Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-01-27Bitstream added on 2014-06-13T19:37:24Z : No. of bitstreams: 1 hasegawa_jm_me_botfca.pdf: 900913 bytes, checksum: e49a35df3df1cebc7bd2e3139d7d52e2 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Empresa Privada / O Bidens mosaic virus (BiMV) é um Potyvirus relatado pela primeira vez no Brasil, no Estado de São Paulo, onde foram realizados estudos através de microscopia eletrônica por Kitajima et al.(1961). É um vírus que causa sintomas em espécies de importância econômica como o girassol, a alface e a ervilha, além de algumas plantas ornamentais. Atualmente, embora se conheça o seu mecanismo de transmissão, a sua sintomatologia, as suas propriedades biológicas e físico-químicas e o seu círculo de hospedeiras, pouco se sabe sobre a importância do BiMV para a cultura da alface e a possíveis fontes de resistência em Lactuca sativa. O presente trabalho teve como objetivos a coleta de isolados de BiMV de diferentes regiões produtoras de alface no Estado de São Paulo, sua caracterização biológica, identificação por meio de técnicas moleculares e triagem de materiais de alface para resistência. Isolados virais coletados em plantas de picão-preto de regiões produtoras do Estado de São Paulo foram submetidos a diferentes metodologias de identificação e caracterização. Testes biológicos em hospedeiros diferenciais permitiram a diferenciação dos isolados de outros vírus de importância para a cultura da alface e a caracterização biológica de alguns isolados como BiMV. Foram vistas partículas flexuosas alongadas ao microscópio eletrônico de transmissão, sugerindo a participação de um Potyvirus na manifestação dos sintomas. O seqüenciamento direto de produtos de PCR de um isolado mostrou identidade de 96% com a seqüência de um isolado de BiMV coletado de ervilha. Isolados monolesionais multiplicados de BiMV foram inoculados em 89 cultivares de alface 2 de diferentes grupos varietais. A maioria das cultivares se mostrou resistente ao BiMV, exceto no caso das nacionais do tipo repolhuda lisa, que foram todas suscetíveis... . / Bidens mosaic virus (BiMV) belongs to the genus Potyvirus and was originally described in São Paulo, Brazil, under examinations by electron microscopy made on exudates obtained from infected plants by Kitajima et al.(1961). Some of the affected plants with economic importance are sunflower, lettuce, peas and bedding plants. Until now, transmission mechanisms, symptomatology on host plants, physical properties and host range had been reported, but few information are available about the importance of BiMV to commercial lettuce fields. At the present time there is no information on resistant cultivars in Lactuca sativa. The aims of this work was to collect isolates of BiMV from different commercial fields in São Paulo State; to determine their biological characterization and their identification by molecular methods and identify sources of resistance in lettuce by the screening of accessions for resistance. Virus isolates originated from different regions were submitted to various methods of detection and characterization. Tests on experimental host range provided data to differentiate one lettuce-infecting species to the others and the virus identification based upon symptom expression. Flexuous rods were observed in leaf extracts from infected plants, showing the presence of a Potyvirus as the causal agent of the symptoms. Direct nucleotide sequencing from amplified PCR products showed 96% of identity compared to an accession of BiMV at GenBank. Monolesional isolates of BiMV properly maintained and multiplied in propagational host were inoculated in 89 cultivars of lettuce of different horticultural types. The great number of them showed resistance to BiMV, except in the case 4 of the Brazilian butterhead types, all susceptible. At present, as the most important commercial lettuce cultivars exhibit high degrees of BiMV resistance, mainly in leafy and iceberg types, it is possible to affirm... (Complete abstract, click electronic address below)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-23T08:39:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 252060.pdf: 593370 bytes, checksum: 858361c2f238891d3f74efba8b533051 (MD5)

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-19T14:08:52Z No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 938401 bytes, checksum: 1a334d28da74f16445f0f193d63f6358 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-19T14:08:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 938401 bytes, checksum: 1a334d28da74f16445f0f193d63f6358 (MD5) Previous issue date: 2001-08-09 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A caracterização de 46 indivíduos de Bidens pilosa, coletados em nove altitudes, foi realizada a partir de sete sistemas enzimáticos, utilizando-se a eletroforese em géis de amido a 12%. As enzimas fosfatase ácida, α-esterase, β- esterase, glutamato oxaloacetato transaminase, peroxidase, chiquimato desidrogenase e superóxido dismutase foram analisadas e apresentaram elevado polimorfismo. diferentes As altitudes. variações ocorreram Utilizando-se da entre matriz indivíduos de de mesma dissimilaridade ou obtida de pelo Complemento Aritmético do Índice de Similaridade de Jaccard, agruparam-se os indivíduos pelo Método de Otimização de Tocher e formaram-se dez grupos. Seis genótipos pertencentes a grupos isozimáticos distintos, representando as altitudes 210, 450, 475, 675, 950 e 1.150 m, foram propagados vegetativamente, em