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Análise morfofuncional do testículo da onça-pintada (Panthera onca) adulta / Morphofunctional analysis of adult jaguar testis (Panthera onca)

Azevedo, Maria Helena Ferreira de 31 March 2004 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 829087 bytes, checksum: 53a595f1be1470ef16a089fa9a53d992 (MD5) Previous issue date: 2004-03-31 / The present work proposed evaluating the organization of the components of the testes, the seminiferous epithelium cycle, the intrinsic yield of each fase of spermatogenic process, the testicular sperm reserve, as well as the correlations of these items with corporal and testicular biometric parameters.The medium corporal weight of the jaguar in the present experiment was 78,5 kg, of which about 0,034% are located in the testicular mass, and 0,022% specifically in the seminiferous tubules, which represented about 77,7% of the testicular parenchyma. The average diameter of seminiferous tubules in jaguars was 257 µm, and the average thickness of the seminiferous epithelium was about 90m. Jaguars have about 12,2 meters of seminiferous tubules by testicle gram. The general spermatogenic yield of the jaguar was about 23,4 cells and each Sertoli cell was able to sustain and to keep about 19,2 germ cells, 11 of which were round spermatides. In each seminiferous epithelium cycle about 166 million of spermatozoids were produced by testicle gram. In the jaguar the Leydig cells occupy an average 0,0036% of the corporeal weight and its average number by testicle gram is within the scope for most mammals: between 20 and 40 million. The obtained data supplied pertinent information about the spermatogenic process of this feline of the brazilian fauna, for subsidy to projects of conservation and protection of the wild life that involve reproduction programs. / O presente trabalho propôs avaliar a organização dos componentes do testículo, o ciclo do epitélio seminífero, o rendimento intrínseco de cada fase do processo espermatogênico, a reserva espermática testicular, bem como as correlações destes itens com parâmetros biométricos corporais e testiculares. O peso corporal médio das onças-pintadas do presente experimento foi de 78,5 kg, dos quais cerca de 0,034% são alocados em massa testicular e 0,022% especificamente em túbulos seminíferos, que representaram cerca de 77,7% do parênquima testicular. O diâmetro médio dos túbulos seminíferos em onça-pintada foi de 257μm, e a espessura média do epitélio seminífero foi de aproximadamente 90μm. A onça-pintada apresenta cerca de 12,2 metros de túbulo seminífero por grama de testículo. O rendimento geral da espermatogênese da onça-pintada foi de aproximadamente 23,4 células, e cada célula de Sertoli foi capaz de sustentar e manter aproximadamente 19,2 células da linhagem germinativa, das quais cerca de 11 são espermátides arredondadas. A cada ciclo do epitélio seminífero, cerca de 166 milhões de espermatozóides são produzidos por grama de testículo. Em onças-pintadas as células de Leydig ocupam em média 0,0036% do peso corporal e seu número médio por grama de testículo apresentou-se dentro da amplitude descrita para a maioria dos mamíferos, entre 20 e 40 milhões. Os dados obtidos fornecem informações pertinentes sobre o processo espermatogênico deste felino da fauna brasileira, para subsídio a projetos de conservação e proteção da vida silvestre que envolvam programas de reprodução.
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Efeitos da estimulação ultra-sônica sobre a espermatogênese de ratos pré-púberes e adultos: estudo experimental / Effects of the stimulation ultrasonic about for spermatogenesis of rats prepubertal and adult: experimental study

Ruberval Farias da Silva 02 March 2007 (has links)
Esta investigação tem a finalidade estudar experimentalmente os efeitos do ultra-som pulsado de baixa intensidade sobre a espermatogênese de ratos pré-púberes e adultos. Foram utilizados 40 ratos machos da raça Wistar, sendo 20 pré-púberes e 20 adultos, os quais tiveram os testículos estimulados por 15 minutos durante 10 dias consecutivos. Cada grupo experimental constou de 10 animais pré-púberes ou adultos, estimulados com o ultra-som pulsado de baixa intensidade ou não estimulados. Administrou-se Colchicina, 6 horas antes do sacrifício dos animais com a finalidade de bloquear a divisão das células em metáfase para facilitar a avaliação do ciclo espermatogenético. Mediante morfometria estimou-se as áreas dos túbulos seminíferos e fez-se a avaliação dos estadios do ciclo espermatogenético quando foi constatado um aumento significativo das áreas dos túbulos seminíferos dos animais estimulados. O ciclo espermatogenético de ratos pré-púberes e adultos foi avaliado mediante contagens de associações celulares do ciclo nos estadios VII e VIII e XIV, correspondentes ao fim e início de cada ciclo. Houve aumento temporal do ciclo espermatogenético por apresentar maior número de associações com características dos estadios VIII significando acentuada maturidade de espermatozóides nos ratos pré-púberes estimulados. Os testículos dos animais adultos estimulados apresentaram aumento de peso em relação aos dos controles, exibindo uma diferença significativa. Nossos resultados são compatíveis com a hipótese de que o ultra-som pulsado de baixa intensidade estimula o aumento do peso dos testículos dos ratos adultos e das áreas dos túbulos seminíferos, bem como acelerando o ciclo espermatogenético em ratos pré-púberes. / This is an experimental study of the effects of low intensity pulsed ultrasound on the spermatogenesis of prepubertal and adult male rats. Forty male Wistar rats - twenty prepubertal and twenty adults -, whose testicles were stimulated for fifteen minutes for ten consecutive days were studied. Each experimental group was composed of ten prepubertal or adult animals, stimulated with low intensity pulsed ultrasound or not. Six hours before killing, the rats were given Colchicine to block the division of metaphasic cells, in order to facilitate the assessment of the spermatogenetic cycle. The area of the seminiferous tubule was done estimated by morphometry and the stages of spermatogenetic cycle were assessed, showing a significant increase of the areas of the seminiferous tubules of the stimulated animals. The spermiogenesis of prepubertal and adult rats was assessed through counts of cell associations in the stages VII and VIII and XIV, corresponding to the end and beginning of each cycle. There was a temporal increase in the spermatogenetic cycle due to a higher number of the associations with stage VIII characteristics, which means accentuated sperm cell maturity of the stimulated prepubertal rats. The testicles of the stimulated animals were weight increase regarding the of the control animals, showing a significant difference. Our results are compatible with the hypothesis that the low intensity pulsed ultrasound stimulates the increase of the testicle weight, the rats adults, and the area of the seminiferous tubules as well as accelerating the spermatogenetic cycle in rats prepubertal.
