Orientador: Paula Rahal / Coorientador: Marilia de Freitas Calmon / Coorientador: Luis Octavio Regasini / Banca: Ana Paula Girol / Banca: Aripuanã Sakurada Aranha Watanabe / Resumo: Os Papilomavírus humanos (HPVs) são vírus de DNA divididos em dois grupos. O de baixo risco, associado a lesões benignas, e o de alto risco, associado a diversos tipos de câncer. As oncoproteínas E6 e E7 são as principais proteínas envolvidas no processo de carcinogênese decorrente da infecção por esses vírus, de forma que compostos naturais têm sido utilizados na busca por drogas que inibam a expressão viral. Paralelamente, devido aos diversos efeitos colaterais e alto índice de reincidência dos tratamentos tradicionais contra o câncer, a procura por agentes antitumorais é intensa. Nesse contexto, diversas pesquisas estão sendo realizadas afim de explorar as inúmeras propriedades da curcumina, uma substância que apresenta atividade antiinflamatória, imuno-modulatória, antioxidante, anti-angiogênica, quimioprotetora, antiproliferativa, antitumoral e antimicrobiana. Assim, uma estratégia promissora utilizada é a busca por análogos de curcumina que consigam aumentar a eficácia terapêutica desse fitoterápico. Dessa forma, o objetivo desse trabalho é analisar in vitro a ação de diferentes derivados semi-sintéticos de curcumina (AC1, AC2, AC7, AC10 E AC13) sobre a expressão dos oncogenes virais E6 e E7 em linhagem de carcinoma cervical HPV-16 positiva (CasKi) e a atividade antitumoral do composto AC13 em diferentes linhagens tumorais (CasKi, HeLa, MDA-MB- 231, MCF-7 e 786-O). Para isso, após a incubação com os compostos em diferentes concentrações, a viabilidade das células foi analisada por ensaio MTT e uma linhagem imortal transformada de queratinócito humano (HaCaT) foi utilizada como controle para análise da citotoxicidade. Posteriormente, a avaliação da expressão do RNAm de E6 e E7 foi realizada por PCR em tempo real, a determinação da expressão da proteína p53 por Western Blotting e a detecção da atividade das caspases 3 e 7 foi... / Abstract: High risk Human Papilomavírus (HPVs) are DNA vírus divided in two groups. Low risk, associated with benign lesions, and high risk, associated with several types of cancer. Oncoproteins HPV E6 and E7 are the main proteins involved in the carcinogenesis process due to infection by this virus, so that natural coumponds have been used in the search for drugs that inhibit viral expression. At the same time, due to various side effects and high relapse rate of traditional cancer treatments, the search for antitumor agents is intense. In this context, several studies are being conducted in order to explore the numerous properties of curcumin, a substance that has anti-inflammatory, immune-modulatory, anti-oxidant, anti-angiogenic, chemoprotective, anti-proliferative, anti-tumor and anti-microbial properties. Thus, a promising strategy used is the search for curcumin analogues which are able to increase the therapeutic efficacy of phytotherapy. Thus, the aim of this study is to analyze the action of different semi-synthetic derivatives of curcumin (AC1, AC2, AC7, AC10 and AC13) on the E6 and E7 viral oncogenes expression in positive HPV-16 cervical carcinoma cell line (CasKi) and the antitumor activity of AC13 compound in different tumor cell lines (CasKi, HeLa, MDA 231, MCF-7 and 786-O). For this, after incubation with the compounds at different concentrations, cell viability was analyzed by MTT assay and a spontaneously transformed immortal keratinocyte cell line (HaCaT) was used as a control to analyze the cytotoxicity. Subsequently, E6 and E7 mRNA expression evaluation was performed by real-time PCR, p53 protein expression determination was analyzed by Western Blotting, and detecting the caspases 3 and 7 activity was analyzed using the luminescent assay of apoptosis. Although no compound has inhibited E6 and E7 expression in the CasKi cell line, AC13 cytotoxicity analyzes suggest ... / Mestre

Mimosa caesalpiniifolia (MIMOSOIDEAE), planta nativa e de grande ocorrência nas áreas semi-áridas do Brasil. É utilizada pelas populações locais como forrageira e na medicina caseira como cicatrizante, anti-inflamatório e males das vias respiratórias superiores. Espécies pertencentes a mesma família e gênero possuem atividades farmacológicas comprovadas experimentalmente, anticancerígena, anti-inflamatória e antimicrobiana, devido a presença de metabólitos secundários como taninos, ácidos fenólicos e flavonoides. No entanto, a maior parte dos constituintes químicos e atividades biológicas de M. caesalpiniifolia permanecem desconhecidas. A obtenção do extrato deu-se pelo processo de percolação, utilizando como líquido extrator hidroalcoólico 70%. Na etapa farmacobotânica, foram realizados ensaios que buscaram o conhecimento botânico da espécie em estudo. Na etapa farmacognóstica, o