Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2008. / Submitted by Kelly Marques (pereira.kelly@gmail.com) on 2009-11-13T18:46:28Z No. of bitstreams: 1 Dissert_AnaElizabethOliveiraAraujo.pdf: 688497 bytes, checksum: 33d29680404575512250d741564841f1 (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2009-12-23T17:17:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissert_AnaElizabethOliveiraAraujo.pdf: 688497 bytes, checksum: 33d29680404575512250d741564841f1 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-12-23T17:17:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissert_AnaElizabethOliveiraAraujo.pdf: 688497 bytes, checksum: 33d29680404575512250d741564841f1 (MD5) Previous issue date: 2008-02 / Os gases derivados do petroleo sao conhecidos por causar danos a saude das pessoas expostas ocupacionalmente, de modo cronico ou agudo. Funcionarios do Laboratorio de Controle de Qualidade dos Combustiveis, da Agencia Nacional do Petroleo-ANP, situada em Brasilia (Brasil), estao expostos a varias substancias quimicas, pois realizam analises para o controle de qualidade nas amostras dos combustiveis coletadas nos 306 postos de abastecimento do Distrito federal. Os monitoramentos citogeneticos desses trabalhadores foram realizados nos linfocitos retirados do sangue periferico e nas celulas esfoliadas da bexiga, extraidas da urina. A frequencia de aberracoes cromossomicas nos linfocitos e a quantidade de micronucleos nas celulas esfoliadas da bexiga foram utilizadas como biomarcadores para analisar o risco genotoxico. Como resultado, observamos aumentos significantes desses biomarcadores, tanto no sangue como na urina, indicando que a exposicao ocupacional aos derivados do petroleo pode estar envolvida nessas alteracoes citogeneticas encontradas. Dentre todas as substancias presentes no petroleo e seus derivados, a fracao benzeno, tolueno e xileno (BTX) e bastante volatil e toxicologicamente mais perigosa ao homem, com riscos conhecidos de carcinogenese. Observou-se tambem uma correlacao direta entre o numero de aberracoes cromossomicas e a frequencia de micronucleo no grupo exposto (r = 0,74). _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / It is well-known that vapours from petroleum derivates, specially aromatic compounds such as benzene, toluene and xilene, known as BTX fraction can be hazardous to human health. Chronic and acute exposure to petroleum derivative vapours are associated with several haematological disturbances. This study was carried out in a group of 21 individuals occupationally exposed to petroleum derivative vapours in a Laboratory of Quality Control from the brazilian government. Blood and urine samples were used to analyse chromosome aberration in lymphocytes cells and micronuclei in exfoliated cells from urinary bladder respectively. These results were compared with a control group of 10 non-exposed individuals working in office. Chromosome aberrations and micronuclei frequencies were statistically increased (P < 0.05) in the exposed group. A positive relationship was found between chromosome aberration and micronuclei in the exposed group (r = 0,74).

Dissertação (mestrado)-Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2011 / Submitted by Jadiana Paiva Dantas (jadi@bce.unb.br) on 2011-07-07T00:18:56Z No. of bitstreams: 1 2011_FagnerNevesOliveira.pdf: 6604665 bytes, checksum: 83446b3563aee26adcf024e43f3ad2cf (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-07-08T14:13:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_FagnerNevesOliveira.pdf: 6604665 bytes, checksum: 83446b3563aee26adcf024e43f3ad2cf (MD5) / Made available in DSpace on 2011-07-08T14:13:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_FagnerNevesOliveira.pdf: 6604665 bytes, checksum: 83446b3563aee26adcf024e43f3ad2cf (MD5) / O escorpião Tityus serrulatus, espécie endêmica do Brasil, é responsável pelos acidentes mais graves frequentemente registrados no país, particularmente na região Sudeste. A principal causa de morte por este agravo é o edema pulmonar agudo (EPA). A incidência desta espécie no DF tem aumentado, porém, não existem registros de escorpionismo grave nesta região. Diante disso, os objetivos do presente trabalho foram avaliar a toxicidade da peçonha de T. serrulatus do DF (TS-DF), por meio da avaliação da DL50 e das alterações induzidas pela peçonha em camundongos; avaliar a capacidade de indução de EPA em ratos por meio da relação entre a massa úmida do pulmão e a massa corpórea de ratos tratados e não tratados com peçonha; avaliar a permeabilidade vascular