9 (MD5) / Approved for entry into archive by Georgia Fernandes(georgia@bce.unb.br) on 2009-02-18T19:10:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_2007_FlaviaGieselerAssis.pdf: 547236 bytes, checksum: acdce5f5ddcc5c64f9d26d716111e9c9 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-02-18T19:10:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_2007_FlaviaGieselerAssis.pdf: 547236 bytes, checksum: acdce5f5ddcc5c64f9d26d716111e9c9 (MD5) / Nos romances de Machado de Assis aparece com freqüência a figura do agregado. Agregado era o indivíduo livre e pobre que necessitava viver às sombras de um senhor para a manutenção de sua existência. Na sociedade brasileira do século XIX, o modo de produção escravista e monocultor, tirava do homem livre praticamente todas as possibilidades de integração à produção mercantil. Sem ter como se sustentar, e vivendo em um país em que o domínio dos senhores sobrepujavam a impessoalidade das leis, o vínculo criado com estes senhores era, muitas vezes, a única forma que possuíam para garantir a sobrevivência. A sua situação frágil o privava, muitas vezes, de um existir autônomo. A proximidade e quase familiaridade com senhor, o colocava em uma situação ambígua: ao mesmo tempo tinha reconhecidos seus predicados humanos e lhe era atribuída desclassificação social. As ambigüidades da vida agregada possibilitam uma multiplicidade de ações e acomodações que são bastante exploradas por Machado de Assis em seus romances. Utilizando a obra de Machado de Assis, esse trabalho buscou explorar as possibilidades de articulação entre essas duas esferas sociais. A estrutura histórica forjou o autoritário pensamento senhorial; As doutrinas do além-mar (positivismo, realismo, naturalismo), ajudaram a validar sua crença de superioridade. Ao agregado, que não podia contar com as normas impessoais, restou a tentativa de sobreviver sem poder contestar diretamente uma ordem rigidamente hierarquizada. Imobilizado por essa hierarquia, ele encontraria na manipulação da vontade senhorial sua única alternativa de alcançar seus interesses. Se as doutrinas cientificistas da época – as mesmas usadas como justificativa de dominação por parte dos senhores – percebiam o indivíduo de forma animalesca e, portanto, descaracterizava o agregado como um agente social, Machado de Assis resgatava o ser moral permitindo a ele o direito ao cálculo e a perfídia. Essa era mais uma sutileza do pessimismo irônico de Machado de Assis: a capacidade de humanizar por meio da relativização. Machado de Assis não negou os indivíduos. Sua obra mostrou que a luta pelo poder, por interesses pessoais e pela autonomia perpetuam, posto que a sociedade seja rigidamente hierarquizada. Afinal, antes de ser hierárquica ela é dinâmica; seja nos romances de Machado de Assis, seja nos conflitos da vida real. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / In the romances from Machado de Assis the “agregado” appear quite often. “Agregado” is denomination for the free poor man who was forced to live under a Master’s protection. At the19th century Brazilian society, the slavery and mocultural system of production take from the free poor man all the possibilities he had to get integrated to the productive system. As a consequence the free poor man could not afford his own expenses; also he was unprotected by State once that the political system was dominated by the land’s owners oligarchies. His only alternative to survive was to be linked to those powerful men. The autonomy of the “agregado” was null. However, he lived quite close from the Masters; close enough to share his familiar life. By on hand the “agregado” was considerated as someone close to the master who he was liked, by the other hand he was his social status was debased. This double situation allowed the “agregado” to lead the live in a several different ways. He never acted directly against his masters wishes, but he tried to manipulated the situations in order to guarantee a bigger autonomy. The racialist theories from that time took the humanity from these kind of people. When Machado de Assis showed the manipulation’s capacity of the “agregado” he allowed this character to have a soul: his not a blind animal any more, but someone who fights to keep his own identity. In spite of the existence of a strong hierarchy at the Brazilian society the society still dynamic. Machado de Assis was able to revel this situation. That happens at his romances, that is not different at the real life.

Resumo não disponível.