cultura de tecidos, obtendo-se clones. Esses foram padronizados, aclimatados e serviram ao estudo da plasticidade fenotípica da influência da altitude em plantas crescidas em vasos em quatro altitudes: 198, 479, 739 e 962 m e os resultados avaliados em quatro colheitas baseadas nos estádios reprodutivos. O início de florescimento variou entre os genótipos mantidos em uma altitude, bem como no mesmo genótipo em cada altitude. A primeira época de colheita de cada genótipo, em cada altitude, foi iniciada 14 dias após a constatação de que 50% de suas plantas estavam floridas. A partir dessa colheita seguiram-se as demais, sendo mantidos representativas intervalos dos regulares estádios de reprodutivos: 14 dias entre florescimento, as colheitas, essas início de frutificação, frutificação plena e senescência. As plantas de cada estádio serviram ao estudo da plasticidade fenotípica. Esse estudo foi feito por meio de caracteres morfométricos, de fitofármacos e anatômicos. Os estudos anatômicos foram feitos apenas no estádio de senescência. Os objetivos foram de identificar os efeitos da altitude sobre estes caracteres e estimar a magnitude e o padrão de resposta dos genótipos às altitudes testadas, bem como obter o coeficiente de coincidência (CCo) entre a resposta à altitude semelhante à de coleta e correlacionar as respostas das características com as variáveis climáticas. Os caracteres morfométricos analisados foram altura da planta, comprimento do caule, número de ramos, número de capítulos, massa seca caulinar, biomassa seca aérea, valor de SPAD foliar, número de folhas por planta, área foliar por planta, área foliar média, massa seca foliar e número de folhas em 1 grama. A análise de fitofármacos das folhas foi feita em extratos etanólicos (80%) submetidos à cromatografia líquida de alta eficiência. Foram identificados e quantificados o ácido clorogênico e o ácido caféico e sua porcentagem na massa seca foliar. Foram obtidas correlações entre as características e os fatores climáticos das altitudes, como temperaturas (máxima e mínima), pluviosidade e capacidade evaporativa do ar. O estudo anatômico foi feito com folhas, analisando a espessura foliar total, espessura do parênquima paliçádico, do parênquima lacunoso, do mesofilo, das epidermes e as relações percentuais entre os tecidos analisados. Obteve-se correlação entre as características anatômicas e climáticas como pressão atmosférica, umidade relativa do ar e luminosidade. Pelos estimadores da plasticidade as altitudes influenciam a resposta morfométrica, de fitofármacos e anatômica e cada genótipo apresentou resposta de acordo com a altitude. Pelo CCo os caracteres morfométricos, de fitofármacos e anatômicos coincidiram em cerca de 53, 45 e 50%, respectivamente, com a resposta à altitude semelhante à de coleta, indicando adaptação intermediária (CCo compreendendo o intervalo de 25 a 75%). A magnitude e o padrão de plasticidade foram específicos em cada genótipo, e nos caracteres morfométricos e de fitofármacos diferiram dentro do mesmo genótipo em função do estádio reprodutivo. Estimou-se que cerca de 83, 76 e 60% da variação morfométrica, de fitofármacos e anatômica, respectivamente, foram devido ao efeito da altitude. Houve variação de fitofármacos entre as altitudes, sendo que na maior altitude (962 m) ocorreu maior acúmulo de ácido clorogênico e na menor altitude (198 m) ocorreu maior acúmulo de ácido caféico. O ácido clorogênico e o ácido caféico tiveram correlação negativa com a temperatura e a evaporação e positiva com a pluviosidade. O aumento da pressão atmosférica e da umidade relativa e a diminuição da luminosidade promovem a diminuição da espessura dos tecidos foliares, sendo o parênquima lacunoso o mais afetado. Conclui-se que a altitude influencia na plasticidade fenotípica e que o estudo da plasticidade em plantas medicinais é importante na seleção de genótipos que possuam adequado crescimento e produção de fitofármacos, servindo na obtenção de plantas medicinais padronizadas, o que auxilia na determinação das doses terapêuticas a serem empregadas medicinalmente. / The characterization of 46 individuals of Bidens pilosa, collected in nine altitudes, was held with seven enzymatic systems, using starch gel electrophoresis 12%. The acid phosphatase, α-esterase, β-esterase, glutamate oxaloacetate transaminase, peroxidase, shikimate dehydrogenase and superoxide dismutase enzymes were analyzed and presented high level polymorphism. The variations occurred among individuals of the same or different altitudes. Using the dissimilarity matrix obtained by Jaccard Arithmetics Complement of Similarity Index, the individuals were put into ten groups organized by Tocher’s Optimization Method. Six genotypes pertaining to distinct isozimatic groups, representing the altitudes 210, 450, 475, 675, 950 and 1.150 m, were vegetatively spread in a tissue culture, obtaining clones. These tissues were standardized, acclimatized and served to the phenotypic plasticity study of the altitude influence in grown plants in vases, in four altitudes: 198, 479, 739 and 962 m, and the evaluated results in four harvests based in reproductive stages. The blooming beginning varied among the genotypes kept in an altitude, just like the same genotype in each altitude. The first harvesting period of each genotype, in each altitude, was iniciated 14 days after observing that 50% of the plants were flourished. After this harvest, the others happened, but the 14 days regular breaks were kept between the harvests and these are