Aquest estudi avalua la utilitat diagnòstica clínica dels biomarcadors imflamatoris respecte de la complicació sèptica intraabdominal en el postoperatori de pacients intervinguts de cirurgia electiva de còlon. La peritonitis postoperatòria és la principal causa de sèpsia postoperatòria i de mort en un postoperatori de cirurgia intraabdominal. Malgratls darrers avenços en maneig perioperatori en els hospitals, el seguiment es fa en base a criteris de gravetat, fet que fa que el pacient sigui diagnosticat més tard de l’inici de la complicació. Nous biomarcadors de sèpsia com la proteïna C reactiva (PCR), procalcitonina (PCT), han estat usats en clínica com a marcadors diagnòstics de sèpsia. El present treball pretén trobar els indicadors de mala evolució clínica i dels marcadors imflamatoris plasmàtics usats en clínica a partir dels quals es podrien indicar maniobres diagnostico-terapèutiques específiques. Es fa una anàlisi descriptiva d’una mostra de 341 casos de neoplasia colo-rectal recollits de forma prospectiva consecutiva, amb 73 casos d’infecció d’òrgan-espai (ILQ-OE), de les quals 53 corresponen a casos de dehiscència de sutura (DS), i 23 a DS clínica. La mostra per a l’anàlisi de biomarcadors és sobre 298 pacients, mostra que inclou 45 casos de DS, i 67 casos d’ILQ-OE. La morbiditat mèdica inclou 146 complicacions mèdiques no sèptiques (42,82%). La morbiditat infecciosa global ha estat del 47,51%, amb 162 casos entre ILQ i IDLQ. La IDLQ ha estat del 17,30%. La ILQ ha estat del 37,24%. La incidència de la ILQ-OE ha estat del 21,41%. L’índex de DS és del 15,54%. La DS dintre de les ILQ-OE ha estat del 72,60%. El dia mediana de diagnòstic ha estat el 7è dia PO (rang 2-35 dies). La reintervenció global ha estat del 12,17%. L’índex de mortalitat ha estat del 6,40%, amb 22 casos de mort postoperatòria. La mortalitat entre el grup que presenta ILQ-OE és del 16%. La DS precoç abans del 6è dia postoperatori ha mostrat una mortalitat (26,67%) doblement superior a la tardana, a partir del 6è dia (10,53%). S’han detectat 19 casos amb retard diagnòstic, definit com la diferència entre el dia de diagnòstic i el de primer dia de sospita. La distribució dels retards diagnòstics abarca un rang de valors de 30 dies, distribuíts en 2 pics, un de principal entorn els 2,5 dies, i un de més tardà i menor, entorn els 22,5 dies. El 30,33% dels pacients presenten almenys un criteri SIRS el dia abans de la IQ. A l’anàlisi multivariant les variables que mostren relació estadísticament significativa amb el desenvolupament d’una ILQ-OE són (Xi2) el valor de la PCR, la presència d’identificadors IMEC, 3 criteris SIRS, o la presència d’hepatopatia crònica. Aquests paràmetres permeten la construcció d’un score de risc per a la consecució d’una complicació sèptica intraabdominal postoperatòria. L’score, un cop aplicat a la mostra objecte d’estudi, obté una mitjana de dies guanyats al diagnòstic de 6,95 dies (mediana de 6,0, mínim de -2 dies, màxim de 32 dies) al diagnòstic d’ILQ-OE. L’aplicació a la mostra obté una sensibilitat (S) de 83,56%, i una especificitat (E) del 52,61%, amb un VPN del 92,16%. Com a conclusions podem afirmar que els nous biomarcadors imflamatoris (PCR, PCT, PCT-US, i pPCT 1-116) sí compleixen una funció com a eina diagnòstica complementària del procés sèptic intraabdominal postoperatori en cirurgia colo-rectal electiva, obtenint la seva major utilitat en combinació amb els identificadors de mala evolució clínica (IMEC) a la mostra estudiada, i no per separat (definits com la presència de 10 possibles identificadors de mala evolució clínica, recollits a peu de llit, d’entre febre, trastorn hemodinàmic, alteració de consciència, taquipnea, abdominalgia, ili paralític perllongat, diarrea, oliguria, petició de proves complementàries i alteració del dèbit dels drenatges o altres). Aquesta combinació no es veu afavorida per la inclusió de més d’un biomarcador en un mateix score de predicció diagnòstic. L’score compost pels valors de la PCR, conjuntament amb el nombre d’IMEC i la presència o no d’hepatopatia crònica constitueix una eina diagnòstica més eficaç que els criteris de sospita clàssics, arribant a avançar fins a 6 dies de mediana el diagnòstic de la complicació sèptica intraabdominal en el model simulat sobre la mostra recollida. El present estudi demostra que la combinació de marcadors clínics i biològics o biomarcadors (combinats entre ells i/o amb marcadors tradicionals de sèpsia) dintre dels 10 primers dies en el postoperatori d’una intervenció de còlon amb anastomosi o sutura intraabdominal, permeten un diagnòstic més acurat de la complicació sèptica intraabdominal que la clínica, traduïble en dies guanyats al diagnòstic, i permet, per tant, la possibilitat d’iniciar abans maniobres diagnòstico-terapèutiques específiques precoces. / This study evaluates the clinical diagnostic utility of the inflammatory biomarkers concerning the septic postoperative complication of patients taken part of elective colo-rectal surgery. The postoperative peritonitis is the main cause of postoperative sepsis and cause of death in those patients. Despite of the last advances in postoperative management, the follow-up usually is being made in base to criteria of gravity, so delaying the diagnostic of the complication. Biomarkers of sepsis like C-reactive protein (CRP), and procalcitonin (PCT), have been used in clinical as diagnostic markers of sepsis. The present work pretends to find the indicators of bad clinical evolution from the inflammatory biomarkers used in clinical practice, which from to be able to indicate diagnostic-therapeutic specific manoeuvres. It does a descriptive analysis from a sample of 341 cases of colo-rectal cancer prospective-consecutive collected, with 53 cases of anastomotic leakage (AL), 23 of them clinical leaks, and 73 organ-space surgical-site infection (OS-SSI). The sample for biomarkers analysis is of 298 patients, sample that includes 45 cases of AL, and 67 cases of OS-SSI. The global infection rate, taking both surgical site infection (SSI) and non-surgical or “at distance” site infection (DI), is 47.51%. The DI has been of 17.30%. The SSI has been of 37.24%. The incidence of the SSI-OE has been of 21.41%. The AL rate is of 15.54%. The AL within the SSI-OE has been of 72.60%. The mean day of diagnostic has been the 7th postoperative day (rank 2-35 days). The global reoperation index has been of 12.17%. The mortality index has been of 6.40%, with 22 cases of death. The mortality in the OS-SSI group is of 16.00%, so on the other hand the precocious AL (before the 6th day) has showed a mortality (26.67%) doubly upper to the late, from the 6th day and beyond (10.53%). It has been detected 19 cases with diagnostic delay, defined as the difference between the day of diagnostic and the first day of suspicion. The distribution of the diagnostic delay takes a rank of values about 30 days, distributed in two modes, one of main surroundings the 2.5 days, and one of later and lesser, surroundings the 22.5 days. The 30.33% of the patients present at least one criterion SIRS the day before of the SI. From the multivariant analysis the variables that shows statistical relationship with the development of OS-SSI are (Xi2) the addition of 50 points in the value of the CRP, the presence of 3 identifiers of bad clinical evolution (IBCE), 3 criteria SIRS, or the presence of chronic hepathopaty. These parameters allow the building of a score of risk for the achievement of the septic complication identification. The score, once applied to the study sample, obtains an average of overcoming days of 6,95 days (mean of 6,0, minimum of 0 days, maximum of 32 days) to the diagnostic of OS-SSI. The application to the sample obtains a sensitivity of 83,56%, and a specificity of 52,61%, with a negative predictive value of 92,16%. As a conclusions it can be affirmed that the new inflammatory biomarkers (CRP, PCT) do fulfil a function as a diagnostic tool of the septic intraabdominal postoperative complication in elective colo-rectal surgery, obtaining his greater utility in combination with the identifiers of bad clinical evolution (IBCE) in the sample studied, and not separately (IBCE defined as the presence of 10 possible identifiers of bad clinical evolution, collected at the bedside, including fever, haemodinamic disfunction, alteration of consciousness, taquipnoea, abdominal pain, paralytic ileum, diarrhoea, low urine output, request of complementary tests and alteration of the debit of the drainages or other). This combination does not take advantage by the inclusion of more biomarkers in a same prediction diagnostic model. The score compounded by the values of the CRP, jointly with the numeral IBCE and the presence (or not) of chronic hepathopaty constitutes a more powerful diagnostic tool than the classical suspicion criteria, reaching a mean save of 6 days to the diagnostic of the septic complication in the simulation over the study sample. The present study shows that the combination of clinical bad evolution parameters and biomarkers (combined between them) within of the 10 first days in the postoperative period of an elective colo-rectal intervention with anastomosis or suture, allows a more powerful diagnostic of the septic complication that the clinical alone, then changeable in days won in front of the diagnosis, and allows, therefore, the possibility of initiate diagnostic-therapeutic specific manoeuvres precociously.