extrato e as frações foram identificados por comparações com padrões autênticos e técnicas espectroscópicas usuais (HPLC-PDA e HPLC-MS). Na atividade antimicrobiana utilizou-se o método de microdiluição em caldo, o extrato e as frações exibiram atividade inibitória de crescimento frente aos microrganismos avaliados e em concentrações de 5 a 1000 µg/mL. Na avaliação da atividade anticancerígena os resultados demonstraram atividade antiproliferativa significativa. A análise morfológica a fração acetato de etila (Fr-EtOAc) foi considerada a fração mais ativa. No ensaio do granuloma, ocorreu uma redução na formação do tecido granulomatoso nos animais tratados com a fração acetato de etila e fração butanólica (Fr-BuOH) na dose de 100 mg/Kg, seguida pela fração aquosa (Fr-AqOH) e extrato hidroalcoólico 70% (EHM) de 300 mg/Kg. No modelo para teste da atividade antinociceptiva observou-se que as três doses 30, 100 e 300 mg/kg do EHM, foram capazes de produzir redução significativa da hipernocicepção mecânica induzida pela injeção de carragenina. No teste do campo aberto e toxicidade as amostras não influenciaram na atividade geral e morte dos animais. Esses resultados indicam que o extrato e as frações de M. caesalpiniifolia testados, podem constituir alvo potencial no desenvolvimento de novos medicamentos para o controle farmacológico de processos inflamatórios, microbiológicos e anticancerígenos e para o conhecimento da química / Mimosa caesalpiniifolia Benth., native plant and high occurrence in semi-arid areas of Brazil. It is used by local populations as forage and is used in folk medicine as a healing, anti-inflammatory and upper respiratory tract. His family and gender have experimentally proven pharmacological activities such as anticancer activity, anti-inflammatory and antimicrobial, due to the presence of secondary metabolites such as tannins, phenolic acids and flavonoids. However, most of the chemical and biological activities of M. caesalpiniifolia remain unknown. The obtained extract was due to the percolation process, using 70% hydroalcoholic liquid extractor. In step Pharmacobotany, tests were conducted seeking the botanical knowledge of the species under study. Pharmacognostic In step, the extract and the fractions were identified by comparison with authentic standards and the usual spectroscopic techniques (HPLC-PDA and HPLC-MS). Antimicrobial activity used in the broth microdilution method, the extract and the fractions showed growth inhibitory activity against microorganisms and evaluated at concentrations 5-1000 µg/mL. In anticancer activity results showed significant antiproliferative activity. The morphological analysis of the Fr-EtOAc was considered the most active fraction. In the assay of granuloma, a reduction in granuloma tissue formation in the animals treated with Fr-EtOAc and Fr-BuOH at a dose of 100 mg / kg, followed by Fr-AqOH EHM and 300 mg / kg. In the model was observed antinociceptive three doses 30, 100 and 300 mg / kg EHM, were able to produce significant reduction in mechanical hypernociception induced by injection of carrageenin. In the open field test and toxicity samples did not influence the general activity and death of animals. These results indicate that the extract and fractions of M. caesalpiniifolia tested, may constitute a potential target in developing new drugs for the pharmacological control of inflammatory processes, and microbiological and anticancer knowledge of chemistry

Orientador: Christiane Pienna Soares / Coorientador: André Gonzaga dos Santos / Coorientador: Valéria Valente / Banca: Raquel Alves dos Santos / Banca: Marlus Chorilli / Resumo: Atualmente, o câncer cervical é considerado o terceiro tumor mais frequente nas mulheres do Brasil e o seu desenvolvimento, na maioria dos casos, esta relacionado com o Papilomavírus Humano (HPV). Frente ao exposto, tornam-se necessários à busca por tratamentos alternativos no combate do câncer cervical a partir dos produtos naturais, como a cordialina A, isolada da planta Cordia verbenacea DC. A cordialina A possui forte atividade antineoplásica, como também insolubilidade em meio aquoso. Dessa forma, os Sistemas Nanoemulsionados Lipídicos (SNL) têm sido explorados como ferramentas para aumentar a solubilidade de bioativos poucos polares em meio aquoso, como também aumentar a sua eficácia terapêutica. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar, in vitro, a atividade antineoplásica e os mecanismos de morte celular promovidos pela cordialina A, encapsulada e não encapsulada no SNL, nas linhagens celulares de câncer de colo uterino HPV-16 (SiHa), de HPV negativo (C-33A) e de queratinócitos humanos normais (HaCaT). Para a formulação do SNL foi acrescido de colesterol, tampão fosfato e sistema tensoativo composto por polioxietileno 20-cetil éter e Fosfatidilcolina de Soja (FS). O diâmetro de partícula encontrado nas formulações foi de 159,53 ± 8,0444 nm e 107 ± 0,3333 nm, o índice de polidispersão (PDI) médio foi de 0,38 ± 0,0466 e 0,214 ± 0,0126 e o potencial zeta foi de -16,83 ± 3,15 mV e -20,16 ± 1,68 mV para SNL e cordialina A + SNL, respectivamente. As fotomicrografi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Currently, cervical cancer is considered the third most frequent tumor in Brazilian women and its development, in most cases, is related to Human Papillomavirus (HPV). In view of the above, they are necessary to search for alternative treatments in the fight against cervical cancer from natural products, such as cordialina A, isolated from the Cordia verbenacea DC plant. The cordialina A has strong antineoplastic activity, as well as insolubility in aqueous medium. Thus, Lipid Nanoemulsion Systems (SNL) have been explored as tools to increase the solubility of a few polar bioactive in aqueous medium, as well as to increase its therapeutic efficacy. The aim of the present study was to evaluate in vitro the antineoplastic activity and mechanisms of cell death promoted by cordialin A, encapsulated and non-encapsulated in the SNL, in cervical cancer cell lines HPV-16 (SiHa) of HPV negative (C-33A) and normal human keratinocytes (HaCaT). For the formulation of the SNL was added cholesterol, phosphate buffer and surfactant system composed of polyoxyethylene 20-cetyl ether and Soy Phosphatidylcholine (FS). The particle diameter found in the formulations was 159.53 ± 8.0444 nm and 107 ± 0.3333 nm, the average polydispersion index (PDI) was 0.38 ± 0.0466 and 0.214 ± 0.0126 and the zeta potential was -16.83 ± 3.15 mV and -20.16 ± 1.68 mV for SNL and A + SNL, respectively. The photomicrographs... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Paulo Eduardo de Oliveira Carvalho / Coorientador: Antonio José Maria Catâneo / Banca: Donaldo Cerci da Cunha / Banca: Olavo Ribeiro Rodrigues / Banca: Marcos Vinícius Muriano da Silva / Banca: Gilberto Uemura / Resumo: Introdução: O câncer de mama metastático apresenta sobrevida inferior a 25% em cinco anos. A superexpressão do receptor HER2 nas células tumorais destas pacientes piora o prognóstico e diminui ainda mais sobrevida destas pacientes. O lapatinibe é uma droga que bloqueia a porção intracelular do receptor HER2 e esta ação poderia diminuir a proliferação das células neoplásicas diminuindo a progressão do tumor. Foi realizada uma revisão sistemática e metanálise dos estudos que avaliaram a eficácia e segurança do lapatinibe associado à quimioterapia ou terapia hormonal em mulheres com câncer de mama avançado com superexpressõ do HER2. Métodos: A busca dos estudos foi realizada nas bases MEDLINE, EMBASE, WEB OF SCIENCE, CENTRAL, ICTRP, ClinicalTrials.gov, Cochrane Breast Cancer Group. Foram analisados, como desfecho primário, a sobrevida global (SG), a sobrevida livre de progressão (SLP) e a qualidade de vida, e como desfechos secundários os efeitos colaterais relacionados ao tratamento. Resultados: Foram identificados e avaliados 1298 estudos. No final, aplicando os critérios de inclusão, foram selecionados cinco estudos. Juntos, estes estudos totalizaram 1127 pacientes com câncer de mama avançado (TNM estádio III ou IV) com superexpressão de HER2. Em ralação à SG foi observado que Lapatinibe associado a quimioterapia ou terapia hormonal diminui a probabilidade de morte em 20% (Hazard Ratio 0.80, 95% CI 0.69 to 0.94;) p=0,005. Em relação à SLP o Lapatinibe diminui a probabilidade de eventos de progressão tumoral ou morte por qualquer causa em 48% (Hazard Ratio 0.58, 95% CI 0.50 to 0.67 p<0,0001. Nenhum estudo analisou a qualidade de vida. Referente aos efeitos colaterais, os pacientes que receberam Lapatinibe tiveram mais diarreia (RR 2,5, 95 IC 1,82 a 3,43; I2 =86 p <0,00001, aumento de risco de eventos cardíacos (RR 1,74, 95 % IC 1,02 a 2,99; I2 =0% p 0,04), e maior risco de sofrer descontinuidade de... / Abstract: Introduction: The five years survival of women with metastatic breast cancer accounts less than 25%. HER2 is an epidermal growth factor; the overexpression of HER2 in the cancer cells decreases survival of these patients Lapatinib is a drug that blocks the intracellular domain of HER2. This blocking could stop or diminish the cell proliferation and improve the survival of these patients. WE performed systematic review and metaanalysis of studies that analyzed the efficacy and safety of lapatinib associated with chemotherapy or hormone therapy for patients with advanced breast cancer that overexpress HER2. Methods: A search of the studies was conducted in MEDLINE, EMBASE, WEB OF SCIENCE, CENTRAL, ICTRP, ClinicalTrials.gov, Cochrane Breast Cancer Group. There were analyzed as the primary endpoint, overall survival (OS), progression-free survival (PFS) and the quality of life, and as secondary