Problems about greenhouse gas emissions attributed to cattle production and improvements in the productivity of these animals has been growing and becoming increasingly important. Cattle releases methane as part of their digestive process, and this represents loss of energy for the animal. The decomposition of feces releases methane and it can be recovered by digester and transformed into different types of energy. Thus, aiming to quantify the potential production of enteric methane and anaerobic fecal decomposition, as well as to evaluate ruminal and behavioral parameters of cattle fed with cottonseed and vitamin E. Six cannulated cows (864±16 kg) were distributed in a replicate 3x3 Latin square. Treatments were: 1) control diet; 2) CS: basal diet plus 30% cottonseed and 3) CSVitE: basal diet plus 30% of cottonseed plus 500 UI of vitamin E. Results were compared through orthogonal contrast and values were considered significant when P0,05. No differences were observed for dry matter intake (DMI), as well as digestibility of DM and neutral detergent fiber (NDF). Animals supplemented with cottonseed spent more time eating and ruminating and less time in idles. Reduction in the concentration and production of acetate, butyrate and the acetate: propionate ratio was observed in animals fed cottonseed compared to the control. Enteric methane mitigation was observed for the cottonseed treatments compared to the control. Changes in the substrates characteristics used to load the digesters were observed. However, no differences were verified for the total biogas production, methane yield and capacity to recover the energy of the feces in the form of methane. Inclusion of 30% cottonseed can be used as a strategy to mitigate enteric methane, without causing losses in the DMI, nutrients digestibility and anaerobic digestion of feces. In addition, it promoted favorable changes in the ingestive behavior, ruminal fermentation products, as well as in the energy partition of the gastrointestinal tract. Vitamin E when is used as antioxidant had not effect on ruminal fermentation, feeding behavior and feces anaerobic digestion, thus the inclusion is not advised due absence of positive results. / A problemática das emissões de gases de efeito estufa atribuída à produção de bovinos e melhorias na produtividade desses animais vem crescendo e se tornando cada vez mais importante. Bovinos emitem metano como parte do seu processo digestivo, e isto representa perda de energia para o animal. A decomposição das fezes gera metano, este pode ser recuperado por biodigestores e transformado em diferentes tipos de energia. Assim, objetivou-se quantificar o potencial de produção do metano entérico e da decomposição anaeróbia das fezes, bem como avaliar parâmetros ruminais e comportamentais de bovinos alimentados com caroço de algodão e vitamina E. Foram utilizadas seis vacas fistuladas não gestantes e não lactantes (876 kg±16). Os tratamentos foram: 1) Controle: dieta basal; 2) CA: dieta basal mais 30% de caroço de algodão; 3) CAVitE: dieta basal mais 30% de caroço de algodão mais 500 UI vitamina E. O delineamento experimental utilizado foi o quadrado latino. Os resultados foram comparados por contrastes ortogonais e foram considerados significantes valores de P0,05. Não foram verificadas diferenças para o consumo de matéria seca (MS), bem como digestibilidade da MS e da fibra em detergente neutro (FDN). Os animais suplementados com caroço de algodão passaram maior tempo comendo e ruminando e menor tempo em ócio. Houve redução na concentração e produção de acetato, butirato e da relação acetato:propionato dos animais que receberam caroço de algodão comparado ao controle. A inclusão do caroço de algodão provocou mitigação das emissões de metano entérico. Houve alteração nas características dos substratos utilizados para abastecer os biodigestores. No entanto, não foram verificadas diferenças para a produção total de biogás, rendimento de metano e capacidade dos biodigestores em recuperar a energia das fezes na forma de metano. A inclusão de 30% caroço de algodão pode ser utilizada como estratégia para mitigar metano entérico, sem causar perdas no consumo, digestibilidade dos alimentos e na biodigestão anaeróbia das fezes. Além disso, sua inclusão promoveu alterações favoráveis no comportamento ingestivo, nos produtos da fermentação ruminal, bem como na partição de energia do trato gastrointestinal. A vitamina E quando utilizada como antioxidante não possui efeitos sobre a fermentação ruminal, comportamento ingestivo e biodigestão anaeróbia das fezes, assim sua inclusão não é indicada devido a ausência de resultados favoráveis a sua utilização.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O resveratrol à um polifenol antioxidante natural encontrado especialmente na epicarpo da uva, em nozes e na romà o qual pode inibir a ativaÃÃo de mediadores prÃ-inflamatÃrio e citocinas na fase precoce de expressÃo do gene. Jà à bem conhecido que as lectinas sÃo proteÃnas de ligaÃÃo de aÃÃcares que atuam tanto como molÃculas prÃ- e anti-inflamatÃrias. Assim, o objetivo do presente trabalho foi o de verificar a ligaÃÃo de um composto de polifenol com uma lectina de Canavalia maritima (ConM) com base na sua capacidade para inibir processos prÃ-inflamatÃrios. Para alcanÃar este objetivo, a ConM foi purificada e cristalizada, uma soluÃÃo de 5 mM de resveratrol 5 mM foi utilizada para soaking durante 2 horas de incubaÃÃo. Os cristais obtidos pertencem ao grupo espacial monoclÃnico C2, o refinamento final resultou em um Rfactor de 16,0% e uma Rfree de 25,5%. Resveratrol se liga na rÃgida atravÃs de pontes de hidrogÃnio e interaÃÃo hidrofÃbica com aminoÃcidos que compÃem a quinta e sexta fita-β da folha-β rÃgida da ConM. A ConM complexada com o resveratrol inibiu a oxidaÃÃo do DPPH, mostrando atividade sinÃrgica entre a proteÃna e o ligante com a relaÃÃo mais eficaz de 2:3. Foi verificado ainda que o sÃtio de ligaÃÃo a carboidratos nÃo està diretamente relacionado à atividade antioxidante. à a interaÃÃo entre ConM e resveratrol, que indica o sinergismo destas duas molÃculas em agir como agentes sequestrantes de radicais livres que podem estarem relacionados a capacidade de reduÃÃo do processo inflamatÃrio atravÃs da inibiÃÃo de muitos mediadores prÃ-inflamatÃrios por lecitinas. / Resveratrol is a natural antioxidant polyphenol found especially in grape epicarp, walnuts, and pomegranates, which can inhibit the activation of proinflammatory mediators and cytokines at the early gene expression stage. It is well known that lectins are sugar-binding proteins that act as both pro- and anti-inflammatory molecules. Thus, the objective of this work was to verify the binding of a polyphenol compound with a lectin of Canavalia maritima (ConM) based on their ability to inhibit pro-inflammatory processes. To accomplish this, ConM was purified and crystallized, and resveratrol was soaked at 5 mM for 2 hours of incubation. The crystal belongs to the monoclinic space group C2, the final refinement resulted in an Rfactor of 16.0% and an Rfree of 25.5%. Resveratrol binds in the rigid β-sheet through H-bonds and hydrophobic interaction with amino acids that compose the fifth and sixth β-strands of the rigid β-sheet of ConM. The ConM and resveratrol inhibited DPPH oxidation, showing synergic activity with the most effective ratio of 2:3 and carbohydrate binding site is not directly related to antioxidant activity. It is the interaction between ConM and resveratrol that indicates the synergism of these two molecules in acting as free radicals scavengers and in reducing the inflammatory process through the inhibition of many pro-inflammatory events.

