Introdução. Pseudomonas aeruginosa é um patógeno clinicamente importante. Existem diversos mecanismos de resistência aos antimicrobianos em P. aeruginosa, dentre eles a produção de enzimas (β-lactamases) e sistemas de efluxo se destacam, uma vez que são capazes de conferir resistência aos carbapenêmicos. Objetivo. Avaliar os sistemas de efluxo MexAB-OprM e MexXY em isolados clínicos de P.aeruginosa de pacientes atendidos no Hospital de Clínicas de Porto Alegre-RS e relacionar a expressão destes sistemas com a CIM de meropenem em isolados produtores e não produtores de metalo-beta-lactamases (MBL). Metodologia. Um total de 86 isolados de P. aeruginosa com suscetibilidade reduzida aos carbapenêmicos foram avaliados. A hiperexpressão dos sistemas MexAB e MexXY foi determinada fenotipicamente utilizando inibidor seletivo da bomba (PAβN). MBLs foi determinada por PCR utilizando primers específicos. Resultados. O fenótipo de hiperexpressão dos sistemas de efluxo estudados foi observado em 34 (47,8%) dos 71 isolados negativos para a produção de MBL e em 14 (93.3%) dos 15 isolados MBL positivos. Na presença de PaβN, todos os isolados não produtores de MBL apresentaram uma redução da CIM para meropenem para valores na faixa de suscetibilidade. Entretanto, das 13 P. aeruginosa produtoras de MBL que diminuíram a CIM, essa redução não foi para valores dentro da faixa de sensibilidade. Conclusão. Os isolados de P. aeruginosa não produtores de MBL apresentam resistência ao meropenem devido a hiperexpressão de MexAB-OprM. Na presença de PaβN, independente de apresentarem produção de MBL, o CIM de meropenem reduziu para valores ≤ 8 mg/L. Contudo, quando isolados não apresentavam MBL, a CIM de meropenem reduziu para níveis de sensibilidade. / Introduction. Bacterial efflux pump systems are resistance mechanisms which may lead to therapeutic failure of antibiotic treatment since many antimicrobial agents are substrate for these mechanisms. The aim of the study was to evaluate the expression of the MexAB, MexXY pump efflux and to determine its influence on meropenem MIC in carbapenemase producing and non-producing P. aeruginosa. Methods. A total of 86 non-repetitive clinical isolates of P. aeruginosa with reduced susceptibility to carbapenems were evaluated. Overexperession of MexAB and MexXY efflux systems were evaluated phenotypically using the PAβN selective inhibitor. Metallo-β-lactamases (MBL) were detected by PCR using specific primers. Results. The efflux pump-overexpressed phenotype was observed in 34 (47.8%) MBL-negative and in 14 (93.3%) MBL-positive isolates. In the presence of the PaβN, all non-producers of MBL presented a reduction of meropenem MICs to the range of susceptibility. In contrast, the 13 P. aeruginosa MBL-producing isolates decreased meropenem MICs at least 16-fold but this reduction did not reach the range of susceptibility. Conclusion. P. aeruginosa non-MBL-producing showed resistance to meropenem due to overexpression of MexAB-OprM. In the presence of PaβN, the isolates harboring or not MBL genes, the meropenem MICs were reduced to values ≤8 mg/L. However, when the isolates harbor MBL genes, the meropenem MIC values were reduced to the susceptibility.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:09:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 341274.pdf: 2062367 bytes, checksum: 9e2c31ae12105178caf4239749a1d515 (MD5) Previous issue date: 2016 / As implicações biológicas da incorporação de agentes antibiofilmes às membranas utilizadas nas técnicas reconstrutivas de tecido ósseo não estão completamente esclarecidas. O objetivo deste estudo foi analisar a resposta inflamatória à implantação subcutânea de membranas de PLGA (ácido polilático co-glicólico) associadas a duas categorias de agentes antibiofilme: quatro tipos de lactamas e dois de nanopartículas de prata. Foram implantados, ao todo, 08 tipos