Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T18:42:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 290080.pdf: 5606807 bytes, checksum: afc25d9417669f8ac0daf93e24bec9ca (MD5) / As chalconas (1,3-diaril-2-propen-1-onas), formam o núcleo de uma ampla variedade de compostos biológicos obtidos de vegetais, que têm espontado como potenciais agentes antitumorais. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo principal avaliar os efeitos antineoplásicos in vitro e in vivo do composto Chalcona N9, obtido sinteticamente. A Chalcona N9 demonstrou ser citotóxica nas linhagens celulares de carcinoma de pulmão humano A549, melanoma de camundongos B16-F10, glioma de rato C6, carcinoma de próstata humano DU 145, carcinoma de mama humano MCF-7 e glioblastoma humano U-87 MG e com citotoxicidade menor sobre a linhagem imortalizada de fibroblastos L929. Nos ensaios de citometria de fluxo para avaliação do ciclo celular foi demonstrado que a Chalcona N9 induziu o acúmulo de células U-87 MG na transição das fases G1-S. Ensaios por Western blotting demonstraram que a Chalcona N9 foi capaz de interferir na expressão de proteínas que participam do ciclo celular, reduzindo a expressão das ciclinas A, D1 e E, e quinases dependentes de ciclina CDK 2 e 6 nas células de glioma humano U-87 MG. Os ensaios de incorporação de Anexina V-FITC demonstraram que as duas concentrações utilizadas da Chalcona N9 induziram a morte por apoptose nas células U-87 MG ao final de 24 horas, e aumento no número de células apoptóticas ao final de 48 horas de tratamento com a Chalcona N9. A morte por apoptose foi também confirmada pelo ensaio de TUNEL. Através da utilização da sonda fluorescente JC-1, foi possível verificar que a Chalcona N9 alterou o potencial de membrana mitocondrial, num período de 2 até 24 horas, sugerindo um efeito sustentado sobre a permeabilidade mitocondrial. Alterações morfológicas da U-87 MG, como células arredondadas e fragmentação no núcleo, puderam ser visualizadas quando observadas por microscopia de fluorescência após o período de 24 horas de incubação com a Chalcona N9 na maior concentração utilizada. O tratamento com a Chalcona N9 reduziu significativamente o número de colônias das células U-87 MG, após 24 horas de incubação. O número de clones das células de glioblastoma multiforme após 48 horas de tratamento, foi significativamente reduzido, comparado com os clones das células do grupo controle. Nos modelos de tumor ascítico de Ehrlich em camundongos BALB/c, modelo de melanoma B16-F10 em camundongos C57Bl/6 e glioblastoma multiforme humano em camundongos nude, inoculados com as células U-87 MG, a Chalcona N9 foi capaz de reduzir a progressão tumoral. Em resumo, podemos concluir que a Chalcona N9 promove um atraso no ciclo celular, especialmente na fase de transição G1/S, além de promover o desencadeamento do processo apoptótico. O tratamento com a Chalcona N9 também altera o potencial de membrana mitocondrial e diminui o potencial proliferativo das células U-87 MG. Nossos resultados sugerem que a Chalcona N9 apresenta potencial atividade antitumoral sugerindo potenciais perspectivas com este composto em terapias contra o câncer. / The chalcones (1,3-diaryl-2-propen-1-ones), a group of aromatic enones, form the core of a wide variety of organic compounds obtained from plants, and in the past 15 years those compounds have emerged as potential antitumor agents. This study aimed at evaluating the in vitro and in vivo antineoplastic effects of the compound Chalcone N9, which was synthetically obtained. The Chalcone N9 was shown to be cytotoxic in cell lines of human lung carcinoma A549, mouse melanoma B16-F10, rat glioma C6, human prostate carcinoma DU 145, human breast carcinoma MCF-7 and human glioblastoma U-87 MG and with lower cytotoxicity in immortalized fibroblast line L929. In tests of flow cytometry used to assess the cell cycle of U-87 MG cells, it was demonstrated that Chalcone N9 induced accumulation of cells in transition from G1-S phase. Western blotting assays showed that Chalcone N9 was able to influence the expression of proteins involved in the cell cycle, reducing the expression of cyclins A, D1 and E and the cyclin dependent kinases CDK 2 and 6. The annexin V-Fitc assay, which detects the incorporation of annexin, demonstrated that both concentrations of Chalcone N9 induced apoptosis in U-87 MG cell after 24 hours and increased the number of apoptotic cells after 48 hours of incubation with Chalcone N9. Death by apoptosis was also confirmed by TUNEL assay. By using the fluorescent probe JC-1, we observed that halcone N9 altered the mitochondrial membrane potential in a period of 2 to 24 hours, suggesting a sustained effect on mitochondrial permeability. Morphological changes of U-87 MG as round cells and fragmentation in the nucleus could be visualized when observed by fluorescence microscopy after 24 hours incubation with Chalcone N9 at the highest concentration used. Treatment with Chalcone N9 significantly reduced the number of colonies of cells U-87 MG, 24 hours after incubation. The number of clones of cells of glioblastoma multiforme after 48 hours of treatment was significantly reduced compared with clones of cells of the control group. In the models of Ehrlich ascites tumor in BALB/c mice, melanoma B16-F10 in C57BL/6 mice and human glioblastoma multiforme in nude mice inoculated with U-87 MG cells, Chalcone N9 was able to reduce tumor progression. In summary, we conclude that the Chalcone N9 promotes a delay in cell cycle, especially during the transition G1 / S, besides promoting the activation of the apoptotic process. Treatment with Chalcone N9 also changes the mitochondrial membrane potential and decreases the proliferative potential of U-87 MG cells. Our results suggest that Chalcone N9 has a potential antitumor activity suggesting potential prospects with this compound in cancer therapies.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-graduação em Farmácia, Florianópolis, 2009. / Made available in DSpace on 2012-10-24T07:43:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 274209.pdf: 14556379 bytes, checksum: 6f33496ccc709255d074d7cf5e2469d9 (MD5) / Os agentes antineoplásicos atingem células que estão em processo de divisão celular, assim, a rápida taxa de renovação celular e diferenciação da medula óssea (MO) tornam o sistema hematopoiético um alvo suscetível à toxicidade por esses agentes. A MO é formada por um estroma composto de muitos tipos celulares (fibroblastos, macrófagos, células endoteliais e adipócitos) e uma matriz extracelular que juntos formam um microambiente ideal favorecendo a modulação da quiescência, auto-renovação e comprometimento de células-tronco mesenquimais (CTMs), bem como, proliferação, maturação e apoptose de células hematopoiéticas. