Submitted by Jos? Henrique Henrique (jose.neves@ufvjm.edu.br) on 2018-09-12T18:39:06Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) yrllan_ribeiro_sincura.pdf: 1372727 bytes, checksum: 658bffd6fd52f41fbd207a828e8d098a (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2018-10-02T16:31:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) yrllan_ribeiro_sincura.pdf: 1372727 bytes, checksum: 658bffd6fd52f41fbd207a828e8d098a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-02T16:31:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) yrllan_ribeiro_sincura.pdf: 1372727 bytes, checksum: 658bffd6fd52f41fbd207a828e8d098a (MD5) Previous issue date: 2018 / Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM) / A leishmaniose visceral (LV) ? uma doen?a altamente letal quando n?o tratada e de car?ter reemergente. ? transmitida atrav?s da picada do flebotom?neo f?mea da esp?cie Lutzomyia longipalpis, inseto com grande distribui??o nas Am?ricas. O controle vetorial ? realizado atrav?s da aplica??o de inseticidas piretr?ides sint?ticos residuais de a??o r?pida sobre os insetos como a ?-cipermetrina e a deltametrina. Nos ?ltimos tempos tem se observado o surgimento de popula??es resistentes o que tem aumentado o interesse pela descoberta de novas mol?culas que possam ser utilizadas no controle de vetores. As plantas s?o um importante e promissor campo de pesquisa, uma vez que j? produzem mol?culas com a??o inseticida. Este estudo objetivou analisar a a??o inseticida de extratos de folhas e cascas de Protium heptaphyllum sobre Lutzomyia longipalpis selvagens. Para isso foram confeccionados extratos hidroalco?licos, etan?licos e ciclo- hex?nicos das folhas e cascas de Protium heptaphyllum. Nestes foram realizados estudos fitoqu?micos para prospec??o de classes de compostos secund?rios com a??o biol?gica. Os bioensaios foram realizados em potes pl?sticos adaptados e utilizou-se flebotom?neos Lu. longipalpis selvagens, oriundos da comunidade de Aroeira em Diamantina-MG. Obtivemos como resultado dos estudos fitoqu?micos, diversas classes de metab?litos secund?rios como terpenos, esteroides, taninos, flavonoides, alcaloides e saponinas, com destaque para os extratos de folhas onde foi observado um maior n?mero de classes em rela??o ?s cascas. Os bioensaios realizados evidenciaram uma a??o inseticida dos extratos hidroalco?licos e ciclo- hex?nicos que tiveram resultados estatisticamente semelhantes ? ?-cipermetrina. Apesar de composi??o qu?mica semelhante as demais, os extratos etan?licos apresentaram uma baixa atividade sobre os insetos. Com isso, conclu?mos que Protium heptaphyllum, possui atividade inseticida sobre Lu. longipalpis. Dessa forma, este estudo contribui com o desenvolvimento de m?todos de controle de insetos mais eficientes e menos agressivos aos humanos e outros animais. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Biologia Animal, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2018. / Visceral leishmaniasis (VL) is a highly lethal disease when untreated and reemerging. It is transmitted through the bite of the female sand fly Lutzomyia longipalpis, a large-dose insect in the Americas. Vector control is performed through the application of fast acting residual synthetic pyrethroids on insects such as cypermethrin and deltamethrin. In recent times has been observed the emergence of resistant populations which has increased interest in the discovery of new molecules that can be used in the control of vectors. Plants are an important and promising field of research, since they already produce molecules with insecticidal action. This study aimed to analyze the insecticidal action of leaves and bark extracts of Protium heptaphyllum on wild Lutzomyia longipalpis. Hydroalcoholic, ethanolic and cyclohexanic extracts of the leaves and bark of Protium heptaphyllum were made. In these, phytochemical studies were found to identify groups of individuals with biological action. The bioassays were carried out in adapted plastic pots and wild Lu. longipalpis were used, originating from the community of Aroeira in Diamantina-MG. We obtained as a result of the phytochemical studies, several classes of secondary metabolites such as terpenes, steroids, tannins, flavonoids, alkaloids and saponins, especially leaf extracts where a greater number of classes were observed in relation to the bark. The bioassays performed showed an insecticidal action of hydroalcoholic and cyclohexane extracts that had statistically similar results to cypermethrin. Despite chemical composition similar to the others, the ethanolic extracts presented a low activity on the insects. From this investigation, we conclude that Protium heptaphyllum has insecticidal activity on Lu. longipalpis. Thus, this study contributes to the development of insect control methods that are more efficient and less aggressive to humans and other animals.