de membranas (controles e testes) em 45 ratos Wistar adultos machos, distribuídos aleatoriamente nos períodos experimentais de 2, 7 e 30 dias. Cada animal recebeu 04 discos de membrana de 6mm de diâmetro, sendo que em todos os animais, 02 sítios obrigatoriamente receberam os discos controle (PLGA puro e colágeno) e os outros 02 sítios receberam, randomicamente, discos teste. Após cada período experimental, os animais foram anestesiados e submetidos a biópsias excisionais das áreas dos implantes e punção cardíaca (eutanásia) para a coleta de amostras de sangue e análise laboratorial - hemograma. As amostras removidas foram fixadas em formol, processadas e incluídas em parafina. A partir de cortes semi-seriados de 5 micrometros, foram confeccionadas as lâminas histológicas, coradas com HE para análise descritiva e semi-quantitativa da resposta inflamatória e biocompatilidade dos compostos testados. A membrana controle de colágeno foi a que mostrou maior reação tecidual ao longo dos 30 dias, com presença de macrófagos e células gigantes multinucleadas. As membranas testadas mostraram reação amena, muito semelhante entre si, e à membrana controle de PLGA puro. Dentro dos períodos experimentais testados, as amostras teste mostraram melhor resposta tecidual que as amostras controle.<br> / Abstract : Biological aspects of the use of membranes for tissue reconstructive procedures embedded with anti-bacterial agents are not completely elicited. The aim of this study was to analyze the inflammatory response to subcutaneous implantation of bioabsorbable poly(lactic-co-glycolic acid) - PLGA membranes embedded with two different categories of anti-bacterial agents: four types of lactams and two silver nanoparticles. Collagen and pure PLGA membranes were used as control groups. Each animal randomly received 04 membranes, 02 of them necessarily the control discs. After 02, 07 and 30 days of implantation, the animals were anesthetized for the excisional biopsy of the implant areas and for blood sample collections through cardiac puncture (euthanasia). The skin samples were histologically processed and embedded in paraffin to undergo semi-serial cuts of 5 micrometers; these slides were stained using Hematoxylin-Eosin and descriptively analyzed by light microscopy. Semi-quantitative inflammatory response analyses of the tested compounds were also made. Both tested antibiofilm agents showed a similar mild reaction with a good resolution at the end of the experimental period. Within the experimental periods tested, the test samples showed better tissue response than the control samples.

Orientadores: Pedro Luiz Rosalen, Cínthia Pereira Machado Tabchoury / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-26T11:28:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paula-Eduardo_LailaFacinde_M.pdf: 1396217 bytes, checksum: ee32ae3fccb5fc73fe047b8152a78b6e (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Os produtos naturais, comprovadamente, têm sido uma fonte promissora para descoberta de novos compostos bioativos. Dentre eles, a própolis coletada por abelhas Apis mellifera possui atividades biológicas descritas na literatura como anticárie, antibacteriana, anti-inflamatória, entre outras. Entretanto, a maioria dos estudos sobre própolis se refere àquelas coletadas por A. mellifera e pouco se tem conhecimento de outras, como a geoprópolis, produzida por abelhas sem ferrão do gênero Melipona. Em estudos recentes, a geoprópolis apresentou promissoras atividades antimicrobiana e anti-inflamatória, porém estas pesquisas ainda não evidenciaram quais as substâncias responsáveis por tais ações biológicas, especialmente contra o biofilme oral cariogênico. Portanto, o objetivo desse trabalho foi isolar e identificar o composto ativo da geoprópolis de Melipona scutellaris com atividade contra biofilme formado por Streptococcus mutans. Este objetivo