Os princípios biológicos da regeneração óssea guiada (ROG) têm contribuído para o desenvolvimento de membranas que, em odontologia, são utilizadas em diversas situações como tratamentos com implantes dentários, aumento de rebordo alveolar e reparo de defeitos ósseos de origem traumática e patológica. Resultados de experimentos in vitro comparando a membrana obtida pela associação do polímero poli(fluoreto de vinilideno-trifluoretileno) e da cerâmica titanato de bário (P(VDFTrFE)/ BT) à membrana de politetrafluoretileno (PTFE) mostraram uma resposta favorável de osteoblastos, fibroblastos e queratinócitos à membrana de P(VDFTrFE)/ BT. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da membrana de P(VDFTrFE)/ BT sobre a formação óssea in vivo. Foram criados defeitos ósseos com 5 mm de diâmetro em calvárias de ratos machos Wistar (peso 200-250 g), distribuídos em três grupos com relação à utilização ou não de membranas nos defeitos ósseos: (1) membrana de P(VDF-TrFE)/BT; (2) membrana de PTFE; (3) nenhum tipo de membrana. Ao final de 4 e 8 semanas os animais foram eutanasiados e as amostras foram submetidas à: (1) análise por microtomografia computadorizada (micro-CT) para avaliar volume ósseo, superfície óssea, superfície óssea específica, número de trabéculas, separação trabecular e espessura trabecular, (2) análise histológica com base em cortes histológicos não descalcificados, (3) análise por reação em cadeia da polimerase em tempo real (PCR em tempo real) para avaliar a expressão gênica dos marcadores ósseos runt-related transcription factor 2 (RUNX2), fosfatase alcalina (ALP), sialoproteína óssea (BSP), osteocalcina (OC), osteoprotegerina (OPG) e receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand (RANKL) e (4) análise da expressão de microRNAs (miRs) pela técnica de sequenciamento na plataforma Illumina. Os dados das análises morfométricas e da expressão gênica foram submetidos ao teste de Kruskal-Wallis, seguido pelo teste de Fischer quando apropriado, e para a análise da expressão de miRs foi utilizado o teste de Mann-Whitney para comparar a membrana de P(VDF-TrFE)/BT à de PTFE. Para todas as comparações o nível de significância adotado foi de 0,05. Os defeitos que não receberam a membrana tiveram uma formação óssea insignificante. Ambas as membranas favoreceram a formação óssea, sendo a superfície óssea maior sobre a membrana de P(VDF-TrFE)/BT comparada à de PTFE em 4 (p=0,01) e 8 (p=0,001) semanas e a separação trabecular maior sobre a membrana de PTFE comparada à de P(VDF-TrFE)/BT em 4 (p=0,05) e 8 (p=0,001) semanas. A expressão gênica de BSP (p=0,01), OC (p=0,001) e OPG (p=0,001) foi maior e de RANKL (p=0,001) foi menor sobre a membrana de P(VDFTrFE)/ BT comparada à de PTFE em 4 semanas. A expressão gênica de RUNX2 (p=0,001) e OC (p=0,05) foi maior e de ALP (p=0,05), RANKL (p=0,01) e OPG (p=0,001) foi menor sobre a membrana de P(VDF-TrFE)/BT comparada à de PTFE em 8 semanas. Quarenta e cinco e 13 miRs foram regulados positivamente (>2 vezes) em 4 semanas e 8 semanas, respectivamente, e 11 e 39 miRs foram regulados negativamente (>2 vezes) em 4 semanas e 8 semanas, respectivamente, pela membrana de P(VDF-TrFE)/BT comparada à de PTFE. Os resultados indicam que a membrana de P(VDF-TrFE)/BT favorece a formação óssea quando comparada à membrana de PTFE e, portanto, pode ser considerada um biomaterial promissor para ser utilizado em procedimentos de ROG. / Biological principles of guided bone regeneration (GBR) have contributed to development of membranes that, in dentistry, are used in several situations such as treatment with dental implants, alveolar bone augmentation and repair of traumatic and pathological bone defects. Results of in vitro experiments comparing membrane obtained by the combination of poly(vinylidene fluoride-trifluoroethylene) and barium titanate ceramics (P(VDF-TrFE)/BT) with polytetrafluoroethylene (PTFE) membrane showed a favorable response of osteoblasts, fibroblasts and keratinocytes to the P(VDF-TrFE)/BT membrane. The aim of this study was to evaluate the effect of P(VDFTrFE)/ BT membrane on in vivo bone formation. Bone defects with 5 mm in diameter were created in calvaria of male Wistar rats (weight 200-250 g), distributed into three groups regarding the use or not of membranes on defects: (1) P(VDF-TrFE)/BT membrane; (2) PTFE membrane; (3) no membrane. At the end of 4 and 8 weeks, the animals were euthanized and samples were subjected to: (1) computed microtomography analysis (micro-CT) to assess bone volume, bone surface, specific bone surface, trabecular number, trabecular thickness and trabecular separation; (2) histological analysis based on non-decalcified histological sections; (3) real time polymerase chain reaction (real time PCR) to evaluate gene expression of the bone markers runt-related transcription factor 2 (RUNX2), alkaline phosphatase (ALP), bone sialoprotein (BSP), osteocalcin (OC), osteoprotegerin (OPG) and receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand (RANKL); (4) microRNAs (miRs) sequencing analysis at Illumina platform. Data from morphometric and gene expression analyses were submitted to the Kruskal-Wallis test followed by Fischer\'s test, when appropriate, and from miRs expression to the Mann-Whitney test to compare P(VDF-TrFE)/BT with PTFE membrane. For all comparisons, the significance level was 0.05. Defects without membrane exhibit a non significant bone formation. Both membranes favored osteogenesis with an increased bone formation on the P(VDF-TrFE)/BT membrane compared with PTFE at 4 (p=0.05) and 8 weeks (p=0.001). Trabecular separation was greater on PTFE membrane compared with the P(VDF-TrFE)/BT at 4 (p=0.05) and 8 weeks (p=0.001). At 4 weeks, the gene expression of BSP (p=0.01), OC (p=0.001) and OPG (p=0.001) were higher on P(VDF-TrFE)/BT membrane compared with PTFE, while RANKL (p=0.001) was lower. The gene expression of RUNX2 (p=0.001) and OC (p=0.05) were higher and ALP (p=0.05), RANKL (p=0.01) and OPG (p=0.001) were lower on the membrane of P(VDF- TrFE)/BT compared with PTFE at 8 weeks. Fortyfive and 13 miRs were up-regulated (> 2 fold) at 4 weeks and 8 weeks, respectively, and 11 and 39 miRs were negatively regulated (> 2 fold) at 4 weeks and 8 weeks, respectively, on the P(VDF-TrFE)/BT membrane compared with PTFE membrane. The results indicate that the P(VDF-TrFE)/BT membrane favors bone formation compared with PTFE membrane and, therefore, may be considered a promising biomaterial for using in GBR procedures.

