Made available in DSpace on 2016-06-02T20:19:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissOSMB.pdf: 768691 bytes, checksum: a1ee980e3f11530bc253a291728b319e (MD5) Previous issue date: 2003-11-27 / Financiadora de Estudos e Projetos / Nicotine is a neuromodulator of the central nervous system, which has a wide variety of behavioural effects. The aim of this study is to investigate the role of nicotine and mecamylamine on the learning and memory mechanism through conditioning by a positive reinforcement process in 158 fish of the species Carassius auratus. For this purpose a rectangular aquarium was used (30×10×17 cm for total length, width and height, respectively). The aquarium was divided into two compartments, one black and one white. The experiment was done in five days: on the first day: habituation; on the second day: the natural preference of the animal was registered; on the third day: raining session number 1(T1), the animals were subjected to reinforcement in the white compartment; on the fourth day: training session number 2 (T2), the animals were subjected to reinforcement in the white compartment and were injected immediately after training; on the fifth day: test, the preference of the animals between the two compartments was registered once more. The animals were divided into eight groups according to the treatment. Four groups were injected immediately after training: vehicle (n=25); nicotine 2.0mg/kg (n=24); mecamylamine 1.0mg/kg (n=25); mecamylamine 2.0mg/kg (n=24); and four groups were injected three hours after training: vehicle (n=15); nicotine 2.0mg/kg; mecamylamine 1.0mg/kg (n=15); mecamylamine 2.0mg/kg (n=15). The statistical analysis was carried out using a two-way analysis of variance (ANOVA) followed by the Student-Newman-Keuls test or the Friedman test. The variables submitted to the analysis were: the time spent in each compartment; the latency and the number of times the fish crossed from one compartment to the other. The results show that in the groups, which were injected immediately the animals, showed a natural preference for the black compartment before training. In the post-training, the vehicle and mecamylamine 1,0mg/kg groups showed less preference for the black compartment, indicating learning. In the nicotine group there was a significant difference (P<0.01) between the time spent in the black and white compartments, however the animals of this group maintained the preference for the dark environment. In the mecamylamine 2.0mg/kg group, the animals changed the preference between the compartments showing facilitation of the learning process. In relation to latency the animals of the vehicle, mecamylamine 1.0 mg/kg and 2.0mg/kg groups, presented a significant reduction (P<0.05) of the L between the days showing that the animals learned by positive reinforcement and retained the task on the day of the test. In the animals of the nicotine group, there was a significant difference (P<0.05) of latency just between the T2 and the test days, showing a slower learning process. In relation to the number of times the fish crossed from one compartment to the other there was not a significant difference between the groups treated, suggesting that the drugs had no effect on the locomotor activity of the animals. In the groups injected after three hours, the animals still preferred the black compartment, showing that there was not any pro-active effect of the drugs on the memory consolidation process. With regards to latency, our results suggest that there was cholinergic drug action on unspecific neural systems. Thus, it suggests that concerning the immediate groups in this model there was an effect on the learning process. / A nicotina é um neuromodulador do sistema nervoso central que produz ampla variedade de efeitos comportamentais. A proposta deste estudo foi investigar o papel da nicotina e da mecamelamina sobre o mecanismo de aprendizagem e memória, através de condicionamento por reforço positivo, em peixes da espécie Carassius auratus. Foram utilizados 158 animais; um aquário retangular, com dimensões de 30 cm de comprimento, 10 cm de largura e 17 cm de altura, dividido ao meio em dois compartimentos, um preto e outro branco. O experimento foi realizado em cinco dias: dia I-habituação; dia II-registrouse a preferência natural do animal; dia III-treino 1, os animais receberam o reforço no compartimento branco; dia IV-treino 2, os animais receberam o reforço no compartimento branco e em seguida foram injetados; dia V-teste, foi observada a preferência do animal entre os dois compartimentos. Oito grupos de animais foram formados de acordo com a droga administrada. Quatro grupos injetados imediatamente no pós-treino: veículo (n=25); nicotina 2,0mg/kg (n=24); mecamelamina 1mg/kg (n=25); mecamelamina 2,0mg/kg (n=24); e quatro grupos injetados três horas após o treino: veículo (n=15); nicotina 2,0mg/kg (n=15); mecamelamina 1,0mg/kg (n=15); mecamelamina 2,0mg/kg (n=15). A análise estatística foi feita através do ANOVA de 2 vias seguida do teste Student-Newman- Keuls ou através do teste Friedman. As variáveis submetidas à análise foram o tempo de permanência (TP) em cada compartimento, a latência (L); e o número de cruzamentos (CZ). Os resultados mostram que nos grupos injetados imediatamente no pós-treino, os animais de todos os grupos tratados exibiram preferência natural pelo ambiente escuro. No pós-treino, os grupos veículo e mecamelamina 1mg/kg reduziram a preferência pelo compartimento preto, permitindo inferir aprendizagem. No grupo nicotina houve diferença significativa (p<0,01) entre a permanência nos compartimentos preto e branco, porém os animais mantiveram a preferência pelo ambiente escuro. No grupo mecamelamina 2mg/kg, os animais inverteram a preferência entre os compartimentos, indicando facilitação da aprendizagem em relação ao grupo veículo. Em relação à L, nos animais dos grupos veículo, mecamelamina 1,0mg/kg e 2,0mg/kg, a redução significativa (p<0,05) da L entre os dias indica que os animais aprenderam por reforço positivo e retiveram a tarefa no dia do teste. Nos animais do grupo nicotina, houve diferença significativa (p<0,05) da latência apenas entre os dias T2 e o Teste. Quanto ao número de CZ, não houve diferença significativa entre os grupos tratados, sugerindo que as drogas não exerceram efeito sobre a atividade locomotora dos animais. Nos grupos injetados após três horas (animais injetados três horas após o treino), a análise do TP no pós-treino indica que os animais continuaram preferindo o compartimento preto, indicando que não houve efeito pró-ativo das drogas sobre o processo de consolidação da memória. Quanto à L, nossos resultados sugerem que provavelmente, houve ações das drogas colinérgicas sobre sistemas neurais inespecíficos. Em relação ao número de CZ, não houve diferença significativa entre os grupos tratados, indicando que as drogas não exerceram efeito sobre a atividade locomotora do animal. Assim, sugere-se que nesse modelo, nos grupos imediatos, houve efeito da mecamelamina sobre a aprendizagem.