foi alcançado por meio das seguintes metodologias: 1- fracionamento bioguiado do extrato etanólico da geoprópolis (EEGP); 2- isolamento e identificação do composto ativo; 3- avaliação do potencial anticárie do composto ativo utilizando modelo in vitro de inibição de biofilme oral monoespécie. Como resultado do fracionamento bioguiado foi isolado e identificado o composto nemorosona (C33H42O4, MM= 502 g/mol), uma benzofenona prenilada. A concentração inibitória mínima da nemorosona foi de 6,25 ¿ 12,5 ?g/mL e na concentração de 100 ?g/mL foi capaz de inibir em 95% a aderência do S. mutans em biofilme formado em microplacas de fundo côncavo. Em biofilme formado em discos de hidroxiapatita, a nemorosona na concentração 250 ?g/mL (0,50 mM) reduziu 65 % do peso seco, mais de 70% dos polissacarídeos e 48% da quantidade proteica além de diminuir a viabilidade bacteriana, quando comparada com o controle negativo (veículo, p<0,05). Estes resultados não diferiram estatisticamente da clorexidina a 0,12% (1,33 mM) (p>0,05). Portanto, concluímos que a nemorosona é um composto ativo isolado e identificado da geoprópolis com atividade antibiofilme de S. mutans com capacidade de alterar a composição bioquímica da matriz do biofilme de S. mutans, o que torna este composto promissor agente químico para o controle do biofilme oral / Abstract: Natural products have been demonstrated a promising source to discover new bioactive compounds. Among then, the propolis collected by Apis mellifera bees has biological activity described in the literature as anticairies, antimicrobial, anti-inflammatory, besides other activities. However, most of the studies on propolis refer to those collected by A. mellifera and little is known about others as geopropolis, which is collected by stingless bees of the genus Melipona. In recent studies, geopropolis presented promising antimicrobial and anti-inflammatory activities, but these studies have not revealed which is (are) the substance(s) responsible(s) for such biological activities, especially against the cariogenic oral biofilms. Therefore, the objective of this study was to isolate and identify the active compound from Melipona scutellaris geopropolis, which has activity against the biofilm formation by Streptococcus mutans. This goal was achieved by the following methodologies: 1- bioassay-guided fractionation of the goeporpolis ethanolic extract (EEGP); 2- isolation and identification of the active compound; 3- anticarie potential assessment of the active compound using an in vitro model of inhibition of the oral mono-species biofilm. As result of the bioassay-guided fractionation, the poliprenil benzophenone compound named nemorosone (C33H42O4, MW=502 g/mol) was isolated and identified. The nemorosone¿s minimum inhibitory concentration (MIC) was 6.25 ¿ 12.5 ?g/mL and the concentration of 100 ?g/mL was capable to inhibit by 95% the adherence of S. mutans¿s biofilm formed in U-bottom microtiter plates. In biofilm formed in hydroxyapatite disks, the nemorosone concentration of 250 ?g/mL (0.5 mM) reduced 65% of the dry weight, more than 70% of the polysaccharides and 48% of the protein content. In addition, it reduced the bacterial viability when compared to negative control (vehicle, p<0.05). These results did not differ statistically from chlorhexidine 0.12% (1.33 mM) (p> 0.05). Therefore, the conclusion is that nemorosone is the active compound isolated and identified from geopropolis with antibiofilm activity that is able to alter the biochemical composition of the S. mutans biofilm matrix, it makes this chemical compound promising to oral biofilm control / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestra em Odontologia

