Com o objetivo de analisar a evolução dos níveis de glicose e dos hormônios insulina, glucagon e cortisol de cadelas com piometra e sepse grave durante o tratamento intensivo, foram estudadas 13 cadelas que apresentaram duas alterações na resposta inflamatória sistêmica e no mínimo uma disfunção orgânica. Antes do procedimento cirúrgico foram colhidas amostras para realização de exames laboratoriais e avaliação dos níveis dos hormônios insulina, glucagon e cortisol. Durante o período de internação, os animais foram avaliados diariamente por meio da análise de perfis bioquímicos renal e hepático, hemograma, sódio, potássio, insulina, glucagon e cortisol. O nível de glicose foi avaliado antes do procedimento cirúrgico, a cada 3 h nas primeiras 6 h e a cada 6 h até a alta ou óbito dos pacientes. Após o procedimento cirúrgico, os animais obtiveram a inserção do aparelho de CGMS no subcutâneo, para avaliação da glicose subcutânea. Um grupo controle com nove animais foram submetidos às mesmas dosagens de glicose do grupo sepse. Para a análise estatística da comparação dos valores obtidos para o grupo controle foi utilizado o teste não paramétrico Wilcoxon. Para avaliação da glicose, glucagon, cortisol, insulina, sódio e potássio para o grupo sepse, utilizou-se abordagem de modelos mistos com medidas repetidas. Os animais do grupo sepse apresentaram 7,37±1,66 anos de idade e 23,88±8,5 kg de peso corpóreo. No primeiro dia de internação, 23 % dos animais apresentaram hiperglicemia e estes animais permaneceram maior período de internação quando comparado com os demais animais. Nenhum animal apresentou hipoglicemia; apenas a técnica utilizada com Medsense Optium® apresentou valores superiores quando comparado com os valores de referência. Os animais apresentaram valores elevados de glucagon no primeiro dia quando comparado com o último dia de internação; o mesmo comportamento foi apresentado pelo cortisol e insulina. Como conclusão do estudo os animais com sepse grave apresentaram hiperglicemia e elevação dos hormônios glucagon, cortisol e insulina que tenderam a normalização na alta. / Aiming the analysis of glucose, insulin, glucagon and cortisol hormones levels in female dogs with pyometra and severe sepsis during intensive treatment. It was studied 13 female dogs with pyometra diagnosis and severe sepsis, which, the animals presented two alterations on the systemic inflammation response and at least one organic dysfunction. Before surgical procedure, samples were collected to laboratory exams realization and evaluation of hormones levels (insulin, glucagon and cortisol). During the interning time, the animals were evaluated daily through the renal and hepatic biochemical profile analysis, hemogram, sodium, potassium, insulin, glucagon and cortisol. The level of glucose was evaluated before the surgical procedure, every 3 hours in the first 6 hours and every 6 hours until patient discharge or patient death. After the surgical procedure, the animals received the CGMS introduction in subcutaneous, for glucose subcutaneous evaluation. A control group of nine animals were submitted to the same dosages of glucose from sepsis group. For statistical analysis of values comparison obtained to the control group was utilized the non parametric testing of Wilcoxon. For glucose evaluation, glucagon, cortisol, insulin, sodium and potassium to the sepsis group, was utilized the mixed model approach with repeated measurements. The animals of sepsis group presented 7,37±1,66 years and 23,88±8,5 Kg of body weight. At the first interning day, 23% of animals presented hyperglycemia and these animals remained with a longer interning period when compared with other animals. None of animals presented hypoglycemia; there was a difference only related to the utilized technique (Medsense Optium® presented higher values when compared to the reference values). The animals presented high values if glucagon at the first day when compared to the last interning day; the same was noticed with cortisol and insulin. As conclusion to this study, the animals with severe sepsis presented hyperglycemia and increase of hormones levels of glucagon, cortisol and insulin, which tendered to normalization on their discharge.

