Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-12-09Bitstream added on 2014-06-13T18:32:18Z : No. of bitstreams: 1 denadai_j_me_jabo.pdf: 810265 bytes, checksum: 590ca7255c11f8f0b1c02155b7433db3 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Foram avaliados parâmetros clínicos, imunitários e epidemiológicos da vacinação contra a Doença de Newcastle em periquitos-australianos (Melopsittacus undulatus) através de dois experimentos. Foram utilizadas amostras vacinais Ulster 2C, B1 e La Sota do VDN. No experimento 1, foram utilizados 72 periquitos australianos com cinco meses de idade, distribuídos em 4 tratamentos de 18 animais cada, num total de três repetições, submetidos a diferentes esquemas imunoprofiláticos. A resposta imune foi avaliada pelo teste de HI, com posterior desafio frente a estirpe patogênica do VDN, aos 11 meses de vida das aves. Em todos os grupos, coletou-se suabes cloacais para pesquisa de RNA viral através da reação de cadeia de polimerase pós Transcrição Reversa (RT-PCR). Independente do grupo experimental, sinais clínicos da reação vacinal não foram observados. Os resultados dos títulos de anticorpos (HI) mostraram que os programas imunoprofiláticos ensaiados foram igualmente eficientes no estímulo da resposta imune humoral. Os periquitos-australianos desafiados mostraram-se refratários à enfermidade clínica com o VDN. Entretanto, ficou caracterizado o estado de portador de VDN nesta espécie decorridos até 19 dias da infecção experimental com este patógeno. No experimento 2, foram utilizadas aves SPF conviventes com periquitos-australianos inoculados com uma estirpe patogênica do VDN. Observou-se a transmissão de vírus patogênico (VDN) dos periquitos-australianos para as aves SPF conviventes decorridos até 19 dias da infecção experimental com este patógeno, o que vem realçar a importância do periquito-australiano como fonte potencial de infecção de VDN para aves domésticas / The clinical, epidemiological, immunological and parameters of vaccination against Newcastle disease in budgerigars (Melopsittacus undulatus) were investigated using 2 experiments. Ulster 2C, B1 and LaSota vaccines strains of the Newcastle disease virus (NDV) were used. In experiment 1, 72 budgerigars were used, and divided into 4 different groups with 18 birds per group. They were submitted to different vaccination programs. The immunological responses in these birds were measured by HI test. These birds were also challenged with a pathogenic VDN strain at 11 months of age. In all the groups, cloacal swabs were collected for RT-PCR. Independent of the group, clinical signs of reaction to the vaccine were not observed. The antibody titers (HI) results showed that the immune vaccine programs adopted were equally efficient in stimulating protective levels of humoral immune responses. Challenged budgerigars were refractory to the NDV clinical disease. However, a NDV carrier state was shown in this species until 19 days after experimental infection. In experiment 2, SPF chickens were housed with budgerigars which were previously inoculated with a pathogenic NDV strain. Therefore, the pathogenic virus (NDV) was transmitted from the budgerigars to SPF birds up to 19 days after challenge, showing the importance of the budgerigars as source of dissemination of NDV to domestic birds

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Neosporosis is an economically important disease caused the protozoan Neospora caninum and is characterized by causing reproductive problems in cattle such as abortion, return to estrus and birth of calves persistently infected. The diagnosis is based mainly on detection of antibodies anti-N.caninum by serological tests, from samples of blood serum and also through milk. The control of this disease is related to the culling of positive animals that showing reproductive disorders, since no commercially available vaccine induces immune response able of preventing transplacental transmission and thus, the parasite remains in the herd. In this study, we performed studies involving the humoral response against the parasite and the detection of antibodies in individual and bulk milk samples for the indirect immunofluorescence assay (IFA). The results are presented in three manuscripts. In chapter one, the aim was to compare serum immunoglobulin G and M, in animals experimentally infected with tachyzoites of NC-1 strain, and animals vaccinated with an inactivated vaccine. The results showed a clear oscillation in antibody titers, revealing that the heifers inoculated immune response was more durable than in those vaccinated. In the second chapter, it was performed a diagnostic test of the anti-N.caninum antibodies from milk samples, using as a test, IFA. When analyzing individual samples of milk, there was a good correlation for samples of blood serum. The higher the serum titer, the greater the probability of detecting antibodies in milk samples, both individual and bulk milk. In chapter three, the aim it was to evaluate the use of bulk milk sample for herd diagnostic or for epidemiological studies, by detecting antibodies. Similar to results obtained in chapter two, the bulk milk sample, when analyzed by IFA demonstrated to be correlated with the number of positive animals in each herd as well as with the titles presented by these animals. Thus, through this study we emphasize that with regard to vaccination, more work needs to be better conducted in order to get an immune response able to protect the fetus longer more time and more importantly, that will prevent or reduce transplacental transmission. Regarding the diagnosis by using the milk samples it was observed that both samples in individual and bulk milk, the IFA can be used safely and is considered an easier way to carry out epidemiological studies in herd cattle. / Neosporose é uma doença economicamente importante causada pelo protozoário Neospora caninum e caracteriza-se por causar problemas reprodutivos em bovinos, como aborto, retorno ao cio e nascimento de bezerros persistentemente infectados. O diagnóstico é baseado, principalmente, na detecção de anticorpos anti-N. caninum através de testes