Introdução: Poluição do ar está associada ao aumento da morbidade e mortalidade e essas associações persistem mesmo a baixas concentrações do poluente e a exposições agudas. Objetivos: Avaliar a associação entre componentes de três diferentes fontes do Particulado Total em Suspensão (PTS) e resposta aguda inflamatória, local e sistêmica, em ratos saudáveis. Métodos: PTS proveniente de fonte automativa, industrial e da queima da cana de açúcar foram coletados em filtros de fibra de vidro, extraídos em água destilada por ultrassonificação, e instilados na traquéia de 45 ratos (15 em cada grupo). Vinte microgramas por mililitro dos PTS foram administrados em cada animal. A mesma quantidade de partículas de grafite em água destilada foi utilizada como controle. Marcadores inflamatórios de resposta local e sistêmica foram mensurados 24 horas após a exposição. Resultados: PTS proveniente da fonte automotiva apresentou altas concentrações de enxofre, ferro, chumbo e cobre e produziram efeito adverso local e sistêmico, evidenciado pelo aumento do óxido nítrico exalado (6,22 ppm ± 3,8), do número de plaquetas (743,7 x 103/mm3 ± 73,4), e dos níveis do fibrinogênio (312,1 ± 42,7 mg/dL) e fator VIII (185,1 ± 37,2%), maiores dos que os observados no grupo controle (p < 0,05). O PTS proveniente da queima da cana de açúcar, com altas concentrações de ferro e cobre, e moderadas de enxofre produziram maior estresse oxidativo pulmonar e cardíaco em comparação ao grupo-controle e fonte automotiva (p < 0,05). O PTS gerado a partir da fonte industrial, com significativa concentração de ferro e cobre, e alta quantia de cálcio mostrou maior resposta oxidativa pulmonar e cardíaca em comparação ao grupo-controle, embora com discreta resposta inflamatória sistêmica (p > 0,05). Conclusão: Os resultados mostram que em doses baixas e agudamente, a exposição ao material particulado total em suspensão induz respostas inflamatórias locais e sistêmicas e pode alterar os componentes da hemostasia. Estas respostas foram influenciadas e moduladas pela composição elementar dos materiais analisados. Além disso, estes resultados subsidiam os achados epidemiológicos que associam exposição ao material particulado com morbidade e mortalidade cardiovasculares. / Background: Air pollution is associated with both increased morbidity and mortality. These associations persist even at lower concentrations and shortterm exposure. Objectives: To assess the impact of the components of three different sources of Total Suspended Particles (TSP) on local and systemic inflammatory responses in healthy rats. Methods: TSP from automotive, industrial and biomass burning sources were collected in specific glass-fiber filters, extracted in distilled water by ultrasound and instilled into the trachea of 45 rats (15 in each group). Twenty micrograms for mililiter of TSP were administered to each animal. The same amount of graphite particles (carbon black) in distilled water was used as control. Inflammatory markers of local and systemic responses were measured 24 hours after the exposure. Results: Automotive-generated TSP presented high percentages of sulfur, iron and copper, producing local and systemic adverse effects evidenced by increases in exhaled nitric oxide (6.22 ppm ± 3.8), platelets (743.7 x 103/mm3 ± 73.4), fibrinogen (312.1 ± 42.7 mg/dL) and factor VIII (185.1 ± 37.2 %) levels, which proved higher than those observed in the black carbon group (p < 0,05). Biomass burning TSP with high percentage of iron and copper and moderate levels of sulfur produced the greatest pulmonary and cardiac oxidative stresses compared to the black carbon and automotive groups (p < 0,05). Industry-generated TSP with relevant amounts of iron, copper, and high percentages of calcium showed higher pulmonary and cardiac oxidative responses than those observed for the control group, along with a slightly systemic response (p > 0,05). Conclusion: The results showed that the acute exposure to the total suspended particles at low concentrations induces local and systemic inflammatory responses and can change the hemostasis components. These effects were influenced and modulated by the elementary composition of the analyzed materials. Moreover, these results subsidize the epidemiologycal findings that associate exposure to the particulate matter with cardiovascular morbidity and mortality.

