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Estudo da produção de poligalacturonases em processo submerso em biorreatores de agitação mecânica e airlift

Fontana, Roselei Claudete 20 July 2009 (has links)
Nesse trabalho, foi estudada a produção de endo e exo-poligalacturonases (PG) por Aspergillus oryzae IPT 301, em biorreatores com agitação mecânica (STR) e airlift de circulação interna e externa em escala de bancada. Utilizando um planejamento experimental, foi definida uma formulação de meio isento de sólidos em suspensão (WBE), com o qual foram obtidas atividades máximas de endo e exo-PG comparáveis com as atingidas com um meio formulado com farelo de trigo integral. Com o meio WBE, a produção de PG foi comparada em STR e airlift de circulação interna. Nesses ensaios, foram alcançadas atividades superiores de endo-PG (91,3 unidades por mililitro de meio, U/mL) e exo-PG (65,2 U/mL) com o STR, enquanto que com o biorreator airlift as atividades máximas de endo-PG e exo-PG foram 86,2 U/mL e 60,6 U/mL, respectivamente. Esses resultados demonstram a viabilidade do emprego da configuração airlift na produção de poligalacturonases por A. oryzae. Em cultivos em STR, foi avaliada a influência da presença, no meio WBE, de diferentes concentrações de pectina (0, 10 e 20 g/L) e glicose (0, 5, 10, 15, 20, 25 e 30 g/L) sobre o processo. Adicionalmente, em meios contendo 20 g/L de pectina e 20, 30 e 50 g/L de glicose, o pH foi controlado em um valor mínimo de 2,7. Nos testes em que o pH foi controlado nesse valor mínimo, foi observado um forte incremento das atividades de endo e exo-PG, destacando-se a concentração de glicose de 30 g/L com a qual atividades enzimáticas de 175,0 U/mL de endo-PG e 103,0 U/mL de exo-PG foram obtidas. Em STR, foram ainda testados meios de cultivo formulados com pectina em sua forma normal (WBE) e pectina que sofreu hidrólise enzimática parcial, com o fim de promover a redução da viscosidade do meio e, dessa forma, favorecer a transferência de oxigênio para o cultivo. Numa das condições testadas (WBE5), o meio foi formulado com metade da pectina parcialmente hidrolisada e com a outra metade não tratada. Nessa condição, atividades de endo-PG de 149,0 U/mL e de exo-PG de 82,2 U/mL foram obtidas, enquanto que com o uso do meio com a pectina integral atividades estatisticamente inferiores 130,0 e 78,0 U/mL, respectivamente foram determinadas. A produção de PG foi avaliada na condição WBE5 e na condição WBE6, com pectina não hidrolisada, em que os sais nutrientes foram adicionados parceladamente ao meio durante o cultivo, em biorreatores STR e airlift de circulação interna e externa. Após 96 h de processo, atividade superior de endo-PG (145,0 U/mL) foi atingida no STR, na condição WBE5, seguindo-se a condição WBE6 (140,0 U/mL) no mesmo reator. Em biorreatores airlift, títulos superiores de endo-PG (116,0 U/mL) e exo-PG (80,4 U/mL) foram atingidos no sistema de circulação externa, na condição WBE6, observando-se, para exo-PG, atividade semelhante à obtida no STR. O processo foi avaliado em meios com diferentes concentrações de KH2PO4, (NH4)2SO4, FeSO4, MnSO4, MgSO4 e ZnSO4. Em análises individuais de cada um desses sais, em ensaios em frascos agitados, evidenciou-se a influência nas concentrações de sulfatos de NH4+, Fe2+, Mn2+, Mg2+, Zn2+ sobre a produção de poligalacturonases. Em STR, sob condições controladas, foi comparada a produção enzimática no meio padrão WBE e com diferentes condições de adição dos sais ao cultivo. Entre as condições avaliadas em STR, as mais altas atividades de endo-PG (175 U/mL) e de exo-PG (86,5 U/mL) foram atingidas quando KH2PO4, (NH4)2SO4, FeSO4, MnSO4, MgSO4 e ZnSO4 foram adicionados parceladamente ao meio durante o processo, com ganho significativo em relação ao meio WBE em que essas atividades alcançaram 130,0 e 78,6 U/mL, respectivamente. Os resultados