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Crestamento bacteriano comum do feijoeiro: patologia de sementes e dinâmica temporal de epidemias / Common halo blight: seed pathology and temporal dynamics of epidemicsPereira, José Luciano de Assis 27 June 2003 (has links)
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Previous issue date: 2003-06-27 / Estudos sobre a patologia de sementes de feijão e a dinâmica temporal de epidemias do crestamento bacteriano comum do feijoeiro foram realizados com o objetivo de melhor conhecer a doença nas condições brasileiras. Em um primeiro estudo avaliou-se a incidência de Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli (Xap) em 19 lotes de sementes provenientes, em sua maioria, do Distrito Federal. As sementes foram avaliadas pelos métodos de semeio direto e de inoculação do extrato de sementes em plantas suscetíveis, em duas condições ambientes, casa-de-vegetação e câmara de crescimento (30°C). Em 16 dos 19 lotes avaliados observou-se contaminação com Xap. Os métodos de plantio direto e extrato de sementes foram eficientes e de uso prático em laboratórios de rotina. Em um segundo estudo avaliou-se a transmissão de Xap, das sementes para as plântulas de feijão, em quatro cultivares e uma linhagem de feijão. Estudou-se ainda o efeito da idade de vagens na contaminação das sementes. Ambos os ensaios foram realizados duas vezes. Xap foi transmitida da semente para as plântulas, em todas as cultivares avaliadas. Além disso, com a maturação das vagens, houve redução significativa na produção de sementes sintomáticas. Finalmente, estudou-se a dinâmica temporal de epidemias do crestamento bacteriano comum do feijoeiro, em Viçosa, MG e no Distrito Federal. Foram avaliados os componentes epidemiológicos taxa de progresso, valor máximo de severidade e a área abaixo da curva de progresso da doença. Tentou-se, ainda, correlacionar dados de temperatura, precipitação e umidade aos de severidade da doença no campo. Detectou-se uma relação entre a severidade da doença no campo e a fenologia da cultura de feijão, além da correlação da temperatura, precipitação e a severidade. Porém, a umidade relativa não foi correlacionada aos dados de severidade obtidos. / Seed pathology of beans and temporal dynamics of common halo blight studies were done to better know about the disease in the Brazilian conditions. The first work concerned to the contamination of bean seeds by Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli was evaluated in 19 samples from Cerrados Brazilian Savana region, Brazil. Growing- on test and extraction followed by inoculation of suspension in bean susceptible plants were the two techniques used to assess the seeds. Growing-on tests were conducted in two environmental conditions: greenhouse and growing chamber at 30°C. X. axonopodis pv. phaseoli was found in sixteen samples. Seeds were placed in sterilized distilled water for bacterial extraction and the suspension obtained was inoculated in bean susceptible plants. Occurrence of symptoms was observed and the pathogen was detected in 16 samples. In the second work seed transmission of X. axonopodis pv. phaseoli was evaluated in some bean cultivars often used in comercial crops in Brazil. Two assays had been carried out and the results showed high rate of seed transmission of X. axonopodis pv. phaseoli in the cultivars. Rates of transmission ranged from 5,66 to 86,36% according to each cultivar. The effect of phenology of pods in seeds contamination was studied. Results showed that as younger as pods are, higher is the incidence of symptomatic seeds. Finally temporal dynamics of bean halo common blight epidemics were analyzed in two Brazilian locations, Federal District (Cerrados Savanna Region) and Viçosa, MG. Three epidemiological components were compared: disease progress rate (r), maximum intensity of disease (Ymax) and area under the viiidisease progress curve (AUDPC). Among the Gompertz, logistic, and monomolecular models, the monomolecular model fitted better disease severity data over time in Viçosa experiments. Disease severity was related to plant phenology, mean temperature, and rain intensity. However no correlation was found between disease severity and relative humidity. / Tese importada do Alexandria
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Tempo de permanência do curativo após mamoplastia de aumento com implantes de silicone:ensaio clínico aleatório / Application time for wound dressing following breast augmentation with silicone implants: randomized controlled trialMendes, Denise de Almeida [UNIFESP] January 2015 (has links) (PDF)
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Previous issue date: 2015 / Introdução: O tratamento da ferida operatória é controverso na literatura e
varia desde não usar curativo, mantê-lo por 24 a 48 horas ou mantê-lo até a
retirada das suturas. Objetivo: Avaliar a influência do tempo de
permanência do curativo após a mamoplastia de aumento. Métodos: 80
pacientes candidatas à mamoplastia de aumento com implantes de silicone
foram distribuídas aleatoriamente em dois grupos. No grupo A o curativo foi
retirado no primeiro dia pós-operatório e no grupo B o curativo foi retirado
no sexto dia pós-oprtório. A colonização cutânea foi verificada por meio de
culturas de amostras coletadas antes e após o curativo ser retirado. A
avaliação da ferida operatória quanto a infecção seguiu os critérios definidos
pelo Centers for Disease Control and Prevention (CDC). A opinião das
pacientes quanto ao curativo foi verificada no 13º dia pós-operatório.
Resultados: Não houve diferença significante entre os grupos antes do
curativo (p=0,198). No sexto dia pós-operatório o crescimento de bactérias
foi significantemente maior no grupo A (p=0,01). Não houve casos de
infecção do sítio operatório. As pacientes preferiram manter o curativo por
um dia e consideraram a manutenção do curativo por um dia mais prática.
Conclusões: A colonização no sexto dia pós-opratório foi maior no grupo
A. Não houve diferença entre os grupos na ocorrência de infecção da ferida
operatória. As pacientes preferiram remover o curativo no primeiro dia pósoperatório
e consideraram mais prático manter o curativo um dia. / Introduction: The treatment of the surgical wound is controversial in
literature and range from not use dressing, keep it for 24 to 48 hours or keep
it until the removal of the sutures. Objective: To evaluate the influence of
application time for wound dressing following breast augmentation.
Methods: 80 patients candidates for augmentation mammoplasty with
silicone implants were randomized into two groups. In group A the dressing
was removed on the first postoperative day and in the group B the dressing
was removed on the sixth postoperative day. The skin colonization was
verified by cultures samples collected before and after the dressing be
removed. The evaluation of the wound on the infection followed the criteria
set by the Centers for Disease Control and Prevention (CDC). The opinion
of patients on the dressing was observed on the 13th postoperative day.