A rápida oxidação da matéria orgânica dos solos tropicais é mais uma evidência da grande vantagem do uso de biossólidos como condicionadores, capazes de melhorar as características físicas, químicas e biológicas do solo com grandes reflexos na produtividade agrícola. Portanto, o presente projeto objetivou averiguar o potencial genotóxico e cancerígeno dos lotes do Lodo de Estação de Tratamento de Esgoto (LETE) gerado em uma ETE prédefinida na região da bacia hidrográfica Piracicaba, Capivari e Jundiaí (PCJ1). Estes dados poderão fornecer subsídios para a avaliação do risco das populações humanas e o meio ambiente expostas ao LETE. Foram utilizados 140 ratos Wistar machos com 8 semanas de idade, expostos, via ração, a concentrações de 10.000 e 50.000ppm de LETE, durante 6 e 8 semanas, com os iniciadores DEN (N-dietilnitrosamina) e DMH (1,2- dimetilhidrazina), conforme citado nos respectivos protocolos (Figuras 4 e 5). A avaliação toxicológica do lodo de esgoto desenvolvida pelo Núcleo de Avaliação do Impacto Ambiental Sobre a Saúde Humana (TOXICAM), enfocou os parâmetros toxicológicos, como seu potencial genotóxico, pelos testes do cometa e micronúcleo em sangue periférico e medula óssea e carcinogenicidade pelos ensaios de FCA e FHA. Os dois ensaios foram divididos em 4 grupos (FCA- GI=Controle Negativo, GII=Controle Positivo/DMH III=10.000ppmLETE e GIV=50.000ppmLETE); (FHAGI= Controle Negativo, GII=Controle Positivo/DEN, GIII=10.000ppmLETE e GIV=50.000ppmLETE). Entretanto, na 3ª semana foi realizada hepatectomia parcial em todos os animais dos respectivos grupos do ensaio de FHA. No teste do cometa foram utilizados 10 animais como controle positivo (controle interno - MNU-N-metil-N-nitrosourea), e 10 animais como controle negativo nos respectivos ensaios (FCA e FHA). Os testes em questão indicaram que o LETE não promove aumento do número de criptas aberrantes no cólon, número e área de focos de hepatócitos alterados no fígado, lesões no DNA (cometa), e também, não houve aumento de forma significativa a frequência de micronúcleo nas células, conforme as tabelas a seguir: 2.1(G=III e IV); 3.1(G=IV); 4(G=,III e IV); 5(G=III,IV e V); 6(G=III,IV e V); 7(G=IV e V). Em relação ao controle positivo. Estes dados poderão fornecer suporte na avaliação de risco da população humana e o meio ambiente, quando expostos ao lodo de estação de tratamento de esgoto. / Fast oxidation of organic matter on tropical soils is another evidence of the great advantage of using biosolids as conditioners once they are able to improve biological, chemical and physical characteristics of the soil with remarkable consequences on agricultural productivity. Therefore, the present project aimed at verifying genotoxic and carcinogenic potential plots of sludge from sewage treatment plants in a pre-defined watershed region at Piracicaba, Capivari and Jundiaí (PCJ1). These data may provide support to evaluate risks on human populations and the environment exposed to sludge from sewage treatment plants. In the study, 140 Wistar male rats, 8 weekold, were used. They were exposed, via chow, to a 10.000 and 50.000 ppm concentration of sludge from sewage treatment plants during 6 to 8 weeks with DEN initiators (diethylnitrosamine) and DMH (1,2-dimethylhydrazine) as mentioned in protocols (Figures 4 and 5). Toxicological evaluation of LETE developed by Center of Evaluation of Environmental Impact on Human Health (TOXICAM) focused toxicological parameters with its genotoxic potential by comet and micronucleus assays on peripheral blood and bone marrow in Wistar rats and carcinogenicity using ACF and AHF assays. Both assays were divided into 4 groups (ACF- GI=Negative Control, GII=Positive Control/DMH III=10.000ppmLETE and GIV=50.000ppmLETE); (AHF-GI=Negative Control, GII=Positive Positive/DEN, GIII=10.000ppmLETE and GIV=50.000ppmLETE). Therefore, on the 3rd week partial hepatectomy was performed in every animal from AHF assays respective groups. assays and to FCA comet test, using MNU (N-methyl-N-nitrosourea) as positive control. The tests in question indicated that the SS not promote increased number of aberrant crypts in the colon, number and area of foci of altered hepatocytes in the liver, lesions in DNA (comet), and also, significantly increased the frequency of micronucleus in cells, according to the following tables 2.1(G=III and IV); 3.1(G=IV); 4(G=,III and IV); 5(G=III,IV and V); 6(G=III,IV and V); 7(G=IV and V). For the positive control. These data may provide support to evaluate risks on human populations and the environment exposed to sludge from sewage treatment plants.