sorológicos, a partir de amostras de soro sanguíneo e também através do leite. O controle dessa enfermidade está relacionado com o descarte dos animais positivos que apresentam desordens reprodutivas, uma vez que a vacina disponível comercialmente não induz resposta imune capaz de prevenir a transmissão transplacentária e assim, o protozoário se mantém no rebanho. Neste estudo, foram realizados trabalhos envolvendo a resposta humoral frente ao protozoário bem como a detecção de anticorpos em amostras individuais e coletivas de leite pela técnica de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Os resultados estão apresentados em três artigos. No capítulo um, o objetivo foi comparar a concentração sérica de imunoglobulinas G e M, em animais infectados experimentalmente com taquizoítos da cepa NC-1 e, em animais vacinados com uma vacina inativada. Os resultados obtidos demonstraram uma evidente oscilação no título de anticorpos, sendo possível observar que nas novilhas inoculadas a resposta imune foi mais duradoura que nas vacinadas. No segundo capítulo, buscou-se diagnosticar anticorpos contra o N.caninum a partir de amostras de leite, utilizando como teste, a RIFI. Quando analisadas amostras individuais de leite, observou-se uma boa concordância em relação às amostras de soro sanguíneo. Quanto maior o título sérico, maior é a probabilidade de detectar anticorpos em amostras de leite, tanto individuais, como coletivas. No capítulo três, o objetivo foi avaliar a utilização de amostras coletivas de leite para diagnóstico de rebanho ou para estudos epidemiológicos, através da detecção de anticorpos. Semelhante aos resultados obtidos no capítulo dois, as amostras coletivas de leite, quando analisadas demonstraram estarem correlacionadas com o número de animais positivos de cada rebanho, assim como, com os títulos apresentados por esses animais. Assim, através desse estudo podemos ressaltar que em relação à vacinação, outros trabalhos precisam ser melhor conduzidos, visando buscar uma resposta imune capaz de proteger o feto por mais tempo e o mais importante, que consiga evitar ou reduzir a transmissão transplacentária. Com relação ao diagnóstico através do leite, pode-se determinar que tanto em amostras individuais como coletivas, a RIFI pode ser utilizada com segurança, sendo considerada uma maneira mais fácil de realizar estudos epidemiológicos em nível de rebanho.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4898999 bytes, checksum: a1929863574a39c391ec971fb2ed4731 (MD5) Previous issue date: 2007-03-20 / The expression of HSP70 and HSP90 was evaluated through immunoistochemistry studies in bovine inoculated with synthetic peptides SBbo23290 and SBm7462 applied simultaneously, in association or in individual presentation. The animals received three applications with 30 days of interval among them and after challenged with the Babesia bovis strain UFV1 - 9th passage. The histopathological studies showed reactivity of the lymphoid organ seven days after the first immunization with germinative centers increased. After the second immunization, it was evident the hyperplasia of the paracortical and medular areas, with subsequent decrease of the reactivity of the germinative centers after this period, suggesting formation of a memory response to the immunogens. The heat shock proteins presented basal expression. HSP70 expressed preferentially in the paracortical area, while HSP90 showed more visible immunomarker in the paracortical and medular areas. Immunoistochemical studies showed a coincidence in the expression of HSP90 and of the peptides SBbo23290 and SBm7462, when were considered the same periods of immunization, suggesting the formation of a complex HSP- peptide. The glucose, lactate, haptoglobin and C-reactive protein levels stayed inside of the values considered physiologic for the bovine species. The basal cellular immunoreaction of HSP70 and HSP90, as well as the maintenance of the normal levels of the biochemical parameters during the whole period of the experiment, suggest that the stress provoked by the synthetic peptides was insufficient to cause damage to the organism. In other hand, the maintainance of the health condition of the animals influenced the immunological response, and the basal levels of the heat shock proteins might have been enough to promote cytoprotection after the challenge. / A expressão de HSP70 e HSP90 foi avaliada por meio de estudos imunoistoquímicos, em bovinos inoculados com peptídeos sintéticos SBbo23290 e SBm7462, aplicados simultaneamente, em associação ou em apresentação individual. Os animais receberam 3 aplicações em intervalos de 30 dias entre si e posteriormente desafiados com cepa de Babesia bovis (UFV1- 9ª passagem). Os estudos histopatológicos mostraram reatividade do órgão linfóide sete dias após a primeira imunização, com centros germinativos aumentados. Após a segunda imunização, ficou evidente a hiperplasia da região paracortical e medular, com subseqüente diminuição da reatividade dos centros germinativos após este período, sugerindo formação de uma resposta de memória aos imunógenos. As proteínas de choque térmico apresentaram expressão basal. A HSP70 expressou, preferencialmente, na região paracortical, enquanto que a HSP90 mostrou imunomarcação mais visível nas regiões paracortical e medular. Estudos imunoistoquímicos mostraram uma coincidência na expressão de HSP90 com os peptídeos SBbo23290 e SBm7462, quando se consideraram os mesmos períodos de imunização, sugerindo a formação de um complexo HSP-peptídeo. Os níveis de glicose, lactato, haptoglobina e proteína C-reativa mantiveram-se dentro dos valores considerados fisiológicos para a espécie bovina. A imunomarcação celular basal de HSP70 e HSP90, bem como a manutenção dos níveis normais das variáveis bioquímicas durante todo o período do experimento, sugerem que o estresse provocado pelos peptídeos sintéticos foi insuficiente para causar dano ao organismo. Em contrapartida, a manutenção do estado de saúde dos animais influenciou a reposta imunológica, e os níveis basais das proteínas de choque térmico podem ter sido suficientes para promover citoproteção após o desafio.

