Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-03-09Bitstream added on 2014-06-13T19:46:55Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_clcg_dr_arafcf.pdf: 1338386 bytes, checksum: 1cecdf656a075fad289768bc6e0d0ceb (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A linezolida é o primeiro antimicrobiano da classe das oxazolidinonas comercializado mundialmente. O espectro de ação desta molécula envolve a ação contra bactérias gram-positivas, anaeróbias, bem como, Mycobacterium turbeculosis. Este trabalho teve como objetivo desenvolver métodos analíticos para linezolida, incluindo métodos físico-químicos e microbiológicos, realizar estudos de dissolução e de estabilidade, bem como dispor de técnicas de identificação para linezolida na forma farmacêutica comprimido e matéria-prima. A análise qualitativa foi realizada por cromatografia em camada delgada, espectrofotometria no ultravioleta (UV), espectrofotometria no Infravermelho (IV), cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e análise térmica, possibilitando a identificação das amostras. Os métodos de análise quantitativos empregados e validados foram: (i) espectrofotometria no UV a 251 nm, na faixa de concentração de 6,0 -16,0μg/mL no qual foram avaliados os parâmetros de linearidade, precisão, exatidão e seletividade, com teor médio nos comprimidos de 98,7 %; (ii) CLAE, coluna de C18 e fase móvel composta por, ácido acético 1%: metanol: acetonitrila (50:25:25, V/V/V), apresentando ampla linearidade, precisão, exatidão e especificidade, com um teor médio obtido nos comprimidos de 101,36 %; (iii) determinação da potência microbiológica, pelo método de difusão em ágar cilindros em placa, utilizando cepas de Bacillus subtilis ATCC 9372, em que o teor médio nos comprimidos foi 101,96%. Os métodos desenvolvidos não apresentaram diferença estatística para um nível de significância de 1 %. O teste de dissolução foi desenvolvido e validado utilizando água como meio de dissolução e pás a 50 rpm. O perfil de dissolução obtido foi satisfatório, e a cinética de dissolução calculada. Estudo preliminar de estabilidade de linezolida frente... / The antimicrobial agent linezolid is the first class of oxazolidinonas marketed worldwide. The spectrum of action of this molecule involves action against grampositive bacteria, anaerobic, and Mycobacterium turbeculosis. This work aims to develop analytical methodos to quantify linezolid, including physical, chemical and microbiological tests, studies of dissolution and stability, as well as providing technical quality of identification for tablet and raw material. Qualitative analysis performed by thin layer chromatography, UV-spectrophotometry, IV-spectrophotometry, high performance liquid chromatography (HPLC) and thermal analysis, enabling the identification of samples. The methods of quantitative analysis employed and validated were: (i) UV spectrophotometry at 251 nm, in the range of concentration of 6.0-16.0 μg/mL which presented linearity, precision, accuracy and selectivityy, with the average content in tablets of 98.7%, (ii) HPLC, using as stationary phase column of C18 reversed-phase and mobile phase with the following composition, 1% acetic acid: methanol: acetonitrile (50:25:25, V/V/V), a wide linearity, precision, accuracy and specificity, with an average content obtained in tablets of 101.36%. (iii) Agar diffusion bioassay, using strains of Bacillus subtilis ATCC 9372, with the average content in tablets of 101,96 %. The results of assays were treated statistical by analysis of variance (ANOVA) and were found to be linear (r2 = 0.9998) in the selected range of 20-80 μg/mL. The proposed methods showed no statistical difference for a significance level of 1%. The dissolution test was developed and validated using water as a means of dissolution and blades to 50 rpm. The dissolution profile obtained was satisfactory. Preliminary study of stability of linezolid in acidic, alkaline, oxidative, thermal, photolytic and climatic chamber (40°C/75%) conditions... (Complete abstract click electronic access below)

