Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-07-12T18:31:16Z No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_ Luciano Silva Santos.pdf: 68293759 bytes, checksum: e08fa92a1a464c69aa2ced5f53822c73 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-07-12T18:31:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_ Luciano Silva Santos.pdf: 68293759 bytes, checksum: e08fa92a1a464c69aa2ced5f53822c73 (MD5) / O ameloblastoma (AB) e o carcinoma espinocelular (CEC) são tumores benignos e malignos, respectivamente, que acometem os ossos e tecidos maxilares, com propriedades de invasibilidade consideráveis levando a tratamento muitas vezes mutiladores. As células de Langerhans (CLs) são células dendríticas, responsáveis pela apresentação de antígenos aos Linfócitos T, que desempenham importante função nos tecidos epiteliais, bem como na patogênese dessas lesões. O presente estudo analisou a expressão das células de Langerhans, utilizando a técnica imuno-histoquímica através dos marcadores imunológicos CD1a e Langerina, bem como a expressão da angiogênese utilizando o anticorpo CD34, em 25 casos de ameloblastoma (AB) e 23 casos de carcinoma espinocelular (CEC). As células dendríticas foram observadas em 88 % dos ameloblastomas e em 100% dos carcinomas espinocelulares, mostrando associação estatisticamente significante (p-valor<0,001). Tanto nos ameloblastomas como nos carcinomas espinocelulares, as CLs exibiram formas arredondada e dendrítica, em todas as camadas epiteliais, com predominância desta última na camada suprabasal. Apesar de existir uma correlação inversa entre a microdensidade vascular (MDV) e a densidade de CLs, nos CECs, e uma correlação direta entre esses mesmos parâmetros, nos ABs, não foi observada representatividade estatística entre essas correlações. Dos resultados obtidos conclui-se que as células de Langerhans parecem influenciar na imunopatogênese das lesões aqui estudadas, possivelmente com um papel modulador nos carcinomas espinocelulares e inflamatório nos ameloblastomas. / Salvador

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-04-02T13:33:04Z No. of bitstreams: 1 Delsilene Borges. Avaliação...2013.pdf: 2874154 bytes, checksum: 062e7af1c2af767178820b1b4d1d1bc7 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-04-02T13:33:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Delsilene Borges. Avaliação...2013.pdf: 2874154 bytes, checksum: 062e7af1c2af767178820b1b4d1d1bc7 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Na esquistossomose mansônica o fígado é o órgão alvo das agressões patogênicas, onde as lesões hepáticas caracterizam-se principalmente pela presença de granulomas periovulares e formação de fibrose periportal, além de alterações vasculares responsáveis pela hipertensão dentro do sistema venoso portal. A angiogênese precede a maioria dos casos de fibrose, onde se verifica participação direta das células estreladas hepáticas (CEH) e das células endoteliais sinusoidais (CES) que são estimuladas, principalmente por macrófagos do tipo II (M2) – ativados alternativamente. O tratamento para esquistossomose é feito pelo uso do praziquantel (PZQ), o qual é capaz de promover cura parasitológica e reparo das lesões hepáticas, todavia pouco se sabe sobre os componentes celulares envolvidos na angiogênese durante o reparo do fígado. Este trabalho teve como objetivo estudar o remodelamento das lesões hepáticas pós-tratamento e investigar a participação das CEH, CES e macrófagos M2 no processo de reparo das lesões. Após aprovação pela Comissão de Ética no Uso de Animais (CEUA-CPqGM), protocolo nº 006/2011, 80 camundongos Swiss Webstar foram utilizados, destes 70 foram infectados com 50 cercárias do Schistossoma mansoni e dez permaneceram intactos. Quatro meses após infecção foi realizado tratamento com PZQ (400mg/Kg) em parte dos animais infectados, formando assim três grupos: um controle, um infectado não tratado e outro infectado e tratado. Em diferentes intervalos de tempo foram realizadas três hepatectomias parciais: a primeira com quatro meses de infecção (antes do tratamento); a segunda com seis meses de infecção e dois meses de tratamento; a