Results: There was no significant difference between the groups before the
dressing (p=0,0198). On the sixth postoperative day bacteria growth was
significantly higher in group A (p=0,01). There were no cases of infection of
the surgical site. The patients preferred to keep the dressing for one day and
considered the maintenance of the dressing for one day more practical.
Conclusions: The colonization on the sixth postoperative day was higher in
group A. There was no difference between groups in the occurrence of
surgical wound infection. The patients preferred to remove the dressing in
the first postoperative day and considered more pratical to keep the dressing
for one day.
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Uso do beta glucano e avaliação de indicadores de estresse e do sistema imune inato de pacus após manejo de transporte / Use of beta glucan and evaluation of stress indicators and the innate immune system of pacus after transport handlingMello, Mariana Maluli Marinho de [UNESP] 27 July 2016 (has links)
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A versão submetida por você é considerada a versão final da dissertação/tese, portanto não poderá ocorrer qualquer alteração em seu conteúdo após a aprovação.
Corrija esta informação e realize uma nova submissão contendo o arquivo correto.
Agradecemos a compreensão. on 2016-09-05T17:59:45Z (GMT) / Submitted by Mariana Maluli Marinho de Mello null (marimaluli@gmail.com) on 2016-09-06T20:23:53Z
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Dissertação Mariana Maluli IMPRIMIR.pdf: 1983967 bytes, checksum: 0667ac45479a626e249d2757e1cefb45 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-09-08T16:41:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2016-07-27 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Manejos inerentes da piscicultura intensiva, como o transporte, desencadeiam resposta de estresse nos animais, podendo causar perdas na produtividade. Como alternativa, o β-glucano, um polissacarídeo derivado da parede celular de cereais, bactérias e fungos, vem sendo muito utilizado na aquicultura pelo seu efeito imunoestimulante. Há evidências de que o β-glucano minimiza os efeitos negativos do estresse por atuar no sistema imune, porém é pouco investigado o seu efeito direto sobre a resposta clássica de estresse. Neste contexto, o presente estudo avaliou, em juvenis de pacu, o uso oral de 0.1% de duas gerações de β-glucano, de diferentes graus de pureza e processamentos, na resposta de estresse e no sistema imune inato, após transporte e inoculação com Aeromonas hydrophila. Avaliamos a concentração de cortisol e glicose plasmáticos como indicadores da resposta de estresse, a atividade respiratória de leucócitos, a atividade hemolítica do sistema complemento, a atividade de lisozima e contagem total e diferencial de leucócitos, como indicadores do sistema imune inato, e o hematócrito, número de eritrócitos, concentração de hemoglobina e volume corpuscular médio de eritrócitos como indicadores hematológicos. As duas gerações de β-glucano utilizadas modularam os níveis de cortisol circulantes, mantendo os níveis elevados até 24 horas após o transporte, sem alteração após o desafio bacteriano. O β-glucano aumentou a atividade hemolítica do sistema complemento e de lisozima após o manejo e após a inoculação bacteriana, e manteve a população de leucócitos circulantes após recuperação de leucopenia, evidenciando o efeito imunoestimulante. A análise geral dos resultados deste estudo sugere o fortalecimento da resposta imune de juvenis de pacu alimentados por 15 dias antes de manejo estressante, com ração contendo 0.1% β-glucano derivado da parede celular de levedura (Sacaromyces cerevisiae). / Inherent handling in intensive fish farming, such as transport, trigger stress response in animals, and may cause losses in productivity. As an alternative, the β-glucan, a polysaccharide derived from the cell walls of cereals, bacteria and fungi, has been widely used in aquaculture due their immunostimulatory effect. The β-glucan minimizes the negative effects of stress by acting on the immune system, but it is little investigated its direct effect on the classical stress response. In this context, the present study evaluated in pacu, the oral administration of 0.1% of two generations of β-glucan, with different degrees of purity and processing methods, on the stress and innate immune system responses, after transport and inoculation with Aeromonas hydrophila. We evaluated the plasma concentration of cortisol and glucose, as stress response indicators, the respiratory activity of leukocytes, the hemolytic activity of the complement system, lysozyme activity and total and differential counts of leukocytes as innate immune system indicators, and hematocrit, number of erythrocytes, hemoglobin concentration, and mean corpuscular volume of erythrocytes as hematological indicators. The two generations of β-glucan modulated the circulating levels of cortisol, keeping the high levels 24 hours after transportation, without changes after the bacterial challenge. The β-glucan increased the hemolytic activity of the complement system and lysozyme after handling and after bacterial inoculation, and kept the population of circulating leukocytes after recovery of leukopenia, demonstrating the immunostimulatory effect. The general results of this study suggest the strengthening of the immune response of pacu juveniles fed for 15 with feed containing 0,1% β-glucan derived from yeast cell wall (Sacaromyces cerevisiae) days before stressful handling. / CNPq: 138990/2014-0
