The genus Arnica (Asteraceae) was investigated for phylogenetic relationships and sesquiterpene lactone (STL) content with the aims to trace the evolutionary history of the genus and to investigate possible congruencies between DNA sequence data, secondary chemistry, and biological activity. Complex evolutionary patterns in Arnica are evident from phylogenetic analyses of chloroplast regions (the rpl16 and rps16 introns and the psbA–trnH, ycf4–cemA, and trnT–L spacers), nuclear ribosomal regions (the internal and external transcribed spacers) and the nuclear low-copy DNA region coding for the second largest subunit of RNA polymerase II (RPB2) between exons 17 and 23. Polymorphism was detected in nuclear ribosomal and low-copy regions, likely caused by polyploidy and agamospermy. Lineage sorting and/or hybridization is a possible explanation for incongruencies between topologies of the different DNA regions. None of the five subgenera in Arnica constitute a monophyletic group according to any of our analyses. Sesquiterpene lactone profiles were compared to nuclear ribosomal DNA data using phylogenetic inference and principal component analysis for 33 accessions of 16 species. Clusters supported by both STL chemistry and ribosomal DNA sequence data consist of multiple accessions of the same species (e.g. A montana and A. longifolia), indicating that these species are well defined both genetically and chemically, based on our sampling. Support for subspecies classification of A. chamissonis and A. parryi was found in chemical data. For the first time STLs are reported from subtribe Madiinae, sister to Arniciinae. Anti-inflammatory properties, as measured by inhibition of human neutrophil elastase release from neutrophils and inhibition of the binding of transcription factor NF-κB to DNA, were investigated for extracts of 12 Arnica species. Arnica montana, A. chamissonis and A. longifolia accessions show high inhibitory effects in both bioassays. Generally, species with a more diverse STL chemistry also possess the strongest inhibitory activity in the bioassays.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-08-31Bitstream added on 2014-06-13T18:54:58Z : No. of bitstreams: 1 isobe_mtc_me_botfca.pdf: 987112 bytes, checksum: 67b1de5e7f11df70311b90461e76ad6f (MD5) / A espécie Lychnophora pinaster, espécie microendemica do Cerrado brasileiro, encontra-se na categoria vulnerável da lista vermelha das espécies ameaçadas de extinção da flora de Minas Gerais. Amplamente utilizada na medicina popular, esta espécie sofre o impacto do constante extrativismo desordenado e a degradação do seu ambiente natural. O objetivo deste tabalho foi avaliar a influência de duas épocas de colheita (verão e inverno) no rendimento e na composição química dos óleos essenciais de populações nativas de Lychnophora pinaster Mart e caracterizar morfologicamente as folhas e os tricomas glandulares, gerando informações relevantes para potencial uso da espécie. Foram amostradas três populações nativas de L. pinaster, oriundas dos municípios de Carrancas, Lavras e Itumirim no Estado de Minas Gerais. O óleo essencial das folhas de cada indivíduo foi extraído por hidrodestilação e analisados em cromatógrafo a gás acoplado a espectrômetro de massas (CG-EM, Shimadzu, QP-5000). Para a caracterização da anatomia foliar foram selecionadas folhas jovens e adultas de um indivíduo proveniente do banco de germoplasma localizado em Campinas-SP. Foram analisadas lâminas permanentes e semi-permanentes e realizados testes histoquímicos para identificar e localizar as principais classes químicas dos metabólitos presentes nas folhas. Todo o laminário obtido foi analisado em microscópio Olympus BX41 equipado com câmera digital Olympus C7070. As análises da morfologia do indumento foliar foram... / Lychnophora pinaster Mart is one of the microendemical species of the Brazilian Cerrado and it is in the vulnerable category of the Red List of endangered species of the Minas Gerais flora. Widely used in folk medicine, this species suffers the impact of constant non-organized extractivism and degradation of its natural environment. The objective of this research was to evaluate the influence of two harvest seasons (summer and winter) on the yield and chemical composition of the essential oil from native populations of L. pinaster and the morphological characterization of the leaves and glandular trichomes, generating relevant information about the potential use of the species. Was sampled three native populations of L. pinaster, at Carrancas, Lavras and Itumirim localities in the State of Minas Gerais (Brazil). The essential oil from the leaves of each individual was extracted by hydrodistillation and analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS, Shimadzu QP-5000). To characterize the leaf anatomy, old and young leaves were selected 4 from a single plant of the Campinas-SP germoplasm bank. We analyzed permanent and semipermanent slides and histochemical tests were performed to identify and locate the main chemical classes of metabolites present in the leaves. The entire slide collection obtained was analyzed in Olympus BX41 microscope equipped with Olympus C7070 digital camera. The morphological analysis of the leaf indumentum was performed in scanning electron microscope (SEM), FEI Quanta 200 (Philips). The results of seasonality showed no significant difference in the average yield of the essential oil production within populations, but we observed a lower average yield of essential oil in the population from Carrancas. Trans-methyl cinnamate and trans-caryophyllene were... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Márcia Ortiz Mayo Marques / Banca: Ling Chau Ming / Banca: Ademir Farias Morel / Resumo: A espécie Lychnophora pinaster, espécie microendemica do Cerrado brasileiro, encontra-se na categoria vulnerável da lista vermelha das espécies ameaçadas de extinção da flora de Minas Gerais. Amplamente utilizada na medicina popular, esta espécie sofre o impacto do constante extrativismo desordenado e a degradação do seu ambiente natural. O objetivo deste tabalho foi avaliar a influência de duas épocas de colheita (verão e inverno) no rendimento e na composição química dos óleos essenciais de populações nativas de Lychnophora pinaster Mart e caracterizar morfologicamente as folhas e os tricomas glandulares, gerando informações relevantes para potencial uso da espécie. Foram amostradas três populações nativas de L. pinaster, oriundas dos municípios de Carrancas, Lavras e Itumirim no Estado de Minas Gerais. O óleo essencial das folhas de cada indivíduo foi extraído por hidrodestilação e analisados em cromatógrafo a gás acoplado a espectrômetro de massas (CG-EM, Shimadzu, QP-5000). Para a caracterização da anatomia foliar foram selecionadas folhas jovens e adultas de um indivíduo proveniente do banco de germoplasma localizado em Campinas-SP. Foram analisadas lâminas permanentes e semi-permanentes e realizados testes histoquímicos para identificar e localizar as principais classes químicas dos metabólitos presentes nas folhas. Todo o laminário obtido foi analisado em microscópio Olympus BX41 equipado com câmera digital Olympus C7070. As análises da morfologia do indumento foliar foram... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Lychnophora pinaster Mart is one of the microendemical species of the Brazilian Cerrado and it is in the vulnerable category of the Red List of endangered species of the Minas Gerais flora. Widely used in folk medicine, this species suffers the impact of constant non-organized extractivism and degradation of its natural environment. The objective of this research was to evaluate the influence of two harvest seasons (summer and winter) on the yield and chemical composition of the essential oil from native populations of L. pinaster and the morphological characterization of the leaves and glandular trichomes, generating relevant information about the potential use of the species. Was sampled three native populations of L. pinaster, at Carrancas, Lavras and Itumirim localities in the State of Minas Gerais (Brazil). The essential oil from the leaves of each individual was extracted by hydrodistillation and analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS, Shimadzu QP-5000). To characterize the leaf anatomy, old and young leaves were selected 4 from a single plant of the Campinas-SP germoplasm bank. We analyzed permanent and semipermanent slides and histochemical tests were performed to identify and locate the main chemical classes of metabolites present in the leaves. The entire slide collection obtained was analyzed in Olympus BX41 microscope equipped with Olympus C7070 digital camera. The morphological analysis of the leaf indumentum was performed in scanning electron microscope (SEM), FEI Quanta 200 (Philips). The results of seasonality showed no significant difference in the average yield of the essential oil production within populations, but we observed a lower average yield of essential oil in the population from Carrancas. Trans-methyl cinnamate and trans-caryophyllene were... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Ricardo Cedraz Duque Moliterno (ricardo.moliterno@uefs.br) on 2017-04-11T21:06:17Z No. of bitstreams: 1 Tese final Ana Carolina-.pdf: 2069305 bytes, checksum: d639d8880ea9572c9a3ab7a9e940b690 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-11T21:06:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese final Ana Carolina-.pdf: 2069305 bytes, checksum: d639d8880ea9572c9a3ab7a9e940b690 (MD5) Previous issue date: 2016-09-26 / (In vitro propagation and acclimatization of medicinal species: Alpinia zerumbet (Pers.) B.L.Burtt&R.M.Sm. (Zingiberaceae) and Solidago chilensis Meyen (Asteraceae). Alpinia zerumbet and Solidago chilensis are known for their ornamental and medicinal values. There are few reports in the literature on micropropagation of Alpinia zerumbet and none about Solidago chilensis, which demonstrates the need for studies. This work aimed to study in vitro propagation of the species, involving micropropagation and developing protocols for organogenesis. For in vitro establishment were tested different types of explants, disinfestation methods and antioxidants. For multiplication, these explants were tested with plant growth regulators naftalen acetic acid and benzilaminopurin isolated and combined, and dichlorophenoxyacetic acid and kinetin, isolated and combined. It was made anatomical characterization of callus formation. For acclimatization, after pre-acclimatization, the seedlings were transferred to plastic cups containing