representing reproductive stages: blooming, initial frutification, total frutification and senescence. The plants of each stage served to the phenotypic plasticity study. This study was done using morphometric, phytopharmac and anatomic characters. The anatomic studies were done only in the senescence stage. The objectives were to identificate the altitude effects in the characters and to estimate the magnitude and the response pattern of genotypes to the tested altitudes and to obtain the coincidence coefficient (CCo) between the same altitude response and the collecting response and to correlate these responses with the climatic variations responses. The analysed morphometric characters were the plant height, the stem length, the branch number, the flower-head number, the stem dry matter, the aerial dry biomass, the leaf SPAD value, the leaves number in each plant, the total leaves area per plant, the average leaf area, the dry leaf mass and the leaves number in 1 gram. The leaves phytopharmac analysis was done in ethanolic extracts (80%) submitted to high performance liquid chromatography. The chlorogenic acid and caffeic acid were identificated and quantificated and also their percentage in dry leaf mass. Correlations between characteristics and altitudes climate factors were obtained, like temperatures (maximum and minimum), pluviosity and the evaporative air capacity. The anatomic study was done analyzing the total leaf thickness, palisade parenchyma thickness, lacunary parenchyma thickness, mesophyll thickness, epidermis thickness and the percentual relations among the analyzed tissues. The correlation between the anatomic characteristics and climatic ones like atmospheric pressure, relative air humidity and luminosity were obtained. By the plasticity estimator the morphometric, phytopharmac and anatomic responses were influenced by the altitude and each genotype presented a response according to its altitude. According CCo the morphometric, phytopharmac and the anatomic characters coincided around 53, 45 and 50%, respectively, with the altitude response similar to the collect one indicating an intermediate adaptation (CCo interval comprehended between 25 and 75%). The magnitude and morphometric plasticity and pattern phytopharmac were specific characters in variations each genotype differed in and the in same genotype due to the reproductive stage. Estimative numbers of the 83, 76 e 60% of the morphometric, phytopharmac and anatomic variation, respectively, were due to the altitude effects. There was phytopharmac variation among the altitudes and in the higher one (962 m) there was a higher accumulation of the chlorogenic acid and in the lowest altitude (198 m) there was a higher accumulation of the caffeic acid. The chlorogenic acid and caffeic acid had negative correlation with the temperature and the evaporation, but positive correlation with pluviosity. The atmospheric pressure increased, the relative air humidity increased and the luminosity decrease promoted a decrease on the thickness of the leaves tissues with the lacunary parenchyma the most affected. As a conclusion, the altitude influences the phenotypic plasticity, and the plasticity study in medicinal plants is important in selecting genotypes that have a suitable growing and phytopharmac production, serving in the obtension of standardized medicinal plants, and this helps to determine the therapeuthic doses to be used medicinally.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia / Made available in DSpace on 2012-10-26T11:29:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2015-03-18T20:42:43Z : No. of bitstreams: 1 310448.pdf: 1153725 bytes, checksum: a30e0a76515f31d96e76c1c23888958e (MD5) / O desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas, como as que utilizam as plantas medicinais, tem despertado grande interesse no tratamento do câncer, pois as terapêuticas tradicionais não são capazes de regredir totalmente a evolução da doença e/ou apresentam elevada toxicidade. B. pilosa e C. sylvestris, plantas medicinais que possuem vários usos populares no Brasil e outros países americanos, têm sido indicadas para o tratamento de tumores. Neste estudo a extração supercrítica (ESC) foi o método de escolha, por seu bom fracionamento presentes na matriz vegetal. Assim sendo, o presente trabalho se propôs avaliar as atividades citotóxica, antiproliferativa, antitumoral, nucleásica, antiangiogênica e pró-apoptótica dos extratos bruto e supercrítico de B. pilosa e C. sylvestris em diferentes condições de extração utilizando modelos experimentais in vitro e in vivo. Para se atingir tal objetivo, foram realizados experimentos para avaliar primeiramente a atividade citotóxica (MTT) in vitro com extrato bruto (EB) (0-500 ?g/mL) e nos extratos na extração supercrítica (ESC) 250bar/40°C (0-100 ?g/mL), e a atividade antiproliferativa através do ensaio clonogênico (100 e 200 ?g/mL ) dos extratos de B. pilosa. Os resultados obtidos no MTT e ensaio clonogênico mostraram que os EB e ESC 250 bar/40°C de B. pilosa foram ineficazes em reduzir a viabilidade celular e antiproliferativa em células MCF-7 e T-24. A partir dos resultados obtidos com B. pilosa descritos acima, foram realizados os ensaios de viabilidade celular (MTT) em células MCF-7 (5, 10, 20, 40 e 80 ?g/mL) e T-24 (1; 2,5; 5; 7,7 e 10 ?g/mL) com as diversas condições de ESC de C. sylvestris. Já o EB de C. sylvestris foi realizado em células MCF-7, em concentrações de 62,5; 125; 250; 500 e 1000 ?g/mL e em T-24 nas concetrações