Este trabalho descreve o desenvolvimento e aplicações práticas de uma nova e simples metodologia eletroquímica para a determinação da capacidade antioxidante de moléculas modelo específicas e/ou algumas amostras complexas de alimentos normalmente consumidas no Brasil. Outros sistemas de interesse teórico ou tecnológico também foram investigados. O método se baseia no uso de uma quantidade conhecida de um íon inorgânico como oxidante e na determinação cronoamperométrica de sua concentração remanescente após reação com as espécies antioxidantes de interesse. Contudo, testes iniciais para diferentes marcas comerciais de sucos de laranjas usando Fe3+ como oxidante (ensaio FRAP modificado), só obtiveram êxito quando o antioxidante apresenta um comportamento eletroquímico totalmente irreversível como, por exemplo, o ácido ascórbico. Para superar esse problema, o ensaio foi então desenvolvido usando o Ce4+ como oxidante (ensaio CRAC) uma vez que sua redução após reação pode ser realizada em 0,8 V vs Ag/AgCl, uma região de potencial na qual não ocorre a redução das espécies formadas pela oxidação reversível ou quase reversível do antioxidante. Devido ao elevado potencial anódico requerido quando o Ce4+ é usado, foi necessário um filme de diamante dopado com boro como eletrodo de trabalho. Após uma rigorosa caracterização do sistema eletroquímico, foram realizadas determinações da capacidade antioxidante de oito compostos padrões (ácido ascórbico, ácido gálico, ácido tânico, BHA, catequina, quercetina, rutina e trolox), usando o ensaio CRAC. Os resultados mostraram uma correlação satisfatória com ensaios mais complexos reportados na literatura e foram aplicados em um conjunto de sucos de frutas industrializados, mostrando valores máximos com quase uma ordem de grandeza superior ao apresentado pelo composto de referência (trolox), com a seguinte seqüência de capacidade antioxidante: caju > goiaba > uva > manga > laranja > maracujá. Considerando a busca da indústria local de \"cachaça\" por madeiras alternativas em contrapartida aos tonéis de carvalho, o ensaio CRAC foi realizado usando quatro extratos etanólicos de madeiras brasileiras [Pequi (Caryocar brasiliense), Imbuia (Octea porosa), Cabreúva (Myrocarpus frondosus) e Cabreúva-vermelha (Myroxylon balsamum)] assim como um extrato de Carvalho (Quercus sp), para comparação. Os resultados indicaram um aumento na capacidade antioxidante na ordem apresentada acima e, apesar da melhor amostra (Cabreúva-vermelha) ter apenas 60% da capacidade antioxidante apresentada pelo carvalho, sua disponibilidade e preço despertam o interesse por pesquisas futuras. Uma avaliação comparativa dos resultados obtidos usando os ensaios CRAC e DPPH foi realizado para extratos metanólicos de cana-de-açúcar e polpa de maracujá. Essa comparação revelou uma diferença quantitativa entre os valores dos ensaios, porém, a hierarquia foi mantida para cada conjunto de resultado. Esse efeito foi atribuído às diferenças nos mecanismos dominantes para a desativação radicalar, bem como para as condições experimentais de cada ensaio. A correlação entre a estrutura e a atividade antioxidante de moléculas modelo de flavonóides sob investigação foi relatada devido à presença de certos grupos substituintes na estrutura de difenilpirano. A atividade hierárquica para tais grupos foi estabelecida como: OH(C2´C4´) > OH(C4´) ~ OH(C3´C4´) > C2=C3 + 4-oxo > OH(C3,C5) + 4-oxo > OH(C3) + 4-oxo > OH(C5) + 4-oxo > OH(C3,C5). A formação de complexos entre flavonóides e íons metálicos, tal como o Fe2+, tem um forte efeito sobre a capacidade antioxidante e o ensaio CRAC mostrou que para a morina, quercetina e fisetina, esse aumento foi de 15,3; 31,8 e 27,9%, respectivamente. Por outro lado, para a catequina e crisina, o aumento foi de apenas 1,8 e 7,8%, respectivamente. Esses aumentos foram relatados devido à presença de, pelo menos, um dos três tipos de sítios ativos na molécula polifenólica que interage com íons metálicos. Todos esses resultados confirmam que o ensaio CRAC é uma ferramenta simples e viável para a determinação da capacidade antioxidante de uma variedade de sistemas práticos e moléculas modelo. / This work describes the development and practical applications of a novel and simple electrochemical methodology for the determination of the antioxidant capacity of specific model molecules and/or some complex food samples currently consumed in Brazil. Other systems having either theoretical or technological interest were also investigated. The method is based on the use of a known amount of an inorganic ion as the oxidant and in the chronoamperometric determination of its remaining concentration after reaction with the chosen antioxidant species. However, initial tests for different commercial brands of orange juices using Fe3+ as the oxidant (modified FRAP assay) were only successful when the antioxidant has a totally irreversible electrochemical behavior as, for example, ascorbic acid. To overcome this problem, the assays were then performed using Ce4+ as the oxidant (the CRAC assay) since its reduction after reaction can be carried out at 0.8 V vs Ag/AgCl, a potential region where the reduction of species formed by the reversible or quasi-reversible oxidation of the antioxidant does not occur. Due to the high anodic potentials required when using Ce4+, it was necessary to have a boron-doped diamond film as the working electrode. After a rigorous characterization of the electrochemical systems, measurements of the antioxidant capacity of eight standard compounds (ascorbic acid, gallic acid, tannic acid, BHA, catechin, quercetin, rutin and trolox) were carried out using the CRAC assay. The results showed a satisfactory correlation with those reported in the literature using other more complex assays and these studies were then applied to a set of industrialized fruit juices showing maximum values almost one order of magnitude higher than that of the reference