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos do Mesilato de Imatinibe (MI), um fármaco inibidor de proteínas e receptores tirosinoquinases como c-Kit, fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF), fator de célula-tronco (SCF), c-Abl, BCR-ABL envolvidos em diferentes vias de sinalização celular; sobre células progenitoras hematopoiéticas (CFU-GM) e células do estroma da MO de camundongos saudáveis. Por meio de ensaios clonogênicos em meio semi-sólido e cultura de células aderentes do estroma da MO, avaliamos o potencial mielossupressor do MI através de ensaio de viabilidade celular MTT e Laranja de Acridina/ Brometo de Etídio (LA/BE), citoquímica para identificação de adipócitos, ciclo celular, proliferação celular por incorporação do BrdU e expressão de alfa-actina de músculo liso (a-SMA). Quanto às células hematopoiéticas, os resultados demonstraram que o MI reduziu gradativamente o crescimento de colônias de granulócitos/macrófagos (CFU-GM), a IC50 obtida foi 26,5µM e a inibição total ocorreu em 60µM. Quanto às células do estroma, no 4º e 8º dias de cultura, não houve diferença significativa no percentual de proliferação avaliado pela incorporação de BrdU, sendo que em 10µM houve uma tendência em aumentar a proliferação. No 14º dia a proliferação diminuiu gradativamente e com 7,5µM a proliferação foi reduzida a aproximadamente 5%. O percentual de células viáveis por MTT foi semelhante no 7º e 14º dias, aumentando até 10µM e então reduzindo até atingir 0% em 25µM. A morfologia da maioria das células não tratadas e células tratadas com baixas concentrações de MI (2,5µM) era tipicamente fibroblástica, e conforme se aumentou a concentração de MI (principalmente a partir de 10µM), predominaram as células de morfologia arredondada, do tipo macrófago, as quais apresentaram inibição apenas em altas concentrações (20-25µM). A fluorescência com LA/BE mostrou os mesmos resultados vistos no MTT e revelou a presença de corpos apoptóticos, principalmente em 20µM, confirmando o efeito do fármaco na viabilidade celular. O ciclo celular das células do estroma da MO no 14º dia de cultivo mostrou a ocorrência de bloqueio das células nas fases G0/G1 (66,3% no controle para 91,5% em 15µM) e diminuição do percentual de células nas fases S e G2/M. Em 2,5µM, a expressão de a-SMA reduziu para 45,74% e foi quase totalmente inibida a partir de 10µM. A presença de adipócitos corados por Oil Red só foi observada no grupo controle. Estes resultados em conjunto sugerem um efeito mielossupressor do MI sobre células da MO saudável, o que é indesejado já que a maioria dos pacientes estará exposta por muito tempo a esse fármaco. / The antineoplastic agents affect cells that are in the process of cell division, thus rapid rate of cell renewal and differentiation of bone marrow (BM) makes the hematopoietic system a susceptible target toxicity by these agents. The BM is formed by a stroma composed of many cell types (fibroblasts, macrophages, endothelial cells and adipocytes) and an extracellular matrix that together form an ideal microenvironment favoring the modulation of quiescence, self-renewal and commitment of mesenchymal stem cells (MSCs), as well as proliferation, maturation and apoptosis of hematopoietic cells. In this context, the objective this work was to evaluate the effects of Imatinib Mesylate (IM), a drug inhibitor of tyrosine kinase proteins and receptors as c-Kit, platelet derived growth factor (PDGF), stem cell factor (SCF), c-Abl, BCR-ABL, involved in different signaling pathways of hematopoietic progenitor cells (CFU-GM) and stromal cells from BM of healthy mice. By clonogenic assays in semisolid medium and culture of adherent stromal cells from the BM, we evaluated the potential myelosuppressive of IM through the test cell viability MTT and Acridine Orange/Ethidium Bromide (AO/EB), cytochemistry to identify of adipocytes, cell cycle, cell proliferation by incorporation of BrdU and expression of alpha-smooth muscle actin (a-SMA). As for hematopoietic cells, the results showed that the MI gradually reduced the growth of colonies of granulocytes/macrophages (CFU-GM), the IC50 obtained was 26.5µM and total inhibition occurred at 60µM. The stromal cells in 4 and 8 days of culture, no significant difference in the percentage of proliferation measured by BrdU incorporation, and in 10µM there was a tendency to increase proliferation. In 14 days the proliferation decreased gradually and at 7.5 µM proliferation was reduced to about 5%. The percentage of viable cells by MTT was similar at 7 and 14 days, rising to 10µM and then reducing to reach 0% at 25µM. The morphology of most cells untreated and cells treated with low concentrations of IM (2.5µM) was typically fibroblastic, and in more elevated concentrations of IM (mainly from 10µM), the predominant cells were rounded morphology of type macrophages, which were inhibited only at high concentrations (20-25µM). Fluorescence with AO/EB showed the same results seen in the MTT and revealed the presence of apoptotic bodies, especially in 20µM, confirming the drug effect on cell viability. The cell cycle of stromal cells from the BM on day 14 of culture indicates the occurrence of blockage of cells in G0/G1 phase (66.3% in control to 91.5% in 15µM) and decreased the percentage of cells in S phase and G2/M. At 2.5µM, the expression of a-SMA decreased to 45.74% and was almost completely inhibited from 10µM. The presence of adipocytes stained with Oil Red was observed only in the control group. These results together suggest a myelossupressive effect of IM on healthy cells of the BM, which is undesirable since the majority of patients of will be exposed for a long time with this drug.