O crescimento das atividades urbano-industriais tem provocado um significativo aumento nas emissões de poluentes aéreos para a atmosfera. A poluição do ar, um dos principais fatores determinantes da destruição do meio ambiente, causa estresse às plantas, já que apresenta compostos altamente reativos e danosos, como os metais pesados. O uso de plantas bioindicadoras de poluição aérea é uma prática comum para o monitoramento da qualidade do ar e para o diagnóstico dos efeitos da poluição aérea na vegetação. Entre as plantas bioindicadoras mais utilizadas, destaca-se a gramínea C3 de clima temperado Lolium multiflorum ssp. italicum Beck var. Lema, que acumula metais pesados, fluoretos e enxofre quando se desenvolve na presença desses elementos químicos no ar. Além disso, esta espécie acumula frutano, um carboidrato solúvel cuja produção pode ser alterada por um número variado de perturbações ambientais. O presente trabalho foi dividido em três experimentos com os objetivos de (1) verificar a partição de carboidratos solúveis em cinco partes distintas (lâmina em alongamento, lâmina expandida, porção superior do estolho, porção inferior do estolho e raízes) de plantas de L. multiflorum; (2) analisar as relações sazonais e diurnas entre concentrações de poluentes aéreos urbanos, principalmente de dióxidos de enxofre e de nitrogênio e de material particulado, entre outros fatores ambientais, concentrações foliares de metais e mudanças no acúmulo de frutanos em plantas de Lolium multiflorum Lam ssp. italicum expostas a diferentes condições de poluição do ar na cidade de São Paulo; (3) verificar se as variações sazonais e diurnas no conteúdo de frutanos são determinadas por acúmulos foliares de enxofre e metais pesados ou por variações nas concentrações de poluentes gasosos; e (4) verificar a eficiência bioacumuladora da variedade “Lema" de Lolium multiflorum para a região tropical. Para isso, as plantas foram expostas durante períodos consecutivos de 28 dias ou 2 meses, em cada estação do ano, em Congonhas (local com altos níveis de poluentes aéreos) e em casa de vegetação com ar filtrado (local controle). Após cada exposição, a frutose total foi quantificada pelo método de antrona e os frutanos analisados qualitativamente por HPAEC-PAD. As concentrações de enxofre foram determinadas por turbidimetria, enquanto que as concentrações de metais pesados (Al, Fe, Cu, Zn, Pb, Cd e Ba) foram medidas utilizando um espectrofotômetro de absorção atômica, após digestão ácida. Os resultados mostraram que o estolho contendo as bainhas foliares de L. multiflorum acumulou mais frutanos, enquanto que as raízes acumularam os menores níveis desse carboidrato. As variações sazonais no conteúdo dos carboidratos solúveis foram marcantes no presente trabalho e pareceram estar relacionadas com as condições climáticas, mas intensificadas pelas concentrações de poluentes aéreos, especialmente de metais pesados contidos no material particulado, e acumulados nas folhas de L. multiflorum expostas em Congonhas. Já as variações diurnas foram sutis, mas suficientes para refletir as variações de irradiância, temperatura e de alguns poluentes gasosos ao longo do dia. Tanto no experimento sazonal como no diurno, os frutanos de alto peso molecular pareceram ter sido hidrolisados sendo o acúmulo de frutanos de peso molecular intermediário preferencial nas plantas dos dois locais de estudo. As interferências no conteúdo e na composição de frutanos influenciaram a produção de biomassa e a partição desta entre as partes da plantas, o que ode ter alterado a capacidade acumuladora da espécie de elementos provenientes da poluição atmosférica. Assim, o uso da variedade Lema de L. multiflorum para fins de biomonitoramento da qualidade do ar em regiões tropicais deve ser cuidadoso. / The development of urban and industrial activities has caused a significant increase in the emissions of pollutants to the atmosphere. Air pollution, one of the most destructive factors of the environment, causes stress to plants, since certain compounds such as heavy metals are very reactive and dangerous to plant cells. The utilization of bioindicator plants is an usual practice to monitor the air quality and to diagnose the effects of air pollution on vegetation. The C3 temperate grass Lolium multiflorum