terceira com oito meses de infecção e quatro de tratamento. Os fragmentos hepáticos coletados foram submetidos a avaliações morfológicas e estudos imuno-histoquímicos para visualização de componentes celulares – macrófagos M2 (Ym1), CEH (α-SMA) e CES (CD31). Análises morfométricas foram realizadas para quantificação do percentual de tecido fibroso e das células imunomarcadas. Nossos resultados demonstraram que após dois meses de tratamento com PZQ foi possível observar reabsorção do tecido fibroso hepático com redução da expressão de macrófagos M2 e CEH. Quatro meses após a quimioterapia verifica-se aumento no número de células endoteliais. Esses resultados sugerem que macrófagos M2 e CEH têm participação ativa na formação do tecido fibroso, exercendo pouca influência na fase involutiva do granuloma. Todavia, a intensa proliferação de CES nos granulomas involutivos, confirma o importante papel da angiogênese no remodelamento das lesões hepáticas. / The liver is a target for pathogenic attacks during schistosomiasis, showing periovular granulomas and the formation of periportal fibrosis, besides vascular changes responsible for hypertension within portal venous system. Angiogenesis precedes most cases of fibrosis, which can be verified the presence of hepatic stellate cells (HSC) and liver sinusoidal endothelial cells (LSEC) stimulated mostly by macrophages type II (M2) – alternatively activated. Schistosomiasis treatment is based on praziquantel (PZQ), which enables parasitological cure and resolution of liver cells. However, knowledge regarding active cell components on angiogenesis during liver regeneration is scarce. Our goal was to study the remodeling of liver injuries during post-treatment phase and investigate the role of HSC, LSEC and macrophages (M2) on the process of resolution of injuries. After the approval of ethical committee for animal research of the CPQGM-FIOCRUZ, record number 006/2011, 80 mice Swiss Webstar were used, which 70 were infected by 50 cercariae of Schistossoma mansoni and ten remained intact. Four months after infection a treatment with PZQ (400mg/Kg) was started in part of infected animals, constituting three different groups: normal, non-treated infected and treated and infected. In different times three partial hepatectomias were made: the first on four months of infection (before treatment); the second with six months of infection and two months of treatment; and the third with eight months of infection and four months of treatment. In all liver fragments collected for morphological evaluations were performed and immunohistochemistry studies were made to visualize macrophages M2 (Yml), HSC (α-SMA) and LSEC (CD31). Morphometric analysis was performed to quantify percentage of fibrosis and the immunostainig cells. Our results show that after two months of PQZ treatment it is possible to observe fibrosis resorption in the liver, with reduction of macrophages M2 expression and HSC. Four months after chemotherapy an increase on the number of LSEC was verified. These results suggest that macrophages M2 and HSC are active on the formation of fibrosis tissue, playing little influence on the evolving phase of the granuloma. Nevertheless, intense proliferation of LSEC observed on involute granulomas confirm the important role for angiogenesis on remodeling of liver injuries.

OBJETIVO: demonstrar as alterações histológicas secundárias ao uso de bevacizumabe na aorta descendente de suínos submetida à interrupção dos vasa vasorum. MATERIAIS E MÉTODOS: em doze suínos, divididos em grupos tratamento e controle (n=6 cada) foi realizada dissecção por 5 cm da aorta torácica, ligadura das artérias intercostais e cobertura com polivinil; o grupo tratamento recebeu uma dose endovenosa única de bevacizumabe. Após quinze dias, os animais foram sacrificados para retirada da artéria e preparo das lâminas histológicas dos grupos tratamento, controle e área não manipulada dos dois grupos. As lâminas foram analisadas com relação aos graus de angiogênese, injúria, inflamação e espessamento intimal. A análise estatística foi conduzida através da média e do desvio-padrão dos escores e as comparações