Made available in DSpace on 2016-07-01T13:10:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-22. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-01T13:14:08Z : No. of bitstreams: 1 000866261.pdf: 2011639 bytes, checksum: de26a1680120fdc75d49c236f0f98bb9 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Com o objetivo de investigar os efeitos da administração de 2,5 mg de benzoato de estradiol (BE) seguido de 1500 mg de progesterona de longa ação (P4 LA) sobre a dinâmica molecular endometrial, características morfológicas do útero e concentrações plasmáticas de estrógeno e progesterona em éguas receptoras acíclicas, foram avaliados: a expressão proteica e as alterações na abundância relativa dos transcritos para os receptores de estrógeno (ER) e progesterona (PR) no endométrio por meio da RT-qPCR e imunohistoquímica; as características morfológicas do útero por ultrassonografia e palpação retal; e as concentrações plasmáticas do estrógeno e progesterona por meio de radioimunoensaio. A aplicação de 2,5 mg, 5 mg ou 10 mg de BE foram eficazes em causar edema uterino máximo 24 h após a administração. A dose de 2,5 mg de BE provocou picos de concentração de estradiol similares aos de éguas tratadas com 5 mg, 10 mg e aos de éguas cíclicas, sem elevar a concentração de estrógeno conjugado como observado com as outras doses de BE. Ainda, a concentração de P4 foi reduzida após a aplicação da P4 LA quando 10 mg de BE foram utilizados. A administração dos tratamentos hormonais alterou a abundância relativa dos transcritos para ERα, ERβ e PR de forma similar às alterações encontradas em éguas cíclicas quando o final do estro e início do diestro foram comparados. Em conclusão, o uso de 2,5 mg de BE seguido de 1500 mg de P4 LA provoca alterações similares na morfologia uterina, abundância relativa dos transcritos para ERα, ERβ e PR no endométrio, e de concentrações circulantes de estrógeno e progesterona às encontradas em éguas cíclicas / To investigate the effects of the administration of 2.5 mg of estradiol benzoate (EB) followed by 1500 mg of long acting progesterone (LA P4) on endometrial molecular dynamics, uterine morphological characteristics, as well as estrogen and progesterone plasma concentrations in non-cyclic recipient mares, we evaluated: protein expression and changes in relative abundance of transcripts for estrogen (ER) and progesterone receptors (PR) in the endometrium by RT-qPCR and immunohistochemistry; uterine morphological characteristics by ultrasonography and rectal palpation; and estrogen and progesterone plasma concentrations by radioimmunoassay. The administration of 2.5 mg, 5 mg or 10 mg of EB were effective at promoting maximum uterine edema 24 h after their injection. The dose of 2.5 mg of EB caused similar estradiol concentration peaks to those observed in mares treated with 5 mg or10 mg of EB and to those observed in cyclic mares, which was not followed by increased concentrations of estrogen conjugate as observed for the other doses. Moreover, P4 concentration was reduced 24 h after LA P4 administration when the dose of 10 mg of EB was injected. The administration of the hormonal protocols altered the relative abundance of transcripts for ERα, ERβ and PR in non-cyclic mares as observed in cyclic ones when late estrus and early diestrus were compared. In conclusion, the use of 2.5 mg of EB followed by 1500 mg of LA P4 causes similar uterine morphology changes, relative abundance of transcripts for ERα, ERβ and PR, and estrogen and progesterone circulating concentrations to those found in cyclic mares

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:39:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-09. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:08Z : No. of bitstreams: 1 000870620.pdf: 854848 bytes, checksum: 8c79744870f5da8cb69ae19583f3ce62 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / The process of embryonic and placental development is under high epigenetic control, with different epigenetic processes regulating the differentiation of pluripotent cells into specialized cells. An abnormal placental development is observed frequently in pregnancies produced by nuclear transfer, and is associated with incomplete epigenetic reprogramming of the donor cell and formed embryo. The objective of this study was to evaluate the expression of the imprinted genes TSSC4 e PHLDA2 in cotiledonary and intercotiledonary tissues, after 60 days of pregnancy, in placentas produced by Embryo Transfer (ET) In Vitro Fertilization (IVF) and Nuclear Transfer (NT) in cattle, and also to investigate the epigenetic control of this gene in the bovine placenta evaluating the epigenetic profile of cotiledonary tissues of the experimental groups (ET, IVF and NT). The TSSC4 gene expression was reduced by 30% in the cotyledons in the NT group, however PHLDA2 