Orientador: Flávio Ruas de Moraes / Banca: Margaria Maria Barros / Banca: Júlio Hermann Leonhardt / Banca: Maria José Tavares Ranzani de Paiva / Banca: Newton Castagnolli / Resumo: O presente trabalho teve por objetivos avaliar a inter-relação entre a suplementação alimentar com 0,3% de parede celular de levedura e vacinação com extrato oleoso de Streptococcus agalactiae sobre o desempenho produtivo, parâmetros fisiopatológicos e componente celular inflamatório em tilápia do Nilo. Oitenta e quatro tilápia com peso médio inicial de 125,0 + 1,5g foram distribuídas em 12 caixas de fibra, seguindo o esquema fatorial 2x2x3, correspondente a dois níveis de parede celular de levedura (0,0 e 0,3% parede celular), dois tratamentos (solução salina e vacina) e três coletas após o desafio com a bactéria viva (seis, 24 e 48h) com sete repetições. Os peixes foram alimentados durante 77 dias. A vacinação foi realizada 60 dias após o início da alimentação, por meio da inoculação intraperitoneal de 0,5 mL da vacina contendo 108 UFC/mL. Após 15 dias da vacinação, todos os peixes foram submetidos ao desafio com Streptococcus agalactiae vivo, por meio da inoculação intraperitoneal de 108 UFC/mL, veiculadas em 0,5 mL de solução salina (0,85%). As análises do desempenho produtivo mostraram que a suplementação dietética com parede celular de levedura associada à vacinação não influenciou o desempenho produtivo da tilápia do Nilo e o melhor desempenho ocorreu na utilização da parede celular de levedura. Os parâmetros hematológicos mostraram que a suplementação com 0,3% de parede celular de levedura associada à vacinação contra Streptococcus agalactiae em tilápia do Nilo foi essencial para incrementar a hematopoiese. A suplementação alimentar com 0,3% de parede celular de levedura associada à vacinação melhorou a resposta de defesa dos peixes, no que se refere à inflamação aguda e destaca a importância da vacinação. / Abstract: The work evaluates the interrelation between supplementation diets with 0,3% of cellular wall of yeast and vaccination with oily extract of Streptococcus agalactiae in the growth performance, phisiopathological parameters and inflamatory cellular component of Nile tilapia (Oreochromis niloticus). Eighty four tilapia with initial average weight of 125,0 ± 1,5g were distributed in 12 fiber aquaria, following the factorial design 2x2x3, corresponding to two levels of cellular wall of yeast (0,0 and 0,3% cellular wall), two treatments (saline solution and vaccine) and three collections, after challenge with bacteria (six, 24 and 48h) with seven repetitions. Fish were fed during 77 days. The vaccination was accomplished 60 days after the beginning of the feeding, through inoculation intraperitoneal of 0,5 mL of the vaccine containing 108 UFC/mL. After 15 days of the vaccination, all fishes were challenged with Streptococcus agalactiae, through inoculation intraperitoneal of 108 UFC/ml, diluted in 0,5 mL of saline solution (0,85%). The analyses of the pattern performance showed that supplementation diets with cellular wall of yeast associated to vaccination did not influence the growth performance of Nile tilapia and the best growth performance was obtained using cellular wall of yeast. The phisiopathological parameters showed supplementation diets with 0,3% of cellular wall of yeast associated to the vaccination against Streptococcus agalactiae in Nile tilapia were essential to increase the hematopoiesis. The supplementation diets with 0,3% of cellular wall of yeast associated to the vaccination improved the immune response of fish, in relation to the sharp inflammation and it detaches the importance of the vaccination. / Doutor

A vacinação constitui-se em uma estratégia eficaz na prevenção de doenças e redução da morbi-mortalidade. No entanto, isso expõe principalmente as crianças a procedimentos dolorosos, que podem acarretar em consequências, imediatas e a longo prazo, relacionadas à resposta de dor. Para minimizar essas consequências, diversas intervenções têm sido investigadas para alívio da dor decorrente da vacinação, entre essas destaca-se a sacarose. Apesar da efetividade comprovada da sacarose para alívio da dor em procedimentos únicos e na vacinação, sabe-se que diversos fatores podem interferir na reatividade à dor, e pouco se sabe sobre o uso repetido da sacarose nas vacinas igualmente repetidas nos primeiros meses de vida. Assim, com os objetivos de examinar os fatores que interferem na reatividade à dor na vacinação dos lactentes entre dois e cinco meses de idade que receberam sacarose, e avaliar e comparar a reatividade à dor na vacinação dos lactentes nessa idade, desenvolvemos um estudo transversal observacional que incluiu 272 lactentes que compareceram à sala de vacina do estudo para receber as vacinas propostas no calendário de vacinação para o estado de São Paulo, no período de outubro de 2014 a maio de 2015, e cujos pais ou responsáveis aceitaram participar da pesquisa, mediante assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. Foram excluídos: bebês que não residiam no município de Ribeirão Preto; os com suspeita ou intolerância a frutose; com doença congênita do sistema nervoso; com malformação ou prejuízos neurológicos severos; os que não seguiram o calendário regular de vacinação ou necessitavam de vacinas especiais. Foram coletados os dados de proporção da mímica facial, frequência cardíaca (FC) e choro nas fases basal (90s), pré-injeção (120s), injeção e pós-injeção (180s) e os fatores de exposição relacionados ao nascimento, a mãe e que antecedem o momento da própria vacina. Os dados comportamentais foram obtidos através da observação sistemática, com análise sequencial segundo a segundo. O banco de dados foi estruturado em planilha do Excel e exportado para o software SPSS. Para as análises, considerou-se como desfecho principal a proporção de mímica facial na fase injeção. No modelo de regressão linear não ajustada identificamos que houve influência para as variáveis de exposição: peso atual, número de gestações anteriores, mímica facial na fase basal, e FC na fase basal considerando um p<0,20. Para o modelo de regressão múltipla identificou apenas a influência da mímica facial na fase basal (p=0,001). Como fatores de risco, os testes t student para as variáveis numéricas de distribuição normal e Mann-Whitney para variáveis categóricas ou variáveis numéricas de distribuição não normal, identificamos risco para as variáveis mímica facial foi estatisticamente significante, apenas para as variáveis tipo de aleitamento materno (p=0,048) e FC (p=0,030), mímica facial (p=0,000) e choro (p=0,029). Para a análise de medidas repetidas (ANOVA-RM) identificamos que a proporção de mímica facial foi significativamente maior na administração das três vacinas consecutivas (pneumo + VIP + penta), em comparação com a vacina única (meningocócica), somente na fase pós-injeção (p<0,001). Para as participações repetidas duas ou três vezes do mesmo lactente (n=460), identificamos que a proporção de mímica facial diferiu estatisticamente entre as fases nos quatro grupos de diferentes idades (p>0,05), apresentando maiores valores na fase injeção. Concluímos que, apesar da efetividade da sacarose para alívio da dor, permanecem fatores de risco que interferem na reatividade à dor, principalmente diferenças na mímica facial no pós-injeção quando comparadas vacinas múltiplas e consecutivas (pneumocócica 10 valente, poliomielite injetável, pentavalente) versus vacina única (meningocócica C) / Vaccination is an effective strategy to prevent disease and reduce morbidity and mortality. However, this exposes patients, specially, children to painful procedures, which can lead to immediate and long-term consequences related to the pain response. To minimize these consequences, several