Nanoemulsões catiônicas têm sido consideradas como potenciais sistemas carreadores para oligonucleotídeos (ON) antisenso. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver nanoemulsões catiônicas como um sistema de liberação para ON anti-topoisomerase II de Plasmodium falciparum. Primeiramente, nanoemulsões constituídas de triglicerídeos de cadeia média, lecitina de gema de ovo, glicerol e água contendo os lipídeos catiônicos oleilamina ou DOTAP (2 mM) foram obtidas através do procedimento de emulsificação espontânea. Este procedimento resultou em formulações monodispersas com diâmetro de gotícula de 200-260 nm e potencial zeta de +50 e +55 mV. Após, um método espectrofotométrico no UV para quantificação dos ON em série fosfodiéster (PO) ou fosforotioato (PS) foi validado. O método mostrou-se linear, específico, preciso e exato para a determinação de PO e PS, sem diferenças significativas entre os ON. Nas condições validadas, as isotermas de adsorção dos ON às nanoemulsões foram obtidas através da determinação dos ON na fase aquosa externa das nanoemulsões, após ultrafiltração/centrifugação dos complexos. A taxa de recuperação através das membranas de ultrafiltração de celulose regenerada (30 kDa) foi superior a 92%. Os resultados indicam a adsorção progressiva dos ON com as nanoemulsões, até cerca de 60 mg/g de fase interna para o complexo DOTAP-PS. Finalmente, evidências adicionais da adsorção de PO e PS às nanoemulsões foram detectadas pelo aumento do diâmetro de gotícula, inversão do potencial zeta e morfologia das gotículas avaliada por microscopia eletrônica de transmissão. O conjunto dos resultados obtidos demonstra que ON de série PO e PS anti-topoisomerase II de P. falciparum podem ser adsorvidos eficientemente às nanoemulsões catiônicas. / Cationic nanoemulsions have been recently considered as a potential delivery system for antisense oligonucleotides (ON). The aim of the present work was to evaluate cationic nanoemulsions as a delivery system for ON against the Plasmodium falciparum topoisomerase II gene. Firstly, nanoemulsions composed of medium chain triglycerides, egg yolk lecithin, glycerol and water, containing the cationic lipids oleylamine or DOTAP (2 mM) were obtained through spontaneous emulsification process. This procedure resulted in monodisperse formulations with droplet size of 200-260 nm and zeta potential of +50 and +55mV. After that, an UV spectrophotometric method for the quantification of either phosphodiester (PO) or phosphorothioate (PS) ON was validated. The method was linear, specific, precise, and accurate for the determination of PO and PS, without significant differences between both ON. In the validated conditions, ON adsorption isotherms with nanoemulsions were obtained through the ON determination in the external phase of nanoemulsions, after ultrafiltration/centrifugation of complexes. The recovery through regenerated cellulose membranes (30kDa) was higher than 92%. The results showed a progressive ON adsorption to the nanoemulsions up to approximately 60mg/g of internal phase for DOTAP-PS complexes. Finally, additional evidences of PO and PS adsorption to nanoemulsions could also be detected by the increase of the mean droplet size, the inversion of the zeta potential and the morphology of the oil droplets obtained by transmission electron microscopy. The overall results showed that PO and PS ON against P. falciparum anti-topoisomerase II gene can be efficiently adsorbed to the cationic nanoemulsions.