pulmonar (PVP), utilizando o protocolo de azul de Evans (AE); realizar análises histológicas do pulmão e do coração dos animais experimentados; e determinar as dosagens séricas de CK e CK-MB, além da contagem total de leucócitos no lavado bronco-aveolar (LBA) dos ratos. Todos esses ensaios foram também conduzidos com a peçonha de T. serrulatus de MG (TS-MG) para fins de comparação. A peçonha de TS-DF apresentou-se duas vezes menos tóxica a camundongos (51,6 ?g/kg) que a peçonha de TS-MG (26 ?g/kg). Foi verificado um aumento significativo na relação massa úmida dos pulmões / massa corpórea e um aumento na PVP nos ratos do grupo TS-MG (p> 0,001) em relação ao controle e ao TS-DF, sendo que, entre esses dois últimos grupos, essas diferenças não foram observadas (p <0,05). As análises histológicas mostraram EPA intra-alveolar multifocal apenas em animais do grupo TS-MG. Os tecidos cardíacos de todos os animais apresentaram-se normais. No entanto, as dosagens séricas de CK e CK-MB e a quantidade de leucócitos encontrados no LBA foram maiores apenas nos animais do grupo TS-MG (p>0.05). Os perfis cromatográficos obtidos para as peçonhas de T. serrulatus das duas populações estudadas foram qualitativamente semelhantes. Algumas diferenças quantitativas foram observadas e podem explicar as diferenças na toxicidade e nas atividades biológicas dessas peçonhas. Assim, a peçonha de TS-DF é duas vezes menos tóxica a camundongos que a peçonha de TS-MG e não é capaz de induzir EPA em ratos, ao contrário do que é observado para a peçonha de TS-MG. É possível que a peçonha de TS-DF possua uma menor quantidade de peptídeos que atuam em canais para Na+, que são considerados os principais responsáveis pela maioria dos sintomas apresentados no escorpionismo. Estes resultados corroboram com os sintomas descritos para o escorpionismo no DF causado por esta espécie de escorpião e confirmam a variação na peçonha das duas populações estudadas.

Orientador: Nora Marcela Haun Quiros / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T21:19:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Massai_LelioRonaldo_M.pdf: 8207256 bytes, checksum: d47d72af0dfbae4a6c775ac49bcded7d (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Muitos métodos - físicos, químicos e biológicos - têm sido testados na redução da poluição dos efluentes Kraft. E mesmo a tecnologia da reciclagem das águas de processo, que reduz consideravelmente o volume do efluente produzido está sendo muito estudado, contudo a reciclagem parcial utilizada na indústria não reduz necessariamente a emissão de resíduos tóxicos, a menos que se consiga zero de descartes de efluente. Muitos dos compostos formados durante o branqueamento da polpa, não são removidos no tratamento secundário causando sérios danos ao meio ambiente. Neste estudo, análises químicas comparativas e um teste de toxicidade, foram realizados nos efluentes Kraft-E1 (primeira extração) e Final-E3 (tratamento secundário). As amostras com o pH ajustados para 5,0 com H2SO4 1M foram estocadas à 4°C em frascos de 500mL de polietileno. Após serem tratadas com o fungo Lentinus edodes UEC-2021 e após filtração (Millipore 0.22mm) as amostras foram analisadas. Foram obtidos, entre outros resultados, 51 % de redução de cor e 65% de redução na concentração de fenol / Abstract: Kraft Effluents with main purposes: the reuse of water tap and reduce volumes to be discharged. Despite their low toxicity, pulp and paper discharges have a toxic impact on receiving waters because of tremendous volumes discharged with color persisting and organic pollutants even in treated and partially treated effluents. Many compounds formed during pulp bleaching are not removed in the secondary treatment leading to a pulp mill effluent content of hundred different compounds. In this study a comparative chemical analysis was made with samples of Kraft Effluent-E1 (first extraction) a main type of chlorine bleach plant wastewater and with the Final Effluent-E3 after treatment in aerated lagoon with hydraulic dectention time of 3 days. The samples were pH adjusted to 5.0 with H2SO4 1M and stored at 4°C in polyethylene bottles in volumes of 500mL to ensure that all assays would be done with same effluent samples. After incubation with Lentinus edodes UEC-2021 and filtration (Millipore 0.22mm) samples were conveniently prepared for analysis. It was obtained a 51 % color removal and a 65% reduction value for phenol / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Jose Roberto Guimarães / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Civil / Made available in DSpace on 2018-07-31T14:48:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Farah_CarolinaRittesTurato_M.pdf: 5710185 bytes, checksum: 5c15b23113a03261722d797144343476 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A caracterização fisica e química de uma substância ou mesmo de uma mistura de substâncias é muito importante, porém não fornece o potencial tóxico. A utilização de ensaios com organismos, ou seja, a aplicação de testes de toxicidade, pode suprir esta limitação. As bactérias Klebsiella oxytoca e E. colí foram utilizadas como organismosteste em testes de toxicidade, sendo esta última utilizada para fins de comparação. A estimulação/inibição do crescimento bacteriano foi quantificada pela medida da sua respiração, ou seja, do CO2 produzido; que foi medido pelo sistema de análise por injeção em fluxo (FIA), caracterizado por ser um método simples, que utiliza pequenos volumes de amostra, sensível e rápido na determinação. As bactérias foram expostas ao antibiótico tetraciclina, aos metais pesados Hg2+, Cd2+ e CU2+ e a 2 detergentes hospitalares. Os resultados foram expressos em termos de EC5o e tempo de duplicação (tD). A Klebsiella oxytoca apresentou-se mais resistente do que a E. colí. A sensibilidade encontrada pela Klebsiella oxytoca aos metais foi Hg2+>Cd2+>Cu2+ e pela E. colí, Hg2+>Cu2+>Cd2+. Conclui-se que existe uma diferença na sensibilidade entre os organismos do mesmo nível trófico e a necessidade da bateria de ensaios / Abstract: The physical and chemical characterization of a substance or of a substance mixture is very important, however it does not supply any information related to the toxic potential. The use of assays with organisms, or either, the application of toxicity tests, can overcome this limitation. The Klebsiella oxytoca and E. co/i bacteria had been used as tests-organism in toxicity tests, this last one used for matching purposes. The stimulation/inhibition of the bacterial growth was quantified by the measure of its respirantion of produced CO2 that it was measured by the system of flow injection analysis (FIA), characterized as a simple method that uses a small amost of sample, is sensitive and fast in the determination. The bacteria had been exposed to the antibiotic tetracicline, the heavy metals Hg2+, Cd2+ and Cu2+ and to 2 hospital detergents. The results are expressed in terms of EC5o and duplication time (tD). The Klebsiella oxytoca presented higher resistance than E. co/i. The sensitivity found for the Klebsiella oxytoca to metals was Hg2+>Cd2+>CU2+ and for E. coli, Hg2+>CU2+>Cd2+. One concludes that there is a difference in sensitivity between organisms of the same trofic level and the necessity of the battery of assays / Mestrado / Saneamento e Ambiente / Mestre em Engenharia Civil

Orientador: Alexandre Nunes Ponezi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Civil, Arquitetura e Urbanismo / Made available in DSpace on 2018-08-13T11:10:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Caminada_SuzeteMariaLenzi_M.pdf: 5250587 bytes, checksum: 52265efd2c8ae0079d610af85e15b3b3 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A Comissão da União Européia e o comitê científico de toxicologia, ecotoxicologia e ambiente, identificaram, a necessidade da obtenção de dados sobre os efeitos dos fármacos no ambiente. Estes compostos e seus metabólitos são introduzidos no ambiente, pelo esgoto em quantidades que superam 100 toneladas/ano. A literatura científica comenta que a presença de fármacos no ambiente é, geralmente, pequena quando comparada a outros produtos químicos. No entanto, a alta persistência de vários destes compostos e sua contínua reposição aumentam o risco de exposição crônica para os organismos aquáticos, como também para os humanos. Um destes compostos, Hidrocloridrato de Fluoxetina, medicamento bastante utilizado no tratamento da ansiedade e distúrbios de comportamento, obesidade e bulemia nervosa, tem sido reportado como um causador de distúrbios em organismos aquáticos. Os resultados demonstram que o fármaco em estudo foi parcialmente degradado pelos organismos no sistema teste com uma remoção de 27%. Os ensaios ecotoxicológicos indicaram que os fármacos apresentam toxicidades diferentes entre as formulações estudadas. As avaliações da toxicidade das amostras geradas pelo sistema de respirometria apresentaram uma redução na toxicidade. Os ensaios indicam uma possível acumulação ambiental com conseqüências prejudiciais aos organismos aquáticos. / Abstract: The Commission of the European Union