A planta Casearia sylvestris, popularmente conhecida como guaçatonga, é comumente utilizada para o tratamento de diversas afecções como queimaduras, ferimentos, herpes labial e genital, distúrbios do trato gastrointestinal, como gastrites, úlceras, gengivites, aftas, halitose; além disto, atribui-se à planta ação cicatrizante, tônica, depurativa, anti-reumática, antiinflamatória, antiofídica, antidiarréica, entre outras. Atualmente, é catalogada como planta medicinal de interesse ao Sistema Único de Saúde no Brasil. Entretanto, até o momento, não haviam estudos relativos à avaliação de sua toxicidade. Assim, o objetivo desta pesquisa foi o de estudar, em ratos, os possíveis efeitos tóxicos da C. sylvestris. Para tal, foram realizados os testes de citotoxicidade com o objetivo de analisar o potencial tóxico das diferentes formas de extração da planta, e estudos pré-clínicos de toxicidade oral aguda, e em doses repetidas, por 28 e 90 dias, realizados de acordo com protocolos preconizados pelas agências reguladoras nacionais (Agência Nacional de Vigilância Sanitária - ANVISA) e internacionais (Organization for Economic Cooperation and Development - OECD) de avaliação de risco para substâncias químicas. No presente estudo, o extrato fluido (EF) de C. sylvestris foi administrado, a ratos, por via oral, através de gavagem, em dose única de 2000mg/kg; ou em doses repetidas, durante 28 ou 90 dias, nas doses 60, 120 e 240mg/kg,. Foram avaliados sinais sistêmicos de toxicidade, ganho de peso e consumo de ração, hemograma completo, avaliação bioquímica (AST, ALT, GGT, ALP, uréia, creatinina, ácido úrico, colesterol, triglicerídes, glicose, albumina, proteínas totais e cloreto), análise macroscópica e histopatológica de órgãos e avaliação do peso relativo dos órgãos linfóides baço e timo e celularidades do baço e medula óssea para averiguar os possíveis efeitos imunotóxicos. Além disso, foi obtido o perfil cromatográfico (fingerprint) utilizando a técnica analítica CLAE/UV. Os resultados mostraram que o EF de C. sylvestris não causou efeitos tóxicos quando administrado em dose única 2000mg/kg no estudo de toxicidade aguda, assim como também não mostrou efeitos sistêmicos de toxicidade ou efeitos imunotóxicos nos estudos em doses repetidas por 28 e 90 dias. Estes dados aqui encontrados permitem sugerir que o EF da C.sylvestris é seguro quando utilizado mesmo prolongadamente. No entanto, outros estudos, como por exemplo, de genotoxicidade e de carcinogenicidade, devem ser realizados para complementar esta etapa de avaliação pré-clínica. / Casearia sylvestris Sw commonly known in Brazil as guaçatonga, is currently used to treat many diseases such as burns, wounds, labial and genital herpes, gastrointestinal disorders- gastritis, ulcers, gingivitis, aphthae and halitoses. C.sylvestris has been also used as cicatrizant in skin diseases, blood purifier and general detoxification, anti-inflammatory, antiofidic, diarrhea, among others. In our country it is considered as medicinal plant and for this reason C.sylvestris is catalogued at The Unified Health System (Sistema Único de Saúde - SUS) as a plant of interest for Brazilian population .However, no toxicological studies concerned the safety of extract fluid of this plant have been reported. Thus, the aim of this study was to evaluate the possible toxic effects of fluid extract (EF) of C. sylvestris. For this, it was performed citotoxicity tests in order to analyze the toxic potential of different extracts of the plant. It was also performed preclinical studies, in rats, according the guidelines proposed by National Health Surveillance Agency (Agência Nacional de Vigilância Sanitária - ANVISA) and OECD (Organization for Economic Cooperation and Development) being performed the following tests: acute oral toxicity and repeated dose 28 and 90-day. The EF of C. sylvestris was administered by gavage at a single dose of 2000 mg/kg, or during 28 and 90 days with doses 60, 120 e 240mg/kg. It was evaluated systemic signs of toxicity, body weights and food consumption, hematology, serum biochemistry (AST, ALT, GGT, ALP, urea: creatinine, uric acid cholesterol, triglycerides, glucose, albumin, total proteins, and chloride) macroscopic and histopathological analysis of different organs and evaluation of relative weight of lymphoid organs, spleen and thymus and the cellularity of spleen and bone marrow to investigated the possible immunotoxic effects. We also obtained the fingerprint chromatogram of C. sylvestris, using CLAE/UV. The results showed that there were no toxic effects by the EF when administered as a single dose at 2000mg/kg in acute toxicity study, as well as showed no systemic effects of toxicity or immunotoxic effects in studies with repeated doses of 28 and 90 days. This data suggest that the EF of the plant is safety even used for long period. However, other studies, eg, genotoxicity and carcinogenicity studies should be performed to complement the preclinical evaluation.