sterilized substrate, capped with plastic bottles and taken to a greenhouse with 50% shading, where the bottle caps were unscrewed slowly. The results showed success in establishing in vitro of A. zerumbet crucial step to start large-scale cultivation. Against contamination, the most effective treatment was 4ml PPM/L (Plant Preservative Mixture), controlling 100% of pathogens. As an antioxidant, ascorbic acid (2%) was the most efficient. There was budding A. zerumbet derivatives bud explants. There was no decline in the propagation rate during in vitro subcultures, however growth is very slow. S. chilensis, explants nodal segments showed a higher rate of multiplication. There was no decline in the spread rate over four subcultures in vitro and the seedlings had a high survival rate in the acclimatization phase. / Alpinia zerumbet e Solidago chilensis s?o conhecidas pelos valores ornamental e medicinal. Existem poucos relatos na literatura sobre micropropaga??o de Alpinia zerumbet e nenhum sobre Solidago chilensis, o que demonstra necessidade de estudos. Este trabalho objetivou estudar a propaga??o in vitro das esp?cies, envolvendo micropropaga??o e desenvolvendo protocolos para organog?nese. Para o estabelecimento in vitro foram testados diferentes tipos de explantes, m?todos de desinfesta??o e antioxidantes. Para multiplica??o, esses explantes foram testados com reguladores vegetais: ?cido naftalenoac?tico e benzilaminopurina isolados e combinados, al?m de ?cido 2,4-diclorofenoxiac?tico e cinetina, isolados e combinados. Foi feita caracteriza??o anat?mica da calog?nese. Para aclimatiza??o, ap?s a pr?-aclimatiza??o, as mudas foram transferidas para copos pl?sticos contendo substrato esterilizado, tampados com garrafas pet e levados para casa de vegeta??o com sombrite 50%, onde as tampas das garrafas foram desenroscadas aos poucos. Os resultados mostraram sucesso no estabelecimento in vitro de A. zerumbet, etapa crucial para iniciar cultivo em larga escala. Contra contamina??o, o tratamento mais efetivo foi 4mL de PPM/L (Plant Preservative Mixture), controlando 100% dos pat?genos. Como antioxidante, o ?cido asc?rbico (2%) foi o mais eficiente. Houve brota??o de A. zerumbet em explantes derivados de gemas. N?o foi observado decl?nio na taxa de propaga??o no decorrer dos subcultivos in vitro, contudo o crescimento ? muito lento. Para S. chilensis, explantes de segmentos nodais apresentaram maior taxa de multiplica??o. N?o foi observado decl?nio na taxa de propaga??o no decorrer de quatro subcultivos in vitro e as mudas apresentaram alto ?ndice de sobreviv?ncia na fase de aclimatiza??o.

Submitted by Sandra Guimarães (gsandra@ufpa.br) on 2018-02-09T14:04:23Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_ObtencaoCaracterizacaoFormulacao.pdf: 3006481 bytes, checksum: a3804ff9042c9d1306516234032acd0a (MD5) / Approved for entry into archive by Sandra Guimarães (gsandra@ufpa.br) on 2018-02-09T14:04:59Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_ObtencaoCaracterizacaoFormulacao.pdf: 3006481 bytes, checksum: a3804ff9042c9d1306516234032acd0a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-09T14:04:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_ObtencaoCaracterizacaoFormulacao.pdf: 3006481 bytes, checksum: a3804ff9042c9d1306516234032acd0a (MD5) Previous issue date: 2015-12-18 / Devido a grande difusão e utilização de plantas medicinais, as indústrias vêm fabricando produtos a base de espécies vegetais, como extratos e tinturas, que são utilizados principalmente por farmácia com manipulação. No entanto, são questionáveis a garantia para a grande maioria destes produtos, quanto à sua eficácia, segurança e qualidade, podendo trazer riscos à saúde do usuário. Assim, torna-se importante a realização do controle de qualidade para produtos fitoterápicos, de acordo com a legislação vigente. A formulação que deu origem à pesquisa é um gel de carbopol contendo tintura de Arnica montana L e extrato de Aesculus hippocastanum L. O presente estudo objetivou a obtenção e caracterização da formulação citada e validar o emprego de metodologias da tecnologia farmacêutica por meio da realização da padronização do extrato de Aesculus hippocastanum L e da tintura de Arnica montana L, Para a avaliação físioquímica foram realizados: O controle microbiológico, a caracterização organolépticas, determinação de pH, densidade, resíduo seco, perda por dessecação, determinação do teor de sólidos, comportamento reológico, concentração, liofilização e prospecção química dos insumos vegetais . Para a análise fitoquímica foi realizada Cromatografia em Camada Delgada da tintura de Arnica (CCD) e Cromatografia Em Camada Delgada Comparativa (CCDC) do extrato de Aesculus, Infravermelho e Análise Térmica tanto dos extratos como da formulação. Para as caracterizações físico-química e validação dos Laudos de Análise dos fornecedores das duas espécies vegetais os resultados encontram-se dentro dos parâmetros estabelecidos pela Farmacopéia Brasileira Vª Ed. O controle micróbiológico foi para comprovar a ausência de microorganismos patogênicos, os resultados indicaram ausência de mico-organismos, pois a contaminação microbiana dos insumos pode alterar a estabilidade do produto final e ainda caracterizar risco de infecção ao usuário. A prospecção química das espécies