endpoints side effects, Results: We identified and assessed 1298 studies. Appling the inclusion criteria were selected five studies. Together these studies included a total of 1127 patients with advanced breast cancer (TNM stage III or IV) with overexpression of HER2. In conclusion it was observed that: for OS lapatinib combined with other drugs decreases the probability of death in 20% (Hazard Ratio 0.80, 95% CI 0.69 to 0.94) p = 0.005. For PFS, lapatinib decreases the probability of tumor progression events or death from any cause in 48% (hazard ratio 0:58, 95% CI 0.67 to 0:50 P < 0,0001. None of the studies analyzed the quality of life. Refers to side effects, patients receiving Lapatinib had more diarrhea (RR 2.5, 95 CI 1.82 to 3.43; P<0.00001; increased risk of cardiac events (RR 1.74, 95% CI 1.02 the 2.99; P<0.04), and higher discontinuation of treatment (RR 4.00, 95% CI 1.44 the 11.17). Conclusion: The use of Lapatinib associated with other drugs decreases the probability of death and increases the likelihood of disease progression free ... / Doutor

Orientador: Debora Aparecida Pires de Campos Zuccari / Banca: Ana Elizabete Silva / Banca: Heidge Fukumasu / Banca: Alessandra Vidotto / Banca: Heloísa Cristina Caldas / Resumo:A transição epitélio-mesenquimal (EMT) é o processo pelo qual as células cancerosas a partir de tumores primários passam por uma conversão fenotípica para invadir e migrar, gerar metástases em tecidos ou órgãos distantes. Este processo pode ser induzido por fatores de crescimento, tais como Fator de Crescimento Transformante beta (TGF-β) e sua alta expressão tem sido implicada na angiogênese tumoral, na migração e invasão celular em muitos tipos de tumores. A expressão de ROCK-1 está associada com a malignidade dos tumores, enquanto a inibição desta molécula resulta em uma supressão significativa de metástases tumorais. A metformina, um fármaco utilizado no tratamento da diabetes, demonstrou inicialmente inibir a EMT e impedir o fenótipo mesenquimal pela repressão transcricional de pontos chave da regulação da EMT (ZEB1, TWIST1, SNAIL2, TGF-β) em células de câncer de mama. Os objetivos foram avaliar a expressão gênica e proteica de marcadores relacionados a metástase, em um estudo in vitro e in vivo, em linhagens de câncer de mama, após o tratamento com metformina, além do silenciamento gênico do TGF-β1 para inibição da transição epitéliomesenquimal. Foi realizado a transfecção da linhagem celular metastática de tumor mamário canino CF41 de forma estável após a construção de um pequeno RNA de interferência para desenvolver derivados clonais que expressam níveis reduzidos de TGF-β1 (células TGF-β1sh). Este foi subsequentemente combinado com o tratamento com metformina, para analisar os efeitos sobre a migração de células, assim como a expressão dos marcadores de EMT E-caderina e N-caderina, quantificados através de imunofluorescência e do qRT-PCR. As linhagens mamárias humanas MCF-7 (nãometastática) e MDA-MB-231 (metastática) foram tratadas com metformina e inibidor Y27632, após a indução da EMT por TGF-β1 para... / Abstract: Epithelial mesenchymal transition (EMT) is the process by which cancer cells from primary tumors pass through a phenotypic conversion to invade and migrate, generating metastases in organs or tissues distant. This process can be induced by growth factors such as transforming growth factor beta (TGF-β) and its overexpression has been implicated in tumor angiogenesis, cell migration and invasion in many cancers. ROCK- 1 expression is associated with the malignant character of tumors, while inhibiting this molecule results in a significant suppression of tumor metastasis. Metformin, a drug use for the treatment of diabetes, was previously shown to inhibit EMT by suppressing expression of key transcription factors in breast cancer cells. The aims were to evaluate the gene expression and protein expression of related markers metastasis, in a study in vitro and in vivo in breast cancer cell lines after treatment with metformin in addition to the gene silencing of TGF-β1 for inhibiting epithelial-mesenquimal transition. These aims were contemplated performing transfected of canine metastatic mammary tumor cell line CF41 with small interfering RNA constructs to develop clonal derivatives expressing reduced levels of TGF-β1 (TGF-β1sh cells). This was subsequently combined with metformin treatment, to look at effects on cell migration, as well as the expression of the EMT markers E-cadherin and N-cadherin, which were quantified by immunofluorescence and qRT-PCR. MCF-7 and MDA-MB-231 cell lines were treated with metformin and Y27632, after induction of EMT by TGF-β1, to examine the effects on cell migration as well as the protein expression of the ROCK-1 markers, vimentin, Ecadherin, CD44 and CD24 by immunocitochemistry. In an in vivo study, unmodified or TGF-β1 shRNA-expressing CF41 cells were injected in the inguinal region of nude athymic female mice that were treated with ... / Doutor