El término insight hace referencia a un fenómeno multidimensional que incluye no sólo la conciencia de un paciente de sus síntomas o enfermedad sino también una mayor elaboración, conceptualizada distintamente como una correcta atribución (Amador et al., 1991), una consideración de los síntomas como patológicos (David, 1990) o un mayor conocimiento de los efectos de los síntomas o enfermedad en el individuo en el contexto de su ambiente (Marková y Berrios, 1995). El déficit de insight es más grave y prevalente en los trastornos del espectro psicótico que el observado en otras patologías mentales y sus consecuencias negativas no tardan en verse reflejadas en la evolución de los pacientes ya que este déficit ha sido relacionado con una pobre adherencia terapéutica. A pesar de que se dispone de una serie de evidencias clínicas y neurobiológicas, las causas de este déficit aún son desconocidas. Actualmente, se dispone de numerosos estudios que desde un punto de vista empírico se han centrado en determinar el papel que juegan algunas variables clínicas en este proceso, entre las cuales se incluyen las aportaciones de esta tesis. Este trabajo tuvo como finalidad analizar algunos factores psicopatológicos, cognitivos y metodológicos del insight en pacientes psicóticos en diferentes situaciones clínicas. En la primera parte, se hace una revisión de los aspectos históricos y teóricos más sobresalientes en el estudio de este fenómeno. En la segunda parte, se presentan dos investigaciones actualmente publicadas: 1) Adaptación al castellano de la escala de insight de Marková y Berrios, 2) Insight, symptomatic dimensions, and cognition in patients with acute-phase psychosis Finalmente, en el Anexo se presenta un tercer trabajo titulado: Insight and awareness of auditory hallucinations in patients with acute-phase psychosis, remitido a la revista Schizophrenia Research. En el primer estudio se realizó la adaptación al castellano de la escala de Insight de Marková y Berrios. Los datos evidenciaron que la versión aquí propuesta presenta validez a nivel psicométrico. Esta escala es una herramienta que permite valorar dimensiones del insight que no han sido consideradas por las escalas tradicionales. Rescata la visión y la atribución subjetiva de los cambios experimentados por el paciente a través de la enfermedad mental y también la forma en cómo los articula. Supone una nueva herramienta de considerable interés para futuras investigaciones. En el segundo estudio se observó que la relación entre el déficit de insight y la severidad de los síntomas psicóticos negativos no fue lineal, sino que ésta estuvo mediada por el déficit en las habilidades cognitivas generales. Por otro lado, el perfil sintomático de los pacientes jugó un importante papel en las relaciones que se establecieron entre el insight y los síntomas psicóticos negativos. En relación con la naturaleza multidimensional del insight, en este estudio se observó que el insight debe de ser analizado considerando cada una de sus dimensiones de manera independiente ya que no todos los síntomas psicóticos estuvieron relacionados con todas las dimensiones del insight y aquellos que sí lo estuvieron no lo hicieron con la misma fuerza. Finalmente, en el tercer estudio se observó que la presencia de alucinaciones auditivas, por sí misma, no es un indicador de mayor déficit de insight. Los pacientes con conciencia de alucinaciones auditivas atribuían el origen de las voces a causas internas y relacionadas con ellos mismos, como era de esperar, pero también experimentaban mayor estrés en comparación con los participantes sin conciencia de este síntoma. Para futuras investigaciones sería necesario diseñar estudios que analicen, entre los pacientes con conciencia de alucinaciones auditivas, la relación causal entre la internalización de las voces y el estrés. / Insight in psychosis is understood as a multidimensional phenomenon that includes not only a patient’s awareness of their symptoms or illness, but higher elaboration, distinctly conceptualized as a correct attribution (Amador et al., 1991), a consideration of symptoms as pathological (David, 1990), or a better understanding of the effects of symptoms or disease in the individual in the context of their environment (Marková and Berrios, 1995). Lack of insight is more severity and prevalent in psychotic spectrum disorder that observed in other mental disorder. Although it has a series of clinical and neurobiological evidence, the reasons of this deficit are still unknown. The aimed of this work was to evaluated psychopathological, cognitive and methodological factors of insight in psychotic patients in different clinical situations. The first part is a review about the historical and theoretical perspectives more salient in the study of insight. The second part, there are two research actually published: 1) Spanish adaptation of the insight scale of Marková and Berrios, 2) Insight, symptomatic dimensions, and cognition in patients with acute-phase psychosis. Finally, annex can be found a third paper entitled Insight and awareness of auditory hallucinations in patients with acute-phase psychosis. Submitted in the Journal Schizophrenia Research. In the first study was observed that the Spanish adaptation of the Scale of Insight of Marková and Berrios has good internal and external reability, is simple, easy to performed and very sensitive to change. This scale a tool to assess dimensions of insight that have not been considered by traditional scales. Rescues vision and attribution subjective of the changes experienced by the patient through mental illness. This is a new tool of considerable interest for future research. In the second study was found that the symptomatic profile of subjects played an important role in determining the relationship between insight and its dimensions and the severity of psychotic symptoms. Cognitive function moderated these relationships only in the negative symptomatic profile. Finally, in the third study no statistically significant differences were found in insight and its three dimensions between patients with and without AH. In those with AH, subjects without awareness of this particular symptom also had a greater deficit of general insight and of its three dimensions than subjects with awareness of AH. The beliefs about origin of voices and intensity of distress were the variables with greatest influence in determining these differences. Aware patients attributed the origin of the voices to internal causes associated with themselves but reported a greater amount and intensity of distress than unaware patients. The presence or absence of AH does not seem to have an impact on insight or any of its three dimensions. Having no insight into AH is associated with a worse insight in general. The intensity of distress and the beliefs about the origin of voices (internal o external causes) seem to play a role in determining the awareness of AH, supporting psychological explanations of the phenomena of poor insight in psychosis. Psychological interventions for voices that work on the reattribution of voices to internal causes should also aim patients to gain and internal control of the voices.