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:01:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4248_1.pdf: 782218 bytes, checksum: 40cb7f588dc25849f987eab3d1dc8613 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Instituto de Medicina Integral Professor Fernando Figueira / Avaliou-se o efeito da natação sobre o crescimento somático e ósseo de ratas submetidas a dois modelos experimentais a fim de reproduzir déficit hormonal. Utilizou-se 28 ratas Wistar, neonatas, fêmeas separadas em dois grupos: Glutamato Monossódico (GluM,n=14) que recebeu uma solução de glutamato monossódico (4.0mg/g), em dias alternados, nos primeiros 14 dias de vida; e Grupo Salina (SAL, n=14) que recebeu solução salina. O peso corpóreo e as mensurações murinométricas (eixos látero-lateral, antero-posterior do crânio - LLC/APC - e comprimento da cauda - CC) foram avaliados do 1º ao 30º dia de vida. Aos 60 dias de vida, o grupo GluM foi ovariectomizado (GluMO) e o grupo SAL apenas passou pelo estresse cirúrgico. Em seguida, metade dos animais de cada grupo iniciou o treinamento de natação (12 semanas, 5 dias/semanas). Resultando nos seguintes grupos experimentais: Salina sedentário (SALsed,n=7), Salina natação (SALnat,n=7), Glutamato ovariectomia sedentário (GluMOsed,n=7) e Glutamato ovariectomia natação (GluMOnat,n=7). Ao final do experimento o fêmur direito foi pesado e avaliado seu comprimento. Seis preparações histológicas do fêmur de cada grupo esperimental foram confeccionadas a fim de avaliar: diâmetro da cabeça do fêmur, área da cartilagem articular da cabeça do fêmur, espessura da cortical da diáfise deste osso e a proporção volumétrica (PV) da epífise femoral. Nos 30 dias iniciais, o grupo GluM reduziu o peso corpóreo e os eixos LLC, APC e CC comparado ao grupo SAL. Ao final do experimento, o peso corpóreo foi similar entre os grupos SALsed e SALnat e; GLuMOsed e GluMOnat. Porém houve redução no peso do GluMOsed comparado ao SALsed. A natação aumentou o peso do fêmur no grupo SALnat em relação ao SALsed e também no grupo SALsed comparado ao GluMOsed, porém não o alterou entre os GluMOsed e GluMOnat. No comprimento, o grupo SALnat foi similar ao SALsed e o mesmo ocorreu entre GluMOnat e GluMOsed. Porém, o grupo SALsed apresentou comprimento maior que GluMOsed. A área da cartilagem articular do fêmur mostrou-se reduzida no GluMOnat comparado ao GluMOsed. A natação aumentou a espessura das corticais no grupo SAL, porém não influenciou no GluMO. Na região lateral da epífise houve redução da PV no Grupo GluMOnat comparado ao GluMOsed. Na região medial, a natação aumentou a PV no grupo SAL, porém não influenciou GluMO. Constatou-se que a natação pode ser utilizada como estímulo ósseo em animais saudáveis, porém, no tecido ósseo debilitado pode não exercer nenhum efeito estimulante

Atualmente existe uma lacuna de conhecimento referente à doação e ao transplante do tecido ósseo, já que muitas publicações concentram-se, principalmente, na temática \'doação e transplante de órgãos sólidos\'. O objetivo deste estudo foi compreender os aspectos intervenientes na efetivação da doação do tecido ósseo durante o acolhimento e a entrevista familiar, realizada pelos profissionais da Organização de Procura de Órgãos, na ótica do profissional e do familiar do potencial doador. Método: Este estudo de abordagem qualitativa, apoiado em conceitos do interacionismo simbólico, constituiu-se de familiares de doadores de órgãos e tecidos que autorizaram a doação do tecido ósseo no período de janeiro a dezembro de 2016, iniciando-se a partir de pesquisa nos prontuários da Organização de Procura de Órgãos localizada no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto/SP. Selecionaram-se todos os prontuários dos doadores de tecido ósseo, totalizando doze doadores Ainda, foram convidados a participar do estudo os quatro enfermeiros responsáveis pelo acolhimento e entrevista para solicitação dos órgãos e tecidos pertencentes à Organização de Procura dos Órgãos citada, por meio de uma entrevista gravada e realizada em seu contexto de trabalho. Foram entrevistados nove familiares e quatro enfermeiros mediante roteiro de entrevista contendo dados sociodemográficos e questões sobre a vivência de todo o processo de doação do tecido ósseo. O material foi transcrito e submetido a análise de conteúdo indutiva em três categorias temáticas: contexto onde se dá o processo de solicitação da doação, fatores que facilitaram a decisão pela doação do tecido ósseo e o resultado do processo de doação para o familiar. Observamos que os familiares, ao refletirem sobre o momento de decisão pela doação do tecido ósseo, revelaram que, apesar do desconhecimento desse tipo de doação, os aspectos que contribuíram para o consentimento foram a satisfação com o atendimento hospitalar humanizado, bem como o profissionalismo dos enfermeiros da Organização de Procura de Órgãos ao explicarem quais ossos seriam retirados e como seria reconstituído o corpo do doador; o conhecimento prévio da vontade do ente querido em ser um doador e o pensamento de estar \"fazendo o bem\". Observamos ainda que os enfermeiros, ao refletirem sobre seu papel na entrevista para solicitação da doação do tecido ósseo, revelaram que, inicialmente, o desconhecimento dos familiares quanto à possibilidade de doação do tecido ósseo, faz com que os mesmos reajam negativamente devido ao medo da deformidade do corpo. Objetivando superar esse momento difícil, os enfermeiros explicam todo o processo de captação do tecido ósseo, até a forma como seria entregue o corpo do familiar para o velório. Sugerem-se capacitações futuras à equipe de enfermeiros contribuindo para a otimização de todo o processo de doação do tecido ósseo para transplante. Acreditamos ser evidente a necessidade de educação voltada à população por meio de ações governamentais, em que futuras campanhas na divulgação da existência da doação do tecido ósseo possam promover um maior entendimento, resultando em uma reação menos traumática das pessoas no momento da solicitação do tecido ósseo / Currently there is a lack of knowledge regarding donation and transplantation of bone tissue, due many publications to focus primarily on donation and transplantation of solid organs. The aim of this study was to understand the intervening aspects on the effectiveness of bone tissue donation during approach and family interview, carried out by professionals of the Organ Procurement Organization, from perspective of professionals and potential donor relatives. Methods: It is a qualitative study, based on symbolic interactionism concepts; the sample was composed for relatives of donors of organs and tissues that authorized the donation of bone tissue in the period from January to December of 2016,.The first part was characterized for a data collection in the medical records from Organ Procurement Organization located in a Brazilian School Hospital. There were twelve donors during the selected period which medical records were selected to analyze. In