Orientador: Jorge Fernando Brandão Pereira / Banca: Carlota de Oliveira Rangel Yagui / Banca: Marlus Chorilli / Banca: Ariela Veloso de Paula / Banca: Luis Henrique Souza Guimarães / Resumo: A L-asparaginase destaca-se como um importante biofármaco utilizado no tratamento de leucemia, além da sua utilização na indústria alimentícia. Seu alto custo de produção se deve principalmente às etapas de purificação, que correspondem em geral a mais de 70% do valor do produto final. Assim, novos processos de extração líquido-líquido, como a aplicação de Sistemas Aquosos Bifásicos (SABs), surgem como técnicas alternativas de extração/purificação mais econômica e biocompatível. Nesse sentido, este trabalho avaliou um processo alternativo para a purificação de baixa resolução da enzima L-asparaginase (ASNase) utilizando-se SABs com polímeros e sais ou líquidos iônicos (LIs). Inicialmente, foi realizado um estudo comparativo de diferentes metodologias de quantificação da atividade da ASNase comercial, a fim de compreender as interferências dos métodos em diferentes condições, e assim estabelecer um método de quantificação adequado para determinação da atividade de ASNase nos SABs. A seguir, a estabilidade da ASNase foi avaliada frente aos diferentes componentes de fases dos SABs. Dessa forma, LIs derivados de colinas e polímeros foram testados como solventes alternativos na biocatálise, e a fim de compreender o efeito do tamanho da cadeia do ânion dos LIs sob a estabilidade da enzima, foram testadas soluções aquosas contendo as colinas com os seguintes ânions: cloreto ([Ch]Cl); acetato ([Ch][Ac]); propanoato ([Ch][Pro]); butanoato ([Ch][But]) e hexanoato ([Ch][Hex]). O aumento... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: L-asparaginase (ASNase) is an important biopharmaceutical used in the treatment of leukemia, as well in industrial food processes. Its high production costs are mainly due to purification steps, in general, up to 70% of the final product value. Therefore, new liquid-liquid extraction processes, such as Aqueous Biphasic Systems (ABS), have appeared as more economical and biocompatible extraction/purification alternatives. In this work an alternative process for the purification of the enzyme L-asparaginase (ASNase) using ABS composed of polymers and salts or ionic liquids (ILs) was evaluated. In the first stage, a comparative study of different activity quantification methods of the commercial ASNase was carried out. This study intended to determine the interferences of the quantification methods and to establish the most adequate method for the quantification of ASNase activity after the extraction with different ABS. Further, the stability of the ASNase in the presence of different type and concentration of phase-forming agents, namely cholinium based-ILs ([Ch]+ -ILs) and polymers, was evaluated. Thus, in order to understand the effect of the increase of anion alkyl chain length of the ILs in the enzyme stability, aqueous solutions of [Ch]+ -ILs, with the following anions, were tested: chloride ([Ch]Cl), acetate ([Ch][Ac]), propanoate ([Ch][Pro]), butanoate ([Ch][But]) and hexanoate ([Ch][Hex]). The increase of the anion alkyl chain length had a negative effect on the enzymatic activity due to the affinity of these compounds to the protein structure. [Ch]Cl and [Ch][Ac] were selected as the best alternative solvents, because of their ASNase stability aptitude, as well enzymatic activity enhancing effect. The stability and activity of ASNase in aqueous solutions of polyethylene glycol... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-27Bitstream added on 2014-08-13T18:00:40Z : No. of bitstreams: 1 000756666.pdf: 613574 bytes, checksum: a92a80d34136f09d16ed171a5dede264 (MD5) / Os medicamentos antineoplásicos são uma das classes de produtos farmacêuticos com maior potencial para causar efeitos negativos no ambiente. Várias fontes contribuem para a potencial contaminação do ambiente com esses medicamentos, como emissões da indústria ou descarte direto de produtos farmacêuticos nos domicílios, mas a principal fonte de compostos citostáticos no esgoto ou no ambiente são excreções (urina e fezes) de pacientes em tratamento. Neste estudo foi analisada a presença do antineoplásico 5-fluorouracil (5-FU) e sua quantificação nos efluentes de um hospital oncológico de grande porte e na rede municipal de tratamento de esgoto. Foram analisadas 10 amostras obtidas de um ponto distinto (A), a partir dos efluentes do Hospital de Câncer de Barretos (HCB) e 5 amostras foram obtidas de dois pontos diferentes (B e C) do efluente da Estação de Tratamento de Esgoto (ETE) da cidade de Barretos (ETEB), que tem como destino final o Ribeirão