ssp. italicum Beck var. Lema is usually employed as bioindicator of air pollution, due to its high capacity of accumulating heavy metals, fluorine and sulfur when growing in the presence of these chemical elements in the air. This species also accumulates fructan, a soluble carbohydrate, whose production can be altered by to many environmental perturbations. In the present work three experiments were performed aiming (1) to verify the partitioning of water total carbohydrates in five different parts of plants of L. multiflorum (upper stubble; under stubble; elongating leaf, expanded leaf and roots); (2) to analyze the seasonal and the diurnal relationships between the concentrations of urban air pollutants, mainly nitrogen and sulfur dioxides and particulate material, among other environmental factors, leaf concentrations of heavy metals and changes in fructan accumulation in plants of L. multiflorum exposed to different conditions of air pollution in São Paulo city; (3) to verify if the seasonal and diurnal variations in the content of fructans are determined by leaf accumulation of sulfur and heavy metals or by variations in the concentrations of gaseous pollutants or other environmental factors; and (4) to verify the bioindicator efficiency of the variety “Lema" of Lolium multiflorum in tropical areas. Plants were consecutively exposed during 28 days or two months in each season at Congonhas (site reached by high levels of air pollutants) and at a glasshouse with filtered air (reference situation). After each exposure, fructan composition as well as leaf concentrations of total fructose and of sulfur and metals (Al, Fe, Cu, Zn, Pb, Cd and Ba) were measured. Total fructose was quantified by the anthrone method and fructan composition was analyzed by HPAEC-PAD. Sulfur concentrations were determined by the turbidimetric method, whereas metal concentrations were measured using an atomic absorption spectrophotometer, after acidic digestion. Results showed that the stubble containing the leaf sheaths of L. multiflorum accumulated the highest levels of fructans, while the roots accumulated the lowest levels. Seasonal variations in the contents of soluble carbohydrates were evident in the present work and seemed to be related with the climatic conditions but intensified by the air pollutants, especially heavy metals contained in the particulate matter, and accumulated in the leaves of L. multiflorum exposed in Congonhas. However the diurnal variations were tenuous, but reflected the variations of irradiance, temperature and of some gaseous pollutants during daytime. In the both seasonal and diurnal experiments, the fructans of high molecular weight seemed to be hydrolyzed and the accumulation of fructans of intermediary molecular weigh was significant in the plants from both sites. The changes in the content and in the composition of fructans altered the biomass production and partition among roots and shoots, which might have been disturbed their characteristic of accumulating chemical elements from air pollution in the leaves. So, the use of the variety Lema of L. multiflorum for biomonitoring purposes in tropical areas should be carefully evaluated.

Resumo não disponível

Com as descobertas das inúmeras aplicações potenciais da biomassa de microalgas é necessário o desenvolvimento de ferramentas que visem auxiliar o aumento da produtividade dos cultivos. A espectrometria por infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) é uma técnica versátil e rápida utilizada na identificação, caracterização e quantificação de diversos compostos moleculares. Sua aplicação está definida de acordo com a região espectral a ser analisada. O objetivo deste trabalho é desenvolver uma metodologia que torne possível a utilização da espectroscopia FTIR na região do infravermelho médio (MIR) para quantificar os teores de lipídeos, proteínas, carboidratos e células de Scenedesmus sp. Para tanto, a biomassa de Scenedesmus sp. foi analisada diariamente por métodos tradicionais e através do espectro FTIR. Posteriormente os dados foram correlacionados com as bandas de absorção características de cada composto. O modelo gerado para lipídeos na região entre 3000-2800 cm-1 obteve o maior coeficiente de correlação (R2) de 0,8265. Para os carboidratos, a banda de