Orientador: Carlos Magno Castelo Branco Fortaleza / Resumo: A Leishmaniose Visceral (LV) é uma zoonose negligenciada e emergente na Região Sudeste do Brasil. Sua alta letalidade e as dificuldades para prevenção e controle fazem da LV um grave problema de saúde pública. Nós realizamos um estudo em casuística de um hospital de referência no município de Bauru, São Paulo. Foram realizadas: (I) descrição do quadro clínico e laboratorial; (II) estudo de preditores de óbito, recidiva e aquisição de infecções relacionadas à assistência à saúde (IRAS, anteriormente denominadas “infecções hospitalares”); (III) análise de preditores de incidência de LV e da coinfecção LV-HIV em setores censitários de Bauru. A coorte de base deste estudo foi composta de 683 sujeitos. O quadro clínico típico, com febre e hepatoesplenomegalia, foi mais frequente em monoinfectados que na coinfecção. Os preditores de óbito foram a idade e a soropositividade para HIV, sendo esta última também associada à recidiva. A carga de comorbidades e a inserção de cateteres venosos centrais foram fatores associados à aquisição de IRAS. Por fim, na análise espacial, observou-se maior incidência de LV e coinfecção LV-HIV em áreas periféricas de baixa renda e com urbanização precária. / Abstract: Visceral Leishmaniasis (VL) is a neglected and emerging zoonosis in the Southeastern Region of Brazil. Its high lethality and the difficulties for prevention and control make VL a serious public health problem. We studied VL cases attending a referral hospital in the city of Bauru, São Paulo State, Brazil. The following analyses were performed: (I) description of clinical and laboratory conditions; (II) study of predictors of death, recurrence and acquisition of healthcareassociated infections (HAIs, formerly referred to as "nosocomial infections"); (III) analysis of predictors of VL incidence and VL-HIV coinfection in Bauru census sectors. The baseline cohort of this study was composed of 683 subjects. The typical clinical picture, with fever and hepatosplenomegaly, was more frequent in monoinfected subjects than in coinfection. The predictors of death were age and HIV seropositivity, the latter being also associated with relapse. The burden of comorbidities and the insertion of central venous catheters were factors associated with the acquisition of HAIs. Finally, in the spatial analysis, we found higher incidence of VL and VL-HIV co-infection in peripheral areas of low income and with precarious urbanization. / Doutor

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2013-05-28T13:18:55Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_ChristianeCostaPereira.pdf: 812471 bytes, checksum: a060b7309392afdca00cecb47969c8a5 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-28T13:18:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_ChristianeCostaPereira.pdf: 812471 bytes, checksum: a060b7309392afdca00cecb47969c8a5 (MD5) Previous issue date: 2013 / A leishmaniose visceral é endêmica em muitas regiões do Brasil e é uma importante doença infecto-parasitária causada por protozoários. Além dos seres humanos, os cães também são seriamente acometidos e, no meio urbano, são considerados os principais reservatórios da doença. Esta espécie animal caracteriza-se como fonte de transmissão eficaz por coabitar com as pessoas e, muitas vezes, apresentar altas taxas de infecção sem ter um quadro clínico aparente. A atual estratégia para o controle desta doença é baseada na eliminação de cães soropositivos, tratamento sistemático dos casos humanos e o controle vetorial. Embora a eutanásia do cão seja a principal estratégia de controle da doença, não é amplamente aceita, especialmente por parte dos proprietários. Contudo, as estratégias terapêuticas mais estudadas em cães não conseguiram alcançar a cura parasitológica consistente em CVL. Neste contexto, o desenvolvimento de uma vacina protetora contra CVL poderia ser uma ferramenta promissora para o controle de CVL e consequentemente para Leishmaniose visceral humana. Normalmente, há um consenso de que o microambiente citocina desempenha um papel central no resultado da patogênese da leishmaniose. O principal mecanismo efetor envolvido na resposta imunoprotetora em cães infectados com Leishmania é a ativação dos macrófagos pelo IFN-γ, levando-o a eliminar a forma amastigota intracelular mediada pela produção de óxido nítrico. O objetivo do nosso estudo foi avaliar o perfil de citocinas em cães, e m diferentes tempos pós vacinação com Leishmune ®, após estímulo in vitro com antígeno solúvel de Leishmania chagasi. Empregamos citometria de fluxo e ELISA para análise da produção de citocinas intracelular e secretadas, respectivamente. Os nossos resultados mostraram que a Leishmune ® foi capaz de induzir um aumento do nível de produção de IL-8 e IFN−γ, IL-17a e TNF- α e redução de IL-10 no primeiro e sexto mês após a vacinação, e também redução de IL-4 seis meses após vacinação. No grupo de cães com um ano a pós vacinação, não foi encontrada nenhuma alteração significativa em relação ao perfil de citocinas do grupo de cães não vacinados. As alterações imunológicas acima citadas , levam-nos a acreditar que o processo vacinal promove o desenvolvimento de um perfil de resposta imune celular capaz de induzir imunoproteção aos cães vacinados, ou seja, o animal desenvolve mecanismos imunobiológicos supostamente efetivos contra infecção. Portanto, fica claro que estas alterações permanecem até 6 meses, sendo que após 1 ano da vacinação os animais retornam à um perfil de biomarcadores basal, o que sugere a necessidade do reforço vacinal neste período ou até mesmo anterior a ele / Visceral leishmaniasis is endemic in many regions of Brazil, and it is an important infectious disease caused by protozoan. Apart from humans, dog s are also seriously affected and, in urban areas, are considered the main reservoir of the disease. This species is characterized as a source of transmission for effective cohabit with people and often exhibit high rates of infection without having a seeming clinical condition. The current strategy for the control of this disease is based on the elimination of seropositive dogs, systematic human cases treatment and vector control. Although dog euthanas ia is the main strategy to control the disease, it is not widely accepted, especially by the