expression of the gene was elevated by 11-fold in NT compared to ET. ChIP analysis for histone H3 at the proximal promoter region of TSSC4 and PHLDA2 genes showed an increase to the permissive mark H3K4me2 and a reduction for the inhibitory mark H3K9me2 in the cotyledons of cloned placentae, in relation to placentae produced by ET, for both genes. Interestingly, the inhibitory mark H3K9me2 for TSSC4 gene was also significantly reduced in placentae produced by IVF, compared to ET control group. These results show that expression of the imprinted genes TSSC4 and PHLDA2 is affected in placenta of pregnancies produced by nuclear transfer. Further, changes in expression of gene PHLDA2 and histone modifications in TSSC4 gene cotyledons produced by IVF indicate that the in vitro culture can contribute to the observed changes in NT group.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA13MA124.pdf: 602522 bytes, checksum: 06d330f3a4de037875d96b3831ac2b65 (MD5) Previous issue date: 2013-10-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The equine industry has grown considerably in recent years in Brazil. In this aspect, the Crioula breed has emerged as one of the greatest creations in number and genetic quality of animals. Because of this, there is a greater demand for biotechnology for breeding horses. The conventional superovulatory protocols with high hormonal doses, has shown less efficient when evaluating the relation between the number of ovulations and embryo recovery rates. Dose reduction of equine pituitary extract (EPE) could be an alternative to ensure that one or more embryos can be recovered at each collection procedure. There is few information about reproductive physiology of the Crioula mare, and practically there is no data of how that category of animal responds to superovulation and embryo transfer. Thus, this study aimed to compare the superovulatory response of embryos donor mares of Quarter Horse (QH) and Crioula breed using a protocol with low dose of equine pituitary extract (EPE). Eight QH mares and 6 Crioula mares were used in the 2011/2012 and 2012/2013 seasons. These mares were in perfect health and reproductive conditions. The mare follicular control was performed daily with the aid of ultrasound. Were monitored 3 consecutive estrous cycles in each mare, being where all mares have passed for all the treatments. Every donor mare received a dose of PGF2a before beginning each protocol. Control Group - monitoring of follicle growth up to the time of ovulation; EPE group - monitoring of follicular growth. When the follicles reached 20 mm in diameter was administrated 7 mg EPE twice daily with an interval of 12h until the moment of ovulation induction. When most of the follicles achieved a diameter 35 mm, the ovulation was induced by administration of 2500UI hCG; Post EPE Group - same procedure as the control group. Donors were inseminated every 48 hours until the time of ovulation. On the eighth day post-ovulation embryo collection was performed. Data were analyzed using PROC GLM of the SAS statistical package. The variables were submitted by the Tukey test and means of least squares adjusted for multiple comparisons using the Tukey-Kramer test, with significance level of 5%. Values are presented as mean ± SD. The rate of follicular growth in different breeds, showing a mean of 10.1 and 7.7 days for Crioulas and QH mares, respectively (p <0.01). Difference was observed between breeds (p = 0.005) in the number of days on treatment with EPE with mean 6.6 and 4.7 days for the Crioula and QH breed. In the mares treated with EPE, there was an increase in the number of 6 ovulations (p <0.01) with a mean of 2.00 ± 0.53 and 3.33 ± 2.06 for Crioulas and QH mares respectively, when compared to the control and post-EPE groups (QH - control 1.12 ± 0.35, post-EPE 1.42 ± 0.53; Crioula - control and post-EPE 1.16 ± 0.40). The embryo recovery rate per ovulation in mares treated with EPE was 75% (27/36) versus 56.25% (9/16) in the control group (n = 14) and 88.23% (15/17) in post EPE (n = 13) group. Treatment with EPE resulted in the recovery of 1.1 ± 0.8 embryo for QH mares and 3.0 ± 2.0 embryos for the Crioula mares, while the control group 0.5 ± 0.5 and 0.8 ± 0.4 (QH and Crioula, respectively). The therapy with EPE in the dose of 7 mg bid proved effective, increasing the incidence of multiple ovulations in mares and was able to increase the number of embryos recovered by washed compared to the control group. The Crioula mares showed better superovulatory response and embryo recovery rate compared with mares of Quarter Horse / A indústria equina tem crescido consideravelmente no Brasil nos últimos anos. Neste aspecto, a raça Crioula tem se destacado como uma das maiores criações em número e qualidade genética de animais. Devido a isso existe uma maior procura por biotecnologias