de 10; 25; 50; 75 e 100 ?g/mL. Além disso, foi avaliado o efeito dos extratos (EtOH5% 300bar/40°C e EtOac5% 300bar/40°C) sobre o DNA plasmidial através da ativida nucleásica. A atividade antitumoral in vivo foi realizada em camundongos Balb/C inoculados com o TAE e tratados com EB de C. sylvestris e ESC (EtOH5% 300 bar/40°C e EtOac5% 300bar/40°C) de C. sylvestris nas concentrações de 0,1; 1 e 10 mg/kg e através da atividade antiangiogênica em ovos fertilizados de Gallus domesticus, através do ensaio da membrana corioalantóica (MCA), nas mesmas concentrações de 1, 5 e 10 mg/kg/dia. Também foi avaliada a capacidade pró-poptótica, através do ensaio de anexina V por citometria de fluxo em células TAE retiradas dos camundongos após o tratamento com os extratos supercríticos EtOH 5% 300bar/40°C de 0,1 mg/kg/dia, EtOac5% 300bar/40°C de 0,1mg/kg/dia e EtOac5% 300bar/40°C de 1 mg/kg/dia, que elevaram o percentual de células apoptóticas e necróticas de C. sylvestris. Os resultados demonstraram que os extratos supercríticos (EtOH5% 300bar/40°C e EtOac5% 300bar/40°C) de C. Sylvestris reduziram de maneira significativa a viabilidade de células MCF-7 e T-24. Em relação à avaliação da atividade nucleásica com o extrato supercrítico EtOH5% 300bar/40°C, se observou que houve dano direto ao DNA, sendo que o mesmo foi dose-dependente. Os ensaios in vivo demonstraram que os extratos supercríticos EtOH5% 300bar/40°C e EtOac5% 300bar/40°C apresentaram atividades antitumorais consideráveis. O tratamento com os extratos causaram importante inibição do crescimento tumoral nos camundongos, principalmente o extrato supercrítico EtOH5% 300bar/40°C (0,1 mg/kg/dia), causando também aumento do percentual médio de longevidade (PAL). O ensaio da anexina V revelou que a morte celular induzida pelos extratos supercríticos foi do tipo apoptose (EtOH 0,1 mg/kg/dia e EtOac 0,1 mg/kg/dia) e necrose (EtOac 1 mg/kg/dia). A atividade antiangiogênica dos EtOH5% 300bar/40°C e EtOAc5% 300bar/40°C (1, 5 e 10 mg/kg/dia) mostrou que os extratos foram capazes de reduzir de forma significativa o percentual de vasos sanguíneos em torno do embrião, sendo este efeito inversamente proporcional às concentrações. / The development of new therapies, such as therapies using medicinal plants, has aroused great interest in cancer treatment, because the available therapies are not able to completely regress the disease progression and/or presents high toxicity. B. pilosa and C. sylvestris, medicinal plants that possess multiple popular uses in Brazil and other American countries, has been indicated for tumor treatment. In this study, the supercritical extraction (ESC) was the choice method for its superior performance in isolation of chemical compounds. Therefore, this study aimed to assess the cytotoxic, antiproliferative, antitumor, nucleasic, antiangiogenic and apoptotic activity of supercritical extract of B. pilosa and C. sylvestris at different extraction conditions using experimental models in vitro and in vivo. To achieve this goal, experiments were performed previously to evaluate the cytotoxic activity (MTT) in vitro with EB (0-500 µg/mL) and supercritical extract 250bar/40 °C (0-100 µg/mL), and antiproliferative activity via the clonogenic assay of B. pilosa extracts. The results obtained from MTT and clonogenic assay demonstrated that the B. pilosa EB and supercritical extract 250bar/40°C were ineffective in reducing cell viability and antiproliferative in MCF-7 cells and T-24. Considering the results obtained with B. pilosa described above, assays were performed in cell viability (MTT) in MCF-7 cells (5, 10, 20, 40 and 80 ?g/mL) and T-24 (1; 2.5; 5; 7.7 and 10 µg/ml) with ESC conditions with C. sylvestris. The EBC was performed on MCF-7 cells at concentrations of 62.5, 125, 250, 500 and 1000 µg/mL and T-24 in concetrations 10, 25, 50, 75 and 100 µg/ mL. Furthermore, the effect of extracts (EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40 °C) on plasmid DNA through the nuclease activity was also evaluated. The in vivo antitumor activity was performed in Balb/C mice inoculated with TAE treated with EBC and supercritical extract (EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40°C) of C. sylvestris at concentrations of 0.1, 1 and 10 mg/Kg and through the antiangiogenic activity of Gallus domesticus eggs fertilized by the chorioallantoic membrane essay (CAM) at the same concentrations of 1, 5 and 10 mg/kg/day. The pro-apoptotic ability was also evaluated by annexin V essay using flow cytometry in TAE cells taken from mice after treatment with the supercritical extract EtOH5% 300bar/40°C of 0.1 mg/kg/day, EtOac5% 300bar/40°C of 0.1 mg/ kg/day and EtOac 1mg/kg/day of 1 mg/kg/day that increased the apoptotic and necrotic cells percentage of C. sylvestris. The results demonstrated that the supercritical extract (EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40 °C) of C. Sylvestris significantly reduced the viability of MCF-7 and T-24 cells. Regarding the nuclease activity assessment with the supercritical extract EtOH5% 300bar/40°C, there was a direct dose-dependent damage on DNA. In vivo assays demonstrated that supercritical extract EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40°C showed considerable antitumor activity. The treatment with the extracts caused significant inhibition of tumor growth in mice, mainly the supercritical extract EtOH5% 300bar/40°C (0.1 mg/kg/day), also causing increase in the average percentage of longevity (PAL). The annexin V essay revealed that the induced cell death by extracts was apoptosis type (EtOH5% 300bar/40°C 0.1 mg/kg/day and EtOac5% 300bar/40°C 0.1 mg/kg/day) and also necrosis type (EtOac5% 300bar/40°C 1mg/kg/day). The antiangiogenic activity of the EtOH5% 300bar/40°C and EtOac5% 300bar/40°C (1, 5 and 10 mg/kg/day) demonstrated that the extracts were able to reduce significantly the percentage of blood vessels around the embryo being this effect inversely proportional to their concentrations.