owners. However, the most often therapeutic strategies studied in dogs had failed t o achieve a consistent parasitological cure in CVL. In this context, the development of a protective vaccine against CVL could be a promising tool for the control of CVL and consequently for human visceral leishmaniasis. Typically, there is a consensus that the cytokine microenvironment performs a central role in the outcome of the pathogenesis of leishmaniasis. The major effector mechanism involved inLeishmania immunoprotective response on infected do gs is the activation of macrophages by IFN-y, leading to destroy the intracellular amastigote form mediated by the production of nitric oxide. The aim of our study was to evaluate the cytokine profile in dogs at different Leishmune ® vaccination times, after in vitro stimulation with soluble antigen of Leishmania chagasi. We had used flow cytometry and ELISA method to an alysis the cytokine production. Our results showed that Leishmune® was capable of the induction of increasing IL-8, IFN-γ,IL-17a and TNF-α production levels in the first and sixth months after vaccination, also IL-10 reduction rates in first and sixth month after vaccination and decreased IL-4 rates only six months after the vaccination. In the “T12 time” group of dogs, one year after vaccination, we did not find any significant difference in the cyto kine profile for the group of non-vaccinated dogs group. The immunobiological changes aforementioned lead us to believe the immunization process promotes the development of a cellular immune response profile capable of inducing immunoprotection on vaccinated dogs. Therefore, it is clear that those changes remain up to 6 months whereas after 1 year after the vaccination the animal returns to a baseline profile of biomarkers, which suggests the necessity of the strengthen the vaccine either at this time or even before

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2013-11-07T16:47:38Z No. of bitstreams: 1 Isadora dos Santos Lima Desorganização da Polpa Branca Esplênica está associada...pdf: 823516 bytes, checksum: 6c64973b1a470182971fdecded62d3c4 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-07T16:47:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Isadora dos Santos Lima Desorganização da Polpa Branca Esplênica está associada...pdf: 823516 bytes, checksum: 6c64973b1a470182971fdecded62d3c4 (MD5) Previous issue date: 2013 / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / O baço é o maior órgão linfoide secundário em seres humanos e em cães. Em ambos, a ausência do baço está associada com um risco aumentado de ocorrência de infecções localizadas e disseminadas, incluindo sepse generalizada. A leishmaniose visceral e outras infecções podem alterar a estrutura histológica do baço, o que leva a uma destruição dos microambientes da polpa branca. Trabalhos anteriores mostraram que a ruptura da estrutura de polpa branca é mais frequente em cães com marcadores laboratoriais de suscetibilidade à leishmaniose visceral, como a cultura esplênica positiva e LST negativo, do que nos animais em que estes marcadores de susceptibilidade estavam ausentes. Neste estudo, o nosso objetivo é examinar a relação entre a desorganização histológica da polpa branca esplênica e a gravidade da leishmaniose visceral. As amostras e os dados utilizados neste estudo foram coletados de 206 cães de rua provenientes de uma área endêmica para leishmaniose visceral, a cidade de Jequié (Bahia, Brasil). Os animais foram examinados clinicamente e foram realizados os testes ELISA e LST. Aspirados de baço foram coletados para a cultura, e fragmentos de baço foram coletadas para estudos de biologia molecular e de estudos morfológicos. Os animais foram classificados de acordo com o grau de organização estrutural da polpa branca esplênica em grupos com baço (a), bem organizado, (b) ligeiramente desorganizado, (c) a moderadamente a extensivamente desorganizado. Em relação à positividade no ELISA juntamente com a desorganização do baço, conjuntivite ( P= 0,0116), hiperproteinemia (p= 0,021) foram mais frequentes no grupo de animais com ELISA positivo e baço desorganizado, quando comparado com os outros grupos. Os animais polissintomáticos são mais frequentes no grupo com ELISA positivo e baço do tipo 3 (p= 0,004). Os scores clínicos atribuídos à intensidade da conjuntivite (P <0,05), dermatite (P <0,05) e linfadenopatia (P <0,01), alopecia (P <0,01), onicogrifose (P <0,05) foram mais elevados nos animais com ELISA positivo e baço desorganizado do que outros grupos, bem como o número de sinais clínicos atribuíveis à leishmaniose visceral canina (p= 0,0014).Em relação à análise da positividade na cultura esplênica juntamente com a desorganização do baço, a frequência de cães polissintomáticos foi maior em animais com baço ligeiramente desorganizado (P <0,05) e baço desorganizado (P <0,005), do que em animais com baço organizado. Alopecia (P <0,01), conjuntivite (P <0,05), desidratação (P <0,001), dermatite (P <0,05), onicogrifose (p <0,01), anemia (P <0,05), úlcera (P <0,001 ) e alto escore clínico (P <0,001) foram mais frequentes em animais com cultura esplênica positiva e baço desorganizado, do que nos animais com cultura negativa e baço organizado. Em conclusão, os cães com desorganização do baço associada com leishmaniose visceral têm mais sinais clínicos e pior estado clínico do que os animais com leishmaniose visceral, mas sem desorganização do baço. / The spleen is the largest secondary lymphoid organ in human beings and in dogs. In both in human beings and in dogs, the absence of the spleen is associated with increased risk of localized and disseminated infection including overwhelm sepsis. Visceral leishmaniasis and other infections alter the histological structure of the spleen, leading to a disruption of the white pulp microenvironments. Previous works have shown that the disruption of the white pulp structure is more frequent in dogs with laboratorial markers of susceptibility to visceral leishmaniasis such as positive spleen culture and negative leishmanin skin test than in animals in which these susceptibility markers were absent. In this study, our goal is to examine the relationship between the histological disorganization of splenic white pulp and severity of visceral leishmaniasis.The samples and data used in this