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009 - Ana Paula de Magalhaes Nunes.pdf: 2100747 bytes, checksum: 71718bf8a01eaa5a22f6b041a009a396 (MD5) Previous issue date: 2009-03-13 / Funda??o Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / In order to investigate the hypothesis of the influence of serotonergic system on the control of dipsogenic and sodium appetite, we examined the effects of chronicallytreated rats with the brain serotonin releaser, fenfluramine, the 5-HT1A agonist, 8-OHDPAT and the selective serotonin re-uptake inhibitor, sertraline. Animals treated with 5- HT1A agonist and brain serotonin releaser were sodium depleted and then their fluids intake analyzed. The first group decreased significantly the salt intake response while the second group intensified the sodium appetite 2 weeks after the first administration of fenfluramine. The water consumption was not altered in none of the groups when compared to their respective controls. Sodium-depleted animals that were treated with sertraline showed a more intense natriorexigenic response. On the other hand, water deprivation induced a lower water intake in SERT-treated rats than the controls. Osmotic simulation evoked a dipsogenic response significantly lower in SERT group. Fluids and food deprivation induced a weak dipsogenic response in SERT treated-rats compared to controls but without difference on saline intake. An increased urinary density and decreased plasma sodium levels in SERT-treated rats correlated with the highest plasma vasopressin and oxytocin levels at the 3rd week post-treatment. The obtained results in chronically-treated rats with the 5-HT1A agonist and the brain serotonin releaser, suggest that the alteration on the brain serotoninergic activity influences the sodium appetite expression, possibly after 5-HT1A autoreceptor desensitization produced by 8-OH-DPAT or brain serotonin depletion achieved with fenfluramine treatment. The results of chronically-treated rats with sertraline, constitute the first evidence of alterations on the threshold for thirst and sodium appetite response in SERT-chronically-treated rats. These alterations possibly are consequence of the hyponatremia provided by inappropriate secretion of AVP and OT. / Para investigar a hip?tese da influ?ncia do status do sistema seroton?rgico no controle da resposta dipsog?nica e do apetite ao s?dio, analisamos os efeitos de ratos tratados cronicamente com um liberador cerebral de serotonina, fenfluramina, um agonista 5-HT1A, 8-OH-DPAT e um inibidor da recapta??o pr?-sin?ptica de serotonina, sertralina (SERT). Animais tratados com agonista 5-HT1A e com liberador cerebral de serotonina, foram submetidos a deple??o de s?dio e, posteriormente, a ingest?o de fluidos foi aferida. O primeiro grupo diminuiu significativamente a ingest?o de salina hipert?nica, enquanto o segundo grupo intensificou o apetite ao s?dio 2 semanas ap?s o ?n?cio do tratamento com fenfluramina. O consumo de ?gua n?o foi alterado em nenhum dos grupos, quando comparados aos seus respectivos grupo controle. Os animais tratados cronicamente com SERT que sofreram deple??o de s?dio, obtiveram uma intensa resposta natriorexig?nica. Por outro lado, a priva??o de ?gua induziu uma menor ingest?o de ?gua em ratos tratados cronicamente com SERT quando comparado-os aos do grupo controle. O est?mulo osm?tico evocou uma resposta dipsog?nica significativamente menor no grupo SERT. A priva??o de fluidos e de alimentos induziu uma baixa resposta dipsog?nica em ratos tratados com SERT quando comparados aos controles, mas sem diferen?a significativa na ingest?o de salina hipert?nica. O aumento da densidade urin?ria em ratos tratados com SERT correlaciona-se com os maiores n?veis plasm?ticos do horm?nio anti-diur?tico e ocitocina na 4? semana p?s-tratamento. Os resultados obtidos em ratos tratados cronicamente, com o agonista 5-HT1A e com o liberador cerebral de serotonina, sugerem uma poss?vel altera??o da atividade cerebral serotonin?rgica, influenciando assim a express?o do apetite ao s?dio, pois possivelmente ocorreu uma dessensibiliza??o de autoreceptores 5-HT1A com o tratamento com 8-OH-DPAT, e deple??o cerebral de serotonina, obtida com o tratamento com fenfluramina. Os resultados relativos aos animais tratados cronicamente com sertralina, constituem as primeiras evid?ncias de altera??o no limiar de sede e de apetite ao s?dio. Essas altera??es s?o possivelmente conseq??ncia da hiponatremia gerada pela secre??o inapropriada de ADH e OT.

Made available in DSpace on 2017-07-10T14:57:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Claudio Girelli_ Junior.pdf: 1035740 bytes, checksum: 5744f2af3a9cdd7a97647cc399f302df (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Testosterone is the principal male sex steroid hormone involved in differentiation, sexual development and control of male reproductive functions. In addition to its role in reproductive endocrinology and fertility, testosterone is an important hormone in the regulation and functioning of other organs and tissues including the kidney, heart, skeletal muscle, immune system and oral and periodontal tissues. Periodontitis is a disease characterized by inflammation of the periodontal tissues and associated with dental decay, are mainly responsible for the loss of dental elements. The relationship between sex steroids hormones and periodontal disease has been intensively investigated in females, however studies in males are still scarce. Therefore, the aim of the present project is to analyze the influence of testosterone deficiency on bone loss and histological structure of the periodontal tissues of castrated rats and experimental periodontitis. Twenty-eight male Wistar rats, provided by the Central Biotherium of Unioeste were used. At 80 days of age the animals were separated in four experimental groups, with 7 animals per group: no ligature control (CON), ligature control CON + LIG), no ligature castrated (CAST) and ligature castrated (CAST + LIG). At 90 days of age was held orchiectomy in appropriate groups. Sixty days after castration, the periodontal disease was induced by ligature technique. At