addition, four nurses belonging to Organ Procurement Organization were invited to participate in study. They were responsible for the approach and interview with relatives to request organs. The data collection strategy was a structured interview which was recorded and performed in their workplace. Nine families and four nurses were interviewed using an interview script containing sociodemographic data and questions about the experience of entire process of donating bone tissue. The interviews were transcribed and submitted to analysis of inductive content in three thematic categories: the context where the donation request process happens, factors that facilitated the decision by the donation of the bone tissue and the donation process result to the relative. Results: It was observed that family members reflected on the moment of decision of bone tissue donation. They revealed that, despite the lack of knowledge about this type of donation, there were some aspects that contributed to the consent satisfaction with humanized hospital care as well as the nurses of the Organ Procurement Organization professionalism. These nurses explained which bones would be removed and how the donor\'s body would be reconstituted. Another contributed factor was the relatives prior knowledge of the being´s desire to be an organ donor and the \"doing good\" feeling. Meanwhile, the nurses interviewed revealed that initially there was family members\' lack of knowledge about the possibility of donation of the bone tissue, causes them to react negatively due to the fear of deformity of the body. The nurses explained the whole process of bone tissue withdrawal and the way which the deceased´s body would be delivered to the funeral. The aims of this approach were to overcome this difficult moment and family insecurity to make decision. Conclusions: Future nurses team training is suggested to improve all bone tissue donation for transplantation process. It is extremely important a population-oriented education through governmental actions, campaigns about bone tissue donation to promote a better understanding. It could result in less traumatic people reaction at the moment of bone tissue demand

Atualmente existe uma lacuna de conhecimento referente à doação e ao transplante do tecido ósseo, já que muitas publicações concentram-se, principalmente, na temática \'doação e transplante de órgãos sólidos\'. O objetivo deste estudo foi compreender os aspectos intervenientes na efetivação da doação do tecido ósseo durante o acolhimento e a entrevista familiar, realizada pelos profissionais da Organização de Procura de Órgãos, na ótica do profissional e do familiar do potencial doador. Método: Este estudo de abordagem qualitativa, apoiado em conceitos do interacionismo simbólico, constituiu-se de familiares de doadores de órgãos e tecidos que autorizaram a doação do tecido ósseo no período de janeiro a dezembro de 2016, iniciando-se a partir de pesquisa nos prontuários da Organização de Procura de Órgãos localizada no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto/SP. Selecionaram-se todos os prontuários dos doadores de tecido ósseo, totalizando doze doadores Ainda, foram convidados a participar do estudo os quatro enfermeiros responsáveis pelo acolhimento e entrevista para solicitação dos órgãos e tecidos pertencentes à Organização de Procura dos Órgãos citada, por meio de uma entrevista gravada e realizada em seu contexto de trabalho. Foram entrevistados nove familiares e quatro enfermeiros mediante roteiro de entrevista contendo dados sociodemográficos e questões sobre a vivência de todo o processo de doação do tecido ósseo. O material foi transcrito e submetido a análise de conteúdo indutiva em três categorias temáticas: contexto onde se dá o processo de solicitação da doação, fatores que facilitaram a decisão pela doação do tecido ósseo e o resultado do processo de doação para o familiar. Observamos que os familiares, ao refletirem sobre o momento de decisão pela doação do tecido ósseo, revelaram que, apesar do desconhecimento desse tipo de doação, os aspectos que contribuíram para o consentimento foram a satisfação com o atendimento hospitalar humanizado, bem como o profissionalismo dos enfermeiros da Organização de Procura de Órgãos ao explicarem quais ossos seriam retirados e como seria reconstituído o corpo do doador; o conhecimento prévio da vontade do ente querido em ser um doador e o pensamento de estar \"fazendo o bem\". Observamos ainda que os enfermeiros, ao refletirem sobre seu papel na entrevista para solicitação da doação do tecido ósseo, revelaram que, inicialmente, o desconhecimento dos familiares quanto à possibilidade de doação do tecido ósseo, faz com que os mesmos reajam negativamente devido ao medo da deformidade do corpo. Objetivando superar esse momento difícil, os enfermeiros explicam todo o processo de captação do tecido ósseo, até a forma como seria entregue o corpo do familiar para o velório. Sugerem-se capacitações futuras à equipe de enfermeiros contribuindo para a otimização de todo o processo de doação do tecido ósseo para transplante. Acreditamos ser evidente a necessidade de educação voltada à população por meio de ações governamentais, em que futuras campanhas na divulgação da existência da doação do tecido ósseo possam promover um maior entendimento, resultando em uma reação menos traumática das pessoas no momento da solicitação do tecido ósseo / Currently there is a lack of knowledge regarding donation and transplantation of bone tissue, due many publications to focus primarily on donation and transplantation of solid organs. The aim of this study was to understand the intervening aspects on the effectiveness of bone tissue donation during approach and family interview, carried out by professionals of the Organ Procurement Organization, from perspective of professionals and potential donor relatives. Methods: It is a qualitative study, based on symbolic interactionism concepts; the sample was composed for relatives of donors of organs and tissues that authorized the donation of bone tissue in the period from January to December of 2016,.The first part was characterized for a data collection in the medical records from Organ Procurement Organization located in a Brazilian School Hospital. There were twelve donors during the selected period which medical records were selected to analyze. In addition, four nurses belonging to Organ Procurement Organization were invited to participate in study. They were responsible for the approach and interview with relatives to request organs. The data collection strategy was a structured interview which was recorded and performed in their workplace. Nine families and four nurses were interviewed using an interview script containing sociodemographic data and questions about the experience of entire process of donating bone tissue. The interviews were transcribed and submitted to analysis of inductive content in three thematic categories: the context where