do presente trabalho demonstram o alto potencial dos biorreatores airlift, como um sistema de relativa simplicidade de construção e operação, para a produção de poligalacturonases em grande escala. / In this work, the production of endo and exo-polygalacturonase (PG) by Aspergillus oryzae IPT 301 was studied in a stirred tank bioreactor (STR) and in airlift bioreactors with internal and external circulation loop. Using a factorial experimental design, a soluble culture medium (WBE) was defined which allowed the production of exo and endo-PG comparable to that obtained in a medium containing suspended wheat bran. With the WBE medium, the production of PG was compared in STR and internal-circulation-airlift bioreactor. In these tests, superior enzymatic activities for both endo-PG (91.3 units per mL of medium, U/mL) and exo-PG (65.2 U/mL) were obtained in the STR, whereas in the airlift reactor the maximum activities were 86.2 U/mL and 60.6 U/mL, respectively. These results indicate the feasibility of airlift reactors for producing polygalacturonases by A. oryzae. In STR cultivations, the influence of different concentrations of pectin (0, 10, and 20 g/L) and glucose (0, 5, 10, 15, 20, 25 e 30 g/L), in WBE medium, on the process was assessed. Furthermore, in media containing 20 g/L pectin and 20, 30, and 50 g/L glucose, tests where pH was controlled to a minimum value of 2.7 were carried out. In tests where pH was controlled to this minimum value, strong improvement of both endo and exo-PG activities was attained, especially in the run with 30 g/L glucose in which enzyme activities of 175.0 U/mL for endo-PG and 103.0 U/mL for exo-PG. In STR, cultivation media formulated with regular pectin (WBE) and with partially enzyme-hydrolysed pectin to reduce the viscosity of medium and as such to improve the oxygen transfer to the culture were evaluated. In one condition (WBE5), the medium was formulated with half of the pectin partially hydrolysed and half of the pectin untreated. In this condition, activities of endo-PG of 149.0 U/mL and exo-PG of 82.2 U/mL were achieved, whereas with the non-hydrolysed-pectin medium statistically inferior activities 130.0 and 78.0 U/mL, respectively were measured. PG production was compared in STR and in both airlift bioreactors (internal and external circulation loop), using the condition WBE5 and a further condition (WBE6), with non-hydrolysed pectin medium, in which the nutrient salts were fed to the medium in lots during the cultivation. After 96 h of process, a higher activity of endo-PG (145.0 U/mL) was attained in STR followed by the condition WBE6 in the same reactor (140.0 U/mL). In airlift bioreactors, superior titres of endo-PG (116.0 U/mL) and exo-PG (80.4 U/mL) were obtained in the condition WBE6, with the external loop configuration, the activity of exo-PG being similar to that measured in STR. The process was evaluated in media with different concentrations of KH2PO4, (NH4)2SO4, FeSO4, MnSO4, MgSO4 e ZnSO4. In individual analysis of each salt, performed in shake-flasks experiments, the influence of the concentrations of NH4+, Fe2+, Mn2+, Mg2+, Zn2+ sulphates on the production of polygalacturonases was evidenced. In STR, under controlled conditions, the enzyme production in WBE medium was compared with different conditions of salt feeding to the culture. Among the conditions tested in STR, the highest activities for endo-PG (175.0 U/mL) and exo-PG (86.5 U/mL) were achieved when KH2PO4, (NH4)2SO4, FeSO4, MnSO4, MgSO4 e ZnSO4 were fed to the medium in lots, with a significant improvement in comparison to the use of WBE medium that resulted in activities of 130.0 and 78.6 U/mL, respectively. The results of this work reveal the high potential of airlift bioreactors as a relatively simple building operating system to be used in large-scale polygalacturonase production.