absorção que melhor representou as ligações características foi entre 1200-950cm-1, com R2=0,8023. Já para proteínas, a escolha do método tradicional não mostrou boa relação com os resultados do FTIR. Quando a concentração celular foi correlacionada com a área total foi obtido R2=0,7900. Por fim, realizaram-se experimentos para validar os modelos preditos, obtendo bons resultados para a quantificação de lipídeos e carboidratos. O FTIR mostra ser uma ferramenta eficiente para estimar os conteúdos de lipídeos e carboidratos de Scenedesmus sp. Além disso, o FTIR permite análise simultânea de múltiplos metabolitos que permitirá o monitoramento mais detalhado do cultivo em um tempo de análise muito mais curto e com alta reprodutibilidade dos resultados. / With the discoveries of the numerous potential applications of microalgal biomass, it is necessary to develop tools to help increase the productivity of cultivation. Infrared spectrometry with Fourier transform (FTIR) is a versatile and fast technique used in the identification, characterization and quantification of several molecular compounds. Its application is defined according to the spectral region to be analyzed. The objective of this work is to develop a methodology that makes possible the use of FTIR spectroscopy in the medium infrared region (MIR) to quantify lipid, protein, carbohydrate and cells contents of Scenedesmus sp. For this, the Scenedesmus sp. biomass was analyzed daily by traditional methods and through the FTIR spectrum. Subsequently the data were correlated with the absorption bands characteristic of each compound. The model generated for lipids in the region between 3000-2800 cm-1 obtained the highest coefficient of correlation (R2) of 0.8265. For carbohydrates, the absorption band that best represented the characteristic bonds was between 1200-950cm-1, with R2=0.8023. For proteins, the choice of the traditional method did not show a good relation with the FTIR results. When the cell concentration was correlated whit the total area an R2=0.7900. Finally, experiments were carried out to validate the predicted models, obtaining good results for the quantification of lipids and carbohydrates. The FTIR shows to be an efficient tool to estimate lipid and carbohydrate contents of Scenedesmus sp. In addition, the FTIR allows simultaneous analysis of multiple metabolites that will enable more detailed monitoring of the cultivation in a much shorter analysis time and with high reproducibility of the results.

O CO2 supercrítico (CO2-sc) é um bom solvente para substâncias apolares e pouco polares de baixa massa molecular. A fim de tornar este meio um melhor solvente para uma gama maior de substâncias, desenvolvemos 8 novos tensoativos, sendo seis derivados de açúcares (N-metil-D-glucamina, 2-D-Glucosamina e Sorbitano) e três derivados de óleos vegetais (linhaça e palma). Os tensoativos possuem como grupos CO2-fílicos, o acetato (peracetilados) ou o t-butil-glicidil-éter, e como grupo CO2-fóbico o dodecanoato, que pode proporcionar um ambiente \"apolar\" em eventuais agregados formados em CO2-sc. A solubilidade e o comportamento de fase destes novos tensoativos em CO2-sc foram investigados, mostrando-se bastante solúveis e apresentando pontos de névoa comparáveis a outros tensoativos fluorados (mais agressivos, do ponto de vista ambiental). A polaridade que estes tensoativos agregam ao meio foi verificada através de análises de solvatocromismo, utilizando o corante de Reichardt (Betaína-30) e fluorescência de pireno, as quais mostraram resultados bastante promissores, obtendo-se polaridades baixas e médias (similares a álcoois de cadeia média ou solventes clorados). / Supercritical CO2 (sc-CO2) is a good solvent for non-polar or almost non-polar substances with low molecular mass. In order to turn this medium into a better solvent for a wider range of substances, we developed 8 new surfactants, six of them sugar derivatives (N-methyl-D-glucamine, 2-D-Glucosamine and Sorbitan), and three of them vegetable oil derivatives (palm and linseed). The surfactants have either acetate (peracetylated) or t-butyl-glycidyl ether as CO2-philic groups, and as CO2-phobic group, dodecanoate, that can provide an \"apolar\" environment in aggregates that might be formed in sc-CO2. The solubility and phase behavior of these new surfactants in sc-CO2 were investigated, and they showed to be very soluble presenting low cloud pressures comparable to fluorinated surfactants (that are more aggressive from an environmental perspective). The polarity that these new surfactants brought to the medium was verified through the solvatochromic analysis, using the Reichardt\'s dye (Betaine-30) and pyrene fluorescence, which showed promising results, with polarities similar to medium chain alcohols or chlorinated solvents

