O Banco de Tecidos do Instituto de Ortopedia e Traumatologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo está desenvolvendo uma linha de estudos experimentais com o intuito de apresentar novos métodos de armazenamento de aloenxertos. Este estudo tem como objetivo comparar o método da criopreservação (- 80° C) com o da conservação em glicerol a 98% em temperatura ambiente. Foram analisadas tanto a capacidade de inibição de crescimento bacteriano e fúngico quanto às eventuais alterações histológicas. Para isso, foram estudadas 30 amostras de tecido ósseo trabecular coletadas de 10 pacientes submetidos à artroplastia total do quadril. Estas amostras foram divididas em três grupos de 10 espécimes, a saber: grupo controle, grupo criopreservado e grupo conservado em glicerol a 98% à temperatura ambiente. O período de armazenamento das amostras foi de um ano. Os resultados foram analisados estatisticamente pelo método de McNemar, com índice de significância de 0,10. No que diz respeito à preservação da matriz óssea, não houve variações significativas nos dois grupos estudados em relação ao grupo controle. Não ocorreu crescimento bacteriano ou de fungos nas amostras armazenadas durante um ano em glicerol a 98%. Por ser extremamente reduzido em relação à criopreservação, o custo do método da conservação em glicerol a 98% o indica para uso em Bancos de Tecidos de pequena monta. Contudo, são ainda necessários posteriores estudos sobre as propriedades biomecânicas, remoção do glicerol do tecido ósseo e o processo de integração biológica dos mesmos com o receptor. / The Tissue Bank of Instituto de Ortopedia e Traumatologia do Hospital das Clínicas da Universidade de São Paulo is developing a line of experimental studies with the intention to present new methods of allografts storage. This study has the objective to compare the method of cryopreservation (-80 ºC) with glycerol 98% preservation at room temperature. It even analyses, in such way, the inhibition capacity of bacterial and fungal growth and any eventual histological changes. For this, 30 samples of trabecular bone tissue have been collected from 10 patients submitted to total hip arthroplasty. These samples were separated in three groups of 10 specimens, as following: a control group, a cryopreserved group and a glycerol 98% preserved group at room temperature. They were stored during a period of one year. The results were analysed by the McNemar statistic method, with a significance of 0,10. Concerning to bone matrix, no significant changes occurred to the two studied groups compared to the control group. Bacterial and fungal growth do not occurred in the stored samples for one year in glycerol 98%. For being extremely reduced when compared with cryopreservation method, the preservation cost in glycerol 98% indicates its use on small sum tissue banks. However, posterior studies about biomechanical properties, glycerol removal of bone tissue and their biological process of integration with the receiver are necessary.

A deficiência óssea requer procedimentos restauradores como uso de enxertos e substitutos ósseos para a reabilitação estética e funcional. Com o desenvolvimento dos biomateriais, a biocerâmica à base de fosfato de cálcio tornou-se alternativa promissora para a recomposição de estruturas ósseas, entretanto não apresenta potencial de osteoindução. O material hidróxido de cálcio (Ca(OH)2) demonstra propriedades antibacterianas e capacidade de induzir a formação de tecido ósseo. O objetivo deste trabalho foi avaliar o processo de reparo ósseo proporcionado pelo BTCP e Ca(OH)2 , isolados e associados. Realizou-se experimento em tíbias posteriores de dezoito coelhos. Dois animais receberam marcadores ósseos para fluorescência (alizarina, calceína e tetraciclina), e para cada tíbia foi utilizado um tipo de material de preenchimento (BTCP, Ca(OH)2, BTCP com Ca(OH)2 e sangue como controle); sendo eutanasiados após 56 dias para a análise de fluorescência e histomorfometria. Os 16 coelhos restantes foram aleatoriamente selecionados para receber os quatro materiais de preenchimento. Estes foram eutanasiados nos tempos de 14, 28, 42 e 56 dias para a análise morfológica microscópica com coloração em hematoxilina e eosina. Observou-se formação óssea em todos os grupos, e os que utilizaram BTCP apresentaram atraso para o início da reparação. O sítio preenchido com sangue ocorreu apenas o reparo da estrutura lesada, consistindo na reconstituição da cortical óssea e tecido medular em 28 dias. Aos 56 dias, o grupo de BTCP com Ca(OH)2 apresentou maior formação de trabéculas no interior da tíbia. Na avaliação histomofométrica, o marcador calceína apresentou maiores valores de deposição óssea em relação à alizarina e tetraciclina. Conclui-se que os biomateriais BTCP e Ca(OH)2 estão diretamente envolvidos na formação de tecido ósseo no interior do defeito; a combinação do Ca(OH)2 com BTCP mostrou aumento do potencial de formação óssea; e houve maior deposição óssea no período entre quinta e sexta semana de reparação indicado pelo marcador calceína. / Insufficient bone volume requires restorative procedures such as use of grafts and bone substitutes for cosmetic and functional rehabilitation. The development of biomaterials made available bioceramic based on calcium phosphate that is showing to