the donation request process happens, factors that facilitated the decision by the donation of the bone tissue and the donation process result to the relative. Results: It was observed that family members reflected on the moment of decision of bone tissue donation. They revealed that, despite the lack of knowledge about this type of donation, there were some aspects that contributed to the consent satisfaction with humanized hospital care as well as the nurses of the Organ Procurement Organization professionalism. These nurses explained which bones would be removed and how the donor\'s body would be reconstituted. Another contributed factor was the relatives prior knowledge of the being´s desire to be an organ donor and the \"doing good\" feeling. Meanwhile, the nurses interviewed revealed that initially there was family members\' lack of knowledge about the possibility of donation of the bone tissue, causes them to react negatively due to the fear of deformity of the body. The nurses explained the whole process of bone tissue withdrawal and the way which the deceased´s body would be delivered to the funeral. The aims of this approach were to overcome this difficult moment and family insecurity to make decision. Conclusions: Future nurses team training is suggested to improve all bone tissue donation for transplantation process. It is extremely important a population-oriented education through governmental actions, campaigns about bone tissue donation to promote a better understanding. It could result in less traumatic people reaction at the moment of bone tissue demand

A desnutrição é uma condição clínica decorrente da deficiência de um ou mais nutrientes essenciais para homeostase do organismo. Em crianças continua a ser um dos problemas mais graves de saúde pública no mundo, em virtude de sua grandeza e consequências desastrosas para o crescimento, desenvolvimento e sobrevivência, o acarretando graves comprometimentos na idade adulta. O osso é extremamente sensível a mudanças metabólicas, hormonais e nutricionais. Alterações internas e externas ao organismo podem interferir na aquisição de massa óssea máxima, levar a doenças osteometabólicas e afetar o crescimento de ossos longos. Uma alimentação adequada, com fornecimento de todos os nutrientes necessários ao organismo é crucial para o desenvolvimento do sistema esquelético. No entanto, os estudos de qualidade óssea e crescimento no desnutrido ainda são poucos na literatura. Sendo assim, o nosso objetivo foi avaliar os efeitos da restrição alimentar no tecido ósseo (trabecular e cortical) e na cartilagem de crescimento de ratos em crescimento. Neste estudo, a qualidade do tecido ósseo e da cartilagem de crescimento das tíbias foi analisada em ratos normais e desnutridos. Foram utilizados 72 ratos machos, com massa corpórea inicial de 70 a 80 gramas, que permaneceram alojados em gaiolas individuais e foram aleatoriamente divididos em 2 grupos experimentais com dois subgrupos cada, conforme o tempo de exposição à restrição alimentar: CON1: ratos normais, observados por 56 dias; RA1: ratos submetidos à restrição alimentar, observados por 56 dias; CON2: ratos normais, observados por 70 dias; RA1: ratos submetidos à restrição alimentar, observados por 70 dias. A desnutrição foi induzida por meio da restrição alimentar em 50%, ou seja, metade da quantidade ingerida pelos animais controles. Ao término do período experimental, após 56 e 70 dias, os ossos foram submetidos às análises macroscópica, microtomografia computadorizada (avaliação qualitativa e quantitativa da microestrutura óssea), densitometria óssea (DXA), microscopia óptica (caracterização dos tecidos), histomorfometria (quantificação de colágeno e volume trabecular), de expressão gênica e ensaio mecânico (avaliação da resistência mecânica). O nível de significância estatística foi de 5%. Embora a desnutrição não tenha resultado em alterações na expressão gênica, várias alterações fenotípicas foram observadas na cartilagem de crescimento (diminuição do volume; redução da área total, área de ossificação e espessura; alterações celulares nas zonas hipertrófica e proliferativa; tecido mais fraco na resistência ao cisalhamento), osso trabecular e cortical (redução no tamanho e massa óssea; menor densidade óssea; deterioração na microarquitetura trabecular e cortical e; menos trabéculas com menor deposição de colágeno). Concluiu-se que a restrição alimentar causou efeitos deletérios para a cartilagem de crescimento, osso trabecular e cortical, indicando interferência nos mecanismos de ossificação osteocondral e intramembranosa. / Clinical undernutrition is characterized by the depletion of one or more nutrients that are essential for human homeostasis. Undernutrition in children results in a serious health impact due to the impairment in growth and bone quality in adulthood. Several factors may interfere with the peak mass achieved by an individual and interfere in growth and osteometabolic disorders. An adequate nutritional intake is an essential factor for bone development. However, few studies have investigates the relation between bone quality and growth in malnourished subjects. Therefore, we aimed to study the effects of food restriction on the growth plate and bone tissue (trabecular and cortical) in growing rats. 72 male Wistar rats weighing approximately 70-80g were randomly assigned into two groups and, subsequently subdivided into two subgroups according to the experimental follow-up: CON1: control rats followed by 56 days; RA1: food restricted rats followed by 56 days; CON2: control rats followed by 70 days and, RA2: food restricted rats followed by 70 days. After weaning, food restricted rats were fed 50% of the ad libitum food intake. At the end of each experimental period, the rats were euthanized and tibias were analyzed by morphological measurements, micro-computed tomography (qualitative and quantitative analysis of bone microstructure), dual-energy X-ray absorptiometry (DXA), optical microscopy (tissue characterization), histomorphometry (trabeculae quantity and collagen deposition), gene expression and mechanical test (mechanical strength assessment). Statistical significance was set when p<0.05. Although undernutrition did not alter gene expression, several phenotypic changes were seen at the growth plate (i.e. decreased in growth plate volume, reduction in total growth plate area and thickness, decrease in area of proliferative, hyperthrofic and ossified zones and, decrease in hyperthrofic cells and lesser mechanical resistance), trabecular and cortical bone (i.e. reduction in bone size and mass, bone density, deterioration at the trabecular and cortical microstructure, reduction in trabeculae bone and collagen deposition) of growing rats subjected to food restriction. We concluded that food restriction caused detrimental effects on growth plate, trabecular bone and cortical shaft, evidencing deleterious changes in the mechanisms of osteochondral and intramembranous bone formation.