the end of experimental period (90 days after castration), the animals were weighed and euthanized in a CO2 chamber. The mandible was removed, dissected, separated into left and right, were fixed by immersion in 10% buffered formalin for 24 hours, decalcified and processed for histological and radiological techniques. The results of this study showed that ligature model was effective 13 in inducing periodontitis in the animals. The food intake profile was similar between groups. The animals of CAST and CAST + LIG groups showed significant reduction in body weight at the end of experimental period, when compared with the groups CON and CON + LIG. Castration resulted in a significant bone loss in animals, which was accentuated with the induction of periodontal disease. Animals with periodontal diseases presented increased of gingival epithelium and connective tissue area, compared to animals without the disease. We conclude that testosterone is a physiological regulator important of alveolar bone metabolism. Testosterone deficiency in synergism with periodontal disease increases alveolar bone resorption and alters the thickness of gingival epithelium.Key / A testosterona é o principal hormônio sexual esteróide masculino envolvido na diferenciação, desenvolvimento sexual e controle das funções reprodutivas masculina. Além do seu papel na endocrinologia reprodutiva e fertilidade, a testosterona é um hormônio importante na regulação e funcionamento de outros órgãos e tecidos corporais tais como o rim, coração, músculo estriado esquelético, sistema imunológico e os tecidos orais e periodontais. A periodontite é uma doença caracterizada pelo processo inflamatório dos tecidos periodontais e juntamente com a cárie, são as grandes responsáveis pela perda de elementos dentais. As relações entre os hormônios sexuais esteróides e doença periodontal tem sido intensamente investigado em fêmeas, entretanto os estudos em machos ainda são escassos. Assim, o presente trabalho teve por objetivos analisar a influência da deficiência de testosterona sobre a perda óssea alveolar e estrutura histológica dos tecidos periodontais de ratos castrados e com periodontite experimental. Foram utilizados 28 ratos machos Wistar, fornecidos pelo Biotério Central da Unioeste. Aos 80 dias de idade os animais foram separados em quatro grupos experimentais, com 7 animais por grupo: controle sem ligadura (CON), Controle com ligadura (CON+LIG), castrado sem ligadura (CAST) e castrado com ligadura (CAST+LIG). Aos 90 dias de idade realizou-se a orquidectomia nos devidos grupos. Sessenta dias após a castração a doença periodontal foi induzida através da técnica de ligadura. Ao final do período experimental (90 dias após a castração), os animais foram pesados e sacrificados em câmara de CO2. As mandíbulas foram retiradas, dissecadas, separadas em direita e esquerda, fixada em formalina tamponada a 10% por 24 horas, descalcificada e 11 processadas para técnicas histológicas e radiológicas. Os resultados do presente trabalho demonstraram que o modelo de ligadura foi eficiente em induzir a periodontite nos animais. O perfil de consumo alimentar foi semelhante entre os grupos. Os animais dos grupos CAST e CAST+LIG apresentaram significativa redução do peso corporal ao final do período experimental, quando comparados aos grupos CON e CON+LIG. A castração levou a uma significativa perda óssea nos animais, a qual foi acentuada com a indução da doença periodontal. Os animais com doença periodontal apresentaram aumento de área do epitélio gengival e área de tecido conjuntivo, quando comparado aos animais sem a doença. Concluímos que a testosterona é um importante regulador fisiológico do metabolismo ósseo alveolar. A deficiência de testosterona em sinergismo com a doença periodontal aumenta a reabsorção óssea alveolar e altera a espessura do epitélio gengival.

La mitochondrie est le siège principal de la production d’énergie sous forme d’ATP en conditions aérobies, mais aussi d’espèces réactives dérivées de l’oxygène (ROS). La fonction mitochondriale est étroitement liée à la production de ROS puisque ces derniers, selon leur taux, peuvent altérer ou optimiser le rendement énergétique. La plasticité structurale et fonctionnelle de la mitochondrie est essentielle au maintien de l’homéostasie dans toute situation qui nécessite des ajustements métaboliques comme l’exercice physique. Les mécanismes adaptatifs de la fonction mitochondriale et des ROS lors de l’entrainement sont encore loin d’être élucidés ainsi que l’impact du genre sur ces réponses. Dans cette perspective, deux modèles animaux (rat Wistar et anguille européenne) ont été choisis. Les effets d’un entrainement en endurance de même intensité (70% de la vitesse maximale aérobie de course ou de nage) ont été étudiés chez le rat Wistar et l’anguille européenne argentée. Cette dernière est une espèce endurante capable d’effectuer une migration de reproduction de 6000 km et caractérisée par un dimorphisme sexuel de taille. Des mesures in vitro de la consommation d’oxygène, la production radicalaire et d’ATP ont été effectuées simultanément à partir de fibres perméabilisées de cœur et de muscle squelettique. La vulnérabilité ou résistance de la fonction mitochondriale à l’exposition à un système générateur de ROS (mimant un stress oxydant) a également été étudiée. Avant entrainement, chez le rat Wistar, la femelle présente une fonction mitochondriale plus efficiente énergétiquement et plus résistante aux ROS, alors que chez l’anguille, ce profil métabolique et radicalaire est plutôt observé