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:19:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 887.pdf: 469528 bytes, checksum: fc5bcdbae3a402aaac1aae4dbf59bcd1 (MD5) Previous issue date: 2006-03-03 / Universidade Federal de Sao Carlos / This work intended to investigate in forebrain ablated Carassius auratus the effect of the H1 receptor blockade in a spatial choice task using a T-maze test with positive reinforcement. Sixty-nine goldfish were submitted to surgery for removal of both telencephalic lobes five days before the beginning of the experiment. A T-shaped glass aquarium, which had two feeders located at the extremities of the long arm, was employed. One of the two feeders was blocked. The experimental trials were performed in nine consecutive days. Each fish was individually placed in the short arm and confined there for thirty seconds, then it was allowed to swim through the aquarium to search for the food for ten minutes (maximum period). Time to find food was analysed in seconds. Animals were injected intraperitoneally with chlorpheniramine (CPA) at 16 mg/kg of body weight or saline after every trial, ten minutes after it had been replaced at house aquarium. Data were analyzed via a three-way analysis of variance (ANOVA) with repeated measures, and post hoc comparisons were analyzed using the Student Newman-Keuls test (p<0.05). All the training latencies of A-SAL group were significantly higher than latencies of S-SAL group (p<0.05). S-SAL group showed a significative decrease in latencies at the second trial and maintained that reduction until the end of the experiment (p<0.05), S-CPA group demonstrated a decrease only after the fourth trial (p<0.01), A-SAL group showed reduced latencies after the fifth trial (p<0.05), and ACPA group did not showed any difference between training latencies. Thus, our results showed that CPA seems to impair the consolidation of memory either on telencephalon ablated animals and in sham-operated ones. Furthermore, this work supports evidence that histamine plays a facilitatory role in learning and memory processes of a spatial task through its action in primitive structures of the brain in teleost fish. / O objetivo deste trabalho foi investigar, em peixes da espécie Carassius auratus submetidos à ablação telencefálica, o efeito do bloqueio do receptor H1 em uma tarefa de escolha espacial utilizando um teste de labirinto em T com reforço positivo. Sessenta e nove peixes foram submetidos à cirurgia para a remoção de ambos os lobos telencefálicos cinco dias antes do início do experimento. Foi empregado um aquário de vidro transparente em forma de T, o qual teve dois comedouros fixados nas extremidades do braço longo, sendo que um dos comedouros foi bloqueado durante as sessões de treino. O experimento foi realizado em nove sessões consecutivas realizadas com intervalos de 24 horas. Individualmente, cada peixe foi confinado no compartimento de saída do aquário experimental durante trinta segundos, e então foi permitido a ele explorar todo o aquário para procurar o alimento durante dez minutos (período máximo). O tempo utilizado para encontrar o alimento foi cronometrado em segundos. Os animais foram injetados intraperitonealmente com clorfeniramina (CPA), na dose de 16 mg/kg de peso corporal, ou salina após cada treino, dez minutos após o peixe ter sido recolocado no aquário de manutenção. Os dados foram analisados através de ANOVA de três vias seguida pelo teste de comparações múltiplas de Student Newman-Keuls. Todas as latências de treino do grupo A-SAL foram significativamente maiores do que as do grupo LFSAL (p<0,05). O grupo LF-SAL demonstrou diminuição significativa das latências apartir do segundo dia de treino (p<0,05), o LF-CPA apresentou esta diminuição após o quarto dia de treino (p<0,01), o A-SAL apresentou redução após o quinto dia de treino (p<0,05), e não foram encontradas diferenças entre as latências no grupo A-CPA. Assim, nossos resultados mostraram que a CPA parece prejudicar a consolidação da memória tanto nos animais que tiveram o telencéfalo removido quanto nos que foram submetidos à lesão fictícia. Além disto, este trabalho dá suporte às evidências de que a histamina desempenha um papel facilitatório nos processos de aprendizagem e memória em uma tarefa de escolha espacial, atuando em estruturas primitivas do cérebro de teleósteos.

A validação de um modelo experimental para se investigar a ansiedade deve estar baseada inicialmente em uma validação comportamental paramétrica, que pressupõe a investigação de respostas relacionadas ao comportamento de defesa da espécie frente às situações aversivas presentes no ambiente de exposição. Assim, o presente trabalho validou a preferência claro/escuro como um modelo comportamental para o estudo da ansiedade no peixe Carassius auratus (peixe dourado). Foram avaliados os seguintes parâmetros: repetição das exposições ao aparato de teste em 5 sessões diárias, privação de comida, aquário enriquecido, troca de água do aquário antes dos testes, proporções diferentes do compartimento claro e escuro, e aquário com a metade do comprimento. Os dados indicaram que as reexposições aumentaram o número de cruzamentos, indicando que a mesma aumenta a exploração do aparato, atenuando os componentes aversivos do ambiente. Os peixes alojados no aquário enriquecido se locomoveram mais no aparato, e não apresentam preferência significativa por nenhum dos compartimentos (claro/escuro), evidenciando que a aversividade do ambiente claro foi atenuada pelo alojamento em um aquário enriquecido. Os animais privados de comida por 48 h não apresentaram diferenças estatisticamente significativas entre os tempos gastos nos compartimentos claro e escuro do aquário, indicando uma maior exploração do aparato em busca de alimento. Os animais que passaram pelo procedimento de troca de água do aquário de testes não apresentaram preferência por nenhum dos compartimentos, indicando que os peixes, provavelmente, liberam sinalizadores químicos na água que informam seus co-específicos sobre o potencial aversivo do ambiente. Quanto à proporção do aquário, os animais expostos ao aquário teste 75% claro e 25% escuro se locomoveram menos que os do aquário controle, indicando que uma maior área clara, pode levar a uma ampliação da aversividade nesse aquário. Quando os sujeitos foram submetidos ao aquário 75% escuro e 25% claro, a frequência de cruzamentos foi maior no grupo controle