O presente trabalho objetivou estudar as principais variáveis analíticas associadas aos métodos espectrofotométricos de quantificação do teor de taninos utilizando caseína e pó-de-pele, os reagentes de Folin-Denis e Folin-Ciocalteu, bem como a avaliação de diferentes tipos de PVPP (Divergan® F, Divergan® RS, Kollidon® CL e PVPP-P6755) na substituição dos substratos protéicos. Para tanto, dois métodos de análise, um espectrofotométrico e outro por CLAE foram desenvolvidos, utilizando os polifenóis catequina, ácido tânico, ácido gálico e pirogalol como substâncias de referência e rutina como flavonóide modelo. Para maiores inferências uma solução extrativa de folhas secas de Psidium guajava L também foi quantificada. A análise comparativa assinalou o uso vantajoso do reagente de Folin-Ciocalteu, em relação ao reagente de Folin-Denis. Em termos de reprodutibilidade, a caseína grau técnico (GT) mostrou-se superior à caseína purificada, embora essa última possua maior afinidade pelos polifenóis testados. Contudo, as análises por UV-VIS e por CLAE em comprimentos de onda de 280m e 352 nm, demonstraram que tanto a caseína GT quanto o pó-de-pele não são seletivos para complexar taninos, de acordo com as normas do ICH. Tanto o pó-de-pele quanto a caseína GT foram capazes de complexar polifenóis e rutina de maneira inespecífica. Isso foi evidenciado quando misturas de um único polifenol e rutina ou a fração flavonoídica de P. guajava foram testadas. A capacidade de complexação de polifenóis e rutina por parte da PVPP foi avaliada por UV-VIS, DSC e CLAE. Os melhores resultados foram observados para PVPP-P6755, no entanto com restrições. De maneira similar a caseína GT e pó-depele a PVPP-P6755 foram capazes de complexar de maneira inespecífica rutina e outros flavonóides do extrato de P. guajava. Uma validação plena para o caso específico de folhas de P. guajava é questionável. No entanto, o método baseado na utilização de PVPP mostrou-se passível de padronização utilizando 500,0 mg de pó de droga, 2,0 mL de reagente de Folin-Ciocalteu, tempo de leitura 30 min após adição desse reagente e quantificação em 760 nm. Sob essas condições, a análise comparativa demonstrou que 50,0 mg de PVPP foram, em termos analíticos, equivalentes a 100,0 mg de pó-de-pele ou a 750 mg de caseína GT.

O presente trabalho apresenta um estudo sobre ondas de gravidade. São descritas as equações que governam o movimento de ondas lineares, fracamente não-lineares e completamente não-lineares. Foi implementado um método espectral que resolve, empregando o método de Newton, as equações completamente não-lineares que descrevem o movimento das ondas estacionárias em água. Com isso, é possível simular o empinamento das ondas, ou seja, o comportamento destas quando a profundidade da água diminui. Calcula-se a altura das ondas em função da profundidade, o coeficiente de empinamento e o ângulo de quebra das ondas. Assim, pôde-se observar as relações destas propriedades com a quebra das ondas e associar os resultados numéricos com aqueles previstos pela teoria. / A study on the propagation of gravity waves is presented. The governing equations for linear, weakly nonlinear and fully nonlinear water waves are described. A spectral method has been implemented which solves, employing the Newton method, the fully nonlinear equations describing the motion of steady waves. It is then possible to simulate the shoaling of waves, that is, the behaviour of them when the water depth decreases. The wave height as a function of depth, the shoaling coefficient and the angle of wave breaking are calculated. It was possible to observe the relationship of these properties with the breaking of the waves and associate the numerical results with those predicted by the theory.

Submitted by Flávia Moura (flavia.cpimenta@gmail.com) on 2017-01-16T13:04:01Z No. of bitstreams: 1 Estudo comparativo da verificação da estabilidade de barragens de gravidade de concreto compactado a rolo a partir de modelagem em elementos finitos e de métodos analíticos.pdf: 11420858 bytes, checksum: 42e5ecdb818258b88f92b05ae96264c4 (MD5) / Approved for entry into archive by Flávia Sousa (flaviabs@ufba.br) on 2017-01-18T16:26:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Estudo comparativo da verificação da estabilidade de barragens de gravidade de concreto compactado a rolo a partir de modelagem em elementos finitos e de métodos analíticos.pdf: 11420858 bytes, checksum: 42e5ecdb818258b88f92b05ae96264c4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-18T16:26:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Estudo comparativo da verificação da estabilidade de barragens de gravidade de concreto compactado a rolo a partir de modelagem em elementos finitos e de métodos analíticos.pdf: 11420858 bytes, checksum: 42e5ecdb818258b88f92b05ae96264c4 (MD5) / Esta dissertação analisa os resultados obtidos na verificação da estabilidade global de barragens de gravidade de CCR, durante a fase apenas de operação dessas, a partir de modelos analíticos utilizando critérios nacional e internacionalmente aplicados, e a partir de modelagem numérica utilizando o Método dos Elementos Finitos. Inicialmente faz-se uma revisão do estado da arte, onde discute-se as principais ações que atuam neste tipo de estrutura influenciando sua estabilidade, e apresentam-se os métodos e critérios a serem utilizados. Em seguida, aplicam-se os critérios discutidos em modelos analíticos e numéricos desenvolvidos para um estudo de caso, e os resultados obtidos a partir de cada modelo são apresentados e discutidos. / This dissertation analyzes the results of the verification of the overall stability of RCC gravity dams obtained from analytical models using national and internationally applied criteria, and from numerical modeling using the Finite Element Method. Initially it makes a review of the state of the art, where the main action that acts in this type of structure influencing their stability is discussed, and presents the methods and criteria to be used. Then applies the criteria discussed in analytical and numerical models developed for a case study, and the results obtained from each model are presented and discussed.