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Enfermagem, 2014 / Made available in DSpace on 2015-06-02T04:01:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 333909.pdf: 1708112 bytes, checksum: f59fadd6c2a6c80e28771a9d01b9b47e (MD5) Previous issue date: 2014 / A discussão acerca do tema segurança tem se ampliado nos últimosanos, chamando a atenção das organizações, de pesquisadores, dosgestores, dos trabalhadores das diversas áreas da saúde. Vale destacar aimportância dessas reflexões acerca da segurança do paciente e saúdedos trabalhadores nos cenários de saúde referentes à terapiaantineoplásica. Esta pesquisa teve como objetivo elaborar critériosrelativos à prevenção de erros de medicamentos antineoplásicos, quecontribuam para a construção de uma política de gestão de segurança eque possibilitem a segurança do paciente e dos trabalhadores. Trata-sede um estudo exploratório descritivo, com abordagem qualitativa,realizado em duas instituições públicas que oferecem atendimentoexclusivo pelo Sistema Único de Saúde. Uma das instituições édestinada especificamente ao cuidado a pacientes oncológicos e a outrainstituição, por ser um hospital universitário/geral, envolve além docuidado oncológico, uma variedade de doenças complexas. A coleta dedados ocorreu no período de maio a setembro de 2013, a partir darealização de entrevistas semiestruturadas e observação sistemática emunidades de internação para adultos, direcionadas para o cuidadooncológico. Fizeram parte do estudo 16 profissionais de saúde, entreeles farmacêuticos, enfermeiros, técnicos de Enfermagem e chefes deEnfermagem das unidades de internação. A análise dos dados baseou-sena análise de conteúdo proposta por Bardin. Como resultados a pesquisadestacou que a organização/processo de trabalho referente ao pacienteoncológico em terapia antineoplásica, deve ser pensada a partir dasexigências diferenciadas e específicas de cuidados, principalmenterelativas à sobrecarga de trabalho associada ao dimensionamentoinadequado de pessoal. Reconhece a necessidade de especial atenção,conhecimento e capacitação específica para os profissionais visando aprevenção de erros e acidentes durante a realização dessa atividade.Evidencia a adequação da área física, o uso de equipamentos desegurança e dispositivos tecnológicos, direcionados ao preparo eadministração das medicações antineoplásicas, como forma de priorizara segurança do paciente e a saúde dos trabalhadores. Salienta aresponsabilidade profissional durante a terapia antineoplásica,considerando preponderante a participação de farmacêuticos eenfermeiros nesse processo. Destaca a necessidade de: conferência dosmedicamentos durante todas as etapas da terapia antineoplásica,orientação aos pacientes/familiares, observação das condições clínicasdo paciente antes do inicio da infusão, monitoramento do pacientequanto a sinais/sintomas, possíveis reações adversas, complicações e/ouacidentes com esses medicamentos. Entre os erros que mais ocorrem emrelação à segurança do paciente ressalta: erros relacionados à prescriçãomédica, ao tempo de infusão, a troca de pacientes e ao extravasamentointerno de medicamentos. Em relação aos acidentes de trabalho, apontao extravasamento externo de medicamentos antineoplásicos como maiorfator de risco para os profissionais envolvidos. Relaciona as causas destecom descuido dos profissionais, tanto na etapa de preparo como durantea instalação dos medicamentos, deficiência dos equipamentos, falta ounão uso dos equipamentos de proteção individual. Denotou-se que asubnotificação de erros em relação ao paciente está associada ao medodos profissionais devido à cultura punitiva ainda presente nasinstituições hospitalares. Em relação aos acidentes de trabalho,identifica-se o desconhecimento de encaminhamentos e negligência dosprofissionais em relação a sua saúde. Apesar dos avanços naslegislações e políticas públicas relacionadas à segurança do paciente edos trabalhadores, os ambientes de trabalho, em sua maioria, aindaexpõem esses sujeitos a diferentes riscos, destacando o risco químico,sendo que esses riscos também afetam o meio ambiente, quando odescarte dos resíduos advindos da terapia antineoplásica não sãodevidamente encaminhados. Salienta-se que a busca do conhecimentodeve considerar a perspectiva da educação permanente que possibilita ainter-relação entre instituição e profissionais, proporcionandoautonomia, crescimento pessoal, profissional e organizacional. Concluise,neste sentido, a importância da existência de uma cultura desegurança nas instituições de saúde, com ações alinhadas aos princípiosda educação permanente e em consonância com as disposições legaisrelativas à segurança do paciente e saúde dos trabalhadores. Para tanto,instituições e trabalhadores devem centrar esforços na implementaçãode estratégias coletivas em busca de um ambiente seguro visando apreservação e proteção da saúde dos envolvidos nesses cenários decuidado.<br> / Abstract: The discussion on safety has been expanded in the last years, drawingthe attention of organizations, researchers, managers, and employeesfrom diverse health areas. It is worth mentioning the importance of suchreflections on patients' safety and on the health of workers in thescenery of health related to antineoplastic therapy. This qualitative studyhas aimed to elaborate criteria on the prevention of errors concerningantineoplastic drugs, which shall contribute to the construction of asafety management policy and result in the patients and employees' safety. An explanatory descriptive study has been conducted in twopublic institutions offering exclusive care to patients relying on theBrazilian Unified Health System (SUS). One of these institutions isdestined specifically to oncologic patients, while the other, being acollege/general hospital, also handles with a variety of complex diseasesbesides cancer. Data collection occurred from May to September 2013,through the conduction of semi-structured interviews and the systematicobservation in units for adult hospitalization, directed to oncologic care.The participants were 16 professionals from the health field, beingamong them nurse-pharmacists, practical nurses, and nursing chiefsfrom inpatient units. Data analysis has been based on Bardin's contentanalysis. With results which pinpoint the weight of criteria for a safetymanagement policy, regarding the prevention of errors/accidents withantineoplastic medication, the research has highlighted that the labourorganization/process concerning the oncologic patient in antineoplastictherapy must be thought in terms of particular requirements, especiallyvis-à-vis the work overburden associated to the inadequatedimensioning of personnel. It also acknowledges the necessity of