chez le mâle. Après entrainement, quelle que soit l’espèce, la meilleure performance physique observée s’accompagne de modifications métaboliques et radicalaires différentes selon le genre et l’espèce. Chez le rat, l’amélioration de la fonction mitochondriale se traduit différemment selon le sexe. Chez le mâle, l’entrainement induit une amélioration du rendement énergétique via un meilleur couplage entre oxydation et phosphorylation et/ou une meilleure utilisation des électrons au niveau de la chaine respiratoire. Chez la femelle, l’augmentation de la production d’ATP serait liée à l’augmentation de la consommation d’oxygène mitochondriale. Comme chez le rat, l’entraînement induit globalement chez l’anguille une amélioration du rendement énergétique et de la résistance de la fonction mitochondriale aux ROS, mais uniquement chez le mâle. L’ensemble de ces résultats montre des réponses métaboliques et radicalaires dépendantes du genre. Quelle que soit l’espèce, l’entrainement semble être chez le mâle plus bénéfique que chez la femelle en termes d’efficacité énergétique mitochondriale et de résistance de la fonction mitochondriale à un stress oxydant. Dans le contexte de la migration de l’anguille, ces adaptations permettraient au mâle, largement plus petit que la femelle, une efficacité de nage supérieure, permettant leur synchronisation d’arrivée sur le lieu de reproduction. Les similitudes interspécifiques de réponse à l’entraînement selon le genre confortent l’intérêt d’utilisation du modèle poisson dans le champ de la physiologie de l’exercice. / Mitochondrion is the main site of aerobic energy (ATP) and reactive oxygen species (ROS) productions. Mitochondrial function is closely linked to ROS, which, according their rate, can alter or optimize energy efficiency. Structural and functional plasticity of mitochondria is essential to maintain homeostasis in any situation that requires metabolic adjustments as physical exercise. The adaptive mechanisms of mitochondrial function and ROS during training and the impact of gender on these responses are still far from being solved. In this perspective, two animal models (Wistar rat and European eel) were chosen.The effects of endurance training of the same intensity (70% of maximal aerobic speed running or swimming) were studied in Wistar rat and silver European eel. The latter is an enduring species capable of performing a spawning migration of 6000 km and characterized by sexual dimorphism in size. In vitro measurements of oxygen consumption, free radical and ATP productions were carried out simultaneously from heart and skeletal muscle permeabilized fibers. The vulnerability or resistance of the mitochondrial function to a ROS generating system exposure (mimicking oxidative stress) was also studied.Before training, in rat, female has a mitochondrial function energetically more efficient and more resistant to ROS, whereas in eel, this metabolic and radical profile is observed rather in male. After training, whatever the species, the improved physical performance observed is associated with various metabolic and radical changes which depending on gender and species. In rats, the improving of mitochondrial function translates differently according to gender. In male, training induces improvement in energy efficiency through a better coupling between oxidation and phosphorylation and/or better use of electrons at the respiratory chain level. In female, increasing in ATP production may be related to the increase in mitochondrial oxygen consumption. As in rats, training induces globally in eel an improvement in energy efficiency and resistance of mitochondrial function to ROS, but only in male. All these results show metabolic and radical responses depending on gender. Whatever the species, training seems to be most beneficial in males than in females in terms of mitochondrial energy efficiency and resistance of mitochondrial function to oxidative stress. In the context of eel migration, these adaptations allow to male, largely smaller than female, a higher swim efficiency, allowing their synchronization on breeding site. Interspecific similarities in training response by gender confirm the interest of fish model’s using in the field of exercise physiology.

Philosophiae Doctor - PhD / Obesity is a medical condition in which an energy imbalance leads to excessive accumulation of body fat. Obesity leads to a reduction in life expectancy through its association with chronic diseases of lifestyle. The prevalence of obesity is rapidly increasing throughout the world. It is now accepted that most cases of obesity result from an interaction between genetic and environmental factors. This rapid increase in obesity generally leads to an increase in morbidity and mortality from chronic diseases such as cardiovascular disease, type 2 diabetes, osteoarthritis and cancer of which obesity is a risk factor. There is a lack of information in molecular research to explain how obesity predisposes individuals to these diseases. Proteomics is a molecular tool and a set of techniques used to identify changes at protein level from a diseased state. This study aims to identify differentially expressed proteins in serum of obese rats fed different isocaloric diets using proteomics.