entre os grupos foram realizadas pelo teste de Mann-Whitney. Para obtenção de intervalos de confiança de 95% para as médias das contagens dos escores utilizou-se a distribuição de Poisson, a fim de determinar o efeito estatístico. RESULTADOS: o bevacizumabe causou parefeitos em todos os suínos tratados, com um óbito. As variáveis analisadas através da Escala de Magnitude para Efeito Estatístico, demonstram tendência de redução da angiogênese e da injúria e de aumento da inflamação no limite do moderado. Não ocorreu modificação do espessamento intimal entre os grupos. CONCLUSÃO: a medicação utilizada na lesão da parede arterial induzindo hipóxia, mostrou tendência de redução da angiogênese e da injúria, mas não reduziu o processo inflamatório ou o espessamento intimal da parede arterial. O bevacizumabe mostrou toxicidade no modelo suíno. / OBJECTIVE: To demonstrate histological changes secondary to the use of bevacizumab in the descending aorta of pigs after interruption of vasa vasorum flow. METHODS: Twelve pigs were divided into control and treatment groups (n = 6 each). It was performed a 5-cm dissection of the thoracic aorta, ligation of the intercostal arteries and protection with polyvinyl chloride. Pigs in the treatment group received a single intravenous dose of bevacizumab. After 15 days, the animals were euthanized and the aorta removed. Histological slides were prepared for control and treatment groups and for the non-surgically manipulated part of the aorta in both groups. The slides were analyzed for the degree of angiogenesis, injury, inflammation, and intimal thickening. Data were expressed as mean (SD) of scores and groups were compared using the Mann-Whitney test. The Poisson distribution was used to calculate 95% confidence intervals for the mean scores in order to determine effect statistics. RESULTS: Bevacizumab had adverse effects on all treated pigs, leading to one death. The analysis using a scale of magnitudes for effect statistics showed a trend toward a decrease in angiogenesis and injury and an increase in inflammation for moderate effects. There was no change in intimal thickening in either group. CONCLUSION: The medication used for arterial wall injury inducing hypoxia showed a trend toward reduced angiogenesis and injury, but with no reduction in the inflammatory process or intimal thickening of the arterial wall. Bevacizumab showed toxicity in the porcine model.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2015-03-13T13:41:44Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ODONTO_ Poliana Ramos Braga Santos.pdf: 1921456 bytes, checksum: c77e91196bc30a795d51c54281f7c04f (MD5) / Approved for entry into archive by Flávia Ferreira (flaviaccf@yahoo.com.br) on 2015-04-30T13:03:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_ODONTO_ Poliana Ramos Braga Santos.pdf: 1921456 bytes, checksum: c77e91196bc30a795d51c54281f7c04f (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-30T13:03:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ODONTO_ Poliana Ramos Braga Santos.pdf: 1921456 bytes, checksum: c77e91196bc30a795d51c54281f7c04f (MD5) / CAPES / O objetivo desse trabalho foi avaliar o perfil de expressão dos microRNAs: miR-9, miR-16, miR-17, miR-132, miR-195 e miR-221 relacionados à ativação de mastócitos e a angiogênese em 31 amostras de tumores de glândulas salivares parafinadas, sendo 11 carcinomas adenóides císticos (CAC), 9 carcinomas mucoepidermóides (CME) e 11 adenomas plaomórficos (AP). Em adição, foi realizada uma investigação imuno-histoquímica para a detecção de mastócitos e de microvasos utilizando os marcadores mast cell tryptase e CD-34. Foi possível observar uma maior densidade de mastócitos entre os controles normais (2,12células/mm2) e os CME (10,55células/mm2) e, entre este último e o CAC (6,27células/mm2) e o AP (5,97células/mm2), sendo que o CME apresentou as maiores concentrações tanto peri (16,8células/mm2) quanto intratumorais (4,29células/mm2). Uma diferença significatica na densidade de microvasos foi observada entre os tumores malignos e benignos (p<0,001), bem como entre os controles (3,06microvasos/mm2) e os tumores, sendo que o CME (21,53 microvasos/mm2) apresentou os maiores índices quando comparado ao CAC (10,92microvasos/mm2) e ao AP (2,63microvasos/mm2). Foi observada também uma forte correlação positiva entre a densidade mastócitaria e a densidade de microvasos nos tumores analisados (ρ=0,601, Coeficiente de Spearman, p<0,001). Os microRNAs: miR-16, miR-17, miR-132, miR-195 e miR-221 apresentaram uma expressão diminuída, enquanto, o miR-9 apresentou uma expressão aumentada na maioria dos tumores quando comparados aos tecidos normais. Observou-se também uma diferença significativa na média de expressão do miR-9 (p=0,003), miR-17 (p=0,013), miR-132 (p=0,040) e miR-221 (p=0,032) entre os tumores e controles. Apenas o miR-9 apresentou uma correlação negativa estatisticamente significante com a densidade de microvasos nos tumores estudados (ρ= -0,533, Coeficiente de Spearman, p=0,001). Sendo assim, o estudo genético dos microRNAs parece contribuir para o entendimento de algumas das anormalidades que ocorrem em tumores de glândulas salivares podendo tornar-se fortes alvos terapêuticos no futuro.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-03-05Bitstream added on 2014-06-13T21:06:09Z : No. of bitstreams: 1 calderon_c_dr_botfmvz.pdf: 668199 bytes, checksum: 39ff86991440908435624d410c3ad500 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O mastocitoma canino (MCT) é uma neoplasia maligna de grande importância na clínica oncológica devido ao seu comportamento biológico agressivo e alta freqüência. A COX-2 e a PGE2 têm sido associadas à promoção e progressão tumoral e seus principais mecanismos envolvem estímulos da angiogênese tumoral e a inibição da morte celular programada. O VEGF é um potente indutor da angiogênese e a caspase-3 tem um importante papel na via efetora da apoptose. Compreender o mecanismo pela qual a COX-2 pode estimular a progressão tumoral no mastocitoma, permite ampliar o conhecimento do comportamento biológico desta neoplasia e direcionar tratamentos mais eficazes. O presente trabalho fez um estudo retrospectivo em 24 casos de mastocitoma canino (MCT). As neoplasias foram classificadas de acordo com Patnaik et al. (1984) e a expressão da COX-2, PGE2, VEGF e caspase-3 foram avaliadas usando a técnica de imunoistoquímica. A expressão da COX-2 foi correlacionada à expressão do VEGF, PGE2 e caspase-3 nos diferentes graus histopatológicos. A imunomarcação da caspase-3 foi menor nos tumores indiferenciados comparados com os bem diferenciados. Comparando os dados da expressão da COX-2 com os demais marcadores foi observado a correlação positiva entre COX-2 e PGE2, COX-2 e VEGF nas graduações II e III. A correlação entre COX-2 e caspase-3 foi somente detectada no grau III. / The canine mast cell tumor (MCT) is a malignant neoplasia with great importance on the clinical practice due to its aggressive behavior and high frequency. The COX-2 and the PGE2 have been associated to the tumor initiation, promotion and progression, and its main mechanisms involve the stimuli of tumor angiogenesis and the inhibition of apoptosis. The VEGF is a powerful inductor of angiogenesis and the caspase-3 is responsible for most part of the apoptotic effects. The understanding of the mechanism by which the COX-2 stimulates the tumor progression in the mast tumor cells provides an extension through the biological behavior of this neoplasia and leads to a better and effective treatment. The present work was a retrospective study in 24 cases of MCT. The neoplasias were classified according to Patnaik et al. (1984) and the expression of COX-2, PGE2, VEGF and caspase-3 were evaluated using the immunohistochemistry technique. The expression of COX-2 was correlated to the expression of VEGF, PGE2 and caspase-3 in the different histopathologic grades. Caspase-3 immunolabeling was lower in the undifferentiated tumors compared to the more differentiated ones. Comparing the COX-2 expression data to the other markers it was observed a positive correlation between COX-2 and PGE2, COX-2 and VEGF in grade II and III. Correlation between COX-2 and caspase-3 was detected only on grade III. Keywords: COX-2, PGE2, VEGF, caspase-3, mast cell tumor.