interventions have been investigated to relieve pain resulting from vaccination, among which sucrose. Despite the proven effectiveness of sucrose for pain relief in single procedures and vaccination, it is known that several factors may interfere with reactivity to pain, and little is known about the repeated use of sucrose in the equally repeated vaccines in the first months of life. Thus, with the aim of examining the factors that interfere with reactivity to pain in the vaccination of infants between two and five months of age who received sucrose, and to evaluate and compare reactivity to pain in the vaccination of infants at this age, we developed an observational cross-sectional study which included 272 infants who attended the study\'s vaccine room to receive the vaccines proposed in the vaccination schedule for the State of São Paulo, from October 2014 to May 2015, and whose parents or guardians agreed to participate in the study through signed Free and Informed Consent Form. The following were excluded: infants who did not live in the city of Ribeirão Preto; those with suspected or intolerance to fructose; with congenital nervous system disease; with malformation or severe neurological impairment; those who did not follow the regular schedule of vaccination or needed special vaccines. Data were collected on the proportion of facial mimetic, heart rate and crying in the basal (90s), preinjection (120s), injection and post-injection (180s) and exposure factors related to birth and mother. Behavioral data were obtained through systematic observation, with sequential analysis according to each second. The database was structured in Excel spreadsheet and exported to SPSS software. For the analyzes, the main outcome was the proportion of facial mimetics in the injection phase. In the unadjusted linear regression model, we identified that there was influence on the variables of exposure: current weight, number of previous pregnancies, facial mimetic in the basal phase, and heart rate (HR) in baseline, considering a p<0.20. For the multiple regression model, only the influence of facial mimicry on the basal phase (p=0.001) was identified. As risk factors, student t tests for the numerical variables of normal distribution and Mann-Whitney for categorical variables or numerical variables of non-normal distribution, we identified risk for the variables; (p=0.048) and HR (p=0.030), facial mimetic (p=0.000) and crying (p=0.029). For the analysis of repeated measures (ANOVA-RM) we identified that the proportion of facial mimetics was significantly higher in the administration of the three consecutive vaccines (pneumo + VIP + penta), compared to the single (meningococcal vaccine), only in the post-injection phase (p<0.001). For repeated participation two or three times of the same infant (n=460), we identified that the proportion of facial mimicry differed statistically between the phases in the four groups of different ages (p>0.05), presenting higher values in the injection phase. We conclude that despite the effectiveness of sucrose for pain relief, risk factors that interfere with pain reactivity, mainly differences in facial mimicry post-injection when multiple and consecutive vaccines (10-valent pneumococcal, injectable polio, pentavalent) versus single vaccine (meningococcal C)

Introdução: Nas últimas quatro décadas o Programa Nacional de Imunização (PNI) apresentou grande evolução, alcançando ótimas estimativas de cobertura vacinal calculadas por meio de dados administrativos. Este método, entretanto, não permite o cálculo da proporção de crianças com esquema completo e a avaliação da oportunidade (vacinação na idade preconizada). Sistemas informatizados de imunização (SII) permitem uma avaliação mais acurada da cobertura vacinal. Objetivos: Descrever e avaliar a cobertura vacinal, tanto de vacinas específicas quanto do esquema completo, assim como a oportunidade de vacinação, em crianças aos 12 e 24 meses de idade no Município de Araraquara nascidas entre 1998 e 2013. Métodos: Este estudo de série temporal usou dados de um SII, Sistema Juarez, do Município de Araraquara. Para cada coorte de nascimento, considerou-se o calendário vacinal do PNI vigente. Verificou-se a validade das doses e analisaram-se as coberturas vacinais oportunas e atualizadas para vacinas específicas e esquema completo. As tendências das coberturas vacinais foram analisadas por meio do método Prais-Winsten e a oportunidade do esquema completo foi apresentada por uma adaptação do método Kaplan-Meier. Resultados: Todas as coberturas de vacinas específicas apresentaram tendência crescente aos 12 meses de idade. Aos 24 meses, as coberturas atualizadas apresentaram tendência crescente e as oportunas, estacionárias. As coberturas oportunas e atualizadas do esquema completo no período foram de 62por cento e 84por cento aos 12 meses, respectivamente, e de 41por cento e 78por cento aos 24 meses, e apresentaram tendência estacionária, principalmente por conta da limitação de idade na aplicação da vacina Rotavírus. O método Kaplan-Meier permitiu visualizar que as vacinas aplicadas a partir dos seis meses de idade representam o momento de quedas mais acentuadas nas coberturas e que a introdução de novas vacinas não apresentou efeito negativo constante nas mesmas. As quedas nas coberturas foram mais relacionadas à idade de aplicação da dose do que ao número de doses de uma vacina. A porcentagem de crianças que receberam doses inválidas e com doses em atraso foi menor do que a encontrada na literatura. Conclusões: Este estudo mostrou as potencialidades de um SII numa cidade de médio porte, que permite análises mais complexas e acuradas das coberturas vacinais. / Introduction: The national immunization program (NIP) has improved in the last four decades, reaching high estimates of vaccination coverage calculated by administrative data. However, this method does not allow to assess timeliness, i.e. in the recommended age, and the proportion of children with complete vaccination schedules. Immunization information systems (IIS) enable a more accurate assessment of vaccination coverage. Objectives: To describe and assess vaccination coverage, both the specifics vaccines and the complete vaccination schedule, as well as timeliness of coverage, in children 12 and 24 months old in Araraquara city born between 1998 and 2013. Methods: This time series study used data from an IIS, Juarez System, in Araraquara city. For each birth cohort, it was considered respective NIP vaccination schedules. It was assessed the validity of doses and timely and up-to-date vaccination coverage for specific vaccines and complete schedule. Trends in vaccination coverage were analyzed using the Prais-Winsten method. Timeliness of complete schedule was presented by Kaplan- Meier method. Results: All specific vaccine coverages showed increasing trend at 12 months old. At 24 months, only up-to-date coverages increased. The average coverages of timely and up-to-date complete schedule over the studied period were 62per cent and 84per cent at 12 months old, respectively, and 41per cent and 78per cent at 24 months, and no trend was found, mainly due to strict age limits for receipt of rotavirus vaccine. The Kaplan-Meier method showed that vaccines administered from six months of age caused significant decrease in coverage and the introduction of new vaccines did not present a constant negative effect on the coverage. Recommended age appeared to affect vaccine delay more than number of doses. The proportion of children undervaccinated and who received invalid was lower than in other studies. Conclusions: This study showed the potential of an IIS in the assessment of vaccine coverage in a medium-sized city, presenting more accurate forms of analysis.