compound (trolox) and following the antioxidant capacity sequence: cashew>guava>grape>mango>orange>passion fruit. Considering that the local \"cachaça\" industry is looking for alternative woods to the use of oak barrels, CRAC assays were carried out using four ethanol extracts of Brazilian woods [Pequi (Caryocar brasiliense), Imbuia (Octea porosa), Cabreúva (Myrocarpus frondosus) e Cabreúva-vermelha (Myroxylon balsamum)] as well as an Oak (Quercus sp) extract, for comparison. The results indicate an increasing antioxidant capacity in the order presented above and, although the best sample (Cabreúva-vermelha) has only 60% of the capacity shown by oak, its local availability and price makes it interesting for further research. A comparative evaluation of the results obtained using the CRAC and the DPPH assays was carried out for methanol extracts of sugar cane juice and passion fruit pulp. That comparison revealed a quantitative difference between the assay values but the hierarchy was maintained for each set of results. Such effect was attributed to differences in the prevailing mechanism for radical deactivation, as well as, the experimental conditions used for each assay. The correlation between structure and antioxidant activity of model flavonoid molecules under investigation was related to the presence of certain groups in the diphenilpyrene structure. The activity hierarchy for them was established as: OH(C2´C4´) > OH(C4´) ~ OH(C3´C4´) > C2=C3 + 4-oxo > OH(C3,C5) + 4-oxo > OH(C3) + 4-oxo > OH(C5) + 4-oxo > OH(C3,C5). The complex formation between flavonoids and metal ions, such as Fe2+, has a strong effect on the antioxidant capacity and CRAC assay showed that for morin, quercetin and fisetin the increase was 15.3, 31.8 and 27.9%, respectively. On the other hand, for catechin and chrysin the increase was only 1.8 and 7.8%, respectively. These increases were related to the presence of, at least, one of three types of active sites in the polyphenolic molecule that can interact with metal ions. All these findings confirm that the CRAC assay is simple and convenient tool for the determination of the antioxidant capacity of a variety of practical systems and model molecules.

Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-06-15T20:20:22Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Aline Oliveira Barros.pdf: 151056 bytes, checksum: 60016ead165c5cb85f0e67185b407127 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-06-16T14:44:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Aline Oliveira Barros.pdf: 151056 bytes, checksum: 60016ead165c5cb85f0e67185b407127 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-06-16T14:48:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Aline Oliveira Barros.pdf: 151056 bytes, checksum: 60016ead165c5cb85f0e67185b407127 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-16T14:48:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Aline Oliveira Barros.pdf: 151056 bytes, checksum: 60016ead165c5cb85f0e67185b407127 (MD5) Previous issue date: 2012-02-24 / Não Informada / The skin is the largest organ in the human body and is intended to serve as a barrier against external agents. The loss of integrity of this tissue can cause injury or illness that can lead to death. The aging of the skin, which is also a natural process of the body, has its root causes and can be accelerated due to extrinsic causes, such as exposure to solar radiation, which causes physical changes to the skin, due to changes that occur in the connective tissue through the formation of lipid peroxides, contents of cells and enzymes and reactive oxygen species. Due to the important role in tissue remodeling processes in health and disease involving the skin, some studies have shown investigations with plant extracts as inhibitors of enzymes and antioxidants. The Libidibia ferrea Mart. is a tree that belongs to the family Leguminosae-Caesalpininoideae which grows in Brazil widely distributed in North and Northeast, especially in Pernambuco and Ceará. The species is popularly known as “jucá”, “pau-ferro”, “ibirá-obi”, “imirá-itá”, “muirá-obi”, “muiré-itá”. The phytochemical investigation of the hydroalcoholic extract of L. ferrea revealed the presence of flavonoids, saponins, tannins, curmarinas, steroids and other phenolic compounds, classes of substances already mentioned in the literature as potential antioxidants and enzyme inhibitors. We used extracts from the bark and pods of L. ferrea in different concentrations to perform the tests anti-elastase, anti-collagenase, anti-hyaluronidase test and in vitro antioxidant and in NIH3T3 murine fibroblast cells. The anti-elastase test, the skin showed inhibition constant average of 42% at concentrations of 63 μg / mL to 1000 μg / mL. In assessing the inhibitory activity of collagenase, it was found that the bark extract of L. ferrea showed no significant activity at the concentrations tested (25, 50 and 100 μg / mL), and inhibition of 15.2%. At the highest concentration tested (100 μg / mL) extract produced from the pod L. ferrea showed greater inhibition of enzyme activity compared with the extract made from the bark. Although the extracts of bark and pods of L. ferrea have been shown to be good scavengers of DPPH radicals in vitro test, the test cell with fibroblasts NIT3T3, extracts, in concentrations non-toxic, have not been able to capture radicals significantly. These results demonstrate that extracts of L. ferrea can be considered promising in studies on aging and skin diseases. / A pele é o maior órgão do organismo humano e tem finalidade de servir como barreira contra agentes externos. A perda da integridade deste tecido pode causar lesões ou doenças que podem levar a morte. O envelhecimento da pele, que também é um processo natural do organismo, tem suas causas intrínsecas e pode ser acelerado devido a causas extrínsecas, como a exposição à radiação solar, que provoca mudanças físicas