be promising alternatives for the restoration of bony structures, however it do not has osteoinductive potential. Calcium hydroxide (Ca(OH)2) shows antibacterial properties and induce bone tissue formation as well. The objective of this research was to evaluate the bone healing process promoted by BTCP and Ca(OH)2 isolated or conjugated. The experiment was conducted in posterior rabbit tibiae of 18 animais. Two animais received bone markers (alizarin, calcein, tetracycline) and each of their tibias received a type offiller material (BTCP, Ca(OH)2, BTCP plus Ca(OH)2 and blood as control group), being euthanized after 56 days for the histomorphometry and fluorescence analysis. The remaining 16 rabbits were randomly selected to receive one of the 4 filling materiais. These rabbits were euthanized on 14,28,42 and 56 days for the micromorphological analysis in hematoxylin and eosin slides. The bone formation was observed in ali groups, and who used BTCP had delay to the start of repair. The site filled with blood occurred only repair of the damaged structure, consisting of the reconstitution of the bone cortical and medullary tissue in 28 days. After 56 days, the BTCP group with Ca(OH)2 showed higher trabecular formation inside the tibia. In histomorfometric evaluation, the marker calcein had higher bone deposition values in relation to alizarin and tetracycline. It was concluded that the biomaterials BTCP and Ca(OH)2 are directly involved in the formation of bone tissue; the conjugation of Ca(OH)2 with BTCP increased bone formation potential; and there was greater bone deposition in the period between the fifth and sixth week of repairs indicated by calcein marker.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:04:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000407116-Texto+Completo-0.pdf: 4086224 bytes, checksum: 0d63db77cbcec70fa4573faaf2637eea (MD5) Previous issue date: 2008 / The stem cells have potential application to tissue regeneration or tissue engineering. Due to ethical and legal aspects alternative sources are being considered. Several researchers concentrate the studies on adult stem cells, mainly those derived of bone marrow stromal cells. Nevertheless, recent data proved that adult stem cells can also be isolated from adipose tissue (PLA) obtained by liposuction. These cells are able to differentiate into a diversity of mesodermal tissue and among them, bone tissue. The osteoinduction process depends on several factors and consists of mesenquimal stem cells differentiating into osteoprogenitor cells. Frequently, the osteoinduction culture media contains recombinant human bone morphogenetic protein (rhBMP-4) or DAG (dexamethasone, ascorbate acid and -glycerophosphate). This study aims to evaluate the adipose tissue derived stem cells adhesion, proliferation, differentiation into osteoblasts in vitro using either (rhBMP-4) or DAG. Adult stem cells derived from adipose tissue were obtained from three human subjects by liposuction realized by Plastic Surgery Service (Hospital São Lucas- PUCRS). After tissue dissociation by collagenase treatment, the cells were quantified, characterized with regard to cell membrane markers, and cultured in media containing rhBMP-4 or DAG, and control (only standard medium). The cultures were evaluated in 7, 14 and 21 days after induction. The expression of alkaline phosphate, osteopontin and osteocalcin were evaluated by PCR standard technique in cultured cells derived from adipose tissue obtained from two subjects. The expression of osteopontin and osteocalcin in one culture was determined by Real Time PCR technique. Moreover, alkaline phosphatase and von Kossa staining was performed to demonstrate the differentiation into mature osteoblasts by matrix mineralization. The average number of adult stem cells derived from adipose tissue was 1. 2x107/mL. The frequency of CD34 and CD117 markers were similar, 0. 73% and 0. 72% respectively. The frequency of CD105 was higher in the three samples. This study showed that the adult stem cells derived from adipose tissue cultivated or not in osteogenic media adheres and proliferates. Also, we demonstrate the presence of mature osteoblasts when cells were cultured in the presence of medium containing rhBMP-4 or DAG by the expression of osteogenic lineage markers such as alkaline phosphatase, osteopontin, and osteocalcin. Cells cultivated in media containing DAG have also shown deposition of bone matrix protein. / A aplicação de diferentes células-tronco na regeneração de tecidos lesionados ou na engenharia de tecidos tem recebido grande atenção. Devido às dificuldades práticas de obtenção de células-tronco embrionárias e considerando os aspectos éticos e legais, inúmeros pesquisadores têm realizado seus estudos com células-tronco adultas, principalmente aquelas derivadas do estroma da medula óssea. No entanto, estudos recentes comprovam que essa população celular também pode ser isolada do tecido adiposo (PLA) obtida através de lipoaspiração. Esse tipo de célula tem a característica de se diferenciar numa variedade de tecidos mesodérmicos, dentre eles o tecido ósseo. O processo de osteoindução é influenciado por vários fatores e consiste na indução de células-tronco mesenquimais indiferenciadas a formarem células osteoprogenitoras. Os fatores osteoindutores