Aquesta tesi està basada en tres articles que he publicat amb dades recollides d’una mostra de 1251 estudiants de Secundària i Batxillerat al Regne Unit. La informació que es va obtenir amb els qüestionaris que aquest grup de joves van emplenar, ha permès ampliar el coneixement del fenomen de somatització en aquesta població. Les somatitzacions són dolors i altres malestars físics que tenen un origen psicològic i no orgànic. Els símptomes psicosomàtics són comuns en la població pediàtrica. Poden ser lleus i transitoris o bé configurar trastorns psicosomàtics quan suggereixen malalties mèdiques, limiten funcionalment el pacient i comporten visites mèdiques. Aquests trastorns estan fonamentats en condicions psiquiàtriques que s’anomenen Trastorns Somatomorfs. La motivació per escriure aquesta tesi va sorgir de l’oportunitat de poder estudiar els símptomes psicosomàtics i les seves associacions en una mostra d’estudiants Britànics, així com els seu efectes en el funcionament global d’aquests joves i en la decisió de consultar el metge. L’objectiu del primer article era avaluar els símptomes somàtics utilitzant el CSI-35 (Children’s Somatization Inventory) i analitzar les propietats psicomètriques d’aquest qüestionari. El CSI-35 és un qüestionari que engloba preguntes sobre 35 queixes físiques que el nen ha presentat en les dues setmanes prèvies i avalua tant la frequència com la intensitat de les mateixes. El CSI-35 no avalua l’impacte dels símptomes en el funcionament global del nen, o les associacions amb l’estrès o amb les consultes mèdiques, aspectes que són crucials en l’estudi del fenomen de somatització. És per això que en aquest projecte vam afegir preguntes per avaluar totes aquestes facetes, i vam utilitzar una escala d’impacte en el funcionament global que pregunta sobre l’afectació dels símptomes somàtics en 4 àrees: concentració, estar amb els amics, anar a l’escola i disfrutar d’activitiats en general. Aquesta és la primera vegada que s’han estudiat tots aquests aspectes en una població comunitària d’estudiants Britànics en el context de símptomes somàtics identificats amb el CSI. A més a més d’avaluar els símptomes psicosomàtics utilitzant el CSI-35, i ja que els mals de panxa són les queixes somàtiques més freqüents en la població infanto-juvenil, vam decidir estudiar aquests símptomes amb més profunditat en el segon article. Fins ara hi ha hagut pocs estudis al Regne Unit que hagin estudiat prevalences de mals de panxa en mostres comunitàries d’adolescents anglesos, i les seves associacions amb l’estrès, problemes psicològics, l'impacte en el funcionament global i en les consultes mèdiques. D’altra banda, estudis en la població adulta indiquen que els pacients que consulten el metge de capçalera amb alta freqüència constitueixen la majoria de les visites a Assistència Primària. Resultats en aquesta àrea d’investigació han demostrat que aquests pacients tenen més desavantatges socials, més problemes mèdics i de salut mental, consulten freqüentment altres metges i pateixen alts nivells de queixes psicosomàtiques. De totes maneres, l’estudi d’aquesta àrea en la població adolescent és escàs i no es coneixen els factors que estan associats amb l’alta freqüència de consultes mèdiques en els joves. És per això que en en el tercer article ens vam concentrar en investigar la contribució d’una sèrie de variables, incloent factors psicosocials, a la freqüència de visites mèdiques en la nostra mostra, posant especial èmfasi en el fenomen de somatització. / Psychosomatic pathology is common in the paediatric population. Many children present with somatic symptoms that are often transient and non-impairing and do not need medical care; however, there is a subgroup whose symptoms are chronic, impairing, leading to health-seeking behaviour and associated with psychiatric pathology, who can meet criteria for a Somatoform Disorder. This group constitute a real health concern if not identified and treated properly, as symptoms can persist into adolescence and adulthood with severe personal, economic and public health consequences. The three papers and thus this thesis, was motivated by a need to know more about the phenomenon of paediatric somatisation in British general population by using the CSI-35 (Children’s Somatization Inventory) and studying its psychometric properties. Paper 1 investigates the use of the CSI-35 in a community sample of 1251 Secondary school students and documents the frequency of the physical symptoms and their impact in terms of functional impairment and medical help seeking in British young people. This was the first time that impairment and perceptions of stress were studied in a British general population in the context of CSI identified somatic symptoms. In addition to exploring the use of the CSI in a new population, and since abdominal pains are one of the most commonly reported functional symptoms in children and young people, this was singled out and studied in this sample. Although acute and recurrent abdominal pain is one of the main presentations in children attending primary care services in the UK, there has been little work on the prevalence rates, impairment and medical help seeking behaviour associated with abdominal pain in British adolescent community samples. Therefore Paper 2 explored the relationship between abdominal pain and other symptoms reported by the CSI, as well as investigating its associations with stress and psychological problems, impairment and medical help seeking. Research indicates that frequent attenders account for a large proportion of contacts with general practice; it has been estimated that the top 10% of frequent attenders account for 30-50% of all such contacts. However, research in this area has mainly focused on adult populations and has consistently shown that frequent primary care attenders experience psychosocial disadvantage, have high rates of physical disease, an excess of psychiatric difficulties, high levels of somatisation, and high rates of using other health services. Adolescent primary health care attendance has been neglected, perhaps because adolescents are perceived to rarely attend. This perception is misguided since national statistics indicate that in the UK, 50-70% of young people attend their general practitioner with an approximate average of two consultations per year. High rates of psychiatric disorder and emotional symptoms have been reported amongst adolescent primary care attenders, therefore it may be expected that this association will be particularly marked in those who attend frequently. Given that medical help seeking is a key feature of somatisation, it seems likely that adolescents with functional somatic symptoms will be over represented amongst frequent attenders to primary care. However, very little work has been done on the contribution of functional somatic symptoms, alongside other psychosocial problems, to the frequency of general practice consultations amongst young people, indicating a gap in our knowledge. Therefore this was the focus of Paper 3.