O conceito de que estimulação elétrica promove o reparo de fraturas tem uma longa história, datada de 1812. O mecanismo pelo qual estimulação elétrica promove a osteogênese ainda é assunto de especulação científica, entretanto esse método não farmacológico, utilizado no presente trabalho, já mostrou efeitos positivos na promoção e estímulo da osteogênese. O presente trabalho objetivou analisar a influência da aplicação de campo elétrico pulsado nas características histológicas e propriedades mecânicas do tecido ósseo em osteotomias experimentais realizadas em tíbias de ratos. Foram utilizados 52 ratos com fraturas cirúrgicas unilaterais do terço médio da tíbia, sem lesão dos músculos e do periósteo. Os animais foram divididos em dois grupos: grupo controle, que não recebeu estimulação e grupo tratado com campo elétrico. Esses foram divididos em dois subgrupos: animais sacrificados no 19º pós-operatório e animais sacrificados no 27º pós-operatório. O membro fraturado foi tratado com campo elétrico pulsado com freqüência fundamental de 1,5 MHz e 200 \'mü\'s de largura de pulso, em sessões diárias de 20 minutos. Realizou-se radiografia desse membro no dia da cirurgia e do sacrifício. Após o tratamento sacrificaram-se os ratos e extraíram-se suas tíbias para a obtenção de material para a análise morfométrica e ensaio mecânico de flexão. Os ensaios biomecânicos revelaram que houve diferença significativa entre as médias dos grupos tratado 18 e 12 dias somente para a tensão, sendo esta maior para o grupo tratado 18 dias, para as demais propriedades mecânicas analisadas não houve diferença significativa. A análise morfométrica determinou que a relação entre os grupos controle 18 dias com tratado 18 dias bem como entre os grupos tratado 12 dias e tratado 18 dias das médias das áreas de osso formado apresentaram diferenças estatisticamente significantes. Esses resultados sugerem que existe um incremento na síntese de matriz orgânica no grupo tratado, não acompanhado linearmente pela síntese mineral. A diferença estatisticamente significativa nas tensões de ruptura, por outro lado, sugere que o aumento no grau de mineralização encontra-se em curso. / The concept that electrical stimulation promotes the repair of fractures has a long history, dated of 1812. The mechanism for which electrical stimulation promotes osteogenesis is still subject of scientific speculation, however that method non-pharmacological, used in the present work has already showed positive effects in the promotion and incentive of osteogenesis. The present work objectified to analyze the influence of the application of electric field pulsed in the histological characteristic and mechanical properties of the bone tissue in experimental osteotomy accomplished in tibias of rats. 52 rats were used with unilateral surgical fractures of the medium third of the tibia, without lesion of the muscles and of the periosteum. The animals were divided in two groups: group control, that didn\'t receive stimulation and treated group with electric field. These were divided in two subgroups: animals sacrificed in the 19th after operation and animals sacrificed in the 27th after operation. The fracture member was treated with electric field pulsed with fundamental frequency of 1,5 MHz and 200 \'mü\'s of pulse width, in daily sessions of 20 minutes. The x-ray of that member took place in the day of the surgery and of the sacrifice. After the treatment the rats were sacrificed and their tibias were extracted for the material obtaining for analysis morfometric and mechanical rehearsal of flexion. The mechanical rehearsals revealed that there was only significant difference among the averages of the treated groups 18 and 12 days for the tension, the treated group 18 days had a larger tension, for the other analyzed mechanical properties there was not significant difference. The averages of the moment of inertia and area went significantly larger for the treated group 18 days compared with the respective averages of the control group controls. The treated group 12 days presented averages significantly larger when compared to the properties: moment of inertia, neutral line and area with the control group 12 days. These results suggest that an increment exists in the synthesis of organic matrix in the treated group, not accompanied lineally by the mineral synthesis. The difference significant statistic in the rupture tensions, on the other hand, suggests that the increase in the mineralization degree meets in course.