Pitangueiras. Observou-se a presença do fármaco na concentração de 26,7 a 733 μg/L em todas as 10 amostras de água residuária do HCB analisadas, os resultados foram muito superiores aos encontrados em outros trabalhos semelhantes realizados em outros hospitais. Também foi realizado o cálculo das concentrações previstas do agente citostático na água residuária do HCB, utilizando-se parâmetros como o consumo de 5-FU, o consumo de água e a fração de droga excretada na forma não metabolizada. Encontrou-se uma baixa correlação entre a concentração prevista e a concentração medida analiticamente. Esse baixo índice de recuperação pode ter ocorrido decorrente da excreção do fármaco realizada fora do ambiente hospitalar, de uma possível degradação da droga decorrente da instabilidade da molécula ou a perda de uma porção da droga adsorvida na matéria em suspensão dos efluentes. O impacto do descarte de 5-FU no meio ambiente foi avaliado através ... / Anticancer drugs represent one of the classes of pharmaceuticals with the greatest potential to cause negative effects on the environment. Contamination of the environment with these drugs may occur from several sources, such as emissions from industry or direct disposal of pharmaceuticals in households, but the main source of cytostatic compounds in the environment occur through sewage emission or excreted fluids (feces and urine) of patients receiving treatment. In this study we analyzed the presence of the antineoplastic 5-fluorouracil (5-FU) and its quantification in the effluents originated from a large oncology hospital and in the local municipal wastewater system. We analyzed 10 samples obtained from a distinct collection site (A), from the effluents of the Barretos Cancer Hospital (HCB). Also, 5 samples were obtained from two different sites (B and C) in the effluent from the Sewage Treatment Plant in Barretos (ETEB), whose final destination is the stream known as Ribeirão Pitangueiras. Presence of 5FU was observed in concentrations ranging from 26.7 to 733 μg/L in all 10 samples of the wastewater originated at the HCB collected at site A. These results were far superior to those found in similar studies performed at other hospitals. The predicted concentrations of the cytostatic agent in the wastewater from HCB was calculated using parameters such as 5-FU consumption, water consumption and the fraction of drug excreted unmetabolized. We found a low correlation between the predicted concentrations and the measured concentrations. This low recovery rate may have occurred due to probable excretion of the drug occuring outside the hospital facilities, since the majority of the patients were ambulatory. Other possibilities are drug degradation due to instability of the molecule and loss of a portion of the drug adsorbed in suspended solid matter of the effluent. The possible impact of the emission of 5-FU to the ...

Orientador: Marlus Chorilli / Coorientador: Valéria Valente / Banca: Rose Mary Zumstein Georgetto Naal / Banca: Gislaine Ricci Leonardi / Banca: Janice Rodrigues Perussi / Banca: Marcos Antonio Correa / Resumo: O trans-resveratrol (RES) atua na prevenção e no tratamento de desordens cutâneas, porém apresenta baixa biodisponibilidade e rápida metabolização quando administrado por via oral em humanos. As nanopartículas lipídicas sólidas (NLSs) têm sido exploradas para a administração cutânea de fármacos, em virtude das características de interação com a pele. Assim, o objetivo deste capítulo foi à avaliação in vitro e in vivo da atividade do RES incorporado em NLSs para administração cutânea, bem como a avaliação da atividade antinociceptiva e antiedematogênica in vivo e dos efeitos celulares em células HaCat e B16F10 dos sistemas nanoestruturados. As formulações desenvolvidas foram selecionadas através de design fatorial, as quais eram compostas por ácido esteárico (AE), como lipídeos sólidos e fosfatidilcolina de soja (FS), polissorbato 80 (T80) e poloxamer 407 (P407) como tensoativos (F1). A esta formulação foi acrescido brometo de cetrimônio (BC) como tensoativo catiônico para promoção de carga superficial positiva (F2). O RES foi adicionado na fase lipídica da formulação, obtendo-se as formulações F1.RES e F2.RES, respectivamente. O diâmetro hidrodinâmico médio das formulações foi de 195,0 ± 3,34 nm, 241,3 ± 48,33 nm, 159,15 ± 4,78 nm e 158,25 ± 33,92 nm para F1, F1.RES, F2 e F2.RES, respectivamente. O potencial zeta (mV) das formulações foi -25,5 ± 1,01; -26,0 ± 1,67; 30,6 ± 1,13 e 30,0 ± 1,85 mV para F1, F1.RES, F2 e F2.RES, respectivamente. O RES livre foi quantificado de acor... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Not available / Doutor