Banca: Maria Aparecida Neves Jardini / Banca: Eduardo Bresciani / Banca: Antônio Wilson Sallum / Banca: Enilson Antônio Sallum / Banca: Márcio Mateus Beloti / Resumo: A periodontite agressiva (PA) tem grande impacto na qualidade de vida dos indivíduos acometidos por esta patologia. Possui início precoce, rápida e severa progressão, pobre resposta as abordagens terapêuticas e é associada a altas taxas de perda dentária. De patogênese complexa, o início e progressão da doença e a resposta ao tratamento são determinadas pela microbiota, resposta imune-inflamatória do hospedeiro e pelas diferentes abordagens terapêuticas adotadas. Contudo, nenhum desses fatores está totalmente elucidado na literatura. Dessa forma, foram compilados 9 estudos que focaram entender fatores etiológicos, terapêuticos e preventivos dessa doença. No primeiro estudo, foram avaliados 200 indivíduos brasileiros portadores de PA quanto a presença de polimorfismos genéticos dos genes rs1537415 (GLT6D1), rs6667202 (IL10) e rs1333048 (ANRIL), polimorfismos já descritos em outras populações também afetadas pela PA. Foi observado que o alelo raro C do gene da IL-10 apresentou menor frequência (23,5%) na população PA comparado com sujeitos com periodontite crônica (n=190; 30,3%) e saudáveis (n=196; 34,2%), indicando um caráter protetor desse polimorfismo para a ocorrência da PA. Contudo, abordagens mais amplas poderiam indicar novos polimorfismos relacionados a essa doença. No segundo capítulo foi realizado uma análise exômica com um protocolo de filtragem familiar, confirmado em estudo populacional, em núcleos familiares com PA. Após a análise do exoma e validação por PCR-real time, análise funcional e in silico, foi possível identificar o indel no gene GPRC6A (p.Tyr775LeufsTer776), com a PA, o qual apresentou maior frequência na população afetada, indicando um novo foco para avaliar a ocorrência da mesma. Entretanto, alterações genéticas podem afetar o funcionamento dos sistemas de proteção e homeostase, levando a ocorrência da doença. Assim, no intuito de identificar alterações... / Abstract: Aggressive periodontitis (AgP) has a great impact on the quality of life of the individuals affected by this pathology. It has early onset, rapid and severe progression, poor response to therapeutic approaches and is associated with high rates of tooth loss. AgP presents a complex pathogenesis - the onset and progression of the disease, as well as the response to treatment, are determined by the microbiota, the host's immune-inflammatory pattern and the therapeutic approaches adopted. However, none of these factors is fully elucidated in the literature. Thus, 9 studies were compiled focusing on understanding etiological, therapeutic and preventive factors of this disease. In the first study, 200 Brazilian individuals with AgP were evaluated for the presence of genetic polymorphisms of the rs1537415 (GLT6D1), rs6667202 (IL10) and rs1333048 (ANRIL). These polymorphisms have already been described in other populations also affected by AgP. It was observed that the rare C allele of the IL-10 gene presented a lower frequency (23.5%) in the AgP population compared to subjects with chronic (n=190, 30.3%) and healthy periodontitis (n=196; 34.2%), indicating a protective character of this polymorphism for the occurrence of AgP. However, high-throughput approaches could indicate new polymorphisms related to this disease. In the second chapter, exomic analysis was performed using a familiar filtering approach, confirmed in a population-based study, in familiar nuclei with AgP. After analysis of the exome and validation by real-time PCR, functional and in silico analysis, it was possible to identify the indel in the GPRC6A gene (p.Tyr775LeufsTer776) associated with AgP, presenting higher frequency in the affected population, indicating a new target to understand its occurrence. However, genetic alterations can affect the functioning of the protection systems and homeostasis, leading to the occurrence of the disease. Thus, in order to identify constitutive...