A insuficiência renal aguda (IRA) em cadelas com piometra foi avaliada retrospectivamente em 147 animais e prospectivamente em 351 animais selecionando 27 e 132 cadelas respectivamente, mediante os seguintes critérios de inclusão, creatinina ≥ 2,4 mg/dL e ou uréia ≥ 80 mg/dL e ou aumentos relativos de 100% da creatinina e ou uréia séricas em relação a qualquer mensuração anterior, aplicados em 3 momentos estratégicos, o diagnóstico, 24 horas após a ovário-salpingo-histerectomia e na retirada dos pontos. Os animais do estudo retrospectivo foram utilizados como controle, enquanto que os animais selecionados do estudo prospectivo receberam tratamento conservador com solução de Ringer Lactato até 90 ml/kg/h, durante 4 horas. Os parâmetros avaliados antes e após a terapia, peso, pressão arterial sistólica, freqüência cardíaca, função renal, hemogasimetria arterial, bioquímica sérica e urinária e "clearance" da creatinina endógena. Os animais que não responderam adequadamente a terapia convencional e apresentavam-se em "síndrome urêmica" foram submetidos à hemodiafiltração (N=5 animais) e prescrito sessões de 2 horas, durante 3 dias, soluções apropriadas para hemodiafiltração (HDF) e reposição e capilar de polissulfona. Durante a HDF 2 animais vieram a óbito, 1 animal morreu com 18 dias e outro 12 dias após a última sessão de diálise e 1 animal sobreviveu. A taxa de mortalidade para os animais selecionados retrospectivamente foi de 40,7% e 20,4% prospectivamente. Entretanto os animais selecionados do estudo prospectivo que não sobreviveram foram comparados com os animais selecionados que sobreviveram, mediante análise univariada da uréia e creatinina séricas, fração de excreção de eletrólitos, bicarbonato arterial e "clearance" da creatinina e foram significativamente diferentes (p<0,05). Porém quando estes dados foram submetidos a uma análise multivariada e realizada a curva ROC (Receiver Operating Characteristic), detectou-se que a área sob a curva era de 0,867 (p<0,0001) IC: 0,769 ? 0,966. Desta forma foi possível concluir que a creatinina maior que 2,6 mg/dL prediz a morte da cadela com piometra e IRA, com 93% de sensibilidade e 77% de especificidade. Quanto aos animais que receberam a HDF e morreram apresentavam uma sobrevida de 7 dias em relação aos animais que receberam o tratamento conservador apenas, podendo a HDF ser um método de aumentar a sobrevida, dando tempo para o animal se recuperar. / Acute renal failure (ARF) was evaluated retrospectively in 147 and prospectively in 351 female dogs with piometra. 27 and 132 animals were respectively selected for this study, fulfilling the following criteria, measured in three moments (immediately after the diagnosis, 24 hours after the hysterectomy and when the suture was removed): creatinine ≥ 2,4mg/dl and/or urea ≥ 80mg/dl and/or relative increases of 100% in comparison with values previously obtained. The animals of the retrospective study were used as control. The animals selected for the prospective study received conservative treatment consisting in Lactated Ringer Solution, with the maximum dose of 90ml/kg/h, during 4 hours. The factors evaluated before and after the therapy were weight, systolic arterial pressure, heart rate, renal function, arterial hemogasometry, serum and urinary biochemistry and the endogenous renal creatinine clearance. Five animals that did not respond adequately to the conservative treatment and showed uremic syndrome were randomly chosen and submitted to hemodiafiltration (HDF), given in 3 sessions of 2 hours each, during 3 days, with appropriate solutions for HDF and polissulfona membrane. During the HDF two animals died after the last session of HDF, one animal remained alive for 18 days, another animal for 12 days and one animal survived. The rate of death for the animals in the retrospective study was 40.7% and 20.4% for the prospective group. The animals of the prospective study that died were compared with the alive animals that were selected from the total population for that group, using univariada analysis of the values of serum urea and creatinine, electrolyte rate of excretion, arterial bicarbonate and creatinine clearance and it was observed that there was significative difference (p<0.05), however when this data was submitted to a multivariated analysis and the ROC curve were plotted it was detected that the area under it was of 0,867 (p<0.0001), IC:0,769-0,966. Therefore it was possible to conclude that a creatinine value higher than 2,6mg/dl predicted the death of the animals with piometra and ARF, with 93% of sensibility and 77% of specificity. Regarding the animals that were submitted to HDF and died, it was observed that they presented a -7days prolonged life in relation with the animals that received only the conservative treatment, suggesting that the HDF is a method to increase lifetime, offering extra time for the animal to recover.