Made available in DSpace on 2013-10-29T16:25:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000451795-Texto+Completo-0.pdf: 9844032 bytes, checksum: abd171b9947156a56d52eef795138daf (MD5) Previous issue date: 2013 / In this study we investigated the immunodetection of VEGF, ANG-1 and ANG-2, as well as the number of blood vessels in specimens of reticular (ROLP) and atrophic-erosive oral lichen planus (AEOLP). In addition, were included the control groups oral epithelial hyperplasia (OFH), oral epithelial dysplasia (OED) and oral squamous cell carcinoma (OSCC) in order to find a relation between those angiogenics growth factors and biological behavior. Biopsy specimens diagnosed at the Oral Medicine Division of PUCRS, Brazil, were selected and distributed into the following groups ROLP (n=21); AEOLP (n=11); OFH (n=10); OED (n=10); and OSCC (n=10). They were subjected to immunohistochemical processing with primary antibodies anti-VEGF, anti-ANG-1 and anti-ANG-2. The results do not revelead significant difference in the immunodetection of ANG-1 and ANG-2 between the OLP groups. The ROLP group showed significantly higher immunodetection of VEGF (P=0. 01) compared with the AEOLP group. There was no significant difference in the number of blood vessels between the OLP groups (P=0. 393).In comparative analysis of OLP with control groups, ROLP and AEOLP cases were considered together, forming the OLP group (n=32). The comparison of immunodetection of those growth factors between the OLP group and each control group showed significantly higher values of ANG-1 in the OLP group compared to the OFH group (P=0. 043) and no significant difference in ANG-2. VEGF immunodetection in the OLP group was significantly higher than in the OFH group (P=0. 003) and significantly lower compared to the OSCC group (P=0. 032). No correlation was observed between growth factors evaluated in the different groups studied. The results of immunodetection of VEGF, ANG-1 and ANG-2 and the lack of significant difference in the number of blood vessels between ROLP and AEOLP groups indicate that angiogenesis in OLP can not be associated to the different clinical forms of this disease. The lack of correlation between the growth factors in the different lesions indicates the involvement of other pro-angiogenic agents in vascular neoformation and reflects the complexity of this process. Furthermore, immunodetection of growth factors evaluated was similar between OLP and OED, suggesting that angiogenesis in OLP may behave similarly to the epithelial dysplastic lesions. / Neste estudo foi investigada a imunodetecção do VEGF e das angiopoietinas (ANG) 1 e 2, bem como o número de vasos sanguíneos em espécimes de líquen plano oral reticular (LPOR) e atrófico-erosivo (LPOAE). Além disso, foram incluídos os grupos-controle hiperplasia fibroepitelial (HFO), displasia epitelial (DEO) e carcinoma espinocelular (CEO) orais, a fim de encontrar uma relação entre esses fatores de crescimento angiogênicos e comportamento biológico. Foram obtidos espécimes de biópsias do arquivo do Serviço de Estomatologia e Prevenção do Câncer Bucomaxilofacial do Hospital São Lucas da PUCRS, os quais foram distribuídos nos grupos LPOR (n=21); LPOAE (n=11); HFO (n=10); DEO (n=10); CEO (n=10) e, posteriormente, submetidos ao processamento imunoistoquímico com os anticorpos primários anti-VEGF, anti-ANG-1 e anti-ANG-2. Os resultados não revelaram diferença significativa na imunodetecção da ANG-1 e ANG-2 entre os grupos líquen plano oral (LPO). No entanto, o grupo LPOR apresentou imunodetecção significativamente superior do VEGF (p=0,01) comparado ao grupo LPOAE. Com relação ao número de vasos sanguíneos, a comparação entre os grupos LPO não mostrou diferença significativa entre ambos (p=0,393).Na análise comparativa com os grupos-controle, os casos de LPOR e LPOAE foram considerados em conjunto, formando o grupo LPO (n=32). A comparação da imunodetecção dos fatores de crescimento entre o grupo LPO com cada grupocontrole revelou valores significativamente superiores da ANG-1 no grupo LPO em relação ao grupo HFO (p=0,043) e ausência de diferença significativa nos valores da ANG-2. A imunodetecção do VEGF foi significativamente superior no grupo LPO em relação ao grupo HFO (p=0,003) e inferior quando comparada ao grupo CEO (p=0,032). Não foi observada correlação entre os fatores de crescimento avaliados nos diferentes grupos estudados. Os resultados observados na imunodetecção do VEGF, ANG-1 e ANG-2 e a falta de diferença significativa no número de vasos entre os grupos LPOR e LPOAE indicam que a angiogênese no LPO possa não estar associada às diferentes formas clínicas desta doença. A falta de correlação entre estes fatores de crescimento nos diferentes tipos de lesões estudadas indica o envolvimento de outras citocinas pró-angiogênicas, além daquelas avaliadas neste estudo, na neoformação vascular e reflete a complexidade deste processo. Por outro lado, a imunodetecção dos fatores de crescimento avaliados foi semelhante entre os grupos LPO e DEO, sugerindo que a angiogênese no LPO possa comportar-se de modo semelhante ao de lesões displásicas epiteliais.