vegetais, foi para identificar metabólitos secundários relevantes, no caso do A. hippocastanum indicou a presença de saponinas, representada pela escina que é a responsável pela atividade farmacológica, foi um indício importante para a certificação da autenticidade da matéria prima em estudo. A viscosidade dos insumos vegetais e da formulação foram determinadas através do Reômetro de Brookfield, os extratos apresentaram comportamento de fluído Newtoniano e a formulação apresentou um comportamento pseudo plástico. O resultado da Cromatografia em Camada Delgada (CCD), auxiliou na identificação da amostra e possíveis adulterações que poderiam ter ocorrido, assim como a CCDC serviu para demonstrar a seletividade do método, pois identificou a presença da escina, substância responsável pela ação farmacológica da Castanha da índia. Na validação da tintura de Arnica montana L., por CLAE foi detectado a presença da rutina na amostra in natura com o tempo de retenção 10,84 min. As análises de infravermelho realizadas nas espécies vegetais, foram obserdas bandas que podem indicar a presença dos principais marcadores químicos, no caso da arnica indicou à presença da rutina, e a presença da escina no extrato de castanha da índia. Na análise térmica TG/DTA, podemos dizer que o primeiro evento de decomposição para as amostras ocorreu até 150º C, que corresponde a perda de massa, os valores obtidos foram 6,5 e 8 % para à castanha da índia e arnica respectivamente. Todos os resultados foram de relevância para a caracterização e controle de qualidade, servindo de parâmetro para à padronização do extrato e da tintura, as informações obtidas serviu também para a certificação de um dos fornecedores de extratos e tinturas para as farmácias de manipulação em Belém. / Because of the wide dissemination and use of medicinal plants, industries are producing products based on plant species, such as extracts and tinctures, which are mainly used by pharmacy with handling. However, it is questionable collateral for the vast majority of these products as to their efficacy, safety and quality, and may bring risks to the user's health. So, it is important to perform quality control for herbal products, according to current legislation. The formulation that gave rise to the research is a carbopol gel containing Arnica montana L dye and Aesculus hippocastanum L extract. The present study aimed at obtaining and characterization of said formulation and validate the use of methods of pharmaceutical technology by performing the standardization of Aesculus hippocastanum L extract and Arnica montana L dye, to the physio-chemical evaluation were performed: microbiological control, organo-leptical characterization, determination of pH, density, dry, loss on drying, determine the level solids, rheological behavior, concentration, lyophilization and chemical prospecting of plant inputs. For the phytochemical analysis was performed Thin Layer Chromatography of Arnica tincture (TLC) and Thin Layer Chromatography In Comparative (TLCC) Aesculus extract, Infrared and Thermal Analysis of both extracts as the formulation. For physicochemical characterization and validation of analysis Reports of the two plant species suppliers the results are within the parameters established by the Brazilian Pharmacopoeia Fifth Ed. The microbiologic control was to prove the absence of pathogenic microorganisms, the results indicated microorganisms absence of, for microbial contamination of the inputs can change the stability of the final product and further characterize risk of infection to the user. The chemical prospecting of plant species, was to identify relevant secondary metabolites, in the case of A. hippocastanum indicated the presence of saponins, represented by escin which is responsible for the pharmacological activity, was an important clue to the certification of the authenticity of the raw material in study. The viscosity of vegetable raw materials and formulation were determined by the rheometer of Brookfield, the extracts showed fluid behavior and Newtonian formulation showed a pseudo plastic behavior. The result of the Thin Layer Chromatography (TLC), assisted in the identification of the sample and possible tampering that could have occurred as well as the TLCC served to demonstrate the selectivity of the method as identified the presence of aescin, substance responsible for pharmacological activity Chestnut from India. In the validation of Arnica montana L. dye, it was detected by HPLC the presence of the rutin in the sample in nature with retention time 10.84 min. The infrared analyzes the plant species were observerd bands that may indicate the presence of the major chemical markers in the case Arnica indicated the presence of the rutin and escin in the presence of horse chestnut extract. In the thermal analysis TG / DTA, we can say that the first decomposition event occurred for the samples to 150 ° C, corresponding to weight loss, the values were 6.5 and 8% for the chestnut and arnica respectively. All results were significant for the characterization and quality control, used as benchmark for the standardization of the extract and tincture, the information obtained was also used for the certification of suppliers of extracts and tinctures for drugstores in Belém.