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Influ?ncia da mat?ria org?nica dissolvida al?ctone e aut?ctone sobre o balan?o de carbono em sistemas aqu?ticos: um experimento em mesocosmosMoura, Caroline Gabriela Bezerra de 28 February 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-02-28 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / O aumento da concentra??o de CO2 na atmosfera tem sido observado, principalmente a partir da revolu??o industrial. Uma das causas principais desse comportamento tem sido a queima de combust?veis f?sseis. Isso tem levado a altera??es globais no ciclo do carbono. Desta forma tem sido de suma import?ncia trabalhos que mostrem a influ?ncia dos sistemas em geral e suas contribui??es relativas na din?mica e ciclo do carbono. Dentro deste contexto, os ecossistemas aqu?ticos apresentam import?ncia no processamento da mat?ria org?nica produzida internamente nos sistemas aqu?ticos (aut?ctone), bem como a mat?ria org?nica trazida dos sistemas terrestres (al?ctone). Os principais organismos que metabolizam a mat?ria org?nica dissolvida (carbono org?nico dissolvido COD) presente nos sistemas aqu?ticos s?o as bact?rias. No entanto a qualidade da mat?ria org?nica determina a prefer?ncia e a via metab?lica (produ??o bacteriana - PB ou respira??o bacteriana - RB) pela qual o carbono ser? direcionado quando assimilado pelas bact?rias. Nos sistemas aqu?ticos a diversidade da mat?ria org?nica presente, muitas vezes estimula a produ??o bacteriana. Desta forma, os objetivos deste trabalho foram avaliar os efeitos do COD al?ctone e aut?ctone na PB e RB, al?m de avaliar o efeito da mistura de COD sobre o balan?o de CO2 no experimento de mesocosmo. Para testar os objetivos realizamos um experimento de mesocosmo com o arranjo experimental do tipo (2x2) destinado a simular condi??es onde houvesse o predom?nio de mat?ria org?nica aut?ctone (fitopl?ncton), al?ctone (detrito de vegeta??o terrestre) e ambas combinadas. Consistindo em quatro tratamentos incluindo o Controle. A dura??o do experimento foi de 42 dias. Verificamos no geral que os tratamentos enriquecidos com mat?ria org?nica al?ctone apresentaram as maiores taxas metab?licas (RB, CO2), o que provavelmente esteve relacionado ? qualidade da mat?ria org?nica utilizada. Conclu?mos que o aporte de mat?ria org?nica de origem terrestre resulta em aumento da atividade de decomposi??o resultando na condi??o de heterotrofia nos tanques estudados. Conclu?mos ainda que com o esgotamento da mat?ria, os tanques passaram a apresentarem-se subsaturados em CO2, resultando na condi??o de autotrofia. Conclu?mos tamb?m que nos tanques com mistura de fonte o efeito observado foi antag?nico. / The increased concentration of CO2 in the atmosphere has been observed, mainly from the industrial revolution. One of the main causes of this behavior has been the burning of fossil fuels. This has led to changes in the global carbon cycle. Thus it has been extremely important work showing the influence of systems in general and their contributions on the dynamics and the carbon cycle. Within this context, aquatic ecosystems have importance in the processing of domestically produced organic matter in aquatic systems (indigenous) and the organic matter brought from the terrestrial (allochthonous). The main organisms that metabolize dissolved organic matter (dissolved organic carbon - DOC) present in aquatic systems is bacteria. However the quality of organic matter determines the preference and the metabolic pathway (bacterial production - PB or bacterial respiration - RB) by which carbon will be directed when assimilated by bacteria. In aquatic systems, the diversity of organic matter present, often stimulates bacterial production. Thus, the objectives were to evaluate the effects of allochthonous and autochthonous DOC in the PB and RB, and to evaluate the effect of mixing of DOC on the CO2 balance in the mesocosm experiment. For testing purposes we conducted a mesocosm experiment with the experimental arrangement of type (2x2) to simulate conditions where there was a predominance of autochthonous organic matter (phytoplankton), allochthonous (terrestrial vegetation detritus) and both combined. Consisting of four treatments including control. The experiment lasted 42 days. We note that in general the treatments enriched with allochthonous organic matter showed the highest metabolic rates (RB, CO2), which probably was related to the quality of organic matter used. We conclude that the input of organic matter from terrestrial origin results in increased activity of decomposition resulting in the condition of heterotrophy in the tanks studied. We also concluded that the exhaustion of matter, the tanks began to present themselves in subsaturados CO2, resulting in the condition of autotrophy. We also conclude that the tanks blend with the source of the observed effect was antagonistic.
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Determina??o do coeficiente de decaimento bacteriano em wetland - alagado constru?doBeda, Juliana Neves 22 September 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-09-22 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Wetlands systems are considered nowadays as a treatment method that uses simple,
easy operation and low cost technology, which has been used in various parts of the world and
also in Brazil. Used alone or as a complement to other types of treatment systems, once it
effectively removes nutrients, pathogens and other pollutants in the water.
Due to the high complexity found in wetlands, making it difficult to predict the
response of the system to treat wastewater, one should consider as ideal to base the sizing of
the wetland system over the necessary removal of this parameter instead of scaling it from
empiricism.
The study was conducted to determine the coefficient of bacterial decrease in the
Wetland unit located at Ponta Negra Station Sewage Treatment, located in Natal, the coastal
region of Rio Grande do Norte.
The most representative model to determine the bacterial decrease in this system was
the one from Chick for hydraulic piston system. Kb of 0.37 d-1 were found for the flow rate of
15m?/d, while for the system operating at maximum design flow, 30m?/d, the Kb of 0.98 d-1
was found / Os sistemas Wetlands -alagados constru?dos- s?o considerados atualmente como um
m?todo de tratamento que utiliza tecnologia simples, de f?cil opera??o e custo baixo, que tem
sido utilizado em v?rias partes do mundo, bem como no Brasil. Utilizado isoladamente ou
como complemento de outros tipos de sistemas de tratamento, uma vez que remove
eficientemente nutrientes, outros poluentes e pat?genos presentes na ?gua.
Devido ? alta complexidade encontrada nos alagados constru?dos, dificultando a previs?o
da resposta do sistema ao tratar efluentes, deve-se considerar como ideal basear o
dimensionamento do sistema wetland em rela??o a necess?ria remo??o deste par?metro ao
inv?s de dimension?-lo a partir de empirismo.
Foi realizado o estudo para a determina??o do coeficiente de decaimento bacteriano na
unidade Wetland localizada na Esta??o de Tratamento de Esgotos Ponta Negra, situado na
cidade de Natal, regi?o litor?nea do Estado do Rio Grande do Norte.