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-12-15Bitstream added on 2014-06-13T20:45:45Z : No. of bitstreams: 1 sanches_mm_dr_botfca.pdf: 1119751 bytes, checksum: 73ca03050a05db3fe10a6b8f92cd79bf (MD5) / O Bidens mosaic virus (BiMV) é uma espécie tentativa de vírus do gênero Potyvirus e tem sido encontrado em culturas de importância econômica como ervilha e girassol. Recentemente foi proposto que o BiMV poderia ser uma estirpe do Potato virus Y (PVY). Em 2004 amostras de alface apresentando mosaico intenso, coletadas no município de São Manuel - SP, apresentavam-se infectadas pelo BiMV. Foi realizada a caracterização biológica, o sequenciamento parcial e a purificação deste isolado para obtenção de anti-soro policlonal. Verificou-se que este isolado possui gama de hospedeiros restrita à alface, Chenopodium quinoa, Chenopodium amaranticolor e ervilha (Pisum sativum) de forma assintomática. O vírus possui uma proteína capsidial em torno de 33 kDa e padronizou-se um teste de PTAELISA para o diagnóstico sorológico deste vírus. Também foi realizada a caracterização biológica e avanços no sequenciamento do genoma de um isolado de BiMV coletado a partir da planta de Bidens pilosa (picão preto). Este isolado foi capaz de infectar e causar sintomas em girassol (Helianthus annus), alface (Lactuca sativa), ervilha (Pisum sativum), C. quinoa, C. amaranticolor, Nicotiana benthamiana, N. clevelandii, N. occidentalis, Zinnia elegans e em Gomphrena globosa, nesta última de forma assintomática. Através do sequenciamento de um fragmento de 7.945 bp, correspondente à parte do gene da HC-Pro e dos genes da P3, 6K1, CI, 6K2, VPg, NIa, NIb, CP e à região 3’UTR, verificou-se que o BiMV é possivelmente uma espécie distinta do PVY, baseando-se nos atuais critérios para demarcação de espécies do International Committee on Taxonomy of Viruses (ICTV). Foram obtidos oligonucleotídeos específicos para diagnose do BiMV, que através de RT-PCR em uma só etapa, detectam eficientemente o vírus a partir de alface e de plantas daninhas associadas à cultura. Através desta técnica... / Bidens mosaic virus (BiMV) is a tentative species of the genus Potyvirus, and has been commonly found infecting pea and sunflower. Recently it was proposed that BiMV could be a member of the Potato virus Y (PVY) species. In 2004 lettuce plants showing intense mosaic symptoms were collected in São Manuel-SP and were infected with BiMV. The host range of this isolate was characterized, the genome partially sequenced and the virus was purified to obtain a polyclonal antiserum. The host range for this isolate was restricted to lettuce, Chenopodium quinoa, Chenopodium amaranticolor and pea (Pisum sativum) (assymptomatic). The virus has a coat protein with approximately 33 kDa and the antiserum could be used for serological diagnosis by PTA-ELISA tests. A BiMV isolate from Bidens pilosa was also studied in this work. This isolate infected sunflower (Helianthus annus), lettuce (Lactuca sativa), pea (Pisum sativum), C.quinoa, C. amaranticolor, N. benthamiana, N. clevelandii, N. occidentalis, Zinnia elegans and Gomphrena globosa (assymptomatic). A fragment of 7.945bp including part of the HC-Pro, the entire genes for P3, 6K1, CI, 6K2, VPg, NIa, Nib, CP and the 3’UTR region was sequenced. Based on the International Committee on Taxonomy of Viruses (ICTV) criteria of potyvirus species demarcation using the individual genes, BiMV could be considered a distinct species of PVY. Specific primers were obtained for BiMV diagnosis and efficiently used in a one step RT-PCR test for BiMV diagnoses. A total of 222 lettuce and 126 weeds samples were collected in the lettuce growing areas of Mogi das Cruzes, Campinas and Bauru and analysed by RT-PCR. Low incidence of BiMV was verified on lettuce. The presence of BiMV was also observed on B. pilosa and Galinsoga parviflora. This last plant species was identified as a new host of BiMV and Lettuce mottle virus (LeMoV) in this study.

Resumo: O Bidens mosaic virus (BiMV) é uma espécie tentativa de vírus do gênero Potyvirus e tem sido encontrado em culturas de importância econômica como ervilha e girassol. Recentemente foi proposto que o BiMV poderia ser uma estirpe do Potato virus Y (PVY). Em 2004 amostras de alface apresentando mosaico intenso, coletadas no município de São Manuel - SP, apresentavam-se infectadas pelo BiMV. Foi realizada a caracterização biológica, o sequenciamento parcial e a purificação deste isolado para obtenção de anti-soro policlonal. Verificou-se que este isolado possui gama de hospedeiros restrita à alface, Chenopodium quinoa, Chenopodium amaranticolor e ervilha (Pisum sativum) de forma assintomática. O vírus possui uma proteína capsidial em torno de 33 kDa e padronizou-se um teste de PTAELISA para o diagnóstico sorológico deste vírus. Também foi realizada a caracterização biológica e avanços no sequenciamento do genoma de um isolado de BiMV coletado a partir da planta de Bidens pilosa (picão preto). Este isolado foi capaz de infectar e causar sintomas em girassol (Helianthus annus), alface (Lactuca sativa), ervilha (Pisum sativum), C. quinoa, C. amaranticolor, Nicotiana benthamiana, N. clevelandii, N. occidentalis, Zinnia elegans e em Gomphrena globosa, nesta última de forma assintomática. Através do sequenciamento de um fragmento de 7.945 bp, correspondente à parte do gene da HC-Pro e dos genes da P3, 6K1, CI, 6K2, VPg, NIa, NIb, CP e à região 3'UTR, verificou-se que o BiMV é possivelmente uma espécie distinta do PVY, baseando-se nos atuais critérios para demarcação de espécies do International Committee on Taxonomy of Viruses (ICTV). Foram obtidos oligonucleotídeos específicos para diagnose do BiMV, que através de RT-PCR em uma só etapa, detectam eficientemente o vírus a partir de alface e de plantas daninhas associadas à cultura. Através desta técnica... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Bidens mosaic virus (BiMV) is a tentative species of the genus Potyvirus, and has been commonly found infecting pea and sunflower. Recently it was proposed that BiMV could be a member of the Potato virus Y (PVY) species. In 2004 lettuce plants showing intense mosaic symptoms were collected in São Manuel-SP and were infected with BiMV. The host range of this isolate was characterized, the genome partially sequenced and the virus was purified to obtain a polyclonal antiserum. The host range for this isolate was restricted to lettuce, Chenopodium quinoa, Chenopodium amaranticolor and pea (Pisum sativum) (assymptomatic). The virus has a coat protein with approximately 33 kDa and the antiserum could be used for serological diagnosis by PTA-ELISA tests. A BiMV isolate from Bidens pilosa was also studied in this work. This isolate infected sunflower (Helianthus annus), lettuce (Lactuca sativa), pea (Pisum sativum), C.quinoa, C. amaranticolor, N. benthamiana, N. clevelandii, N. occidentalis, Zinnia elegans and Gomphrena globosa (assymptomatic). A fragment of 7.945bp including part of the HC-Pro, the entire genes for P3, 6K1, CI, 6K2, VPg, NIa, Nib, CP and the 3'UTR region was sequenced. Based on the International Committee on Taxonomy of Viruses (ICTV) criteria of potyvirus species demarcation using the individual genes, BiMV could be considered a distinct species of PVY. Specific primers were obtained for BiMV diagnosis and efficiently used in a one step RT-PCR test for BiMV diagnoses. A total of 222 lettuce and 126 weeds samples were collected in the lettuce growing areas of Mogi das Cruzes, Campinas and Bauru and analysed by RT-PCR. Low incidence of BiMV was verified on lettuce. The presence of BiMV was also observed on B. pilosa and Galinsoga parviflora. This last plant species was identified as a new host of BiMV and Lettuce mottle virus (LeMoV) in this study. / Orientador: Renate Krause Sakate / Coorientador: Marcelo Agenor Pavan / Banca: Norberto da Silva / Banca: Marli Teixeira de Almeida Minhoni / Banca: Antonio Carlos Maringoni / Banca: Valdir Atsushi Yuki / Banca: Romulo Fujito Kobori / Doutor

This work had the aim to assess some biological eects of the Bidens sulphurea (Asterace ) (also know as Cosmos sulphureus), assessed eects were: cytotoxicity, antibiotic and phototoxicity. The phototoxicity was ephasized, since the primary aim of this work was to evaluate if this plant\'s pigments could be used as photosensitizers in the photodynamic therapy, in a non invasive way, using light emitted by LED, for treatment of dermatosis, particularly, onicomicosis. The conclusion of this work is that, of the two Bidens sulphurea varieties studied, the one that bear the greater photodynamic activity, when irradiated with white light, or red light ( 600 nm) and did showed greater antibiotic eect (in the dark) was the orange variety. The orange variety did showed an increase in the toxicidy to the Artemia salina nauplii, when irradiated with red light. / Este trabalho teve por objetivo, avaliar alguns efeitos biologicos do extratos bruto (etanolico) das ores de Bidens sulphurea (Asterace), os efeitos avaliados foram: citotoxicidade, efeito antibiotico e fototoxico. Deu-se ênfase aos efeitos fototoxicos, pois o objetivo primario era avaliar se os pigmentos desta planta poderiam ser utilizados como fotosensitizadores para a terapia fotodinâmica, empregando-se luz emitida por LED, para o tratamento de um modo não invasivo de dermatoses, tais como a onicomicose. Concluiuse que, das duas variedades da planta estudada (variedades laranja e amarela), a que apresenta maior fototoxicidade tanto quando irradiado por luz branca, e vermelha ( 600 nm), quanto efeito antibiotico (no escuro) foi a variedade laranja, a qual tambem mostrou uma grande toxicidade frente aos nauplios de Artemia salina quando irradiada com luz vermelha. / Mestre em Química