e, nesse caso, a maior locomoção pode estar associada a uma atenuação da aversividade do ambiente relacionada a presença de uma maior área escura. No aquário 87,5% claro e 12,5% escuro, os animais do grupo experimental não apresentaram diferenças estatisticamente significativas entre os tempos gastos em nenhum dos compartimentos do aquário, indicando que uma maior área clara (aversiva) altera a preferência por ambientes escuros. Os peixes expostos ao aquário com a metade do comprimento aumentaram sua locomoção, evidenciando que o comprimento do aparato interfere na aversividade do compartimento claro. De forma geral, os dados demonstraram que a manipulação de estímulos ambientais altera os padrões comportamentais exploratórios relacionados à preferência claro/escuro, os quais podem estar associados a diferentes comportamentos relacionados à ansiedade. / The validation of an experimental model to investigate the anxiety must be initially based in a parametric behavioral validation, which involves investigating responses related to the defense behavior of the species to cope with aversive situations in the environment of exposure. Thus, the present study validated the light/dark preference as a behavioral model for the study of anxiety in Carassius auratus (goldfish). The following parameters were evaluated: repetition of exposures to the test apparatus in 5 daily sessions, food deprivation, enriched aquarium, exchange of the water of the test aquarium, different proportions of the light and dark compartments, and exposure to an aquarium with half the length of the control one. The data indicated that the repeated exposures increased the number of crossings, indicating that they increased the exploration of the apparatus by reducing the aversive components of the environment. The fish housed in the enriched aquarium displaced more in the test apparatus, showin no significant preference for either the dark or light side, indicating the aversion of the test environment was attenuated by the exposure to the enriched aquarium. 48-H food-deprived animals showed no statistically significant differences between the times spent in either side of the test aquarium, indicating more intense exploration of the test apparatus in search of food. The animals submitted to the procedure of exchanging the water of the test aquarium before testing did not show preference for either side, indicating that the fish probably release chemical signals in the water which inform their conspecifics of the potential aversiveness of environment. As to the proportion of the aquarium, animals exposed to the 75% light 25% dark test aquarium displaced less than the ones exposed to the control aquarium, indicating that a larger light area can lead to an increase in the aversiveness of the aquarium. When the subjects were exposed to the 75% dark 25% light aquarium, the frequency of crossings was greater for the control group and, in this case, the increased locomotion may be associated with an attenuation in the aversiveness of the environment related to the presence of a larger dark area. In the 87.5% light 12.5% dark aquarium, the animals in the experimental group did not present statistically significant differences between the times spent on either the light or dark sides of the apparatus, indicating that a larger light (aversive) area alters the preference for dark environments. The fishes exposed the aquarium with half the length increased their locomotion, indicating that the length of the apparatus interferes with the aversiveness of the light compartment. Overall, the data showed that manipulating environmental stimuli affects exploratory behavior patterns related to light/dark preference, which may be associated with different anxiety-related behaviors.

<p>Prema novijim istraživanjima, kompleks Carassius auratusčini najmanje pet vrsta roda&nbsp; Carassius: Carassius carassius, Carassius auratus, Carassius langsdorfii, Carassius cuvieri i Carassius gibelio. Vrste ovog roda su morfolo&scaron;ki veoma slične i nemoguće ih je razlikovati na osnovu uobičajenih morfolo&scaron;kih karaktera, te su ranije&nbsp; sve determinisane kao Carassius auratus gibelio ili Carassius gibelio. Jedina vrsta koja se značajnije razlikuje je Carassius carassius.&nbsp; Smara se da su vrste ovog kompleksa unesene u Evropu iz Azije u 17. veku.</p><p>Najveći broj predstavnika kompleksa C. auratus je na teritoriji Evrope proteklih pedesetak godina determinisan je kao vrsta Carassius gibelio(C. auratus gibelio) (Bloch, 1783) (srebrni kara&scaron; ili babu&scaron;ka). S obzirom da su pripadnici ovog kompleksa registrovani u većini vodotokova Evrope, smatraju se najuspe&scaron;nijom invazivnom grupom slatkovodnih riba. Zbog svojih biolo&scaron;kih odlika (brz rast, različiti vidovi razmnožavanja, izuzetna otpornost na nepovoljne uslove) ove vrste veoma brzo postaju kompetitivne autohtonoj ihtiofauni za hranu i stani&scaron;te i neretko imaju izuzetno negativan uticaj na celokupan ekosistem koji nasele.</p><p>U ovoj disertaciji prvi put je izvr&scaron;ena identifikacija vrsta kompleksa Carassius auratus na teritoriji Vojvodine i peripanonske oblasti primenom specifičnih genetičkih markera (dela sekvence cytb gena). Primenom linearne i geometrijske morfometrije ispitivana je morfolo&scaron;ka varijabilnost različitih morfolo&scaron;kih celina (celo telo, kosti glavenog skeleta, cleithrum-a i krlju&scaron;ti) jedinki unutar kompleksa Carassius auratusizmeđu različitih lokaliteta sa različitim ekolo&scaron;kim uslovima (prisustvo predatora i protok), dok je primenom savremenih statističkih i matematičkih metoda (multi-modelne analize) analizirana dinamika rasta recentnih, kao i ranoinvazivnih populacija.</p><p>Metaanalizom dostupnih podataka utvrđena je veoma &scaron;iroka zastupljenost populacija vrsta kompleksa C. auratus na teritoriji Srbije. Beležene populacije su uglavnom pokazivale srednju do visoku zastupljenost (20-40%) u ukupnoj ihtiofauni uz uočljivo povećanje brojnosti u funkciji vremena. Na nekim lokalitetima se u nekoliko uzastopnih studija registruju veoma brojne popu-lacije vrsta ovog kompleksa (40-100% u ukupnom ulovu).</p><p>Za potrebe molekularno- taksonomskih analiza i analiza morfolo&scaron;ke varijabilnosti recentnih populacija uzorkovano je 280 jedinki u periodu 2012 &ndash; 2014.godine sa 14 različitih lokaliteta u&nbsp;Vojvodini i peripanonskoj oblasti. Sve jedinke u uzorku su prvo fotografisane za potrebe analiza linearne i geometrijske morfometrije, uzet je uzorak repnog peraja za dalje genetičke analize, a nakon toga su izvr&scaron;ena sva neophodna merenja&nbsp;&nbsp; morfometrijskih i merističkih karaktera radi ana-lize varijabilnosti među&nbsp; populacijama. Populaciono-genetičkim analizama sekvenci dela cytb gena utvrđeno je da su sve ispitivane jedinke pripadale vrsti Carassius gibelio I. Zbog biolo&scaron;kog stanja uzoraka, determinacija je bila moguća za samo 52 jedinki sa 11 lokaliteta te se ne bi smela isključiti mogućnost postojanja jo&scaron; nekih vrsta kompleksa C. auratus, kao &scaron;to su C. auratus i C. langsdorfi koje su prema navodima drugih autora beležene na teritorijama susednih zemalja.