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Efeitos combinados da exposição ao di-n-butil ftalato e à dieta hiperlipídica sobre a estrutura e função testicular de gerbilos adultos / Combined effects of exposure to di-n-butyl phthalate and to high-fat diet on testicular structure and function of adult gerbils

Negrin, Ana Carolina, 1988- 24 August 2018 (has links)
Orientador: Rejane Maira Góes / Texto em português e inglês / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-24T19:26:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Negrin_AnaCarolina_M.pdf: 3573186 bytes, checksum: 84ff9397d827717b776f6497a21bc510 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Desreguladores endócrinos (DE), como o di-n-butil ftalato (DBP), podem alterar o panorama dos hormônios esteroides ou sua ação, comprometendo o desenvolvimento testicular e a capacidade reprodutiva na vida adulta. Estudos toxicológicos mostram que ratos adultos, quando expostos a altas doses de ftalatos durante a fase de diferenciação sexual, exibem diversas anomalias reprodutivas, como agenesia do epidídimo e redução na produção diária de espermatozoides. Dados mostram que exposições a 2mg/kg/dia de DBP durante a gestação e a lactação são suficientes para prejudicar o desenvolvimento das células germinativas. Além disso, há relatos de que DE contrinuem para o aumento da adipogênese por causar alterações na sinalização celular de adipócitos. É conhecido que a obesidade masculina pode afetar a qualidade do sêmen e aumenta as taxas de infertilidade. Considerando que os ftalatos podem se acumular no tecido adiposo, ficamos interessados em avaliar os efeitos da exposição prolongada a baixas doses de DBP a as possíveis interferências do excesso de lipídeos na dieta para a função testicular e os parâmetros espermáticos de gerbilos adultos. Gerbilos fêmeas adultas, alimentadas com dieta balanceada (4% de lipídeos) ou hiperlipídica (20% de lipídeos) por oito semanas, foram acasaladas com machos normais. A prole masculina foi dividida em grupos controle (C), di-n-butil ftalato (Ph), dieta hiperlipídica (HF) e hieta hiperlipídica mais di-n-butil ftalato (HFPh). DBP (5 mg/kg/dia) foi administrado na água de beber às mães durante a gravidez e lactação e aos filhotes do desmame até a idade adulta (14 semanas). A resposta do testículo foi avaliada por meio de análises microscópicas e esterológicas, da sensibilidade de suas principais populações celulares a andrógenos e estrógenos, e da produção espermática. Também foram examinados os efeitos sobre a reserva espermática, o tempo de trânsito dos espermatozoides pelo epidídimo e a motilidade espermática. Isoladamente, baixas doses de DBP resultaram em obesidade e dislipidemia nos animais adultos. Nenhuma alteração foi observada na estrutura testicular, mas a síntese de estrógeno pelo testículo foi reduzida, resultando em tendência a diminuição na eficiência espermática. A redução no estrógeno intratesticular, após exposição ao DBP, foi acompanhada de um aumento de ~70% na expressão de ER? nos testículos, que pode ser uma resposta adaptativa aos baixos níveis deste hormônio. A ingestão crônica de dieta hiperlipídica não induziu os gerbilos adultos à obesidade, mas causou uma leve queda na eficiência espermática. Esta redução não está relacionada a alterações na estrutura testicular ou na sua capacidade esteroidogênica, mas podem estar ligadas ao comprometimento da sinalização testicular, já que foi verificada uma redução no conteúdo de AR. A exposição combinada à dieta hiperlipídica e a baixas doses de DBP atuaram sinérgica e negativamente na síntese de testosterona intratesticular, prejudicando a eficiência espermática e aumentando o tempo de trânsito dos espermatozoides pelo epidídimo. A motilidade espermática não sofreu alteração frente as exposições isoladas ou combinadas. Este estudo demonstrou que o ambiente nutricional pode interferir na resposta dos testículos frente aos ftalatos e proporciona novas informações para o entendimento das consequências da exposição aos DE para a redução na reverva espermática e fertlidade humana / Abstract: Endocrine disrupting chemicals (EDC), as di-n-butyl phthalate (DBP), can alter the scenary of steroid hormones or their action, impairing the testicular development and reproductive capacity in adulthood. Toxicological studies show that adult rats, when exposed to high doses of phthalates during sexual differentiation, exhibit several reproductive anomalies, such as agenesis of the epididymis and reduction in daily sperm production. Data show that exposures to 2mg/kg/day of DBP during gestation and lactation periods are enough to impair the development of the male germ cells. Furthermore, there are reports that EDC contribute to the increase of the adipogenesis by altering cell signaling of adipocytes and lipid metabolism. It is known that the male obesity can affect semen quality and increases infertility rates. Whereas that phthalates can accumulate in adipose tissue, we were interested in evaluating the effects of prolonged exposure to low