Submitted by Everaldo Pereira (pereira.evera@gmail.com) on 2017-02-19T22:38:39Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Mestrado_Zoltan.pdf: 3195497 bytes, checksum: 4252a2f5ec80980bd2496ebacc7a1dab (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-19T22:38:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Mestrado_Zoltan.pdf: 3195497 bytes, checksum: 4252a2f5ec80980bd2496ebacc7a1dab (MD5) / Este trabalho abordou a conectividade entre águas subterrâneas e superficiais, na área de influência do Sistema Aquífero Urucuia, bacia do rio Grande, sub-bacias do rio de Janeiro e das Fêmeas, na região oeste da Bahia, bem como a aplicação de modelos analíticos para avaliar o impacto que o bombeamento a partir de poços tubulares profundos tem sobre os rios. Ao considerar que os rios da região são mantidos perenes pelo aquífero, foram estimados os impactos potenciais da extração de águas subterrâneas sobre os mananciais superficiais, com base nos diversos estudos realizados na região. A motivação para este estudo decorreu de que as relações entre aquíferos e rios continuam a ser mal entendidas, na gestão de recursos hídricos de praticamente todas as bacias hidrográficas do mundo e, ainda assim, são fundamentais para a efetiva gestão dos recursos hídricos. De fato, a extração de águas de aquíferos, com conexões hidráulicas com os rios, pode reduzir significativamente as vazões do escoamento superficial, com implicações para as políticas de gestão de recursos hídricos em geral e para a outorga de água em particular. Destas implicações, destacamos o risco potencial de conflitos entre os diversos usuários de recursos hídricos, possíveis problemas para o ecossistema, para a segurança social e econômica, além de atritos entre as diversas políticas públicas. Este trabalho demonstrou que para atender aos pressupostos de uma gestão integrada dos recursos hídricos, um modelo analítico pode perfeitamente atender aos problemas envolvidos, dando respostas rápidas e eficazes. Isto permite aperfeiçoar as metodologias para outorga de águas superficiais e subterrâneas, para quantificar os impactos do bombeamento dos poços na vazão dos rios e possibilitar aos gestores dos recursos hídricos, a avaliação das opções de alocação de água desses mananciais. Apesar da modelagem que utiliza métodos analíticos apresentar algumas limitações, incluindo os decorrentes da falta de informação sobre a recarga, esta oferece muitas vantagens adicionais, incluindo a melhor compreensão dos problemas envolvidos na gestão entre usuários, gestores e sociedade civil. Possibilita avaliar os impactos da extração de água subterrânea sobre os mananciais superficiais e cria condições para estabelecer uma estratégia de gestão preventiva, conservacionista, para minimizar as possibilidades de conflitos futuros ou mesmo de danos ambientais. Em particular, esta abordagem estratégica possibilita a avaliação integrada das opções de outorga de água em que, aspectos hidrológicos, ecológicos e socioeconômicos podem ser combinados. Além disso, os dados podem ser trabalhados em resposta às exigências da política de recursos hídricos em paralelo às demandas de outras políticas publicas. Por fim os resultados da pesquisa apontam para uma forma sustentável de gerenciar os impactos da extração de água subterrânea em regiões onde os mananciais superficiais e subterrâneos, encontram-se conectados. / ABSTRACT - This work addressed the connectivity between groundwater and surface water in the area of influence of the Aquifer System Urucuia, Grande River basin, sub-basin of Rio de Janeiro and females, in western Bahia, and the application of analytical models to assess the impact that pumping from deep wells has on the rivers. When considering that the rivers of the region are maintained by perennial aquifer were estimated potential impacts of groundwater extraction on surface water sources, based on several studies in the region. The motivation for this study was held that the relationship between aquifers and rivers remain poorly understood, in the management of water resources in almost all river basins in the world and yet are fundamental to the effective management of water resources. In fact, the extraction of water from aquifers with hydraulic connections with the rivers can significantly reduce the flow of runoff, with implications for the policies of water resources management in general and for the granting of