O modelo mais representativo para determinar o decaimento bacteriano neste sistema foi o
de Chick para regime hidr?ulico em pist?o. Foram encontrados Kb de 0,37 d-1 para vaz?o
15m?/d. J? para o sistema funcionando a vaz?o m?xima de projeto, 30m?/d, obteve-se o Kb de
0,98 d-1
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Termoterapia e controle biológico para manejo do cancro bacteriano em videiraCARVALHO, Francisco Conrado Queiroz 26 February 2016 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-12-01T13:10:00Z
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Previous issue date: 2016-02-26 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Bacterial canker, caused by Xanthomonas campestris pv. viticola, has been responsible for significant economic losses on the grapevine crop in Brazilian states of Pernambuco and Bahia, located in the São Francisco river Valley. This work evaluated the effect of thermotherapy on cuttings of cultivars Isabel and Red Globe on the viability of plantlets and eradication of X. campestris pv. viticola, and the effect of combination of biological control agents (BCA) and thermotherapy on the pathogen eradication and disease severity reduction. The cuttings were treated at 50, 52 and 54°C during 30, 45 and 60 min, planted, and after 45 days the plantlets were analyzed for growth. The eradication of X. campestris pv. viticola was evaluated at 50 to 52°C and 45, 50 and 60 min by quantifying bacterial populations on cuttings before planting and epidemiological components of bacterial canker, 120 days after planting. Only the temperature of 54°C, mainly during 45 and 60 minutes, affected negatively leaf number, plant height, and length and volume of root system. The bacterial population was reduced in cuttings of both cultivars. No binomial temperature/time was able to eradicate X. campestris pv. viticola, but at 50 and 52°C during 45 to 60 min, canker symptoms on the branches were reduced from 65.5 to 95.9%. To evaluate the combined effect of BCA and thermotherapy, 23 BCA were sprayed on the leaves of 'Red Globe' and 24 h later the pathogen was inoculated. After 40 days, the incubation period and disease severity were evaluated. It was also determined the antibacterial activity of BCA to the pathogen, by testing for antibiotic production, detection of volatile substances, proteases and ammonia. Although not able to eradicate the pathogen, bacterial strains LCB 6, LCB 30, LCB 33, UNEB 27 and RAB 9 (108 CFU/mL), and yeast strains L7, L8 and LF (107 cel/mL) reduced bacterial canker, exhibiting at least one type of antibacterial activity. Two BCA (LCB 6 – Bacillus subtilis and LF - Saccharomyces cerevisiae) were combined with thermotherapy (50 and 52°C for 45, 50 and 60 min). The cuttings were subjected to thermotherapy, followed by immersion during two hours in the suspension of LCB 6 and LF, and the plantlets were sprayed weekly, through 15 weeks. The plantlets were evaluated 120 days after planting. No combination was able to eradicate X. campestris pv. viticola, but some of them reduced the disease severity on leaves and branches. The best results were obtained by combined use of LCB 6 –Bacillus subtilis and thermotherapy at 52°C during 45 min, which is recommended for the integrated management of bacterial canker of grapevine. / O cancro bacteriano, causado por Xanthomonas campestris pv. viticola, tem sido responsável por significativos prejuízos econômicos na cultura da videira no Submédio do Vale do São Francisco, estados de Pernambuco e Bahia, Brasil. Este trabalho avaliou o efeito da termoterapia em bacelos de videira das cultivares Isabel e Red Globe na viabilidade de mudas e na erradicação de X. campestris pv. viticola, e também a combinação de agentes de controle biológico (ACB) e termoterapia na erradicação do patógeno e na redução da severidade da doença. Os bacelos foram tratados a 50, 52 e 54°C nos tempos de 30, 45 e 60 min, plantados, e o crescimento das mudas avaliado após 45 dias. A erradicação de X. campestris pv. viticola foi determinada nas temperaturas 50 e 52°C e tempos de 45, 50 e 60 min, quantificando-se a população bacteriana nos bacelos antes do plantio e componentes epidemiológicos do cancro bacteriano, 120 dias após o plantio. Apenas a temperatura de 54°C, principalmente durante 45 e 60 min, interferiu negativamente no número de folhas, altura da planta, comprimento e volume do sistema radicular. A população bacteriana foi reduzida nos bacelos de ambas cultivares. Nenhum binômio temperatura/tempo foi capaz de erradicar X. campestris pv. viticola, mas os sintomas de cancros nos ramos foram reduzidos de 65,5 a 95,9% nos tratamentos a 50 e 52°C durante 45 e 60 min. No estudo do efeito combinado de biocontrole e termoterapia, 23 isolados de ACB foram pulverizados nas folhas de ‘Red Globe’, com inoculação do patógeno após 24 h. Após 40 dias, o período de incubação e a severidade da doença foram avaliados. Foi determinada a atividade antibacteriana dos ACB ao patógeno, detectando-se a produção de antibióticos, substâncias voláteis, proteases e amônia. Apesar de não serem capazes de erradicar o patógeno, cinco isolados de bactérias LCB 6, LCB 30, LCB 33, UNEB 27 e RAB 9 (108 UFC/mL), e três isolados de leveduras L7, L8 e LF (107 cel/mL) se destacaram na redução do cancro bacteriano, exibindo pelo menos um tipo de atividade antibacteriana. Dois isolados de ACB (LCB 6 – Bacillus subtilis e LF – Saccharomyces cerevisiae) foram combinados à termoterapia (50 e 52°C for 45, 50 e 60 min). Os bacelos submetidos aos tratamentos termoterápicos, foram imersos posteriormente, durante 2 h, na suspensão de LCB 6 e LF e as mudas foram pulverizadas semanalmente, por 15 semanas. As plântulas foram avaliadas 120 dias após o plantio. Nenhuma combinação foi capaz de erradicar X. campestris pv. viticola, mas reduções na severidade da doença nas folhas e ramos foram observadas, sendo os melhores resultados obtidos com o uso combinado do isolado da bactéria LCB 6 – Bacillus subtilis e termoterapia de 52°C durante 45 min, o qual é indicado para o manejo do cancro bacteriano.