</p><p>Primenom linearne i geometrijske morfometrijske analize ustanovljena je izražena fenoti-pska varijabilnost u obliku tela i odabranih&nbsp; elemenata skeletnog sistema između riba sa različitih lokaliteta. Utvrđeno je odsustvo polnog dimorfizma. Najveću varijabilnost od svih morfolo&scaron;kih parametara pokazala je vrednost za visinu tela, i veličinu glave, dok su kod kostiju najvi&scaron;e varirale vrednosti za os pharyngii na kojoj su ždrelni zubi - dentes pharyngii.</p><p>Prisustvo predatora i protok vode na ispitivanim lokalitetima su ispoljili uticaj na morfolo&scaron;ku varijabilnost riba. Prisustvo predatora je uslovilo pojavu karakterističnog fenotipa riba sa visokim telom koje omogućava lak&scaron;e izbegavanje predatora.</p><p>Za analizu mofolo&scaron;ke varijabilnosti ranih invazivnih populacija vrsta kompleksa C. auratus kori&scaron;ćeni su podaci za 524 jedinke (prilikom izlova determinisane kao C. auratus gibelio) sa tri lokaliteta u Vojvodini iz perioda 1983 &ndash; 1985. godine. Lokaliteti su izabrani prema različitom načinu invazije vrsta kompleksa C. auratus. Analizama linearne morfometije i modela rasta ut-vrđeno je da su se lokaliteti na kojima su bile&nbsp; zastupljene namerne antropogene introdukcije nepoznatog porekla odlikovali mnogo većom morfolo&scaron;kom varijabilno&scaron;ću od lokaliteta u koje su jedinke dospele prirodnim putevima invazije izvećih vodotokova.</p><p>Analizama životne istorije i dinamike rasta na 395 jedinki vrsta kompleksa C. auratus (pri-likom uzorkovanja determinisanih kao C. gibelio) kao invazivne grupe riba i 429 jedinki bodorke kao predstavnika autohtone ihtiofaune u periodu između 1991. i 1999. godine na akumulacijama Međuvr&scaron;je i Gruža utvrđene su razlike između različitih tipova stani&scaron;ta. Nezavisno od vrste, utvrđeno je da jedinke koje žive u sporim i plitkim stani&scaron;tima su krupnije i dostižu veće asimptotske dužine od individua koje nastanjuju brže i uže vodotokove.</p><p>Ovaj rad je među prvim koji primenjuje multi-modelnu analizu u modelovanju rasta slat-kovodnih riba. Rezultati su pokazali da se ova metoda može implementirati i na&nbsp; invazivne vrste riba kako bi se bolje procenio njihov uticaj na autohtonu faunu i&nbsp; eventualno razvile uspe&scaron;nije strategije upravljanja i kontrole njihovih populacija.</p> / <p>According to recent researches,<em> Carassius auratus</em> complex includes at least five <em>Carassius</em> species: <em>Carassius carassius, Carassius auratus, Carassius</em> langsdorfii, <em>Carassius cuvieri</em> and<em> Carassius gibelio</em>. These species are morphologically very similar and it is impossible to differentiate them on the basis of common morphological&nbsp; characters, so they all used to be classified as<em> Carassius auratus gibelio</em> or <em>Carassi</em>us <em>gibelio</em>. The only species that is significantly different is Carassius carassius. It is believed that the species of this complex were brought to Europe from Asia in the 17th&nbsp;&nbsp; century.</p><p>Over the last fifty years most of the members of C. auratus complex in Europe were classified as Carassius gibelio (<em>C. auratus gibelio</em>) (Bloch, 1783) (Silver carp or Gibel carp). Since the members of this complex have been registered in most European watercourses, they are considered to be the most successful invasive group of freshwater fish. Thanks to their biological characteristics (fast growth, different types of reproduction, remarkable resistance to unfavourable conditions) these species quickly become competitive to indigenous ichthyofauna in respect of food and habitat and they often have very negative impact on the entire ecosystem they inhabit.</p><p>This dissertation identifies the species that belong to the<em> </em>Carassius auratus complex in /Vojvodina and peri-Pannonian region using specific genetic markers (ctyb gene sequence). Using linear and geometric morphometrics, we examined morphological variability of different morphological parts (whole body, skull bones, cleithrum and scales) of the members of<em> Carassius auratus</em> complex, in different localities with different ecological conditions (presence of predators and water flow). Modern statistics&nbsp; and mathematical methods (multi-model analysis) were used in the analysis&nbsp; of growth dynamics of both recent and early invasive populations.</p><p>Meta-analyses of the available data have shown that there is a wide population of C. auratuscomplex species&nbsp; in Serbia. The examined populations showed medium to high occurrence (20- 40%) in the entire ichthyofauna, with evident growth over time. A few consecutive studies have registered very large populations of the species of this complex in several localities (40-100% of total catch).</p><p>For the purpose of molecular-taxonomic analyses and the analysis of morphological variability of recent populations, we used a sample of&nbsp; 280&nbsp; units taken in 14 different localities in Vojvodina and peri-Pannonian region in the period from 2012 to 2014. All the units in the sample were first photographed for the purpose of linear and geometric morphometrics, samples of tail fins were taken for further genetic analysis, and then all the necessary evaluations of morphometric and meristic characters were made, as well as the analysis of variability among populations.<br />Population genetic analysis with the application of a genetic marker (cytb gene) has shownthat all the examined units belong to<em> Carassius gibelio</em> species. Due to the biological state of the samples, the determination was possible for only 52 units from 11 localities, so it not impossible that some other species of C. auratus complex such as C. auratus and C. langsdorficould also be found in this region as they have been registered on the territories of the neighbouring countries, as reported by some authors.</p><p><br />Linear and geometric morphometric analysis has shown significant phenotype&nbsp; variability in body shape and selected elements of the skeletal system. It has also proved the absence of sexual dimorphism and showed that locality had a major impact on the variability.</p><p>The largest variability was recorded in terms of body height and head size, while the most variable values with the bones were those referring to os pharyngii with pharyngeal teeth.