and the scientific committee of toxicology, ecotoxicology and environment 1990, identified, the need of the obtaining of data on the effects of the drugs in the environment. These composed and they metabolics are, introduced in the environment, through the wastewater sanitary, in larger proportions than 100 ton/year. The scientific literature comments that the drugs presences in the environment are generally, small when compared the other chemical products. However the high persistence of several of these composed and its continuous replacement increases the risk of chronic exhibition for the aquatic organisms as well as for the humans. One of these substance, Hidrocloridrate of Fluoxetine, medication quite used in the treatment of the anxiety and disturbances of behavior, obesity and nervous bulemy, it has been reported as a caused of disturbances in aquatic organisms. The results demonstrate that the drug in study was degraded partially by the organisms in test system with a maximum removal of approximately 27%. The toxicological rehearsals indicated that the drugs presents show different toxicicity among the studied formulations. The evaluation of the toxicicity of the samples generated by the system presented a reduction in the toxicicity. The rehearsals indicate a possible environmental accumulation with harmful consequences to the aquatic organisms. / Mestrado / Saneamento e Ambiente / Mestre em Engenharia Civil

Orientador: Renato de Mello Prado / Coorientador: Flávio José Rodrigues Cruz / Banca: Carmen Rosa Betancourt Aguilar / Banca: Wanderley José de Melo / Resumo: As informações sobre fontes de selênio (Se) em alface são incipientes na literatura, sobretudo, com relação ao limite entre biofortificação e toxicidade. Assim, o objetivo deste estudo foi determinar níveis críticos de Se na solução nutritiva e foliar, e a melhor fonte que aumente a biofortificação da alface hidropônica sem causar toxicidade. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado representado por duas fontes de selênio, selenito de sódio (Na2SeO3) e selenato de sódio (Na2SeO4), dez concentrações de selênio (0; 2; 4; 6; 8; 16; 32; 64; 96; 128 μM) com quatro repetições por tratamento, totalizando 80 unidades experimentais. As concentrações adequadas estão entre 5,6 e 16 μM de selênio na forma selenato em solução nutritiva e teores foliares adequados de 10,2 a 41,8 mg kg-1 de selênio / Abstract: Information on sources of selenium (Se) in lettuce are scarce in the literature, especially with respect to the boundary between Biofortification and toxicity. The objective of this study was to determine critical levels of Se in the nutrient solution and leaf and the best source to increase biofortification of hydroponic lettuce without causing toxicity. The experimental design was completely randomized represented by two sources of selenium, sodium selenite (Na2SeO3) and sodium selenate (Na2SeO4) ten selenium concentrations (0. 2. 4. 6. 8. 16. 32. 64. 96. 128 M) with four replicates per treatment, totaling 80 experimental units. The concentrations are between 5.6 and 16 M selenium selenate form the nutrient solution and appropriate foliar 10.2 to 41.8 mg kg-1 of selenium / Mestre

Orientador: Carmem Silvia Fontanetti Christofoletti / Banca: Márcia Miyuki Hoshina / Banca: Cintya Aparecida Christofoletti de Figueiredo / Resumo: Os inseticidas representam uma grande proporção dos compostos sintetizados pela indústria química para uso doméstico e na agricultura. Devido ao aumento da resistência das pragas aos antigos pesticidas e sua delicada implicação para a saúde pública, está havendo uma substituição progressiva por novas famílias de inseticidas. Nos últimos anos, o fipronil deixou de ser uma das melhores alternativas dentre os inseticidas e passou a ser alvo de órgãos governamentais e da comunidade científica, para progressiva supressão mundial por conta de seus efeitos deletérios sobre o meio ambiente. Estudos comparados sobre a eficiência de um novo membro da família fenilpirazol, demonstram que, o ethiprole, mesmo com sua menor lipofilicidade e menor toxicidade, é basicamente tão efetivo quanto seu análogo fipronil. Este composto tem sido largamente utilizado em monoculturas como cana-de-açúcar e arroz e comercializado como um inseticida foliar e de solo e para o uso do tratamento de sementes. No entanto, pouco se sabe sobre a ação do ethiprole nos organismos não alvos e se a incidência luminosa influencia sua ação. Este trabalho teve por objetivo investigar a potencialidade tóxica, citotóxica, genotóxica e mutagênica