A cartilagem do processo condilar (PC) da mandíbula de ratos wistar é secundária e atua como sítio do crescimento mandibular. O fenômeno depende da ingestão adequada de proteínas e da ação de hormônios, entre eles a insulina. Objetivou-se correlacionar as alterações morfológicas provenientes da subnutrição protéica pré e pós-natal, da renutrição pós-natal com a detecção imunohistoquímica e a quantificação do receptor de insulina (IR) na cartilagem do PC de ratos wistar. Os grupos experimentais formaram-se animais heterogêneos (n=3) de acordo com a ração oferecida, protéica ou hipoprotéica, e com as respectivas idades, nos grupos N e S (nutridos e subnutridos com 60 dias de vida), R (renutridos do desmame até 60 dias), NN (nutridos até 100 dias) e RR (renutridos do desmame até 100 dias). Após a eutanásia, os espécimes foram processados para análise sob microscopia de luz. Cortes sagitais foram submetidos a colorações que permitiram observar o padrão celular, a matriz cartilagínea e o componente colágeno das camadas da cartilagem do PC. Cortes também foram submetidos à imunomarcação do receptor de insulina. Para se observar alteração na arquitetura tecidual do PC, realizou-se a microscopia eletrônica de varredura. Observou-se que o PC contém praticamente o mesmo número de células em proliferação na fase púbere e no adulto maduro (N=NN; p&gt;0,05). A subnutrição determinou a diminuição significativa do número de células da camada proliferativa do PC (N&ne;S; p&lt;0,05) e o restabelecimento nutricional mantido até a idade adulta não normaliza este parâmetro, de modo que o número de células permanece menor (NN&ne;RR; p&lt;0,05). A densidade celular aos 100 dias é maior no grupo RR (NN&ne;RR; p&lt;0,05). Quanto ao período púbere, a avaliação do colágeno demonstrou que a renutrição é capaz de prover novas áreas de desenvolvimento do componente fibroso do complexo osteocartilagíneo e aumento de espessura da camada condroblástica. Quanto à imunomarcação, todos os grupos apresentaram reatividade bastante heterogênea ao receptor de insulina, com predomínio nas camadas condroblástica e hipertrófica. O número de células imunorreativas foi menor e se equivalem estatisticamente nos grupos S e RR, enquanto que os grupos N, NN e R exibiram maior número, sendo N=R e R=NN; p&lt;0,05. A densidade dessas células foi menor em S, N e R quando comparados ao grupo NN e não houve diferença estatística entre S, N, R e RR. O número de células do PC modifica-se pouco no período púbere, e o seu desenvolvimento normal é sensível à depleção protéica, de modo que o tecido não é capaz de responder ao restabelecimento protéico mesmo quando mantido até a idade adulta, apresentando também drástica diminuição da produção de matriz extracelular. A insulina funciona como hormônio de crescimento no PC, e o quadro apresentado em estados de subnutrição, é muito semelhante àquela condição observada no diabetes do tipo II, na qual as células se tornam resistentes à insulina. / In the mandible of wistar rats the cartilage of the condylar process (CP) is secondary and acts as a site of mandibular growth. The phenomenon depends on adequate protein intake and action of hormones, like insulina. In the present study, the morphological changes from protein malnutrition pre- and post-natal and post-natal re-nourishment were evaluated with immunohistochemical detection and quantification of insulin receptor (IR) in the cartilage of CP rats. The experimental groups were formed by heterogeneous animals (n = 3) according to the diet (protein or low protein) and age (60 or 100 days of life). Thus, the CP from animals of groups N and S (nourished and malnourished - 60 days old), R (renourished from weaning to 60 days), NN (fed up to 100 days) and RR (renourished from weaning until 100 days) were processed under light microscopy techniques. Semi-seriate sagittal sections were stained to observe the standard cellular cartilage matrix and collagen component of CP cartilage layers. Some sections were also immunolabelled with insulin receptor. The three-dimensional architecture of the CP was evaluated under electron microscopy (SEM). The CP exhibits the same number of proliferating cells at puberty (60 days) and mature phase (100 days) (N = NN; &gt; p 0, 05). The undernutrition determine a significant decrease in the number cells present in the proliferative layers of CP (N &ne; S p &lt;0.05). The nutritional recovery until adult phase does not normalize this parameter, with the cell number remaining lower (NN &ne; RR, p &lt;0.05). In the adult phase, the cell density is higher in the RR (NN &ne; RR, p &lt;0.05). When the collagen component was evaluated at puberty it was observed that re-nourishment was able to provide areas of development in the fibrous component present in the osteocartilaginous complex. The re-nourishment also increased the thickness of chondroblastic layer. All groups showed highly heterogeneous reactivity for insulin receptor, predominantly in the chondroblastic and hypertrophic layers. The number of immunoreactive cells is small and statistically equivalent in S and RR groups, while the groups N, R and NN have a great number of these cells (N = NN = R and R). The density of immunoreactive cells was lower in S, N and R than in NN. There were no statistical differences among S, N, R and RR. The number of cells in the CP is slightly altered during puberty and the normal development of CP is sensitive to protein depletion. This condition indicates that the tissues are not able to respond to the restoration of protein retained, even when maintained until the adult phase also showing a drastic decrease in the extracellular matrix production. The insulin acts like a growth hormone in the CP, and the roll of malnutrition states is very similar to that condition observed in type II diabetes, in which cells become resistant to insulin.