Made available in DSpace on 2014-08-20T02:02:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000460424-Tese+Parcial-0.pdf: 208542 bytes, checksum: c614e57b83b06eea8ef4c11836bbd946 (MD5) Previous issue date: 2014 / Oral cancer is among the six most common types of cancer worldwide, considered as the seventh most frequent in the Brazil. Tumor angiogenesis has become a promising target for the treatment of malignancies. Methods that allow three-dimensional evaluation of the vascular network of tumors have a great importance to assess the effects of antiangiogenic treatments in tumors. The objective of this study was to evaluate the effect of sunitinib maleate and the metronomic chemotherapy with cyclophosphamide on the vascular network of the oral squamous cell carcinoma by scanning electron microscopy (SEM) of corrosion casts. 24 Syrian hamsters (Mesocricetus auratus) were divided into three groups of eight animals each and had their right buccal pouches submitted to tumor induction with dimethylbenzanthracene and carbamide peroxide for 55 days. Following, the animals were maintained without treatment (group I) or receiving sunitinib (group II), or cyclophosphamide (group III) for a period of 4 weeks. After the treatment, six animals of each group had their vascular networks casted by Mercox® resin and analyzed qualitatively and quantitatively by SEM. The two remaining animals of each group had their buccal pouches prepared for qualitative analysis by light microscopy. It was observed changes in the angioarchitecture of the pouches that were treated with these two drugs, suggesting an improvement in the tumors vascularization. The main changes caused by the treatments were the reduction of vessel tortuosity, the reestablishment of vascular hierarchy, besides the decrease of sprouting and intussusception images, compressed vessels, saccular dilations, and other vascular figures. Quantitative analysis of the samples exhibited a statistically significant reduction in vascular diameter and intervascular distances ofthe pouches treated with cyclophosphamide, when compared with the pouches no treated and those treated with sunitinb. The findings of the present study suggest that these two drugs may act in the vascular normalization of squamous cell carcinomas induced in hamster buccal pouch, however the metronomic chemotherapy exhibited superior results. / O câncer oral está entre os seis tipos mais comuns de câncer no mundo, sendo o sétimo mais encontrado entre a população brasileira. O processo de angiogênese tumoral tem-se tornado um alvo promissor para o tratamento de neoplasias malignas. Os métodos que permitem a avaliação tridimensional da angioarquitetura dos tumores são de grande importância na análise dos efeitos de tratamentos antiangiogênico. Este trabalho visou avaliar o efeito do maleato de sunitinibe e da quimioterapia metronômica com ciclofosfamida na vasculatura do carcinoma oral de células escamosas, através de microscopia eletrônica de varredura (MEV) de réplicas vasculares. Assim, 24 hamsters sírios (Mesocricetus auratus) divididos em três grupos de oito animais cada, tiveram suas bolsas jugais direitas submetidas à indução tumoral com dimetilbenzantraceno e peróxido de carbamida por 55 dias, sendo mantidos por mais 4 semanas sem tratamento (grupo I), ou recebendo sunitinibe (grupo II), ou ciclofosfamida (grupo III). Após o tratamento, seis animais de cada grupo tiveram suas redes vasculares moldadas pela resina Mercox® e analisadas qualitativa e quantitativamente em MEV. Os dois animais restantes de cada grupo tiveram suas bolsas qualitativamente analisadas em microscopia de luz. Foram observadas modificações na angioarquitetura das bolsas que receberam tratamento com os dois fármacos, o que gerou uma normalização da vascularização dos tumores. As principais modificações provocadas pelos tratamentos foram a redução da tortuosidade dos vasos, o reestabelecimento da hierarquia vascular, além da diminuição de imagens de sprouting e intussuscepções, vasos comprimidos, dilatações saculares e outras figuras vasculares. A análise quantitativa das amostras evidenciou uma redução estatisticamente significativa do diâmetro vascular e das distâncias intervasculares nas bolsas tratadas com ciclofosfamida, quando comparadas com as bolsas que não receberam tratamento e com aquelas tratadas com sunitinibe. Os achados do presente estudo sugerem que essas duas drogas podem atuar na normalização da rede vascular no carcinoma de células escamosas induzido em bolsa jugal de hamster; no entanto a quimioterapia metronômica apresentou resultados superiores.