Describe el uso de colistina en pacientes críticos a través de un seguimiento intensivo con relación a los diagnósticos, los resultados de terapia, la mortalidad y la sospecha de reacciones adversas (RAM). Realiza un estudio observacional, prospectivo y longitudinal llevado a cabo en la UCI adultos del Hospital Nacional Edgardo Rebagliati Martins de marzo a octubre del 2016. El estudio incluyó a 47 pacientes críticos. Se encontró que los principales diagnósticos para el tratamiento definitivo con colistina fueron la neumonía por P. aeruginosa (25.64%), la neumonía por Acinetobacter (23.08%) y la bacteriemia (12.82%). Del mismo modo, para el tratamiento empírico fueron las sospechas de neumonía por bacterias gram negativas MDR (37.50%) y shock séptico (37.50%). Se obtuvo una respuesta favorable y no favorable desde el punto de vista microbiológico en 41.03% y 58.97% respectivamente y una tasa de mortalidad dentro de los 30 días de 51.06%. Las RAM posibles asociadas al uso de colistina analizado por el algoritmo de Karch y Lasagna modificado fueron nefrotoxicidad (21.28%), diarrea (10.64%), eosinofilia (6.38%), hipokalemia (4.26%), trombocitopenia (2.13%), hiponatremia (2.13%), hipercloremia (2.13%), hipomagnesemia (2.13%) y diarrea asociada a Clostridium difficile (2.13%). Conclusión: Colistina es usado con mayor frecuencia en la UCI para tratar neumonía y bacteriemia por P. aeruginosa y/o Acinetobacter, lo cual coincide en su mayoría con las indicaciones del petitorio farmacológico de EsSalud. Se obtuvo una baja respuesta microbiológica al tratamiento con colistina con resultados no favorables del 58.97%. La nefrotoxicidad (21.28%) continúa siendo una de las reacciones adversas más comunes, pero su frecuencia ha disminuido posiblemente a la monitorización de la función renal, ajuste de dosis oportuna y periodos cortos de tratamiento con colistina. También se encontraron con menor frecuencia problemas gastrointestinales (12.77%), eosinofilia (6.38%), alteraciones electrolíticas (6.38%) y trombocitopenia (2.13%). / Tesis

Busca conjugar NPs metálicas con un péptido antibacteriano conteniendo el motivo ATCUN, el cual es una seria de 3 aminoácidos comenzando por el amino terminal en el cual el tercer aminoácido es la histidina (Libardo, Gorbatyuk, & Angeles-Boza, 2016), como una primera aproximación al desarrollo de vectores de transporte de proteínas basados en AgNPs. Estas NPs son consideradas debido a su comprobado poder bactericida. La conjugación entra las NPs y el péptido se lleva a cabo mediante una reacción click de Huisgen catalizada por Cu(I), la cual consiste en la reacción entre el grupo N3 y el grupo alquino catalizado por Cu(I) formando el anillo triazol. En este trabajo primero se funcionaliza las NPs con una molécula espaciadora SHPEG- N3), y finalmente se hace reaccionar el péptido VIHGW-alquino-G-NH2 con las NPs funcionalizadas en presencia de Cu(I) el cual actuará como catalizador. El producto obtenido luego de esta reacción fue caracterizado por medio de técnicas espectroscópicas como XPS, FTIR, DLS y microscópicas como TEM. Estas caracterizaciones estarán complementadas por un estudio de la actividad biocida hacia E. Coli usando la técnica de conteo en placas. Mediante espectroscopia FTIR se pudo demostrar que la reacción entre el péptido y las AgNPs-S-PEG-N3 se dio mediante la reacción click porque la señal del grupo N3 presente en las AgNPs-S-PEG-N3 desaparece una vez realizada la reacción con el péptido. Usando la técnica XPS se pudo determinar que la molécula espaciadora se unió a las AgNPs mediante el grupo funcional SH porque en el espectro de las AgNPs-S-PEG-N3 se observa que aparece un a 160 eV característico de los sulfuros metálicos. Por ultimo las pruebas antibacteriales nos dan como resultado que el producto final AgNPs-S-PEG-VIH presenta una mayor actividad antibacterial contra E. Coli que sus componentes individuales. / Tesis