utilizados mais freqüentemente são a rhBMP-4 ou DAG (Dexametasona/ácido ascórbico/b-glicerolfosfato). Este estudo teve como objetivo avaliar a adesão, proliferação e diferenciação de células-tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo quando cultivadas em meio indutor específico, contendo rhBMP-4 ou DAG. Células-tronco adultas foram obtidas do tecido adiposo de três pacientes pela técnica de lipossucção, realizada pelo Serviço de Cirurgia Plástica do Hospital São Lucas da PUCRS. Após tratamento com colagenase para dissociação do tecido, as células foram quantificadas, caracterizadas com relação aos marcadores de membrana celular e cultivadas em meio contendo rhBMP-4, DAG ou convencional (controle). As culturas foram avaliadas no 7º, 14º e 21º dia após indução em meio específico.A expressão da fosfatase alcalina, osteopontina e osteocalcina foram avaliadas pela técnica de RT-PCR nas culturas de células derivadas do tecido adiposo de dois pacientes. A expressão das proteínas osteopontina e osteocalcina foi determinada pela técnica do PCR em tempo real em uma cultura de células derivada de um paciente. Igualmente, nesta mesma cultura foram realizada colorações para fosfatase alcalina e von Kossa para demonstrar a diferenciação das células-tronco mesenquimais (MSC) em células osteoblásticas pela detecção da transformação osteoblástica e mineralização da matriz. O número médio de células tronco adultas derivadas de tecido adiposo foi de 1,2 x 107/mL. A média da freqüência de expressão dos marcadores CD34 e CD117 foram semelhantes, 0,73% e 0,72%, respectivamente, embora tenha ocorrido uma grande variação entre as amostras. Para os marcadores CD45 e CD105 a média das freqüências foram de 1,17% e 1,57%, respectivamente. A freqüência do CD105 foi mais elevada nas três amostras. Este estudo mostrou que as células-tronco adultas derivadas de tecido adiposo cultivadas, ou não em meio osteogênico aderem e proliferam em cultura, sofrem osteoindução e expressam proteínas marcadoras da linhagem osteogênica como a fosfatase alcalina, osteocalcina e osteopontina. Células-tronco adultas derivadas de tecido adiposo são capazes de realizar a deposição de matriz mineralizada somente quando cultivadas em meio contendo DAG.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000413196-Texto+Parcial-0.pdf: 80871 bytes, checksum: c1dd2f33f2e72ef3b3458fdd98226248 (MD5) Previous issue date: 2009 / OBJECTIVE: To evaluate the in vitro cytotoxicity of poly (L-lactic acid), poly(urethanecaprolactone), poly (glycolic acid), poly (L-lactic acid-co-glycolic), nanofibers of poly (lactide) and in vivo biocompatibility of poly(urethane-caprolactone), as a possible biomaterial for bone and nervous regeneration. METHODS: In this study, was tested in vitro in cell culture of osteoblastic human alveolar bone to poly (L-lactic acid) and poly(urethane-caprolactone). The poly (glycolic acid) and the poly (L-lactic acid - co-glycolic) were tested in cell culture of odontoblastic line of mice (MDPC-23). The poly (lactide) nanofibers were tested in cell culture of fibroblasts of mice, NIH-3T3. The in vivo tests of poly(urethane-caprolactone) were performed in rats, which were separated into 5 groups, based in the time of observation, 7, 14, 30, 60 and 120 days of postoperative, in order to observe the reactions between the biomaterial and bone, nerve and dorsal tissues of the animal. Were performed analyses in light microscopy and scanning electron. RESULTS: The polymer PLLA, PGA, PLGA, and PCL-PU nanofibers of poly (lactide) showed cell viability above 85% in tests in vitro. In vivo tests showed that the PU-PCL is biocompatible and were partially absorbed in 60 days and with no undesirable reactions that could be attributed to the implant. CONCLUSIONS: The poly (L-lactic acid), poly (glycolic acid), poly (L-lactic acid-coglycolic), nanofibers of poly (lactide) and poly(urethane-caprolactone) polymers evaluated in this study showed very favorable results for its use as a biomaterial for applications in tissue replacement. / OBJETIVO: Avaliar a citotoxicidade in vitro do poli(ácido L-láctico), poli(uretanocaprolactona), poli(ácido glicólico),poli(L- ácido láctico-co-glicólico), nanofibras de poli(lactide) e a biocompatibilidade in vivo do poli(uretano-caprolactona), como possível biomaterial para regeneração óssea e nervosa. MÉTODOS: No presente trabalho, foi testado in vitro em cultura de células osteoblásticas de osso alveolar humano o poli(ácido L-láctico) e poli(uretanocaprolactona). O poli(ácido glicólico) e o poli(L- ácido láctico – co- glicólico) foram testados em cultura de células-tronco de linhagem odontoblástica de camundongos (MDPC-23). As nanofibras de poli(lactide) foram testadas em cultura de células de fibroblastos de camundongos, NIH-3T3. Os testes em vivo do poli(uretanocaprolactona) foram em ratos Wistar, separados em 5 grupos, referentes aos tempos de observação de 7, 14, 30, 60 e 120 dias pós-operatórias, a fim de se observar as reações entre este biomaterial e o tecido ósseo, nervoso e dorsal do animal. Foram feitas análises de microscopia óptica e eletrônica de varredura. RESULTADOS: Os polímeros PLLA, PGA, PLGA, PU-PCL e as nanofibras de poli(lactide) mostraram viabilidade celular superior a 85% nos testes in vitro. Nos testes in vivo, o PU-PCL foi biocompatível, parcialmente absorvido em 60 dias e com ausência de reações indesejáveis que pudessem ser atribuídas ao implante. CONCLUSÕES: Os polímeros poli(ácido L-láctico), poli(ácido glicólico), poli(ácido Lláctico- co-glicólico), nanofibras de poli(lactide) e o poli(uretano-caprolactona) avaliados neste estudo, apresentaram resultados bastante favoráveis para seu uso como biomaterial nas aplicações de substituição tecidual.