OBJETIVO: demonstrar as alterações histológicas secundárias ao uso de bevacizumabe na aorta descendente de suínos submetida à interrupção dos vasa vasorum. MATERIAIS E MÉTODOS: em doze suínos, divididos em grupos tratamento e controle (n=6 cada) foi realizada dissecção por 5 cm da aorta torácica, ligadura das artérias intercostais e cobertura com polivinil; o grupo tratamento recebeu uma dose endovenosa única de bevacizumabe. Após quinze dias, os animais foram sacrificados para retirada da artéria e preparo das lâminas histológicas dos grupos tratamento, controle e área não manipulada dos dois grupos. As lâminas foram analisadas com relação aos graus de angiogênese, injúria, inflamação e espessamento intimal. A análise estatística foi conduzida através da média e do desvio-padrão dos escores e as comparações entre os grupos foram realizadas pelo teste de Mann-Whitney. Para obtenção de intervalos de confiança de 95% para as médias das contagens dos escores utilizou-se a distribuição de Poisson, a fim de determinar o efeito estatístico. RESULTADOS: o bevacizumabe causou parefeitos em todos os suínos tratados, com um óbito. As variáveis analisadas através da Escala de Magnitude para Efeito Estatístico, demonstram tendência de redução da angiogênese e da injúria e de aumento da inflamação no limite do moderado. Não ocorreu modificação do espessamento intimal entre os grupos. CONCLUSÃO: a medicação utilizada na lesão da parede arterial induzindo hipóxia, mostrou tendência de redução da angiogênese e da injúria, mas não reduziu o processo inflamatório ou o espessamento intimal da parede arterial. O bevacizumabe mostrou toxicidade no modelo suíno. / OBJECTIVE: To demonstrate histological changes secondary to the use of bevacizumab in the descending aorta of pigs after interruption of vasa vasorum flow. METHODS: Twelve pigs were divided into control and treatment groups (n = 6 each). It was performed a 5-cm dissection of the thoracic aorta, ligation of the intercostal arteries and protection with polyvinyl chloride. Pigs in the treatment group received a single intravenous dose of bevacizumab. After 15 days, the animals were euthanized and the aorta removed. Histological slides were prepared for control and treatment groups and for the non-surgically manipulated part of the aorta in both groups. The slides were analyzed for the degree of angiogenesis, injury, inflammation, and intimal thickening. Data were expressed as mean (SD) of scores and groups were compared using the Mann-Whitney test. The Poisson distribution was used to calculate 95% confidence intervals for the mean scores in order to determine effect statistics. RESULTS: Bevacizumab had adverse effects on all treated pigs, leading to one death. The analysis using a scale of magnitudes for effect statistics showed a trend toward a decrease in angiogenesis and injury and an increase in inflammation for moderate effects. There was no change in intimal thickening in either group. CONCLUSION: The medication used for arterial wall injury inducing hypoxia showed a trend toward reduced angiogenesis and injury, but with no reduction in the inflammatory process or intimal thickening of the arterial wall. Bevacizumab showed toxicity in the porcine model.