Os peptídeos antimicrobianos são importantes ferramentas do sistema imune inato para controle das infecções e recentemente tem sido investigado seu potencial como estratégia terapêutica nas infecções e sepse. Estes peptídeos apresentam diversas atividades decorrentes de mecanismos de ação antimicrobianas e imuno estimuladoras. A indução de tolerância com a administração de pequenas doses de LPS reduz a mortalidade em modelos animais de sepse, modulando diversos aspectos do sistema imune. Nossa hipótese neste estudo foi que o efeito protetor da tolerância ao LPS está relacionado com a modulação da produção dos peptídeos antimicrobianos na sepse. A tolerância ao LPS foi induzida em camundongos C57bl/6 por injeção de lipopolissacarídeo de E. coli na dose de 1mg/kg por cinco dias. No oitavo dia os animais foram eutanasiados por overdose anestésica ou submetidos ao modelo de ligadura e punção cecal. Após seis horas os animais foram eutanasiados por overdose anestésica e o sangue, baço, intestino e pulmões foram coletados para determinação das concentrações de citocinas e peptídeos antimicrobianos. Nossos resultados mostram que o efeito da tolerância ao LPS sobre a produção de peptídeos antimicrobianos é tecido específica. Sistemicamente (plasma) a tolerância aumenta a concentração plasmática de beta defensina-3 e CRAMP somente em animais submetidos à CLP. No baço ocorre redução de beta defensinas 1 e 7 pela CLP e também pela tolerância. No pulmão há elevação de beta defensinas 1 e 3 pela CLP e esta é revertida pela tolerância. No intestino ocorre redução de defensinas pela tolerância tanto em animais controle quanto em animais submetidos à CLP. Observamos em nosso estudo um padrão invertido entre as concentrações de peptídeos antimicrobianos e citocinas no intestino e baço dos animais, principalmente nos submetidos à CLP. Quanto maior a concentração da citocina no tecido, menor a concentração da defensina em questão. No intestino podemos observar que a tolerância e a CLP aumentam a concentração de IL-6 e IL-10 e diminuem as concentrações de beta defensinas 1 e 7. No baço observamos esse padrão entre beta defensina-7 e IL-6 e entre beta defensina-1 e TNF-alfa. Não foi possível encontrar esse tipo de correlação no pulmão. Concluímos que os efeitos protetores da tolerância ao LPS estão relacionados com uma menor produção de defensinas no baço, pulmão e intestino de animais submetidos à sepse, e com maior concentração de peptídeos antimicrobianos no plasma / Antimicrobial peptides are important tools of the innate immune system to control infections and its potential as a therapeutic strategy in infections and sepsis has recently been investigated. These peptides present both antimicrobial and immuno-stimulatory activities. Lipopolysaccharide (LPS) tolerance is a defense mechanism against invading microorganisms also widely distributed in nature. Induction of tolerance with the administration of small doses of LPS reduces mortality in animal models of sepsis, modulating several immune system aspects. Our hypothesis was that the protective effect of LPS tolerance is related to the modulation of antimicrobial peptide production in sepsis. LPS tolerance was induced in C57bl / 6 mice by injection of E. coli LPS at 1mg / kg for five days. On the eighth day the animals were submitted to the sepsis model of cecal ligation and puncture. After six hours the animals were euthanized by anesthetic overdose and blood, spleen, intestine and lungs were collected for the determination of cytokines and antimicrobial peptides concentrations. Our results show that the effect of LPS tolerance on the production of antimicrobial peptides is tissue specific. LPS tolerance increases the plasma concentration of beta-defensin-3 and CRAMP only in animals undergoing CLP. In the spleen, there is reduction of ? defensins 1 and 7 by CLP and also by tolerance. In the lung, there is elevation of beta defensins 1 and 3 by PLC and this is reversed by tolerance. In the intestine, there is reduction of defensins by tolerance in both control and CLP animals. In our study, we observed an inverted pattern between the concentrations of antimicrobial peptides and cytokines in the intestine and spleen of animals, especially those submitted to CLP. The higher the cytokine concentration in the tissue, the lower the concentration of defensin in question. In the gut we can observe that tolerance and CLP increases IL-6 and IL-10 concentration and decreases ? defensins 1 and 7 concentrations. In the spleen, we observed this pattern between ?