specialattention, of specific knowledges and capacitating for the professionalsworking on the prevention of errors and accidents within such field. Itevinces the suitability of the physical area, the effective usage of safetyequipment and technological appliances directed to the preparation andadministration of antineoplastic medication, as a manner of prioritizingOccupational Safety and Health (OSH). It stresses the professionalresponsibility during antineoplastic therapy, considering of paramountimportance the participation of pharmacists and nurses during suchprocess. Furthermore, as to provide a safe assistance to the patient, withless risk, the research underlines the necessity of: conferences duringevery stage of antineoplastic therapy, orientation to patients and theirfamilies, observation of patients' clinical conditions prior to thebeginning of the infusion, patients' monitoring regardingsigns/symptoms, possible adverse reactions, complications, and/oraccidents with the drugs. Among the most recurring errors concerning patients' safety the study highlights: errors related to prescription drugs, infusion time, the exchange of patients, and medication internal extravasating. Concerning work accidents it stresses antineoplastic drugs external extravasating as the main risk factor for the involved professionals. It relates the causes of such issue with professionals' lackof care not only during the preparation, but also at the installation ofdrugs, deficiency in the equipments, the absence or not of Personal Protective Equipment (PPE) usage. It also denotes that the underreporting of errors related to the patient is associated to professionals' alarm due to the punitive culture still present in hospitals, and, in relation to work accidents, it refers to the lack of knowledge concerning referrals and the negligence of professionals regarding their own health. It poses that, even though public legislations and policieshave advanced in terms of Occupational Safety and Health (OSH), the reality of work, at least mostly, still brings diverse risks to these subjects, especially chemical ones. It has also been acknowledged thatthe mentioned risks also affect the environment, when the waste produced by antineoplastic therapy is not properly discarded. It indicates that the search for knowledge must take into consideration the perspective of continuing training, which enables the intercourse between professionals and institution, providing autonomy, personal, professional, and organizational growth. The research demonstrates, inthis sense, the importance of counting on a safety culture within health institutions, with actions aligned with the continuing training principles,and in accordance with the legal dispositions related to Occupational Safety and Health (OSH). Therefore, institutions and employees must harness their efforts for implementing collective strategies aiming the construction of a safe environment whereby the preservation and protection of those involved within such care sceneries might be achieved.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia / Made available in DSpace on 2012-10-26T11:29:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2015-03-18T20:42:43Z : No. of bitstreams: 1 310448.pdf: 1153725 bytes, checksum: a30e0a76515f31d96e76c1c23888958e (MD5) / O desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas, como as que utilizam as plantas medicinais, tem despertado grande interesse no tratamento do câncer, pois as terapêuticas tradicionais não são capazes de regredir totalmente a evolução da doença e/ou apresentam elevada toxicidade. B. pilosa e C. sylvestris, plantas medicinais que possuem vários usos populares no Brasil e outros países americanos, têm sido indicadas para o tratamento de tumores. Neste estudo a extração supercrítica (ESC) foi o método de escolha, por seu bom fracionamento presentes na matriz vegetal. Assim sendo, o presente trabalho se propôs avaliar as atividades citotóxica, antiproliferativa, antitumoral, nucleásica, antiangiogênica e pró-apoptótica dos extratos bruto e supercrítico de B. pilosa e C. sylvestris em diferentes condições de extração utilizando modelos experimentais in vitro e in vivo. Para se atingir tal objetivo, foram realizados experimentos para avaliar primeiramente a atividade citotóxica (MTT) in vitro com extrato bruto (EB) (0-500 ?g/mL) e nos extratos na extração supercrítica (ESC) 250bar/40°C (0-100 ?g/mL), e a atividade antiproliferativa através do ensaio clonogênico (100 e 200 ?g/mL ) dos extratos de B. pilosa. Os resultados obtidos no MTT e ensaio clonogênico mostraram que os EB e ESC 250 bar/40°C de B. pilosa foram ineficazes em reduzir a viabilidade celular e antiproliferativa em células MCF-7 e T-24. A partir dos resultados obtidos com B. pilosa descritos acima, foram realizados os ensaios de viabilidade celular (MTT) em células MCF-7 (5, 10, 20, 40 e 80 ?g/mL) e T-24 (1; 2,5; 5; 7,7 e 10 ?g/mL) com as diversas condições de ESC de C. sylvestris. Já o EB de C. sylvestris foi realizado em células MCF-7, em concentrações de 62,5; 125; 250; 500 e 1000 ?g/mL e em T-24 nas concetrações de 10; 25; 50; 75 e 100 ?g/mL. Além disso, foi avaliado o efeito dos extratos (EtOH5% 300bar/40°C e EtOac5% 300bar/40°C) sobre o DNA plasmidial através da ativida nucleásica. A atividade antitumoral in vivo foi realizada em camundongos Balb/C inoculados com o TAE e tratados com EB de C. sylvestris e ESC (EtOH5% 300 bar/40°C e EtOac5% 300bar/40°C) de C. sylvestris nas concentrações de 0,1; 1 e 10 mg/kg e através da atividade antiangiogênica em ovos fertilizados de Gallus domesticus, através do ensaio da membrana corioalantóica (MCA), nas mesmas concentrações de 1, 5 e 10 mg/kg/dia. Também foi avaliada a capacidade pró-poptótica, através do ensaio de anexina V por citometria de fluxo em células TAE retiradas dos camundongos após o tratamento com os extratos supercríticos EtOH 5% 300bar/40°C de 0,1 mg/kg/dia, EtOac5% 300bar/40°C de 0,1mg/kg/dia e EtOac5% 300bar/40°C de 1 mg/kg/dia, que elevaram o percentual de células apoptóticas e necróticas de C. sylvestris. Os resultados demonstraram que os extratos supercríticos (EtOH5% 300bar/40°C e EtOac5% 300bar/40°C) de C. Sylvestris reduziram de maneira significativa a viabilidade de células MCF-7 e T-24. Em relação à avaliação da atividade nucleásica com o extrato supercrítico EtOH5% 300bar/40°C, se observou que houve dano