INTRODUÇÃO: O nervo facial (NF) desempenha um papel importante em diversas funções fisiológicas do organismo e controla a musculatura da mímica facial, responsável por transmitir sentimentos e emoções. O tratamento padrão-ouro para reconstrução do NF após trauma com secção é a anastomose término-terminal com cola de fibrina, que na maioria dos casos ainda produz resultados subótimos. Por isso, objetivou-se testar o efeito de uma nova técnica de reconstrução usando um protocolo de fusão axonal por polietilenoglicol (PEG), denominada sutura química, utilizando parâmetros eletrofisiológicos e histomorfométricos. MÉTODOS: Ratos Wistar foram divididos em 4 grupos. Após transecção do ramo mandibular do NF, o grupo controle foi submetido a anastomose dos cotos neurais com microssuturas. O grupo 2 foi tratado com microssuturas mais a sutura química. A sutura química consistiu de lavagem dos cotos neurais com solução de Krebs hipotônica contendo azul de metileno antes das microssuturas. Depois da sutura, seguiu-se a lavagem com solução de PEG e, por último, aplicação de solução de Krebs contendo cálcio. O grupo 3 recebeu microssuturas mais a solução com azul de metileno. E o grupo 4 foi tratado com microssuturas mais a solução de PEG. Os potenciais de ação musculares compostos (PAMCs) foram avaliados no pré-operatório e após 3 e 6 semanas das intervenções. A análise histomorfométrica foi realizada após 6 semanas. RESULTADOS: Os animais submetidos à sutura química apresentaram maior amplitude e menor duração dos PAMCs 3 e 6 semanas após a cirurgia em comparação com todos os demais grupos; na análise histológica, apresentaram maior contagem axonal e maior diâmetro axonal. CONCLUSÕES: A sutura química produziu recuperação mais intensa do NF após secção e sutura quando comparada à sutura isoladamente, pela avaliação eletrofisiológica e histomorfométrica, e pode ser útil em situações clinicas nas quais haja secção seguida de reparo neural imediato / BACKROUND: The gold standard treatment for traumatic transection of the FN continues to be end-to-end anastomosis using fibrin glue, which often yields unsatisfying results. OBJECTIVE: To test the outcome of a novel method of polyethylene glycol (PEG)-fusion on FN transection using electrophysiological and histophormometric parameters. METHODS: Wistar rats were divided into 4 groups. After FN transection, the control group was submitted to end-to-end anastomosis with microsutures. Group 2 was submitted to microsutures plus the PEG-fusion protocol. This protocol consisted in bathing nerve stumps with a calcium-free Krebs solution containing methylene blue (MB) before suturing. After suturing, the repaired nerve received a PEG solution followed by a calcium-containing Krebs solution. Group 3 received microsutures plus the MB solution and group 4 received microsutures plus the PEG solution. Compound muscle action potentials (CMAPs) were recorded before the intervention and 3 and 6 weeks afterwards. Histomorphometric analysis was done at 6 weeks time. RESULTS: The PEG-fusion protocol yielded larger CMAP amplitude, smaller CMAP duration at 3 and 6 weeks and a larger axon count and axon diameter. Between the other groups, no significant difference was seen. CONCLUSION: PEG-fusion produces better FN recovery after transection, when considering electrophysiological and histomorphometric analysis and may be of use in clinical scenarios of FN cut-severance followed by immediate repair

Introdução: A alteração dos níveis normais de marcadores séricos e urinários ocorre na presença de dano renal associado à uropatia obstrutiva. Valores séricos e e urinários de TGF beta1 e CA 19-9 ainda não foram avaliados em modelo experimental de uropatia obstrutiva. Material e Métodos: Ratos foram divididos em sete grupos: referência, sham operation, nefrectomia unilateral, ligadura completa de ureter unilateral, obstrução parcial de ureter unilateral, obstrução parcial de ambos ureteres, nefrectomia unilateral associada à obstrução parcial do ureter contralateral. Morfometria renal e ureteral, concentrações séricas e urinárias de TGF beta1 e CA 19-9 e expressão tecidual renal de CA 19-9 foram analisadas. A correlação destes marcadores com os grupos submetidos a obstrução completa, obstrução parcial ou sem obstrução foi realizada. Resultados: Achados anatomopatológicos correlacionaram-se positivamente à intensidade da obstrução ureteral e negativamente aos níveis urinários de CA 19-9. Subexpressão acentuada do CA 19-9 foi observada em unidades renais com obstrução completa. Não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas para os marcadores TGF beta1 urinário, TGF beta1 sérico e para o CA 19-9 sérico Conclusões: O CA 19-9 urinário correlacionou-se negativamente com o grau de obstrução ureteral. A análise imuno-histoquímica demonstrou a expressão do CA 19-9 no citoplasma das células epiteliais tubulares, sugerindo produção renal do marcador. O TGF beta1 sérico e urinário não apresentaram modificações de acordo com o grau de severidade e tempo de obstrução, o que pode estar relacionado a remodelamento renal menos intenso em resposta à uropatia obstrutiva nestes ratos / Introduction: Abnormal levels of serum and urinary markers occur in the presence of renal damage associated to obstructive uropathy. Urinary and serum TGFbeta1 and CA 19- 9 have not yet been evaluated in an experimental model of obstructive uropathy. Material and Methods: Rats were divided into seven groups: reference, sham operation, unilateral nephrectomy, complete unilateral ureteral obstruction, partial unilateral ureteral obstruction, partial bilateral ureteral obstruction, and unilateral nephrectomy with contralateral partial ureteral obstruction. Kidney and ureter morphometry, TGFbeta1 and CA 19-9 serum and urinary concentrations and CA 19-9 renal tissue expression were analysed. Correlation of these markers to complete, partial obstruction or unobstructed groups was performed. Results: Pathological findings correlated positively with the degree of ureteral obstruction, but negatively with urinary CA 19-9 levels. Marked underexpression of CA 19-9 was observed in kidneys with complete ureteral obstruction. No statistically significant differences were found for urinary and serum TGFbeta1 and also for serum CA 19-9. Conclusions: Urinary CA 19-9 correlated negatively with ureteral obstruction grade. Immunohistochemistry depicted CA 19-9 expression on epithelial tubular cells cytoplasm, suggesting renal origin. Serum and urinary TGFbeta1 did not show alterations in response to severity and length of urinary obstruction, which might be associated with less intense renal remodeling