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-24Bitstream added on 2014-06-13T19:48:22Z : No. of bitstreams: 1 vitorino_hs_me_botfca.pdf: 1010025 bytes, checksum: ebb8cca22a8439d8a7f6d2ab0925617d (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O objetivo deste estudo foi o de avaliar em condições de casa de vegetação a eficiência de herbicidas inibidores das enzimas acetolactato sintase (ALS) e protoporfirinogênio oxidase (PROTOX) em pós-emergência em plantas de Euphorbia heterophylla, Bidens pilosa e Ipomoea grandifolia quando submetidos a déficit hídrico, bem como a ação destes sobre algumas características bioquímicas. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 4x2, sendo quatro herbicidas utilizados (fomesafen, lactofen, chlorimuron-ethyl e imazethapyr) e dois níveis de déficit hídrico: com déficit (-0,5 MPa) e sem déficit (-0,01 MPa). Quando as plantas daninhas atingiram o estádio de um par de folhas definitivas a manutenção da umidade do solo nos dois níveis de cada tratamento. Aos 7, 14, 21 e 28 dias após a aplicação (DAA) dos herbicidas foi avaliado o controle (por escala visual) e aos 28 DAA a massa seca da parte aérea. As plantas utilizadas para a determinação dos solutos orgânicos (carboidratos solúveis, proteínas totais e aminoácidos livres) foram coletadas às 24, 48, 72 e 96 horas após a aplicação (HAA). Todos os herbicidas controlaram as plantas daninhas de I. grandifolia, enquanto que apenas os inibidores da PROTOX foram eficientes no controle de E. heterophylla, contudo para as plantas de B. pilosa o fomesafen foi o único herbicida que proporcionou um controle satisfatório. O déficit hídrico reduziu o controle de todos herbicidas estudados. Tanto o déficit hídrico como a aplicação de herbicidas aumentaram o conteúdo de carboidratos solúveis em todas as plantas estudadas. O teor de proteínas encontrado nas plantas daninhas estudadas foi reduzido pelo déficit hídrico e a aplicação dos herbicidas, enquanto que para as concentrações de aminoácidos livres os herbicidas proporcionaram um incremento nessa concentração... / The objective of this work was to evaluate conditions in the greenhouse the efficiency of herbicides inhibitors of acetolactate synthase (ALS) and protoporphyrinogen oxidase (PROTOX) post-emergence in plant of Euphorbia heterophylla, Ipomoea grandifolia and Bidens pilosa when subjected to water deficit, as well as to determine the effect of these on some biochemical characteristics. The experimental design was randomized blocks in factorial scheme 4x2, with four herbicides (fomesafen lactofen, chlorimuron-ethyl and imazethapyr), and two levels of water deficit: with deficit (-0,5 MPa) and no deficit (-0,01MPa). When weeds reached the stage of a pair of true leaves to maintain soil moisture at the two leaves of each treatment. At 7, 14, 21 and 28 days after application (DAA), was evaluated the control (a visual scale), and 28 DAA, the dry weight of shoots. The plants used for the determination of organics solutes (soluble carbohydrates, protein and free amino acids) were collected at 24, 48, 72 and 96 hours after application (HAA). All herbicides controlled the weeds of I. grandifolia whereas only PROTOX inhibitors were effective in control of E. heterophylla, however, to plants of B. pilosa fomesafen was the single that provided satisfactory control. Water deficit reduced the control of all the herbicides. Both the water deficit and herbicide application increased the soluble carbohydrate content in all species studied. The protein found in the weeds studied were reduced by water deficit and herbicide application, whereas for concentrations of free amino acids the herbicides have provided an increase in this concentration, but with respect to water deficit caused reduction of amino acids, except for plants B. pilosa