study were collected from 206 stray dogs from an endemic area for visceral leishmaniasis, the city of Jequie (Bahia, Brazil). The animals were examined clinically and ELISA and LST were performed. Splenic aspirates were collected for culture, and fragments of spleen were collected for molecular and morphological studies. The animals were ranked according to the degree of structural organization of splenic white pulp of the spleen in groups (a), well-organized, (b) slightly disordered, (c) moderately extensively disorganized. In relation to the positive in the ELISA with the disorganization of the spleen, conjunctivitis (P = 0.0116) hyperproteinemia (p = 0.021) were more frequent in the group of animals with positive ELISA and disorganized spleen when compared to the other groups. Polisymptomatic animals are more frequent in the group with positive ELISA and spleen type 3 (p = 0.004). Clinical scores attributed to the intensity of conjunctivitis (P <0.05), dermatitis (P <0.05) and lymphadenopathy (P <0.01), alopecia (P <0.01), onychogryphosis (P <0.05 ) were higher in animals with positive ELISA and disorganized spleen than other groups, as well as the number of clinical signs attributable to canine visceral leishmaniasis (p = 0.0014). Regarding the analysis of positive spleen culture together with splenic disorganization, the frequency of polisymptomatic dogs was higher in animals with slightly disordered spleen (P <0.05) and disorganized spleen (P <0.005) than in animals with organized spleen. Alopecia (P <0.01), conjunctivitis (P <0.05), dehydration (P <0.001), dermatitis (P <0.05), onychogryphosis (p <0.01), anemia (P <0.05 ), ulcers (P <0.001) and high clinical score (P <0.001 were more frequent in animals with positive spleen culture and disorganized spleen than in animals with negative culture and organized spleen . In conclusion, dogs with disorganization of the spleen associated with visceral leishmaniasis have more clinical signs and worse clinical status than animals with visceral leishmaniasis, but without disruption of the spleen.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-02-07T19:06:15Z No. of bitstreams: 1 Graziele Quintela de Caravalho... O Papel do Neme na infecção....pdf: 1591650 bytes, checksum: 3f661f0e0b742c04c4ad3e8907c1cf24 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-07T19:06:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Graziele Quintela de Caravalho... O Papel do Neme na infecção....pdf: 1591650 bytes, checksum: 3f661f0e0b742c04c4ad3e8907c1cf24 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Laboratório de Engenharia Tecidual e Imunofarmacologia. Salvador, BA, Brasil / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / A Leishmaniose é uma doença que atinge milhões de pessoas em todo o mundo, sendo endêmica em muitas áreas. A doença pode apresentar diferentes manifestações clínicas, tais como a Leishmaniose Visceral (LV), que é a forma mais grave e letal, caso não seja tratada. As manifestações hematológicas são comumente associadas à LV, onde os mecanismos relacionados à hemólise e a presença do heme livre, podem interferir no comportamento de neutrófilos. Já foi descrito que o heme livre é uma molécula pró-inflamatória, com a capacidade de induzir migração e ativação dos neutrófilos. No entanto, o efeito do heme sobre neutrófilos humanos durante a infecção por Leishmania chagasi, ainda não foi explorado. A nossa hipótese é que o heme induz ativação de neutrófilos humanos favorecendo o processo inflamatório na infecção por L. chagasi. Nossos resultados mostraram que o heme induz a ativação e apoptose em neutrófilos humanos infectados com L. chagasi, seguido pela sobrevivência do parasita. Moléculas presentes na composição do heme, como a protoporfirina IX (PPIX) e o Fe+2, não alteram o status de ativação dos neutrófilos, mas mantêm o aumento do crescimento parasitário como observado em presença do heme. Além disso, o heme e o Fe+2 aumentam a produção do TGF-β e a atividade da SOD. A inibição farmacológica da enzima SOD com dietilditiocarbamato (DETC) reduz a taxa de proliferação da L. chagasi em neutrófilos infectados. Em conjunto, esses dados indicam que o heme e o Fe+2 podem contribuir como fonte nutricional e controlar o ambiente inflamatório, com a indução de TGF-β e SOD, permitindo a sobrevivência da L. chagasi em neutrófilos humanos. Esse estudo poderá abrir novas perspectivas para o entendimento dos mecanismos imunopatogênicos envolvendo neutrófilos e suas implicações no processo inflamatório da LV. / The Leishmaniasis is a disease that affects millions of people worldwide, being endemic in many areas. The disease may present different clinical manifestations, such as Visceral Leishmaniasis (VL), which is the most severe form and fatal if left untreated. The hematologic manifestations are commonly associated with VL, where the mechanisms related to hemolysis and the presence of free heme may modify the behavior of neutrophils. It has been reported that the free heme is a pro-inflammatory molecule with the ability to induce migration and activation of neutrophils. However, the effect of the heme on human neutrophils during infection by Leishmania chagasi yet hasn't been explored. Our hypothesis is that the heme induces activation of human neutrophils favoring the inflammatory process on the infection by L. chagasi. The results showed that the heme induces activation and apoptosis in human neutrophils infected with L. chagasi, followed by parasite survival. Molecules present in the composition of heme, as protoporfirin IX (PPIX) and Fe+2, do not alter the activation status of neutrophils, but maintain the increased parasite growth as viewed in the presence of heme. Furthermore, the heme and Fe+2 increase the production of TGF-β and SOD activity. The pharmacological inhibition of SOD with diethyldithiocarbamate (DETC) reduces the rate of L. chagasi proliferation in infected neutrophils. Together, these data indicate that the heme and Fe+2 may contribute as a nutritional source and control the inflammatory environment with the induction of TGF-β and SOD, allowing the survival of the L. chagasi in human neutrophils. This study may open new perspectives for the understanding of the immunopathogenic mechanisms involving neutrophils and its implications in the inflammatory process of the VL.