Uno de los desafíos en la implementación del uso de nanopartículas metálicas como vehículos de proteínas es la falta de metodologías de formación de compuestos del tipo nanopartículaproteína que permitan mantener la actividad biológica de dichas biomoléculas. En esta investigación, se presenta una metodología para la síntesis de nanopartículas de plata, las cuales se caracterizan por su facilidad de síntesis, biocompatibilidad y su naturaleza antimicrobiana, a altas concentraciones y su interacción con una proteína estándar, la albúmina de suero bovino (BSA, del inglés bovine albumin serum), y con factor de crecimiento epidermal (EGF, del inglés epidermal growth factor), la cual es una proteína de interés para la regeneración de tejido epitelial. La interacción nanopartícula-proteína ha sido caracterizada mediante espectroscopía UV-Visible, espectroscopía infrarroja por transformada de Fourier (FTIR, del inglés fouriertransform infrared spectroscopy), dispersión dinámica de luz (DLS, del inglés dynamic light scattering), potencial zeta (ZP, del inglés zeta potential) y microscopía electrónica de transmisión (TEM, del inglés transmission electron microscopy). La evaluación de la actividad antibacterial fue evaluada en cultivos de Escherichia coli. Se demostró que con un tiempo de reacción de 20 minutos y una concentración inicial de 1.0 mM de nitrato de plata, AgNPs de 33 mM con una baja distribución en longitud de onda máxima y absorbancia eran obtenidas. Además, bajo la metodología desarrollada una relación molar de 0.018 BSA:AgNPs fue encontrada óptima para una mayor interacción entre BSA nativo y las AgNPs. Por último, dicha metodología fue extrapolada para la interacción de AgNPs con 1000, 2500 y 4000 ng rh EGF, encontrando una mayor eficiencia de carga, mayor velocidad de liberación y una mayor estabilidad de la proteína usando 4000 ng rh EGF. Los ensayos antibacteriales mostraron que la actividad antibacterial se mantuvo en las AgNPs en interacción con rh EGF aunque en menor escala en comparación con las AgNPs puras. / Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (Perú). Fondo Nacional de Desarrollo Científico y Tecnológico (Fondecyt) / Tesis

Detecta la presencia de enrofloxacina en cuyes destinados al consumo humano, en la provincia de Jauja de la región de Junín del Perú. El tamaño de muestra se determinó mediante la fórmula para poblaciones infinitas con un intervalo de confianza del 95%, obteniéndose la cantidad de 200 cuyes para muestrear. Las muestras se obtuvieron de cuyes faenados en diferentes mataderos de la provincia de Jauja, que se enviaron para su procesamiento al Laboratorio de Salud Pública y Salud Ambiental de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional de San Marcos. La detección de residuos de antibióticos se realizó utilizando el test de Inhibición del Crecimiento Microbiano con muestras de hígado, riñón y músculo diafragma, obteniéndose un 0% (0/200) de muestras positivas; y también utilizando el test de Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay de muestras de hígado, obteniéndose un 26.67% (8/30) de muestras positivas en hígado de cuyes, con concentraciones que variaban desde 1.26 μg/Kg hasta 35.1 μg/Kg. Estos resultados demuestran que existe la presencia de residuos de enrofloxacina a concentraciones permitidas por las normativas en cuyes destinados al consumo humano en la provincia de Jauja. / Tesis

The translation initiation process is an important checkpoint that assures the correct protein production. Within this phase, Initiation Factor IF2 plays an important role along all early and late steps of the process. During late reactions, IF2 enhances the joining of the 50S subunit to the 30S Initiation Complex (IC) and positions initiator tRNA in the 70S IC. Concomitantly, IF2 hydrolyses a GTP molecule which led to propose that the active hydrolysis of GTP stimulates both above events. However, recent mutagenic studies of IF2 showed that inhibiting its GTP hydrolytic activity does not compromise the overall translation initiation process. Moreover, biochemical studies indicate that the dissociation of inorganic phosphate (Pi) is a late event, prior to the release of IF2. These findings indicated that it is the dissociation of Pi that weakens the interaction of IF2 with the ribosome. However, the GTP hydrolysis reaction is energetically favorable and may actively drive factor release. To elucidate which of the above postulates describe more accurately IF2 dependent reactions, here we design, produce and test a novel recombinant fluorescent phosphate binding sensor that specifically binds nearby the exit point of Pi during protein translation. This protein chimeras could evidence whether the IF2 dissociation is catalyzed by the Pi dissociation after GTP hydrolysis or by the reaction per se. Furthermore, the system provides a novel platform to study and systematically screen for new antimicrobial compounds. / Tesis