direto ao DNA, sendo que o mesmo foi dose-dependente. Os ensaios in vivo demonstraram que os extratos supercríticos EtOH5% 300bar/40°C e EtOac5% 300bar/40°C apresentaram atividades antitumorais consideráveis. O tratamento com os extratos causaram importante inibição do crescimento tumoral nos camundongos, principalmente o extrato supercrítico EtOH5% 300bar/40°C (0,1 mg/kg/dia), causando também aumento do percentual médio de longevidade (PAL). O ensaio da anexina V revelou que a morte celular induzida pelos extratos supercríticos foi do tipo apoptose (EtOH 0,1 mg/kg/dia e EtOac 0,1 mg/kg/dia) e necrose (EtOac 1 mg/kg/dia). A atividade antiangiogênica dos EtOH5% 300bar/40°C e EtOAc5% 300bar/40°C (1, 5 e 10 mg/kg/dia) mostrou que os extratos foram capazes de reduzir de forma significativa o percentual de vasos sanguíneos em torno do embrião, sendo este efeito inversamente proporcional às concentrações. / The development of new therapies, such as therapies using medicinal plants, has aroused great interest in cancer treatment, because the available therapies are not able to completely regress the disease progression and/or presents high toxicity. B. pilosa and C. sylvestris, medicinal plants that possess multiple popular uses in Brazil and other American countries, has been indicated for tumor treatment. In this study, the supercritical extraction (ESC) was the choice method for its superior performance in isolation of chemical compounds. Therefore, this study aimed to assess the cytotoxic, antiproliferative, antitumor, nucleasic, antiangiogenic and apoptotic activity of supercritical extract of B. pilosa and C. sylvestris at different extraction conditions using experimental models in vitro and in vivo. To achieve this goal, experiments were performed previously to evaluate the cytotoxic activity (MTT) in vitro with EB (0-500 µg/mL) and supercritical extract 250bar/40 °C (0-100 µg/mL), and antiproliferative activity via the clonogenic assay of B. pilosa extracts. The results obtained from MTT and clonogenic assay demonstrated that the B. pilosa EB and supercritical extract 250bar/40°C were ineffective in reducing cell viability and antiproliferative in MCF-7 cells and T-24. Considering the results obtained with B. pilosa described above, assays were performed in cell viability (MTT) in MCF-7 cells (5, 10, 20, 40 and 80 ?g/mL) and T-24 (1; 2.5; 5; 7.7 and 10 µg/ml) with ESC conditions with C. sylvestris. The EBC was performed on MCF-7 cells at concentrations of 62.5, 125, 250, 500 and 1000 µg/mL and T-24 in concetrations 10, 25, 50, 75 and 100 µg/ mL. Furthermore, the effect of extracts (EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40 °C) on plasmid DNA through the nuclease activity was also evaluated. The in vivo antitumor activity was performed in Balb/C mice inoculated with TAE treated with EBC and supercritical extract (EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40°C) of C. sylvestris at concentrations of 0.1, 1 and 10 mg/Kg and through the antiangiogenic activity of Gallus domesticus eggs fertilized by the chorioallantoic membrane essay (CAM) at the same concentrations of 1, 5 and 10 mg/kg/day. The pro-apoptotic ability was also evaluated by annexin V essay using flow cytometry in TAE cells taken from mice after treatment with the supercritical extract EtOH5% 300bar/40°C of 0.1 mg/kg/day, EtOac5% 300bar/40°C of 0.1 mg/ kg/day and EtOac 1mg/kg/day of 1 mg/kg/day that increased the apoptotic and necrotic cells percentage of C. sylvestris. The results demonstrated that the supercritical extract (EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40 °C) of C. Sylvestris significantly reduced the viability of MCF-7 and T-24 cells. Regarding the nuclease activity assessment with the supercritical extract EtOH5% 300bar/40°C, there was a direct dose-dependent damage on DNA. In vivo assays demonstrated that supercritical extract EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40°C showed considerable antitumor activity. The treatment with the extracts caused significant inhibition of tumor growth in mice, mainly the supercritical extract EtOH5% 300bar/40°C (0.1 mg/kg/day), also causing increase in the average percentage of longevity (PAL). The annexin V essay revealed that the induced cell death by extracts was apoptosis type (EtOH5% 300bar/40°C 0.1 mg/kg/day and EtOac5% 300bar/40°C 0.1 mg/kg/day) and also necrosis type (EtOac5% 300bar/40°C 1mg/kg/day). The antiangiogenic activity of the EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40°C (1, 5 and 10 mg/kg/day) demonstrated that the extracts were able to reduce significantly the percentage of blood vessels around the embryo being this effect inversely proportional to their concentrations.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2012 / Made available in DSpace on 2013-06-25T20:36:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 311888.pdf: 263385 bytes, checksum: 685343a8ff22be784ed13eab8765cacd (MD5) / O crescente número de indivíduos que desenvolverão algum tipo câncer exige que sejam desenvolvidos radiofármacos e quimioterápicos seletivos, pois o diagnóstico preciso e um tratamento específico são fundamentais para a possibilidade de cura e da elevação da taxa de sobrevida. Motivados a tentar atender essas necessidades, neste trabalho tivemos como objetivo sintetizar e caracterizar novos complexos mononucleares de GaIII e InIII com ligantes não-simétricos, NO-doadores, hexadentados inéditos, sendo os complexos potenciais radiofármacos e/ou quimioterápicos. Foram obtidos 8 complexos mononucleares de GaIII e de InIII. Os complexos foram caracterizados utilizando-se as técnicas de análise elementar, espectroscopia de infravermelho, ressonância magnética nuclear de 1H, espectrometria de massas, condutivimetria e utilizou-se para os complexos GaL1, InL1, GaL2 e InL5 a difração de raios x para determinar a estrutura cristalina. Todos os complexos de Ga e In obtidos, tiveram sua estabilidade em solução avaliada a partir de coletas de espectros de RMN 1H, em DMSO-d6, nas temperaturas de 22, 36 e 55°C; sendo observado que os complexos são estáveis em solução. A citotoxicidade dos ligantes e complexos foi avaliada frente a células leucêmicas e os resultados revelaram que os complexo são ativos em concentrações a partir de 2,5 ?M, e os ligantes testados também apresentaram citoxicidade a partir de 5,0 ?M. Além disso, todos os compostos induziram a morte celular por apoptose. O fato de as concentrações necessárias para atingir o IC50 serem superiores às utilizadas em radiofarmácia indica que todos os complexos são potenciais radiofármacos.