L’espermatozoide és una cèl•lula molt especialitzada amb una estructura de la cromatina única formada per dos dominis principals: el domini nucli-protamínic on la gran majoria del DNA es troba empaquetat per protamines en toroides molt compactes, i el domini nucli-histònic on una petita proporció del DNA roman empaquetat per histones, d’una manera més accessible. Cada vegada són més les evidències que suggereixen que l’espermatozoide madur presenta una funció més enllà de la simple transmissió del material genètic patern a la següent generació. La hipòtesi principal d’aqueta tesi consisteix en que aquesta contribució paterna no és solament basada en la transmissió de patrons de metilació de DNA o modificacions d’histones concretes, si no que també es troba influïda per l’estat de la cromatina espermàtica i, en especial, per la seva composició proteica. Per aquest motiu, en aquesta tesi doctoral s’ha caracteritzat detalladament el contingut proteic del nucli de l’espermatozoide humà normal mitjançant dues estratègies diferents. Per una banda, les proteïnes majoritàries del nucli espermàtic, les protamines, han sigut analitzades per extraccions i electroforesis àcides per tal d’estudiar la seva implicació en la conservació de la cromatina. S’ha observat una relació negativa significativa entre la quantitat de protamines i el dany al DNA espermàtic (mesurat per la tècnica COMET) en pacients infèrtils que cursen tècniques de reproducció assistida. Aquests resultats han suggerit una funció de les protamines referent a la protecció del material genètic patern. A més a més, mitjançant tècniques basades en espectrometria de masses (Top-down proteomics), s’ha observat com les protamines podrien contenir modificacions post-traduccionals en la seva seqüència (fosforilacions, acetilacions, metilacions), el que suggeriria també una funció reguladora per aquestes proteïnes espermàtiques. En segon lloc, mitjançant espectrometria de masses també s’han caracteritzat la resta de proteïnes presents en el nucli del gàmeta masculí madur. S’han arribat a identificar centenars de proteïnes, la meitat de les quals corresponen a histones, variants d’histones, modificadors d’histones, factors de transcripció, proteïnes addicionals associades a la cromatina i proteïnes modificadores de la cromatina espermàtica. D’aquesta manera, mitjançant anàlisis bioinformàtics es pot observar com el nucli de l’espermatozoide humà madur es trobaria enriquit en proteïnes involucrades en processos reguladors com la modificació de la cromatina, modificació d’histones, expressió gènica i transcripció. Aquestes tendències també es trobarien presents en altres espècies de mamífers, com per exemple el ratolí, la rata o el macaco. La presència d’aquests grups de proteïnes intactes en una cèl•lula considerada transcripcionalment inerta ha suggerit una funció epigenètica/reguladora durant els primers estadis del desenvolupament embrionari. Addicionalment, en aquesta tesi doctoral s’ha observat que les proteïnes espermàtiques nuclears es poden diferenciar en dos grups diferents segons la seva afinitat per la cromatina espermàtica. D’aquesta manera, les proteïnes unides més fortament al DNA es trobarien majoritàriament implicades en funcions estructurals, mentre que les proteïnes unides al DNA d’una forma més feble es trobarien relacionades amb processos reguladors o epigenètics. Aquesta observació, juntament amb el fet conegut de que la regió més accessible de la cromatina espermàtica (associada a les histones) es troba especialment enriquida en promotors i gens del desenvolupament, suggeriria que part de les proteïnes nuclears espermàtiques podrien estar relacionades amb la regulació de la transcripció d’aquests gens, a més a més d’altres processos com la remodelació de la cromatina en el pronucli masculí. Per tant, mitjançant la caracterització del contingut proteic del nucli de l’espermatozoide humà, s’ha augmentat el coneixement d’aquesta cèl•lula i de la seva funcionalitat, recolzant la hipòtesi de que a més a més del propi material genètic patern, l’espermatozoide contribueix en la fertilització amb informació epigenètica, la qual inclou una composició proteica específica de la cromatina. / The mammalian spermatozoon is a very specialized cell with a unique chromatin structure: while the vast majority of the DNA is condensed by high compact toroids (avoiding any transcriptional and translational activity), a small part of the DNA remains packaged by nucleosomes. An increasing body of evidence is showing that, in addition to the transmission of the paternal genetic message to the next generation, the sperm cell is also involved in the transmission of epigenetic information. The main hypothesis of the present doctoral thesis is that, in addition to histone modifications, DNA methylation patterns and RNA content; protein composition of the sperm chromatin is also essential in epigenetic inheritance. Therefore, the protein content of the human sperm nucleus has been characterized using proteomic techniques. Firstly, by acid extraction and electrophoresis, it has been shown a negative relationship between protamine quantities and DNA damage in infertile patients who undergo assisted reproduction techniques, confirming an involvement of those proteins in the protection of the paternal DNA. In addition, by top-down proteomics, it has been detected several post-translational modifications in protamine sequences, which have suggested a potential regulatory role for those major sperm nuclear proteins. Secondly, it has been described the human sperm nuclear proteome using mass spectrometry techniques. A rich network of histones, histone variants, histone modifiers, transcription factors, chromatin-associated proteins and chromatin modifying proteins has been identified in the human sperm nucleus. In addition, based in Gene Ontology information, the human sperm nucleus seemed to be enriched in processes as chromatin remodelling, histone modification, transcription and gene expression. Furthermore, proteomic dissection of the sperm chromatin results in two groups of proteins differing in chromatin affinity. Higher-affinity sperm chromatin proteins seemed to be mainly involved in structural roles, while proteins with potential regulatory/epigenetic roles were identified with a lower sperm chromatin affinity. Altogether, the results obtained in this doctoral thesis have contributed in the knowledge of the nucleus of the male gamete and have suggested an involvement of the sperm nuclear proteins in post-fertilization events, as the chromatin remodelling in the male pronucleus or the transcription regulation of histone-bound paternal developmental genes.