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Produção, purificação, caracterização bioquimica e aplicações da lipase de Alcaligenes sp.

Sousa Neto, Roseli de 23 October 1996 (has links)
Orientador: Glaucia M. Pastore / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T18:50:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SousaNeto_Roselide_M.pdf: 5421437 bytes, checksum: bb45f47bcfa77af3377a10cacce24442 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Quinhentas e cinquenta linhagens de microrganismos foram isolados do solo, frutas, resíduos industriais e testados quanto à capacidade de hidrolisar glicerídeos em meio alcalino. Cinco linhagens de bactérias foram selecionadas como produtoras de lipase alcalina. Entre elas, uma linhagem identificada como Alcaligenes sp., apresentou alta produção de lipase alcalina em meio de cultivo composto por: 2% de farinha de soja torrada, 1% farinha de trigo, 0,5% de K2HPO4, 1 % de água de maceração de milho (com steep liquor) e 0,2% de Na2CO3. A enzima lipolítica de Alcaligenes sp. hidrolisou as ligações éster de triglicerídeos insolúveis em água, podendo assim, ser classificada como lipase (Glicerol Éster Hidrolase E.C.3.1.1.3). Estudou-se a produção da lipase extracelular pela linhagem selecionada, a caracterização da enzima no estado bruto e a purificação através de fracionamento com sulfato de amônio e cromatografia em coluna DEAE- Sephadex A-50. Na purificação das proteínas, foram detectadas 2 frações com atividade de lipase, sendo denominadas de frações I e II. As frações foram coletadas e concentradas em membrana de ultrafiltração. A fração I apresentou atividade ótima. em pH 8 a 40°C. A fração II apresentou atividade ótima em pH 9 a 45°C. A presença de MgSO4 e CaCl2 provocaram um aumento da atividade enzimática das duas frações, por outro lado, ZnSO4 e FeSO4 inibiram moderadamente a atividade enzimática de ambas frações. Os reagentes cisteína e f3-mercaptoetanol inibiram significativamente a atividade enzimática das frações I e II. A esterificação de ácido graxo e glicerol pela lipase bruta de Alcaligenes sp. foi examinada e verificou-se que a enzima esterificou apenas 34% após 48 horas de incubação. A lipase bruta de Alcaligenes sp. mostrou-se estável na presença de detergentes e protease a pH 9. / Abstract: The screening of alkaline lipase of producing microorganisms was performed using 550 strains of microorganisms wich were isolated from samples of soil, fruits and industrial residues. It was found that five strains of bacteria produced high activity of extracellular lipase and one of them produced exceptionally high alkaline lipase activity. This strain was identified as Alcaligenes sp. The medium for lipase production was composed of 2% roasted soybean meal, 1 % wheat meal, 0,5% K2HP04, 1 % of com steep liquor and 0,2% Na2C03. Maximum enzyme activity with olive oil as substrate was observed at pH 9,0 at 45°C. The enzyme extract was purified by fractionation with ammonium sulfate and DEAE Sephadex A-50 column chromatography. In the elution between 0,lM and 0,3M of NaCI, two active fractions were separately, collected, concentrated by ultrafiltration on membrane and characterized. It was observed that optimum pH activity for the fraction I was 8,0 at 40°C with olive oil as substrate. The optimum pH activity for the fraction II was 9,0 at 45°C with olive oil as substrate. The effects of various metal ions and other reagentes at the final concentration of 1 mM on the lipase activity were studied. The fractions I and II were inhibited by ZnS04 and FeS04, on other hand CaCl2 and MgS04 increased the activity. Both fractions were inhibited by f3- mercaptoethanol and cysteine. The enzimatic esterification using oleic acid and glycerol by lipase from Alcaligenes sp was examined. It was found that the reaction system esterified only 34% after 48 hours of reaction time. The lipase from Alcaligenes sp was estable on detergents and protease systems / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos
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Variabilidade bioquimica, sorologica e eletroforetica entre isolados de Pseudomonas syringae pv. lachrymans