para a pele, devido a alterações que ocorrem no tecido conjuntivo através da formação de peróxidos lipídicos, conteúdo das células e enzimas e espécies reativas de oxigênio. Devido ao papel importante na remodelação tecidual nos processos que envolvem saúde e doença da pele, alguns estudos tem mostrado investigações com extratos de plantas como inibidores de enzimas e antioxidantes. A Libidibia ferrea Mart. é uma árvore que pertence à família Leguminosae-Caesalpininoideae e que cresce em todo o Brasil largamente distribuída nas regiões Norte e Nordeste, principalmente em Pernambuco e no Ceará. A espécie é conhecida popularmente como jucá, pau-ferro, ibirá-obi, imirá-itá, muirá-obi, muiré-itáe. A investigação fitoquímica do extrato hidroalcoólico das cascas e folhas de L. ferrea revelou a presença de flavonóides, saponinas, taninos, curmarinas, esteróides e outros compostos fenólicos, classes de substâncias já citadas na literatura como potenciais antioxidantes e inibidores de enzimas. Foram utilizados extratos da casca e vagem de L. ferrea em diferentes concentrações para realizar os testes anti-elastase, anti-colagenase, anti-hialuronidase e teste antioxidante in vitro e em células de fibroblastos murinos NIH3T3. O teste anti-elastase, a casca mostrou inibição média constante de 42% nas concentrações de 63 μg/mL até 1000 μg/mL. Na avaliação da atividade inibitória da colagenase, verificou-se que o extrato da casca de L. ferrea não apresentou atividade importante nas concentrações testadas (25, 50 e 100 μg/mL), sendo a inibição de 15,2%. Na maior concentração testada (100 μg/mL). o extrato produzido a partir da vagem de L. ferrea apresentou maior inibição da atividade enzimática quando comparado com o extrato feito a partir da casca. Apesar dos extratos da casca e vagem de L. ferrea terem se mostrado bons varredores de radicais de DPPH no teste in vitro, no teste celular com fibroblastos NIT3T3, os extratos, em concentrações não tóxicas, não foram capazes de captar radicais de maneira significativa. Estes resultados demonstram que os extratos de L. ferrea podem ser considerados promissores nos estudos referentes a antienvelhecimento e doenças da pele.

O uso de antioxidantes sintéticos para promover a conservação de alimentos tem sido alvo de questionamentos devido a possíveis efeitos tóxicos que estes podem causar. Desse modo, a utilização de substâncias naturais com poder antioxidante mostra-se uma alternativa bastante interessante. Além de conter compostos antioxidantes, muitas plantas também apresentam atividade antimicrobiana, o que tem sido alvo de interesse nas últimas décadas. A cor da carne bovina in natura é um de seus principais atributos, pois a maioria dos consumidores associa esta característica à qualidade do produto no ato da compra. A mioglobina, pigmento responsável pela cor vermelha da carne bovina, uma vez oxidada adquire coloração amarronzada e causa a rejeição da carne. Sua oxidação está ligada também ao processo de oxidação de lipídeos, que igualmente compromete a estabilidade deste produto durante a refrigeração. Desse modo, esta tese teve como objetivo caracterizar extratos aquosos de folhas de pitanga (Eugenia uniflora L.) e alecrim (Rosmarinus officinalis) e de sementes de guaraná (Paullinia cupana Kunth), e avaliar sua aplicação na estabilidade da carne bovina moída refrigerada. Foram realizados 3 experimentos: 1) Caracterização dos materiais vegetais (composição centesimal, teor de clorofila e carotenoides totais) e extratos aquosos (cor, pH, teor de sólidos solúveis, atividade antioxidante pelos métodos do captura do radical DPPH• e o do radical ABTS•+ e capacidade redutora); 2) Estudo da estabilidade da carne bovina moída com extratos vegetais por meio de análises de cor, pH, atividade de água, oxidação lipídica (TBARS), oxidação da mioglobina e análises microbiológicas; e 3) Análise sensorial de cor e odor da carne bovina moída com extratos. Conclui-se que: os extratos vegetais de plantas nativas brasileiras, guaraná e pitanga, apresentaram melhor capacidade antioxidante; os extratos de pitanga promoveram a inibição do crescimento das bactérias testadas; o extrato de pitanga promoveu melhor estabilidade na oxidação de lipídios, além de ter apresentado ação antimicrobiana para bactérias psicrotróficas na carne; a adição de extratos aquosos de pitanga e alecrim à carne bovina moída in natura refrigerada não interferiu na preferência dos atributos de cor e odor, e ainda, que o atributo odor parece estar associado a preferências pessoais. / The use of synthetic antioxidants to promote conservation of foods has been questioned due to possible toxic effects that such substances may cause, thereby the use of natural antioxidant sources seems to be a good alternative. Besides containing antioxidant compounds, many plants also have antimicrobial activity, which has been the subject of interest in recent decades. Color is one of the main attributes of fresh beef, since most consumers associate this characteristic to the quality of the product at the moment of purchase. Myoglobin, the pigment responsible for the red color of beef, once oxidized gets brownish and cause rejection of the product. This protein oxidation is also linked to the lipid oxidation process, which also impairs the stability of the product during cold storage. Thus, this thesis aimed at characterizing aqueous extracts Pitanga (Eugenia uniflora L.) and Rosemary (Rosmarinus officinalis) leaves, and Guarana (Paullinia cupana Kunth) seeds, evaluating their use on the stability of ground refrigerated beef. The experiments were carried out in three steps, namely: 1) Characterization of plant materials (chemical composition, chlorophyll content and carotenoids) and aqueous extracts (color, pH, soluble solids content, antioxidant activity by the methods of radical DPPH• and ABTS•+ scavenging and reducing capacity); 2) Study of the stability of ground beef with plant extracts through color analysis, pH, water activity, lipid oxidation (TBARS), myoglobin oxidation and microbiological analysis; and 3) Sensory analysis of color and odor of ground beef with extracts. As conclusion, the plant extracts of Brazilian native plants, Guarana and Pitanga, showed better antioxidant capacity; Pitanga extracts promoted growth inhibition of the tested bacteria; Pitanga extract provided better stability in the oxidation of lipids, and has presented antimicrobial activity for psychotropic bacteria in the ground beef; the addition of aqueous extracts of Pitanga and Rosemary to fresh ground beef during cold storage for 6 days did not affect the preference of color and odor attributes; odor attribute of beef seems to be associated with personal preferences.