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Objetivo: Investigar si el Trastorno Delirante es una entidad nosológica diferente a la Esquizofrenia analizando las diferencias entre las características clínicas y las neuropsicológicas. Metodología: Se realizaron dos estudios transversales. En el primer estudio, consta de 86 pacientes diagnosticados de Trastorno Delirante. El segundo estudio 115 pacientes con diagnóstico de Esquizofrenia. Estos eran pacientes de la red asistencial Parc Sanitari Sant Joan de Déu. Dentro de la zona de captación de esta red esta Cerdanyola, Ciutat Vella, Cornellá, Esplugues, Vilanova y la Geltru y el Prat de Llobregat, tiene una cobertura de población adulta de 513,500 personas residentes en la ciudad de Barcelona y cercanías y de origen socioeconómico diverso. Para valorar la psicopatología los pacientes fueron evaluados con la Escala de los Síndromes Positivo y Negativo (PANSS), un cuestionario socio demográfico que incluía la escala de Evaluación del Funcionamiento Global (GAF) así como una batería neuropsicológica que incorporaba las siguientes pruebas: MEC, Vocabulario, Clave de Números y Dígitos del WAIS-III, WCST, TMTa-b, STROOP, CPT, FAS y el TAVEC. Resultados: Diferencias significativas entre los grupos en género, habiendo más mujeres en la población de delirantes que en la de pacientes con esquizofrenia, edad de inicio, síntomas negativos, presentando los esquizofrénicos peor funcionamiento que los delirantes. En las pruebas neuropsicológicas; en memoria fue donde encontramos mayores diferencias entre los pacientes delirantes y con esquizofrenia, seguido de función ejecutiva y atención. Conclusiones: Encontramos que el Trastorno Delirante se puede diferenciar claramente de la esquizofrenia en función de variables sociodemográficas como la edad de inicio, menor sintomatología de primer grado, menor alteración en pruebas neuropsicológicas y mejor cociente intelectual pre mórbido que avalan las diferencias / Objectives: To investigate if Delusional Disorder (DD) is a different nosology entity from Schizophrenia, measuring the differences in clinical and neuropsychological variables Methods: Two cross sectional studies were used. The first study, with 86 DD patients. The second study with 115 patients with diagnosed with Schizophrenia. These were outpatients of the assistential network of the Parc Sanitari San Joan de Deu. It covers a population zone of 513,500 people with different socioeconomic situation of the Barcelona area and surrounding, (Cerdanyola del Valles, Ciutat Vella, Cornella, Esplugues, Vilanova y La Geltru and El Prat de Llobregat) . To evaluate psychopathology we used the Positive and Negative Symptom Scale (PANSS) a sociodemographic questionnaire, as well as the Global Assessment Functioning scale (GAF). For the neuropsychological evaluation, the MEC, WAIS III subtest (vocabulary, digits, and symbol search) as well as the TMT a-b, Verbal Fluency (FAS), STROOP, WCST, CPT and TAVEC. Results: Significant differences were found between the two diagnoses in gender, where women had a higher presence in DD than in Schizophrenia, age of illness onset, it was higher in DD patients tan in patients with schizophrenia, DD patients showed less negative symptoms and higher social functioning rates. I terms of cognitive areas, the most significant differences between the two groups were found in memory followed by executive function and attention, were the DD patients were less impair that the patients with schizophrenia. Conclusions: DD can be classified and stay as a different diagnosis from Schizophrenia, it can be clearly be distinguished by sociodemographic variables like its age of onset, less first Rank symptoms, less neuropsychological impairment, although it is not completely preserved, compare to control subjects and better premorbid IQ. All these variables support the differences between these two diagnoses.

La implicación de la salud oral en el rendimiento físico del deportista es un área que ha suscitado un interés creciente en los últimos años. Atendiendo a los factores etiológicos de las patologías orales y a las repercusiones que éstas pueden tener sobre el organismo, se plantean las siguientes hipótesis de trabajo: (i) los hábitos higiénicos y dietéticos de la población deportista los sitúan, a priori, en un grupo de riesgo para el desarrollo de caries y erosión dental; (ii) el ejercicio anaeróbico máximo podría inducir respuestas específicasa a nivel oral que determinaran una diferente experiencia de caries; (iii) la oclusión dental podría estar asociada a alteraciones en el equilibrio del sujeto, de especial trascendencia en especialidades con un alto componente técnico. Esta tesis doctoral se lleva a cabo a través de varios estudios con los siguientes objetivos: (i) analizar y comparar la experiencia de caries (índice CAOD) en atletas de disciplinas anaeróbicas en comparación con la población general; (ii) estudiar el efecto de la realización de ejercicio anaeróbico máximo en carrera (series interválicas de 300 metros) en el valor del pH salival. A la vez, valorar la posible correlación entre el valor de pH salival y el lactato sanguíneo; (iii) comprobar si realizando un ejercicio de carácter similar al descrito en el punto (ii) en condiciones de hipoxia (series de saltos con contramovimiento (CMJ)) se modifica el pH salival en comparación con el mismo protocolo de ejercicio realizado en normoxia. A la vez, valorar una posible correlación entre el valor de pH salival y la saturación arterial de oxígeno (SaO2); (iv) valorar la influencia de la oclusión dental en el control postural del sujeto bajo condiciones de estabilidad opuestas (estática vs dinámica) en plataforma inestable; y (v) determinar si la fatiga muscular resultante de la realización de ejercicio máximo (CMJ o circuito de fuerza general) altera el equilibrio y si la oclusión dental es un factor determinante en el control del equilibrio del sujeto después del ejercicio. Los resultados obtenidos aportan las siguientes conclusiones: (i) la población deportista especialista en disciplinas anaeróbicas manifiesta una menor experiencia de caries que la población general; (ii) la realización de ejercicio anaeróbico láctico provoca una alcalinización en el valor del pH salival. Sin embargo, pese a observar una tendencia incremental paralela en los valores de lactato sanguíneo y del pH salival, la correlación entre ambos valores es inconcluyente; (iii) cuando se realiza ejercicio anaeróbico máximo en condiciones de hipoxia normobárica se produce una mayor alcalinización del pH salival en comparación con normoxia. A la vez, parece existir una correlación estadísticamente significativa entre la SaO2 y el pH salival; (iv) la información aferente de la oclusión dental podría contribuir en mayor medida en el proceso de control postural en presencia de mayores condiciones de inestabilidad. Además, existen determinadas características de la oclusión dental que influyen negativamente en el control postural del sujeto: el resalte, la desviación de la línea media, la clase de Angle, la mordida abierta anterior, la mordida cruzada, y el apiñamiento; y (v) la fatiga muscular resultante de la realización de un ejercicio máximo no causa alteraciones inmediatas en el equilibrio. De manera global, se puede concluir que la práctica de ejercicio físico anaeróbico de alta intensidad produce una alcalinización en el pH salival. A la vez, la oclusión dental parece influir en el equilibrio de la población físicamente activa sólo en condiciones de alta inestabilidad. El ejercicio anaeróbico produce respuestas específicamente diferentes que el aeróbico en la fisiología oral y de la misma manera, el estado de salud bucodental puede influir de modo diferente en el rendimiento anaeróbico y aeróbico. / The influence of oral health on the sport performance is a matter of growing interest. Here we conduct several researches with the following aims: (i) to compare the DMFT index in athletes of anaerobic disciplines with general population; (ii) to determine if high intensity anaerobic exercise could affect the salivary pH response; (iii) to determine if high intensity exercise performed in hypoxia could affect the salivary pH response in comparison to normoxia; (iv) to assess a possible correlation between salivary pH values and blood lactate or SaO2; (v) to determine whether there are differences in balance between opposed dental occlusion (Intercuspal position (ICP)/Rest position (RP)) for two extreme levels of stability (stable/unstable); and (vi) to determine whether the muscle fatigue affects stability and if it differs according to the dental occlusion condition. Results allow us to obtain the following conclusions: (i) athletes of anaerobic disciplines has less dental decay experience than general population; (ii) performing anaerobic lactic acid-producing exercise has an effect on saliva alkalinization; (iii) exercise performed in normobaric hypoxia has stronger effects in saliva alkalinization than when performed under normoxia; (iv) significant negative correlation was found between salivary pH and SaO2 levels for the tests performed under hypoxia conditions, whereas correlation between salivary pH and blood lactate was inconclusive; (v) the stability index was significantly better when dental occlusion was set in RP than in ICP in unstable conditions; and (vi) the postural control was not affected after maximal exercise. These results suggest and important interactions of oral health status and the anaerobic performance that may differ from aerobic exercise. Specifically, conclusions indicate that (i) a salivary pH alkalinization may occur after performing maximal anaerobic exercise; and (ii) the sensory information linked to the dental occlusion for the balance control comes strongly into effect in unstable conditions.