do Curbix®, produto comercial do ethiprole. As avaliações foram feitas pelos testes de aberrações cromossômicas (AC) e de micronúcleos (MN) em Allium cepa (cebola) e pelos testes do MN e ensaio do cometa em Oreochromis niloticus (tilápia do Nilo). Os testes com A. cepa indicaram genotoxicidade para as todas as concentrações de ethiprole e citotoxicidade em todas as concentrações expostas a luz. A maior indução de brotos nucleares sugeriu uma ação aneugênica para o inseticida. Os testes com O. niloticus apontaram genotoxicidade do inseticida apenas para a menor concentração testada, demonstrando menor sensibilidade desses organismos teste às concentrações testadas do ethiprole em relação a... / Abstract: Pesticides represent a large proportion of the compounds synthesized by the chemical industry for domestic and agriculture use. The oldest families are being progressively replaced by new families of insecticides due to increased resistance to the old pesticides and their delicate implication for public health. In recent years, fipronil is no longer one of the best alternatives among the insecticides and happened to be in the crosshairs of government agencies and the scientific community for progressive global suppression because of its deleterious effects on the environment. Comparative studies on the efficiency of a new member of the phenylpyrazole family show that the ethiprole is basically as effective as analog fipronil, even with its lower lipophilicity and lower toxicity. This compound has been widely used in crops like cane sugar and rice and marketed as a foliar and soil insecticide and the use of seed treatment. However, little is known about the action of ethiprole on non-target organisms and the light incidence influence their action. This study aimed to investigate the potential toxic, cytotoxic and genotoxic of Curbix®, commercial product ethiprole. The evaluations were made by chromosome aberration test (CA) and micronuclei (MN) in Allium cepa (onion) and the MN test and comet assay in Oreochromis niloticus (Nile tilapia). The A. cepa tests indicated genotoxicity for all ethiprole concentrations and cytotoxicity at all concentrations exposed to light. The most induction of nuclear buds suggested aneugenic action for the insecticide. The O. niloticus tests pointed pesticide genotoxicity only for the lowest concentration tested, it shows lower sensitivity of these organisms than the onion / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-31Bitstream added on 2014-06-13T18:41:13Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_pr_dr_rcla.pdf: 1096326 bytes, checksum: a2a1be84ec8b09cfcf7ab3110daa8ce4 (MD5) / O presente estudo avaliou os efeitos do fipronil em fêmeas semi-ingurgitadas de carrapatos Rhipicephalus sanguineus por meio do desenvolvimento de protocolo adequado de bioensaio in vitro (AIT), monitorado diariamente, com determinação da CL50 (concentração 50% letal) e intervalo de confiança a 95%, g (95): CL50 = 9.647 ppm (4.711 a 13.470), bem como analisou os efeitos histológicos e ultra estruturais deste produto nos ovários desses indivíduos, demonstrando quais são os mecanismos de defesa utilizados pelas células germinativas para eliminar o composto químico do sistema. Para o estudo morfológico, os carrapatos foram divididos em quatro grupos, onde o grupo I foi utilizado como controle e os grupos II, III e IV, foram submetidos às concentrações de 1, de 5 e de 10 ppm (CL50) de fipronil, respectivamente. As alterações variaram desde a presença de poucos e pequenos vacúolos até a interrupção da vitelogênese e morte celular. A concentração de 10 ppm de fipronil foi a que mais afetou o desenvolvimento dos ovócitos. Mecanismos de defesa celular como o aumento da quantidade e novo arranjo citoplasmático de elementos do citoesqueleto, bem como a grande quantidade de vacúolos digestivos e de figuras mielínicas foram observados. Simulando a ação do fipronil nos hospedeiros de carrapatos expostos aos acaricidas que tenham esse princípio ativo em sua composição, o presente estudo avaliou também o potencial citotóxico (danos causados nas células do fígado), genotóxico e mutagênico do fipronil utilizando camundongos submetidos a diferentes doses da droga. Os camundongos foram divididos em quatro grupos: grupo controle e grupos I, II e III, que foram expostos às doses de 15mg/Kg, 25 mg/Kg e 50 mg/Kg (DL50) de fipronil, respectivamente. Em seguida, o fígado dos indivíduos foi retirado, seccionado e analisado por meio de técnicas histológicas e histoquímicas... / The present study evaluated