Submitted by Helena Bejio (helena.bejio@unioeste.br) on 2018-06-09T00:30:28Z No. of bitstreams: 2 Jaqueline_Barbosa_2018.pdf: 754013 bytes, checksum: 0dd83e656c2f8d6bfc0e9ea67999e134 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-09T00:30:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Jaqueline_Barbosa_2018.pdf: 754013 bytes, checksum: 0dd83e656c2f8d6bfc0e9ea67999e134 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The substances present in the plant material of green manures can act in the suppression of weeds by the release of allelopathic compounds. The objective of this study was to evaluate the allelopathic effect of the extracts of Dolichos lab lab, Pachyrhizus sp. and Sorghum bicolor, isolated and mixed, under different preparation method, in the weed species Bidens pilosa, Euphorbia heterophylla and Digitaria insularis. The experiment was realized in four stages, the collection of the vegetal material and the preparation of the aqueous extracts; influence of aqueous extracts on germination and initial development of B. pilosa, E. heterophylla and D. insularis, at completely randomized design was used, with factorial 7x4+T, and four replications; the effect of the aqueous extract were evaluated in post-emergence of B. pilosa, E. heterophylla and D. insularis, at completely randomized design was used, with six trataments and four replications, ermination and initial development of B. pilosa after the application of different fractions of aqueous extracts of D. lab lab, with dried plant material submitted to water bath, was used a completely randomized design with 14 trataments, ad four replications. In pre-emergence, the extract Pachyrhizus sp.+S. bicolor with freeze-dried plant material submitted to the water bath, reduced germination percentage, hypocotyl length and root length by 87%, 30% and 61%, respectively. For the E. heterophylla, the mixture Pachyrhizus sp.+S. bicolor, with freeze-dried plant material, caused the reduction of germianation percentage b 23%. For D. insularis, the extract Pachyrhizus sp.+S. bicolor, with freeze-dried plant material submitted to the water bath, reduced the percentage of germinations in 83%, and in 52% the length of the root. In post-emergence, the D. lab lab+Pachyrhizus sp. With freeze-dried plant material submitted to the water bath, reduced the dry mass of roots of B. pilosa plants by 21%, and by 18% the dry mass of roots of D. insularis, however, stimulated in 14% same variable in E. heterophylla. The fractionation of the D. lab lab extract with dried plant material, did not affect the germination percentage and dry mass of B. pilosa, but interfered the hypocotyl and the root. The fractionation of the D. lab lab + Pachyrhizus sp. + S.bicolor, with freeze—dried plant material submitted to the water bath, interfered in all variables. Is conclude that there is allelopathic effect of extracts of S. bicolor, D. lab lab, and Pachyrhizus sp. Isolated or in mixture, in different preparation method, on the germinability and development of B. pilosa, E. heterophylla and D. insularis, this stimulus os inhibition effect being according to the extract used and the method of preparation. Also, that the allelopathic effect happened by the action of several substances of different polarities. / As substâncias presentes no material vegetal podem atuar na supressão de plantas daninhas pela liberação de compostos alelopáticos. Objetivou-se avaliar o efeito alelopático de extratos de Dolichos lab lab, Pachyrhizus sp. e Sorghum bicolor, isolados e em mistura, submetidos a diferentes modos de preparo, nas espécies de plantas daninhas Bidens pilosa, Euphorbia heterophylla e Digitaria insularis. O experimento foi realizado em quatro etapas, sendo, elas, a coleta do material vegetal e o preparo dos extratos aquosos; influência dos extratos aquosos na germinação e desenvolvimento inicial de B. pilosa, E. heterophylla e D. insularis, em delineamento inteiramente casualizado e fatorial 7x4+T, com quatro repetições; efeito alelopático dos extratos de adubos verdes em pós-emergência nas plantas daninhas B. pilosa, E. heterophylla e D. insularis, em delineamento inteiramente casualizado, com seis tratamentos e seis repetições; germinação e desenvolvimento inicial de B. pilosa após a aplicação de diferentes frações dos extratos aquosos de D. lab lab, preparado com material vegetal seco e da mistura D. lab lab+Pachyrhizus sp.+S.bicolor, preparado com material vegetal liofilizado e submetido a banho-maria, em delineamento inteiramente casualizado, com 14 tratamentos e quatro repetições. Em pré-emergência, o extrato Pachyrhizus sp.+S. bicolor preparado com material vegetal liofilizado e submetido a banho-maria reduziu a porcentagem de germinação, o comprimento do hipocótilo e o comprimento da raiz primária em 87%, 30% e 61%, respectivamente. Para E. heterophylla, a mistura Pachyrhizus sp.+S. bicolor, preparado com material vegetal liofilizado, causou a redução em 23% da porcentagem de germinação. Para D. insularis, o extrato Pachyrhizus sp.+S. bicolor, preparado com material vegetal liofilizado e submetido a banho-maria, reduziu a porcentagem de germinação em 83%, e o comprimento da raiz primária em 52%. Em pós-emergência, o extrato de D. lab lab+Pachyrhizus sp., preparado com material vegetal liofilizado e submetido a banho-maria, reduziu em 21% a massa seca das raízes das plantas B. pilosa, e em 18% a massa seca das raízes de D. insularis, contudo, estimulou em 14% a mesma variável em E. heterophylla. O fracionamento do extrato de D. lab lab, preparado com material vegetal seco, não afetou a porcentagem de germinação e a biomassa de B. pilosa, mas interferiu no comprimento do hipocótilo e no comprimento da raiz primária. As frações do extrato D. lab lab+Pachyrhizus sp.+S. bicolor, preparado com material vegetal liofilizado e submetido a banho-maria, interferiu em todas as variáveis avaliadas. Conclui-se que existe efeito alelopático de extratos de S. bicolor, D. lab lab, e P. Pachyrhizus sp. isolados ou em mistura, em diferentes modos de preparo, sobre a germinação e o desenvolvimento de B. pilosa, E. heterophylla, e D. insularis, sendo este efeito de estímulo ou de inibição, de acordo com o extrato utilizado e o modo de preparo. Ainda, que o efeito alelopático ocorre pela ação de várias substâncias de diferentes polaridades.