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Formação de biofilme e análise bidimensional de proteínas de Xanthomonas campestris pv. viticolaGUERRA, Myrzânia de Lira 24 July 2015 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-03-24T15:08:49Z
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Previous issue date: 2015-07-24 / Xanthomonas campestris pv. viticola (Xcv) is the causal agent of grapevine bacterial canker. In the Submédio do Vale São Francisco in the northeast of Brazil, bacterial canker is one of the most important grapevine diseases, responsible for severe damage and representing a serious risk to Brazilian viticulture and wine production. The aims of this study were to: a) evaluate the ability of seven Xcv strains to adhere and form biofilms in vitro and to determine the influence of the culture medium and surfaces on biofilm formation, besides to study the biofilm architecture and swarming motility; and b) optimize a method of protein extraction for proteomic analysis of the Xcv, comparing the efficiency of four methods, based on the twodimensional gel electrophoresis profile (2D-PAGE). All the strains adhered to the wells of the polystyrene microtiter plate and formed biofilms in all liquid culture medium (nutrient brothdextrose- yeast extract, yeast extract-dextrose-calcium carbonate, KADO 523 and Luria-Bertani), though to different degrees (weak, moderate and strong). In glass tubes, only Xcv229 and Xcv158 strains formed biofilms. We identified Xcv229 as a strong biofilmproducing strain. Using confocal laser scanning microscopy (CLMS) only Xcv229 showed an initial matrix of biofilm structure after 24 h of growth. Scanning electron microscopy (SEM) images of strains Xcv229 and Xcv158 grown for 36 h on microtiter plates revealed typical biofilm architectures. Strain Xcv158 displayed a higher swarming motility than Xcv229, showing that in this case, biofilm formation is not motility-dependent. This is the first report of biofilm production by the bacterial plant pathogen Xcv. Trizol®, Phenol, Centrifugation and Lysis methods were tested and through quantitative and qualitative analysis, the most suitable method to obtain high-quality protein was selected. All methods enabled the extraction of a significant amount of proteins; nevertheless, the centrifugation method allowed obtaining the highest concentration of solubilized proteins. However, the analysis of the 2D-PAGE gel images revealed a larger number of spots in the lysis method when compared to the others. Taking into consideration the quality of the results and the practical advantages of the lysis method, this is recommended as the best option for total protein extraction of Xcv for proteomic studies. / Xanthomonas campestris pv. viticola (Xcv) é o agente causal do cancro bacteriano da videira. No Submédio do Vale São Francisco, no nordeste do Brasil, o cancro bacteriano é uma das doenças mais importantes dessa cultura, sendo responsável por grandes prejuízos, o que representa um sério risco para a viticultura brasileira. Os objetivos deste estudo foram: a) avaliar a capacidade de sete isolados de Xcv para aderir e formar biofilmes in vitro e determinar a influência do meio de cultura e das superfícies na formação de biofilme, além de investigar a arquitetura do biofilme e motilidade swarming; e b) otimizar um protocolo para extração de proteínas para análise da proteômica de Xcv, comparando a eficiência de quatro métodos com base no perfil de eletroforese em gel bidimensional (2D-PAGE). Todos os isolados aderiram aos poços da placa de microtitulação de poliestireno e formaram biofilmes nos meios de cultura líquidos testados (caldo nutriente-dextrose-extrato de levedura, extrato de levedura-dextrose-carbonato de cálcio, KADO 523 e Luria-Bertani), em níveis fraco, moderado e forte. Em tubos de vidro, apenas os isolados Xcv229 e Xcv158 formaram biofilmes. Xcv229 foi considerado um forte produtor de biofilme. Na microscopia confocal a laser (MCL) apenas em Xcv229 visualizou-se a matriz inicial da estrutura do biofilme, após 24 h de crescimento. As imagens da microscopia eletrônica de varredura (MEV) de Xcv229 e Xcv158 crescidos durante 36 h em placas de microtitulação revelaram arquiteturas típicas de biofilme. O isolado Xcv158 apresentou uma maior motilidade swarming do que Xcv229, mostrando que, neste caso, a formação de biofilme é independente da motilidade. Este é o primeiro relato de produção de biofilme bacteriano pela fitobactéria Xcv. Os métodos Trizol®, fenol, centrifugação e lise foram analizados quantitativa e qualitativamente, para selecionar o mais adequado na obtenção de proteína de alta qualidade. Todos permitiram a extração de uma quantidade significativa de proteínas, no entanto, o método de centrifugação resultou numa maior concentração de proteínas solubilizadas. A análise das imagens do gel 2D-PAGE revelou um maior número de spots no método de lise, quando comparado com os outros. Levando-se em consideração a qualidade dos resultados e as vantagens práticas do método de lise, este é recomendado como a melhor opção para extração de proteínas totais de Xcv para estudos de proteômica.
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Periodontite, aterosclerose e cardiopatia isquêmica / Periodontitis, atherosclerosis and ischemic heart diseaseOliveira, Fernando José de 16 August 2018 (has links)
Orientador: Reinaldo Wilson Vieira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T22:33:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2010 / Resumo: Objetivo: Processos inflamatórios e infecciosos mediados por bactérias em sítios distantes têm sido descritos como fator de risco à doença coronariana isquêmica aguda (DCIA). Métodos: Cento e oitenta e um pacientes com DCIA, com e sem periodontites crônicas, foram incluídos neste estudo. Os pacientes foram admitidos no HC da UNICAMP e estratificados em três grupos: grupo 1- pacientes com periodontite crônica grave (31 homens e 19 mulheres; média de idade 55,1 ± 11,29 anos); grupo 2- pacientes com periodontite crônica leve (40 homens e 28 mulheres; média de idade 54,8 ± 10,37 anos); grupo 3- pacientes desdentados (43 homens e 20 mulheres; média de idade 67,5 ± 8,55 anos). Amostras sanguíneas foram coletadas para mensurar os perfis lipídico, hematológico e glicêmico. Além disso, biópsias de 17 artérias coronárias com aterosclerose e igual número de artérias torácicas interna sem degeneração aterosclerótica no grupo 1 foram investigadas. Para análise estatística utilizou-se a análise de variância (ANOVA) e o teste de Scheffé para