water in particular. These implications, we highlight the potential for conflicts between different water users, potential problems for the ecosystem, for social and economic security, as well as friction between the various public policies. This study showed that to meet the assumptions of an integrated management of water resources, an analytical model can perfectly meet the problems involved, giving rapid and effective responses. This allows enhancing methodologies for grant of surface and groundwater, to quantify the impacts of well pumping on river flows and enable managers of water resources, assessment of water allocation options in these watersheds. Although modeling using analytical methods present some limitations, including those arising from lack of information on recharging, this offers many additional advantages, including better understanding of the problems involved in the management between users, managers and civil society. Possible to evaluate the impacts of groundwater extraction on surface water sources and creates conditions to establish a strategy for managing preventive conservation to minimize the chances of future conflicts or environmental damage. In particular, this strategic approach enables integrated assessment of options granted in that water, hydrologic, ecological and socioeconomic factors may be combined. In addition, data can be worked out in response to the demands of resource policy in parallel to the demands of other public policies. Finally the results of the research point to a sustainable way of managing the impacts of groundwater extraction in regions where surface and underground springs, are connected.

Nanoemulsões catiônicas têm sido consideradas como potenciais sistemas carreadores para oligonucleotídeos (ON) antisenso. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver nanoemulsões catiônicas como um sistema de liberação para ON anti-topoisomerase II de Plasmodium falciparum. Primeiramente, nanoemulsões constituídas de triglicerídeos de cadeia média, lecitina de gema de ovo, glicerol e água contendo os lipídeos catiônicos oleilamina ou DOTAP (2 mM) foram obtidas através do procedimento de emulsificação espontânea. Este procedimento resultou em formulações monodispersas com diâmetro de gotícula de 200-260 nm e potencial zeta de +50 e +55 mV. Após, um método espectrofotométrico no UV para quantificação dos ON em série fosfodiéster (PO) ou fosforotioato (PS) foi validado. O método mostrou-se linear, específico, preciso e exato para a determinação de PO e PS, sem diferenças significativas entre os ON. Nas condições validadas, as isotermas de adsorção dos ON às nanoemulsões foram obtidas através da determinação dos ON na fase aquosa externa das nanoemulsões, após ultrafiltração/centrifugação dos complexos. A taxa de recuperação através das membranas de ultrafiltração de celulose regenerada (30 kDa) foi superior a 92%. Os resultados indicam a adsorção progressiva dos ON com as nanoemulsões, até cerca de 60 mg/g de fase interna para o complexo DOTAP-PS. Finalmente, evidências adicionais da adsorção de PO e PS às nanoemulsões foram detectadas pelo aumento do diâmetro de gotícula, inversão do potencial zeta e morfologia das gotículas avaliada por microscopia eletrônica de transmissão. O conjunto dos resultados obtidos demonstra que ON de série PO e PS anti-topoisomerase II de P. falciparum podem ser adsorvidos eficientemente às nanoemulsões catiônicas. / Cationic nanoemulsions have been recently considered as a potential delivery system for antisense oligonucleotides (ON). The aim of the present work was to evaluate cationic nanoemulsions as a delivery system for ON against the Plasmodium falciparum topoisomerase II gene. Firstly, nanoemulsions composed of medium chain triglycerides, egg yolk lecithin, glycerol and water, containing the cationic lipids oleylamine or DOTAP (2 mM) were obtained through spontaneous emulsification process. This procedure resulted in monodisperse formulations with droplet size of 200-260 nm and zeta potential of +50 and +55mV. After that, an UV spectrophotometric method for the quantification of either phosphodiester (PO) or phosphorothioate (PS) ON was validated. The method was linear, specific, precise, and accurate for the determination of PO and PS, without significant differences between both ON. In the validated conditions, ON adsorption isotherms with nanoemulsions were obtained through