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-01-22Bitstream added on 2014-06-13T20:03:59Z : No. of bitstreams: 1 haber_ll_dr_botfca.pdf: 866192 bytes, checksum: f6d9dede11b30cda861174dc04f042d3 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Atualmente, Lychnophora pinaster, encontra-se classificada na categoria de plantas vulneráveis, ou seja, os “taxa” cujas populações encontram-se em risco de extinção. Suas folhas e flores são aromáticas e utilizadas na medicina popular sob a forma de extrato alcoólico, como antinflamatório, anestésico e cicatrizante. O presente estudo objetivou realizar a caracterização genética, via marcador molecular microssatélite, e a química dos óleos essenciais de populações de Lychnophora pinaster Mart, visando sua preservação, uso sustentável e estudos futuros de melhoramento genético vegetal. Para tal, foram amostradas quatro populações da espécie coletadas no Estado de Minas Gerais. O estudo da variabilidade populacional realizou-se pela análise de polimorfismo do DNA com marcadores microssatélite e a química, por meio da análise da composição química dos óleos essenciais das folhas das populações nativas e cultivadas. Os óleos essenciais foram extraídos por hidrodestilação e analisados em cromatógrafo a gás acoplado a espectrômetro de massas (Shimadzu, QP-5000). Pelo agrupamento UPGMA, as populações nativas foram divididas em dois grupos, sendo um composto por Estrada Real, Estrada Real 1 e Antena, e o outro representado por Poço Bonito. Pela análise de componentes principais, quimicamente as populações foram, também, divididas em dois grupos, um composto por Estrada Real, Estrada Real 1 e Poço Bonito, tendo como principal constituinte do óleo essencial o trans-cinamato de metila, e, o outro, representado pela população Antena, tendo como o outro principal constituinte o cedr-8-(15)-en-9-alfa-ol. As populações quando cultivadas não tiveram diferenças no perfil químico, tendo como constituinte majoritário o trans-cinamato de metila... / Currently, Lychnophora pinaster is considered an endangered species, that is, it belongs to the taxa whose native populations are risking extinction. Its leaves and flowers are aromatic and used in popular medicine in the form of alcohol extracts as anti-inflammatory, anesthetic and curative agent in wounds. Therefore, the present study aimed to characterize the genetic diversity, using microsatellite molecular markers, and the chemical composition of the essential oil from Lychnophora pinaster Mart populations, so that it can be preserved, sustainably used and be incorporated into further studies of genetic breeding. In order to do so, four native populations of the species were sampled from the state of Minas Gerais. Population variability studies were performed by DNA polymorphism analyses using microsatellite molecular markers and the chemical characterization was performed by analyzing the composition of the essential oil from leaves obtained from native and cultivated populations. Essential oils were extracted by hydro-distillation and analyzed by gas-chromatography mass spectrometry (Shimadzu, QP- 5000). The native populations formed two clusters by UPGMA grouping; one of them consisting of the populations from Estrada Real, Estrada Real 1 and Antena, and the other one consisting of the population from Poço Bonito. Chemically, the populations were also clustered in two groups according to the major compounds analyses; the first one comprising Estrada Real, Estrada Real 1 and Poço Bonito, that had methyl trans-cinnamate as major compound and the second one, represented by Antena population that had cedr-8- (15)-en-9-alpha-ol as major component...(Complete abstract click electronic access below)

Submitted by PAULO SÉRGIO SIBERTI DA SILVA null (sibertisilva@hotmail.com) on 2016-06-23T02:50:14Z No. of bitstreams: 1 tese_definitiva_rev Marcia_final_22_06_2016.pdf: 7944179 bytes, checksum: c1b7190a1c23d0d924b3a8e4d60ff257 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-06-24T18:03:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_pss_dr_bot.pdf: 7944179 bytes, checksum: c1b7190a1c23d0d924b3a8e4d60ff257 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-24T18:03:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_pss_dr_bot.pdf: 7944179 bytes, checksum: c1b7190a1c23d0d924b3a8e4d60ff257 (MD5) Previous issue date: 2016-04-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os objetivos deste estudo foram (i) fornecer a caracterização dos padrões de diversidade genética e estrutura populacional de sete populações naturais de L. pinaster e discutir estratégias de conservação; (ii) avaliar a composição química dos óleos essenciais de três populações naturais da espécie, duas provenientes da região sul e uma do sudeste de Minas Gerais; (iii) caracterizar os princípios ativos, registrados na literatura, dos extratos etanólicos das três populações naturais; (iv) determinar a atividade in vitro dos óleos essenciais e extratos etanólicos das populações contra formas amastigotas de Tripanossoma cruzi; e (v) avaliar as relações entre o polimorfismo químico, os fatores ambientais e genéticos. Os resultados revelaram (i) existência de diferentes níveis de diversidade genética dentro e alto nível de diferenciação genética entre populações. É estritamente necessário o monitoramento