As leishmanioses são zoonoses de caráter incurável que apresentam diversas manifestações clínicas no homem e tem o cão como seu principal reservatório no ambiente urbano. A Leishmaniose visceral (LV) é a forma mais grave da parasitose e sua ocorrência tem aumentado no Brasil, apesar das ações dos órgãos de saúde pública. Até o do ano de 2002, o Estado do Rio Grande do Sul era área indene para as leishmanioses humana e canina. Em 2003 foi registrado o primeiro caso humano da forma tegumentar e em 2006 e 2008 identificaram-se, respectivamente 3,5% e 30,5% de cães sororreagentes para Leishmania sp. em Porto Alegre/RS. Em 2009, foram confirmados os primeiros casos autóctones humanos de LV e caninos de Leishmaniose visceral canina (LVC) no município de São Borja/RS e registrada, pela primeira vez, a ocorrência do inseto vetor no estado. Em 2010, foi notificado o primeiro caso confirmado de LVC e identificados cães sororreagentes em Porto Alegre/RS. Tendo em vista a importância desta zoonose e as dificuldades de um diagnóstico confiável em cães, o presente estudo objetivou identificar aspectos epidemiológicos da LVC em cães em uma região com registros de casos no município de Porto Alegre/RS. Coletaram-se 300 amostras de sangue de cães desta região as quais foram testas pelos métodos TR-DPP® e ELISA para diagnóstico de Leishmania chagasi. Um questionário epidemiológico foi aplicado durante entrevista com os tutores, contendo aspectos relativos à criação dos animais e fatores ambientais. Na área de estudo, observou-se presença frequente de lixo não acondicionado e saneamento básico precário nas moradias, além de extensas áreas de mata verde e pequenos sítios alternados com áreas urbanizadas. Verificou-se que 83% (250/300) dos cães não tinham raça definida, 58% (175/300) eram fêmeas, 78% (238/300) dormiam ao ar livre e 61% (183/300) conviviam com outras espécies animais. Clinicamente, observou-se que 90% (270/300) dos animais apresentavam infestação por ectoparasitos, 70% (210/300) apresentavam alterações dermatológicas, 24% (72/300) emagrecimento e anorexia e 22% (65/300) alterações oculares. Os resultados dos testes sorológicos foram 100% concordantes uma vez que as mesmas três amostras (1%) apresentaram reação positiva e as demais 297 (99%) foram negativas em ambos os métodos diagnósticos. Concluiu-se que, apesar da baixa prevalência de cães soropositivos para L. chagasi, existem condições de transmissão de LVC, com risco de LV para a população humana no município de Porto Alegre. / Leishmanioses are zoonoses of incurable character that present different clinical manifestations in the man and have the dog as its main reservoir in the urban environment. Visceral leishmaniasis (VL) is the most severe form of the parasitosis and its incidence has been increasing in Brazil, despite the actions of public health authorities. To the year of 2002, the state of Rio Grande do Sul was unscathed to the human and canine Leishmanioses. In 2003, it was first recorded a human case of cutaneous leishmaniasis and in 2006 and 2008 were identified, respectively, 3.5% and 30.5% of seropositive dogs to Leishmania sp. in Porto Alegre/RS. In 2009, the first autochthonous human cases of VL and canine visceral leishmaniasis (CVL) were confirmed in the municipality of São Borja/RS and it was registered, for the first time, the occurrence of the vector insect in the state. In 2010 was reported the first confirmed CVL case and seropositive dogs were identified in Porto Alegre/RS. Given the importance of this zoonosis and the difficulties of a reliable diagnosis in dogs, this study goal was to identify epidemiological aspects of CVL and evaluate the performance of ELISA and TR-DPP® in the diagnosis of this disease in dogs on a region with records of cases in the city of Porto Alegre/RS. Blood samples were collected from 300 dogs of this region. An epidemiological questionnaire, containing aspects of care and management of the animals, was conducted during an interview with the owners. Within the study area, it was observed the frequent presence of unpacked garbage and poor sanitation in the homes, and large areas of green forest and small farms alternated with urbanized areas. It was found that 83% (250/300) dogs were of mixed breeds, 58% (175/300) were females, 78% (238/300) slept outdoors and 61% (183/300) coexisted with other animal species. Clinically, it was observed that 90% (270/300) of the animals had infestation by ectoparasites, 70% (210/300) had dermatological alterations, 24% (72/300) had weight loss and anorexia and 22% (65/300) had ocular disorders. The results of serological tests were 100% consistent since, in both diagnostic methods, the same three samples showed a positive reaction and the remaining 297 were negative. Despite the low prevalence of dogs seropositive for L. chagasi, it was concluded that there are conditions for the transmission of CVL, resulting in a risk of VL for the human population in the municipality of Porto Alegre.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-08-01T18:14:31Z No. of bitstreams: 1 Melissa Moura Abbehusen Estudo da imunogenicidade de vacinas de....pdf: 867164 bytes, checksum: 4ef801f12d349f64700eea900fccfc9b (MD5) / Made available in DSpace on 2012-08-01T18:14:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melissa Moura Abbehusen Estudo da imunogenicidade de vacinas de....pdf: 867164 bytes, checksum: 4ef801f12d349f64700eea900fccfc9b (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / A Proteína ácida ribossomal de Leishmania infantum (L. infantum) - LiP0 é um componente estrutural da subunidade maior do ribossomo e já foi descrita como um antígeno imunodominante, que participa na síntese de outras proteínas e é capaz de induzir resposta imune humoral específica em soro de pacientes e cães infectados com Leishmania chagasi (L. chagasi). Mycobacterium smegmatis (M. smegmatis), é uma micobactéria oportunista, que apresenta crescimento rápido e uma poderosa capacidade adjuvante, já sendo utilizado como vetor de expressão para diversos antígenos. Neste trabalho avaliamos a capacidade imunoprotetora do Mycobacterium smegmatis recombinante (rM.smegmatis) expressando