</p><p>Morphological variability of fish also depended on the presence of predators and the water flow in the examined localities. The presence of predators causes a characteristic phenotype of fish with tall body which enables them to avoid predators more easily.</p><p>In the analysis of morphological variability of early invasive populations of the species of C. auratus complex we used data for 524 units (classified as C. auratusgibelio during the catch) from three localities in Vojvodina in the period from 1983 to 1985. The localities were chosen according to different ways of invasion of the species of C. auratus complex. Linear morphometrics and growth model analyses have shown that the localities with deliberate anthropogenic introduction of unknown origin were characterized with greater variability than the localities populated by natural invasion from larger watercourses.</p><p>The analyses of life history and growth dynamics in 395 members of the species of C. auratuscomplex (classified as C. gibelio during the sampling) as an invasive group of fish, and 429 units of the roach as the representative of the indigenous ichthyofauna in the artificial lakes of Međuvr&scaron;je and Gruža in the period from 1991 to 1999, have established differences among different types of habitats. Regardless of species, the fish that live in slow and shallow habitats are larger and they reach greater asymptotic length than those living in faster and narrower watercourses.</p><p>This study is among the first ones to apply multi-model analyses in modeling freshwater fish growth. The results have shown that this method can be implemented in studying invasive fish species in order to make a better estimation of their influence on indigenous fauna and possibly develop more successful&nbsp; strategies of managing and controlling their populations.</p>

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O conhecimento da morfologia e ultraestrutura dos helmintos permite a correta classificação destes organismos, bem como fornece subsídios que poderão ser utilizados para diagnóstico e controle. A microscopia laser confocal é uma ferramenta para estudar a organização estrutural de várias espécies de helmintos, possibilitando acesso a detalhes morfológicos não evidenciados pela microscopia óptica. Echinostoma paraensei é um trematódeo, digenético, hermafrodita parasito de numerosos hospedeiros vertebrados. Neste trabalho foi investigado o desenvolvimento dos órgãos reprodutivo e a morfometria de E. paraensei, desde a fase jovem até a adulta, como contribuição ao conhecimento do desenvolvimento reprodutivo desta espécie. Os trematódeos foram recuperados aos 3, 4, 5, 6, 7, 10, 14 e 21 dias posterior à infecção (dpi) experimental em hamsters. Estes foram corados em carmim clorídrico, desidratados em série alcoólica e montados em lâmina permanente em bálsamo do Canadá, fotografados e medidos usando microscopia de luz de campo claro (MCC) e microscopia de varredura laser confocal (MVLC). Entre 3 e 4 dpi, os primórdios genitais estavam presentes e nenhuma organização do sistema reprodutivo foi visualizada por MCC e MVLC. Os primórdio do ovário, dos testículos e da bolsa do cirro foram visualizados por MCC aos 5 e 6 dpi, no entanto, MVLC dos helmintos aos 5dpi mostra que estes primórdios, o ootipo e o útero estavam presentes, como estruturas individualizadas. A bolsa do cirro apresenta metratermo e o ovário com primórdio do oótipo adjacente aos 7dpi por MVLC. A vesícula seminal, receptáculo seminal, células diferenciadas nos testículos, ducto e reservatório vitelínico e oviducto foram visualizados após 10 dias, enquanto os espermatozóides na vesícula seminal, ovos e oócitos, células vitelínicas, poro e canal de Laurer aos 14 dias. A morfometria evidencia um acelerado crescimento dos órgãos reprodutores a partir do 7 dia. Os testículos apresentam aumento significativo no comprimento do 7 ao 21 dia e o ovário durante o período de 7 à 10 dpi. Aos 21 dpi, todos os helmintos apresentaram glândulas vitelínicas, útero contendo ovos e espermatozóides no oviducto enquanto outros ovos estão sendo formados. As mudanças morfológicas acentuadas durante a gametogênese consistem no aumento do comprimento do helminto, maturação das gônadas, desenvolvimento e maturação das glândulas vitelínicas. O desenvolvimento do helminto como um todo está relacionado à maturação dos órgãos reprodutivo masculino e feminino indicando o investimento deste trematódeo em garantir a produção e eliminação dos ovos ao meio exterior. / The knowledge about morphology and ultra structure of helminthes are great importance in correct classification these organisms. The Scanning Laser Microscopy (LSM) is an important tool to study the structural organization of several helminthes species. Echinostoma paraensei is a trematode, digenetic, hermaphroditic parasite of several hosts. In this study, the development of reproductive organs and the morphometry of E. paraensei from young stage to adult worm were investigated, to contribute knowledge of the reproductive development of this specie. The trematodes were recovered on 3, 4, 5, 6, 7, 10, 14 and 21 days post infection (dpi) from experimental hamsters. It were dehydrated in alcohol series, stained with hydrochloric carmine, mounted on permanent slide using Canada balsam, photographed and measured using light microscopy (LM) and Scanning Laser Microscopy (LSM). Between 3 and 4 dpi the genital anlage were present and were not observed reproductive system organization by either LM and LSM. The anlage of ovary, testes and Cirruss sac were seen at 5 and 6dpi by LM, however LSM from 5dpi image shows theses anlage, ootype and uterus are present as individualized structure. Cirrus sac showed metraterm and ootype adjacent to primordial ovary were seen at 7 dpi by LSM. The seminal vesicle, seminal receptacle, differentiated cells in the testes, viteline ducts and oviduct were visualized after 10 days infection, while sperms in seminal vesicle, eggs, oocyte, Laurer canal and pore from 14 dpi by LSM. The morphometry shows a rapid growth of reproductive organs from 7th day. The testes have significantly increased length from 7 until 21dpi and ovary from 7 until 10dpi. All helminthes showed vitellines glands, uterus contained eggs and sperm in oviduct while another eggs were forming at 21 dpi. The marked morphologic changes during gametogenesis are increase of body length of helminthes, gonad maturation and development and maturation of vitelline glands. The development of helminthes as a whole is related to maturation of female and male organs of reproductive system showing the investment this trematode taken to ensuring the production, maintenance and delivery the eggs to external environment.