<br> / Abstract : The growing number of individuals who will develop some type of cancer require selective radiopharmaceutical and chemotherapeutic agents for accurate diagnosis associated with a specific treatment. The combination of these factors is fundamental for the possibility of cure and raising the survival rate. In and Ga elements stand out in their use as radionuclides (67Ga, 111In, and 68Ga) to obtain radiopharmaceutical used in imaging techniques such as PET and SPECT. Promising results from studies of complex GaIII have boosted interest in this metal-based chemotherapy. InIII have already been described as a potential agent against bacteria and cancer. Motivated by the need to obtain more effective and selective radiopharmaceuticals and chemotherapy, in this work we describe the synthesis and characterization (by infrared spectroscopy, and nuclear magnetic resonance 1H and 13C) of 5 novel ligands mononucleates hexadentate unsymmetrical suitable for obtaining complexes with the cations and GaIII InIII stable under physiological conditions. GaIII and InIII were obtained as complexs with the ligands HL1, H2L2, H3L3 and HL5, and HL1 was also obtained as a complex with Fe. The complexes were characterized by elementar analysis, infrared spectroscopy, nuclear magnetic resonance 1H, mass spectrometry, conductivity measurement and for GaL1, InL1, GaL2 and InL5 complexes x-ray diffraction was also used to determine the crystalline structures. For all complexes obtained, except FeHL1, stability was evaluated in solution from collections of 1H NMR spectra at temperatures of 22, 36 and 55°C; it was observed that the complexes are stable in solution. The cytoxic activity was evaluated for all complexes and ligands in leukemic cells and the results showed that only FeL1 complex is inactive, and the others are active at concentrations from of 5 ìM. Furthermore, all compounds induced cell death by apoptosis. The fact that the concentrations needed to achieve the IC50 are greater than that used in radiopharmacy indicates that all complexes are potential radiopharmaceuticals.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-11Bitstream added on 2014-06-13T20:24:56Z : No. of bitstreams: 1 scolastici_c_dr_botfm.pdf: 429755 bytes, checksum: 699c635f6217a38ea4f5d62a997ee8ce (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O licopeno e um pigmento natural sintetizado por plantas e microorganismos, e encontrado principalmente no tomate. E um isomero aciclico do À-caroteno sem atividade pro-vitaminica-A, sendo um dos mais potentes agentes antioxidantes. Diversos pesquisadores tem demonstrado o efeito protetor do licopeno contra danos no DNA e sobre a carcinogenese quimicamente induzida, embora os mecanismos envolvidos nesses processos nao estejam, ainda, totalmente esclarecidos. Assim, o presente estudo objetivou avaliar o potencial quimioprotetor do licopeno contra danos no DNA e sobre a hepaticarcinogenese em roedores. O efeito anticarcinogenico do licopeno em figado de ratos foi avaliado utilizando-se os focos GST-P positivos (modelo de hepatocarcinogenese de media duracao proposto por Ito et al., 1988) como biomarcadores de lesoes pre-neoplasicas. Para avaliacao do efeito antigenotoxico e antimutagenico do carotenoide, bem como de seu possivel mecanismo de acao, foram utilizados, respectivamente, o teste do cometa e o teste do micronucleo em duas linhagens celulares in vitro: celulas de ovario de hamster chines (CHO) e celulas de hepatoma humano (HepG2). Mutagenos de acao direta (peroxido de hidrogenio, oxido de 4-nitroquinolina - 4NQO e metil metanosulfonato - MMS) e indireta (dietilnitrosamina -DEN), foram utilizados como indutores de danos no DNA in vitro. Os resultados mostraram que o licopeno, na concentracao 300 ppm, reduziu significativamente os danos no DNA induzidos pela DEN na etapa de iniciacao da hepatocarcinogenese de rato, embora nao tenha sido observada reducao do numero e area dos focos GST-P-positivos. Os resultados dos experimentos in vitro mostraram que o tratamento previo e simultaneo com licopeno (10, 25, e 50 ÊM) foi eficaz em reduzir os niveis de danos no DNA induzidos pelo H2O2 e pela DEN em celulas HepG2, quando avaliados tanto teste do cometa como do micronucleo. / Lycopene is a natural pigment synthesized by plants and microorganisms, and mainly found in tomatoes. It is an acyclic isomer of â-carotene with no vitamin A activity, and one of the most potent antioxidants. Several studies have showed the chemopreventive effect of lycopene on chemically-induced DNA damage and on chemical hepatocarcinogenesis, however its mechanism of action needs to be clarified. The present study aimed to evaluate the protective activity of lycopene on chemically-induced DNA damage and on rodent hepatocarcinogenesis. Anticarcinogenic potential of lycopene was evaluated using GST-P positive foci (medium-term hepatocarcinogenesis model described by Ito et al., 1988) as a biomarker of preneoplasic lesion. Lycopene antigenotoxicity and antimutagenicity, as well as its mechanism of action were investigated in two cell lines (CHO and human hepatoma cell HepG2) using the comet assay and micronucleus test, respectively. Direct-acting (hydrogen peroxide; 4-nitroquinoline 1-oxide - 4NQO; methyl methanesulphonate - MMS) and indirect-acting (n-nitrosodiethylamine DEN) mutagens were used to induce in vitro DNA damage. The results showed that lycopene (300 ppm) reduced DEN-induced DNA damage at the initiation step of in vivo hepatocarcinogenesis, although no effect was observed on the number and area of GST-P positive foci in liver of rats. Data from in vitro experiments showed that lycopene (10, 25 and 50 ìM) was effective in reducing DNA damage induced by H2O2 and DEN in HepG2 cells, both in comet assay and in micronucleus test. In CHO cells the chemopreventive acitivity of lycopene was visualized only for primary DNA damage in the comet assay. In conclusion our data confirmed the chemopreventive effect of lycopene on chemically-induced DNA damage, although such activity depends on the treatment schedule used. On the other hand, no protective action of this carotenoid on DEN-induced preneoplasic lesion in liver of rats was detected.