Submitted by Sandro Camargo (sandro.camargo@unipampa.edu.br) on 2015-05-08T02:26:40Z No. of bitstreams: 1 127110042.pdf: 1189553 bytes, checksum: ea7e59cc1e2251e7776d2f1d3a611d89 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-08T02:26:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 127110042.pdf: 1189553 bytes, checksum: ea7e59cc1e2251e7776d2f1d3a611d89 (MD5) Previous issue date: 2014-08-07 / As pesquisas no desenvolvimento de fármacos a partir de plantas têm apresentado resultados promissores para as mais diversas doenças. Ceiba speciosa A. St. Hill (paineira) é uma espécie arbórea tropical pertencente à família Malvaceae, que no Rio Grande do Sul ocorre principalmente na região de floresta do Alto Uruguai. Existem relatos populares de utilização do chá das cascas desta espécie na região noroeste do Rio Grande do Sul – Brasil, para a redução dos níveis sanguíneos de colesterol. Contudo, ainda não foram encontrados dados científicos sobre a confirmação da eficácia e segurança de seus efeitos, tampouco dados fitoquímicos acerca da espécie. A literatura apresenta estudos sobre outras espécies do gênero Ceiba, sendo que Ceiba pentandra, empregada como agente hipoglicêmico, representa a espécie mais investigada. Dessa forma, este trabalho teve por objetivo realizar uma avaliação preliminar do potencial antioxidante e da toxicidade de Ceiba speciosa (A. St.-Hill). Para tanto, o extrato aquoso de C. speciosa foi preparado conforme o método de uso popular e seco por liofilização (denominado EALCs), para utilização na realização dos testes in vitro. O precipitado obtido a partir do extrato etanólico bruto (Cs1) também foi utilizado nos testes. Dando sequência às análises, foram realizadas: a análise fitoquímica da espécie; determinação do dano oxidativo e do potencial antioxidante e avaliação da genotoxicidade. Os resultados obtidos neste estudo foram analisados através do software estatístico Graph Pad Prism 5.0. O extrato aquoso de Ceiba speciosa e de Cs1 demonstraram potencial antioxidante in vitro frente a lipídeos e proteínas nas concentrações de 50 e 10 μg/mL. Nestas concentrações ainda foi observada uma atividade superior a 50% na avaliação da captação do radical 2,2-difenil-1- pricril-hidrazil (DPPH). Além disso, concentrações de 10, 5 e 2 μg/mL não apresentaram toxicidade nos parâmetros avaliados, sugerindo a relativa segurança na sua utilização popular. Desta forma, é possível indicar que a dose de 10 μg/mL é a dose que teve melhores resultados de forma geral, uma vez que não apresentou toxicidade e demonstrou potencial antioxidante. Por se tratar de uma planta de ampla utilização no noroeste do estado do Rio Grande do Sul, o presente estudo representa a primeira avaliação a respeito da caracterização da espécie, e da segurança de sua utilização, uma vez que as doses que não apresentaram toxicidade estão dentro do parâmetro de ação biológica, em humanos. / The research in developing drugs from plants have shown promising results for many different diseases. Ceiba speciosa (A. St. Hill) is a tropical tree species of the Malvaceae family, which in Rio Grande do Sul occurs mainly in the region of the Upper Uruguay Forest. There are reports of popular use of the bark tea of this species in the Northwestern region of Rio Grande do Sul - Brazil, to reduce blood cholesterol levels. However, both no scientific data to confirm the efficacy and safety of its effects found, or phytochemicals data about the species yet. The literature presents studies on others species of the genus Ceiba; and Ceiba pentandra, employed as a hypoglycemic agent, is the most investigated species. Thus, this study aimed to conduct a preliminary assessment on antioxidant potential and toxicity of Ceiba speciosa. Thus, Ceiba speciosa aqueous extract was prepared according to popular method, and concentrated by freeze-drying use (called EALCs), for use in testing in vitro. The precipitate obtained from crude ethanol extract (Cs1) was also used in these tests. Continuing the analyzis were performed: a phytochemical analysis of the species, determination of oxidative damage and antioxidant potential, and assessment of genotoxicity. The results obtained in this study were analyzed using the statistical software Graph Pad Prism 5.0. The aqueous extract of Ceiba speciosa and Cs1 demonstrated in vitro antioxidant potential against lipid and protein concentrations of 50 and 10 μg/mL. At these concentrations a higher activity and 50% was observed in the evaluation of the capture of the radical 2,2-diphenyl-1-pricril- hydrazyl (DPPH). Furthermore, concentrations of 10, 5 and 2 μg/mL showed no toxicity in the evaluated parameters, suggesting the relative safety of their popular use. Thus, it is possible to indicate that dose of 10 μg/ml is which had better results overall, since it does not present toxicity, and showed potential antioxidant. Because it is a plant of wide use in the Northwest of the state of Rio Grande do Sul, the present study is the first evaluation regarding the characterization of the species and the safety of their use, since the doses showed no toxicity, being within parameter of biological action in humans.