doses of DBP and possible interferences of excess dietary fat for testicular function and spermatic parameters of adult gerbils. Adult female gerbils, fed high-fat (20% fat) or balanced diet (4% fat) for eight weeks, were mated with normal males. The male offspring was divided into control (C), di-n-butyl phthalate (Ph), high-fat diet (HF) and high-fat diet plus di-n-butyl phthalate (HFPh) groups. DBP (5 mg/kg/day) was administered in drinking water to pregnant and breastfeeding mothers and to offspring from weaning up to adulthood (14-week-old). Testis response was evaluated by means of microscopic and stereological analyses, sensitivity of its major cell populations to androgens and estrogens, steroidogenic capacity and spermatic efficiency. We also examined the effects on sperm reserves, sperm transit time through the epididymis and sperm motility. Alone, low doses of DBP resulted in obesity and dislipidemy at adulthood. No histological change was observed in testicular structure of these animals, but there was reduction in intratesticular estrogen synthtesis, resulting in a tendency to decrease in sperm production. The decrease in intratesticular estrogen after lifetime DBP exposure was accompanied by a ~70% increment in ER? content in the testis, that might be an adaptative response to low estrogen levels. Chronic intake of high-fat diet did not induce obesity in aldult gerbils, but led to a slight decrease in spermatic efficiency. This decrease was not associated with changes in testicular structure or steroidogenic capacity, because serum or intratesticular testosterone and estrogen concentrations were not altered, but it can be linked to an unbalanced in androgen receptor signaling, since it was observed a decrease in AR content. The combined exposure to high-fat diet and to low doses of DBP acted synergical and negatively on intratesticular testosterone synthesis, impairing the spermatic efficiency and increasing the sperm transit time. The sperm motility was not changed in isolated or combined exposures. This study demonstrated that fat nutritional environment may adversely affect the response of testes to phthalates, and provide new informations for understanding the consequences of exposures to ECD in decreasing human sperm counts and fertility / Mestrado / Biologia Celular / Mestra em Biologia Celular e Estrutural
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Atividade antioxidante do extrato NSE50 de 'Heteropterys tomentosa' (A. Juss.) em testículo de ratos Wistar / Antioxidant activity of Heteropterys tomentosa (A. Juss.) NSE50 extract in Wistar rats testis

Leite, Rodrigo Paula, 1981- 27 August 2018 (has links)
Orientadores: Mary Anne Heidi Dolder, Fernanda Ramos Gadelha, Mary Anne Heidi Dolder / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-27T11:14:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leite_RodrigoPaula_D.pdf: 2410216 bytes, checksum: 7bc6c22d763f8f597e6e6208e8d60e5f (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Heteropterys tomentosa A. Juss. é uma planta endêmica do cerrado brasileiro cuja raiz é popularmente utilizada como planta medicinal. O extrato vegetal é consumido de maneira rudimentar e sem qualquer forma de extração padronizada. No entanto, determinadas propriedades com potencial clínico são descritas na literatura para o extrato de H. tomentosa. Entre estas, expressiva atividade antioxidante in vivo, a qual poderia ser contribuir para os efeitos benéficos à saúde do composto. Portanto, propôs-se investigar neste trabalho os mecanismos antioxidantes do extrato de H. tomentosa em testículo de ratos Wistar submetidos a estresse oxidativo por cloreto de cádmio. Dois possíveis mecanismos bioquímicos foram considerados: capacidade de quelar íons de cádmio e de metais de transição, como ferro e cobre; capacidade de neutralizar espécies reativas de oxigênio. Os animais foram organizados em quatro grupos (n=5) e tradados durante 30 dias: Controle - ingestão ad libitum de água; Cd - ingestão ad libitum de solução aquosa de cloreto de cádmio [75mg/L]; Ht - uma injeção intraperitoneal diária do extrato vegetal NSE50 [50 mg/Kg Pc]; CdHt - ingestão ad libitum de solução aquosa de cloreto de cádmio [75mg/L] concomitantemente à injeção intraperitoneal diária do extrato vegetal NSE50 [50 mg/Kg Pc]. Ao término do tratamento, as amostras de testículo foram coletadas e submetidas a análises bioquímicas, estereológicas e histopatológicas. Os resultados demonstram que o extrato de H. tomentosa reduziu significativamente as taxas de peroxidação lipídica nos animais submetidos ao cádmio. As evidências sugerem que ambos os mecanismos antioxidantes inicialmente propostos estão envolvidos neste processo. Isto é, o extrato possui propriedades quelantes associadas à capacidade de neutralizar as EROs normalmente formadas após a exposição ao metal. Adicionalmente, os resultados acusam a presença de cádmio no testículo dos animais não expostos experimentalmente, provavelmente obtido através da ração comercial. Este cenário expõe um grave problema ambiental