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-27. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:25Z : No. of bitstreams: 1 000829940.pdf: 916653 bytes, checksum: 09926f007a66538b3dedd4cb298c6c6a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / We have recently observed that treatment of colon tumor cells with low concentration of paclitaxel increased the expression of several genes associated with antigen-presenting machinery. Since 5-fluoruracil (5-FU) is the main antineoplastic agent for colon cancer, in this study we aimed to evaluate immunomodulatory properties analyzing: a) if the DC transfection with drug-treated tumor cells RNA, enhances the effectiveness of DC-based vaccine; b) if the modulatory effects of vaccine can be observed in vivo, and c) if the combination of DC with low dose chemotherapy schedule improves the antitumor responsiveness. To achieve these goals s.c. MC-38 bearing C57/Bl-6 mice were treated with DC sensitized with RNA from tumor cells pre-treated with the minimum effective concentration (MEC) of 5-fluorouracil. Our results of studies show that vaccination with tumor RNA-transfected DC delays the tumor growth, increases the percentage of CD86+ (35%) CD40+ (63%) and MHC class II+ (47%) DC and significantly increases the in vitro production of IFN-ɣ. These results suggest that treatment of tumor cells with 5-FU induces transcriptional changes that can be transfered to DC by RNA transfection, enhancing their ability to stimulate the antitumor response / CNPq: 555857/2010-07 / FAPESP: 2009/18331-8

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-24. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:49:02Z : No. of bitstreams: 1 000845425.pdf: 1489608 bytes, checksum: bf180cdfaed896fcaedaf4fdee14e48e (MD5) / O Cloridrato de Doxorrubicina (DOX) é considerado um dos agentes mais ativos disponíveis para o tratamento quimioterápico do câncer, além de ser um dos antineoplásicos mais utilizados para o tratamento de tumor venéreo transmissível canino resistente à vincristina. Com intuito de melhor conhecimento dos efeitos adversos promovidos pelo uso da DOX em cães, foi delineado um estudo composto por um grupo de 10 cães domésticos, do sexo feminino, sem raça definida, com peso entre 4,5 e 24 kg e idade média de 5 anos, portadores de TVT de ocorrência natural, confirmados por avaliação citológica, sem metástases clinicamente detectáveis ou quimioterapia prévia, que receberam o Cloridrato de Doxorrubicina na dose de 30 mg/m2 ou 1mg/kg para os animais com peso inferior a 15kg. Foram avaliados os efeitos da DOX sob o sangue periférico e medula óssea, além de avaliação da bioquímica sanguínea e resposta de citotoxicidade tumoral. A determinação da toxicidade gerada pelo tratamento quimioterápico com DOX baseou-se nos critérios de efeitos adversos estabelecidos pelo consenso da cooperativa de oncologia veterinária (VCOOG). Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística pelo método de variância com medidas repetidas; regressão linear, quadrática e cúbica e quando houve diferença significativa entre médias (P < 0,05), estas foram comparadas entre si pelo teste de Tukey. Os valores da série vermelha do sangue não apresentaram alterações significativas entre os momentos; a contagem de leucócitos totais foi significativamente maior no momento inicial (M0) quando comparada com o 14º dia após a quarta sessão (M7); os neutrófilos segmentados apresentaram redução significativa no 14º dia após a primeira e após a terceira sessão quimioterápica quando comparados com o momento inicial; os valores de linfócitos, basófilos, eosinófilos e neutrófilos bastonetes não diferiram entre os momentos... / Doxorubicin (DOX) is considered one of the most active agent avaliable for chemotherapy treatment of cancer, in addition to be one of the most antineoplastic drug used for the treatment of canine Transmissible Venereal Tumor resistant to vincristine. For a better understanding of the side effects caused by the use of DOX in dogs, we did an study composed by 10 domestic, female, mixed breed dogs with Transmissible Venereal Tumor of natural ocurrence, diagnosed by cytology, with no evidence of metastasis and without previous chemotherapy treatment, that received DOX in dose of 30 mg/m² ou 1 mg/kg for animals weighing less than 15 kg. Were evaluated the effects of DOX in the peripheral blood and bone marrow, blood biochemistry and tumor cytotoxicity response. In order to standardize the toxicity level, we applied the terminology based on the addapted tables of the veterinary co-operative oncology group-Common terminology criteria for adverse events - VCOG-CTCAE). Statistical data were analyzed by the variance method with repeated measures; linear regression, quadratic and cubic and when there was a significant difference between means (P <0.05), these were compared by Tukey test. The values of red blood series did not change significantly between moments; the white blood cell count was significantly higher at baseline (M0) when compared to the 14th day after the fourth session (M7); segmented neutrophils had significant reduction on the 14th day after the first and third chemotherapy session when compared with the initial moment; lymphocytes, basophils, eosinophils and neutrophils rods did not differ between the moments. In The myelogram, rubrícitos, metarubrícitos ratio, showed a significant increase 21 days after the end of chemotherapy (M8), and myeloid: erythroid relationship showed significantly decreased after the treatment (M8); neutrophils rods and segmented neutrophils showed reduced values in M8. Biochemical parameters ...