Cumarinas são metabólitos secundários de plantas encontrados majoritariamente nas espécies das famílias Asteraceae, Rutaceae e Umbeliferae. Quimicamente, são compostos fenólicos, formados pela fusão de um benzeno e de um anel α-pirona, chamados de benzopironas. Elas apresentam diversas propriedades farmacológicas, associadas com baixa toxicidade. Nosso grupo de pesquisa sintetiza cumarinas pela reação de Pechmann, que ocorre através da condensação de um fenol com um β-cetoéster, na presença de um ácido de Bronsted ou Lewis. Um dos trabalhos mais recentes foi a síntese de 6-metil-4-clorometilcumarinas com um IC50 menor do que 1,6 μM para atividade antitripanocida. Em outro trabalho, um grupo de compostos de híbridos cumarina-triazol foi sintetizado e apresentou potencial atividade como agente antitumoral. Baseado nesses trabalhos, foi planejado a síntese de análogos da 6-metil-4-clorometilcumarina via condensação de Pechmann, com diferentes substituintes na posição 6, obtidos através das reações de click chemistry, no intuito de aumentar a atividade antioxidante desses compostos. Assim, para obter esses compostos, foi realizada uma condensação de Pechmann com hidroquinona e 4-cloroacetoacetato de etila. Após, uma eterificação de Williamson com brometo de propargila foi feita. Finalmente, a reação de click chemistry foi realizada sob irradiação de micro-ondas com diversas azidas previamente sintetizadas no laboratório, conduzindo à obtenção de diversos análogos da 6-metil-clorometilcumarina que foram avaliados quanto a viabilidade celular através ensaio do MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio). Também foi testada a sua capacidade antioxidante pelo método do DCFH-DA (diacetato de 2’,7’ –diidroclorofluoresceína). Dessa maneira, sob as condições reacionais utilizadas neste trabalho, foi possível sintetizar 12 compostos inéditos com rendimentos entre 9 e 61%. Os ensaios biológicos preliminares indicaram que os compostos sintetizados apresentam potencial atividade antioxidante e algumas moléculas tiveram potencialidade como agente citotóxico. / Coumarins are secondary plant metabolites typically found in species of the Asteraceae, Rutaceae and Umbeliferae families that demonstrate diverse pharmacological properties associated with low toxicity to humans. Chemically, they are phenolic compounds characterized by the fusion of benzene with an α-pyrone ring, yielding the benzopyrone nucleus. Our research group usually synthesizes coumarins by the Pechmann reaction, through the condensation of phenols with β-ketoesters catalyzed by Bronsted or Lewis acids. One of the most recent works performed at our laboratory describes the synthesis of 6-methyl-4-chloromethylcoumarins with an IC50 of 1.6 μM concerning the anti-trypanocidal activity. Another work described the syntheses of coumarin-triazole hybrids with potential activity as anticancer agents. Based on the previous works, it was designed the synthesis of 4-chloromethylcoumarins via Pechmann condensation with several substituents at the position 6 of the coumarin ring through click chemistry reactions to improve their antioxidant activities. The synthesis of the coumarins started with Pechmann condensation using hydroquinone and ethyl 4-chloroaceacetate followed by functionalization of the phenolic hydroxyl with propargyl bromide via Williamsom ether synthesis. Subsequently, the click chemistry reactions were performed under microwave irradiation using different organic azides previously synthesized at our laboratory, yielding several 6-substituted-4-chloromethylcoumarin analogues which were evaluated for cell viability through MTT 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay. Their antioxidant capacity was also tested by the DCFH-DA (2’,7’–diihydrochlorofluorescin diacetate) method. Therefore, under the reaction conditions used in this study, it was possible to synthesize 12 novel compounds with yields between 9 and 61%. Preliminary biological assays indicated that the compounds synthesized have potential antioxidant activity and some molecules had potential as an antitumor agent.