envolvendo a presença do metal na agricultura voltada para o consumo humano e, dessa forma, reforça os estudos populacionais que correlacionam exposição não ocupacional ao cádmio com diversas patologias idiopáticas / Abstract: Heteropterys tomentosa A. Juss. is an endemic Brazilian bush whose root is widely used as a medicinal plant. The plant extract is traditionally taken imbibed in alcohol and, therefore neither go through any standard extraction procedure nor has its active compounds identified. Nonetheless, the literature have reported some pharmacological properties with clinical potential for H. tomentosa root extract, such as a relevant in vivo antioxidant activity. Therefore, its health benefits could partially be attributed to the capacity of reducing the oxidative stress in the organism. For this reason, the aim of the present study is to shed light on the antioxidant mechanisms of H. tomentosa in Wistar rat testis undergoing cadmium induced lipid peroxidation. Two possible mechanisms have been investigated: the capacity of chelating cadmium and transitional metal ions, such as iron and copper; the capacity of ROS scavenging. Animal were set into four different groups (n=5) and submitted to different treatments for 30 days: Control - water ad libitum; Cd - water plus cadmium solution [75mg/L] ad libitum; Ht - daily intraperitoneal injection of NSE50 extract [50 mg/Kg Pc]; CdHt - water plus cadmium solution [75mg/L] ad libitum accompanied by a daily intraperitoneal injection of NSE50 extract [50 mg/Kg Pc]. At the end of the treatment, testis samples were collected and submitted to stereological, histopathological and biochemical analyses. The results showed a significant reduction in lipid peroxidation rates for the animals submitted to cadmium diet and simultaneously treated with the NSE50 extract. Our data indicates that two antioxidants mechanisms are employed by the plant extract: a cadmium chelating property and a ROS scavenging activity. In addition, results show the presence of cadmium in testis of control and Ht group, although they were not experimentally exposed to the metal. These animals are likely to have been contaminated through rat ration, mainly made from corn. This scenario exposes a current environmental issue involving agriculture for human consumption and, thus reinforces some epidemilogical studies correlating cadmium and several idiopathic pathologies / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural
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Repercussões da obesidade materna e/ou pós-natal sobre as células de Sertoli e a expressão de fatores parácrinos intratesticulares / Repercussions of maternal obesity and/or post natal on the Sertoli cells and the expression of paracrine factors intratesticula

Reame, Vanessa, 1988- 27 August 2018 (has links)
Orientadores: Rejane Maira Góes, Maria Etelvina Pinto Fochi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-27T12:07:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reame_Vanessa_M.pdf: 2703536 bytes, checksum: ca5e54abedb9ba4eb714ecc22d220f3a (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A obesidade está associada a vários prejuízos para a saúde, mas os efeitos sobre o sistema genital e reprodução masculina ainda são pouco compreendidos. Um estudo concluído recentemente em nosso laboratório comparou os efeitos do ambiente obesogênico (AO) em diferentes fases do desenvolvimento de ratos sobre a produção espermática na idade adulta. Todos os grupos expostos ao AO apresentaram prejuízos espermáticos. Para esclarecer esses achados, no presente trabalho, nós investigamos se os diferentes períodos de exposição ao AO resultaram em alterações funcionais nas células de Sertoli e modificaram permanentemente o ambiente parácrino intratesticular. Foram utilizados ratos Wistar adultos expostos à obesidade materna na gestação (O1), na gestação/ lactação (O2), ou sujeitos ao AO após desmame (O3), da lactação até a idade adulta (O4) ou da gestação até a idade adulta (O5) e grupo controle (C). A obesidade materna ou o AO foram induzidos por dieta com 20% de lipídeos (ração controle: 4% de lipídeos), por 15 semanas. As análises em microscopia de luz não mostraram alterações morfológicas nas células de Sertoli e no número dessas células expressando o receptor de andrógeno nos estágios VII e VIII do ciclo do epitélio seminífero. Entretanto, a percentagem de túbulos com descolamento prematuro de células germinativas foi acentuada em O5, moderada nos grupos O1, O2 e O3 e menor em O4. A testosterona sérica diminuiu 60% em O3 e O5, 27 % em O2, ~45% em O4 e não variou no O1. A dosagem de citocinas e de fator de crescimento, com o uso de ensaios multiplex, indicou aumento do TNF-'alfa' e a diminuição do FGF-2 no testículo dos grupos O1, O3 e O4, diminuição da IL-1'alfa' e IL-1'beta' no grupo O2, e diminuição da IL-1'alfa' no grupo O5. Nenhum grupo apresentou alteração para a IL-6. Adicionalmente, as análises por imunocitoquímica e por Western blotting mostraram que a expressão de conexina 43 diminuiu para o