A validação de um modelo experimental para se investigar a ansiedade deve estar baseada inicialmente em uma validação comportamental paramétrica, que pressupõe a investigação de respostas relacionadas ao comportamento de defesa da espécie frente às situações aversivas presentes no ambiente de exposição. Assim, o presente trabalho validou a preferência claro/escuro como um modelo comportamental para o estudo da ansiedade no peixe Carassius auratus (peixe dourado). Foram avaliados os seguintes parâmetros: repetição das exposições ao aparato de teste em 5 sessões diárias, privação de comida, aquário enriquecido, troca de água do aquário antes dos testes, proporções diferentes do compartimento claro e escuro, e aquário com a metade do comprimento. Os dados indicaram que as reexposições aumentaram o número de cruzamentos, indicando que a mesma aumenta a exploração do aparato, atenuando os componentes aversivos do ambiente. Os peixes alojados no aquário enriquecido se locomoveram mais no aparato, e não apresentam preferência significativa por nenhum dos compartimentos (claro/escuro), evidenciando que a aversividade do ambiente claro foi atenuada pelo alojamento em um aquário enriquecido. Os animais privados de comida por 48 h não apresentaram diferenças estatisticamente significativas entre os tempos gastos nos compartimentos claro e escuro do aquário, indicando uma maior exploração do aparato em busca de alimento. Os animais que passaram pelo procedimento de troca de água do aquário de testes não apresentaram preferência por nenhum dos compartimentos, indicando que os peixes, provavelmente, liberam sinalizadores químicos na água que informam seus co-específicos sobre o potencial aversivo do ambiente. Quanto à proporção do aquário, os animais expostos ao aquário teste 75% claro e 25% escuro se locomoveram menos que os do aquário controle, indicando que uma maior área clara, pode levar a uma ampliação da aversividade nesse aquário. Quando os sujeitos foram submetidos ao aquário 75% escuro e 25% claro, a frequência de cruzamentos foi maior no grupo controle e, nesse caso, a maior locomoção pode estar associada a uma atenuação da aversividade do ambiente relacionada a presença de uma maior área escura. No aquário 87,5% claro e 12,5% escuro, os animais do grupo experimental não apresentaram diferenças estatisticamente significativas entre os tempos gastos em nenhum dos compartimentos do aquário, indicando que uma maior área clara (aversiva) altera a preferência por ambientes escuros. Os peixes expostos ao aquário com a metade do comprimento aumentaram sua locomoção, evidenciando que o comprimento do aparato interfere na aversividade do compartimento claro. De forma geral, os dados demonstraram que a manipulação de estímulos ambientais altera os padrões comportamentais exploratórios relacionados à preferência claro/escuro, os quais podem estar associados a diferentes comportamentos relacionados à ansiedade. / The validation of an experimental model to investigate the anxiety must be initially based in a parametric behavioral validation, which involves investigating responses related to the defense behavior of the species to cope with aversive situations in the environment of exposure. Thus, the present study validated the light/dark preference as a behavioral model for the study of anxiety in Carassius auratus (goldfish). The following parameters were evaluated: repetition of exposures to the test apparatus in 5 daily sessions, food deprivation, enriched aquarium, exchange of the water of the test aquarium, different proportions of the light and dark compartments, and exposure to an aquarium with half the length of the control one. The data indicated that the repeated exposures increased the number of crossings, indicating that they increased the exploration of the apparatus by reducing the aversive components of the environment. The fish housed in the enriched aquarium displaced more in the test apparatus, showin no significant preference for either the dark or light side, indicating the aversion of the test environment was attenuated by the exposure to the enriched aquarium. 48-H food-deprived animals showed no statistically significant differences between the times spent in either side of the test aquarium, indicating more intense exploration of the test apparatus in search of food. The animals submitted to the procedure of exchanging the water of the test aquarium before testing did not show preference for either side, indicating that the fish probably release chemical signals in the water which inform their conspecifics of the potential aversiveness of environment. As to the proportion of the aquarium, animals exposed to the 75% light 25% dark test aquarium displaced less than the ones exposed to the control aquarium, indicating that a larger light area can lead to an increase in the aversiveness of the aquarium. When the subjects were exposed to the 75% dark 25% light aquarium, the frequency of crossings was greater for the control group and, in this case, the increased locomotion may be associated with an attenuation in the aversiveness of the environment related to the presence of a larger dark area. In the 87.5% light 12.5% dark aquarium, the animals in the experimental group did not present statistically significant differences between the times spent on either the light or dark sides of the apparatus, indicating that a larger light (aversive) area alters the preference for dark environments. The fishes exposed the aquarium with half the length increased their locomotion, indicating that the length of the apparatus interferes with the aversiveness of the light compartment. Overall, the data showed that manipulating environmental stimuli affects exploratory behavior patterns related to light/dark preference, which may be associated with different anxiety-related behaviors.