comparações múltiplas. Resultados: Triglicérides e LDL estavam elevados no grupo 1 em relação ao grupo 2. O HDL apresentou-se reduzido em 20% dos pacientes do grupo 1, e em 8% nos desdentados. A glicemia estava elevada no grupo 1. DNA de bactérias periodontais foram detectados em 58,8% das artérias coronárias. Conclusões: Pacientes com DCIA e periodontite crônica grave podem apresentar perfil lipídico alterado, como também microorganismos associados com as periodontites crônicas graves podem permear dentro de vasos coronarianos / Abstract: Objective: Infectious and inflammatory processes mediated by bacteria in distant sites have been described as a risk factor for acute ischemic heart disease (AIHD). Methods: One hundred one patients with AIHD with and without chronic periodontitis (CP) were included in this study. Patients were admitted to the HC-UNICAMP and stratified into three groups: in group 1, we selected patients with severe chronic periodontitis (31 men and 19 women, mean age 55,1 ± 11,29 years old); the group 2 with mild chronic periodontitis (40 men and 28 women, mean age 54,8 ± 10,37 years old) and group 3 represented by the toothless (43 men and 20 women, mean age 67,5 ± 8,55 years old). Blood samples were collected to measure the lipid profiles, hematological and blood glucose levels. In addition, biopsies of seventeen coronary arteries with atherosclerosis and an equal number of internal thoracic artery without atherosclerotic degeneration in group 1 were investigated. Statistical analysis by analysis of variance (ANOVA) and Scheffé test for multiple comparisons was performed. Results: Triglyceride and LDL levels were elevated in group 1 than in group 2. HDL were reduced by 20% in group 1 and remained reduced by 8% in toothless. Blood glucose was higher in group 1. DNA of periodontal bacteria was detected in 58,8% of the coronary arteries / Doutorado / Fisiopatologia Cirúrgica / Doutor em Ciências
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Is there an association between periodontal pathogens colonization and the frequency of some specific serotype of Aggregatibacter actinomycetemcomitans? / Existe uma associação entre a colonização de patógenos periodontais e a frequência de sorotipos específicos de aggregatibacter actinomycetemcomitans?Paulo Roberto Orzechowski 30 March 2012 (has links)
Aggregatibacter actinomycetemcomitans is a gram-negative, facultative anaerobic coccobacillus bacterium that colonizes the human oral cavity. Regarding the bacterial consortium found into biofilms, previous studies have suggested that the occurrence of particular serotypes of A. actinomycetemcomitans may be related to other oral microorganisms. Interestingly, the relations among these bacterial species seem to be under influence of geographic and ethnical aspects. Objective: This study aimed to evaluate the frequency of A. actinomycetemcomitans serotype-specific antigens and its association with Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Tannerella forsythia and Campilobacter rectus in Brazilian subjects. Method: A wide group of subjects (n=1320) had their periodontal status determined and were screened for the subgingival presence of A. actinomycetemcomitans serotypes. Then, a total of 263 individuals A. actinomycetemcomitans positive for serotypes A, B, C and E were considered in this survey. Subsequently, in this same group of positive subjects, the presence of P. gingivalis, P. intermedia, T. forsythia and C. rectus from periodontal pockets were also evaluated by PCR. Result: Out of 263 subjects investigated, A. actinomycetemcomitans serotype A was detected in 28.5% subjects; serotype B in 15.97%; serotype C in 51.71% and serotype E in 3.80% subjects. The frequency of serotype A of A. actinomycetemcomitans was significantly higher in C. rectus positive subjects than in P. gingivalis, P. intermedia or T. forsythia positive subjects. Additionally, the frequency of serotypes B and C were significantly higher in both C. rectus and T. forsythia positive subjects in comparison to P. gingivalis and P. intermedia positive subjects. Meanwhile, the frequency of serotype E was not associated with the presence of the other periodontal pathogens investigated. Conclusion: We observed a positive association between A. actinomycetemcomitans serotypes A with C. rectus and between B and C serotypes with C. rectus and T. forsythia. / Aggregatibacter actinomycetemcomitans é uma bactéria do tipo cocobacilo anaeróbia facultativa gram-negativa que coloniza a cavidade oral humana. Levando em consideração as associações bacterianas encontradas no biofilme dentário, estudos prévios têm sugerido que a ocorrência de sorotipos específicos de A. actinomycetemcomitans pode estar relacionada à ocorrência de outros micro-organismos orais. Curiosamente, as relações entre essas espécies de bactérias parecem sofrer influência de aspectos geográficos e étnicos. Objetivo: Este estudo tem como objetivo avaliar a frequência de sorotipo-específicos de A. Actinomycetemcomitans e suas associações com Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Tannerella forsythia e Campilobacter rectus em indivíduos brasileiros. Materiais e Métodos: Um extenso grupo de indivíduos (n=1320) teve sua condição periodontal determinada e foram selecionados pela presença subgengival de algum sorotipo de A. actinomycetemcomitans. Sendo assim, um total de 263 indivíduos positivos para os sorotipos A, B, C e E foram considerados nessa pesquisa. Posteriormente, nesse mesmo grupo de indivíduos positivos, foram avaliadas, por PCR, a presença de P. gingivalis, P. intermedia, T. forsythia e C. rectus nas bolsas periodontais. Resultados: Dos 263 indivíduos investigados, o sorotipo A de A. actinomycetemcomitans foi detectado em 28,5% dos casos, o sorotipo B em 15,97%, o sorotipo C em 51,71% e o sorotipo E em 3,80% dos indivíduos. A frequência do sorotipo A de A. actinomycetencomitans foi significativamente maior em indivíduos positivos para C. rectus do que em indivíduos positivos para P. gingivalis, P. intermedia ou T. forsythia. Além disso, a frequência de sorotipos B e C foi significativamente maior tanto em indivíduos positivos para C. rectus quanto em T. forsythia quando comparados a indivíduos positivos para P. gingivalis e P. intermedia. Entretanto, a frequência do sorotipo E não foi associada com a presença de nenhum dos periodontopatógenos investigados. Conclusão: Observamos uma associação positiva entre o sorotipo A de A. actinomycetemcomitans com C. rectus e entre o sorotipo B e C com C. rectus e T. forsythia.