En este trabajo de tesis se han desarrollado distintas estrategias para la inmovilización controlada de anticuerpos sobre la superficie sensora de dispositivos biosensores de Resonancia de Plasmón Superficial. Estos inmunosensores se han aplicado en la determinación de las hormonas hTSH y hGH, ambas de vital importancia en el desarrollo y crecimiento del individuo. El objetivo principal ha sido maximizar la eficiencia del proceso de inmovilización del anticuerpo, controlando la orientación y densidad del mismo sobre la superficie, para obtener un inmunosensor de alto rendimiento. El contenido de esta tesis se ha dividido en tres bloques distintos. En el primero de ellos se ha descrito el desarrollo de un método que presenta un gran potencial en el control de dopaje con hGHr, que es idéntica a la isoforma de la hGH de 22kDa, fracción de la hormona biológicamente activa. La relación entre los niveles de esta y de la isoforma de 20kDa es indicadora de la presencia de hGHr. Haciendo uso del sistema biotina/estreptavina para la inmovilización del anticuerpo se ha desarrollado un inmunoensayo para la detección simultánea de ambas isoformas, uno de los grandes retos en el desarrollo de tests antidoping, que por el momento requieren dos ensayos independientes. La segunda sección del trabajo se ha centrado en el desarrollo de un método novedoso para la inmovilización de anticuerpos, basado en el uso de una proteína de fusión. Se ha utilizado el par BSA/antiBSA como sistema modelo para optimizar las condiciones del método, y finalmente, este se ha empleado en un inmunoensayo para la determinación de la hGH de 22 kDa. Se ha demostrado la utilidad de la proteína para conseguir llevar a cabo una inmovilización orientada del anticuerpo, de una manera muy sencilla, y reduciendo al máximo el uso de material y tiempo empleado durante el inmunoensayo. Finalmente, en el tercer bloque se ha desarrollado un inmunosensor para el diagnóstico del Hipotiroidismo Congénito Neonatal (HCN). Se han explorado dos vías distintas en la funcionalización de la superficie sensora, una de ellas basada en la optimización de la metodología empleada en el desarrollo del inmunoensayo para la detección de las isoformas de la hGH. Como segunda estrategia se ha desarrollado un método inmovilización basado en el uso de la proteína G. Los inmunosensores desarrollados han permitido la detección en suero de niveles de 1,2 ng/mL en el caso de la hTSH, valor por debajo del nivel de corte para el diagnóstico de HCN, y de 0,9 ng/mL en el caso de la hGH de 22 y 20 kDa, valor inferior a los niveles basales de hGH 22K (~ 1,1 ng/mL) y superior a los de la hGH 20K (~ 0,11 ng/mL). Estos resultados indican que el inmunosensor desarrollado para la detección de hTSH tendría utilidad en el diagnóstico de HCN. Respecto al inmunosensor desarrollado para la detección de las isoformas de la hGH, aunque la aplicación del mismo en el análisis anti-doping estaría limitada por la reducción que experimenten los niveles circulantes de la hGH 20K tras la administración de la hormona (por un mecanismo de control por retroalimentación negativa), el inmunoensayo permite calcular la relación hGH 22K:hGH 20K, parámetro indicador de dopaje con hGHr. / This thesis focused on the development of different strategies for the site-directed immobilization of antibodies on the sensor surface of Surface Plasmon Resonance devices. These immunosensors were applied in the determination of the hTSH and hGH hormones, which play a crucial role in the human growth and development. The main goal was to maximize the efficiency of the antibody immobilization procedures, controlling its orientation and density on the sensor surface, in order to achieve high performance immunosensors. The content of this work is divided in three sections. In the first one, the development of a method with a great potential in the detection of doping with hGHr, which is identical to the hGH isoform of 22kDa, the biologically active isoform. The ratio between this variant and the one of 20 kDa, is a biomarker parameter of the hGH doping. By using the biotin/streptavidin system for the antibody immobilization, an immunoassay for the simultaneous determination of both isoforms were developed, one of biggest challenges in the development of tests antidoping, which at the moment require two assays. The second section of the work focused on the development of a novel method for the immobilization of antibodies, based on the use of a fusion protein. The pair BSA/anti-BSA was used as model system for the optimization of the method conditions, and finally, it had been employed in an immunoassay for the determination of the 22 kDa hGH isoform. The utility of this protein for the achievement of an oriented immobilization of the antibodies in a simple way whilst consuming only tiny amounts of reagents and time was demonstrated. Finally, in the third section an immunosensor for the diagnosis of Neonatal Congenital Hypothyroidism (CH) was developed. Two approaches have been explored for the functionalization of the sensor surface, one of them based on the optimization of the methodology used for the development of the hGH isoforms immunoassay. The second strategy employed was based in the use of the protein G. The immunosensors developed in this work allowed the detection in serum of 1.2 ng/mL of hTSH, below the cut-off value for the diagnosis of CH, and 0.9 ng/mL of 22 kDa hGH and 20 kDa hGH, below basal levels of the 22 kDa isoform (~ 1.1 ng/mL), and above basal levels of the 20 kDa (~ 0.11 ng/mL). These results demonstrate the potential clinical application of the immunosensor developed for the detection of hTSH. Regarding the immunosensor developed for the detection of the hGH isoforms, although its application in anti-doping analysis would be limited by reduction of the 20K isoform after hGH administration (due to a negative feedback mechanism), the immunoassay allows the calculation of the hGH 22K:hGH 20K ratio, biomarker parameter of hGH doping.