-defensin-7 and IL-6 and between alpha-defensin-1 and TNF-alpha. It was not possible to find this type of correlation in the lung. We conclude that the protective effects of LPS tolerance are related to a lower production of defensins in the spleen, lung and intestine of animals submitted to sepsis, and with a higher concentration of antimicrobial peptides in plasma

Objectives: Negative energy balance can impair regeneration of the respiratory epithelium and limit the functionality of respiratory muscles, which can prolong mechanical ventilation. The present study sought to quantify and identify deviation in energy requirements of patients with septic shock during and upon liberation from mechanical ventilation. Methods: Patients admitted into intensive care with initial diagnosis of septic shock and mechanical ventilation-dependent were recruited. Their metabolic requirements before and after liberation from mechanical ventilation were measured by indirect calorimetry. Paired t-test was used to examine the variance between the two modes of breathing and Spearman rho correlation coefficient to examine relationship of selected indicators. Results: Thirty-five patients, 20 males and 15 females mean age 69 ±10 years, body height of 1.58 ±0.08 meters, and ideal body weight 59.01 ±7.63 kg were recruited. Median APACHEII score was 22, length of stay in the intensive care was 45 ±65 days and duration on mechanical ventilation was 24 ±25 days. Measured energy expenditure during ventilation was 2090 ±489 kcal∙d-1 upon liberation from ventilation was 1910 ±579 kcal∙d-1, and actual caloric intake was 1148 ±495 kcal∙d-1. Paired-t test showed that measured energy expenditure (p=0.02), actual calories provision and energy expenditure with (p=0.00) and without (p=0.00) ventilator support were all significantly different. Mean carbohydrate oxidation was 0.17 ±0.09 g·min-1 when patients were on mechanical ventilation compared to 0.14 ±0.08 g·min-1 upon liberalization from it, however, the results were not statistically significant. Furthermore, mean lipid oxidation was 0.08 ±0.05 g·min-1 during mechanical ventilation and 0.09±0.07 g·min-1 upon liberalization from it and the mean difference was not statistically significant. Spearman correlation coefficient showed a positive relationship between actual calorie provision and duration of stay in intensive care (r=0.41 and p=0.01) and duration on mechanical ventilation (r=0.55 and p=0.00). Oxygen consumption (r=0.49 and p=0.00) and carbon dioxide production (r=0.4 and p=0.02) were moderately strong and positive during and upon liberation from mechanical ventilation. Correlation between lipid oxidation and oxygen consumption during ventilation (r=0.74, p=0.00) and after ventilation (r=0.82, p=0.00) as well as lipid oxidation and carbon dioxide production during ventilation (r=0.37, p=0.03) and liberation from ventilator (r=0.91, p=0.00) were significantly correlated with each other in grams per minute only. Conclusions: This is a pioneering study to examine energy expenditure and substrate utilization and oxidation within a single cohort of patients. The lower measured energy expenditure upon liberation from mechanical ventilation among critically ill patients could result from positive pressure support from ventilation, the repeated cycle of “rest” and “work” during weaning from ventilators and the asynchronization between self-initiated breathing effort and the ventilatory support. The positive relationship in duration on mechanical ventilation and length of stay with calorie consumption could be longer stay led to more time for progression to reach nutrition targets. . Any discrepancy in energy expenditure and substrate utilization with and without ventilatory support should be monitored. Future studies are important to examine whether matching energy expenditure with energy intake could promote positive clinical outcomes.