O processo de reparo ósseo depende de uma resposta inflamatória inicial e transitória, a qual envolve a participação de diversos leucócitos, como células da linhagem monócito/macrófago. O receptor CCR2 é importante para o recrutamento de macrófagos durante as respostas imunes, além de ter um papel na regulação da osteoclastogênese. Assim, o objetivo do presente estudo foi investigar papel de células CCR2+ no processo de reparo ósseo alveolar pós-exodontia em camundongos, por meio de análises microscópicas (MicroCT, histomorfometria, análise de birrefringência e imuno-histoquímica) e moleculares (PCRArray) comparativas entre as linhagens C57Bl/6 (WT) e CCR2KO, ao longo dos períodos de 0 hora, 7, 14 e 21 dias pós-exodontia do incisivo superior direito. Como resultado geral das análises microscópicas, constatamos que a ausência de células CCR2+ não afetou o resultado final do reparo ósseo alveolar em camundongos CCR2KO, mas levou a alterações transitórias e estatisticamente significantes (p<0,05) para quantificação de infiltrado inflamatório, vasos sanguíneos, fibroblastos, fibras colágenas, osteoblastos e osteoclastos. Além disso, a ausência de células CCR2+ resultou em diminuição (p<0,05) de células F4/80+ e CCR5+ no infiltrado inflamatório ao longo do processo de reparo ósseo alveolar de camundongos CCR2KO, demonstrando o papel do receptor CCR2 no recrutamento de macrófagos (células F4/80+), bem como sugerindo que as células F4/80+ apresentam dupla positividade para os receptores CCR2 e CCR5. Neste contexto, o receptor CCR5 seria o responsável pela migração remanescente, ainda que reduzida, de células F4/80+ nos animais CCR2KO. Considerando os resultados moleculares, a ausência de CCR2 resultou na alteração da expressão de diferentes marcadores em camundongos CCR2KO, tais como: o fator de crescimento TGF1, marcadores de matriz COL1, MMP1a, MMP2 e MMP9, marcadores ósseos RUNX2, DMP1, RANKL, RANK e CTSK, e marcadores de MSCs CD106, COT-4, NANOG, CD146 e CD105, bem como de marcadores imunológicos como as citocinas IL-6 e TNF-a, receptores de quimiocinas CCR1, CCR5 e CXCR1,e as quimiocinas CCL12, CCL20, CCL25 e CXCL12. Em conclusão, estes resultados indicam que células CCR2+ desempenham diferentes funções no reparo ósseo alveolar em camundongos, influenciando tanto a resposta inflamatória, como os eventos teciduais observados ao longo deste processo. / The bone repair process depends of an initial and transitory inflammatory response, which involves the participation of various leukocytes subsets, as of the monocyte/macrophage lineage. The CCR2 receptor is important to macrophage recruitment during immune responses, and play an active role in the regulation of osteoclastogenesis. Thereby, the purpose of this study was to investigate the role of CCR2+ cells in the alveolar bone repair process in mice, by means of microscopic (MicroCT, histomorphometry, birefringence analysis and immunohistochemistry) and molecular (PCRArray) comparative analysis between C57BL / 6 (WT) and CCR2KO mice during periods of 0 hour, 7, 14 and 21 days post-extraction of the right upper incisor. As a result of the microscopic analysis, we noted that the absence of CCR2+ cells did not affect in the overall outcome of alveolar bone repair in CCR2KO mice, but resulted in transient and statistically significant (p<0.05) alterations of inflammatory infiltrate, blood vessels, fibroblasts, collagen fibers, osteoblasts and osteoclasts counts. Furthermore, the absence of CCR2+cells resulted in a decrease (p<0.05) of CCR5+ and F4/80+ cells in the inflammatory infiltrate along the alveolar bone repair process in CCR2KO mice, demonstrating the role of CCR2 receptor in macrophages migration (F4/80+ cells), as well as suggesting that the F4/80+ cells are double positive for CCR2 and CCR5. In this context, CCR5 receptor could be responsible for the remaining (but reduced) migration, of the F4/80 + cells in CCR2KO mice. According to molecular results, the absence of CCR2 resulted in an altered expression of different markers in CCR2KO mice, such as: growth factor TGF1, the matrix markers COL1, MMP1a, MMP2 and MMP9, the bone markers RUNX2, DMP1 RANKL, RANK and CTSK, and MSCs markers CD106, OCT-4, NANOG, CD146 and CD105, as well as immunological markers as IL-6 and TNF-, chemokine receptors CCR1, CXCR1 and CCR5, and the chemokines CCL12, CCL20, CCL25 and CXCL12. In conclusion, these results indicate that CCR2+ cells have different functions in alveolar bone repair in mice, influencing the inflammatory response and also tissue events observed throughout the process events.