La gripe es un problema de salud pública en todo el mundo, siendo una de las enfermedades infecciosas más comunes y una patología de las vías aéreas altamente contagiosa. Desde abril de 2009, un nuevo virus de influenza A H1N1, con origen porcino dio lugar a la aparición de brotes en todo el mundo siendo declarada posteriormente como una situación de pandemia. Hoy en día el virus pdmH1N1 de 2009 continúa en circulación, generalmente provocando infecciones leves y autolimitadas. Sin embargo, un pequeño porcentaje de pacientes requieren hospitalización y atención especializada en la Unidad de Cuidados Intensivos (UCI). Es digno de mención comentar que se ha identificado un aumento en la producción de citoquinas proinflamatorias en pacientes de UCI. Esta observación sugiere la hipótesis de que la heterogeneidad en el resultado de la infección por virus de la gripe pdmH1N1 de 2009 podría ser debido no sólo a la diferencia entre fitness /virulencia de las diversas cepas de virus pandemico circulantes, sino también por el medio ambiente inmune del huésped que pueden contribuir a la patogénesis respiratoria grave, probablemente por una respuesta inmune exacerbada asociada a hipercitoquinemia. Para probar esta hipótesis el presente trabajo se divide en cuatro estudios que describen los experimentos realizados en ratones y hurones con los virus pdmH1N1 de 2009 aislados durante el brote de 2009 de pacientes que mostraron grados de enfermedad desde leve a severa con el fin de analizar las características patológicas de la infección. Los experimentos en los capítulos 5 y 6 se llevaron a cabo con el fin de evaluar si los altos niveles de citoquinas proinflamatorias y, en particular IL-6, podrían afectar a la respuesta inmune del huésped y al curso clínico de la infección. Los ratones fueron tratados con LPS o ratones que expresaron altos niveles de IL-6 fueron infectados con el virus pdmH1N1 de 2009 (CAT09) simultáneamente. En el caso de la exposición a LPS, los resultados mostraron que los signos clínicos y la pérdida de peso fueron directamente influenciadas por LPS en los animales infectados con CAT09. Sin embargo, no se detectaron diferencias en la carga viral de los pulmones de los ratones infectados con exposición de LPS, lo que indica que el tratamiento con LPS no estaba afectando a la replicación viral in vivo. La secreción de IL-6 después de la exposición a LPS correlacionó con pérdida de peso corporal a mayor grado de patología. El papel de la IL-6 en la infección por influenza se abordó mediante la inducción de IL-6 en ratones antes de ser infectados con CAT09. Una vez más, los niveles de IL-6 se correlacionaron con la pérdida de peso. Sorprendentemente, la replicación viral no fue afectada por altos niveles de IL-6 debido a que la carga viral no mostró diferencias significativas cuando se compararon los dos grupos infectados, aunque los animals infectados con alto nivel de IL-6 aclararon el virus antes que los animales infectados con CAT09. Se detectó una fuerte respuesta de anticuerpos en los animales infectados, siendo los ratones infectados sólo con CAT09 sin tratamiento con IL-6, los que obtuvieron los mayores títulos de inhibición de hemaglutinación. IL-10 correlacionó con los niveles de IL-6 en el suero y en los pulmones en los primeros días después de la infección. Finalmente, las lesiones histopatológicas fueron más graves en los ratones con altos niveles de IL-6 e infectados con CAT09. Desde el inicio de la pandemia de 2009, mutaciones de resistencia a oseltamivir (OsR) se han descrito en virus circulante pdmH1N1 de 2009. En el capítulo 7 estudios in vitro e in vivo en el que se compararon dos cepas (R6 y R7) de virus pandémico OsR. Hubo diferencias in vitro en la cinética de ambos virus que finalmente se reflejó en la patogénesis de la infección in vivo. Los resultados obtenidos en el análisis in vitro mostraron diferencias en el fitness en la replicación viral de los virus estudiados respecto a un virus sensible a oseltamivir (F), siendo F > R6 > R7. En el siguiente experimento in vivo, ambas cepas OsR produjeron un resultado fatal aunque en diferente magnitud y cinética; el grupo infectado con R6 experimentó un 40 % de letalidad y el grupo R7 un 20 % a los 4 dpi. Sin embargo, a 7 dpi el porcentaje de supervivencia fue de un 50 % para ambos grupos infectados con virus OsR. La replicación viral detectada en los pulmones de los grupos infectados con virus OsR obtuvo los valores no estadísticamente diferentes para R7 que para R6. Hubo una fuerte respuesta de anticuerpos a los 14 dpi en ambos grupos infectados para cada virus, pero no anticuerpos de reacción cruzada. Curiosamente, se detectaron altos niveles de IL-6 en el suero de los ratones R7 con diferencias significativas. Sorprendentemente, los niveles de IL-6 en los pulmones de R6, R7 y animales control fueron similares a todos los tiempos sin diferencias estadísticas. Niveles de IL-10 de suero y pulmón mostraron valores ligeramente más altos también en ratones R7 en comparación con los controles a los 3 y 5 dpi, respectivamente. Hallazgos histopatológicos mostraron lesiones más severas en ratones R7 a 5 dpi. Para analizar las posibles diferencias de virulencia, se infectaron hurones con dos virus pdmH1N1 de 2009 de dos pacientes sin condiciones comórbidas conocidas, uno con consecuencia fatal (F), mientras que el otro sólo mostró enfermedad respiratoria leve (M). Este estudio está comprendido en el capítulo 8. Los hurones desarrollaron diferente grado de severidad de signos clínicos que no se correlacionaron con el origen del virus utilizado en la infección, exhibiendo patología severa (S) o no severa (NS). Se detectó una disminución significativa en el peso corporal en los animales S en comparación con los animales NS a 4 a 7 dpi. La evolución clínica de la infección se relaciono directamente con los hallazgos histopatológicos. El análisis de las proteínas de fase aguda mostró que las concentraciones de haptoglobina (HP) y amiloide A sérico (SAA) incrementaron en ambos grupos después de 2 pi. Los títulos de virus en todos los tejidos fueron más altos en los hurones pertenecientes al grupo S en comparación con los hurones pertenecientes al grupo de NS a 4 dpi. Los animales infectados con ambos virus mostraron una fuerte inhibición de la hemaglutinina de la respuesta de anticuerpos en el suero de ambos virus a 10 y 14 dpi. Los hurones con un progreso severo de la infección clínica mostraron respuestas de anticuerpos ligeramente más altos y los títulos virales más altos después de la infección. / Influenza is a worldwide public health concern, being one of the most common infectious diseases and a highly contagious airborne pathology. From April 2009, a new influenza A H1N1 virus with swine origin gave rise to the emergence of worldwide outbreaks which was subsequently declared as a pandemic situation. Nowadays pdmH1N1 2009 virus continues on circulation and generally triggers mild and self-limiting infections. Nevertheless, a small percentage of the patients require hospitalization and specialized attention in Intensive Care Units (ICUs). Noteworthy, in ICU patients an increased proinflammatory cytokine production has been identified. This observation would suggest the hypothesis that the heterogeneity in the outcome of pdmH1N1 2009 influenza virus infection could be due not only to differential fitness/virulence of the diverse circulating pandemic virus strains but also to the host immune environment that may contribute to severe respiratory pathogenesis, probably by an exacerbated immune response associated to hypercytokinemia. To test such hypothesis the work was divided in four studies describing the experiments performed in mice and ferrets with pdmH1N1 2009 viruses isolated during the 2009 outbreak from patients that showed mild to severe disease in order to analyse pathological features of the infection. Experiments in chapters 5 and 6 were conducted in order to evaluate whether high levels of proinflammatory cytokines and in particular IL-6, might affect host immune responses and the clinical course of infection. Mice were treated with LPS or mice expressing with high levels of IL-6 were infected with pdmH1N1 2009 (CAT09) simultaneously. In the case of LPS exposure, results showed that clinical signs and weight loss were directly influenced by LPS in CAT09 infected. However, no differences in viral load of lungs from infected mice were detected upon LPS exposure, indicating that LPS treatment was not affecting