aplicadas a reprodução de equinos. Os protocolos convencionais superovulatórios, com altas doses hormonais, tem se mostrado menos eficientes quando se avalia a relação entre o número de ovulações e a recuperação embrionária. A redução da dose de extrato de pituitária equina (EPE) pode ser uma alternativa para garantir que um ou mais embriões possam ser recuperados em cada procedimento de coleta. Existem poucas informações sobre a fisiologia reprodutiva da égua Crioula, e praticamente não há relatos de como esta categoria de animais responde a técnica de superovulação e transferência de embriões. Dessa forma, este trabalho teve por objetivo comparar a resposta superovulatória de éguas doadoras de embriões das raças Quarto de Milha (QM) e da raça Crioula utilizando um protocolo com baixa dose de extrato de pituitária equina (EPE). Para realização deste experimento foram utilizadas 8 éguas da raça QM e 6 éguas da raça Crioula, em perfeitas condições sanitárias e reprodutivas, nas estações de 2011/2012 e 2012/2013. Os animais foram submetidos a um controle folicular diário com o auxílio do ultrassom, sendo acompanhados 3 ciclos estrais consecutivos em que todas as éguas passavam por todos os tratamentos. Todas as éguas doadoras receberam uma dose de PGF2&#945; antes de iniciarem os protocolos. Grupo Controle monitoramento do crescimento folicular até o momento da ovulação; Grupo EPE monitoramento do crescimento folicular, e a partir da presença de folículos com cerca de 20 mm de diâmetro foi realizada a administração de 7 mg de EPE, duas vezes ao dia com intervalo de 12hs até o momento da indução da ovulação. Quando a maioria dos folículos atingiram um diâmetro igual ou superior a 35 mm foi induzida a ovulação através da administração de 2500UI de hCG; Grupo Pós-EPE mesmo procedimento do grupo controle. As doadoras foram inseminadas a cada 48h até o momento da ovulação. No oitavo dia pós-ovulação foi realizada a coleta de embriões. Os dados foram analisados utilizando o PROC GLM do pacote estatístico SAS. As variáveis foram submetidas ao teste de Tukey e as médias dos quadrados mínimos ajustados para comparação múltipla utilizando o teste de Tukey-Kramer, com nível de significância de 5%. Os valores estão sendo apresentados como médias ± SD. Um dos 4 parâmetros avaliados foi a taxa de crescimento folicular nas diferentes raças trabalhadas, apresentando uma média de desenvolvimento de 10,1 e 7,7 dias para as Crioulas e QM, respectivamente (p<0,01). Houve diferença entre as raças (p=0,005) no número de dias em tratamento com EPE com média de 6,6 e 4,7 dias para a raça Crioula e QM. Nas éguas tratadas com EPE, houve um incremento no número de ovulações (p<0,01), com média de 2,00±0,53 e 3,33±2,06 para éguas QM e Crioulas, respectivamente, quando comparados ao grupo controle e pós-EPE (QM controle 1,12±0,35; pós- EPE 1,42±0,53; Crioula controle e pós- EPE 1,16±0,40). A taxa de recuperação embrionária por ovulação nas éguas tratadas com EPE foi de 75% (27/36) contra 56,25% (9/16) do grupo controle (n=14) e 88,23% (15/17) no grupo pós EPE (n=13). O tratamento com EPE resultou na recuperação de 1,1 ± 0,8 embrião para as éguas QM e 3,0 ± 2,0 embriões para as éguas Crioulas, enquanto o grupo controle 0,5 ± 0,5 e 0,8 ± 0,4 (QM e Crioula, respectivamente). O tratamento com EPE na dose de 7 mg b.i.d mostrou-se efetivo, aumentando a incidência de ovulações múltiplas em éguas e foi capaz de elevar o número de embriões recuperados por lavado comparado ao grupo controle. As éguas Crioulas apresentaram melhor resposta superovulatória e taxa de recuperação embrionária comparado com as éguas da raça Quarto de Milha

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-07-13Bitstream added on 2014-06-13T20:38:41Z : No. of bitstreams: 1 ranieri_al_me_jabo.pdf: 416692 bytes, checksum: 8c5b1d1a825427d9d4b8b9ab52602486 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do meloxicam sobre a taxa de concepção inicial (TCi), final (TCf) e perda gestacional (PG) de vacas Holandesas de alta produção submetidas à Transferência de Embrião (TE) Inseminação Artificial (IA) e Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF). Na TE foram utilizadas, como receptoras de embrião, 492 vacas em lactação repetidoras de serviço. Na IA (n=312) e IATF (n=336) foram incluidas no estudo somente fêmeas recém paridas (com pelo menos 60 dias em lactação). Todas as fêmeas foram avaliadas e alocadas em um de dois grupos experimentais: Grupo Controle (GC) e Grupo Tratado (GT). O tratamento consistiu na administração i.m. de meloxicam injetável 2% (0,5mg/kg de peso) nos dias 7, 8 e 9 após a inovulação das receptoras de embrião, e nos dias 14, 15 e 16 da possível gestação das fêmeas submetidas a IA e IATF. Amostras de sangue foram colhidas nos D14 e D21 para posterior dosagem de progesterona (P4). O diagnóstico de gestação ocorreu aos 25-38 e 