Submitted by Eunice Novais (enovais@uepg.br) on 2018-08-14T18:52:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Gabriela Veloso 28-05-2018.pdf: 2164370 bytes, checksum: 4e7d75f83857ad16625e9fb2ea2f374d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-14T18:52:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Gabriela Veloso 28-05-2018.pdf: 2164370 bytes, checksum: 4e7d75f83857ad16625e9fb2ea2f374d (MD5) Previous issue date: 2018-05-28 / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná / Estudos epidemiológicos têm apontado a doença periodontal como a desordem óssea mais prevalente em humanos. Sua etiologia é definida de forma mul-tifatorial, em que há influência de doenças sistêmicas. De fato, muitos estudos relatam esta última associação e, neste contexto, a sepse é uma doença sistêmica caracteri-zada por uma disfunção orgânica com risco de vida, causada por uma resposta des-regulada do hospedeiro à uma infecção. O objetivo deste estudo foi avaliar por meio de análise histológica e imunohistoquímica se a sepse é capaz de exercer influência sobre o metabolismo ósseo na região do periodonto. Métodos: Foram utilizados dois grupos de ratos Wistar divididos em controle (n=6) e sepse (n=6). Os animais passa-ram pelo modelo de procedimento de ligação e perfuração do ceco (CLP) e, após 24 horas, por meio de sobredose anestésica, suas hemimandíbulas foram coletadas e submetidas a procedimentos histotécnicos. Em seguida, componentes do periodonto como matriz óssea, fibras colágenas, fibroblastos, osteócitos, células inflamatórias, vasos sanguíneos e espaços em branco do ligamento periodontal, osso alveolar e osso da área da furca foram avaliados e quantificados por meio de análise histomor-fométrica. Posteriormente, foram realizadas análises por imunohistoquímica nestas mesmas regiões, visando avaliar o número de células imunomarcadas para BMP-2/4, osteocalcina e RANKL. Resultados: A análise histomorfométrica não revelou dife-renças significativas entre os grupos avaliados. Entretanto, a análise imunohistoquí-mica revelou diferenças significativas no número de células imunomarcadas entre o grupo controle e sepse para osteocalcina e RANKL. Conclusões: Foram observadas algumas modificações no periodonto de ratos após 24 horas da indução da sepse. Contudo, outros estudos são necessários para possibilitar uma avaliação mais abran-gente sobre os possíveis efeitos da sepse na região periodontal, incluindo avaliações moleculares e com períodos experimentais maiores. / Epidemiological studies have pointed the periodontal disease as the most prevalent bone disorder in humans. Its aetiology is defined in a multifactorial way, in which there is influence of systemic illnesses. In fact, many studies report this asso-ciation and, in such context, sepsis is a systemic disease characterized by an organic malfunction that is life threatening, caused by a deregulated response from the host to certain infection. The objective of this study was to evaluate through histological and immunohistochemical analyses whether sepsis is able to have influence on the bone metabolism in the periodontal regions. Methods: Two groups of Wistar rats were used, which were divided into control (n=6) and sepsis (n=6). The animals were submitted to the model of procedure cecum link and perforation (CLP) and, after 24 hours, through an anaesthetic overdose, their hemimandibles were collected and submitted to histo-technical procedures. Next, periodontal components such as bone matrix, collagenous fibers, fibroblasts, osteocytes, inflammatory cells, blood vessels, periodontal ligament blank spaces, alveolar bone and bone from the furcation area were evaluated and quantified using the histomorphometric analysis. Later on, immunohistochemical anal-ysis was carried out in the same regions, aiming at evaluating the number of BMP-2/4, osteocalcin and RANKL immunolabeled cells. Results: The histomorphometric analy-sis did not reveal significant differences between the groups under analysis. However, immunohistochemical analysis revealed significant differences in the number of immu-nolabelled cells between the control and sepsis groups for osteocalcin and RANKL. Conclusions: Some modifications were observed in the periodontium of rats after 24 hours of induction of sepsis. However, further studies are required to enable a broader evaluation of the possible effects of the sepsis on the periodontal region, including molecular evaluations and with longer experimental periods.

Critical illness is an aetiologically and clinically heterogeneous syndrome that is characterised by organ failure and immune dysfunction. Mortality in critically ill patients is driven by inflammation-associated organ damage and a profound vulnerability to nosocomial infection. Both factors are influenced by the complement protein C5a, released by unbridled activation of the complement system during critical illness. C5a suppresses antimicrobial functions of key immune cells, in particular the neutrophil, and this suppression has been shown to be associated with poorer outcomes amongst critically ill adults. The intracellular signalling pathways which mediate C5a-induced neutrophil dysfunction are incompletely understood, and scalable tools with which to assess immune cell dysfunction in patients are lacking. This thesis aimed to develop tools with which to assess neutrophil function and delineate intracellular signalling pathways driving C5a-induced impairment. Neutrophils were isolated from healthy volunteer blood and functions (priming, phagocytosis and reactive oxygen species production) were assessed using light microscopy, confocal microscopy and flow cytometry. A new assay was developed using an Attune Nxt™ acoustic focusing cytometer (Life Technologies) which allowed the rapid assessment of multiple neutrophil functions in small samples of unlysed, minimally-manipulated human whole blood. Complete proteomes and phosphoproteomes of phagocytosing neutrophils were obtained from four healthy donors pre-treated with C5a or vehicle control. Several key insights were gained from this work and are summarised here. Firstly, C5a was found to induce a prolonged (greater than seven hours) impairment of neutrophil phagocytosis. This defect was found to be preventable by previous or concurrent phagocytosis, indicating common signalling mechanisms. Secondly, a novel assay was developed which allows the rapid assessment of multiple neutrophil functions in less than 2 mL of whole blood, and this assay can feasibly be applied in clinical settings. Thirdly, cell-surface expression of the C5a receptor was found to be markedly decreased during phagocytosis, and this decrease was not mediated by protease activity. Finally, unbiased proteomics quantified 4859 proteins and 2712 phosphoproteins respectively. This quantification is the deepest profile of the human neutrophil proteome published to date, and has revealed novel insights into the mechanisms of C5a-induced neutrophil dysfunction and phagocytosis.