Leishmaniasis are zoonosis with different clinical manifestations according to the Leishmania species involved and the host immune response. Leishmania braziliensis complex is responsible for the majority of human Tegumentary Leishmaniasis cases in Brazil and it is endemic in the Triângulo Mineiro region. Our aim was to compare the pathogeny of two different isolates of Leishmania braziliensis complex, obtained from cutaneous lesions of patients from Triângulo Mineiro region, with Leishmania (Viannia) braziliensis reference strain (MHOM/BR/75/M2903). Comparision was done by histopathological and ultrastructural analisys of organs of experimentally infected Hamster golden (Mesocricetus auratus). For that, 106 stationary promastigotes of the two isolates and the reference strain were subcutaneously innoculated in the hind forepaw of Hamster that were killed after 15, 30, 60 e 120 days post infection and then were collected fragments of the skin, popliteal lymph node, liver, spleen and bone marrow. The organs were processed for histopathological and ultrastructural analysis. The results showed differents pathogeny between both isolates and the reference strain, characterized for differences in prepatent period of the macroscopy lesions, in the outcome of the histophatological lesions, in the parasitism and in the capacity to produce metastatic lesions in the lymph node, liver and spleen. / As leishmanioses são zoonoses que produzem diferentes manifestações clínicas dependendo da espécie de Leishmania envolvida e da resposta imune do hospedeiro. O complexo Leishmania braziliensis é responsável pela maioria dos casos da leishmaniose tegumentar humana no Brasil e é endêmica na região do Triângulo Mineiro. Este trabalho teve como objetivo comparar a patogenia de dois diferentes isolados do complexo Leishmania braziliensis, provenientes de lesões cutâneas de pacientes da região do Triângulo Mineiro (MG), com a cepa de referência Leishmania (Viannia) braziliensis MHOM/BR/75/M2903, através de análise histopatológica e ultra-estrutural de órgãos de Hamster golden (Mesocricetus auratus) infectados experimentalmente. Para isto, 106 promastigotas na fase estacionária de desenvolvimento de cada isolado e da cepa de referência foram inoculadas em coxim plantar de Hamsters, os quais, após períodos de 15, 30, 60 e 120 dias de infecção, foram sacrificados e destes retirados fragmentos de pele, linfonodo poplíteo, fígado, baço e medula óssea. Os órgãos foram processados para avaliação histopatológica e ultra-estrutural. Os resultados obtidos dessas análises revelaram diferentes patogenias entre os dois isolados e a cepa de referência, caracterizadas por diferenças no período de prepatência das lesões macroscópicas, no aparecimento das lesões histopatológicas, no parasitismo e na capacidade de produzir lesões metastáticas no linfonodo, fígado e baço. / Mestre em Ciências da Veterinárias

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O conhecimento da morfologia e ultraestrutura dos helmintos permite a correta classificação destes organismos, bem como fornece subsídios que poderão ser utilizados para diagnóstico e controle. A microscopia laser confocal é uma ferramenta para estudar a organização estrutural de várias espécies de helmintos, possibilitando acesso a detalhes morfológicos não evidenciados pela microscopia óptica. Echinostoma paraensei é um trematódeo, digenético, hermafrodita parasito de numerosos hospedeiros vertebrados. Neste trabalho foi investigado o desenvolvimento dos órgãos reprodutivo e a morfometria de E. paraensei, desde a fase jovem até a adulta, como contribuição ao conhecimento do desenvolvimento reprodutivo desta espécie. Os trematódeos foram recuperados aos 3, 4, 5, 6, 7, 10, 14 e 21 dias posterior à infecção (dpi) experimental em hamsters. Estes foram corados em carmim clorídrico, desidratados em série alcoólica e montados em lâmina permanente em bálsamo do Canadá, fotografados e medidos usando microscopia de luz de campo claro (MCC) e microscopia de varredura laser confocal (MVLC). Entre 3 e 4 dpi, os primórdios genitais estavam presentes e nenhuma organização do sistema reprodutivo foi visualizada por MCC e MVLC. Os primórdio do ovário, dos testículos e da bolsa do cirro foram visualizados por MCC aos 5 e 6 dpi, no entanto, MVLC dos helmintos aos 5dpi mostra que estes primórdios, o ootipo e o útero estavam presentes, como estruturas individualizadas. A bolsa do cirro apresenta metratermo e o ovário com primórdio do oótipo adjacente aos 7dpi por MVLC. A vesícula seminal, receptáculo seminal, células diferenciadas nos testículos, ducto e reservatório vitelínico e oviducto foram visualizados após 10 dias, enquanto os espermatozóides na vesícula seminal, ovos e oócitos, células vitelínicas, poro e canal de Laurer aos 14 dias. A morfometria evidencia um acelerado crescimento dos órgãos reprodutores a partir do 7 dia. Os testículos apresentam aumento significativo no comprimento do 7 ao 21 dia e o ovário durante o período de 7 à 10 dpi. Aos 21 dpi, todos os helmintos apresentaram glândulas vitelínicas, útero contendo ovos e espermatozóides no oviducto enquanto outros ovos estão sendo formados. As mudanças morfológicas acentuadas durante a gametogênese consistem no aumento do comprimento do helminto, maturação das gônadas, desenvolvimento e maturação das glândulas vitelínicas. O desenvolvimento do helminto como um todo está relacionado à maturação dos órgãos reprodutivo masculino e feminino indicando o investimento deste trematódeo em garantir a produção e eliminação dos ovos ao meio exterior. / The knowledge about morphology and ultra structure of helminthes are great importance in correct classification these organisms. The Scanning Laser Microscopy (LSM) is an important tool to study the structural organization of several helminthes species. Echinostoma paraensei is a trematode, digenetic, hermaphroditic parasite of several hosts. In this study, the development of reproductive organs and the morphometry of E. paraensei from young stage to adult worm were investigated, to contribute knowledge of the reproductive development of this specie. The trematodes were recovered on 3, 4, 5, 6, 7, 10, 14 and 21 days post infection (dpi) from experimental hamsters. It were dehydrated in alcohol series, stained with hydrochloric carmine, mounted on permanent slide using Canada balsam, photographed and measured using light microscopy (LM) and Scanning Laser Microscopy (LSM). Between 3 and 4 dpi the genital anlage were present and were not observed reproductive system organization by either LM and LSM. The anlage of ovary, testes and Cirruss sac were seen at 5 and 6dpi by LM, however LSM from 5dpi image shows theses anlage, ootype and uterus are present as individualized structure. Cirrus sac showed metraterm and ootype adjacent to primordial ovary were seen at 7 dpi by LSM. The seminal vesicle, seminal receptacle, differentiated cells in the testes, viteline ducts and oviduct were visualized after 10 days infection, while sperms in seminal vesicle, eggs, oocyte, Laurer canal and pore from 14 dpi by LSM. The morphometry shows a rapid growth of reproductive organs from 7th day. The testes have significantly increased length from 7 until 21dpi and ovary from 7 until 10dpi. All helminthes showed vitellines glands, uterus contained eggs and sperm in oviduct while another eggs were forming at 21 dpi. The marked morphologic changes during gametogenesis are increase of body length of helminthes, gonad maturation and development and maturation of vitelline glands. The development of helminthes as a whole is related to maturation of female and male organs of reproductive system showing the investment this trematode taken to ensuring the production, maintenance and delivery the eggs to external environment.