o gene que codifica a LiP0, bem como o plasmídeo e/ou proteína LiP0 utilizando estratégia homóloga (composta de plasmídeo de DNA) e heteróloga (composta de plasmídeo de DNA adicionado a proteína recombinante e CpG), contra a infecção causada por L. chagasi em hamsters. Hamsters foram imunizados e posteriormente infectados com L. chagasi por via endovenosa. Os animais imunizados com a micobactéria, apesar de apresentarem resposta imune humoral anti-M. smegmatis, não produziram anticorpo contra LiP0, que só foram detectados no soro dos animais que receberam a estratégia heteróloga de imunização. Na análise de citocinas, observou-se que os animais imunizados com rM.smegmatis LiP0 apresentaram maior concentração de IFN-γ e menor quantidade de TGF-ß e IL-10 quando comparado aos grupos controle, sugerindo uma resposta Th1. Em diferentes momentos após o desafio, o grau de proteção avaliado pela carga parasitária em órgãos alvo, foi estimado por ensaio de diluição limitante. Nenhuma diferença foi observada na carga parasitaria do baço, fígado e linfonodo em hamsters imunizados ou controles em todos os pontos da avaliação, sugerindo que a LiP0, não protegeu hamsters imunizados tanto com o Mycobacterium expressando o gene que codifica a proteína, nem como vacina de DNA utilizando a estratégia homóloga ou heteróloga contra infecção por L.chagasi. / The acid ribosomal protein of Leishmania infantum (L. infantum) - LiP0 is a structural component of the ribosomal subunit and it was described as an immunodominant antigen recognized either by serum of patients and dogs infected by Leishmania chagasi (L. chagasi) and cooperates in the synthesis of other proteins. Mycobacterium smegmatis (M. smegmatis) is a opportunistic bacteria, which presents rapid growth, is a potent adjuvant and has been used as carrier of antigens in several different experimental models of immunoprotection. In this work we evaluate the immunoprotective capacity of recombinant M. smegmatis (rM. smegmatis) carrying the gene of LiP0 and the DNA or protein of LiP0 using homologous strategy (composed of plasmid DNA) and heterologous (consisting of plasmid DNA and recombinant protein more CpG) to immunize hamsters against infection by L. chagasi. The immunized animals produced anti-M.smegmatis antibodies but they did not produce antibody against LiP0, detected only in animals who received the heterologous strategy of vaccination. In the analysis of cytokines, we observed that animals immunized with rM.smegmatis LiP0 had higher concentration of IFN-γ and lower amounts of TGF-ß and IL-10 compared to control groups, suggesting a Th1 response. At different times after challenge, the degree of protection, evaluated by parasite load in the target organs, was estimated by limiting dilution assay. No difference was observed in the parasite load in the spleen, liver and lymph node between immunized hamsters and controls at all points of evaluation. There was no protection in animals immunized with rM. smegmatis expressing the acidic ribosomal protein gene, suggesting that LiP0 did not protect hamsters immunized with either Mycobacterium expressing the gene encoding the protein or DNA as a vaccine strategy using homologous or heterologous against infection L.chagasi.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-08-29T21:19:29Z No. of bitstreams: 1 Simone de Souza Oliveira Avaliação de estratégia otimizada para triagem....pdf: 656689 bytes, checksum: 2248d68384fab994772907132553ea61 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-08-29T21:19:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Simone de Souza Oliveira Avaliação de estratégia otimizada para triagem....pdf: 656689 bytes, checksum: 2248d68384fab994772907132553ea61 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / A Leishmaniose Visceral Humana (LVH) é uma das seis endemias mundiais de prioridade da OMS. São registrados anualmente cerca de 500 mil casos novos, destes 90% ocorrem em cinco países: Bangladesh, Índia, Nepal. Sudão e Brasil. O cão doméstico é considerado o principal reservatório no ambiente urbano e o responsável pela persistência da doença. OBJETIVO: Avaliar a eficácia de estratégia otimizada para triagem e eliminação de cães soropositivos no controle e prevenção da LVH. MÉTODOS: Foi realizado um estudo de ensaio comunitário, com crianças entre 6 meses a 12 anos de idade, residentes numa região endêmica para LVH, dividida aleatoriamente em duas áreas: área de intervenção (triagem e eliminação de cães a cada sete meses) e área controle. A população do estudo foi acompanhada por um período de 30 meses. O desfecho principal foi infecção por Leishmania, definida como soroconversão por teste imunoenzimático, que era realizado em inquéritos soroepidemiológicos a intervalos de 15 meses, aproximadamente. RESULTADOS: Foram incluídas inicialmente 1206 crianças. No final do primeiro período (15 meses), após dois ciclos da intervenção, a incidência de soroconversão na área da intervenção não diferiu significativamente da incidência na área controle (RR=1,59; IC 95% 0,85-2,97). No entanto, no final do segundo período (30 meses), depois de quatro ciclos da intervenção, a incidência de soroconversão foi menor na área da intervenção (RR=0,23; IC 95% 0,08 - 0,65). CONCLUSÃO: A intervenção não foi eficaz no primeiro período do estudo, mas, no final do segundo período ela reduziu a taxa de soroconversão. Assim, a eficácia da intervenção foi dependente do número de ciclos de triagens realizadas. É possível que as limitações e deficiências dessa estratégia sejam minimizadas com a repetição dos ciclos e que a persistência da intervenção por mais tempo permita que os benefícios se acumulem e sejam alcançados os resultados dessa medida de controle da LVH. / Human visceral leishmaniasis is within the six worldwide OMS’s priority endemic diseases. About 500 thousand new cases are recorded annually around the world, 90% of them in five countries: Bangladesh, India, Nepal, Sudan and Brazil. Domestic dogs are the most important reservoir host at urban area and the cause of HVL persistence. OBJECTIVE: Measure the efficiency of optimal strategy for screening and elimination of seropositive