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Estudo sobre a atividade antimicrobiana de substÃncias extraÃdas e purificadas de secreÃÃes da pele de anfÃbios / Estudo sobre a atividade antimicrobiana de substÃncias extraÃdas e purificadas de secreÃÃes da pele de anfÃbiosCarlos Iberà Alves Freitas 14 November 2003 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A emergÃncia de mocroorganismos resistente a multidrogas, tais como Staphylococcus aureus as resistentes a meticilina, Enterococcus resistente a vancomicina, e Mycobacterium tuberculosis resistente a drogas, tem incitado esforÃospara desenvolver e pesquisar novas classes de antibiÃticos que possam ter utilidade clÃnica. Nos Ãltimos anos, uma variedade de antibiÃticos de baixo peso molecular tÃm sido isolados de diversas espÃcies animais. Estes agentes incluem peptÃdeos, lipÃdios, e alcalÃides, exibem atividade antibiÃtica contra micrÃbios do meio ambiente e considera-se que desempenhem um papel na imunidade inata. Compostos com largo espectro de atividade antimicrobiana que sÃo sintetizados pelas glÃndulas granulares presentes na pele de anuras (rÃs e sapos) tÃm recebido uma crescente atenÃÃo como agentes terapÃuticos em potencial. NÃs relatamos aqui a descoberta de um antibiÃtico esteroidal de atividade de largo espectro, bufadienolÃdeos, chamados hellebrigenin, telocinobufagin, marinobufagin e bufalin de Bufo schneideri, um sapo Brasileiro, com atividade inibitÃria diferenciada contra sete microorganismos e nenhuma atividade contra Pseudomonas aeruginosa. A secreÃÃo da pele do sapo foi obtida porcompressÃo manual das glÃndulas paracnemis e tibial. Tr~e peptÃdeos com estruta possivelmente relacionada com uma potente atividade inibitÃria para bactÃria gram positiva, Staphylococcus aureus e uma potente proteÃna com forte atividade antimicrobiana contra Pseudomonas aeruginosa (MIC = 9,64 microg/ml) foi isolada com secreÃÃes da pele de Leptodactylus pentadactylus estimuladas por adrenalina obtidas por injeÃÃo subcutÃnea de 500 micro l (100 microg/ml) e caracterizada. Os bufadienolÃdeos foram obtidos com separaÃÃo em CLAE de fase reversa sendo executado utilizando-se uma coluna C-18 (15 micro m, 100 Ao, Shim-pack PREP 250 mm x 25 mm) com um gradiente de 0-40 % de acetonitrila/Ãgua e 0,05 % de Ãcido trifluoroacÃtico. AnÃlise de NMR de alta resoluÃÃo das amostras purificadas por aplicaÃÃo de seqÃÃncia de pulsos modernos tais como 1H, 1H-COSY e NOESY, e determinaÃÃo da correlaÃÃo heteronuclear dos carbono-hidrogÃnio ligados diretamente 1H, 13C-COSY (HETCOR) e via detecÃÃo do hidrogÃnio inversa (HMQC), bem como o seqÃenciamento a longa distÃncia, COLOC e HMBC, permitindo assim sua identificaÃÃo como um esterÃide do tipo bufodienolÃdeo. A proteÃna de L. pentadactylus foi purificada por cromatografia em Sephacryl S-400 (460 mm x 6 mm) eluÃda com um tampÃo (Tris â HCl 0,05 N) e sua pureza foi avaliada poreletroforese em condiÃÃes desnayurantes e nÃo desnaturantes.A proteÃna total foi determinada pelo mÃtodo de Bradford usando albumina soro bovina como padrÃo. O isolamento dos peptÃdeos foi efetuado usando-se o exsudato liofilizado e redissolvendo em Ãgua bidestilada/TFA 0,05 % (20:1; P:V) e corrido numa coluna C18 de fase reversa em CLAE (15 micro m, 100 Ao, Shim-pack PREP 250 mm x 25 mm) eluÃda com um gradiente linear de 5 - 80% em 103 min num fluxo de 5 ml/min com acetonitrila/Ãgua e Ãcido trifluoroacÃtico 0.05 %. A atividade antimicrobiana de todas as amostras foi monitorada pelos mÃtodos de Bauer â Kirby e placa de microdiluiÃÃo padrÃousando Escherichia coli ATCC 25922, Enterobacter aerogenes ATCC 1304, Klebsiella pneumoniae ATCC 10031, Salmonella choleraesus choleraesus var typhi ATCC 6534, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 P e Pseudomonas aeruginosa HUWC 1. No primeiro mÃtodo, cada placa com agar MÃeller âHinton apÃs promover incubaÃÃo por 24 h a 35 ÂC. As zonas claras na superfÃcie do agar foram tomadas como indicativoda atividade antibacteriana. O diÃmetro destas foram mensuradas e a atividade foi expressa em Ãrea das zonas claras (mm2). As incubaÃÃes com os microorganismos foram feitas em caldo de B.H.I. por diferentes tempos atà 24 h a 35ÂC e estimada a influÃncia da desnaturaÃÃo na atividade das amostras protÃicas. ApÃs incubaÃÃo, na absorbÃncia de 492 nm cada poÃo foi determinado usando-se um Detector Shimadzu UV â VS modelo SPD - 10A VP. A mÃnima concentraÃÃo inibitÃria (MICs) se possÃvel foi determinada pelo mÃtodo da microdiluiÃÃo padrÃo. Todos os procedimentos foram executados de acordo com os manuais de instruÃÃo do Comità National de PadronizaÃÃo para LaboratÃrios ClÃnicos (Wayne, PA, USA). A hemÃlise induzida por amostras foi determinada por incubaÃÃo de uma suspensÃo 5% (v/v) de hemÃcias humanas dos tipos antigÃnicos A e O, rato e caprinos em tampÃo fosfato - salina com quantidades apropriadas das amostras a 37 ÂC atà 24 h. O sobrenadante foi mensurado em densidade optical a 541 nm. Esta foi comparada a uma suspensÃo tratada com detergente a 0,1 % com agitaÃÃo enÃrgica e definido o % de hemÃlise. Todos os compostos manifestaram moderado ou nenhuma atividade hemolÃtica. A proteÃna de L. pentadactylus apresentou uma concentraÃÃo hemolÃtica mÃnima de 2,09 x 10-4, 1,34x10-2, 1,07x10-1 e 1,34x10-2 microgramas para rato, caprino, tipos antigÃnicos humanos A e O humanos respectivamente. Sob refrigeraÃÃo estes valores decrescem. Para analisar interrelaÃÃo entre a assimetria e mecanismos, estimativa