grupo exposto ao AO por toda a vida. As alterações no TNF-'alfa' e na IL-1'alfa1 pode ter aumentado a permeabilidade da barreira hematotesticular e juntamente com a queda na testosterona, podem explicar o descolamento de células germinativas e o prejuízo na eficiência e produção espermática. Esses dados indicam que o AO modula os fatores parácrinos testiculares de maneira diferencial, dependendo do período de exposição / Abstract: Obesity is associated with several health damage, but the effects on the reproductive system and male reproduction are still poorly understood. A study recently in our laboratory compared the effects of the obesogenic environment (OE) at different stages of development of rats on sperm production in adulthood. All the groups exposed to OE showed sperm damage. To clarify these findings in the present study, we investigated whether the different periods of exposure to OE resulted in functional changes in Sertoli cells and permanently changed the intratesticular paracrine environment. Wistar adult rats exposed to maternal obesity during pregnancy (O1), during pregnancy / lactation (O2), or subject to OE after weaning (O3), lactation to adulthood (O4) or from pregnancy to adulthood ( O5) and control group (C) were used. The maternal obesity or OE were induced by diet with 20% lipids (control diet: 4% lipid) for 15 weeks. The analysis by light microscopy showed no morphological changes in Sertoli cells and in the number of these cells expressing the androgen receptor in the seventh and eighth stages of the cycle of seminiferous epithelium. However, the percentage of tubules with premature separation of germ cells was accentuated in O5, moderate in groups O1, O2 and O3 and lower in O4. Serum testosterone decreased by 60% in O3 and O5, 27% in O2, ~ 45% in O4 and did not change in O1. The dosage of cytokines and growth factor with the use multiplex assays, showed an increase of TNF-'alpha' and the reduction of FGF-2 in the testis of groups O1, O3 and O4, reduced IL-1'alpha' and IL-1'beta' in O2 group, and decreased IL-1'alpha' in the O5 group. Neither group showed a change for IL-6. Additionally, analysis by immunocytochemistry and Western blotting showed that the expression of connexin 43 decreased to the group exposed to OE for all life. Changes in TNF-'alpha' and IL-1'alpha' may have increased the permeability of Blood-Testis barrier and along with the drop in testosterone may explain the detachment of germ cells and the loss in efficiency and sperm production. These data indicate that the OE modulates testicular paracrine factors differentially, depending on the exposure period / Mestrado / Biologia Celular / Mestra em Biologia Celular e Estrutural
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Caracterização, isolamento e cultura de espermatogônias primárias de curimbatá, Prochilodus lineatus (Valencienes, 1847). / Characterization, isolation and culture of primary spermatogonias of curimbatá, Prochilodus lineatus (Valencienes, 1847).

Gisele Cristiane de Melo Dias 20 March 2015 (has links)
Machos adultos de P. lineatus tiveram suas gônadas processadas de acordo com as rotinas de microscopia de luz e microscopia eletrônica de transmissão. Para a cultura de células, os testículos foram digeridos enzimaticamente, a suspensão testicular foi separada por gradiente descontínuo com Percoll seguido pelo plaqueamento diferencial por adesão e as células foram cultivadas. Foi realizado o método de enriquecimento das espermatogônias por citometria de fluxo. Os testículos apresentam as regiões anterior, média e posterior com distribuição semelhante dos tipos de células, e o diâmetro nuclear das células germinativas diminui significativamente durante a espermatogênese. As espermatogônias cultivadas por 15 dias com meio para proliferação celular resultaram em grandes aglomerados celulares que foram caracterizados com o anti-Vasa, anti-GFRa1 e anti-OCT4. As culturas que receberam o meio para diferenciação celular mostraram processo de proliferação lento das espermatogônias primárias comparado com a cultura que teve o meio indicado para proliferação celular. / Adult males of P. lineatus had their gonads used according routines of light microscopy and transmission electron microscopy. For cell culture, the testes were enzymatically digested; testicular suspension was separated by discontinuous gradient with Percoll followed by adhesion differential plating and the cells were cultured. The enrichment of the spermatogonia was carried by flow cytometry. The testes present three regions with similar distribution of cell types, and nuclear diameter of germ cells decreases significantly during spermatogenesis. The spermatogonia cultured for 15 days with medium for cell proliferation, resulted in large cell agglomerates which were characterized with the antibodies anti-Vasa, anti-GFRa1 and anti-anti-OCT4. The cultures that receiving medium for cell differentiation showed slow proliferation process of primary spermatogonia compared to cell culture medium suggestive for cell differentiation.