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:56:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ArquivoTotalStela.pdf: 1718832 bytes, checksum: fcb910074921d64170b58b950c91c599 (MD5) Previous issue date: 2013-03-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aims to evaluate the effect of 0.5% (5mg/ml) and 1% (10mg/ml) alendronate sodium (ALN) associated or not with lyophilized bovine bone (Bio-Oss®) on the repair of calvaria bone defects in rabbits. Two bony defects, 10mm diameter circular, were created in 40 male New Zealand white rabbits. The animals were randomized into five (n = 8) groups: GI = Bio-Oss®; GII = Bio-Oss® + ALN 0.5%; GIII = Bio-Oss® + ALN 1%; GIV = ALN 0. 5%; GV = ALN 1%. The left defect was filled with the corresponding substance of each experimental group and the right defect was filled with autogenous blood clot (control). All cavities were lined and covered with a biological membrane. The animals were euthanized 30 and 60 days after craniotomy. The percentage of new bone formation was assessed by microradiographic analysis of calvaria. The images obtained were analyzed using the public domain program Image J®, to assess quantitatively the percentage of bone repair. The values obtained were analyzed using the software SPSS® Statistics, using descriptive statistics (mean, standard deviation and confidence intervals) and inferential ("t" - Student and ANOVA/Tukey). The intragroup results showed that in GI, GII and GIII the percentage of bone repair was significantly higher in the experimental side compared to their respective controls; and was not statistically difference in GIV and GV groups, between experimental and controls sides. The intergroup results showed the following percentage of repair at 30 days: GI = 61.91% (± 10.61), GII = 80.39 (± 8.68), GIII = 81.60% (± 5.42), GIV = 48.45% (± 6.54), GV = 41.45% (± 8.98) and at 60 days: GI = 83.23% (± 14.43), GII = 98.72% (± 2.54), GIII = 92.66% (± 9.22), GIV = 50.18% ( ± 3.03), GV = 37.46% (± 6.26). It is concluded that the addition of alendronate in concentrations of 0.5 and 1%, to lyophilized bovine bone, accelerate the process of bone repair, being more significant in lower concentration. The use of ALN alone delayed the process of bone repair, but without statistical significance. / A presente pesquisa teve como objetivo avaliar o efeito do alendronato de sódio (ALN), nas concentrações de 0,5 (5mg/ml) e 1% (10mg/ml), associadas ou não ao osso bovino liofolizado (Bio-Oss®), na reparação de defeitos ósseos produzidos em calvária de coelhos. Foram utilizados 40 coelhos machos brancos da raça Nova Zelândia. Na calvária de cada animal, foram confeccionados dois defeitos medindo 10 mm de diâmetro. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em cinco grupos (n=8 cada): GI = Bio-Oss®; GII = Bio-Oss®+ALN 0,5%; GIII = Bio-Oss®+ALN 1%; GIV = ALN 0,5%; GV = ALN 1%. A cavidade esquerda foi preenchida pela substância correspondente a cada grupo experimental e a cavidade direita preenchida por coágulo sanguíneo autógeno (controle de cada grupo). Todas as cavidades foram forradas e cobertas por membrana biológica. Os animais foram eutanasiados aos 30 e 60 dias após a craniotomia. O percentual de neoformação óssea foi avaliado por meio de análise radiomicrográfica da calvária. As imagens obtidas por radiomicrografia foram analisadas através do programa de domínio público Image J®, para avaliar quantitativamente o percentual de reparo ósseo. Os valores obtidos pelo Image J® foram submetidos à análise com auxílio do software SPSS® Statistics, por meio de estatística descritiva (média, desvio-padrão e intervalos de confiança) e inferencial (teste t Student e ANOVA/ Tukey). Na comparação intragrupos, os resultados demonstraram que nos grupos GI, GII e GIII o percentual de reparo foi significantemente mais elevado no lado experimental em relação aos respectivos controles; nos grupos GIV e GV não foram observadas diferenças estatisticamente significativas no percentual de reparo entre os lados experimental e controle. Na comparação intergrupos, os resultados mostraram os seguintes percentuais de reparo aos 30 dias: GI = 61,91% (± 10,61), GII = 80,39 (± 8,68), GIII = 81,60% (± 5,42), GIV = 48,45% (±± 6,54), GV = 41,45% (± 8,98). Aos 60 dias: GI = 83,23% (± 14,43), GII = 98,72% (± 2,54), GIII = 92,66% (± 9,22), GIV = 50,18% (± 3,03), GV = 37,46% (± 6,26). Conclui-se que a adição do ALN, nas concentrações de 0,5 e 1%, ao osso bovino liofilizado aplicado topicamente nos defeitos ósseos acelerou o processo de reparo ósseo, sendo mais significativo na menor concentração. O uso do ALN isoladamente retardou o processo de reparo ósseo, mas sem significância estatística.