39-52 dias. O tratamento com o antiinflamatório não incrementou as TCi, TCf e tampouco diminuiu a PG em nenhuma das três biotecnologias. Contudo, observou-se que receptoras de embrião inovuladas com embriões congelados/descongelados do GT tiveram TCi e TCf menores que as do GC (GT= 25,8% v. GC=37,8%) .Não houve diferença na concentração sérica de progesterona de vacas do GC e do GT no D21. Contudo, houve efeito da estação do ano sobre as concentrações de P4 no D14 e D21 tanto na TE como na IA e IATF. Ainda, vacas gestantes apresentaram maiores concentrações de P4 que vacas não gestantes no D21. Conclui-se que o tratamento com meloxicam não incrementou as TCi, TCf, tampouco reduziu a PG de vacas Holandesas de alta produção / The aim of this study was to evaluate the effect of meloxicam on initial conception rate, final conception rate and pregnancy loss of high-producing Holstein cows submitted to embryo transfer (ET), artificial insemination (AI) and timed artificial insemination (TAI). On ET, 492 repeat breeders in milk were used as recipients. On AI (n=312) and TAI (n=336) only freshly calved cows (with at least 60 days in milk) were included in the study. The animals were evaluated and allocated in one of two experimental groups: Control Group (CG) and Treated Group (TG). The treatment consisted on administration of meloxicam 2% i.m. (0.5mg/kg of weight) on days 7, 8 and 9 after inovulation of embryo recipients, and on days 14, 15 and 16 of the possible pregnancy of females submmited to AI and TAI. Blood samples were collected on D14 and D21 for progesterone assay. The diagnosis of pregnancy was done on days 25-38 and 39-52. The treatment with the antiinflamatory did not increase initial conception rates and final conception rates, nor decreased pregnancy loss of animals in all three biotechnologies. However, recipients of TG inovulated with frozen/thawed embryos had lesser initial and final conception rates than CG (TG= 25.8% v. CG=37.8%) There was no difference on progesterone serum concentration of cows from TG and CG on D21. However, there was a season effect on P4 concentrations on D14 and 21 for ET, AI and TAI. Pregnant cows had higher P4 concentrations than non-pregnant cows. In conclusion, the treatment with meloxicam did not increase initial and final conception rates, neither decreased pregnancy loss of high producing Holstein cows

Orientador: José Luiz Moraes Vasconcelos, / Banca: Mario Binelli / Banca: Ricarda Maria dos Santos / Resumo: Objetivou-se com este estudo avaliar a utilização de dois dispositivos intravaginais de P4 (CIDR®, Zoetis) em vacas Holandesas em lactação sem CL e com P4 ≤1,0 ng/mL no início de um protocolo de sincronização da ovulação à base de E2/P4 para IATF (exp 1) ou TETF (exp 2) no sucesso da prenhez. Estes experimentos foram realizados em 9 fazendas, sendo 4 destinadas a IATF (n = 341) e 5, a TETF (n = 356). O protocolo utilizado nos experimentos foi: d-10 2mg IM BE (2,0mL de Estrogin, Farmavet, SP, Brasil) + CIDR (1,9g de P4, CIDR®, Zoetis, SP, Brasil); d-3 25mg IM Dinoprost Trometamina (5,0mL de Lutalyse®, Zoetis, SP, Brasil); d-2 remoção do CIDR + 1mg IM de Cipionato de Estradiol (0,5mL ECP®, Zoetis, SP, Brasil); d 0 IATF (exp1) ou d 7 TETF (exp 2). No d-10, os animais sem corpo lúteo à ultrassonografia (US) foram distribuídos aleatoriamente para receberem 1 CIDR (1CIDR) ou 2 CIDR (2CIDR). O diâmetro do folículo ovulatório [d0 (exp 1)] e presença de CL [d7 (exp 1 e 2)] foram avaliados por US. Amostras de sangue foram colhidas para dosagem de P4 nos dias -10, -3 e 7. Foram consideradas sincronizadas vacas com CL 7 dias após a IA (d7) ou com CL no momento da TE, consistente com a ovulação do folículo ovulatório; no exp 2, apenas vacas com CL (d7) que receberam embrião foram utilizadas. Diagnósticos de gestação foram realizados por US aos 32 e 60 d. Para avaliar as variáveis binomiais, foi utilizado o PROC GLIMMIX, e as contínuas, o PROC MIXED. Efeitos foram considerados significantes quando P ≤0,05 e tendência quando P >0,05 e P ≤0,10. Não houve efeito do tratamento na taxa de sincronização [1CIDR = 74,1% (329/451) vs. 2CIDR = 71,1% (298/423)]. A concentração de P4 no d-10 não diferiu entre os tratamentos (1CIDR = 0,59 ± 0,12 ng/mL vs. 2CIDR = 0,68 ± 0,12 ng/mL)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the use of two progesterone (P4) intravaginal devices (CIDR ®, Zoetis) in lactating Holstein cows without CL with P4 ≤ 1.0 ng / mL at the start of a E2/P4 ovulation synchronization protocol for TAI (exp 1) or TET (exp 2) on pregnancy success. These experiments were conduced in 9 farms, 4 destined to TAI (n = 341) and 5 TET (n = 356). The protocol used in the experiments was: d-10 2 mg IM EB (2.0 mL Estrogin, Farmavet, SP, Brazil) + CIDR (1.9 g of P4, CIDR ®, Zoetis, SP, Brazil); d-3 25 mg dinoprost tromethamine IM (5.0 mL Lutalyse ®, Zoetis, SP, Brazil), d-2 CIDR removal + 1 mg estradiol cypionate IM (0.5 mL, ECP ®, Zoetis, SP, Brazil); TAI d0 (exp 1) or TET d7(exp 2). On d-10, animals without a corpus luteum detected by ultrasonography (US) were randomly divided into groups to receive 1 CIDR (1CIDR) or 2 CIDR (2CIDR). The ovulatory follicle diameter [d0 (exp 1)] and presence of CL [d7 (exp 1 and 2)] were evaluated by US. Blood samples were collected for P4 measurement on days -10, -3 and 7. Were considered synchronized cows when they had CL 7 days after AI (d7) or CL at the time of ET, consistent with ovulation of detected ovulatory follicle; In exp 2 only cows CL (d7) receiving embryo were used. Pregnancy diagnosis were performed using US on days 32 and 60. Was used to evaluate binomial variables PROC GLIMMIX and PROC MIXED for continuous. Effects were considered significant when P ≤ 0.05 and tendency when P> 0.05 and P ≤ 0.10. There was no effect of treatment on synchronization rate [1CIDR = 74.1% (329/451) vs. 2CIDR = 71.1% (298/423). P4 concentration on d-10 did not differ between treatments (1CIDR = 0.59 ± 0.12 ng/mL vs. 2CIDR = 0.68 ± 0.12 ng/mL). P4 concentration was higher for 2CIDR treatment (2.14 ± 0.31 ng / mL) compared to 1CIDR (1.71 ± 0.28 ng / mL) at d-3 (PGF moment)... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Samir Issa Samara / Banca: Sandra Possebon Gatti / Banca: Walt Yamasaki / Resumo: O herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1), agente etiológico da rinotraqueite infecciosa bovina (IBR)/Vulvovaginite Pustular Bovina (IPV), tem grande importância como agente causador de problemas reprodutivos em vacas por determinar baixas taxas de concepção ou parição, acarretando consideráveis perdas econômicas para o produtor. Assim, o presente estudo conduzido em rebanhos de três fazendas (A, B e C) onde se processa a transferência de embriões (TE) no município de Prata no Estado de Minas Gerais teve como objetivo verificar as condições sorológicas de 209 animais antes do processamento biotécnico, determinar a resposta imune de esquema vacinal pré-definido e analisar a relação entre títulos médios geométricos (TMG) de anticorpos antes e depois da vacinação com os parâmetros reprodutivos de fêmeas receptoras de embriões vacinadas contra o BoHV-1. O título dos anticorpos para BoHV-1 foi determinado por meio do teste de virusneutralização (VN), conforme protocolo definido pelo Organização Mundial de Saúde Animal (OIE) e o quadro reprodutivo foi caracterizado por meio do exame de ultrassonografia transretal. Com isso, verificou-se que as prevalências de 39,7% (27/68) na fazenda A, 27,5% (11/40) na fazenda B e 36,6% (37/101) na fazenda C não foram estatisticamente diferentes; essa situação epidemiológica definiu o aumento de títulos de anticorpos para o BoHV-1 em 72,7% (152/209) dos animais pela vacinação com dose única; o maior sucesso de prenhez (75%) na 1ª TE foi observada nos animais que eram positivos e atingiram títulos acima de 256 após a vacinação; mesmo assim, no contexto estatístico, os índices gerais de gestação não tiveram influência significativa em decorrência da vacinação com dose única / Abstract: The bovine herpesvirus type 1 (BoVH-1), which causes infectious bovine rhinotracheitis (IBR) / infectious pustular vulvovaginitis (IPV), has major importance as an agent that causes reproductive problems by determining low conception or calving rates causing significant economical losses for the producer. The present study, was carried out in the cattle of three farms (A, B and C), where the embryos transfer is processed (ET), at Prata municipality in Minas Gerais State, aiming to verify the serological conditions of 209 animals before biotechnical processing, to determine immune response to a pre defined vaccination schedule and to analyze the relationship between geometric mean titers (TMG) of antibodies before and after vaccination with the reproductive parameters in embryo recipient heifers vaccinated against BoHV-1. The antibodies titers of BoHV-1 were determined by the virusneutralization test (VN), according to the protocol established by the World Organization for Animal Health (OIE) and the reproductive performance was characterized by transrectal ultrasonography examination. Thus, it was verified that the prevalence rates of 39.7% (27/68) in farm A, 27.5% (11/40) in farm B and 36.6% (37/101) in farm C had no statistical difference; this epidemiological situation defined the increase of antibody titers for BoHV-1 in 72.7% (152/209) of the animals by vaccination with a single dose; the greater success of pregnancy (75%) in the first ET was observed in animals that were positive and reached titers higher than 256 after vaccination; in the statistical context, the single dose vaccination had no significative influence in the overall rates of pregnancy / Mestre