the ON determination in the external phase of nanoemulsions, after ultrafiltration/centrifugation of complexes. The recovery through regenerated cellulose membranes (30kDa) was higher than 92%. The results showed a progressive ON adsorption to the nanoemulsions up to approximately 60mg/g of internal phase for DOTAP-PS complexes. Finally, additional evidences of PO and PS adsorption to nanoemulsions could also be detected by the increase of the mean droplet size, the inversion of the zeta potential and the morphology of the oil droplets obtained by transmission electron microscopy. The overall results showed that PO and PS ON against P. falciparum anti-topoisomerase II gene can be efficiently adsorbed to the cationic nanoemulsions.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Se ha demostrado en estudios anteriores el traspaso de antibióticos a las plumas de pollos, presentando un comportamiento de eliminación más lento que en otros tejidos comestibles, como hígado y músculo, encontrándose en altas concentraciones, incluso después de respetar los periodos de resguardo establecidos para otros tejidos. Esto cobra relevancia debido a que las plumas son luego incorporada como una fuente de proteína en las dietas de animales de producción. Dado este escenario, es necesario un método analítico que permita la extracción de manera confiable, precisa, y reproducible en laboratorio para el analito Lincomicina en tejidos comestibles y plumas, dando paso posteriormente a un estudio de depleción en estas matrices, ya que no existen estudios anteriores para este antibiótico. Por lo que el objetivo de este estudio fue el desarrollo de una metodología analítica mediante LC-MS/MS, para la detección de Lincomicina en músculo, hígado y plumas, la cual se implementó y validó en el Laboratorio de Farmacología Veterinaria (FARMAVET). Se escogió como estándar interno Lincomicina d-3, metanol como solvente para la extracción y la columna SPE Florisil como paso de limpieza. Los resultados obtenidos indican que la metodología analítica implementada es válida, ya que cumple con los criterios de aceptación de los parámetros establecidos por la Comisión de decisión 2002/657/CE y por la FDA: VICH GL49, siendo específica, lineal, con recuperación adecuada y precisa. Se determinó un límite de detección de 20 μg/kg-1, y se calcularon límites de cuantificación entre 20,7 y 23,6 μg/kg-1 para las tres matrices. Para la linealidad, todas las curvas de calibración mostraron un coeficiente de determinación (R2) mayor a 0,99. Los rangos de recuperación estuvieron entre 98% y 101% para todas las concentraciones estudiadas. Basándose en estos resultados, es posible la utilización de esta metodología analítica como base para realizar estudios a futuro de depleción de Lincomicina en tejidos comestibles y plumas. / The transfer of antibiotics to chicken feathers has been demonstrated in previous studies, showing a slower elimination than in other edible tissues such as liver and muscle, being found in high concentrations, even after respecting the established withdrawal times for other tissues. This becomes relevant because the feathers are incorporated as a source of protein in the diets of farm species. Given this scenario, an analytical method that allows the reliable, accurate and reproducible extraction in laboratory of Lincomycin analyte in edible tissues and feathers is needed, providing an analytical methodology to study the depletion in these matrices, since there are no previous studies for this antibiotic available in the literature. Therefore, the objective of this study was the development an analytical methodology through LC-MS/MS, for the detection of Lincomycin in muscle, liver and feathers, which was implemented and validated in the Veterinary Pharmacology Laboratory (FARMAVET). Lincomycin d-3 was used as the internal standard, methanol as drug solvent and Florisil SPE column for matrix clean up step. The results indicated that the analytical methodology implemented is valid, since it fulfills the acceptance criteria of the parameters established by Commission Decision 2002/657/CE and by FDA: VICH GL49, being specific, linear, with an adequate recovery and precise. A detection limit of 20 μg/kg-1 and a quantification limits between 20.7 and 23.6 μg/kg-1 were determined for the three matrices. For linearity, all calibration curves showed a coefficient of determination (R2) higher than 0.99. Recovery ranges were between 98% and 101% for all studied concentrations. Based on these results, it is possible to use this analytical methodology as a basis for future studies of depletion of Lincomycin in edible tissues and feathers. / Proyecto Fondecyt de iniciación en Investigación 11140530