Att insjukna i sepsis kan vara livshotande och leda till sjuklighet och nedsatt livskvalité samt långa vårdtider och dyra vårdkostnader för sjukvården. Forskning visar att dödligheten ökar ju längre tid det tar innan behandling sätts in. Trots detta finns det ett behov av att förbättra identifieringen av sepsis. Det finns en mängd studier om sepsis, men det finns få som belyser patienters upplevelse av att insjukna i sepsis. Ambitionen med denna studie är att bidra till att minska denna kunskapslucka.Studiens syfte är att undersöka patienters upplevelser av att insjukna i sepsis. Studien har använt en kvalitativ och utforskande ansats. Datainsamlingen har skett genom telefonintervjuer med patienter som insjuknat i sepsis i hemmet och data har analyserats med hjälp av kvalitativ innehållsanalys. Resultatet visar att informanterna till en början försökte hantera sina symtom på egen hand, vilket innebar att de avvaktade med att söka sjukvård då symtombilden påminde om åkommor som de haft tidigare. När informanterna tog kontakt med sjukvården upplevde de initialt misstro från vårdpersonalens sida. Resultatet visar att insjuknande i sepsis bland annat kännetecknas av sjukdomskänsla, svår trötthet, förlust av kontroll över sin kropp och nedsatt förmåga att ta hand om sig själv. Slutligen visar resultatet att informanterna upplevde en lättnad och trygghet av att överlämna ansvaret till ambulanspersonalen.En slutsats är att det finns svårigheter med att identifiera sepsis prehospitalt, vilket beror på att insjuknandet är diffust och varierar mellan olika patienter. Det finns ett behov av kontinuerlig utbildning om diffusa tillstånd, såsom sepsis, för att förbättra patientomhändertagandet. / Program: Specialistsjuksköterskeutbildning med inriktning mot ambulanssjukvård

Svår sepsis och septisk chock är sjukdomstillstånd som kan orsaka ett stort lidande för patienten genom att de är förknippade med hög mortalitet och morbiditet. Tidig identifiering och adekvat antibiotikabehandling är avgörande för prognosen. Detta ställer höga krav på ambulanssjukvårdens kvalitet. Ambulanssjukvården har behandlingsriktlinjer som ska utgöra beslutsunderlag och kvalitetssäkring för den givna vården. De potentiella vinsterna med en behandlingsriktlinje blir dock aldrig bättre än kvaliteten på behandlingsriktlinjen i sig. Studiens syfte var att granska och värdera kvaliteten på den svenska ambulanssjukvårdens behandlingsriktlinjer rörande patienter med misstänkt svår sepsis och septisk chock. En kvantitativ metod nyttjades och en totalundersökning av behandlingsriktlinjer i svensk ambulanssjukvård genomfördes, där respektive ambulansorganisation i Sveriges tjugoen landsting kontaktades. Svarsfrekvensen var 76%. Utav dessa kunde nio inkluderades i studien (N = 9). De erhållna prehospitala behandlingsriktlinjerna granskades därefter med hjälp av AGREE II-instrumentet. Resultatet belyser dels att flera organisationer helt saknar behandlingsriktlinjer rörande patienter med misstänkt svår sepsis och septisk chock (33% av alla tjugoen kontaktade landsting. 44% av de sexton som svarade) samt att de övriga behandlingsriktlinjerna har metodologiska brister i rapporteringen kring hur behandlingsriktlinjerna togs fram. Detta utgör ett hinder för att behandlingsriktlinjerna ska kunna utgöra den kvalitetssäkring de är avsedda att vara. Bristerna kan härledas till ambulanssjukvårdens organisation och skulle eventuellt kunna avhjälpas genom centralt utvecklade nationella behandlingsriktlinjer finansierade av vårdgivaren. / Program: Specialistsjuksköterskeutbildning med inriktning mot ambulanssjukvård