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T03:52:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 289110.pdf: 1050925 bytes, checksum: e297bbf3d275514b4ad96dad01cd52a3 (MD5) / O câncer está entre as causas mais freqüentes de morte no mundo. É considerado um importante problema de saúde pública em países desenvolvidos e em desenvolvimento, sendo a segunda causa de morte no Brasil e no mundo, superado somente pelas doenças do sistema cardiovascular. Apesar disto até o momento não existe uma terapia efetiva para o tratamento de todos os tipos de câncer além de que a maioria dos quimioterápicos em uso apresentam elevada toxicidade. Esforços vêm sendo dirigidos no sentido de desenvolver fármacos antitumorais tão ou mais eficazes do que os quimioterápicos já disponíveis, porém com menor toxicidade e potencial para desenvolver resistência terapêutica. Muitos dos medicamentos utilizados atualmente resultaram da purificação de produtos naturais, principalmente vegetais. Neste contexto, o presente projeto objetivou avaliar o potencial antitumoral de Cordia verbenacea planta medicinal brasileira, vulgarmente conhecida como erva baleeira que é popularmente utilizada em Santa Catarina para tratamento de tumores e inflamações. Para se atingir tal objetivo foram realizados experimentos para avaliar a atividade citotóxica e antiproliferativa in vitro e antitumoral in vivo. Para tanto, realizou-se os ensaios de viabilidade celular (MTT) em células de tumor ascítico de Ehrlich (TAE) e MCF-7, proliferação celular (incorporação de [3H] timidina) e capacidade pró-poptótica (Brometo de etídio/Laranja de acridina (BE/LA)) em células TAE. Além disso, verificou-se o possível efeito dos extratos sobre o DNA plasmidial (atividade nucleásica) assim como a capacidade protetora do extrato sobre o DNA (com a geração de espécies reativas de oxigênio com Fe-EDTA). Foi avaliada a expressão da COX-2 através de Wertern blot em células MCF-7. A determinação da atividade antitumoral in vivo foi realizada em camundongos Balb/c inoculados com o TAE e tratados com extrato bruto (EB) e supercrítico (ESC) nas concentrações de 37,5; 75 e 150 mg/Kg. Nos ensaios do MTT e incorporação de timidina triciada os resultados demonstraram que o EB e ESC reduziram de maneira significativa a viabilidade e proliferação celular. A coloração com BE/LA revelou que o provável tipo de morte celular induzida pelos tratamentos trata-se de apoptose, uma vez que a grande maioria das células adquiriram uma coloração laranja-avermelhada, característica de células apoptóticas. Os extratos mostraram-se ineficazes no teste de ativação nucleásica. O ESC foi capaz de reduzir significativamente a expressão da COX-2 em células MCF-7. Os ensaios in vivo demonstram que tanto EB quanto ESC apresentaram efeitos antitumorais, sendo os melhores resultados observados para a dose de 150 mg/Kg. O tratamento com os extratos também causou importante inibição do crescimento tumoral nos camundongos, principalmente o ESC. EB e ESC elevaram a proporção de células inviáveis/viáveis em mais de duas vezes quando comparado ao controle negativo. EB e ESC aumentaram o tempo médio de sobrevida e a concentração de GSH. De acordo com os resultados podemos concluir que ESC apresentou atividade antitumoral mais potente que o extrato bruto. Os resultados obtidos foram favoráveis à validação da utilidade de C. verbenacea como potencial agente antitumoral. Além disso, foi considerado que o método de extração supercrítica pode aprimorar a atividade antitumoral de C. verbenacea, como demonstrado com os resultados apresentados acima, uma vez que estes efeitos provavelmente se devam à presença de ?-humuleno e ?-cariofileno presente nos extratos, especialmente no extrato supercrítico. Também a partir dos resultados obtidos podemos supor que um possível mecanismo de ação antitumoral dos extratos possa ser a redução da expressão da COX-2, o que poderia levar a um bloqueio da sobrevivência celular e indução da apoptose.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T15:47:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 289034.pdf: 1049548 bytes, checksum: 5e8bb08ab5eb868e74d88ac9eb828c34 (MD5) / Apesar de todos os recursos existentes na atualidade para o tratamento do câncer uma diversidade de problemas é observada tanto em relação à eficácia dos medicamentos e/ou sua resistência quanto à gama de efeitos colaterais que podem ser induzidos pelos mesmos. Na tentativa de aprimorar a terapia antitumoral novos agentes antineoplásicos de origem natural têm sido buscados visto que a maior parte dos medicamentos existentes é proveniente de plantas medicinais. Croton celtidifolius pertencente à família Euphorbiaceae, composta por diversas plantas que possuem atividade antitumoral, é uma planta promissora uma vez que é utilizada popularmente com esta finalidade. O presente estudo propôs avaliar a atividade citotóxica, nucleásica e pró-apoptótica, in vitro, e a atividade antitumoral e antiangiogênica, in vivo, do látex de C. celtidifolius. As análises