A brucelose bovina é uma das zoonoses mais difundidas no mundo e provoca prejuízos econômicos decorrentes de problemas reprodutivos. Diversos investimentos e esforços têm sido feitos para preveni-la em várias partes do mundo. Em destaque no cenário da pesquisa mundial sobre brucelose, está a busca por uma vacina que seja inócua aos humanos e animais, garanta uma boa imunidade e, principalmente não interfira nos testes de diagnóstico. Desde a criação da primeira vacina contra brucelose, diversas outras foram desenvolvidas, no entanto, poucas foram aceitas e usadas em larga escala. As perspectivas para o futuro das vacinas contra brucelose, demostram ser tão variadas quanto o seu passado. Nesse contexto, o objetivo desse trabalho é fazer uma reflexão sobre as vacinas contra brucelose considerando as principais vacinas desenvolvidas no passado, as utilizadas na atualidade e as perspectivas para a vacinologia contra brucelose. / Bovine brucellosis is one of the most widespread zoonoses in the world and it causes economical losses due to reproductive problems. Several investiments and efforts have been done to prevent bovine brucellosis in many parts of the world. The search for a vaccine which is harmless to both human and animals, ensure good immunity and , mainly, does not interfere in diagnostic tests is featured on the scene of worldwide research on brucellosis. Since the creation of the first vaccine against brucellosis, several others have been created. However, few have been accepted and widely used. The perspectives for the future of vaccines against brucellosis can be seen as varied as they were in the past. In this context, the aim of this study is to reflect on brucellosis vaccines considering the main vaccines developed in the past, the ones in use today and the perspectives for the future of vaccinology againt brucellosis.

O objetivo geral desta pesquisa foi avaliar a resposta imune (RI) humoral e celular de bezerros recém-nascidos mediante imunização passiva e ativa, usando como modelo o Vírus da Diarreia Viral Bovina (BVDV) e o Herpesvírus Bovino tipo-1 (BoHV-1). Esta pesquisa foi dividida em duas etapas e seus dados estão apresentados em dois capítulos. Capítulo 1- Acompanhou-se a imunização passiva de bezerros do nascimento até os seis meses de idade e a influência da vacinação materna no período pré-parto nessa resposta. Os animais foram distribuídos em dois grupos experimentais que receberam colostro de mães não imunizadas (G1, n=4) e (G2, n=6) de mães imunizadas no período pré-parto para o BVDV e BoHV-1. A colostragem foi feita pela administração de seis litros de colostro nas primeiras doze horas de vida, distribuídas em duas mamadas. Nesta etapa foi possível verificar: (1) a presença de títulos de ACs neutralizantes apenas no grupo de bezerros que receberam colostro de mães imunizadas, obtendo soroconversão após a mamada de colostro em 2/6 (33%) bezerros para o BVDV e 6/6 (100%) para o BoHV-1; (2) manutenção dos títulos de ACs protetores até os três meses de vida. Em relação a RI celular: (3) observou-se maior proporção de células T auxiliares CD4+ (P=0,05) no grupo de bezerros que receberam colostro de mães imunizadas no período pré-parto; (4) o leucograma dos bezerros demonstrou respostas inflamatórias em alguns momentos desta pesquisa, mais intensa nos animais que ingeriram colostro proveniente de mães nãoimunizadas. Capítulo 2- Acompanhou-se a imunização de bezerros para BVDV e BoHV-1 aos seis meses de idade. Dez bezerros foram distribuídos em dois grupos de bezerros não vacinados (VAC-, n=5) e vacinados para o BVDV e BoHV-1 (VAC+, n=5), as análises foram realizadas antes da imunização aos 180 dias (T0), após a 1°dose aos 210 dias (T1) e após a 2° dose aos 240 dias (T2). Os resultados obtidos para avaliação da RI humoral foram: (1) soroconversão de 2/5 (40%) animais no momento T1 e 3/5 (60%) no T2 para o BVDV; (2) soroconversão em 2/5 (40%) no T1 e 5/5 (100%) no T2 para o BoHV-1. Para a RI celular observou-se: (3) maior expressão de CD25+ pelas subpopulações de linfócitos T gama-delta WC1+ no VAC+, observando-se diferença estatística no momento T1 (P=0,0016). Com base nos resultados obtidos nas duas etapas experimentais desta pesquisa pode-se concluir que a vacinação materna é uma estratégia para melhorar a qualidade do colostro e as repostas imunes humoral e celular dos bezerros para BVDV e BoHV-1; a duração da imunidade materna considerando-se níveis protetores de Acs foi de três meses; os componentes do colostro influenciaram na resposta inflamatória dos bezerros à exposição natural aos patógenos; a vacinação dos bezerros aos seis meses de idade estimulou a resposta imune humoral para BoHV-1 e parcial para BVDV. / The aim of this research was to evaluate the humoral and cellular immune response (IR) of newborn calves by active and passive immunization, using by model the Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV) and Bovine Herpesvirus type-1 (BoHV-1). This research was divided in two stages and the datas are presented in two chapters. Chapter 1: Was followed the passive immunization of calves from birth until six months old and the maternal vaccination influence on pre-partum period on this response. The animals were divided in two experimental groups that received colostrum from unvaccinated mothers (G1, n = 4) and (G2, n=6) from immunized mothers in the pre-partum period to BVDV and BoHV-1. The calves received six liters of colostrums on the first twelve hours of life, divided in two feedings. At this stage was verified: (1) the presence of neutralizing titers antibodies (Abs) only in group of calves that received colostrum from immunized mothers, getting seroconversion after feeding in 2/6 (33%) of calves for BVDV and 6/6 (100%) for