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-05T14:25:48Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 743716 bytes, checksum: 58ae3c6c0c86dd0630b89789ca61d3c6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-05T14:25:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 743716 bytes, checksum: 58ae3c6c0c86dd0630b89789ca61d3c6 (MD5) Previous issue date: 2001-01-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Foram utilizados 256 pintos de corte, de um dia , machos, Avian Farm, por um período de 14 dias, com peso médio inicial de 48,0 g, criados em baterias aquecidas com piso de tela elevado. O delineamento experimental foi um esquema fatorial inteiramente casualizado 2 x 4 ( 2 níveis de L-glutâmico x 4 níveis de vitamina K), consistindo de 8 tratamentos, 4 repetições de 8 aves cada. Os tratamentos consistiram de uma dieta básica purificada contendo todos os L- aminoácidos indispensáveis, minerais e vitaminas (exceto a Vit. K) suplementada com a combinação de 2 níveis (6,25 e 12,5 %) de L-glutâmico (L-Glu), com 4 níveis (0,02; 0,2 2,0 e 20,0 mg/kg de dieta) de vitamina K (Vit. K). Os animais receberam as dietas e água à vontade durante todo o período experimental de 14 dias. Para o estudo enzimático o período experimental foi estendido por mais uma semana totalizando 21 dias. Não foram observados efeitos significativos da interação L-Glu X Vit. K no desempenho dos animais e na composição química e bioquímica de tibiotarsos e fêmures. Os níveis de Vit. K não afetaram os parâmetros de desempenho, composição química e características físicas (comprimento e resistência) não afetando também os teores de Proteínas Totais (PT) dos tibiotarsos e fêmures. Os níveis de L-Glu não afetaram o consumo das aves, a resistência , a composição química e os teores de PT dos ossos. As aves alimentadas com dietas experimentais contendo 12,5% de L-Glu apresentaram maior ganho de peso (172 g), melhor conversão alimentar (1,51), menor incidência de problemas de pernas (26,8%), ossos maiores (fêmures, 36,8 mm e tibiotarsos, 51,5 mm), menores teores de proteínas não colagenosas (PNC) (3,16mg% tibiotarsos, e 3,23mg%, fêmures) e maiores teores de proteínas colagenosas (PC) (27,47mg%, tibiotarsos e 27,44 mg%, fêmures) do que aquelas alimentadas com dietas suplementadas com 6,25 % de L-Glu que apresentaram ganho de peso médio de 158g, conversão alimentar de 1,60, 100 % de incidência de problemas de pernas, tibiotarsos medindo 47,4 mm e fêmures 32,1 mm, teores de PNC de 4,03 mg% (tibiotarso) e 4,02 mg% (fêmur) e teores de PC de 26,60 mg% (tibiotarso) e 26,58 mg%, (fêmur). Observou-se efeito quadrático dos níveis de Vit. K nos teores de PNC e PC, sendo que para PNC o efeito foi decrescente e para PC crescente. Os animais alimentados com dietas suplementadas com 12,5% de L-Glu apresentaram maior espessura do osso compacto e maior diâmetro do canal medular, do que aqueles alimentados com 6,25% de L-Glu. As diferenças observadas entre os tratamentos em relação aos níveis de Vit. K não foram significativas. O menor comprimento médio do disco epifisário e alto nível de organização foi obtido com 12,5% de L-Glu, independente dos níveis de Vit. K. Em relação ao peso dos órgão e características histológicas do intestino delgado observou-se que o máximo de peso relativo para os órgãos (fígado, pâncreas e intestino) foi encontrado no 14 o dias de idade. O peso absoluto aumentou continuamente durante o período experimental e os parâmetros morfométricos (altura de vilo, profundidade de cripta e espessura de membrana) aumentaram com a idade. 0 perfil de enzimas digestivas apresentou- se da seguinte forma: as atividades de α-amilase e lipase tanto no quimo como no pâncreas, quando expressa por 100 g de peso corporal aumentaram com a idade. A atividade de tripsina no quimo não se alterou com a idade, e no pâncreas a maior atividade foi observada no 21 o dia de idade / In order to study the effects of L-glutamic (L-Glu) acid and vitamin K (Vit. K) on growth, leg abnormalities, bone biochemical and chemical composition, development of the digestive tract and activities of digestive enzymes, one experiment was conducted with 246 day old chicks, male, Avian Farm, fed purified L-aminoacid diets with two levels (6.25 and 12.5 %) of (L-Glu) combined with four levels (0.02; 0.2; 2.0 and 20.0 mg/kg of diet) of menadione sodium bisulfite (Vit. K). The trial was a 2 x 4 factorial in a completely randomized design using 4 replicates of 8 chicks each. Chicks were fed the experimental diets and water ad libitum from one to 14 days of age. For the study development of chick digestive tract and activities of digestive enzymes, the experimental period was from 1 to 21 days of age. No significant L-Glu X Vit. K interaction was observed on growth and biochemical and chemical composition and bone strenght of tibiotarsus and femur. No significant L-Glu X Vit. K interaction and no Vit. K effects were observed in the chick performance. Chicks fed 12.5 % showed higher weigth gains, better feed/gain rations and lower incidence of leg problems than those fed 6.25% L-Glu. Feed consumption was not affected by the levels of L-Glu. Chicks fed with 12.5 % de L-Glu and 2.0 mg of Vit. K/kg of diet showed the lowest leg abnormalities incidence (14.3 %). L-Glu, at 12.5 % level, improved performance and xireduced the incidence of leg problems. The data obtained confirmed that the dietary level of nonspecific ntrogen is important for the normal chick development. The ash, Ca, P