Prestes, Elizabeth Biagioni 04 December 1997 (has links)
Orientadores: Tomomasa Yano, Valdemar Atilio Malavolta Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T03:21:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Prestes_ElizabethBiagioni_M.pdf: 3440718 bytes, checksum: 96e33c9c33d6651a4c83a7b6c9f3ae39 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Este estudo objetivou a caracterização ou a confirmação do patovar de diversos isolados bacterianos patogênicos ao pepino, incorporados à Coleção de Culturas da Seção de Bacteriologia Fitopatológica do Instituto Biológico (IBSBF) e caracterizados como Pseudomonas syringae pv. lachrymans, P. s. pv. syringae, P. s. pv. tabaci, ou, então, apenas a nível genérico. Essa caracterização foi feita por testes bioquímicos, culturais, sorológicos e eletroforéticos. Os resultados mostraram que apenas a utilização de testes bioquímicos e culturais podem ser insuficientes para a caracterização de patovares de bactérias patogênicas ao pepino, devido à variabilidade natural ocorrida entre os diferentes isolados. O emprego de reações sorológicas de dupla difusão em ágar com antígeno autoclavado e a eletroforese de proteínas totais em gel de poliacrilamida PAGE/SDS não permitiram, também, a diferenciação a nível de patovar entre os isolados empregados neste estudo. Os dados obtidos revelaram, ainda, que alguns isolados bacterianos possuem características que não permitem enquadrá-los em nenhum dos patovares de Pseudomonas syringae patogênicos ao pepino. Os resultados mostraram também que o isolado 1258, que é a estirpe tipo do patovar lachrymans, possui características que diferem da descrição desse patovar, mostrando a necessidade de se redefinir uma outra estirpe como neopatotipo de Pseudomonas syringae pv. lachrymans / Abstract: The objective of this study was the characterization or the confirmation of the pathovar of several bacterial isolates from cucumber that were incorporated in the Coleção de Culturas da Seção de Bacteriologia Fitopatológica do Instituto Biológico (IBSBF) and characterized as Pseudomonas syringae pv. lachrymans, P. s. pv. syringae, P. s. pv. tabaci or simply as Pseudomonas sp. This characterization was made by biochemical, cultural, serological and electrophoretical tests. The results showed that only biochemical and cultural tests can be insufficient for the characterization of the pathovars of cucumber pathogenic bacteria because of its natural variability. The utilization of serological tests with agar double diffusion with heat-treated cells and the electrophoresis by PAGE/SDS with total proteins were not sufficient for the differentiation among the isolates tested in this study. It was observed that some isolates have distinct characteristics of the pathovars of Pseudomonas syringae pathogenic to cucumber. It was also possible to verify that the isolate 1258, the representative strain for the pathovar lachrymans, has different characteristics from the description of this pathovar, confirming the necessity of a redefinition of another strain as neopathotype for Pseudomonas syringae pv. lachrymans / Mestrado / Microbiologia / Mestre em Ciências Biológicas
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Caracterização da atividade enzimatica da triparedoxina peroxidase em Trypanosoma cruzi

Rodrigues, Renata Vilela 01 December 2001 (has links)
Orientadores: Fernanda Ramos Gadelha, Luis Eduardo Soares Netto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-27T10:57:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_RenataVilela_M.pdf: 5015994 bytes, checksum: 1edbb85678d6958681c2f20e5bc88952 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi caracterizar e comparar a atividade enzimática da triparedoxina peroxidase (TXNp) em duas cepas de T. cruzi que apresentam diferentes resistências ao estresse oxidativo. A identificação da TXNp foi feita em extratos celulares totais da forma epimastigota de T. cruzi das cepas Y e Tulahuen 2. De um modo geral, a cepa Tulahuen 2 tem uma concentração maior desta enzÍma do que a Y. Variações na concentração da TXNp dentro de uma mesma cepa com origens geográficas diferentes também