BoHV-1, (2) maintenance of Abs titers protectors up to three months of life. In relation to immune cellular response: (3) was observed higher proportion of helper T cells CD4+ (P = 0.05) in the group of calves that received colostrum from immunized mothers during pre-partum; (4) the leukogram of calves showed inflammatory responses in some moments of this research, more intense in animals that ingested colostrums from non-immunized mothers. Chapter 2: Was followed the immunization of calves for BVDV and BoHV-1 at six months old. Ten calves were divided in two groups of calves non-vaccinated (VAC-, n = 5) and vaccinated for BVDV and BoHV-1 (VAC +, n = 5). The analyzes were performed before immunization at 180 days (T0), after the 1st dose at 210 days (T1) and after the 2nd dose at 240 days (T2). The results for evaluation of immune humoral response were: (1) seroconversion 2/5 (40%) animals at the T1 moment and 3/5 (60%) of T2 for BVDV, (2) soroconversion on 2/5 (40 %) in the T1 to 5/5 (100%) at T2 for BoHV-1. For the immune cellular response was observed: (3) increased expression of CD25+ subpopulations of T lymphocytes by gamma-delta WC1+ in VAC+, observing statistical difference in T1 moment (P = 0.0016). Based on the results obtained in the two experimental stages of this research can be concluded that maternal vaccination is a strategy to improve the quality of colostrum and humoral and cellular immune response of calves to BVDV and BoHV-1, the duration of maternal immunity considering protective levels of Abs was three months. The components of colostrum influence the inflammatory response of calves to natural exposure to pathogens. The vaccination of calves at six months old stimulated the humoral immune response to BoHV-1 and partial for BVDV.

Orientador: Antonieta Keiko Kakuda Shimo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T09:24:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ozaki_LuciaMariaTonzarRistori_M.pdf: 1979155 bytes, checksum: 1fc804f15fc5551ca95f43f174e4d1c7 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Trata-se de um estudo descritivo/exploratório com abordagem qualitativa cujo objetivo é descrever o significado da vacina contra a rubéola para mulheres que se descobriram grávidas após receberem a vacina dupla viral, por ocasião da campanha contra rubéola2001, na DIR XX de São João da Boa Vista (DIR XX). Pretende-se, também, analisar a percepção das mulheres relativa às orientações recebidas por ocasião da campanha e durante o acompanhamento pré-natal e como foram apoiadas para enfrentar o processo. O estudo foi realizado nos municípios pertencentes à DIR XX e os sujeitos da pesquisa foram 18 mulheres grávidas e mulheres que engravidaram até 30 dias após aplicação da vacina contra rubéola, consideradas suscetíveis para a rubéola, residentes em 10 municípios da região. Foi utilizado como quadro teórico a teoria das representações sociais, tecnologia em saúde e os aspectos clínicos, epidemiológicos e preventivos da rubéola e da síndrome da rubéola congênita. A coleta de dados foi realizada através de entrevistas semi-estruturas, gravadas. A ordenação dos dados foi realizada através da técnica do Discurso do Sujeito Coletivo proposta por Lefèvre e Lefèvre, emergindo dois temas: I. A mulher. A campanha de vacinação contra a rubéola. O acompanhamento prénatal. II. O significado da vacina contra a rubéola (representada socialmente como ameaça a integridade física da mulher, à de seu filho e ao seu relacionamento conjugal). Os resultados revelaram que o processo de orientação da mulher nas várias fases da atenção foi normatizado, fragmentado, muitas vezes, inadequado e sem qualificação, de modo a não favorecer o "empowerment" e não ajudar a mulher a atravessar com tranqüilidade a situação vivenciada. Observou-se profissionais de saúde despreparados tecnicamente para proverem o cuidado às mulheres, falta de integração entre os serviços, gerando descontinuidade e a não oportunidade da atenção, bem como a não incorporação de toda tecnologia de saúde disponível, no cuidado com a mulher. Constatou-se a importância das redes de apoio social e profissional auxiliando no enfrentamento da situação. As mulheres, através do discurso, desvelaram a situação vivenciada por elas e a diversidade de significados da vacina contra a rubéola quando aplicada durante a gravidez. Constitui-se um grande desafio para gestores e profissionais de saúde a produção do cuidado, ao se disponibilizar procedimentos em saúde. O estudo está inserido na linha de pesquisa - processo de cuidar em saúde e enfermagem, área temática - saúde da mulher / Abstract: This is a descriptive and exploratory research with a qualitative approach, whose objectives are to describe what did the vaccine against rubella mean to women who have found themselves pregnant after having received the measles-rubella vaccine, during the 2001 's campaign against rubella, in the DIR XX from São João da Boa Vista (DIR XX); and to analyze how those women interpreted the orientation given during the campaign and during the antenatal examination, and how were they supported when facing the situation. The research occurred in the municipal districts under the control of DIR XX and the individual were women who were considered to be susceptible to rubella and became pregnant within 30 days after being vaccinated against it. It took part of the study, 18 women who lived in 10 different towns in the region. As the theoretical framework of the study, it was used the theory of social representation, technology in Health, and the clínic, epidemical and preventive aspects of rubella and congenital rubella syndrome. Data was gathered through recording semi-structured interviews, following a guideline script. The data was organized