A elevada incidência de acidentes de trânsito está fortemente relacionada ao consumo de bebidas alcoólicas. No Brasil a verificação do uso de álcool entre os condutores é realizada através dos etilômetros e da confirmação do etanol presente no sangue pela técnica de headspace (HS) associada à cromatografia em fase gasosa com detector de ionização de chama (CG/DIC). Não foram encontrados na literatura métodos para determinação de etanol em fluido oral (FO), utilizando a cromatografia em fase gasosa com detector de massas (CG/EM). Objetivos: Realizar a otimização da extração do etanol do fluido oral pela técnica de HS através de desenho experimental e posterior validação de metodologia analítica para a determinação de etanol em FO através de CG/EM e CG/DIC, utilizando o Quantisal® como dispositivo de coleta. Métodos: O desenho experimental foi desenvolvido através do Box–Behnken Design (BBD), onde foram avaliados a temperatura, o tempo de agitação e o volume injetado. O método foi validado de acordo com as recomendações do FDA e ANVISA considerando os parâmetros de seletividade, efeito residual, efeito matriz, linearidade, precisão, exatidão, limite de detecção e quantificação, estabilidade e recuperação. Resultados: As melhores condições do HS obtidas pelo desenho foram: temperatura de 90ºC, volume de injeção de 1000 μL e tempo de extração de 7 min. O método mostrou-se linear na faixa de 0,05-2 g/L (0,5-20 dg/L). Os valores de exatidão situaram-se na faixa de 101,56 e 111,29% e os valores obtidos para a precisão intra e interdia foram inferiores a 12%. Os limites de quantificação e de detecção encontrados foram iguais a 0,0125 g/L e 0,005 g/L para a CG/EM e 0,05 g/L e 0,0129 g/L para a CG/DIC, respectivamente. Conclusões: O método desenvolvido mostrou-se eficaz na determinação inequívoca de etanol em fluido oral através da técnica de HS-CG/EM e utilizando o dispositivo de coleta Quantisal®, atingindo limites de detecção inferiores ao encontrados pelas análises em CG/DIC, sem a necessidade de confirmação por outros sistemas cromatográficos e podendo ser facilmente aplicado na rotina laboratorial. / The high incidence of traffic accidents is strongly related to alcohol consumption. In Brazil the verification of alcohol use among drivers is performed through the breath alcohol analyzers and confirmation of ethanol in blood by the headspace technique (HS) associated to gas chromatography with flame ionization detector (GC/FID). To the best of our knowledge there are no methods for the determination of ethanol in oral fluid (OF), using gas chromatography with mass detection (GC/MS) in the literature. Propose: Perform the optimization of the extraction of ethanol from OF by headspace technique (HS) through experimental design and subsequent validation of analytical method for the determination of ethanol in OF by GC/MS and GC/DIC, using Quantisal® as a collection device. Methods: The experimental design was performed using the Box-Behnken Design (BBD) and the evaluated parameters were temperature, stirring time and sample volume injected. The methods were validated according to FDA and ANVISA recommendations considering the parameters of selectivity, residual effect, matrix effect, linearity, precision, accuracy, limit of detection and quantification, stability and recovery. Results: The best conditions of HS obtained by design were: temperature 90°C, injection volume 1000 μL and extraction time of 7 min. The method was linear in the range of 0.05-2 g/L (or 0.5-20 dg/L). The values of accuracy stay in the range of 101.56 and 111.29% and values for intra and inter-day precision were less than 12%. The limits of detection and quantification were found equal to 0.0125 g/L and 0.005 g/L for GC/MS and 0.05 g/L and 0.0129 g/L for GC/FID, respectively. Conclusions: The method was effective in unequivocal determination of ethanol in oral fluid by HS-GC/MS and using the collection device Quantisal®, reaching detection limits lower than that found by analysis on HS-GC/FID, without the need confirmation by other chromatographic systems and can be easily applied for routine monitoring.