A erosão dentária é um problema de saúde bucal e seu processo ocorre em uma condição multifatorial. Dentre seus principais fatores, a saliva desempenha importantes funções protetoras contra o desenvolvimento deste problema que afeta principalmente as crianças e jovens. O objetivo do presente estudo foi avaliar o sistema antioxidante e o estresse oxidativo da saliva de crianças de 4 a 6 anos de idade que possuíam erosão dentária comparando com crianças que não apresentavam esse problema de saúde bucal. Um único examinador treinado e calibrado para o diagnóstico de erosão dentária segundo o índice de BEWE (Basic Erosive Wear Examination), selecionou 40 crianças de 4 a 6 anos de idade que freqüentavam a Clinica de Prevenção de Odontopediatria da Universidade de São Paulo, formando 2 grupos, de crianças com erosão (n=22) e crianças sem erosão (n=18). A quantidade do biofilme dental foi obtida utilizando o índice de higiene oral simplificado (IHO-S) e foi feita a coleta de saliva não estimulada para as análises bioquímicas. O fluxo salivar, a capacidade tampão da saliva, o pH salivar e a proteína total da saliva foram avaliados. Também foram determinadas as atividades das enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT), o ácido úrico, o valor do malodialdeído (MDA) para determinação do estresse oxidativo e o total antioxidante (TAS). A proteína total foi menor no grupo de crianças com erosão dentária (p=0,03) e a quantidade de biofilme também foi menor nas crianças com erosão dentária média (desvio padrão) de 0,76 (0,25) comparadas com as crianças sem erosão dentária 1,18 (0,28). Não houve diferença estatística no sistema antioxidante e no estresse oxidativo da saliva de crianças com erosão dentária. A ação do sistema antioxidante e do estresse oxidativo na saliva, não influenciou na erosão dentária, quando ainda se encontrava em estágios mais iniciais deste problema de saúde bucal. / Dental erosion is a problem of oral health and its process occurs in multifactorial conditions. Among its principal factors, saliva plays an important protection role against the development of this problem, which affects children and youngsters mostly. The goal of this study was assessing the antioxidant system and oxidative stress in the saliva of children between the age of four and six who had dental erosion, comparing it to children who did not present this problem of oral health. One single examiner who was trained and prepared for diagnosing dental erosion according to the BEWE (Basic Erosive Wear Examination) index has selected forty children between the age of four and six who went to the Clinic of Prevention of Pediatric Dentistry of the University of São Paulo. Two groups were formed, one of children with dental erosion (n=22), and another with no dental erosion (n=18). The quantity of dental biofilm was verified using the simplified index of oral hygiene (OHI-S) and unstimulated saliva was collected for biochemical analyses. The salivary flow, the buffering capacity of saliva, salivary pH and the total amount protein in it were assessed. The activity of superoxide dismutase and catalase enzymes was also identified, and so were the uric acid and the amount of malodialdehyde (MDA)for determining oxidative stress and total antioxidant status(TAS). There was less total protein in the group of children with dental erosion (p=0,03) and the quantity of biofilm was also smaller in children with dental erosion (standard deviation) of an average of 0,76 (0,25), comparing with children with no dental erosion 1,18 (0,28). There was no statistic difference as far as the antioxidant system and oxidative stress are concerned in the saliva of children with dental erosion. The activity of the antioxidant system and oxidative stress in saliva have not influenced the dental erosion process while it was still in its early stages.

A erosão dentária é um problema de saúde bucal e seu processo ocorre em uma condição multifatorial. Dentre seus principais fatores, a saliva desempenha importantes funções protetoras contra o desenvolvimento deste problema que afeta principalmente as crianças e jovens. O objetivo do presente estudo foi avaliar o sistema antioxidante e o estresse oxidativo da saliva de crianças de 4 a 6 anos de idade que possuíam erosão dentária comparando com crianças que não apresentavam esse problema de saúde bucal. Um único examinador treinado e calibrado para o diagnóstico de erosão dentária segundo o índice de BEWE (Basic Erosive Wear Examination), selecionou 40 crianças de 4 a 6 anos de idade que freqüentavam a Clinica de Prevenção de Odontopediatria da Universidade de São Paulo, formando 2 grupos, de crianças com erosão (n=22) e crianças sem erosão (n=18). A quantidade do biofilme dental foi obtida utilizando o índice de higiene oral simplificado (IHO-S) e foi feita a coleta de saliva não estimulada para as análises bioquímicas. O fluxo salivar, a capacidade tampão da saliva, o pH salivar e a proteína total da saliva foram avaliados. Também foram determinadas as atividades das enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT), o ácido úrico, o valor do malodialdeído (MDA) para determinação do estresse oxidativo e o total antioxidante (TAS). A proteína total foi menor no grupo de crianças com erosão dentária (p=0,03) e a quantidade de biofilme também foi menor nas crianças com erosão dentária média (desvio padrão) de 0,76 (0,25) comparadas com as crianças sem erosão dentária 1,18 (0,28). Não houve diferença estatística no sistema antioxidante e no estresse oxidativo da saliva de crianças com erosão dentária. A ação do sistema antioxidante e do estresse oxidativo na saliva, não influenciou na erosão dentária, quando ainda se encontrava em estágios mais iniciais deste problema de saúde bucal. / Dental erosion is a problem of oral health and its process occurs in multifactorial conditions. Among its principal factors, saliva plays an important protection role against the development of this problem, which affects children and youngsters mostly. The goal of this study was assessing the antioxidant system and oxidative stress in the saliva of children between the age of four and six who had dental erosion, comparing it to children who did not present this problem of oral health. One single examiner who was trained and prepared for diagnosing dental erosion according to the BEWE (Basic Erosive Wear Examination) index has selected forty children between the age of four and six who went to the Clinic of Prevention of Pediatric Dentistry of the University of São Paulo. Two groups were formed, one of children with dental erosion (n=22), and another with no dental erosion (n=18). The quantity of dental biofilm was verified using the simplified index of oral hygiene (OHI-S) and unstimulated saliva was collected for biochemical analyses. The salivary flow, the buffering capacity of saliva, salivary pH and the total amount protein in it were assessed. The activity of superoxide dismutase and catalase enzymes was also identified, and so were the uric acid and the amount of malodialdehyde (MDA)for determining oxidative stress and total antioxidant status(TAS). There was less total protein in the group of children with dental erosion (p=0,03) and the quantity of biofilm was also smaller in children with dental erosion (standard deviation) of an average of 0,76 (0,25), comparing with children with no dental erosion 1,18 (0,28). There was no statistic difference as far as the antioxidant system and oxidative stress are concerned in the saliva of children with dental erosion. The activity of the antioxidant system and oxidative stress in saliva have not influenced the dental erosion process while it was still in its early stages.