das populações remanescentes para que, de fato, seja evitada a extinção da espécie. Os esforços de conservação in situ devem focar na preservação dos habitats de L. pinaster da destruição e no aumento dos tamanhos populacionais, uma vez que o pequeno tamanho populacional e a fragmentação fazem de L. pinaster susceptível às perdas de diversidade genética causada pela endogamia e deriva genética. É sugerido planejamento de coleta de sementes provenientes dos grupos genéticos evidenciados pelo STRUCTURE ou DAPC para a conservação ex situ do germoplasma; (ii) não foi registrada a presença de substâncias da classe dos fenilpropanóides no óleo essencial da população de L. pinaster proveniente da região sudeste, apresentando como constituinte majoritário um sesquiterpeno oxigenado, enquanto as populações do sul apresentaram o E-cinamato de metila, E-cariofileno e α-humuleno como constituintes mais abundantes; (iii) mesmo padrão espacial de composição química foi observado para os extratos, onde as populações do sul apresentaram perfil químico semelhante entre si sob o ponto de vista qualitativo, diferindo da proveniente do sudeste. Dos princípios ativos, somente a quercetina e friedelina foram identificados nos extratos das três populações, tendo as suas quantidades variado entre populações; (iv) os óleos essenciais e extratos etanólicos não apresentam in vitro seletividade e atividade antiparasitária com relação às formas amastigotas T. cruzi equivalente ou superior ao benznidazol, utilizado comercialmente para tratar doença de Chagas; (v) com o aumento das concentrações dos óleos essenciais e extratos, houve aumento da citotoxicidade e, consequentemente, diminuição da taxa de células hospedeiras tanto infectadas como não infectadas. Os extratos se mostraram mais citotóxicos em relação aos óleos essenciais; (vi) comparados à genética, os preditores ambientais - distância geográfica e os diferentes gradientes de solo - se mostraram os elementos mais relevantes para a variação química do óleo essencial entre populações de L. pinaster, indicando que o polimorfismo químico no óleo essencial esteja ocorrendo mais como um reflexo de uma seleção natural de acordo com os fatores ambientais locais e não devido à deriva genética; o que é um alerta quanto à utilização de diferentes populações de L. pinaster como fitoterápico de modo indiscriminado, uma vez que as diferenças na composição química podem comprometer sua eficácia terapêutica. / The aims of this study were (i) to provide the characterization of the genetic diversity and population structure of seven native populations of L.pinaster and to provide strategies for its conservation; (ii) to study the chemical composition of essential oils of three native population of this species, being two from southern and one from southeastern region of the State of Minas Gerais; (iii) to characterize the active ingredients of the ethanolic extracts of these three native populations; (iv) to determine the in vitro activity of the essential oils and ethanolic extracts of the populations against amastigote forms of Tripanossoma cruzi; and (v) to analyze the correlation of the chemical polymorphism of the essential oil with environmental and genetic factors. It were detected (i) existence of different levels of genetic diversity within and high level of genetic differentiation among populations. It is strictly necessary monitoring of the remaining populations so that, in fact, be avoided extinction of L. pinaster. The efforts for in situ conservation should focus on preservation of habitats and the increase of populations size, once the small population size and fragmentation make L. pinaster vulnerable to losses of genetic diversity due to the endogamy and genetic drift. It is suggested collection of seeds from the genetic groups evidenced by STRUCTURE or DAPC for ex situ conservation of germplasm; (ii) It were not detected phenylpropanoids in the essential oil of the population from southeastern region, which presented as majoritary compound an oxygenated sesquiterpene, while in southern populations were detected the majoritary E-methyl cinnamate (phenylpropanoid), followed by E-caryophyllene and α- humelene; (iii) same spatial pattern of chemical composition was observed for extracts, with southern populations having similar profile quantitatively, differing of the southeastern population. Regarding the active ingredients, only quercetin and friedelin were identified in the extracts of the three populations, with quantities differing among populations; (iv) the essential oils and extracts did not show selectivity and antiparasitic activity against T. cruzi amastigotes equivalent or superior to benznidazole, commercially used to treat Chagas disease; (v) the extracts were more cytotoxic than essential oils; and (vi) the environmental predictors – geographical distance and soils – were the most relevant factors to explain the chemical variation of essential oils among populations, indicating the chemical polymorphism is due to a natural selection according to the local environmental factors and not due to the genetic drift, which is an alert regarding the usage of different populations of L. pinaster in an indiscriminate way, once differences in chemical composition could compromise their therapeutic efficacy.