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Avaliação histopatológica e caracterização morfométrica testicular e epididimária em cães adultos sem raça definida (SRD) /

Thomé, Helder Esteves. January 2006 (has links)
Orientador: Enio Pedone Bandarra / Banca: Renee Laufer Amorim / Banca: Veridiana Maria Dignani de Moura / Resumo: Pouco se conhece sobre a ocorrência de alterações testiculares e epididimárias nos cães nas diferentes regiões do país e sua influência sobre a fertilidade na espécie canina, assim como sobre as características morfométricas destes órgãos em cães sem raça definida (srd). Com o intuito de acrescentar dados à literatura buscou-se determinar a incidência de alterações histopatológicas testiculares e epididimárias em cães srd, bem como estabelecer o padrão morfométrico destes órgãos e suas possíveis correlações com porte dos animais, peso, volume e dimensões dos órgãos. Para tal, colheram-se testículos e epidídimos de 60 cães adultos oriundos de campanha de castração e do Centro de Controle de Zoonoses, subdivididos em três grupos, sendo 28 animais de pequeno porte (até 10Kg), 18 de médio porte (de 10 a 20Kg) e 14 de grande porte (acima de 20Kg). Na avaliação microscópica dos 120 testículos observou-se a ocorrência de 107 casos de degeneração, 89 de atrofia tubular, 16 de hipoplasia, seis de orquite, três de leydigocitoma, dois normais, um caso de sertolioma e um de edema. Na avaliação epididimária observaram-se 55 epidídimos normais, 36 casos de epididimite, 22 de hiperplasia epitelial papilar, 14 de degeneração, 12 de cistos, três de fibrose, um de edema, um de adenomiose e um de granuloma espermático. Foram utilizados animais srd, devido ao predomínio destes na população canina brasileira, e os resultados, além de determinarem as características reprodutivas dos SRD, servirão para efeitos comparativos em relação aos dados existentes em animais de raça pura. / Abstract: Issues like testicles and epididymis changes and their influence on canine fertility are insufficient on current literature, as well as morphometric features on mongreel dogs organs. The aim of this work was to determine the incidence of testicles and epididymis histopathological changes and establish a morphometric standart of these organs with possible correlation with animals weight, breed, organs volume and dimension. Sixty adult dogs from castration campaing and Zoonosis Control Center were used and divided in: 28 animals up to 10 kg (small breed), 18 medial breed animals (from 10 to 20 kg) and 14 large breed dogs (above 20 kg). One hundred and twenty testicles were analyzed on microscopic evaluation and were diagnosed the occurrence of 107 degeneration, 89 tubular atrophy, 16 hypoplasia, 6 orquitis, 3 leydig cell tumor, 2 normal, 1 Sertoli cell tumor case and 1 edema. On epididymics evaluation were observed 55 normal epididymis, 36 epididymitis cases, 22 papilar epididymal hyperplasia, 14 degeneration, 12 cysts, 3 fibrosis, 1 swelling, 1 adenomyosis and 1 espermatic granuloma. Were used mongreel animals on this study, due to the prevalence of them in Brazilian canine population, and the results, besides reproductive feature determination, will serve to comparative effects for pure breed animals database. / Mestre
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Alterações morfológicas e hormonais das gônadas e da hipófise da garoupa Epinephelus marginatus (Teleostei: Serranidae) durante a inversão sexual / Morphological and hormonal alterations in the gonads and pituitary of the dusky grouper Epinephelus marginatus (Teleostei: Serranidae) during the sex inversion

Rodrigues Filho, Jandyr de Almeida 14 May 2010 (has links)
A inversão do sexo em peixes hermafroditas sequenciais (protândricos ou protogínicos) ocorre em decorrência de diversos fatores, dentre eles, fisiológicos, genéticos, podendo ser ainda decorrência do comportamento social. Nos peixes hermafroditas marinhos as alterações sexuais são acompanhadas por alterações anátomo-funcionais das gônadas, coloração e comportamento dos animais. A espécie Epinephelus marginatus (garoupa verdadeira), serranídeo da fauna nativa e amplamente difundida no litoral brasileiro, é um hermafrodita protogínico que apresenta dificuldade na manutenção de indivíduos do sexo masculino em seus cardumes e, além disso, encontra-se na lista de espécies sobreexplotadas. Utilizando-se técnicas de inversão sexual induzida, em cativeiro, para a obtenção de machos, este trabalho teve como objetivo estudar as alterações de alguns tecidos endócrinos durante o processo de inversão sexual, utilizando tratamentos com inibidores de aromatase (AI) e metiltestosterona (MT) em animais jovens. Ao longo de 90 dias de experimento a utilização do AI e do MT promoveu uma aparente desorganização da arquitetura gonadal padrão, massiva degeneração das células germinativas femininas, surgimento de centros melanomacrofágicos, proliferação de estruturas associadas ao sexo masculino (tecido intersticial e células germinativas masculinas) e a maturação das células germinativas masculinas. A utilização do andrógeno sintético MT (sozinho ou combinado com AI) possibilitou a obtenção de gônadas em fases mais avançadas de espermatogênese, inclusive a fase de espermiogênese inicial, com redução significativa dos valores do índice gonadossomático (IGS). Já com a utilização do AI foram encontradas gônadas em processos de intersexo mais clássicos após 90 dias experimentais. As análises de imunomarcação das células gonadotrópicas hipofisárias foram viáveis utilizando-se anticorpos de salmão e os resultados mostraram que as células produtoras de FSH (hormônio