A óxido nítrico sintase induzível (iNOS) é uma enzima responsável pela síntese do óxido nítrico, envolvido na regulação de vários processos fisiológicos, com destaque para relevantes efeitos sobre o tecido ósseo. Entretanto, o papel da iNOS no reparo ósseo alveolar permanece pouco conhecido. Assim, o objetivo deste estudo foi caracterizar o papel da iNOS no processo de reparo ósseo alveolar pósexodontia em condições homeostáticas (controle) e infecciosas em camundongos. Para isso, foram utilizados animais das linhagens WT (C57Bl/6) e iNOSKO, divididos em 2 grupos, condição homeostática (exodontia do incisivo superior direito) e alveolite experimental (induzida pela inoculação de uma suspensão de cultura bacteriana), e analisados de acordo com os diferentes períodos experimentais (0, 7, 14 e 21 dias pós-exodontia), através da análise histomorfométrica e molecular. Na análise histomorfométrica, avaliou-se a densidade de volume das estruturas referentes ao coágulo sanguíneo, tecido conjuntivo e tecido ósseo. Na análise molecular, quantificou-se a expressão de mRNA codificando genes de marcadores do metabolismo ósseo; marcadores de osteoclastos; citocinas e quimiocinas, através de reações de RealTimePCR. A expressão de iNOS esteve presente durante todo o processo de reparo ósseo alveolar nos camundongos C57Bl/6, porém de maneira mais expressiva no período de 7 dias pós-exodontia, e se mostrou aumentada pela indução de alveolite. A análise histomorfométrica demonstrou discretas alterações no processo de reparo ósseo alveolar, na ausência de iNOS, tanto em condições homeostáticas quanto infecciosas. Em condições homeostáticas, a ausência de iNOS não impactou de forma significativa o processo de reparo ósseo alveolar pósexodontia, mas se mostrou associada à modulação de vasos sanguíneos. Já em condições infecciosas, a ausência de iNOS se mostrou associada à modulação de células inflamatórias, osteoblastos e osteoclastos. De forma geral, conclui-se que embora a enzima iNOS module certos aspectos do processo de reparo ósseo alveolar de forma pontual, sua ausência não interferiu de forma significativa nesse processo. / The inducible nitric oxide synthase (iNOS) is an enzyme responsible for the synthesis of nitric oxide, a reactive molecule involved in the regulation of several physiological processes, highlighting relevant effects on bone tissue. However, the role of iNOS in alveolar bone repair remains unknown. The aim of this study was to characterize the role of iNOS in alveolar bone healing process after dental extraction in homeostatic and infectious conditions in mice. With this aim, WT (C57Bl/6) and iNOSKO mice strains were divided into 2 groups, homeostatic condition (extraction of the upper right incisor) and experimental alveolitis (induced by inoculation of a suspension of bacterial culture), and analyzed according to the different experimental periods (0, 7, 14 and 21 days post-extraction), through molecular and histomorphometric analysis. In histomorphometric analysis, the volume density of structures related to blood clot, tissue and bone were evaluated. The molecular analysis quantified the expression of mRNA encoding genes of defined as bone metabolism markers; osteoclast markers, as well cytokines and chemokines through RealTimePCR reactions. The expression of iNOS was detected during the all process of the alveolar bone repair in C57Bl/6 mice, with an expression peak at 7 days post-extraction time point, and was significantly enhanced by alveolitis induction. Histomorphometric analysis showed small changes in alveolar bone repair process in the absence of iNOS, in both homeostatic as infectious conditions. Under homeostatic conditions, the absence of iNOS did not impact significantly the process of alveolar bone healing after dental extraction, but it was associated with modulation of blood vessels formation. In the infectious conditions scenario, the absence of iNOS was associated with modulation of inflammatory cells, osteoblasts and osteoclasts counts. In general, it is concluded that even the enzyme iNOS module some aspects of alveolar bone repair in a particular and punctual manner, their absence does not interfere significantly in the overall outcome of alveolar bone repair process.

O uso crônico de etanol prejudica diretamente o processo biológico de reparo ósseo, principalmente pela inibição das células osteoblásticas, podendo causar retardo de consolidação ou pseudoartrose. Vários biomateriais naturais ou sintéticos, têm sido utilizados como uma alternativa aos enxertos ósseos. Os biomateriais sintéticos, como o Beta Fosfato Tricálcico (-TCP) são biocompatíveis, biodegradáveis e osteocondutíveis, por orientar as células osteoblásticas, promovendo a neoformação óssea. Sendo assim, objetivou-se avaliar a influência da ingestão crônica de etanol no processo de reparo ósseo de defeitos cranianos tratados com -TCP® comparativamente aos preenchidos com coágulo sanguíneo e a sua interferência sobre a massa corporal. Foram utilizados 40 ratos machos (Rattus norvegicus), distribuídos aleatoriamente em 2 grupos: GAG - receberam água como dieta liquida, e GAL - receberam etanol a 25%. O GAL foi submetido inicialmente à adaptação gradativa ao álcool e depois permaneceu a 25% por 90 dias. Após o término desse período, todos os animais foram submetidos à cirurgia experimental. Nos ossos parietais de cada animal, foram confeccionadas duas cavidades 5,0 mm de diâmetro ao lado da sutura sagital, de forma que o parietal direito foi preenchido com -TCP® e o esquerdo com coágulo. Dessa forma, os grupos GAG e GAL foram divididos de acordo com o preenchimento dos defeitos: GC-AG (Grupo Coágulo Água), GC-AL (Grupo Coágulo Álcool), GB-AG (Grupo Biomaterial Água) e GB-AL (Grupo Biomaterial Álcool). O reparo ósseo foi observado de acordo com o período de eutanásia: 10, 20, 40 e 60 dias após a cirurgia. Após inclusão histológica, as peças foram submetidas à análises histomorfológica e histomorfométrica. Na análise da variação da massa corporal, observou-se que as massas iniciais do GAG foram maiores que GAL e as massas finais de GAG aumentou significativamente apenas em 60 dias e no GAL em todos os períodos. Na análise histomorfológica, observou-se nos períodos iniciais de todos os grupos a presença de tecido conjuntivo fibroso preenchendo toda área central do defeito. Os grupos com os defeitos preenchidos com -TCP apresentaram tecido reacional com as partículas envoltas por células inflamatórias. No período final de análise, observou-se em todos os grupos pequena neoformação óssea com a área central preenchida por tecido conjuntivo fibroso. Nos grupos GC-AL, GB-AG e GB-AL evidência de reação inflamatória menos intensa. Na análise histomorfométrica em relação à influência do tempo na neoformação óssea, os grupos GC-AG e GC-AL apresentaram o mesmo perfil gráfico em todos os períodos exceto 60 dias. O grupo GB-AG houve aumento substancial de neoformação em todo experimento e GB-AL pequeno aumento, mas não foi significante. Em relação à interferência da dieta, observou-se maior percentual de formação óssea nos grupos que consumiram água nos períodos 40 e 60 dias. E em relação ao tipo de