A malária é um problema de saúde mundial. Esta doença é causada pela infecção dos eritrócitos com o protozoário do gênero Plasmodium. A atovaquona (ATQ) é um análogo estrutural da coenzima Q, usado como monoterapia ou em combinação com proguanil no tratamento da malária. A incorporação de fármacos de reduzida hidrossolubilidade, como a ATQ, em veículos tradicionais, é frequentemente limitada devido a razões de solubilidade. Neste contexto, nanoemulsões oferecem uma alternativa promissora devido a sua efetividade na solubilização de fármacos, aumentando a eficácia, e reduzindo os efeitos adversos. Assim, o objetivo deste trabalho foi desenvolver nanoemulsões catiônicas contendo ATQ para administração intravenosa. Nanoemulsões compostas de ATQ, triglicerídeos de cadeia média, lecitina de gema de ovo, 1,2-dioleoil-3-trimetil amônio propano (DOTAP), glicerol, polissorbato 80 e água foram obtidas pelo método de emulsificação espontânea. Este método levou à obtenção de nanoemulsões monodispersas com um diâmetro médio de aproximadamente 200 nm, como confirmado pela microscopia eletrônica de transmissão. O potencial  das nanoemulsões foi positivo (> 30 mV em pH 5). Um método isocrático de cromatografia líquida de fase reversa foi validado para quantificar ATQ. O método foi específico, linear, preciso e exato para a quantificação de ATQ. O teor de fármaco para todas as formulações foi próximo a 95%. A ATQ liberada a partir das nanoemulsões foi avaliada em dois meios diferentes (RPMI-1640 + 0,5% albumina ou PBS + 0,5% polissorbato 80) após a separação de ATQ livre através das membranas de ultrafiltração (poro de 0,1m). Independente do meio utilizado, ATQ foi progressivamente liberada a partir das formulações em função do fator de diluição e permaneceu constante em função do tempo. A maior liberação de ATQ foi observada para nanoemulsões contendo polissorbato 80 e no meio contendo este tensoativo não iônico em condições sink. O diâmetro das nanoemulsões permaneceu inalterado nas condições de liberação para nanoemsulões contendo polissorbato 80 enquanto uma inversão do - potencial de valores positivos para negativos foi detectado. Tais formulações mostraram uma inibição do crescimento do parasita in vitro frente a cepas de P. falciparum resistentes à ATQ. / Malaria is a global public health problem. This disease is caused by infection of red blood cells with protozoan parasites of the genus Plasmodium. Atovaquone (ATQ) is a structural analogue of coenzyme Q used as monotherapy or in combination with proguanil in malaria treatment. The incorporation of poorly-water soluble drugs such as ATQ in well-accepted vehicles is frequently limited due to solubility reasons. In this context, nanoemulsions offer an appealing alternative due to their effectiveness in drug solubilization, improved efficacy, and reduced side effects. The main purpose of this study was to develop cationic nanoemulsions containing ATQ for intravenous administration. Nanoemulsions composed of ATQ, medium chain triglycerides, egg lecithin, dioleoyl trimethylammonium propane (DOTAP), glycerol, polysorbate 80 and water were obtained by means of spontaneous emulsification. This procedure led to obtaining monodisperse nanoemulsions with mean droplet size of approximately 200 nm, as attested by transmission electron microscopy. - potential of nanoemulsions was positive (> 30mV at pH 5). An isocratic reversed – phase liquid chromatography method was validated for ATQ quantification. The method was specific, linear, precise, and accurate for ATQ quantification. The drug content in all formulations was close 95%. The ATQ release from nanoemulsions was evaluated in two different media (RPMI-1640 + 0.5% albumin or PBS + 0.5% polysorbate 80) after separation of free ATQ on ultrafiltration membranes (cut off 0.1μm). Whatever the media used, ATQ was progressively released from formulations upon the dilution ratio and remained constant over time. A higher release of ATQ was observed for nanoemulsions containing polysorbate 80 and in the media containing this non-ionic surfactant in sink conditions. The droplet size of nanoemulsions remained unchanged in the release conditions for nanoemulsions containing polysorbate 80 whereas an inversion of the -potential from positive to negative values was detected. Such formulations showed in vitro an inhibition of parasite growth against an ATQ-resistant P. falciparum strain.