de parÃmetros cinÃticos foram obtidos pelos modelos matemÃticos de equaÃÃes de Gompertz e regressÃo nÃo linear, ANOVA e teste de comparaÃÃo mÃltipla de Tukey / A emergÃncia de mocroorganismos resistente a multidrogas, tais como Staphylococcus aureus as resistentes a meticilina, Enterococcus resistente a vancomicina, e Mycobacterium tuberculosis resistente a drogas, tem incitado esforÃospara desenvolver e pesquisar novas classes de antibiÃticos que possam ter utilidade clÃnica. Nos Ãltimos anos, uma variedade de antibiÃticos de baixo peso molecular tÃm sido isolados de diversas espÃcies animais. Estes agentes incluem peptÃdeos, lipÃdios, e alcalÃides, exibem atividade antibiÃtica contra micrÃbios do meio ambiente e considera-se que desempenhem um papel na imunidade inata. Compostos com largo espectro de atividade antimicrobiana que sÃo sintetizados pelas glÃndulas granulares presentes na pele de anuras (rÃs e sapos) tÃm recebido uma crescente atenÃÃo como agentes terapÃuticos em potencial. NÃs relatamos aqui a descoberta de um antibiÃtico esteroidal de atividade de largo espectro, bufadienolÃdeos, chamados hellebrigenin, telocinobufagin, marinobufagin e bufalin de Bufo schneideri, um sapo Brasileiro, com atividade inibitÃria diferenciada contra sete microorganismos e nenhuma atividade contra Pseudomonas aeruginosa. A secreÃÃo da pele do sapo foi obtida porcompressÃo manual das glÃndulas paracnemis e tibial. Tr~e peptÃdeos com estruta possivelmente relacionada com uma potente atividade inibitÃria para bactÃria gram positiva, Staphylococcus aureus e uma potente proteÃna com forte atividade antimicrobiana contra Pseudomonas aeruginosa (MIC = 9,64 microg/ml) foi isolada com secreÃÃes da pele de Leptodactylus pentadactylus estimuladas por adrenalina obtidas por injeÃÃo subcutÃnea de 500 micro l (100 microg/ml) e caracterizada. Os bufadienolÃdeos foram obtidos com separaÃÃo em CLAE de fase reversa sendo executado utilizando-se uma coluna C-18 (15 micro m, 100 Ao, Shim-pack PREP 250 mm x 25 mm) com um gradiente de 0-40 % de acetonitrila/Ãgua e 0,05 % de Ãcido trifluoroacÃtico. AnÃlise de NMR de alta resoluÃÃo das amostras purificadas por aplicaÃÃo de seqÃÃncia de pulsos modernos tais como 1H, 1H-COSY e NOESY, e determinaÃÃo da correlaÃÃo heteronuclear dos carbono-hidrogÃnio ligados diretamente 1H, 13C-COSY (HETCOR) e via detecÃÃo do hidrogÃnio inversa (HMQC), bem como o seqÃenciamento a longa distÃncia, COLOC e HMBC, permitindo assim sua identificaÃÃo como um esterÃide do tipo bufodienolÃdeo. A proteÃna de L. pentadactylus foi purificada por cromatografia em Sephacryl S-400 (460 mm x 6 mm) eluÃda com um tampÃo (Tris â HCl 0,05 N) e sua pureza foi avaliada poreletroforese em condiÃÃes desnayurantes e nÃo desnaturantes.A proteÃna total foi determinada pelo mÃtodo de Bradford usando albumina soro bovina como padrÃo. O isolamento dos peptÃdeos foi efetuado usando-se o exsudato liofilizado e redissolvendo em Ãgua bidestilada/TFA 0,05 % (20:1; P:V) e corrido numa coluna C18 de fase reversa em CLAE (15 micro m, 100 Ao, Shim-pack PREP 250 mm x 25 mm) eluÃda com um gradiente linear de 5 - 80% em 103 min num fluxo de 5 ml/min com acetonitrila/Ãgua e Ãcido trifluoroacÃtico 0.05 %. A atividade antimicrobiana de todas as amostras foi monitorada pelos mÃtodos de Bauer â Kirby e placa de microdiluiÃÃo padrÃousando Escherichia coli ATCC 25922, Enterobacter aerogenes ATCC 1304, Klebsiella pneumoniae ATCC 10031, Salmonella choleraesus choleraesus var typhi ATCC 6534, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 P e Pseudomonas aeruginosa HUWC 1. No primeiro mÃtodo, cada placa com agar MÃeller âHinton apÃs promover incubaÃÃo por 24 h a 35 ÂC. As zonas claras na superfÃcie do agar foram tomadas como indicativoda atividade antibacteriana. O diÃmetro destas foram mensuradas e a atividade foi expressa em Ãrea das zonas claras (mm2). As incubaÃÃes com os microorganismos foram feitas em caldo de B.H.I. por diferentes tempos atà 24 h a 35ÂC e estimada a influÃncia da desnaturaÃÃo na atividade das amostras protÃicas. ApÃs incubaÃÃo, na absorbÃncia de 492 nm cada poÃo foi determinado usando-se um Detector Shimadzu UV â VS modelo SPD - 10A VP. A mÃnima concentraÃÃo inibitÃria (MICs) se possÃvel foi determinada pelo mÃtodo da microdiluiÃÃo padrÃo. Todos os procedimentos foram executados de acordo com os manuais de instruÃÃo do Comità National de PadronizaÃÃo para LaboratÃrios ClÃnicos (Wayne, PA, USA). A hemÃlise induzida por amostras foi determinada por incubaÃÃo de uma suspensÃo 5% (v/v) de hemÃcias humanas dos tipos antigÃnicos A e O, rato e caprinos em tampÃo fosfato - salina com quantidades apropriadas das amostras a 37 ÂC atà 24 h. O sobrenadante foi mensurado em densidade optical a 541 nm. Esta foi comparada a uma suspensÃo tratada com detergente a 0,1 % com agitaÃÃo enÃrgica e definido o % de hemÃlise. Todos os compostos manifestaram moderado ou nenhuma atividade hemolÃtica. A proteÃna de L. pentadactylus apresentou uma concentraÃÃo hemolÃtica mÃnima de 2,09 x 10-4, 1,34x10-2, 1,07x10-1 e 1,34x10-2 microgramas para rato, caprino, tipos antigÃnicos humanos A e O humanos respectivamente. Sob refrigeraÃÃo estes valores decrescem. Para analisar interrelaÃÃo entre a assimetria e mecanismos, estimativa de parÃmetros cinÃticos foram obtidos pelos modelos matemÃticos de equaÃÃes de Gompertz e regressÃo nÃo linear, ANOVA e teste de comparaÃÃo mÃltipla de Tukey
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