foi observada. A TXNp obtida em extratos celulares totais de T. cruzi epimastigotas possui função antioxidante, protegendo a glutamina sintetase (GS) contra as espécies reativas de oxigênio (EROs) produzidas pelo sistema oxidante DTT/Fe3+/02. Parece não estar envolvida com a proliferação celular, uma vez que uma correlação não pôde ser estabelecida através da análise por Western blotting entre os diferentes dias de crescimento e a quantidade desta proteína. A triparedoxina (TXN) também foi encontrada nos mesmos extratos e variações em sua concentração foram observadas quando as cepas e seus diferentes dias de crescimento foram comparados. Neste caso também as células Tulahuen 2 apresentaram uma maior concentração da TXN. Uma maior resistência às EROs geradas pelo sistema DTT/Fe3+/02 pode ser explicada pela maior concentração de TXN e TXNp encontradas. Isto levaria a um metabolismo de hidroperóxidos mais efetivo, quando comparado à cepay. Os "sheddings" de T. cruzi de ambas as formas (epimastigota e tripomastigota) mostraram a liberação de TXNp para o meio extracelular / Abstract: The objective of this work was to charactetize and compare the tryparedoxin peroxidase (TXNp) enzymatic activity in two strains of T. cruzi that have different resistances to oxidative stress. TXNp identification was made in total ceIlular extracts ITom epimastigote of Y and Tulahuen 2 strain. In a broad sense, Tulauen 2 strain has a higher concentration of this enzyme when compared to the Y strain. Differences in TXNp concentration into a same strain with different geographic origins were also observed. TXNp present in total ceIlular extracts ITom T. cruzi epimastigote has an antioxidant function, protecting glutamine synthetase (GS) against reactive oxygen species (ROS) produced by the DTTlFe3+/02 oxidant system. lt appears not to be involved with cellular proliferation, since a correlation could not be stablished using Westem Blot analysis, between the different growth days and the amount of this protein. Tryparedoxin (TXN) was also found in the same extracts and variation in its concentration were observed when strains and different growth days were compared. Also in this case, Tulahuen 2 ceIls had a higher concentration of TXN. The higher resistance observed in the Tulahuen 2 strain against ROS generated by DTTlFe3+/02 system can be explained by the higher concentration of TXN and TXNp found. This would led to a hydroperoxide metabolism system more effective, when compared to the Y strain. T. cruzi sheddings of both forms (epimastigote and trypomastigote) showed liberation ofTXNp to the extraceIlular environrnent / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular
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Estudo bioquimico das peroxidases brutas de abacaxi Ananas comosus (L) Merril : cultivar IAC gomo-de-mel e clone IAC-1

Brito, Carlos Alexandre Koguishi de 29 July 2018 (has links)
Orientador: Helia Harumi Sato / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-29T04:55:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brito_CarlosAlexandreKoguishide_M.pdf: 16046069 bytes, checksum: 515e6c62356908bf5476aa83ccc17451 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Foram desenvolvidos no IAC (Instituto Agronômico de Campinas) , clones de abacaxi (Ananas comosus (L.) Merrill), com características organolépticas mais desejáveis e resistentes à fusariose, resultantes de melhoramento genético por meiode cruzamentosdirigidose ao acaso(SPIRONELLOet a/ii, 1994)...Observação: O resumo, na integra, podera ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: New pineapple cultivars of Ananas comosus (L.) Merrill were developed at Campinas Agronomic Institute - IAC, with more desirable organoleptic characteristics and also fusariose resistant, resulting from genetic improvement by chance and programed crosses (SPIRONELLO et alii, 1994...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos
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Dentifricio de baixa concentração de fluoreto : efeito anticarie e mecanismos envolvidos / Low-F concentration dentifrice : anticaries effect and mechanisms involved.