the effects of fipronil on semi-engorged females of the tick Rhipicephalus sanguineus. A protocol for an in vitro bioassay (AIT) was developed, and the LC50 (lethal concentration 50%) and 95% confidence interval were determined: LC50 = 9.647 ppm (4.711 to 13.470). Histological and ultrastructural alterations in ovaries were also examined to describe the defense mechanisms of germ cells to eliminate the chemical compound from the system. For the morphological analysis, ticks were divided into four groups. Group I was used as the control group and groups II, III,and IV were exposed to concentrations of 1, 5, and 10 ppm (LC50) of fipronil, respectively. Alterations varied from the presence of few and small vacuoles to the interruption of vitellogenesis and cell death. The concentration of 10 ppm of fipronil had the strongest effect on oocyte development. Defense mechanisms of cells were observed such as increase in the amount and changes in the arrangement in the cytoskeleton elements in the cytoplasm, amount of digestive vacuoles and myelin figures. Simulating the action of fipronil in tick hosts exposed to fipronil, the present study also assessed the cytotoxic (damage caused in liver cells), genotoxic, and mutagenic potential of fipronil in mice treated with different doses. Mice were divided into four groups: control group and groups I, II, and III, which were exposed to doses of 15mg/Kg, 25 mg/Kg, and 50 mg/Kg (LD50) de fipronil, respectively. The liver of mice were dissected, sectioned, and analyzed with histological and histochemical techniques. Changes varied from proliferation of Kupffer cells, hypertrophy of hepatocytes, accumulation and distribution of proteins, polysaccharides, lipids, and presence of vacuoles in the cytoplasm of hepatocytes, as well as the obstruction of blood vessels, characterizing mainly a) autophagic processes, b) steatosis... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-22Bitstream added on 2014-06-13T20:01:18Z : No. of bitstreams: 1 werkman_c_dr_sjc.pdf: 10285491 bytes, checksum: 01c6d6c66160e4dd0d380e7874948436 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Embora diversos estudos já tenham sido realizados sobre a Punica granatum L., seus possíveis efeitos citotóxicos não são bem conhecidos. No presente trabalho foi avaliada a toxicidade da Punica granatum L. (PG) por meio de cultura celular com duas linhagens: fibroblastos humanos de mucosa oral (FLM) e células de carcinoma epidermóide oral humano (KB). As células foram submetidas ao teste de viabilidade celular por 24 horas em placas de 96 poços nas concentrações da PG (1%, 0,5%, 0,25%, 0,125%, 0,062% e 0,031%) e aos testes de citotoxicidade celular em placas de 24 poços, em cinco períodos diferentes (4 horas, 1, 3, 5 e 7 dias) e com quatro diferentes concentrações (1%, 0,5%, 0,25%, 0,062%). Todos os testes foram realizados em triplicata e em três momentos diferentes. Foram adicionados dois grupos, um controle negativo (Tryton 10%) e um controle positivo constituído de meio de cultura acrescido de soro bovino fetal 10% e sem o extrato de PG. A quantificação celular foi realizada pelo método do Resazurin, com avaliação por espectrofotometria óptica (espectrofotômetro UVM340 - Asys Hitech GmbH) e leitura de absorbância dos comprimentos de onda de 570 nm a 600 nm. Os dados obtidos foram submetidos à ANOVA (5%). Os resultados de viabilidade mostraram que nas concentrações de 0.031%; 0,062%; 0,125%; 0,25% e 0,05% o extrato de PG inibiu a viabilidade celular (≥ 40%) principalmente das células KB. O teste de citotoxicidade mostrou que apenas as culturas tratadas com PG a 0,062% exibiram citotoxicidade para as linhagens celulares. A PG a 1% foi tóxica para as células FLM e KB. O extrato de PG inibiu a citotoxicidade celular nas demais concentrações testadas. Estes resultados podem ser relacionados a propriedade anticarcinogênica da Punica granatum L. / Several studies have been conducted on Punica granatum L., but their cytotoxic effects are not well known. The purpose of this study was to evaluate the cytotoxicity of Punica granatum L. extract (PG) in two cell lines: human oral mucosa fibroblasts (FLM) and cells of human oral squamous cell carcinoma (KB). The cells were analized to viability on 24 h using different concentrations of PG (1%, 0.5%, 0.25%, 0.125%, 0.062% and 0.031%) and to cell proliferation in five different periods (4 h, 1, 3, 5 and 7 days) using four different concentrations of PG (1%, 0.5%, 0.25%, 0.062%). All tests were performed in triplicate and in three different times. There were a