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-31Bitstream added on 2014-08-13T18:00:22Z : No. of bitstreams: 1 000760138.pdf: 1342792 bytes, checksum: 04e3113cab00466cb2ff5442738feb1d (MD5) / Estudos prévios têm demonstrado que baixas concentrações de agentes antineoplásicos como ciclofosfamida e paclitaxel (PAC) modulam positivamente a resposta imune, estimulando linfócitos T e células dendríticas (DCs). Além disso, são capazes de aumentar a imunogenicidade de células de câncer colorretal humano HCT-116, e de induzir a transcrição de genes de proteínas de choque térmico (HSPs). No presente trabalho, tivemos como objetivo avaliar a expressão das HSPs 40, 70 e 90 e comparar o efeito da concentração efetiva mínima (CEM) com a concentração não-tóxica (CNT) de PAC sobre a imunogenicidade das células HCT-116. Células HCT-116 foram tratadas com a CEM ou com a CNT de PAC. Lisados tumorais foram analisados quanto à expressão das HSPs e utilizados para sensibilizar DCs derivadas de monócitos de sangue periférico de indivíduos normais. As DCs foram avaliadas quanto ao seu fenótipo e foram co-cultivadas com linfócitos T alogênicos para a avaliação da capacidade de estimulação desses linfócitos. O tratamento das células tumorais com ambas as concentrações da droga induziu o aumento da expressão de HSP40, enquanto a produção de HSP70 e HSP90 foram aumentadas apenas pela CEM e pela CNT, respectivamente. Observou-se ligeiro, mas não significante aumento da capacidade de indução da resposta alogênica. Houve também uma tendência ao aumento da expressão de CD40 nos grupos HCT, CEM e CNT. É possível que a expressão das HSPs contribua para o aumento de imunogenicidade induzido pelo PAC. A CEM é menos eficiente que a CNT em aumentar a imunogenicidade das células tumorais, mas não prejudica a capacidade das DCs de induzir a resposta alogênica nem seus marcadores fenotípicos de ativação / Colorectal cancer (CRC) is one of the main causes of death worldwide and its conventional treatment is based on surgery, cytotoxic chemotherapy and radiotherapy, or a combination of these therapeutic modalities. The main chemotherapeutic agents for fighting CRC are metrotexate, 5-aza-2-deoxycitidine, taxans and 5-fluorouracil. Usually, their administration is based on maximum tolerable doses, but it has been shown that low concentrations of most of these drugs upregulate the immune system, both enhancing the immune responsiveness and increasing the immunogenicity of tumor cells. These features are associated with translational changes of a couple of genes, among them, there is an increased expression of heat-shock proteins (HSPs). Although the expression of HSPs may represent an adaptive response of tumor cells to the drug-induced damages, there is evidence that some of these proteins are fundamental for antigen processing and presentation by antigen-presenting cells. Then, in the present review we aimed to show that increased expression of HSPs by drug-treated tumor cells may be favorable for the development of an effective immune response, and that this phenomenon should enhance the combinatory schedules of chemotherapy and immunotherapy

Orientador: Andrigo Barboza De Nardi / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Jorge Luiz Costa Castro / Resumo: O Cloridrato de Doxorrubicina (DOX) é considerado um dos agentes mais ativos disponíveis para o tratamento quimioterápico do câncer, além de ser um dos antineoplásicos mais utilizados para o tratamento de tumor venéreo transmissível canino resistente à vincristina. Com intuito de melhor conhecimento dos efeitos adversos promovidos pelo uso da DOX em cães, foi delineado um estudo composto por um grupo de 10 cães domésticos, do sexo feminino, sem raça definida, com peso entre 4,5 e 24 kg e idade média de 5 anos, portadores de TVT de ocorrência natural, confirmados por avaliação citológica, sem metástases clinicamente detectáveis ou quimioterapia prévia, que receberam o Cloridrato de Doxorrubicina na dose de 30 mg/m2 ou 1mg/kg para os animais com peso inferior a 15kg. Foram avaliados os efeitos da DOX sob o sangue periférico e medula óssea, além de avaliação da bioquímica sanguínea e resposta de citotoxicidade tumoral. A determinação da toxicidade gerada pelo tratamento quimioterápico com DOX baseou-se nos critérios de efeitos adversos estabelecidos pelo consenso da cooperativa de oncologia veterinária (VCOOG). Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística pelo método de variância com medidas repetidas; regressão linear, quadrática e cúbica e quando houve diferença significativa entre médias (P < 0,05), estas foram comparadas entre si pelo teste de Tukey. Os valores da série vermelha do sangue não apresentaram alterações significativas entre os momentos; a contagem de leucócitos totais foi significativamente maior no momento inicial (M0) quando comparada com o 14º dia após a quarta sessão (M7); os neutrófilos segmentados apresentaram redução significativa no 14º dia após a primeira e após a terceira sessão quimioterápica quando comparados com o momento inicial; os valores de linfócitos, basófilos, eosinófilos e neutrófilos bastonetes não diferiram entre os momentos... / Abstract: Doxorubicin (DOX) is considered one of the most active agent avaliable for chemotherapy treatment of cancer, in addition to be one of the most antineoplastic drug used for the treatment of canine Transmissible Venereal Tumor resistant to vincristine. For a better understanding of the side effects caused by the use of DOX in dogs, we did an study composed by 10 domestic, female, mixed breed dogs with Transmissible Venereal Tumor of natural ocurrence, diagnosed by cytology, with no evidence of metastasis and without previous chemotherapy treatment, that received DOX in dose of 30 mg/m² ou 1 mg/kg for animals weighing less than 15 kg. Were evaluated the effects of DOX in the peripheral blood and bone marrow, blood biochemistry and tumor cytotoxicity response. In order to standardize the toxicity level, we applied the terminology based on the addapted tables of the veterinary co-operative oncology group-Common terminology criteria for adverse events - VCOG-CTCAE). Statistical data were analyzed by the variance method with repeated measures; linear regression, quadratic and cubic and when there was a significant difference between means (P <0.05), these were compared by Tukey test. The values of red blood series did not change significantly between moments; the white blood cell count was significantly higher at baseline (M0) when compared to the 14th day after the fourth session (M7); segmented neutrophils had significant reduction on the 14th day after the first and third chemotherapy session when compared with the initial moment; lymphocytes, basophils, eosinophils and neutrophils rods did not differ between the moments. In The myelogram, rubrícitos, metarubrícitos ratio, showed a significant increase 21 days after the end of chemotherapy (M8), and myeloid: erythroid relationship showed significantly decreased after the treatment (M8); neutrophils rods and segmented neutrophils showed reduced values in M8. Biochemical parameters ... / Mestre