preenchimento, observou-se no grupo GC-AG maior formação nos períodos de 20 e 40 dias. Já nos GB-AG e GB-AL a formação foi similar durante todo experimento. Conclui-se que o -TCP® não foi capaz de contribuir para melhor regeneração óssea, apresentando desempenho inferior nos animais que consumiram álcool. / Chronic use of ethanol directly affects the biological process of bone repair, primarily by inhibition of osteoblastic cells. This may cause delayed consolidation or nonunion. Various natural and synthetic biomaterials have been used as alternatives to bone grafting. Synthetic biomaterials such as beta tricalcium phosphate (-TCP) are biocompatible, biodegradable, and osteoconductive, guiding osteoblastic cells and promoting bone formation. Thus, the objective was to evaluate the influence of chronic ethanol intake on the bone healing process of cranial defects treated with - TCP® compared to those filled with blood clot. Forty male rats were used (Rattus norvegicus), randomly divided into two groups: GAG received water as a liquid diet, and GAL received 25% ethanol. The GAL group was initially subjected to gradual adaptation to the alcohol and then maintained at 25% for 90 days. At the end of this period, all animals were submitted to experimental surgery. In the parietal bone of each animal, two cavities were prepared, 5.0 mm in diameter on the side of the sagittal suture, and the right parietal was filled with -TCP® and left to clot. Thus, the GAG and GAL groups were divided according to the filling of defects: GC-AG (Clot Water Group); GC-AL (Clot Alcohol Group); GB-AG (Biomaterial Water Group); and GB-AL (biomaterial Alcohol Group). The bone repair was observed according to the euthanasia period: 10; 20; 40; and 60 days after surgery. After a histological inclusion, the pieces were submitted to histomorphological and histomorphometric analysis. The histomorphological analysis was observed in the initial periods of all groups fibrous connective tissue filling the entire central area of the defect. The groups of defects filled with -TCP showed tissue reaction to particles surrounded by inflammatory cells. At the end of the period of analysis, it was observed that in all groups there was little bone formation, with the central area filled with fibrous connective tissue. In the GC-AL, GB-AG, and GB-AL groups there was evidence of less intense inflammatory reaction. In histomorphometric analysis regarding the influence of time in osteogenesis, the GC-AG and GC-AL groups had the same graphic profile in all periods except 60 days. In the GB-AG group there was a substantial increase of formation in every experiment, and in the GB-AL a small increase, but it was not significant. Regarding the influence of diet, there was a higher percentage of bone formation in the group that consumed water in the 40- and 60-day periods, and in the type of filling, increased formation in the periods of 20 and 40 days was observed in the GC-AG group. In the GB-AG and GB-AL groups, the formation was similar throughout the experiment. It is concluded that the -TCP® was not able to contribute to better bone regeneration, with underperformance in animals that consumed alcohol.

A deficiência óssea requer procedimentos restauradores como uso de enxertos e substitutos ósseos para a reabilitação estética e funcional. Com o desenvolvimento dos biomateriais, a biocerâmica à base de fosfato de cálcio tornou-se alternativa promissora para a recomposição de estruturas ósseas, entretanto não apresenta potencial de osteoindução. O material hidróxido de cálcio (Ca(OH)2) demonstra propriedades antibacterianas e capacidade de induzir a formação de tecido ósseo. O objetivo deste trabalho foi avaliar o processo de reparo ósseo proporcionado pelo BTCP e Ca(OH)2 , isolados e associados. Realizou-se experimento em tíbias posteriores de dezoito coelhos. Dois animais receberam marcadores ósseos para fluorescência (alizarina, calceína e tetraciclina), e para cada tíbia foi utilizado um tipo de material de preenchimento (BTCP, Ca(OH)2, BTCP com Ca(OH)2 e sangue como controle); sendo eutanasiados após 56 dias para a análise de fluorescência e histomorfometria. Os 16 coelhos restantes foram aleatoriamente selecionados para receber os quatro materiais de preenchimento. Estes foram eutanasiados nos tempos de 14, 28, 42 e 56 dias para a análise morfológica microscópica com coloração em hematoxilina e eosina. Observou-se formação óssea em todos os grupos, e os que utilizaram BTCP apresentaram atraso para o início da reparação. O sítio preenchido com sangue ocorreu apenas o reparo da estrutura lesada, consistindo na reconstituição da cortical óssea e tecido medular em 28 dias. Aos 56 dias, o grupo de BTCP com Ca(OH)2 apresentou maior formação de trabéculas no interior da tíbia. Na avaliação histomofométrica, o marcador calceína apresentou maiores valores de deposição óssea em relação à alizarina e tetraciclina. Conclui-se que os biomateriais BTCP e Ca(OH)2 estão diretamente envolvidos na formação de tecido ósseo no interior do defeito; a combinação do Ca(OH)2 com BTCP mostrou aumento do potencial de formação óssea; e houve maior deposição óssea no período entre quinta e sexta semana de reparação indicado pelo marcador calceína. / Insufficient bone volume requires restorative procedures such as use of grafts and bone substitutes for cosmetic and functional rehabilitation. The development of biomaterials made available bioceramic based on calcium phosphate that is showing to be promising alternatives for the restoration of bony structures, however it do not has osteoinductive potential. Calcium hydroxide (Ca(OH)2) shows antibacterial properties and induce bone tissue formation as well. The objective of this research was to evaluate the bone healing process promoted by BTCP and Ca(OH)2 isolated or conjugated. The experiment was conducted in posterior rabbit tibiae of 18 animais. Two animais received bone markers (alizarin, calcein, tetracycline) and each of their tibias received a type offiller material (BTCP, Ca(OH)2, BTCP plus Ca(OH)2 and blood as control group), being euthanized after 56 days for the histomorphometry and fluorescence analysis. The remaining 16 rabbits were randomly selected to receive one of the 4 filling materiais. These rabbits were euthanized on 14,28,42 and 56 days for the micromorphological analysis in hematoxylin and eosin slides. The bone formation was observed in ali groups, and who used BTCP had delay to the start of repair. The site filled with blood occurred only repair of the damaged structure, consisting of the reconstitution of the bone cortical and medullary tissue in 28 days. After 56 days, the BTCP group with Ca(OH)2 showed higher trabecular formation inside the tibia. In histomorfometric evaluation, the marker calcein had higher bone deposition values in relation to alizarin and tetracycline. It was concluded that the biomaterials BTCP and Ca(OH)2 are directly involved in the formation of bone tissue; the conjugation of Ca(OH)2 with BTCP increased bone formation potential; and there was greater bone deposition in the period between the fifth and sixth week of repairs indicated by calcein marker.