Orientador: Iguatemy Lourenço Brunetti / Coorientador: Christiane Pena Soares / Banca: Hugo Pequeno Monteiro / Banca: Denise Crispim Tavares / Banca: Patricia Maria Stuelp Capelo / Banca: Luis Octávio Regasini / Resumo: Os produtos naturais apresentam imensa diversidade estrutural, característica útil para alcançar alvos moleculares específicos importantes para a terapia de diversas doenças, contribuindo assim para a ampliação do arsenal farmacológico. Como observado para o gênero Rhamnus, a espécie vegetal Rhamnus sphaerosperma var. pubescens, nativa no Brasil, pode apresentar um grande potencial químico e farmacológico; popularmente é conhecida como "fruto-de-pombo", com poucos estudos relatando suas propriedades. Tem composição rica em compostos antraquinônicos, onde já foram identificados crisofanol, fisciona e emodina. Os objetivos deste estudo foram verificar o potencial antioxidante via estudo da capacidade de captura sobre espécies reativas de oxigênio e nitrogênio, assim como a capacidade de indução de morte celular dos extratos, frações e antraquinonas isoladas de Rhamnus sphaerosperma var. pubescens (Rhamnaceae) em células tumorais de colo uterino com e sem o genoma do vírus HPV (SiHa e C33-A, respectivamente), e carcinoma oral de células escamosas (HSC-3). A antraquinona emodina apresentou a melhor capacidade de captura sobre as espécies NO• e O2 •- em relação as demais antraquinonas e extratos brutos. No ensaio de captura sobre o HOCl/OCl- todas as amostras foram efetivas, sendo os extratos brutos com melhor atividade, e dentre as antraquinonas, o crisofanol apresentou maior efetividade. Nenhuma amostra demonstrou capacidade na captura do H2O2. As antraquinonas emodina e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Natural products have immense structural diversity, useful feature to achieve specific molecular targets in cancer treatment, and thus contribute to the expansion of the therapeutic arsenal. As notorious for the Rhamnus genus, plant species Rhamnus sphaerosperma var. pubescens, native in Brazil may present a great chemical and pharmacological potential; It is popularly known as the Fruto-de-pombo, with few studies reporting its properties. This species has rich composition with anthraquinones, which have been identified: chrysophanol, physcion and emodin. The objectives of this study were to verify the capture capability of reactive species of oxygen and nitrogen, as well as cell death inducing ability of the extracts, fractions and isolated anthraquinones of Rhamnus sphaerosperma var. pubescens (Rhamnaceae) in cervical tumor cells with and without the genome of HPV virus (SiHa and C33-A, respectively), and oral squamous cell carcinoma (HSC-3). The anthraquinone emodin showed the best capture capability of the species NO• and O2 •- compared with other anthraquinones and crude extracts. In the scavenge assay of HOCl / OCl- all samples were effective, and the crude extracts showed better activity and chrysophanol showed better effectiveness among anthraquinones. No samples demonstrated ability in capturing the H2O2. The anthraquinones emodin and physcion demonstrated cytotoxic effect on the cell lines SiHa, C33-A, HSC-3 and HaCaT with mixed cell death (apoptosis and necrosis), independent of caspases pathway, detected in cytomorphological test with fluorochromes exclusion, annexin-V and evaluation of capsase-3 activity. The chrysophanol was not cytotoxic in these assays. Emodin, physcion and the crude extract... (Complete abstract click electronic access below) / Abstract: Natural products have immense structural diversity, useful feature to achieve specific molecular targets in cancer treatment, and thus contribute to the expansion of the therapeutic arsenal. As notorious for the Rhamnus genus, plant species Rhamnus sphaerosperma var. pubescens, native in Brazil may present a great chemical and pharmacological potential; It is popularly known as the Fruto-de-pombo, with few studies reporting its properties. This species has rich composition with anthraquinones, which have been identified: chrysophanol, physcion and emodin. The objectives of this study were to verify the capture capability of reactive species of oxygen and nitrogen, as well as cell death inducing ability of the extracts, fractions and isolated anthraquinones of Rhamnus sphaerosperma var. pubescens (Rhamnaceae) in cervical tumor cells with and without the genome of HPV virus (SiHa and C33-A, respectively), and oral squamous cell carcinoma (HSC-3). The anthraquinone emodin showed the best capture capability of the species NO• and O2 •- compared with other anthraquinones and crude extracts. In the scavenge assay of HOCl / OCl- all samples were effective, and the crude extracts showed better activity and chrysophanol showed better effectiveness among anthraquinones. No samples demonstrated ability in capturing the H2O2. The anthraquinones emodin and physcion demonstrated cytotoxic effect on the cell lines SiHa, C33-A, HSC-3 and HaCaT with mixed cell death (apoptosis and necrosis), independent of caspases pathway, detected in cytomorphological test with fluorochromes exclusion, annexin-V and evaluation of capsase-3 activity. The chrysophanol was not cytotoxic in these assays. Emodin, physcion and the crude extract promoted increased intracellular oxidative stress, verified by thiobarbituric acid reactive species assay (TBARS)... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