A sepse é sempre acompanhada de mudanças na temperatura corporal, seja esta febre ou hipotermia. O presente trabalho tem como objetivos principais (1) caracterizar o curso temporal de hipotermia em um grupo raro de pacientes sépticos; (2) desenvolver um modelo experimental bem controlado de sepse grave monobacteriana e; (3) estudar mecanicamente como o pulmão é preservado na sepse frente à virada de febre para hipotermia. Nossos resultados mostraram, pela primeira vez, que a hipotermia em pacientes sépticos é um fenômeno transitório, não terminal. Ainda desenvolvemos um modelo experimental de sepse grave, no qual observamos que a hipotermia provoca a reprogramação das principais células envolvidas na resposta inflamatória. Essas mudanças favorecem o hospedeiro, pois induzem diminuição do infiltrado inflamatório e manteve a infecção controlada. Logo, podemos concluir que a hipotermia é um fenômeno transitório, auto-limitante e não terminal, diferente da resposta desregulada e progressiva que se acreditava existir. / Sepsis is always accompanied by changes in body temperature, whether it is fever or hypothermia. The present study has as main objectives (1) to characterize the temporal course of hypothermia in a rare group of septic patients; (2) to develop a well-controlled experimental model of severe monobacterial sepsis and; (3) to mechanically study how the lung is preserved in the sepsis in the face of the onset of fever for hypothermia. Our results showed, for the first time, that hypothermia in septic patients is a transitory, non-terminal phenomenon. We have also developed an experimental model of severe sepsis, in which we observed that hypothermia causes reprogramming of the main cells involved in the inflammatory response. These changes favor the host, as they induce a decrease in the inflammatory infiltrate and kept the infection under control. Therefore, we can conclude that hypothermia is a transitory phenomenon, self-limiting and not terminal, different from the deregulated and progressive response that was believed to exist.

A galectina-1 (Gal-1) é uma lectina que reconhece ?-galactosídeos e participa de vários processos biológicos, incluindo a modulação da resposta inflamatória. Dados da literatura mostram a participação desta lectina na indução da exposição de fosfatidilserina (FS - um marcador de apoptose), na geração de espécies reativas do oxigênio (EROs) e na modulação quimiotática de neutrófilos. Entretanto, ainda são escassos os dados relacionados ao impacto biológico da Gal-1, exógena e endógena, sobre a biologia destas células. Neste trabalho foram avaliados, in vitro, alguns aspectos funcionais da interação Gal-1/neutrófilo. Determinou-se o nível de expressão da Gal-1 (Western Blotting) e de seu mRNA (PCR real time), em leucócitos humanos obtidos do sangue periférico de doadores sadios e em células da linhagem promielocítica humana (HL-60). Leucócitos do sangue periférico e células HL-60 não expressam níveis detectáveis da proteína e também do mRNA para Gal-1. Por meio de ensaios de quimiluminescência (QL) foi possível analisar a capacidade da Gal-1 recombinante humana de induzir e modular a produção de EROs em neutrófilos humanos não ativados e ativados com fMLP (n-Formil-Methionyl-Leucyl-Phenylalanine). A Gal-1 induz a produção de EROs de modo dose-dependente em neutrófilos ativados com fMLP. Entretanto, em neutrófilos não ativados esta lectina não induz o metabolismo oxidativo e, além disso, é capaz de modular negativamente a produção de EROs em resposta ao fMLP. Tanto nas células não ativadas quanto ativadas com fMLP, os efeitos da Gal-1 na produção de EROs estão parcialmente associados a sua propriedade lectínica. Na literatura ainda não há relatos sobre a interferência da Gal-1 no metabolismo oxidativo em neutrófilos ativados com repetidas doses de fMLP. Sabe-se que o tratamento sucessivo com fMLP reduz os níveis de produção de EROs por neutrófilos, no entanto, a presença de Gal-1 não interferiu neste processo. Interessantemente, neutrófilos recuperados do peritônio de camundongos Gal-1-/- liberam mais EROs em resposta ao fMLP e a Gal-1 exógena quando comparado aos neutrófilos de animais selvagens. Com base nos achados in vitro e sabendo que na sepse polimicrobiana o neutrófilo desempenha um papel importante, o próximo passo foi