folículo-estimulante) e LH (hormônio luteinizante) distribuem-se pela proximal pars distalis e pars intermedia da adenohipófise. Os resultados obtidos com as análises imunohistoquímicas da hipófise demonstraram uma marcação de pouca intensidade utilizando-se o anticorpo anti-βFSH no grupo tratado com AI após 90 dias. A análise dos esteróides gonadais mostrou que nos animais tratados com AI, não houve diminuição na concentração do estradiol aos 90 dias, desta forma a alça de feedback negativo provavelmente foi acionada, e a produção de FSH diminuiu, causando o aumento da concentração plasmática de 11 cetotestosterona (11 KT) (via ação do LH). Já nos grupos onde o MT foi administrado, houve uma diminuição na concentração de estradiol após o tratamento, causando possivelmente uma menor intensidade na alça de feedback negativo na hipófise, sendo a ação do andrógeno sintético mais efetiva na espermiogênese nestes animais. As análises das gônadas e da hipófise sugerem a atuação do FSH no início da transição do sexo, sendo proposta a liberação desta glicoproteína como o gatilho para a inversão sexual em hermafroditas protogínicos. Estudos mais detalhados ao longo dos 90 dias de transição gonadal em E. marginatus precisam ser realizados para constatar o real envolvimento do FSH na inversão do sexo e verificar se a liberação do LH estaria envolvida com a produção de 11-ceto-testosterona, a espermiogênese completa e espermiação / The sex inversion in sequential hermaphrodite fish (protandrous or protogynous) occurs due to several factors, including physiological, genetics, and also can be associated with the social behavior. In marine hermaphrodite fish, the sex alterations are followed by anatomic and functional alterations in the gonads, color patterns and animal behavior. The species Epinephelus marginatus (dusky grouper), a native serranid and broadly distributed in the Brazilian coast, is a protogynous with problems in maintaining males in the shoal and, additionally, this species is part of the overexploited marine fish red list. Induction of sex change, in captivity, using aromatase inhibitors (AI) and 17α-methyltestosterone (MT) has been conducted with the purpose to study the morphophysiological alteration in some endocrine tissues in juveniles. During 90 experimental days, the use of AI and MT promoted an apparent disorganization of the standard gonad architecture, a massive degeneration of the female germ cells, the appearance of melanomacrophagic centers, a proliferation of the structures associated with the male sex (interstitial tissue and male germ cells) and the maturation of male germ cells. The use of the synthetic androgen, MT (alone or combined with AI) allowed the obtaining of gonads in a more advanced spermatogenesis phase, including an initial spermiogenesis phase, with a significant reduction of gonadossomatic index (GSI). With the use of AI, the gonads were found in a more classic intersex process after 90 days of experiment. The immunostaining analysis of the gonadotropic cells were viable using salmon antibodies and the results showed that FSH and LH cells were distributed in proximal pars distalis and pars intermedia in adenohypophysis. The immunohistochemistry analysis of the pituitary showed a low intensity of staining with the anti-βFSH in the AI group, after 90 experimental days. The analysis of the gonad steroids showed that in the animals from the AI group, there was no decrease in estradiol levels after 90 days, so the negative feedback loop probably was activated, the FSH secretion decreased, allowing the increase of plasma 11- ketotestosterone (11KT) (through LH action). In the MT groups there was a decrease in plasma estradiol, what probably decreased the intensity of the negative feedback loop in the pituitary, and in this case, the action of the synthetic androgen was predominant in spermiogenesis. The analysis of the gonads and pituitary suggest the action of FSH in the beginning of the sex transition, with the proposal that this glycoprotein acts triggering the sex inversion in protogynous hermaphrodites. We suggest that more detailed studies during the 90 days of gonad transition in E. marginatus must be done in order to find the real involvement of FSH in sex inversion and to elucidate the actual role of LH with 11KT production, the full spermiogenesis and spermiation
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Efeitos da estimulação ultra-sônica sobre a espermatogênese de ratos pré-púberes e adultos: estudo experimental / Effects of the stimulation ultrasonic about for spermatogenesis of rats prepubertal and adult: experimental study

Silva, Ruberval Farias da 02 March 2007 (has links)
Esta investigação tem a finalidade estudar experimentalmente os efeitos do ultra-som pulsado de baixa intensidade sobre a espermatogênese de ratos pré-púberes e adultos. Foram utilizados 40 ratos machos da raça Wistar, sendo 20 pré-púberes e 20 adultos, os quais tiveram os testículos estimulados por 15 minutos durante 10 dias consecutivos. Cada grupo experimental constou de 10 animais pré-púberes ou adultos, estimulados com o ultra-som pulsado de baixa intensidade ou não estimulados. Administrou-se Colchicina, 6 horas antes do sacrifício dos animais com a finalidade de bloquear a divisão das células em metáfase para facilitar a avaliação do ciclo espermatogenético. Mediante morfometria estimou-se as áreas dos túbulos seminíferos e fez-se a avaliação dos estadios do ciclo espermatogenético quando foi constatado um aumento significativo das áreas dos túbulos seminíferos dos animais estimulados. O ciclo espermatogenético de ratos pré-púberes e adultos