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-05-30T16:54:35Z No. of bitstreams: 1 TES_CAROLINA_DE_MARCO_VERISSIMO_COMPLETO.pdf: 3480923 bytes, checksum: c145d85afafb9cc7cd5782a17ac34cfb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-30T16:54:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_CAROLINA_DE_MARCO_VERISSIMO_COMPLETO.pdf: 3480923 bytes, checksum: c145d85afafb9cc7cd5782a17ac34cfb (MD5) Previous issue date: 2015-08-31 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / Angiostrongylus cantonensis is a nematode parasite, main etiologic agent of the eosinophilic meningitis (EM) in humans, a disease endemic in many tropical and sub tropical countries. The diagnosis of EM involves clinical evaluation, eosinophils counting >10% in liquor, and consuming historical of raw mollusks, as they are the intermediate hosts of the Angiostrongylus. Definitive diagnosis through larvae visualization in the liquor is rare. Serological test, mainly involving the 31-kDa component detection, which presents high sensitivity and specificity, has been employed as an alternative way for diagnostic. The 31-kDa antigen is composed for glycoproteins and tentatives in producing it in a recombinant way, using either prokaryotic or eukaryotic models, were inable to mantain immunological recognition, probably due the lack or deficient glycosilation of the molecules. Due the lack of information about A. cantonensis glycans and the need of producing a standard antigen able to be used worldwide in a diagnostic test, the main goal of this work was to study the A. cantonensis glycan profile and their role on the immune diagnosis of EM. It was used total soluble extract (TE) and excretory-secretory products (ES) as sources of glycans and glycoconjugates. The N-linked glycans and glycoconjugates from A. cantonensis female TE and 31-kDa antigen were analyzed and identified by mass spectrometry (MS) and lectin array, and the immunogenecity of these molecules were characterized by dot blot and Western blots. Furthermore, It was investigated the biosynthesis routes of glycans using in silico analysis of the Angiostrongylus genome and transcriptome dataset. N-glycans containing complex structures, with truncated antennas containing terminal with galactose and N-acetylgalactosamine, and core ?1-6 fucosylated were identified. Lectin array analysis could also dentify Gal and GalNAc structures in Angiostrongylus glycoconjugates. Eight genes involved with biosynthesis of N-glycans, among them GCS1; GANAB, MAN1, MGAT2 and FUT8; and three involved with O-glycan biosynthesis, GALNT, C1GALT1 e OFUT1 were found by in silico analysis. Immunogenicity of the 31-kDa antigen is tottaly dependent of N-glycans and not to O-glycans. Modeling of proteins of the 31kDa component showed N-glycosilation sites and predicted structures that were the same identified by MS analysis. Taking together, the data generated in this study shown the glycan importance for angiostrongyliasis diagnosis and also the glycan repertoire that Angiostrongylus produces. This work is an important contribution to the development of a standard diagnosis for EM and also for new perspectives in the study of angiostrongyliasis diagnosis, parasite biology and host-parasite relationship. / Angiostrongylus cantonensis ? um nemat?deo parasita, principal agente etiol?gico da meningite eosinof?lica (ME) em humanos, doen?a end?mica em diversos pa?ses tropicais e subtropicais. A ME se caracteriza pela eosinofilia >10% no l?quor, e hist?rico de ingest?o de moluscos crus, j? que estes s?o hospedeiros intermedi?rios do Angiostrongylus. O diagn?stico definitivo ? raramente poss?vel atrav?s da visualiza??o da larva no liquor. Testes sorol?gicos envolvendo principalmente a detec??o do componente de 31-kDa, que apresenta alta sensibilidade e especificidade, tem sido empregados como uma alternativa diagn?stica. O ant?geno de 31-kDa ? composto por glicoprote?nas e tentativas em produzi-lo de maneira recombinante, em modelos procari?ticos ou eucari?ticos, n?o tiveram sucesso em manter o reconhecimento imunol?gico, provavelmente pela incorreta ou insuficiente glicosila??o das mol?culas. Devido ? falta de informa??o sobre glic?dios de A. cantonensis e a necessidade de produzir um