using the technique of the Collective Subject Speech proposed by Lefévre e Lefèvre, which unveiled two topics: I.The woman. The vaccination campaign against rubella. The antenatal care. II. The signification of the rubella vaccine (socially seem as a threat to the woman's physical integrity, as well as to their sons and to their conjugal relationship). The results suggest that the orientation process during the various phases of attention during the occasion has been unsatisfactorily standardized, fragmented, and, in several cases, improper and not qualified, and thus it does not allow the empowerment, and does not help women to experience the situation tranquilly. It can be observed health professionals technically unprepared to fulfill women with proper care; a lack of integration between services, which generates discontinuity and incapability of being properly attended, as well as the incapability to incorporate all technologies available to their care. It has been confirmed the importance of the social and professional networks to help women under this situation. Through their speech, women have unveiled their situation and the various meanings of by being vaccinated during pregnancy. It is a great challenge to supervisors and health professionals to produce care and to make available health procedures. The study is related to research lines - procedures to take care in health and nursing, thematic field - woman's health / Mestrado / Enfermagem e Trabalho / Mestre em Enfermagem

A Leucose Enzoótica dos Bovinos (LEB) é uma enfermidade neoplásica, infectocontagiosa, pluri-sintomática, de evolução crônica, que compromete os órgãos linfopoiéticos e está associada ao desenvolvimento de linfocitose persistente (LP) e linfossarcoma. Acarreta diminuição na produção, quer por seus efeitos danosos diretos, quer pelos indiretos. No entanto, seu efeito na função e na quantidade das diferentes subpopulações de linfócitos, assim como seu papel no estabelecimento de outras doenças oportunistas, ainda não está claro. O presente estudo avaliou a resposta imunitária de bovinos da raça Holandês Preto e Branco naturalmente infectados pelo vírus da LEB (VLB), após desafio antigênico fornecido por vacinação contra o vírus da febre aftosa. Para tal, foram coletadas amostras sanguíneas antes do desafio e, após o desafio, semanalmente, por sete semanas, de dez vacas soropositivas, sem LP; de dez vacas soropositivas, manifestando LP; e de dez vacas soronegativas. Foram avaliadas as alterações quantitativas das diferentes subpopulações de leucócitos circulantes; a função dos linfócitos B, por meio da quantificação de diferentes isotipos de imunoglobulinas (Ig) séricas; os índices de proliferação linfocitária; os índices de morte celular por apoptose ou por necrose; e as concentrações séricas de interleucina-10 (IL-10), IL-12, inteferon- (IFN-&gamma;) e fator de necrose tumoral-&alpha; (TNF-&alpha;). Foi verificada a normalidade da distribuição dos resultados obtidos, utilizando-se do teste de Anderson-Darling, e sua homoscedasticidade, utilizando-se do teste F (para dados que apresentaram distribuição normal) ou do teste de Lavene (para dados que não apresentaram distribuição normal). Para a avaliação das diferenças entre as médias dos resultados obtidos, de acordo, respectivamente, com a ocorrência ou não de homoscedasticidade, foram feitos, para dados com distribuição normal, os testes de análise de variância (One-way ANOVA), seguida do teste de Tukey-Kramer ou o teste t; e, para dados que não apresentaram distribuição normal, o teste de Mann-Whitney ou o teste de Kruskal-Wallis. Para todos os resultados, foram consideradas significantes as análises que apresentaram p&le;0,05. Verificou-se que não houve diferença nas concentrações séricas de IgG1, de IgM e de IgA, tanto entre os tempos de coleta, quanto, a cada tempo, entre animais pertencentes aos diferentes grupos. As concentrações séricas de IgG2 aumentaram, após a vacinação, em todos os animais (p<0,05). Todavia, 17 dias após o desafio antigênico, as concentrações séricas de IgG2, em animais manifestando LP foram, a cada tempo de coleta, menores (p<0,01) que aquelas verificadas nos animais pertencentes aos demais grupos, indicando que animais com LP apresentam resposta humoral menos intensa e menos duradoura. Observou-se que ocorreu um aumento no índice de proliferação de linfócitos sanguíneos (p<0,01), 24 dias após a vacinação contra o vírus da febre aftosa, independente da presença de infecção pelo VLB. A partir deste momento, ocorre um aumento na porcentagem de linfócitos &gamma;&sigma; circulantes (p<0,05) e posterior diminuição nas concentrações séricas de IgG2 (p<0,05), indicando regulação desta resposta humoral por linfócitos &gamma;&sigma;. Em bovinos com LP, o aumento na porcentagem de linfócitos circulantes foi maior (p<0,05), ocasionando diminuição mais intensa e mais precoce nas concentrações séricas de IgG2. Constatou-se que a LP ocorre em decorrência de menor índice de apoptose, posto que as porcentagens de leucócitos sofrendo processo de apoptose foram menores (p&le;0,001) entre as células obtidas de animais manifestando LP, do naquelas coletadas dos animais pertencentes aos demais grupos. Verificou-se que as concentrações séricas das citocinas de perfil Th1, IL-12 e IFN-&gamma;, são maiores em amostras sangüíneas de animais infectados pelo VLB, alinfocitóticos (p<0,01), ao passo que as concentrações séricas das citocinas de perfil Th2, IL-10 e TNF-&alpha;, são maiores em amostras sangüíneas de animais infectados manifestando LP (p<0,01), indicando que alterações no perfil sérico de citocinas podem ser causa ou consequência da LP. Em resposta ao desafio vacinal, ocorre uma elevação nas concentrações séricas de IL-10 (p<0,01), de