Própolis é um material resinoso produzido por Apis mellifera constituído de exsudatos coletados de plantas e substâncias produzidas pelas abelhas, além de pequenas quantidades de aminoácidos, açúcares, pólen, etc. Na colméia, esse material é utilizado para diversos fins, como vedar aberturas no ninho e prevenir a decomposição de invasores mortos. Sua composição variada e rica em compostos biologicamente ativos tem sido amplamente reportada em ensaios de atividades antibacteriana, antifúngica, antiinflamatória, antitumoral, antioxidante e antiviral. Por isso, existe um grande interesse no estudo da composição química da própolis e das atividades biológicas de seus constituintes. De uma amostra de própolis vermelha, oriunda da região de Maceió (AL), obteve-se uma série de extratos de polaridade crescente: n-hexano, clorofórmio, acetato de etila e metanol. Com extrato metanólico foram realizados ensaios para determinação dos teores de fenóis e flavonóides, ensaios de atividade antioxidante, além de ensaios antimicrobianos contra bactérias e o fungo Candida albicans. Foi determinado o teor de ceras a partir de 3 g de própolis bruta, por extração com clorofórmio, evaporação do solvente, tratamento com metanol quente e precipitação após resfriamento. O teor de ceras obtido foi de 6,8%. Os fenóis totais foram determinados pelo método de Folin-Ciocaulteau, usando-se soluções de ácido gálico como referência. Para a determinação dos flavonóides, realizou-se a reação com cloreto de alumínio e soluções de quercetina como referência, fazendo-se leituras em 420 nm. Foram determinados 21,9% de fenóis totais e 8,4% de flavonóides. A atividade antioxidante foi avaliada segundo dois métodos, o de redução do radical estável DPPH e o de descoloração do sistema -caroteno/ácido linoléico, usando-se a rutina como referência em ambos os métodos. Extratos metanólicos da amostra em concentrações de 8, 12,5 e 25 g/mL reduziram o DPPH em 30,6%, 32,7% e 39,1% respectivamente, enquanto a solução de rutina nas mesmas concentrações reduziu 60,7% 64,3%, 100% e respectivamente. Com o sistema -caroteno/ácido linoléico foram utilizadas concentrações de 2, 1,5 e 1 mg/mL tanto de amostra como de rutina. Os coeficientes de atividade antioxidante (CAO) das soluções da amostra nas concentrações 1, 1,5 e 2 mg/mL foram 672,2, 698,7 e 739,7, enquanto os valores de CAO para as soluções de rutina nas mesmas concentrações foram 787,2, 814,4 e 739,7. A proximidade dos resultados entre amostra e referência indicam a presença de substâncias altamente antioxidantes na própolis vermelha, em proporções elevadas. A atividade antimicrobiana foi avaliada pelo método de macrodiluição em caldo, seguida de crescimento em placa, usando cepas de Bacillus subtillis, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonela Typhimurium e Candida albicans. Observou-se inibição do crescimento de todos os microrganismos e atividade microbicida contra B. subtillis, P. aeruginosa, S. Typhimurium e C. albicans. / Propolis is a resinous material produced by Apis mellifera, made up of exsudates from plants collected by the bees and beeswax, in addition to small quantities of aminoacids, sugars, pollen, etc. Propolis is used in the hive for several purposes, such as to seal openings and prevent decomposition of the bodies of invading animals. Its composition is varied and rich in biologically active compounds. Many reports have been published about activities such as antibacterial, antifungal, antiviral, anti-inflammatory, antitumoral and antioxidant. There is, therefore, an increasing interest for studies about chemical composition and biological activity of propolis and its constituents. Extracts of increasing polarity (n-hexane, chloroform, ethyl acetate and methanol) were obtained from a sample of red propolis from Maceió (state of Alagoas, northeast Brazil). Assays for determination of contents of phenolics and flavonoids and activities against bacteria and Candida albicans were carried out with the methanol extract. Waxes content was determined with 3 g of the sample by extraction with chloroform, evaporation of the solvent, treatment with hot methanol and precipitation upon cooling. The content obtained was 6.8%. The content of phenolic compounds was determined by the Folin-Ciocalteau method, using solutions of gallic acid as reference. The flavonoid content was determined by complexation with aluminum chloride and reading the absorbances at 420 nm, using quercetin as reference. The content of phenolic compounds was 21.9% and that of flavonoids 8.4%. The antioxidant activity was evaluated by the methods of reduction of the stable free radical DPPH and discoloration of the system -carotene/linoleic acid, using rutin as reference in both methods. The percent of DPPH reduction of methanolic extracts at concentrations 8, 12.5 and 25 g/mL were, respectively, 30.6%, 32.7% and 39.1%, and the values corresponding to rutin at the same concentrations were 60.7%, 64.3% and 100%. With regard to the system -carotene/linoleic acid, solutions at concentrations 2, 1.5 and 1 mg/mL of the methanolic extract gave coefficients of antioxidant activity (CAO) of 672.2, 298.7 and 739.7, respectively, while solutions of rutin at the same concentrations gave CAO of 787.2, 814.4 and 739.7. The similarity of results comparing propolis extract and rutin indicate that the analyzed propolis sample contain high contents of substances with high antioxidant activity. The antimicrobial activity was evaluated by the method of macrodilution in broth, followed by plate growth, using lineages of Bacillus subtillis, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonela Typhimurium and Candida albicans. The growth of all microorganisms was inhibited, while microbicidal activity was observed against B. subtillis, P. aeruginosa, S. Typhimurium and C. albicans.