ant?geno padr?o capaz de ser usado em um teste de diagn?stico para distribui??o mundial, o objetivo principal deste trabalho foi estudar o perfil glic?dico de A. cantonensis e o papel dessas mol?culas no imunodiagn?stico da ME. Foram utilizados extratos sol?veis totais (ET) de vermes adultos machos e f?meas e produtos de excre??o e secre??o (ES) como fontes dos glic?dios e glicoconjugados estudados. Os N-glic?dios e glicoconjugados do ET de verme f?mea de A. cantonensis e o ant?geno de 31-kDa foram analisados e identificados por espectrometria de massa (EM) e lectina array, e a import?ncia imunog?nica destas mol?culas foi caracterizada por tratamento com glicosidases aliado a dot blot ou Western blot. Al?m disso, foi investigada a presen?a de enzimas envolvidas na s?ntese de diferentes glic?dios a partir de an?lises in silico do genoma e transcriptoma do Angiostrongylus. Diversos N-glic?dios foram identificados nas amostras analisadas. Estes continham estruturas complexas, com antenas truncadas contendo galactose e N-acetilgalactosamina em posi??es terminais e n?cleo ?1-6 fucosilado. As mesmas estruturas terminais foram identificadas pela an?lise de Lectin Array. Em rela??o a an?lise in s?lico da bioss?ntese de glic?dios em Angiostrongylus, foram identificados oito genes envolvidos na s?ntese de N-glic?dios, entre eles GCS1; GANAB, MAN1, MGAT2 e FUT8; e pelo menos tr?s genes envolvidos na s?ntese de O-glic?dios, GALNT, C1GALT1 e OFUT1. Os N-glic?dios se mostraram essenciais para a imunogenicidade do ant?geno de 31-kDa quando soros positivos para A. cantonensis foram testados. Uma modelagem in silico dos componentes de 31-kDa, demonstrou s?tios de glicosila??o para N-glic?dios, e previu as mesmas estruturas que foram identificadas por EM. Em conjunto, os dados gerados neste estudo mostraram a import?ncia de glic?dios para o diagn?stico de angiostrongil?ases e tamb?m o repert?rio de glic?dios que este parasito pode produzir. Este trabalho ? uma contribui??o importante para o desenvolvimento de um diagn?stico padr?o para a ME e tamb?m para novas perspectivas no estudo do diagn?stico de angiostrongil?ases, biologia do parasito e rela??o parasito-hospedeiro.

Dentre a gama de estudos existentes acerca das respostas de plantas ao incremento de CO2 atmosférico associado às mudanças climáticas, são poucas as investigações que contemplam espécies amazônicas frente à relevância desse ecossistema, e se desconhecem estudos desse aspecto com palmeiras. O açaí (Euterpe oleracea Mart., Arecaceae) é uma espécie típica de planícies da Floresta Amazônica sujeitas ao regime anual de inundação e, além de ser extremamente tolerante à anóxia, apresenta elevado valor comercial e um potencial para a produção de energia a partir de biomassa, gerando uma exploração economicamente sustentável. Este trabalho buscou caracterizar o crescimento inicial de plântulas de açaí quanto à fotossíntese, crescimento e metabolismo de carboidratos e investigar as respostas desses parâmetros ao incremento de CO2 atmosférico (de 380ppm - ambiente para 760ppm - elevado) em duas escalas temporais: ao longo do desenvolvimento das plântulas (entre 105 e 195 dias após a germinação, período de desenvolvimento da segunda folha) e ao longo de 24 horas (aos 175 dias após a germinação). Foram analisadas medidas de altura, área foliar, acúmulo e alocação de biomassa, curvas de resposta da fotossíntese à luz, conteúdo de clorofila e concentração de carboidratos não-estruturais. Foi verificado que o período de estabelecimento das plântulas se estende até cerca de 150 dias após a germinação e se sobrepôs ao experimento com elevado CO2. A presença de outra via de entrada de carbono além da fotossíntese tamponou mas não inibiu os efeitos do aumento de CO2 atmosférico. Foram observadas ao longo do experimento reduções na área foliar, condutância estomática e respiração no escuro e aumentos na fotossíntese e eficiência de uso da água, além de aumento na concentração de carboidratos não-estruturais e na biomassa. Os dados obtidos após o esgotamento das reservas do endosperma não apresentaram sinais de que a planta aclimatará ao incremento de CO2, pois aos 90 dias de experimento foram observadas as maiores porcentagens de aumento na fotossíntese, 89%, e no teor de amido, 300%. Esses resultados indicam