utilizar o modelo de M-CLP (sepse moderada) em camundongos destituídos (Gal-1-/-) ou não (Gal-1+/+) do gene da Gal-1. Animais Gal-1-/-, apresentam menor taxa de sobrevivência. O influxo de neutrófilos e a carga bacteriana no peritônio são maiores nos animais Gal-1-/- apesar da menor quantidade de bactérias detectadas no sangue, em relação aos animais selvagens. No pulmão, o influxo de neutrófilos é semelhante para ambos os grupos. No entanto, após a injeção intraperitoneal de 107 Unidades Formadoras de Colônias (UFC) de bactérias, camundongos Gal-1-/- apresentam maior atividade bactericida no lavado peritoneal e sangue, em relação aos selvagens. A participação da Gal-1 na homeostase de neutrófilos foi demonstrada in vitro, por citometria de fluxo (anexina-V-FITC), onde a indução de FS nos neutrófilos tratados com Gal-1 favoreceu a fagocitose destas células por macrófagos. Portanto, este conjunto de resultados sugere que a Gal-1, exógena ou endógena, pode modular funções imunológicas de neutrófilos e participar da regulação do processo inflamatório/infeccioso sistêmico. / Galectin-1 (Gal-1) is a lectin that recognizes ?-galactosides and participates in biological processes, including modulation of the inflammatory response. Literature data show the involvement of this lectin to induce exposure of phosphatidylserine (PS - a marker of apoptosis), in the generation of reactive oxygen species (ROS) and in modulation of neutrophil chemotaxis. However, there are few data related to the biological impact of exogenous and endogenous Gal-1 on the biology of these cells. This study evaluated, in vitro, some functional aspects of the interaction of Gal-1 and neutrophil. It was determined the expression level of Gal-1 (Western blotting) and its mRNA (real time PCR) on human leukocytes obtained from peripheral blood of healthy donors and human promyelocytic cell line (HL-60). Peripheral blood leukocytes and HL-60 cells do not express detectable levels of this protein as well as the Gal-1 mRNA. Through chemiluminescence testing (CL) it was possible to analyze the ability of recombinant human Gal-1 to induce and modulate the production of ROS in naïve and activated (n-Formyl-Methionyl-Leucyl-Phenylalanine-fMLP) human neutrophils. Gal-1 induces ROS production in a dose-dependent way in fMLP activated neutrophils. However, in naive neutrophils this lectin does not induce oxidative stress and can negatively modulate ROS production in response to fMLP. The effects of Gal-1 on ROS production in both non-activated cells and activated cells are partially associated with their lectin property. In the literature there are no data about the interference of Gal-1 on ROS production in activated neutrophils with repeated doses of fMLP. It is known that the subsequent treatment with fMLP reduced levels of ROS production by neutrophils; however, the presence of Gal-1 did not affect this process. Interestingly, peritoneum neutrophils from Gal-1-/- mice release more ROS in response to fMLP and exogenous Gal-1 when compared to neutrophils from wild type animals. Based on the in vitro findings and considering that in polymicrobial sepsis, neutrophils play an important role, the next step was to use the M-CLP model (moderate sepsis) in mice lacking (Gal-1-/-) or not (Gal-1+/+) Gal-1 gene. Gal-1-/- animals present lower survival rate and fewer bacteria in the blood despite having higher bacterial load in infectious focus in relation to wild type mice. The rates of neutrophils influx into the peritoneum and lungs are similar for both groups. The participation of Gal-1 in the homeostasis of neutrophils was demonstrated in vitro by flow cytometry (annexin V-FITC), where induced PS by Gal-1 in the neutrophils enhanced the phagocytosis of these cells by macrophages. Therefore, this set of results suggests that Gal-1, exogenous or endogenous, can modulate immune functions of neutrophils and participate in the regulation of inflammatory/infectious disorders.