Zamataro, Claudia Bianchi 18 April 2008 (has links)
Orientador: Livia Maria Andalo Tenuta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-11T10:53:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zamataro_ClaudiaBianchi_M.pdf: 2650038 bytes, checksum: 6be1cd9f989e8bbd7776d722dc3d8f62 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A eficiência anticárie dos dentifrícios fluoretados contendo 1000-1500 µg F/g está bem estabelecida, porém eles têm sido considerados fator de risco para fluorose dental. Para reduzir esse risco, dentifrícios contendo baixa concentração de fluoreto (F) (500-550 µg F/g) têm sido recomendados, mas sua eficiência anticárie ainda não foi demonstrada. Assim, o objetivo deste trabalho foi: 1. comparar a disponibilidade de F na saliva após utilização de dentifrício de baixa concentração de F (BC, 500 µg F/g, NaF), ou dentifrício de concentração convencional (CC, 1100 µg F/g, NaF), seguida ou não de enxágüe; e 2: avaliar in situ o potencial anticariogênico desses dentifrícios, estudando o efeito do F disponível no biofilme dental após a escovação, associado ou não aos produtos formados no esmalte pelo tratamento com os dentifrícios. Em ambos os estudos, foi empregado um delineamento cruzado e duplo cego. No estudo 1, amostras de saliva não estimulada de 5 voluntários foram coletadas antes e imediatamente após a escovação e nos tempos 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 30, 45 e 60 min após a escovação com BC ou CC, seguida ou não de enxágüe. A área sob a curva da concentração de F na saliva versus tempo foi calculada para determinar a biodisponibilidade de F salivar. Esta foi reduzida em 2,5 x pelo enxágüe pósescovação (p<0,05) e foi semelhante quando BC foi utilizado sem enxágüe e CC foi seguido de enxágüe (p>0,05). No estudo 2, doze voluntários realizaram escovação com dentifrícios contendo concentrações de F distintas (placebo (P) ¿ controle negativo, CC ou BC) e utilizaram um dispositivo palatino contendo blocos de esmalte bovino, previamente tratados ou não com suspensão do respectivo dentifrício. Os blocos foram cobertos com uma placa teste de S. mutans IB 1600 e após 30 min in situ, a placa foi coletada e a concentração de F no fluido foi determinada através de técnica microanalítica com eletrodo íon específico. Um bochecho com sacarose foi realizado como desafio cariogênico e após 45 min os blocos remanescentes e a placa teste foram coletados para avaliação, respectivamente, da perda mineral (simulando o efeito de diferentes espessuras de placa) e da concentração de F no fluido. O pré-tratamento dos blocos de esmalte com os dentifrícios fluoretados isoladamente não impediu a perda mineral em relação ao controle (p>0,05), mas causou aumento na concentração de F no fluido da placa (p<0,05). A escovação com os dentifrícios fluoretados aumentou a concentração de F no fluido da placa, sendo encontrada diferença significativa entre BC e CC (p<0,05), além de uma menor perda mineral em relação ao controle (p<0,05). Adicionalmente, embora a perda mineral tenha sido semelhante para BC e CC na simulação de espessura de placa de até 0,5 mm, ela foi maior para BC na placa mais espessa (1 a 1,5 mm) (p<0,05). Os resultados sugerem que o dentifrício de concentração convencional é mais efetivo do que o de baixa concentração na inibição da perda mineral. Adicionalmente, deve-se estimular o enxágüe da boca após o uso do dentifrício de concentração convencional por crianças de pequena idade / Abstract: The anticaries efficiency of fluoride (F) dentifrices containing 1000-1500 µg F/g is well established, but they are considered a risk factor to dental fluorosis. In order to reduce this risk, low-F concentration dentifrices (500-550 µg F/g) have been recommended, but their anticaries efficiency has not been demonstrated. Thus, this study aimed to: 1. compare salivary F availability after brushing with low- F concentration (LC, 500 µg F/g, NaF) or conventional F concentration (CC, 1100 µg F/g, NaF) dentifrices, followed or not by a water rinse and 2: evaluate in situ the anticaries potential of these dentifrices, studying the