dogs in HVL control and prevention. METHODS: a screening study in a HVL endemic area, 1206 children between 6 months and 12 years old were included in this study. They were living in two different areas: area of intervention (dog screening and elimination every seven months) and a control area. The studied population was accompanied for a period of 30 months. The parameter to verify the efficacy of the chosen strategy was the seroconversions detected by ELISA, defined as immunoenzymatic test in seroepidemiologic surveys conducted about every 15 months. RESULTS: By the end of the first period (15 months), after two intervention cycles the seroconversions incidence at the intervention area wasn’t statistically different of the control area. However at the end of second period (30 months), after four intervention cycles, its incidence was lower at the intervention area. CONCLUSIONS: the intervention wasn’t effective on the study first period, but, by the end of the second period it reduced the seroconversion rate.Therefore the intervention efficacious was dependent of the number of screening cycles performed. Possibly, the limitations and deficiencies of this strategy would be minimized by cycle repetition and longer period of intervention, allowing benefits to accumulate and the results for this procedure to be reached.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-07-18T16:05:02Z No. of bitstreams: 2 Orlando Marcos Farias de Sousa, Estudo da infecção... 2013.pdf: 3775180 bytes, checksum: 1eb7cab3c5ef08df5a81ec9219afacbc (MD5) Orlando Marcos Farias de Sousa, Estudo da infecção... 2013.pdf: 3775180 bytes, checksum: 1eb7cab3c5ef08df5a81ec9219afacbc (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-18T16:05:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Orlando Marcos Farias de Sousa, Estudo da infecção... 2013.pdf: 3775180 bytes, checksum: 1eb7cab3c5ef08df5a81ec9219afacbc (MD5) Orlando Marcos Farias de Sousa, Estudo da infecção... 2013.pdf: 3775180 bytes, checksum: 1eb7cab3c5ef08df5a81ec9219afacbc (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / No município de Camaçari, considerado área endêmica para leishmaniose visceral (LV), foi realizado estudo objetivando determinar a influência das variáveis climáticas sobre a flutuação mensal da população flebotomínica e a taxa de infecção natural desses flebotomíneos por Leishmania infantum. Para o levantamento entomológico foram realizadas capturas sistemáticas de flebotomíneos utilizando armadilhas tipo HP, tanto no peri como no intradomicílio. As residências foram selecionadas em bairros pertencentes a zona urbana orla e zona urbana sede, onde casos humanos de LV no foram registrados município. As capturas foram realizadas entre dezembro de 2011 e novembro de 2012. A relação entre pluviosidade, umidade relativa do ar e temperatura e a proporção de flebotomíneos foi calculada utilizando o coeficiente de Spearman. Para o estudo da infecção natural dos flebotomíneos foi utilizada a técnica de qPCR. Os pools avaliados foram compostos por flebotomíneos da mesma espécie, distribuídos pelas residências, ás quais foram investigadas no intra e peridomicilio. Além disso, os pools foram distribuídos de acordo com os 12 meses de coleta. Os resultados mostraram que a fauna flebotomínica é diversificada, sendo composta por quatro gêneros com ocorrência de cinco espécies. Espécimes de interesse epidemiológico foram encontrados com predominância para a espécie Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (98,4%). Foi observada correlação positiva entre a densidade de flebotomíneos e a variável pluviosidade na zona urbana sede durante o período de coleta (r = 0,66, p <0,02). A correlação entre as variáveis bioclimáticas e a densidade dos flebotomíneos também foi avaliada em bairros que se destacaram individualmente pela densidade de flebotomíneos, sendo encontrado correlação positiva para a variável umidade relativa do ar (r = 0,58 p <0,04) e associação similar para a variável precipitação durante o período de coleta (r = 0,67 p <0,01). As análises moleculares mostraram infecção natural por Leishmania infantum em 10 pools de 78 de pools de Lutzomyia longipalpis analisados. Estes achados aliados à presença do vetor competente da LV, Lutzomyia longipalpis em elevada proporção, e os estudos das variáveis climáticas alertam para a necessidade de vigilância epidemiológica e constituem em ferramenta útil para o planejamento de medidas de controle contra LV no município de Camaçari. / In Camaçari city, considered an endemic area for visceral leishmaniasis (VL), the study was conducted aiming to determine the climatic variables influence on the sandflies monthly fluctuation and the natural infection rates by Leishmania infantum in the sandflies. The entomological inventory was performed with sandflies systematic captures using HP traps, both in peridomiciliar well as in intradomiciliar. The residences were selected in districts belonging to the coastline urban zone and headquarters urban zone, where human cases of VL were recorded in the city. Captures were performed between December 2011 and November 2012. The correlation between the number of sandflies and the different climatic variables was calculated using Spearman's coefficient. The sandfly natural infection was evaluated by qPCR technique. Pools reviews were composed by sand flies of the same species, distributed among households, which were investigated in peridomiciliare and intradomiciliare. Additionally, pools were distributed according to the 12-month sampling. The results showed that the phlebotomine fauna is diverse, consisting of four genera and five species. Specimens of epidemiological interest were found predominantly for Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (98.4%). In addition, a positive correlation between sandfly density and pluviosity at headquarters urban zone was observed during the collection period. (r = 0.66, p <0.02). The correlation between bioclimatic variables and density of sandflies was also evaluated in neighborhoods that stood out individually by the sandfly density. A positive correlation was observed for the variable relative humidity during the collection period (r = 0.58 p <0.04) and similar association for precipitation variable in the same period (r = 0.67 p <0.01). Molecular analysis showed natural infection by Leishmania infantum in 10 pools of 78 pools of Lutzomyia Longipalpis analyzed. In summary, these findings combined with the presence of VL competent vector, Lutzomyia Longipalpis in high density, and studies of climate variables warn of the need for epidemiological surveillance and constitute a useful tool for planning control measures against VL in Camaçari. Keis