Orientador: Claudia Maria Bertan Membrive / Banca: Daniel de Jesus Cardoso de Oliveira / Banca: Ricardo da Fonseca / Resumo: Na IATF e TETF o uso da gonadotrofina coriônica eqüina (eCG) é recomendado com o objetivo de incrementar as concentrações plasmáticas de progesterona (P4) e as taxas de concepção. A hipótese do presente estudo é que em fêmeas tratadas com eCG maiores concentrações de P4 são observadas no D5 e D7 (D0 = dia da IATF) em fêmeas prenhes após à IATF e no D5 e D7 (D0 = dia esperado para o estro) em receptoras prenhes submetidas à TETF. No Experimento 1, fêmeas bovinas tratadas ou não com 300UI de eCG e submetidas à IATF, tiveram as concentrações de P4 mensuradas nos dias 0, 3, 5, 7 e 10 após a IATF. No Experimento 2, todas as fêmeas foram tratadas com 300UI de eCG e submetidas à IATF, sendo mensuradas as concentrações de P4 nos dias 3, 5, 7, 12 e 17 após a IATF. No Experimento 3, receptoras tratadas com 300UI de eCG, foram submetidas à TETF, após a observação da presença ou não de estro e as concentrações de P4 foram avaliadas nos dias 5 e 7, após o dia esperado do estro. A dosagem de P4 foi realizada pela técnica de radioimunoensaio e o diagnóstico de gestação através da ultrassonografia. No Experimento 1, observou-se que animais tratados com eCG apresentaram maior concentração de P4 nos dias 0, 7 e 10. No Experimento 2, não houve diferença significativa na concentração de P4 nos dias 3, 7 e 12, entre os animais prenhes e não prenhes, entretanto no dia 17 os animais não prenhes tiveram menor concentração de P4. No Experimento 3, maiores concentrações de P4 no D7 foram observadas em animais que não apresentaram estro e maiores concentrações de P4 foram detectadas em animais prenhes no D7. Conclui-se que em fêmeas tratadas com eCG maiores concentrações de P4 não foram observadas no D5 e D7 (D0 = dia da IATF)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In FTET and FTAI the use of eCG is recommended in order to increase the synthesis of P4 and the conception rates. The hypothesis of this study is that females treated with eCG higher concentrations of P4 are observed on the D5 and D7 (D0 = day of FTAI) in pregnant females after the FTAI and on the D5 and D7 (D0 = day of expected estrus) in pregnant recipients submitted to FTET. In Experiment 1, cows treated or not with 300 IU of eCG and submitted to FTAI had the concentration of P4 measured on days 0, 3, 5, 7 and 10 after FTAI. In Experiment 2, all females were treated with 300 IU of eCG and submitted to FTAI, being measured the concentration of P4 on days 3, 5, 7, 12 and 17 after FTAI. In Experiment 3, recipients treated with 300 IU of eCG were submitted to FTET, after observation the presence or absence of estrus and measured the concentration of P4 on days 5 and 7 after the expected day of estrus. The P4 assay was performed by radioimmunoassay and pregnancy diagnosis by ultrasonography. In Experiment 1 was observed that animals treated with eCG showed higher concentration of P4 on days 0, 7 and 10. In Experiment 2 there was no significant difference in the concentration of P4 on days 3, 7 and 12 between non-pregnant and pregnant animals, since the day 17 non-pregnant animals had lower concentration of P4. In Experiment 3 highest concentrations of P4 in D7 were observed in animals that did not show estrus and higher concentrations of P4 were detected in pregnant animals on D7. It is concluded that in females treated with eCG higher concentrations of P4 were not observed in D5 and D7 (D0 = day of FTAI) in the pregnant after FTAI, however, the pregnancy rate in FTET embryos produced in vitro was... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Paulo Henrique Franceschini / Banca: Francisco Guilherme Leite / Banca: Erika da Silva Carvalho Morani / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do meloxicam sobre a taxa de concepção inicial (TCi), final (TCf) e perda gestacional (PG) de vacas Holandesas de alta produção submetidas à Transferência de Embrião (TE) Inseminação Artificial (IA) e Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF). Na TE foram utilizadas, como receptoras de embrião, 492 vacas em lactação repetidoras de serviço. Na IA (n=312) e IATF (n=336) foram incluidas no estudo somente fêmeas recém paridas (com pelo menos 60 dias em lactação). Todas as fêmeas foram avaliadas e alocadas em um de dois grupos experimentais: Grupo Controle (GC) e Grupo Tratado (GT). O tratamento consistiu na administração i.m. de meloxicam injetável 2% (0,5mg/kg de peso) nos dias 7, 8 e 9 após a inovulação das receptoras de embrião, e nos dias 14, 15 e 16 da possível gestação das fêmeas submetidas a IA e IATF. Amostras de sangue foram colhidas nos D14 e D21 para posterior dosagem de progesterona (P4). O diagnóstico de gestação ocorreu aos 25-38 e 39-52 dias. O tratamento com o antiinflamatório não incrementou as TCi, TCf e tampouco diminuiu