M.Tech. (Chiropractic) / Purpose: The aim of this study was to look at the effectiveness of massage with MYO₂ gel in conjunction with Spinal Manipulative Therapy (SMT) for the treatment of patients with posterior mechanical neck pain, with regards to pain, disability and cervical spine range of motion. The effect of these treatments was evaluated using a questionnaire consisting of Visual Analogue Scale (VAS) and a Vernon-Mior Neck Pain and Disability Index Questionnaire, and by measuring cervical spine range of motion using a cervical range of motion (CROM) measuring device. Method: 30 participants with posterior mechanical neck pain were randomly divided into two groups based on the order they start the study in. Group A – control group, received SMT to the cervical spine, followed by massage with ultrasound gel over the upper trapezius muscle and the area of the posterior neck musculature. Group B – experimental group, received SMT of the cervical spine, followed by massage with MYO₂ gel over the upper trapezius muscle and the area of the posterior neck musculature. Participants were treated six times out of a total of seven sessions, over a maximum three week period. Procedure: Subjective data was collected at the beginning of the first and fourth and seventh consultations. This was done by means of a Visual Analogue Scale (VAS) and a Vernon- Mior Neck Pain and Disability Index Questionnaire in order to assess pain and disability levels. Objective data was collected at the beginning of the first, fourth session, and seventh consultation by means of measuring cervical spine range of motion using a cervical range of motion (CROM) measuring device. Analysis of collected data was performed by a statistician from STATKON; a department of the University of Johannesburg. Results: When comparing the VAS of the initial with the final consultation it showed a statistically significant difference in both groups. This indicated that both interventions were effective in decreasing the perceived level of neck pain (VAS score). When comparing the Neck Pain and Disability Index of the initial with the final consultation it showed a statistically significant difference in both groups. This indicated that both interventions were effective in decreasing neck pain and disability of the cervical spine. When comparing the Cervical Range of Motion (CROM) of the initial consultation with the final consultation it showed a statistically significant improvement in both groups in all directions of motion. Both groups resulted in an increase in range of motion over time. Group B had a greater average CROM percentage increase of 28.60% average compared to Group A which had an average percentage increase of 22.25%.

Resumo: Atualmente, Lychnophora pinaster, encontra-se classificada na categoria de plantas vulneráveis, ou seja, os "taxa" cujas populações encontram-se em risco de extinção. Suas folhas e flores são aromáticas e utilizadas na medicina popular sob a forma de extrato alcoólico, como antinflamatório, anestésico e cicatrizante. O presente estudo objetivou realizar a caracterização genética, via marcador molecular microssatélite, e a química dos óleos essenciais de populações de Lychnophora pinaster Mart, visando sua preservação, uso sustentável e estudos futuros de melhoramento genético vegetal. Para tal, foram amostradas quatro populações da espécie coletadas no Estado de Minas Gerais. O estudo da variabilidade populacional realizou-se pela análise de polimorfismo do DNA com marcadores microssatélite e a química, por meio da análise da composição química dos óleos essenciais das folhas das populações nativas e cultivadas. Os óleos essenciais foram extraídos por hidrodestilação e analisados em cromatógrafo a gás acoplado a espectrômetro de massas (Shimadzu, QP-5000). Pelo agrupamento UPGMA, as populações nativas foram divididas em dois grupos, sendo um composto por Estrada Real, Estrada Real 1 e Antena, e o outro representado por Poço Bonito. Pela análise de componentes principais, quimicamente as populações foram, também, divididas em dois grupos, um composto por Estrada Real, Estrada Real 1 e Poço Bonito, tendo como principal constituinte do óleo essencial o trans-cinamato de metila, e, o outro, representado pela população Antena, tendo como o outro principal constituinte o cedr-8-(15)-en-9-alfa-ol. As populações quando cultivadas não tiveram diferenças no perfil químico, tendo como constituinte majoritário o trans-cinamato de metila ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Currently, Lychnophora pinaster is considered an endangered species, that is, it belongs to the taxa whose native populations are risking extinction. Its leaves and flowers are aromatic and used in popular medicine in the form of alcohol extracts as anti-inflammatory, anesthetic and curative agent in wounds. Therefore, the present study aimed to characterize the genetic diversity, using microsatellite molecular markers, and the chemical composition of the essential oil from Lychnophora pinaster Mart populations, so that it can be preserved, sustainably used and be incorporated into further studies of genetic breeding. In order to do so, four native populations of the species were sampled from the state of Minas Gerais. Population variability studies were performed by DNA polymorphism analyses using microsatellite molecular markers and the chemical characterization was performed by analyzing the composition of the essential oil from leaves obtained from native and cultivated populations. Essential oils were extracted by hydro-distillation and analyzed by gas-chromatography mass spectrometry (Shimadzu, QP- 5000). The native populations formed two clusters by UPGMA grouping; one of them consisting of the populations from Estrada Real, Estrada Real 1 and Antena, and the other one consisting of the population from Poço Bonito. Chemically, the populations were also clustered in two groups according to the major compounds analyses; the first one comprising Estrada Real, Estrada Real 1 and Poço Bonito, that had methyl trans-cinnamate as major compound and the second one, represented by Antena population that had cedr-8- (15)-en-9-alpha-ol as major component...(Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Márcia Ortiz Mayo Marques / Coorientador: Edivaldo Domingues Velini / Banca: Maria Imaculada Zucchi / Banca: João Domingos Rodrigues / Banca: Maria das Graças Cardoso / Banca: Marcos Aparecido Gimenes / Banca: Luís Vitor Silva do Sacramento / Doutor