and Mg contents, Ca:P ratio of the femur and tibiotarsus ash and bone strenght were not affected by the levels of L-Glu and Vit K studied. Chicks fed 12.5 % L-Glu had longer femur than those fed 6.25 % L-Glu. Based upon the data observed in this experiment, it appears that leg abnormalities of young chicks fed purified diets is not associated with the mineral contents of femur but, probably, could be relates with the organic matrix of the bone. Chicks fed 6,25 % de L-Glu showed higher levels of non collagen proteins (NCP) and lower contents de colagenous proteins (CP) in femur and tibiotarsus than those fed 12,5 % de L-Glu. It was observed quadratic effects of levels of vitamin K in the contents of NCP and CP of femur and tibiotarsus. Chicks fed 12.5 % L-Glu had longer length of compact bone and longer diameter of medular chanel than those fed 6.25 % de L-Glu. No Vit. K effects were observed on parameters studied. The lower lenght of epifhyseal growth plate and better plate organization level were observed with chicks fed 12.5 % of L-Glu independently of the Vit. K levels. Chicks fed 6.25 % of L-Glu and 0.2 mg of Vit. K/kg of diet showed presence of cartilage in the bone diafise. Examination of the morphology of the small intestine showed that morphometric values increased with age. The maximal relative weights of pancreas, liver and intestine were at 14 days of age. Absolute weights increased linearly during the experimental period. The results observed showed that specific activities of amylase and lipase of chymo were not changed among 14 and 21 day of age. But activities expressed per kg body weigth increased with age. Specific activities of trypsin did not change during the experimental period. But specific activites of trypsin per kg body weigth showed a maximum value at 21 st day and the activities on day 7 and 14 did not change. Specific activities of amylase of pancreas were higher at 14 th day than the other ages. Specific activities of lipase of pancreas were higher at hatching. Amylase and lipase activities per kg body weigth increased with age. Specific activities of trypsin of pancreas did not change during the experimental period. But when expressed per kg of body weigth, the maximal values were obtained at 14 th day. The activities on day 7 and 21 were similar.

Made available in DSpace on 2013-10-29T16:25:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000451617-Texto+Completo-0.pdf: 638194 bytes, checksum: f2470bb81322e6a32a3d10b371e1182b (MD5) Previous issue date: 2013 / Objective: To evaluate the histological changes of bone surface after insertion of mini-plates and screws in the bone surface. Material and methods: Eighteen rats of Wistar strain were used, a plate and two screws were inserted in the external cortex of the femur of each animal. The animals were divided into three groups of six animals each, after thirty days of completion of the procedure the implanted material was removed cirurgiacamente after euthanasia of animals, and the bone surface ready to be removed and analyzed histologically. Results: Histological evaluation after marking immunohistochemistry, Group 3, with different materials, showed an increased inflammatory infiltrate in uperfície area analyzed, which indicated a possible area of osteolysis. Groups 1 and 2 showed no statistically significant differences showing an increase of the standard normal reparative inflammation. Conclusions: The results of study indicated that the use of different materials increase the chance of encountering large areas of osteolysis in the bone surface in contact with these materials. / Objetivo: Avaliar as alterações histológicas da superfície óssea após a inserção de miniplacas e parafusos na superfície óssea. Materiais e métodos: Dezoito ratos, da linhagem Wistar, foram utilizados; Uma placa e dois parafusos de fixação foram inseridos na cortical externa do fêmur de cada animal. Os animais foram divididos em três grupos de seis animais cada, após trinta dias da realização do procedimento o material implantado foi removido cirurgicamente após a eutanásia dos animais, e a superfície óssea removida e preparada para ser analisadas histologicamente. Resultados: Na avaliação histológica, após a marcação imunohistoquímica, O grupo 3, com diferentes materiais, apresentou um aumento do infiltrado inflamatório na superfície de área analisada, que indicou uma possível osteólise da região. Os grupos 1 e 2 não apresentaram diferenças estatísticas significantes que demonstrassem um aumento do padrão normal de inflamação reparativa. Conclusões: Os resultados do trabalho indicam que o uso de diferentes materiais aumentam a possibilidade de ocorrer áreas de osteólise na superfície óssea em contato com esses materiais.