Les changements climatiques et l'émission de polluants dans l'environnement sont susceptibles d'entrainer des effets croisés sur les communautés et le fonctionnement des écosystèmes. Les changements de température sont notamment susceptibles de modifier le comportement et la toxicité des polluants, et de sensibiliser les organismes aux stress chimiques. Inversement, l'exposition à des polluants peut diminuer la tolérance thermique des espèces ectothermes comme les poissons. Dans ce contexte, nous avons étudié la réponse d'une espèce modèle de poissons en toxicologie aquatique, le Carassin doré (Carassius auratus), soumis à des stress chimique et thermique individuels et combinés. Pour cela, le carassin doré a été exposé à un cocktail d'herbicides et de fongicides à des concentrations réalistes d'un point de vue environnemental à deux températures pendant 96h ou 16 jours. Les réponses ont été observées de l'échelle moléculaire à l'échelle individuelle par des approches omiques (protéomique et métabolomique), biochimiques (cortisol, biomarqueurs de stress oxydant et allocation cellulaire énergétique), indicielles (indices somatiques et de condition) et comportementales (remaniement sédimentaire, activité, exploration et comportement alimentaire). Les résultats montrent que l'exposition des poissons aux stress chimique et thermique individuels entraine une réponse générale de stress impliquant des compensations biochimiques, énergétiques, physiologiques et comportementales. L'absence d'effets sur la santé générale des carassins suggère la mise en place d'une réponse de stress efficace et adaptée, bien que l'hypoactivité observée chez les poissons exposés aux cocktails de pesticides soit susceptible d'entrainer une diminution de leurs performances et de leur fitness. A l'inverse, les carassins exposés aux stress chimique et thermique combinés montrent une inhibition de la réponse générale de stress, avec des effets antagonistes sur la sécrétion de cortisol, l'induction de certains systèmes de défense antioxydants et la compensation énergétique. Des effets plus importants sont en revanche observés au niveau comportemental ainsi qu'une diminution significative de la condition générale des poissons. Ces résultats montrent que l'augmentation de la température sensibilise les poissons à la contamination de l'eau par les pesticides. L'inhibition de la réponse de stress chez des poissons exposés à des mélanges complexes de pesticides dans un écosystème soumis à de multiples contraintes pose de nombreuses questions pour la conservation des espèces dans l'environnement. / Crossed-effects between climate change and chemical pollutions were identified on community structure and ecosystem functioning. Temperature rising affect the toxic properties of pollutants and the sensitiveness of organisms to chemicals stress. Inversely, chemical exposure may decrease the thermal tolerance of ectothermic species, as fish. In this context, we studied the response of a biological model in aquatic toxicology, the goldfish (Carassius auratus), to individual and combined chemical and thermal stresses. In this aim, we exposed the goldfish to environmental relevant concentrations of herbicide and fungicide mixtures at two temperatures for 96 hours or 16 days. The fish responses were assessed from the molecular level to individual endpoints, including omic approaches (proteomic and metabolomic), biochemical analyses (cortisol, antioxidant defenses, cellular energy allocation), indexes (somatic and condition factors) and behavioral assays (sediment reworking, activity, exploration and feeding). Our results showed that individual chemical or thermal stresses induced a general stress response including biochemical, metabolic, physiological and behavioral compensations. The absence of deleterious effect on the global condition of fish suggested the implementation of an efficient and adaptive stress response, while the hypoactivity of fish exposed to pesticide mixtures could entrain a decreased performance and fitness into the wild. At the opposite, the combined chemical and thermal stresses induced reciprocal inactivation of the stress response, with antagonism effect on cortisol secretion, antioxidant defense induction and metabolic compensation. However, increased effect on behavioral traits and decreased global condition of fish were observed. Our study showed that temperature rising sensitized fish to pesticide exposure. Finally, inhibited stress response in fish exposed to pesticide cocktails raises concerns about species conservation an ecosystem under multiple pressures.

The bounded-hybrid superiority hypothesis (BHSH) predicts stable hybrid zones are characterized by hybrids having the highest fitness within the zone. The dynamic-equilibrium hypothesis (DEH) predicts hybrids to have the lowest fitness and mating should be strongly assortative in the hybrid zone. I used phenotypic-based hybrid indices (HI) to assess mating patterns, reproductive success, and survival of hybridizing northern flickers (Colaptes auratus) within the hybrid zone at Riske Creek, British Columbia. Contrary to the BHSH, flickers showed significant assortative pairing (P = 0.038) which may result via passive mate choice if yellow and red flickers migrate from allopatric winter ranges. North American band recoveries show red-shafted and yellow-shafted flickers winter on different sides of the Rocky Mountains while red-orange hybrids from Riske Creek winter in the range of red-shafted flickers. Arrival dates of phenotypes did not support the idea that mating patterns are caused passively via different arrival schedules. However, assortative mating patterns did correlate with regional weather patterns along flicker migration routes as well as the North Atlantic Oscillation (NAO) a continental weather pattern that has been shown to influence various aspects of the annual cycle in other birds. If variable weather patterns result in different mating patterns by affecting migration, the geographic location of the northern portion of the zone may be variable due to the migratory behaviour of individuals.<p>There were no differences among yellow, orange and red flickers to win more agonistic contests or have earlier nest initiation dates, larger clutch sizes, greater hatching success, or produce more fledglings. No colour group had a higher likelihood of having a successful compared to a depredated nesting attempt. Aggression was similar between red (N = 21) and yellow flickers (N = 20) during taxidermy model presentations of pure red-shafted and yellow-shafted flickers. Using Akaikes information criterion (AIC) in Program MARK, I determined survival was best modeled as either constant between males and females or varying annually according to weather. Models incorporating HI had less support but suggested that survival is best modeled as a linear relationship where red-shafted flickers have the highest survival. Survival modeled in quadratic relationships found hybrid flickers to have the highest apparent survival estimates in support of the BHSH. Overall there was no support for reduced hybrid fitness, but survival appears to be influenced more by annual variation rather than strictly by an individuals HI. Overall, I failed to find reduced hybrid fitness in support of the DEH but also failed to find increased hybrid fitness as predicted by the BHSH. Annual changes in selection pressure could prevent introgression of hybrid genes throughout the zone if selection favours red-shafted genes in some years and yellow-shafted genes in other years.