Orientador: Maria Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha / Banca: Carlos Magno Castelo Branco Fortaleza / Banca: Elisabeth Loshchagin Pizzollitto / Banca: Elisa Yoko Hirooka / Bnaca: Tereza Cristina Rocha Moreira de Oliveira / Resumo: Staphylococcus aureus juntamente com outras espécies de estafilococos coagulase-negativa são importantes patógenos responsáveis por infecções nosocomiais associadas ao uso de dispositivos implantáveis. O fator mais importante na patogênese de infecções estafilocócicas associadas a estes dispositivos é a habilidade do patógeno de formar biofilme, que confere proteção contra o sistema imunológico do hospedeiro e da ação de antimicrobianos, sendo o Polissacarídeo de Adesão Intercelular (PIA) codificado pelo operon icaADBC o principal componente do biofilme estafilocócico. Esse estudo objetivou estudar a estrutura do biofilme de diferentes espécies de Staphylococcus, avaliar a antibioticoterapia utilizada para tratamento dessas infecções em células livres e em biofilme e alternativas para prevenção da formação de biofilme. Foram estudadas 200 amostras de Staphylococcus spp. sendo 50 da espécie S. aureus e 150 do grupo dos estafilococos coagulase-negativa (ECN), incluindo 50 amostras de S. epidermidis, 20 S. haemolyticus, 20 S. warneri, 20 S. hominis, 20 S. lugdunensis e 20 amostras de S. saprophyticus isoladas de pacientes do Hospital das Clínicas (HC) da Faculdade de Medicina de Botucatu (FMB). As amostras foram submetidas à pesquisa dos genes icaADBC pela reação em cadeia da polimerase (PCR) e à expressão pela técnica de Transcriptase Reversa-PCR (RT-PCR). A produção de biofilme foi verificada através dos métodos fenotípicos de aderência ao tubo de borossilicato e na placa de poliestireno. A determinação da concentração inibitória mínima em células planctônicas e em biofilme foi testada para as drogas oxacilina, vancomicina, eritromicina, gentamicina, linezolida e sulfametoxazol-trimetropim pelo método de microdiluição em caldo. O teste do peptídeo (RIP) na prevenção da formação de biofilme foi realizado com cultura de bactérias em TSB glicose 2% com pontas de cateteres e ... / Abstract: Staphylococcus aureus, together with other coagulase-negative staphylococci (CoNS), is an important pathogen that causes nosocomial infections associated with the use of implantable devices. The most important factor in the pathogenesis of staphylococcal infections associated with these devices is the ability of the pathogen to form a biofilm, which protects bacteria against the host immune system and against the action of antimicrobial drugs. The main component of staphylococcal biofilms is polysaccharide intercellular adhesin (PIA), which is encoded by the icaADBC operon. The objectives of this study were to investigate the structure of biofilms of different Staphylococcus species, to evaluate the effect of antibiotics used to treat these infections on planktonic and biofilm cels, and to identify alternatives for the prevention of biofilm formation. A total of 200 Staphylococcus spp., including 50 S. aureus and 150 CoNS strains (50 S. epidermidis, 20 S. haemolyticus, 20 S. warneri, 20 S. hominis, 20 S. lugdunensis and 20 S. saprophyticus), isolated from patients seen at the University Hospital of the Botucatu School of Medicine (HC-FMB), were studied. The presence of the icaADBC genes was investigated by the polymerase chain reaction (PCR) and their expression was determined by reverse transcriptase-PCR (RT-PCR). Biofilm formation was evaluated using the phenotypic method of adherence to borosilicate tubes and polystyrene plates. The minimum inhibitory concentration (MIC) of oxacillin, vancomycin, erythromycin, gentamicin, linezolid and sulfamethoxazole-trimethoprim for planktonic and biofilm cells was determined by the broth microdilution method. The effect of RNA-inhibiting peptide (RIP) on the prevention of biofilm formation was tested using bacterial cultures grown in TSB-2% glucose containing catheter tips and visualization by scanning electron microscopy and on polystyrene plates. The icaA gene was detected by PCR in 97 (48.5%) ... / Doutor