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000397726-0.pdf: 6415316 bytes, checksum: 94e18040fb876738a7854d94d6e2b15c (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Osseous defects can be the result of pathologies, traumas and surgeries. Depending on its extension, the bone repair does not occur spontaneously therefore, fillings are necessary. Biomaterials have been a viable alternative as bone substitutes. Among them, emphasis is given on bioceramics due to their biocompatibility, atoxicity and osteoconduction properties. This study has comparatively analyzed two types of bioceramics, α- tricalcium phosphate (α-TCP) and β-tricalcium phosphate-HA (β-TCP/HA) inserted in critical osseous defects performed on 50 rat calvariae (Rattus norvegicus albinus, Wistar) male, adults, with an average body weight of 300 to 400 g. The animals were divided in two groups with 25 animals each: α- group and β/HA group. On the calvaria of each animal, two cavities were made measuring 4 mm of diameter each. The left cavity was filled with the correspondent material of each group and the right one was filled with autogenous bloodclot corresponding to the control group. The animals were sacrificed 7, 21, 60, 90 and 120 days after surgery. The parietal bones containing the cavities were removed and the parts were submitted to a histological processing by the HE technique. By using software Image Pro Plus 6. 2, a histomorphometric analysis was performed which allowed the measurement of the defect neoformed bone area in different observation periods. The results expressed in mean percentage of the defect area filled by the neoformed bone, in the α- TCP group were: 1,6% (+ 2,37) on day 7, 5,24% (+ 5,58) on day 21, 24% (+ 14,5) on day 60, 30,21% (+ 6,84) on day 90 and 50,59% (+ 5,42) on day 120. In the β - TCP/HA group, the results were 1,94% (+ 3,10) on day 7, 2,53% (+ 1,19) on day 21, 12,47% (+ 3,87) on day 60, 26,84% (+ 2,80) on day 90 and 38,82% (+ 8,76) on day 120 post-surgery. In the control group, the mean results were 0,15% on day 7, 10,12% on day 21, 15,10% on day 60, 18,94% on day 90 and 48,50% on day 120. The study concluded that the cements α-TCP e β-TCP/HA promote osteoconduction; the cement α-TCP is more biosoluble and presents a higher percentage of bone neoformation area, and the β-TCP/HA is reabsorbed more slowly promoting volume maintenance of the implanted area. / Os defeitos ósseos podem decorrer de fatores como patologias, traumas e cirurgias. Dependendo de sua extensão, o reparo ósseo não acontece de forma espontânea, necessitando o uso de enxertos. Os biomateriais têm sido uma alternativa viável como substitutos ósseos. Dentre eles, destacam-se as biocerâmicas pela sua biocompatibilidade, atoxicidade e propriedades osteocondutoras. Este estudo analisou comparativamente dois tipos de biocerâmicas, cimento de α-fosfato tricálcico (α−TCP) e grânulos de β-fosfato tricálcico-HA (β-TCP/HA), inseridas em defeitos ósseos críticos confeccionados em calotas cranianas de 50 ratos (Rattus norvegicus albinus, Wistar), machos, adultos, com peso corporal médio de 300 a 400g. Os animais foram divididos em dois grupos com 25 animais: grupo-α e grupo-β/HA. Na calota craniana de cada animal, foram confeccionadas duas cavidades medindo 4 mm de diâmetro cada. A cavidade esquerda foi preenchida pelo material correspondente de cada grupo e a cavidade direita foi preenchida por coágulo sangüíneo autógeno, correspondendo ao grupo controle. Os animais foram mortos aos 7, 21, 60, 90 e 120 dias de pós-operatório. Os ossos parietais contendo as cavidades foram removidos e as peças operatórias submetidas a processamento histológico pela técnica de HE. Com auxílio do software Image Pro Plus 6. 2, foi realizada análise histomorfométrica que permitiu mensurar a área de osso neoformado dos defeitos nos diferentes períodos de observação. Os resultados, expressos em porcentagem média de área do defeito preenchido por osso neoformado, no grupo α−TCP foram: 1,6% (+ 2,37) aos 7 dias, 5,24% (+ 5,58) aos 21 dias, 24% (+ 14,5) aos 60 dias, 30,21% (+ 6,84) aos 90 dias e 50,59% (+ 5,42) aos 120 dias. No grupo β−TCP/HA, os resultados foram de 1,94% (+ 3,10) aos 7 dias, 2,53% (+ 1,19) aos 21 dias, 12,47% (+ 3,87) aos 60 dias, 26,84% (+ 2,80) aos 90 dias e 38,82% (+ 8,76) aos 120 dias de pós-operatório. No grupo controle, as médias dos resultados foram de 0,15% aos 7 dias, 10,12% aos 21 dias, 15,10% aos 60 dias, 18,94% aos 90 dias e 48,50% aos 120 dias. Conclui-se que o cimento α-TCP e os grânulos β−TCP/HA promovem osteocondução; o cimento α-TCP é mais solúvel e apresenta maior porcentagem de área de neoformação óssea. Os grânulos β−TCP/HA são reabsorvidos mais lentamente, o que parece promover manutenção do volume da região implantada.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000428173-0.pdf: 3267525 bytes, checksum: 111e79e4715696d409dab4a83d48e6c0 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / OBJECTIVE: The aim of the present study was to assess histological alterations following the placement of miniplates and screws with different metal compositions. MATERIALS AND METHODS: Eighteen Wistar rats were divided into three groups of six animals. A miniplate and two screws were inserted on the external surface of the right femur of each animal. Six received a titanium plate and screws; six received a titanium plate and stainless steel screws; and six received a plate and screws coated with diamond-like carbon. The screws were five mm in length and inserted until the tips projected through the endosteal side. After 30 days, the miniplates and screws were removed and histological analysis was performed on the 0. 