a PG em nenhuma das três biotecnologias. Contudo, observou-se que receptoras de embrião inovuladas com embriões congelados/descongelados do GT tiveram TCi e TCf menores que as do GC (GT= 25,8% v. GC=37,8%) .Não houve diferença na concentração sérica de progesterona de vacas do GC e do GT no D21. Contudo, houve efeito da estação do ano sobre as concentrações de P4 no D14 e D21 tanto na TE como na IA e IATF. Ainda, vacas gestantes apresentaram maiores concentrações de P4 que vacas não gestantes no D21. Conclui-se que o tratamento com meloxicam não incrementou as TCi, TCf, tampouco reduziu a PG de vacas Holandesas de alta produção / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of meloxicam on initial conception rate, final conception rate and pregnancy loss of high-producing Holstein cows submitted to embryo transfer (ET), artificial insemination (AI) and timed artificial insemination (TAI). On ET, 492 repeat breeders in milk were used as recipients. On AI (n=312) and TAI (n=336) only freshly calved cows (with at least 60 days in milk) were included in the study. The animals were evaluated and allocated in one of two experimental groups: Control Group (CG) and Treated Group (TG). The treatment consisted on administration of meloxicam 2% i.m. (0.5mg/kg of weight) on days 7, 8 and 9 after inovulation of embryo recipients, and on days 14, 15 and 16 of the possible pregnancy of females submmited to AI and TAI. Blood samples were collected on D14 and D21 for progesterone assay. The diagnosis of pregnancy was done on days 25-38 and 39-52. The treatment with the antiinflamatory did not increase initial conception rates and final conception rates, nor decreased pregnancy loss of animals in all three biotechnologies. However, recipients of TG inovulated with frozen/thawed embryos had lesser initial and final conception rates than CG (TG= 25.8% v. CG=37.8%) There was no difference on progesterone serum concentration of cows from TG and CG on D21. However, there was a season effect on P4 concentrations on D14 and 21 for ET, AI and TAI. Pregnant cows had higher P4 concentrations than non-pregnant cows. In conclusion, the treatment with meloxicam did not increase initial and final conception rates, neither decreased pregnancy loss of high producing Holstein cows / Mestre

Orientador: Cezinande de Meira / Coorientador: José Paes de Oliveira Filho / Banca: Fabiana Ferreira de Ssouza / Banca: Fernanda da Cruz Landim / Banca: Paula de Carvalho Papa / Banca: Guilherme Pugliesi / Resumo: Com o objetivo de investigar os efeitos da administração de 2,5 mg de benzoato de estradiol (BE) seguido de 1500 mg de progesterona de longa ação (P4 LA) sobre a dinâmica molecular endometrial, características morfológicas do útero e concentrações plasmáticas de estrógeno e progesterona em éguas receptoras acíclicas, foram avaliados: a expressão proteica e as alterações na abundância relativa dos transcritos para os receptores de estrógeno (ER) e progesterona (PR) no endométrio por meio da RT-qPCR e imunohistoquímica; as características morfológicas do útero por ultrassonografia e palpação retal; e as concentrações plasmáticas do estrógeno e progesterona por meio de radioimunoensaio. A aplicação de 2,5 mg, 5 mg ou 10 mg de BE foram eficazes em causar edema uterino máximo 24 h após a administração. A dose de 2,5 mg de BE provocou picos de concentração de estradiol similares aos de éguas tratadas com 5 mg, 10 mg e aos de éguas cíclicas, sem elevar a concentração de estrógeno conjugado como observado com as outras doses de BE. Ainda, a concentração de P4 foi reduzida após a aplicação da P4 LA quando 10 mg de BE foram utilizados. A administração dos tratamentos hormonais alterou a abundância relativa dos transcritos para ERα, ERβ e PR de forma similar às alterações encontradas em éguas cíclicas quando o final do estro e início do diestro foram comparados. Em conclusão, o uso de 2,5 mg de BE seguido de 1500 mg de P4 LA provoca alterações similares na morfologia uterina, abundância relativa dos transcritos para ERα, ERβ e PR no endométrio, e de concentrações circulantes de estrógeno e progesterona às encontradas em éguas cíclicas / Abstract: To investigate the effects of the administration of 2.5 mg of estradiol benzoate (EB) followed by 1500 mg of long acting progesterone (LA P4) on endometrial molecular dynamics, uterine morphological characteristics, as well as estrogen and progesterone plasma concentrations in non-cyclic recipient mares, we evaluated: protein expression and changes in relative abundance of transcripts for estrogen (ER) and progesterone receptors (PR) in the endometrium by RT-qPCR and immunohistochemistry; uterine morphological characteristics by ultrasonography and rectal palpation; and estrogen and progesterone plasma concentrations by radioimmunoassay. The administration of 2.5 mg, 5 mg or 10 mg of EB were