negative control (Tryton 10%) and a positive control (culture medium plus 10% SBF, without PG extract). Cell quantification was performed by the Resazurin method, with evaluation by optical spectrophotometry (spectrophotometer UVM340 - Asys Hitech GmbH) and measure of absorbance at a wavelength of 570 nm to 600 nm. Data were submitted to ANOVA (5%). The results showed inhibition of cell proliferation in 0,031%, 0.062%, 0.125%, 0.25% and 0.05% concentrations of PG extract (≥ 40%) specialty to KB cells in comparison to FLM cells. PG 1% was toxic to KB and FLM cells. The proliferation test showed cell proliferation only when using PG 0,062%, for both cell lines and inhibited proliferation whith all other PG concentrations. These effects might be related to the anticarcinogenic properties of PG.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-10-19Bitstream added on 2014-06-13T19:40:41Z : No. of bitstreams: 1 scorzoni_l_dr_arafcf.pdf: 3179979 bytes, checksum: 1e778fd453c60b43b64a943d7b3e82a0 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A incidência de infecções fúngicas oportunistas tem aumentado nas últimas décadas devido à crescente proporção de pacientes imunocomprometidos em nossa sociedade. Candida krusei é descrita como um dos agentes de infecções fúngicas em pacientes susceptíveis. Embora sua prevalência seja baixa entre as infecções fúngicas (2-7%), a resistência intrínseca ao fluconazol torna esta levedura importante no contexto relacionado à epidemiologia e na procura de novas alternativas terapêuticas. Modelos de organismos não mamíferos são alternativas viáveis para estudar a virulência de fungos e eficácia de drogas. Neste trabalho utilizou-se Galleria mellonella e Caenorhabditis elegans como modelos para estudar a virulência e avaliar a eficácia antifúngica de anfotericina B e fluconazol durante a infecção por C. krusei, bem como cultura de macrófagos e testes de agrotransformação. No modelo de G. mellonella foi realizada a caracterização completa da interação de C. krusei por meio da determinação do índice de fagocitose, quantificação da densidade hemocitária, melanização, estudos de filamentação, carga fúngica e histopatologia. Além disso, foi realizado estudo de eficácia antifúngica entre G. mellonella e C. elegans mostrando resultados compatíveis entre os dois modelos. Além disso, utilizou-se cultura de macrófagos RAW 267.7 para verificar o efeito das duas drogas sobre a fagocitose e produção de citocinas quando as células foram infectadas com C. krusei. Não houve alterações quanto à fagocitose nesse modelo, entretanto a produção de TNF-α mostrou-se excessivamente aumentada com o tratamento com anfotericina sugerindo que além do efeito direto da droga existem também mecanismos de imunomodulação envolvidos nessa... / The incidence of opportunistic fungal infections has increased in the last decades due to the increasing proportion of immunocompromised patients. Candida krusei is described as one of the agents of fungal infections in susceptible patients. Although its prevalence is low among fungal infections (2-7%), the intrinsic resistance to fluconazole makes this yeast important in this context related to epidemiology and new therapies. Models of non-mammalian are viable alternatives to study virulence of fungi and drug efficacy. In this work we used Galleria mellonella and Caenorhabditis elegans as models for studying virulence and evaluate the efficacy of antifungal agent’s amphotericin B, fluconazole and caspofungin during infection by C. krusei, and C. albicans, as well as, macrophages and agrotransformation studies. The model of G. mellonella was done full characterization of the interaction with C. krusei by determining the phagocytosis index, measuring the density haemocytic, melanization, filamentation studies, fungal burden and histopathology. In addition, we conducted a study of antifungal efficacy between G. mellonella and C. elegans showing compatible results between the two models. Furthermore, we used macrophage culture RAW 267.7 to determine the effect of drugs amphotericin B and fluconazole on phagocytosis and production of cytokines when the cells were infected with C. krusei and C. albicans. There was no change on the phagocytosis in this model, however, the production of TNF-α was shown to be excessively increased with treatment with amphotericin suggesting that in addition to the direct effect of the drug, immunomodulation mechanisms are also involved in this response. The construction of transformants... (Complete abstract click electronic access below)