Partnerrelaterat våld är ett folkhälsoproblem (Garcia- Moreno, 2006). Enligt världshälsoorganisationen (WHO) kan hälso- och sjukvården spela en viktig roll genom att upptäcka drabbade kvinnor i ett tidigt skede (WHO, 2006). Inom hälso- och sjukvården har barnmorskan en stor möjlighet att identifiera utsatta kvinnor (Heimer & Stenson, 2008). Dock påverkas denna möjlighet av olika faktorer (Socialstyrelsen, 2002). Denna studie är delvis ett uppdrag, vilket är att utvärdera huruvida Bidens, en studie gjord på gravida kvinnor i Malmö under 2008, är en faktor som påverkar barnmorskan i att uppmärksamma partnerrelaterat våld. Syftet med denna studie är att belysa Bidens och andra faktorers påverkan på barnmorskans benägenhet att uppmärksamma och fråga om partnerrelaterat våld hos kvinnor på barnmorskemottagningen. I denna studie, med kvalitativ ansats, har totalt fem fokusgrupper med barnmorskor genomförts. Studiens analys är inspirerad av Burnards innehållsanalys (1991) och resulterade i fyra huvudkategorier: Magkänslan, Barnmorskans och kvinnans relation, Yttre faktorer samt Bidens. Kategorierna innehåller två till fyra underkategorier som visar olika faktorers påverkan på barnmorskorna. Resultatet diskuteras delvis mot bakgrund av Orlandos reflektiva omvårdnadsprocess. Slutsatsen av denna studie är att det barnmorskorna behöver för att i högre grad uppmärksamma och fråga kvinnor om partnerrelaterat våld är mer tid för patienterna, ökad kunskap och erfarenhet i form av utbildning och träning i att öppna upp för samtal om våld. Dessutom behövs uppbackning och ökat samarbete med andra instanser för att barnmorskorna inte ska känna sig ensamma med problemet. Nyckelord: Barnmorska, Bidens, Faktorer, Fokusgrupper, Partnerrelaterat våld, Uppmärksamma / Intimate partner violence is a major public health problem (Garcia-Moreno, 2006) and according to the World Health Organization (WHO) health care services can play an important role in the detection of affected women in early stages (WHO, 2006). Within the health care services the midwife has a great opportunity to identify abused women (Heimer & Stenson, 2008). However, this opportunity is affected by various factors (Socialstyrelsen, 2002). This study is part of a commission, which is to evaluate whether midwives’ participation in Bidens, a study done on pregnant women in Malmö 2008, itself is a factor affecting the identification of intimate partner violence. The purpose of this study is to highlight the Bidens’ and other factors’ impact on the midwife's willingness to identify and inquire for intimate partner violence among women at antenatal clinics. In this study, which has a qualitative approach, a total of five focus groups with midwives were carried out. The analysis of the study is inspired by Burnard’s content analysis (1991) and resulted in four main categories: Gut instinct, The relationship between the midwife and the woman, External factors and Bidens. The categories contain two to four sub-categories that show different factors and their impact on the midwives. The results are partly discussed in the light of Orlando’s theory of a reflective nursing process. The conclusion from this study is that what the midwives needs to identify and inquire women about intimate partner violence is more time for their patients, increased knowledge and experience through education and training how to open up the question about violence. Furthermore an increased collaboration with other authority needs to be established so that the midwives dosen´t feel alone with the problem.Keywords: Bidens, Factors, Focus groups, Identify, Intimate partner violence, Midwife

Resumo: O Bidens mosaic virus (BiMV) é um Potyvirus relatado pela primeira vez no Brasil, no Estado de São Paulo, onde foram realizados estudos através de microscopia eletrônica por Kitajima et al.(1961). É um vírus que causa sintomas em espécies de importância econômica como o girassol, a alface e a ervilha, além de algumas plantas ornamentais. Atualmente, embora se conheça o seu mecanismo de transmissão, a sua sintomatologia, as suas propriedades biológicas e físico-químicas e o seu círculo de hospedeiras, pouco se sabe sobre a importância do BiMV para a cultura da alface e a possíveis fontes de resistência em Lactuca sativa. O presente trabalho teve como objetivos a coleta de isolados de BiMV de diferentes regiões produtoras de alface no Estado de São Paulo, sua caracterização biológica, identificação por meio de técnicas moleculares e triagem de materiais de alface para resistência. Isolados virais coletados em plantas de picão-preto de regiões produtoras do Estado de São Paulo foram submetidos a diferentes metodologias de identificação e caracterização. Testes biológicos em hospedeiros diferenciais permitiram a diferenciação dos isolados de outros vírus de importância para a cultura da alface e a caracterização biológica de alguns isolados como BiMV. Foram vistas partículas flexuosas alongadas ao microscópio eletrônico de transmissão, sugerindo a participação de um Potyvirus na manifestação dos sintomas. O seqüenciamento direto de produtos de PCR de um isolado mostrou identidade de 96% com a seqüência de um isolado de BiMV coletado de ervilha. Isolados monolesionais multiplicados de BiMV foram inoculados em 89 cultivares de alface 2 de diferentes grupos varietais. A maioria das cultivares se mostrou resistente ao BiMV, exceto no caso das nacionais do tipo repolhuda lisa, que foram todas suscetíveis... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: Bidens mosaic virus (BiMV) belongs to the genus Potyvirus and was originally described in São Paulo, Brazil, under examinations by electron microscopy made on exudates obtained from infected plants by Kitajima et al.(1961). Some of the affected plants with economic importance are sunflower, lettuce, peas and bedding plants. Until now, transmission mechanisms, symptomatology on host plants, physical properties and host range had been reported, but few information are available about the importance of BiMV to commercial lettuce fields. At the present time there is no information on resistant cultivars in Lactuca sativa. The aims of this work was to collect isolates of BiMV from different commercial fields in São Paulo State; to determine their biological characterization and their identification by molecular methods and identify sources of resistance in lettuce by the screening of accessions for resistance. Virus isolates originated from different regions were submitted to various methods of detection and characterization. Tests on experimental host range provided data to differentiate one lettuce-infecting species to the others and the virus identification based upon symptom expression. Flexuous rods were observed in leaf extracts from infected plants, showing the presence of a Potyvirus as the causal agent of the symptoms. Direct nucleotide sequencing from amplified PCR products showed 96% of identity compared to an accession of BiMV at GenBank. Monolesional isolates of BiMV properly maintained and multiplied in propagational host were inoculated in 89 cultivars of lettuce of different horticultural types. The great number of them showed resistance to BiMV, except in the case 4 of the Brazilian butterhead types, all susceptible. At present, as the most important commercial lettuce cultivars exhibit high degrees of BiMV resistance, mainly in leafy and iceberg types, it is possible to affirm... (Complete abstract, click electronic address below) / Orientador: Norberto da Silva / Coorientador: Marcelo Agenor Pavan / Banca: Renate Krause Sakate / Banca: Alexandre de Moura Guimarães / Mestre