Lychnophora ericoides is a shrub like species, endemic to rock outcrops areas, whose cultivation practices are unknown and its irregular maturation being the great problem for seedling production. The objective of the work was to evaluate the germination of L. ericoides cypsela collected from across different altitudes of a population occurring in the Serra da Bocaina, region of Alto Paranaíba, Minas Gerais, and submitted to methods for cypselas selection with relation to density. In the first experiment, arnica capitulum of 20 access (altitudes between 1102 and 1245m) formed a completely randomized design, with 20 access (treatments) and four repetitions, in groups with 50 cypselas removed from the borders of the capitulum. In the second experiment, samples of the same cypselas were placed in a blower for 3 minutes and 20 seconds, the heaviest being separated in two groups. Half of the cypselas were washed in running water for 24 hours and the other half were submerged in sulfuric acid for 1 minute and soon after washed in running water for 24 hours. After the separation, the germination test was set up in a completely randomized design in factorial scheme of 2 x 20, the first factor corresponding to treatments (water and sulfuric acid) and the second factor, to the 20 access in four repetitions containing 50 cypselas. In both experiments, the cypsela were distributed in gerbox containing blotting paper humidified with distilled water, being counted, first the cypselas germinated in function of the protrusion of the radicle and, in the second, normal seedlings. In the first experiment, the cypselas presented low percentage of germination (maximum 15%). The small difference between the germination percentage and viability indicated that few cypselas at the end of the germination test were viable, a result proven by the high percentage of empty cypselas (above 65.5%). The percentage relative to germination (full cypselas) showed high capacity of cypsela germination (72.38, 78.13 and 66.85% for cypselas from access 1, 3 and 5, respectively). The variation of the altitude gradient of 143 m was not lineally related to the presence of empty seeds, not even to the physiologic quality of the cypselas. The cypsela germination was slow and distributed over time. After the density test, the maximum germination was also low (maximum 34% for the access 2 submitted to sulfuric acid). The use of sulfuric acid after the density test, in a general way, improved the quality of the cypselas and increased the percentage of cypsela germination of same. / Lychnophora ericoides, conhecida como arnica-do-campo, é uma espécie arbustiva, endêmica dos campos rupestres, cujas práticas de cultivo são desconhecidas, sendo a maturação desuniforme o grande problema para produção de mudas. O objetivo do trabalho foi avaliar a germinação de cipselas de L. ericoides coletados de acessos em diferentes altitudes de uma população ocorrente na Serra da Bocaina, região do Alto Paranaíba, Minas Gerais e submetidos a métodos para seleção dos cipselas quanto à densidade. No primeiro experimento, capítulos florais de 20 acessos (altitudes entre 1102 e 1245 m) formaram um delineamento inteiramente casualizado, com 20 acessos (tratamentos) e quatro repetições, em parcelas com 50 cipselas retirados das bordas dos capítulos. No segundo experimento, amostras dos mesmos cipselas foram colocadas em soprador por 3 minutos e 20 segundos, sendo os mais pesados separados em dois grupos. Metade dos cipselas foi lavada em água corrente por 24 horas e a outra metade ficou submersa em ácido sulfúrico por 1 minuto e em seguida lavados em água corrente por 24 horas. Após a separação, o teste de germinação foi instalado em delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 20, sendo o primeiro fator correspondente aos tratamentos (ácido sulfúrico e água) e o segundo fator, aos acessos em quatro repetições contendo 50 cipselas. Em ambos os experimentos, os cipselas foram distribuídos em gerbox contendo papel mata-borrão umedecido com água deionizada, sendo contados, no primeiro, os cipselas germinados em função da protrusão da radícula e, no segundo, plantas normais. No primeiro experimento, os cipselas apresentaram baixo percentual de germinação (máximo 15%). A pequena diferença entre o percentual de germinação e de viabilidade indicou que poucos cipselas no final do teste de germinação estavam viáveis, resultado comprovado pelo elevado percentual de cipselas chochos (acima de 65,5%). O percentual relativo de germinação (cipselas cheios) mostrou alta capacidade de germinação dos cipselas (78,13; 72,38 e 66,85% para cipselas dos acessos 7, 11 e 20, respectivamente). A variação do gradiente de altitude de 143 m não esteve linearmente relacionada à presença de cipselas chochos, nem mesmo com a qualidade fisiológica dos mesmos. A germinação dos cipselas foi lenta e distribuída no tempo. Após o teste densimétrico, a germinação máxima também foi baixa (máximo 34% para cipselas do acesso 2, quando submetidos ao ácido sulfúrico). A utilização de ácido sulfúrico após o teste densimétrico, de maneira geral, aumentou o percentual de germinação dos cipselas de alguns acessos. / Mestre em Agronomia