effective at promoting maximum uterine edema 24 h after their injection. The dose of 2.5 mg of EB caused similar estradiol concentration peaks to those observed in mares treated with 5 mg or10 mg of EB and to those observed in cyclic mares, which was not followed by increased concentrations of estrogen conjugate as observed for the other doses. Moreover, P4 concentration was reduced 24 h after LA P4 administration when the dose of 10 mg of EB was injected. The administration of the hormonal protocols altered the relative abundance of transcripts for ERα, ERβ and PR in non-cyclic mares as observed in cyclic ones when late estrus and early diestrus were compared. In conclusion, the use of 2.5 mg of EB followed by 1500 mg of LA P4 causes similar uterine morphology changes, relative abundance of transcripts for ERα, ERβ and PR, and estrogen and progesterone circulating concentrations to those found in cyclic mares / Doutor

Orientadora: Eliana Gertrudes Macedo Lemos / Banca: João Martins Pizauro Júnior / Banca: Jesus Aparecido Ferro / Banca: Marcos Antônio Machado / Banca: Mario Sérgio Palma / Resumo: A apomixia, ou seja a produção de sementes clonais, possuindo embriões idênticos à planta mãe, é um processo controlado geneticamente. Na apomixia facultativa, ocorrente no gênero Citrus, verifica-se a coexistência da reprodução sexual e apomítica em um mesmo óvulo. Entretanto os eventos genéticos que desencadeiam a produção de embriões apomíticos são atualmente pouco conhecidos. Não se sabe ainda, se os mesmos genes responsáveis pela formação dos embriões zigóticos, também seriam os responsáveis pela formação dos embriões apomíticos, expressando-se entretanto, de forma diferente. Outra possibilidade é a existência de genes particulares responsáveis pelo evento apomítico, mas é improvável que este locus envolva novas e distintas vias metabólicas que incluam novos genes para a formação do saco embrionário e para a embriogênese. Uma possibilidade é que a reprodução apomítica seja uma consequência da expressão de um gene que funciona iniciando uma cascata de ações gênicas em diferentes momentos durante o curso dos eventos sexuais no óvulo. Conhecidamente as proteínas de reserva são codificadas por genes, que se expressam de forma tecido específico, constituindo-se em excelente material para estudos de eventos genéticos. Com o objetivo de detectar particularidades genéticas do processo apomítico em Citrus, estudou-se, a nível de mRNA e proteínas, a expressão diferencial de embriões zigóticos, embriões apomíticos e plântulas zigóticas de espécies de Citrus. A condição apomítica ou zigótica dos embriões e plântulas estudados, foi avaliada empregando-se marcadores moleculares do tipo RAPD e fAFLP. Verificou-se que ambos os tipos de embriões, e de plântulas, expressam um grupo de proteínas diferencialmente. A nível de mRNA detectou-se expressão diferencial tanto para a condição zigótica, quanto para a apomítica... (resumo completo, clicar no acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Apomixis or clonal seed production with mother identical embryos is a process genetically controlled. On the facultative apomixy, that takes place in the genus Citrus it is possible to observe the co-existence of sexual and apomitical reproduction on the same ovulum. However the genetic events that trigger the apomitical embryo production are presently poorly known. It is still not known if the same genes related to the zygotic embryo formation would be the same related to the formation of the apomitic embryos, exhibiting different expression patterns. Another possibility is the existence of a particular set of genes that would be responsible for the apomitic event but, it is rather improbable that such locus would control new and distinct metabolic pathways that include the action of new genes related to the formation of the embryonic sac and other set of genes for the embryogenesis itself. One should also consider that the apomitic reproduction might be a consequence of erratic gene expression of a gene that acts triggering a successive set of genetic activities on different occasions during the course of the ovulum sexual processes. The reserve proteins are coded by genes that express on specific tissues, making up a set of excellent material for genetic studies. Aiming to study such genetic particularities on the Citrus apomitic process, it was carried out a study on the differential expression of mRNA and their corresponding reserve protein using zygotic, apomitic and zygotic plants. The apomitical and zygotic embryonic conditions together with those related to early developed seedlings were evaluated using molecular markers such as RAPD, fAFLP. It was observed that both types of embryos and seedlings express a set of differential proteins... (complete abstract, access undermentioned eletronic adress) / Doutor