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-05-12T13:35:17Z No. of bitstreams: 1 Juliana Coelho Santos Isotipo...2014.pdf: 500362 bytes, checksum: 4c5dbf54877a6ef41cbbca30b73e6cde (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-05-12T13:35:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Juliana Coelho Santos Isotipo...2014.pdf: 500362 bytes, checksum: 4c5dbf54877a6ef41cbbca30b73e6cde (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-12T13:35:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Juliana Coelho Santos Isotipo...2014.pdf: 500362 bytes, checksum: 4c5dbf54877a6ef41cbbca30b73e6cde (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil. / Neste estudo foi analisada a distribuição de isotipos de imunoglobulinas IgG1, IgG2 e IgE envolvidas na resposta a Leishmania no soro e a expressão de mRNA para IFN-g e IL-4 in situ no baço de cães naturalmente infectados com L.infantum com diferentes perfis de susceptibilidade ou resistência à doença. A atividade sérica de anticorpos do isotipo IgG1 contra Leishmania tendeu a ser maior nos animais com teste cutêneo da Leishmanina negativo e com parasitismo esplênico (grupo infectado potencialmente susceptível, 0,424±0,401) que nos outros grupos: com teste cutêneo da Leishmanina positivo e ausência de parasitismo esplênico (grupo infectado potencialmente resistente, 0,226±0,114), ou com ambos teste cutêneo da Leishmanina e cultura esplênica positivos (grupo em fase indeterminada da doença, 0,234±0,125) ou com ambos os parâmetros negativos (grupo potencialmente não infectado, 0,159±0,044). Essa diferença não foi, contudo estatisticamente significante (ANOVA, P=0,1450). IgG2 específica anti-Leishmania foi maior (ANOVA P=0,0001) no grupo infectado potencialmente susceptível (1,324±0,322) que nos demais grupos: em fase indeterminada da doença (0,930±0,383, P=0,05), infectado potencialmente resistente (0,916±0,401, P=0,05) e potencialmente não infectado (média 0,299±0,151, P=0,001). Foi também maior nos grupos infectado potencialmente resistente e com infecção em fase indeterminada que no grupo de animais potencialmente não infectado. Não houve diferenças entre os grupos (ANOVA p=0,4) nos resultados séricos de IgE anti-Leishmania; o grupo potencialmente susceptível (0,749±0,485) tendeu a apresentar valores médios mais elevados que os grupos potencialmente resistente (0,518±0,161), ou com doença em fase indeterminada (média 0,591±0,331) ou potencialmente não infectados (0,530±0,121), essas diferenças foram intensificadas pela alta atividade de anticorpos do isotipo IgE anti-Leishmania em um dentre os 11 animais examinados, não sendo estatisticamente significante (ANOVA, P=0,4668). Não foram observadas diferenças na expressão de mRNA para IFN-g e IL-4 no baço de animais não infectados ou naturalmente infectados com L. nfantumi com (a) teste cutêneo da Leishmanina positivo e cultura esplênica negativa ou com (b) teste cutêneo da Leishmanina negativo e parasitismo esplênico. Observou-se uma preponderância de anticorpos da subclasse IgG2 em animais com parasitismo esplênico independente da resposta ao teste cutêneo da Leishmanina. Tais resultados sugerem que a polarização da resposta imune a Leishmania pode variar em diferentes compartimentos como sangue e baço. / We analyzed the distribution immunoglobulin isotypes IgG1, IgG2 and IgE involved in the response to Leishmania and the mRNA expression for IFN-g and IL-4 in situ in the spleen of dogs naturally infected with IgG1 antibody anti-Leishmania serum activity was higher in animals with negative Leishmanin skin test and splenic parasitism (infected and potencially susceptible to VL group, 0,424±0,401) than in other groups: positive Leishmanin skin test and negative splenic parasitism (infected and potentially resistant to VL group, 0,226±0,114), or both positive Leishmanin skin test and slpenic parasitism (infected with undefined susceptibility status group, 0234±0,125) or both negative parameters (non-infected group, 0159±0,044). This difference however was not statistically significant (ANOVA, P=0145). Specific IgG2 anti-Leishmania was higer (ANOVA P=0,0001) in infected and potencially susceptible to VL group (1,324±0,322) than in the other groups: infected with undefined susceptibility status (0,930±0,383, P=0,05), infected and potencially resistant to VL (0,916±0,401, P=0,05) and non infected group (0,299±0,151, P=0,001). Was also higher in infected and potencially resistant to VL and infected with undefined susceptibility status groups than in group of non-infected animals. There was no significant differences (ANOVA p=0,4) between different groups in seric IgE anti-Leishmania, infected and potencially susceptible to VL group (0,749±0,485) showed media higher than in infected and potencially resistant to VL group (0,518±0,161), or in infected with undefined susceptibility status group (0,591±0,331) or non-infected group (0,530±0,121), these differences were intensified for the higher IgE antibody activity in one between 11 examined animals, although this was not statistically significant (ANOVA, P=0,4668). There was no difference in IL-4 or IFN-g mRNA expression in the spleen among groups of animals non-infected or naturally infected with L. infantum, with (a) strong LST and negative spleen culture for the parasite or with (b) negative LST and parasite in the spleen We could observe an interesting preponderance of antibodies from the IgG2 class in animals with splenic parasitism independently of the LST response. Our results suggest that the polarity of immune response to Leishmania may vary in different compartments such as blood and spleen.