anticaries effect of F available on the dental biofilm after brushing, associated or not to F products formed on enamel by F dentifrice application was evaluated. In both studies, a crossover, double blind design was used. In study 1, samples of non-stimulated saliva from 5 volunteers were collected before and immediately after brushing with LC or CC, followed or not by a rinse, and after 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 30, 45 and 60 min. The area under the curve of salivary F concentration versus time was calculated to determine F bioavailability in saliva. F salivary bioavailability was reduced 2.5 X by the post-brushing rinse (p<0.05) and it was similar when LC was used without rinsing and CC was used followed by a rinse (p>0.05). In study 2, twelve volunteers brushed with dentifrices containing distinct F concentrations (placebo (P) ¿ negative control, LC or CC) and used a palatal appliance containing bovine enamel blocks previously treated or not with a slurry of assigned dentifrice. The blocks were covered with a test plaque from S. mutans IB 1600 and after 30 min in situ, F concentration in the fluid of plaque was assessed. A sucrose rinse was performed as a cariogenic challenge and after 45 min the remaining blocks and plaque test were removed to evaluate, respectively, mineral loss (as a function of plaque thickness) and F concentration in plaque fluid. The isolated effect of the pretreatment of enamel blocks with F dentifrices did not reduced mineral loss when compared to the control (p>0.05), but resulted in higher F concentration in the plaque fluid (p<0.05). Brushing with F dentifrices increased F concentration in the plaque fluid, which was significantly different between LC and CC (p<0.05), and resulted in lower mineral loss when compared to the control (p<0.05). Additionally, although LC and CC did not differ when mineral loss was evaluated on a plaque thickness simulation of up to 0.5 mm, CC was more efficient than LC at thicker plaque (1 to 1.5 mm) (p<0.05). The results suggest that conventional F concentration dentifrice is more efficient than the low-F one in the inhibition of mineral loss. Additionally, post-brushing rinse should be recommended after the use of conventional F concentration dentifrices by young children / Mestrado / Cariologia / Mestre em Odontologia
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Fotossintese, relações hidricas e alterações bioquimicas em laranjeira 'pera' com CVC e submetida a deficiencia hidrica

Medina, Camilo Lazaro 18 July 2002 (has links)
Orientador: Eduardo Caruso Machado / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T23:05:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Medina_CamiloLazaro_D.pdf: 7144962 bytes, checksum: f5ab9eb4acbd9b98d020e4d3273f6c4b (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O Brasil é o maior produtor mundial de citros, porém a citricultura vem sofrendo perdas devidas à clorose variegada dos citros (CVC), doença causada pela Xylella fastidiosa, bactéria de colonização restrita ao xilema. Embora esteja muito distnouída pelo território nacional, há indicações de que a ocorrência de deficiência hídrica, freqüente em algumas regiões, pode aumentar a severidade da CVC. As folhas das plantas com CVC apresentam sintomas de deficiência hídrica, com decréscimos significativos nas taxas de assimilação de CO2 (A) e de transpiração (E), na condutância estomática (gs) e no potencial da água na folha ('P a). Esses sintomas estão relacionados com o aumento da resistência do fluxo de água no xilema. Também há possibilidade da existência de outros mecanismos de patogenicidade interferindo na abertura dos estômatos e na eficiência fotossintética. Em folhas de laranjeiras, com longo período de infecção por X fastidiosa, há aumento na concentração de compostos fenólicos e na atividade de enzimas relacionadas aos mecanismos naturais de defesa contra patógenos. Embora não haja relatos sobre a participação dessas substâncias no início do desenvolvimento da doença, há a possibilidade que estas sejam importante barreira ao desenvolvimento da bactéria no xilema