A angiogênese é um processo fundamental e fisiológico de organismos vertebrados, sendo responsável pela formação de novos vasos sanguíneos a partir dos já existentes. Entretanto, a angiogênese pode ocorrer também em condições patológicas, como causa ou consequência de doenças. Um exemplo disso está nos tumores, que para crescer além de alguns milímetros cúbicos, necessitam de um suprimento adequado de oxigênio e nutrientes, e, portanto, dependem da angiogênese. Por isso, compostos que inibem a angiogênese já estão em uso na clínica, não só para o tratamento de tumores, mas também de outras doenças dependentes da angiogênese, as retinopatias. Neste projeto, daremos continuidade à linha de pesquisa do nosso grupo, que procura identificar e validar peptídeos com potencial translacional (pré-fármacos), por apresentarem atividade anti-angiogênica. Utilizando a metodologia do Phage Display, nosso grupo identificou e caracterizou um hexapeptídeo, que foi selecionado por interagir com os receptores do principal fator iniciador da angiogênese, o VEGF (fator de crescimento endotelial vascular). Os receptores de VEGF (ou VEGFR) são proteínas do tipo receptor tirosina quinase, expressos em células endoteliais e essenciais para a iniciação e progressão da neovascularização. O hexapeptídeo identificado em nosso laboratório liga-se ao VEGFRs e inibe a formação de vasos sanguíneos in vivo em modelos animais de angiogênese. Neste trabalho, procuramos estender os estudos com este hexapeptídeo para identificar o sítio de ligação do mesmo no VEGFR e avançar em modelos que permitam a determinação dos requisitos estruturais de interação peptídeoreceptor. Com estes conhecimentos, poderemos num futuro próximo, caminhar para o desenvolvimento racional de moléculas peptideomiméticas com propriedades anti-angiogênicas. / Angiogenesis is a fundamental and physiological process for vertebrate organisms, being responsible for the formation of new blood vessels, sprouting from the existent ones. However, angiogenesis may occur in pathological conditions, being cause or consequence of diseases. One example is tumor development. To grow beyond a few cubic millimeters, tumors need a suitable supply of oxygen and nutrients, and, therefore, they are dependent of angiogenesis. In fact, anti-angiogenic compounds are already in therapeutic use, targeting not only tumors but other angiogenesis dependent diseases, like retinopathies. In this project, we expand research from our own group to identify and develop anti-angiogenic peptides with translational potential (pre-drugs). Using Phage Display methodology, our group identified and characterized a hexapeptide, that was selected based on its capacity to interact with the receptors for the main initiator factor of angiogenesis, the VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor). VEGF receptors (VEGFR) are tyrosine kinase proteins, expressed by endothelial cells and essential for neovascularization initiation and progress. The hexapeptide identified in our lab binds to VEGFRs and inhibit blood vessel formation in vivo when tested in an angiogenesis animal model. In this study, we seek to further understand the interaction of this hexapeptide with its receptor by identifying its binding domain on VEGFR and develop models that will allow the determination of the structural requirements for interaction of this receptor ligand pair. With this knowledge, we can in a near future progress to a rational development of novel peptidemimetic molecules with angiogenic properties similar to this hexapeptide.

Este estudo analisou o efeito do ultra-som terapêutico na vascularização pós lesão muscular experimental em coelhos. Foram utilizados 10 coelhos da raça Nova Zelândia, com peso médio de 2,5 kg. Os animais foram submetidos à lesão por esmagamento do músculo reto femoral em ambas as coxas e, após 24 horas um dos lados foi tratado com ultra-som terapêutico e o outro serviu como controle. A freqüência utilizada foi de 1 MHz e intensidade de 0,5 W/cm2 por 5 minutos, durante 10 dias consecutivos. Após 48 horas do término do período de tratamento, os animais foram sacrificados. Foi feita a lavagem do sistema vascular com solução fisiológica, e depois, feita a injeção de uma solução de sulfato de bário e tinta da China. Os músculos foram ressecados do fêmur e submetidos ao processo de diafanização de acordo com a técnica de Spalteholz. Depois que as peças ficaram transparentes, foram examinadas por microscópio cirúrgico. Os resultados não mostraram diferenças no padrão da vascularização (artérias e arteríolas) entre os lados tratados e não tratados, sugerindo que o ultra-som terapêutico não provocou mudanças no padrão vascular após aplicação precoce em lesão muscular. / The effects of therapeutic pulsed ultrasound was investigated on experimental muscular lesions of rabbits. Ten white New Zealand rabbits weighing 2,5 kg were operated on and a crush injury of the rectus femoris of both hind limbs was performed. Twenty-four hours later therapeutic ultrasound was applied on one side and the other side was kept as a control. The following parameters were used: frequency 1 MHz, intensity 0,5 W/cm2, treatment time 5 minutes and a whole of 10 sessions were completed. Two days after completion of the treatment the animals were killed and the arterial system of the hind limbs was injected with a mixture of barium sulphate and Indian ink. The quadriceps was harvested and processed according the Spalteholz technique. The vasculature of the specimens, specially in the local of the injury was studied. The results showed no difference in the vascular pattern between the treated and untreated sides.