espectrofotométricas do látex bruto permitiram a identificação de um alto conteúdo de fenóis totais (18,54 g/L), enquanto que as análises cromatográficas (CLAE) permitiram a detecção de compostos fenólicos como flavonóis (miricetina, quercetina e campferol) e flavan-3-óis (catequina, epicatequina, galocatequina e epigalocatequina). No ensaio do MTT, para a avaliação da citotoxicidade, a CI50 encontrada para as células de Ehrlich e MCF-7 foram 169 ± 1,8 e 187 ± 2,2 µg/mL, respectivamente. Além disso, foi possível observar uma redução dose-dependente significativa na viabilidade celular. A coloração diferencial com brometo de etídio (BE) / laranja de acridina (LA) demonstrou o predomínio da indução de morte celular por apoptose que pode possivelmente ser explicada através dos resultados obtidos no ensaio de atividade nucleásica onde o látex foi capaz de causar quebras simples e dupla no DNA plasmidial submetido ao tratamento. Adicionalmente os experimentos realizados com os animais portadores do tumor ascítico de Ehrlich (TAE) demonstraram que o látex de C. celtidifolius foi capaz de inibir o crescimento tumoral ao reduzir o peso dos animais, o volume de tumor, a quantidade de células compactadas e a proporção de células/volume de tumor. A inibição tumoral observada para o látex (La1: 0,78; La2: 1,56 e La3: 3,25 mg/kg) foi 26; 32 e 54%. O dado mais relevante neste ensaio foi o aumento dose-dependente no tempo médio de sobrevida (TMS) (CN: 13; La1: 15,5; La2: 16 e La3: 17,5 dias) e no percentual de aumento de longevidade (PAL) (CN: 0,00; La1: 19,23; La2: 23,08 e La3: 34,61%). Além disso, também foi relatado o efeito antiangiogênico do látex (0,5; 1,0; 1,5 e 2,0 mg/disco) uma vez que este foi capaz de provocar redução na porcentagem de vasos sanguíneos (41; 56; 66 e 75%) observados no ensaio da membrana corioalantóica (CAM). O látex não provocou toxicidade ao embrião uma vez que não foi capaz de alterar a sua morfogênese. Assim, conclui-se que C. celtidifolius apresenta efeitos citotóxico, nucleásico e pró-apoptótico inter-relacionados; e ainda, potencial efeito antitumoral e antiangiogênico. / Despite all the resources at this time for cancer treatment is a diversity of problems observed regarding the efficacy of drugs and/or its resistance as well as the side effects that can be induced by them. In an attempt to improve antitumor therapy new antineoplastic agents from natural sources has been sought since the majority of existing drugs is derived from medicinal plants. Croton celtidifolius belonging to the family Euphorbiaceae, comprising several plants that have antitumor activity, is a primising plant since it is popularly use for this pourpose. The present study was to evaluate the citotoxic, nucleasic and pro-apoptotic activities in vitro, and antitumor and antiangiogenic activities in vivo from the latex of C. celtidifolius. The spectrofotometric analysis of crude latex allowed the identification of a hight content of total phenols (18.54 g/L), while chromatography (HPLC) allowed the detection of phenolic compounds such as flavonols (myricitin, quercetin and kaempferol) and flavan-3-ols (catechin, epicatechin, gallocatechin and epigallocatechin). In the MTT assay, for the evaluation of citotoxicity, the IC50 observed for the Ehrlich and MCF-7 cells were 169 ± 1.8 e 187 ± 2.2 µg/mL, respectively. Furthermore we observed a significant dose-dependent reduction in cell viability. The differential staining with ethidium bromide (BE) / acridin orange (LA) showed the predominance of the induction of apoptotic cell death that can possibly be explained from the tests results of nucleasic activity where latex was able to induced simple and double breaks on treated plasmidal DNA. In addition the experiments with animals carrying the Ehrlich ascitic tumor (TAE) showed that the latex of C. celtidifolius was able to inhibit tumor growth by reducing the weigth of the animals, tumor volum, the amount of packed cells and the proportion of cells / tumor volum. The tumor inhibition observed for the latex (La1: 0.78; La2: 1.56 and La3: 3.25 mg/kg) was 26; 32 and 54%. The most relevant data from this trial was a dose-dependent increase in mean survival time (TMS) (CN: 13; La1: 15.5; La2: 16 e La3: 17.5 dias) and the increase in the percentage of longevity (PAL) (CN: 0.00; La1: 19.23; La2: 23.08 and La3: 34.61%). Furthermore, was showed the antiangiogenic effect of the latex (0.5; 1.0; 1.5 e 2.0 mg/disc) since it was capable of causing reduction in the percentage of blood vessels (41; 56; 66 and 75%) observed in the chorioallantoic membrane assay (CAM). The latex caused no toxicity to the embryo as it was unable to alter its morphogenesis. Thus, it appears that C. celtidifolius latex presents citotoxic, nucleasic and pro-apoptotic effects interrelated and also potential antiangiogenic and antitumor effects.