e que elas sejam influenciadas pela dispomoilidade de carboidratos da planta e/ou pela deficiência hídrica. Este trabaJho foi dividido em dois capítulos. O objetivo do primeiro foi estudar a evolução dos sintomas foliares e as alterações nas trocas gasosas e relações hídricas de laranjeiras 'Pêra, promovidas ao longo do tempo pela CVC e sob a influência da deficiência hídrica. O experimento foi conduzido sob condições naturais com laranjeiras 'Pêra' (Citrus sinensis L. Osbeck) enxertadas em limoeiro 'Cravo' (Citrus limonia), plantadas em potes de 100 L e inoculadas com X fastidiosa por encostia com plântulas doentes. A CVC causou diminuição de forma gradativa em 'l'a, A e gs, mesmo na ausência de deficiência hídrica. Até os 9 meses posteriores à inoculação da bactéria, as reduções de 'l' a, A e I II III I I gs foram restritas ao período da tarde e para os períodos da manhã, e da tarde aos 22 meses posteriores à inoculação (MPI). Aumento na razão entre a concentração interna e externa de CO2 (C;lCa) e declínio na eficiência no uso da água (EUA) ocorreram apenas aos 22 :MPI, indicando que houve perda da eficiência fotossintética em plantas com CVC. Houve semelhança ao longo do tempo de infecção, nas respostas de A em função de gs e de A em função de 'l' a, entre plantas sadias e doentes. Isto permitiu concluir que a menor eficiência fotossintética de plantas com CVC está principalmente relacionada ao menor 'l' a, causado pela menor condutividade hidráulica no xilema, em conseqüência da colonização das bactérias. A ocorrência da deficiência hídrica no início de desenvolvimento da doença aumentou os sintomas da CVC e reduziu 'l'a, A e gs, confirmando que a deficiência hídrica agrava os danos causados pela CVc. A pequena capacidade fotossintética de plantas com CVC e a redução de A em função do aumento do DPV, podem tornar estas plantas menos adaptáveis em ambientes de maior demanda atmosférica. Isso, aliado aos prejuízos causados pelo déficit hídrico, justifica a maior severidade da doença em regiões de maior DPV e sujeitas à deficiência hídrica, como o centro e o norte paulista. O objetivo do segundo capítulo foi avaliar alterações bioquimicas nas folhas, através da composição de açúcares solúveis, aminoácidos livres, compostos fenólicos e da atividade r! de peroxidases, no início da manifestação dos sintomas de CVC e sob a influência da deficiência hídrica. A composição dos açúcares solúveis, aminoácidos livres, compostos fenólicos, a atividade e o perfil eletroforético de peroxidases não foram afetadas até os 9 MPI, embora houvesse a presença de sintomas da doença e diminuições significativas de A, E e gs. Houve diminuição na concentração de açúcares solúveis somente em folhas de plantas com CVC submetidas ao estresse hídrico. Aumento na atividade de peroxidases foi verificado somente em folhas com presença de sintomas mais avançados de cloro se. Tais resultados indicam que os mecanismos de defesa das laranjeiras não são ativados no período inicial de desenvolvimento da CVC. Estes resultados também sugerem que o hábito da bactéria colonizar o xilema, causando desbalanço hídrico, deve ser o principal fator de sua patogenicidade. A deficiência hídrica diminuiu a atividade de peroxidases em folhas com sintomas de CVC, indicando que pode causar prejuízos nas defesas da plantas, sendo mais um fator que justifica o maior desenvolvimento da doença em regiões mais secas / Abstract: Brazil is the largest producer of citrus ftuits in the World. However, the citrus variegated chlorosis (eVe), a disease caused by the bacteria restrict to xylem Xylella fastidiosa, is causing many impairment in Brazilian citrus industry. Although this disease is disseminated, there are some indications that water deficiency may increase the severity of eve in some regions. The leaves of eve aifected plants presents drought stress symptoms, associated with significant decrease on carbon dioxide assimilation (A) and transpiration rates (E), stomatal conductance (gs) and leaf water potential ( / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal
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