TNF-&alpha; (p=0,005) e de IFN-&gamma; (p<0,01), três dias após o desafio, e de IL-12 (p<0,001), dez dias após o desafio. A elevação na concentração sérica de IL-10 perdura até 31 dias após o desafio e pode ser responsável pelo maior índice de proliferação de linfócitos &gamma;&sigma; verificado a partir de 31 dias após a vacinação. Foi observado que a maioria dos linfócitos B circulantes, em bovinos, consiste de linfócitos B1 e, em animais infectados pelo VLB, a LP ocorre em decorrência de um aumento na porcentagem de linfócitos B1a (p<0,05). Além disso, em animais infectados pelo VLB, apresentando LP, as relações entre linfócitos T auxiliares e citotóxicos são menores (p<0,01) e a porcentagem de linfócitos &gamma;&sigma; é maior (p<0,01), indicando atividade viral nas células infectadas. Assim, os resultados permitem-nos concluir que animais infectados pelo VLB, manifestando LP, apresentam alterações na resposta imunitária frente vacinação contra o vírus da febre aftosa. / Enzootic Bovine Leukosis (EBL) is an infectious, multi-symptomatic, chronic, neoplastic disease, which undermines the lymphopoietic organs and is associated with the development of persistent lymphocytosis (PL) and lymphosarcoma. Infected animals present a decrease of production, either by its direct or its indirect harmful effects. However, its effect on the function and quantity of different lymphocyte subpopulations, as well as its role in the establishment of other opportunistic diseases, are unclear. This study evaluated the immune response of Holstein dairy cattle naturally infected with Bovine Leukosis Virus BLV, after antigen challenge provided by vaccination against foot and mouth disease (FMD) virus. To this end, blood samples were collected before challenge and after challenge, weekly, for seven weeks, from ten seropositive cows without PL, from ten seropositive cows expressing PL, and from ten seronegative cows. We evaluated the quantitative changes of different subpopulations of leukocytes; the function of B lymphocytes, through the quantification of different isotypes of immunoglobulins (Ig) serum concentration; the rate of lymphocyte proliferation; the rate of cell death by apoptosis or necrosis; and the serum concentrations of interleukin-10 (IL-10), IL-12, inteferon-&gamma; (IFN-&gamma;), and tumor necrosis factor-&alpha; (TNF-&alpha;). It was verified the normality of distribution of the results using the Anderson-Darling test, and their homoscedasticity, using the F test (for data with normal distribution) or the Levene test (for data without normal distribution). For the evaluation of differences between the average results, according respectively to the presence or absence of homoscedasticity, we used, for data with normal distribution, One-way ANOVA test, followed by the Tukey-Kramer test or the t test, and, for data without normal distribution, the Mann-Whitney test or the Kruskal-Wallis test. Results with p&le;0.05 were considered statistically significant. There were no differences related to serum IgG1, IgM, and IgA concentrations, both among sampling time and, every time, among animals belonging to different groups. IgG2 serum concentrations increased after vaccination in all animals (p<0.05). However, in animals expressing PL, each collection time, 17 days after antigen challenge, IgG2 serum concentration was lower (p<0.01) than those observed in animals belonging to other groups, indicating that animals with PL present less intense and less enduring humoral response. It was observed that there was an increase in the rate of lymphocyte proliferation (p<0.01) 24 days after vaccination against FMD virus, irrespective of the presence of infection by BLV. From this moment, there was an increase in the percentage of &gamma;&sigma;-lymphocytes (p<0.05) and a subsequent decrease in serum IgG2 (p<0.05), indicating regulation of this humoral response by &gamma;&sigma;-lymphocytes. In cattle with PL, the increase in the percentage of &gamma;&sigma;-lymphocytes was higher (p<0.05), leading to more intense and earlier decrease in IgG2 serum concentration. It was found that PL is due to a lower rate of apoptosis, since the percentage of leukocytes undergoing apoptosis was lower (p&le;0.001) among cells obtained from animals expressing PL, when compared to those collected from animals from the other groups. It was found that serum concentrations of Th1 cytokines, specifically IL-12 and IFN-&gamma;, were higher in blood samples from nonlymphocytotic infected animals (p<0.01), whereas serum concentrations of Th2 cytokines, particularly IL-10 and TNF-&alpha;, were higher in blood samples from infected animals expressing LP (p<0.01), indicating that changes in serum cytokines profile may be a cause or a consequence of PL. IL-10 (p<0.01), TNF-&alpha; (p=0.005), and IFN-&gamma; (p<0.01) serum concentrations increased three days after the challenge, and IL-12 serum concentration increased (p<0.001), ten days after the challenge. The increase in IL-10 serum concentration lasts until 31 days after the challenge and may account for the higher rate of &gamma;&sigma;-lymphocyte proliferation found from 31 days after vaccination. It was observed that the majority of circulating B lymphocytes in cattle consists of B1 lymphocytes and that, in BLV-infected animals, PL occurs due to an increase in the percentage of B1a lymphocytes (p<0.05). Moreover, in lymphocytotic BLV-infected animals, the rate between helper and cytotoxic Tlymphocytes are smaller (p<0.01) and the percentage of &gamma;&sigma;-lymphocytes is greater (p<0.01), indicating viral activity in infected cells. Thus, results allow us to conclude that lymphocytotic BLV-infected animals show changes in the immune response after vaccination against FMD virus.