O objetivo deste experimento foi determinar a sobrevivência de blastocistos Mus domesticus domesticus vitrificado em palhetas na presença de uma haste metálica .Blastocistos Mus domesticus domesticus coletados no quarto dia após a fecundação, foram avaliados morfologicamente e divididos aleatoriamente em três grupos. Os embriões do grupo controle foram transferidos para gotas de meio KSOM e cultivados in vitro por 48 horas. Os embriões selecionados para criopreservação foram expostos a uma solução crioprotetora constituída por PBSm + de 10% etileno-glicol + 10% propileno-glicol, para promover uma desidratação das células embrionárias. Após foram transferidos para a solução de vitrificação que continha 20% etilenoglicol + 20% propilenoglicol diluídos em PBSm, e mantidos durante 25 segundos, sendo imediatamente imersos em nitrogênio submetido à vácuo. As taxas de sobrevivência embrionária revelaram uma maior eficiência da técnica com a inserção da peça metálica (56,21% - 86/153) em relação ao método convencional (18,84% - 26/138). Concluímos assim que a presença da peça metálica em contato com a amostra propiciou maior taxa de sobrevivência dos embriões submetidos à vitrificação envasados em palhetas de 0,25 mL. / The aim of this experiment was determine the Mus domesticus domesticus blastocysts survival rates after vitrification in straws containing a metallic stick, that allows to increase the temperature changes among the nitrogen and the embryo sample. Day 4 Mus domesticus domesticus blastocysts were collected from superovulated donnors and after morphologically evaluation were randomly divided in three groups. The embryos select as control group were transferred to KSOM medium drops and in vitro cultured during 48 hours. The crioperservation selected embryos were first exposed to a cryoprotective solution (modified PBS + 10% ethylene-glycol and 10% propylene-glycol) to promote embryo cell dehydration and after exposed during 25 seconds to the vitrification solution composed by modified PBS + 20% ethylene-glycol and 20% propylene-glycol, and immediately plunged into slush liquid nitrogen. The embryo survival rate in group vitrified in the straws containing the metallic stick (56,21% - 86/153) was significantly different from the observed in the group loaded in original straws (18,84% - 26/138). In conclusion, the presence of the metallic stick in contact with the sample was efficient to enhance more suitable survival rates after vitrification of Mus domesticus domesticus blastocysts loaded in 0,25 mL straws.

O desenvolvimento de protocolos eficientes para a vitrificação de embriões mamíferos ainda é um desafio para os especialistas em reprodução. Soluções crioprotetoras de baixa toxicidade associadas a técnicas seguras de envase são fatores fundamentais, para proporcionarem uma eficiente identificação e controle sanitário das amostras. Dois experimentos foram realizados para determinar a taxa de sobrevivência de embriões Mus domesticus domesticus envasados em palhetas convencionais (0,25 mL), na presença de uma haste metálica de ouro, empregando soluções crioprotetoras descritas para a vitrificação em microvolume. No experimento 1, avaliou-se a toxicidade da solução de desidratação (SD: PBSm + 10% EG + 10% PROH + 0,5 M sacarose), expondo-se os embriões por diferentes tempos: 1 (T1), 3 (T2) ou 10 min (T3). A toxicidade da solução de vitrificação (SV: PBSm + 20% EG + 20% PROH) foi determinada pela exposição dos embriões durante 25, 60 ou 180 seg, previamente desidratados por 1 ou 3 min. No experimento 2, avaliou-se a utilização do macrovolume (palhetas com a haste de ouro) e microvolume (micropipetas de vidro - GMP) na vitrificação dos blastocistos expostos à SV por 25 seg, previamente desidratados por 1 ou 3 min. Os dados foram analisados pelo teste Qui-Quadrado (P<0,05). No experimento 1, não foi observada diferença estatística entre as taxas de eclosão dos embriões desidratados: T1=68,0% (38/56), T2=72,0% (36/50), T3=71,0% (39/55) e o grupo controle, (74,0% - 48/65). No entanto, houve diferença significativa (P<0,05) na taxa de eclosão em relação ao tempo de exposição dos embriões à SV. Os embriões desidratados por 1 ou 3 min e expostos à SV por 25 seg proporcionaram maiores taxas de re-expansão (79,0% vs 84,0%) e de eclosão (58,0% vs 72,0%), em relação aos tempos de exposição de 60 e 180 seg. No experimento 2, após a vitrificação dos embriões envasados nas palhetas com a haste de ouro, a taxa de eclosão dos blastocistos previamente desidratados por 1 min foi de 16,0% (10/64) e