viral replication in vivo. IL-6 secretion upon LPS exposure correlated with body weight loss and higher pathology. The role of IL-6 in influenza infection was addressed by inducing IL-6 in mice prior CAT09 infection. Again, IL-6 levels correlated with weight loss. Surprisingly, viral replication was not affected by high levels of IL-6 since viral load did not exhibit significant differences when both infected groups were compared, although high level of IL-6 in infected animals correlated with sooner viral clearance than the CAT09 infected animals. A strong antibody response was detected in infected animals, being only CAT09 infected mice without IL-6 treatment, the ones with the highest hemagglutinin inhibiting titers. IL-10 levels correlated with IL-6 levels in serum and lungs in the first days after infection. Finally, histopathological lesions were more severe in mice with high levels of IL-6 and CAT09 infected. From the onset of the 2009 pandemic, oseltamivir resistance (OsR) mutations have been described on circulating pdmH1N1 2009 viruses. In chapter 7, in vitro and in vivo experiments in which two strains (R6 and R7) of OsR pandemic virus were compared. There were kinetics differences in both virus in vitro that finally were reflected in the pathogenesis of infection in vivo. The results obtained in the in vitro analysis showed different fitness in viral replication in the virus studied in comparison with a oseltamivir sensitive virus (F), being F>R6>R7. On the following in vivo experiment, both OsR strains produced a fatal outcome although with different magnitude and kinetics, R6-infected group experimented a 40% of lethality and R7-group a 20% at 4 dpi. However, at 7 dpi the percentatge of survival was a 50% in both OsR-infected groups. Viral replication detected in lungs from OsR-infected groups had higher but not statistically different values for R7 than for R6. There was a strong antibody response at 14 dpi on both infected groups for each virus but no cross- reactive antibodies. Interestingly, high levels of IL-6 were detected in serum from R7-mice with significant differences. Surprisingly, levels of IL-6 in lungs of R6, R7 and control animals were similar at all time-point with no statistical differences. Serum and lung IL-10 had also slightly higher values in R7-mice when compared with controls at 3 and 5 dpi respectively. Histopahological findings showed more severe lesions on R7-mice at 5 dpi. To analyze possible virulence differences in viral fitmess, ferrets were infected with two contemporary pdmH1N1 2009 viruses from two patients without known co-morbid conditions, one that became fatal (F) while the other only showed mild (M) respiratory disease. These were studied in chapter 8. Ferrets developed different degree of clinical signs severity that did not correlate with the origin of the virus used in the infection, exhibiting severe (S) or non severe (NS) pathology. A significant decrease in body weight was detected in S animals compared to NS animals at 4 to 7 dpi. Clinical progress of the infection correlated directly with histopathological findings. The analysis of the acute phase proteins showed that the concentrations of haptoglobin (HP) and serum amyloid A (SAA) increased in both groups after 2 dpi. Virus titres in all tissues were higher in ferrets belonging to S group when compared to ferrets belonging to NS group at 4 dpi. Animals infected with both virus showed a strong hemagglutinin inhibiting antibody response in sera to both viruses at 10 and 14 dpi. Ferrets with a severe progress of the clinical infection showed slightly higher antibody responses and higher viral titers after infection.

La investigación con respecto a los niños y niñas que padecen la violencia de género en la pareja (VGP) ha aumentado en los últimos años. No obstante, aún quedan muchas interrogantes con respecto al impacto de este tipo de maltrato en la infancia. En este contexto, el presente estudio se centra en conocer los diversos problemas psicológicos que presenta un grupo de menores en Catalunya que ha sufrido VGP. En específico, valora la relación existente entre dichos daños y el tipo de manifestaciones de violencia sufrida, a la vez que intenta dimensionar la importancia del rol de la madre como factor protector para los niños y niñas. Por último, la investigación estudia los tipos de violencia a que son sometidos los hijos e hijas en el contacto actual con el padre. El diseño metodológico usado corresponde a un estudio transversal analítico en el que participaron 13 mujeres que habían vivido VGP y 15 menores, hijos e hijas de estas mujeres. Se utilizaron los siguientes instrumentos para medir psicopatología y otras dificultades tanto en las madres como en los niños y niñas: Entrevista clínica Kiddie-SADS-PL , el Cuestionario de Capacidades y Dificultades (SDQ), el Cuestionario de Salud General de Goldberg (GHQ-28) y una ficha de información general creada para esta investigación. En el análisis de datos se consideraron elementos descriptivos y también el uso de medidas del efecto (d de Cohen y Riesgo Relativo). Los resultados del estudio mostraron que los niños y niñas víctimas de VGP presentaban altos niveles de problemas psicopatológicos y dificultades en otras áreas de funcionamiento tales como la social y valórica. También se encontró que la presencia de problemas de salud psico-emocional en las madres, estaría asociada a la presencia de consecuencias a nivel psicopatológico, social y valórico en los hijos e hijas. Destacan en particular los resultados que aportan evidencia referida a que los padres maltratadores de sus parejas presentarían conductas de maltrato hacia sus hijos e hijas en los espacios de visitas. Esta violencia estaría asociada en los menores con la adquisición de un rol que perpetúa la violencia y la presencia de trastornos psicopatológicos. Los resultados de esta investigación plantean la necesidad de establecer nuevas medidas de protección para esta infancia víctima de violencia y sugiere medidas de ayuda en el ámbito clínico tanto para la madre y sus hijos así como para el maltratador. En definitiva este estudio pretende abrir nuevas preguntas en torno al tema, de manera de hacerlo más visible a nivel público y clínico. / The research about children who suffer gender violence in couples (GVC) has increased in recent years. However, there are still many questions regarding the impact of this type of abuse in childhood. In this context, the present study focuses on knowing psychological problems of a group of children who has suffered GVC in Catalonia. Specifically, values the relationship between such damage and the type of manifestations of violence suffered while trying to measure the importance of the role of the mother as a protective factor for children. Finally, the research examines the types of violence they are subjected children in today's contact with the father. The methodology used corresponds to an analytical cross-sectional study in which 13 women who had lived GVC and 15 children participated. The following instruments were used to measure psychopathology and other difficulties in both mothers and children: clinical interview Kiddie-SADS-PL, the Strengths and Difficulties Questionnaire (SDQ), the General Health Questionnaire of Goldberg (GHQ- 28) and a general information sheet created for this research. In the data analysis some descriptive elements and the use of measures of the effect (d Cohen and Relative Risk) were considered. The study results showed that children victims of GVC had high levels of psychopathological problems and difficulties in other areas of functioning such as social and value-based. It was also found that the presence of problems of psycho-emotional health in mothers, would be associated with the presence of psychopathological consequences, social and value level in children. Particularly noteworthy are the results that provide evidence that abusive parents have abusive behavior toward their children in the spaces of visits. This violence would be associated in children with the acquisition of a role that perpetuates violence and the presence of psychopathology. The results of this study suggest the need for new measures to protect the child victims of violence and suggest measures to assist in the clinical setting for the mother and her children as well as the abuser. Ultimately this study wants to open new questions on the subject, so to make it more visible to the public and clinical level.