5-cm2 interface between the plate, screw and bone defect. RESULTS: A greater inflammatory process occurred in the group with different metal compositions (titanium and steel). In this same group, there was a greater presence of Howship lacunae, indicating possible osteolysis stemming from the onset of galvanic corrosion between the titanium and stainless steel. CONCLUSIONS: When using materials with different metal compositions in blood, the combination of stainless steel and titanium implants leads to a greater possibility of galvanic corrosion than when using components made from the same materials for fixation purposes. / OBJETIVO: Avaliar as alterações histológicas ósseas superficiais após a inserção de miniplacas e parafusos com diferentes composições metálicas. MATERIAL E METODOS: Dezoito ratos, da linhagem Wistar, foram utilizados. Uma miniplaca e dois parafusos foram inseridos na superfície externa do fêmur direito de cada animal. Todos os parafusos foram de 5,0 mm de comprimento e foram inseridos até as pontas serem projetadas pelo lado endosteal. Os animais foram divididos em três grupos com seis animais cada. Nos primeiros seis animais foram colocados uma placa e dois parafusos de titânio, em outros seis animais foram colocados uma placa de titânio e dois parafusos de aço inoxidável, e nos animais restantes foram colocados placa e parafuso revestido com Diamond-Like Carbon (DLC). Após 30 dias da realização do procedimento cirúrgico, as miniplacas e os parafusos foram retirados e foram feitas avaliações histológicas na interface placa parafuso no defeito ósseo, em uma extensão de 0,5 cm2.RESULTADOS: Na avaliação histológica observou-se um maior processo inflamatório no grupo com diferentes composições metálicas (Grupo titânio-aço)(p=0,204), como também uma maior presença de lacunas de Howship que indicam uma possível osteólise em decorrência de um ínicio de corrosão galvânica entre o titânio e o aço inoxidável (p=0. 002).CONCLUSÕES: Os resultados deste estudo indicam que, quando usamos diferentes materiais com diferentes composições metálicas, os componentes de implantes de aço inoxidável quando em associação com o titânio têm uma maior suscetibilidade à provocar osteólise do que quando se utilizam os mesmos componentes como materiais de fixação.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000422268-0.pdf: 14833302 bytes, checksum: 1b71642b280aa5b7984729b688fbd92e (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / This study examines histologically the effect of cement Calcium Phosphate (CFC) reinforced with nylon fibers, polypropylene and carbon used as implant supra-cortical femur of rats. We used 20 male Wistar rats, approximately 300g each. Being prepared plates CFC with fibers, on the size of 2mm thick and 6 mm in diameter, which were tightened in the femur of animals. These were euthanized at 30, 60, 90 and 120 days after the implant. These pieces were removed and subjected to a routine process for preparing slides slides, stained with Hematoxilyn and Eosin. The biocompatibility, the degree material’s resorption anda its ability to osteoconduction were evaluated at the different times. At all diferents times studied, the histological sections showed formation of dense tissue, few cellularized, showing slightly vascularized and discrete mononuclear infiltration. In the area around the implant, there are discrete reabsorption areas, and hyalinization induction of collagen fibers peripheral. The tissue includes the material of the implant. After 120 days, may be observed a formation of osteoid material. The degree of bone reabsorption in the periphery of the implant was less, and without statistical significance. Can be concluded that: The CFC with fiber is biocompatible promotes bone conduction and bone neoformation rounding the cement. CFC with fibers in the form of prefabricated plates is suitable for use as implants and bone substitute, within the parameters of this experiment. / Este estudo analisa histologicamente o efeito do Cimento de Fosfato de Cálcio (CFC) reforçado com fibras de náilon, carbono e polipropileno utilizado como implante supra-cortical em fêmur de ratos. Foram utilizados 20 ratos Wistar, machos, com cerca de 300g cada. Sendo confeccionadas placas de CFC com fibras, no tamanho de 2 mm de espessura por 6 mm de diâmetro, os quais foram aparafusados no fêmur dos animais. E estes foram eutanasiados em 30, 60, 90 e 120 dias após o implante sendo as peças removidas e submetidas ao processo de rotina para confecção de lâminas, coradas com Hematoxilina e Eosina. Foram avaliados nos diferentes tempos a biocompatibilidade, o grau de reabsorção do material e a sua capacidade de osteocondução. Em todos os tempos estudados os cortes histológicos revelam formação de tecido conjuntivo denso, pouco celularizado, apresentando discretamente vascularizado e discreto infiltrado inflamatório mononuclear. No entorno do implante, observam-se discretas áreas de reabsorção, e indução de hialinização das fibras colágenas periféricas. O tecido apresenta inclusão do material do implante. Aos 120 dias chama a atenção a formação de material osteóide, O grau de reabsorção óssea na periferia do implante foi menor não apresentando significância estatística. Podendo-se concluir que: O CFC com fibras é biocompatível, promove a osteocondução e neoformação óssea contornando o cimento. O CFC com fibras, na forma de placas pré-fabricadas é adequado para ser utilizado como implante e substituto ósseo, dentro dos parâmetros deste experimento.