foi avaliado mediante contagens de associações celulares do ciclo nos estadios VII e VIII e XIV, correspondentes ao fim e início de cada ciclo. Houve aumento temporal do ciclo espermatogenético por apresentar maior número de associações com características dos estadios VIII significando acentuada maturidade de espermatozóides nos ratos pré-púberes estimulados. Os testículos dos animais adultos estimulados apresentaram aumento de peso em relação aos dos controles, exibindo uma diferença significativa. Nossos resultados são compatíveis com a hipótese de que o ultra-som pulsado de baixa intensidade estimula o aumento do peso dos testículos dos ratos adultos e das áreas dos túbulos seminíferos, bem como acelerando o ciclo espermatogenético em ratos pré-púberes. / This is an experimental study of the effects of low intensity pulsed ultrasound on the spermatogenesis of prepubertal and adult male rats. Forty male Wistar rats - twenty prepubertal and twenty adults -, whose testicles were stimulated for fifteen minutes for ten consecutive days were studied. Each experimental group was composed of ten prepubertal or adult animals, stimulated with low intensity pulsed ultrasound or not. Six hours before killing, the rats were given Colchicine to block the division of metaphasic cells, in order to facilitate the assessment of the spermatogenetic cycle. The area of the seminiferous tubule was done estimated by morphometry and the stages of spermatogenetic cycle were assessed, showing a significant increase of the areas of the seminiferous tubules of the stimulated animals. The spermiogenesis of prepubertal and adult rats was assessed through counts of cell associations in the stages VII and VIII and XIV, corresponding to the end and beginning of each cycle. There was a temporal increase in the spermatogenetic cycle due to a higher number of the associations with stage VIII characteristics, which means accentuated sperm cell maturity of the stimulated prepubertal rats. The testicles of the stimulated animals were weight increase regarding the of the control animals, showing a significant difference. Our results are compatible with the hypothesis that the low intensity pulsed ultrasound stimulates the increase of the testicle weight, the rats adults, and the area of the seminiferous tubules as well as accelerating the spermatogenetic cycle in rats prepubertal.
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Efeitos do ciclamato de sódio sobre o testículo fetal de ratos: estudo morfométrico.

Santos, Vera Lúcia Fugita dos 31 October 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2016-01-26T12:51:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 veraluciafugitadossantos_tese.pdf: 270025 bytes, checksum: 8c9d7e6ebc77bbe636dd22a57632946e (MD5) Previous issue date: 2006-10-31 / Objective: To evaluate the effects of sodium cyclamate on fetal growth and on testicular cells of rat fetuses treated during embryogenesis. Method: From the tenth to the thirteenth day of pregnancy, 50 mg/Kg sodium cyclamate was administered via intraperitoneally in rats participating in the Treated Group. An equal volume of distilled water was similarly administered to rats of a Control Group. The fetuses were removed on the twentieth day by laparotomy, when 5 fetuses were randomly selected from the both Treated and Control Groups. Using karyometry, the nuclear parameters of the testicular cells were evaluated in respect to gonocytes, Sertoli cells and Leydig cells. Results: The mean fetal and placental weights of the animals from the Treated Group were lower than those of the Control Group, with a similar result seen in respect to the length of the umbilical cord. No changes were seen in the nuclei of the gonocytes. In relation to the Sertoli cells, differences were observed in the lowest diameter, mean diameter, volume, area, volume:area ratio and perimeter. No nuclear alterations were identified in the Leydig cells. Conclusions: This study identified alterations in fetal growth and in the testicular cells of rat fetuses caused by the administration of sodium cyclamate during the gestational period. / Objetivo: Avaliar os efeitos do ciclamato de sódio sobre o crescimento fetal e nas células testiculares de fetos de ratas tratadas durante a embriogênese. Método: Do décimo ao décimo terceiro dia de prenhez, foi administrado por via intraperitoneal, 50 mg/Kg de ciclamato de sódio nas ratas participantes do grupo tratado e, pela mesma via, igual volume de água destilada nas ratas do grupo controle. A laparotomia para a retirada dos fetos foi realizada no vigésimo dia da gestação, onde foram selecionados aleatoriamente cinco fetos das ratas tratadas e cinco das ratas controle. Por meio da cariometria, foi realizada a avaliação dos parâmetros nucleares de células testiculares dos fetos: gonócitos, células de Sertoli e células de Leydig. Resultados: As médias dos pesos fetal e placentário dos animais componentes do grupo tratado foram menores que os do grupo controle; sendo o mesmo resultado observado para o comprimento do cordão umbilical. Nos núcleos dos gonócitos não foram verificadas alterações. Nas células de Sertoli as modificações foram notadas nos seguintes parâmetros nucleares: diâmetro menor, diâmetro médio, volume, área, relação volume/área e no perímetro. Nas células de Leydig não foram registradas alterações nucleares. Conclusões: O desenvolvimento desta pesquisa possibilitou a observação de alterações no crescimento fetal e células testiculares de fetos de ratas, causadas pelo uso de ciclamato de sódio durante o período gestacional.

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