de 4,0% (2/57) quando previamente desidratados por 3 min. Por outro lado, os embriões envasados nas GMP, e previamente desidratados por 3 min, foram os que apresentaram maior taxa de eclosão (60,0% - 52/86). A vitrificação de embriões utilizando soluções crioprototetoras descritas para microvolume não foi eficiente na crioproteção dos blastocistos envasados em palhetas convencionais com a haste de ouro. / The development of efficient vitrification protocols for mammalian embryos still is a challenge for reproductive biologists. Low toxicity cryoprotectant solutions and safe vitrifications procedures that allow sample identification and sanitary control are fundamental factors. Two experiments were conducted to determine the survival rate of vitrified Mus domesticus domesticus embryos loaded into straws containing a metallic piece (manufactured in gold), using cryoprotectant solutions described for microvolume vitrification procedures. In Experiment 1, the toxicity of the dehydratation solution (SD: PBSm +10% EG + 10% PROH + 0,5 M sucrose) was evaluated using three different embryo exposure times: 1 (T1), 3 (T2) or 10 min (T3), in addition as well as the toxicity of the vitrification solution (SV: PBSm + 20% EG + 20% PROH) was also tested upon embryo exposure for 25, 60 or 180 sec, previously dehydration for 1 or 3 min. In Experiment 2, the use of macrovolume (straw with a stem of gold) or microvolume (glass micropipettes – GMP) was evaluated for the vitrification of blastocysts after exposure to SV for 25 sec and previous dehydration for 1 or 3 min. Data were analized by the Chi-square test (P<0,05). In Experiment 1, statistical differences were not observed between hatching rates of dehydrated embryos: T1=68.0% (38/56), T2=72.0% (36/50), T3=71.0% (39/55) and control group embryos, (74.0% - 48/65). However, a significant difference (P <0,05) was observed between hatching rates after embryos exposure to the SV. Embryos dehydrated for 1 or 3 min and exposed for 25 sec to the SV showed higher re-expansion (79.0% vs. 84.0%) and hatching rates (58.0% vs. 72.0%) than embryos exposed to SV for 60 or 180 sec. In Experiment 2, after vitrification of the embryos loaded into straws containing a metallic piece showed a hatching rate of 16.0% (10/64) when previouslly dehydrated for 1 min, and 4.0% (2/57) when for 3 min. On the other hand, embryos loaded into GMP, previouslly dehydrated for 3 min, showed a higher hatching rate, (60.0% - 52/60). Embryo vitrification using a cryoprotectant solution described as suitable for microvolume was not efficient to cryoprotect blastocysts loaded into macrovolume straws containing a metallic piece.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia / Made available in DSpace on 2013-07-16T02:40:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 214255.pdf: 1658518 bytes, checksum: c5817b005a84e2f801ce18d9dcb5a96c (MD5) / Os pacientes infectados pelo Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV) apresentam diminuição dos níveis séricos de antioxidantes e aumento simultâneo na produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), caracterizando um estado crônico de estresse oxidativo. A ativação imune crônica que ocorre desde os estágios iniciais da infecção é responsável pelo aumento da produção das EROs, que favorecem a replicação viral através da ativação de fatores de transcrição, como NF-kB e AP-1, e a depleção dos linfócitos por apoptose. Os elevados níveis de apoptose verificados nesses pacientes são responsáveis pelo comprometimento do sistema imune e progressão para AIDS. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da suplementação com 800 mg/dia de a-tocoferol e 2.000 mg/dia de ascorbato sobre a viabilidade celular e a evolução da infecção pelo HIV em pacientes submetidos à terapia antirretroviral, através da avaliação de marcadores laboratoriais. Participaram deste estudo 47 voluntários soropositivos para o HIV, destes, 13 foram suplementados com ascorbato, 14 com a-tocoferol e 20 fizeram uso de placebo. As análises laboratoriais foram realizadas antes do início do tratamento e após 60, 120 e 180 dias. Os resultados obtidos demonstraram o efeito adicional da suplementação sobre o aumento dos níveis de viabilidade celular (p=0,002) e diminuição dos níveis de apoptose (p=0,0001), independentes da terapia antirretroviral. Os níveis séricos de IgA apresentaram diminuição no grupo suplementado com a-tocoferol, no entanto não houve diferença estatística (p=0,490). Da mesma forma, houve uma tendência de melhores resultados dos níveis séricos de IgM no grupo suplementado com ascorbato (p=0,511). Para os marcadores CD4, CD8, relação CD4/CD8 e níveis plasmáticos de RNA do HIV, não observamos efeito adicional da suplementação com ascorbato ou a-tocoferol. A partir desses resultados concluímos que a suplementação com ascorbato e a-tocoferol constituem uma ferramenta importante na manutenção da viabilidade celular e recuperação do sistema imune em pacientes infectados pelo HIV.