que essa espécie apresenta uma grande capacidade de aumento da força de dreno, o que diminui a sinalização por açúcares possibilitando a manutenção de uma resposta positiva ao incremento de CO2 atmosférico / Despite all knowledge available nowadays on plant responses to increasing atmospheric CO2, few are the studies that focus on Amazonian species in contrast to the biological relevance of this ecosystem, and no record has been found of Palm species analysis on this area of research. Açaí palm (Euterpe oleracea Mart., Arecaceae) is a typical species of Amazon plains subjected to annual periods of flooding. Apart from being extremely anoxia tolerant, this species presents high commercial value and a potential of energy production through biomass utilization, counting towards a sustainable economic exploitation. This study aimed to characterize the initial growth of açaí palm seedlings as for photosynthesis, growth and carbohydrate metabolism and to investigate these parameters\' responses to an increase on atmospheric CO2 (from 380ppm - ambient to 760ppm - elevated) on two temporal scales: throughout seedling development (from 105 to 195 days post germination, time span of second leaf development) and throughout 24 hours (at 175 days post germination). Analysis included: height, leaf area, biomass increase and allocation, light-response curves, chlorophyll content and non-structural carbohydrate concentration. It was observed that the seedling establishment period extends to 150 days post germination and overlapped the elevated CO2 experiment. The presence of another carbon entry pathway besides photosynthesis buffered the effects of elevated CO2, but did not inhibit them. Results observed were reductions on leaf area, stomatal conductance and dark respiration and increases on photosynthesis, water use efficiency, non-structural carbohydrate content and biomass. The results obtained after seed reserves were depleted did not seem to indicate that this species will present acclimation to elevated CO2, since the greater percentages of increase on photosynthesis (89%) and starch content (300%) occurred at the end of the experiment (90 days on elevated CO2). These results indicate that açaí palm seedlings have a large capacity of sink strenght increase, which reduces sugar signaling and maintains a positive response to the increase on atmospheric CO2

Orientador: Marcos Jun Watanabe / Coorientador: Letícia Andreza Yonezawa / Banca: Carlos Alberto Hussni / Banca: Alexandre Augusto de Oliveira Gobesso / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da administração de maltodextrina em dose única sobre as respostas fisiológicas e metabólicas de cavalos submetidos a testes padrão de exercício progressivo (TPEP) e a sessões sequenciais de exercício de alta intensidade e rápida aceleração (Teste de Exercícios Sequenciais - TES) em esteira ergométrica. Para tanto, o estudo foi dividido em 2 etapas: o Estudo 1 foi realizado visando determinar o efeito da maltodextrina administrada por via oral em dose única em resposta a três quantidades (0,2g/kg; 0,4g/kg; 0,6g/kg) sobre as curvas glicêmica e insulinêmica de equinos em repouso, com o objetivo de determinar a dose de maltodextrina que apresentasse maior persistência das concentrações sanguíneas de glicose associada com menor estímulo insulinêmico, e o Estudo 2 que avaliou o efeito da maltodextrina em resposta a dois tipos de exercícios: TPEP e TES. Foram utilizados oito equinos da raça puro sangue Árabe, machos castrados, com idade de 2 a 8 anos divididos aleatoriamente em dois grupos de quatro animais que passaram por dois tratamentos, suplementados com maltodextrina (GM, n=8) e controle (GC, n=8). Animais submetidos ao GM receberam 0,4g/kg de maltodextrina enquanto os submetidos ao GC receberam carboximetilcelulose pela via oral 30min antes dos exercícios. O TPEP foi realizado em esteira com inclinação de 6% e consistiu em fases sequenciais de velocidades progressivas de 1,8 m/s por um período de 5min, seguindo a 4,0 m/s por 3min, 6,0 m/s por 2min, e fases subsequentes a 7,0; 8,0; 9,0 e 10,0m/s por 1min em cada velocidade, ou até quando os cavalos não conseguiram manter o galope mesmo sendo estimulados. O TES seguiu o protocolo com um período de aquecimento ativo de velocidade de 1,7m/s por 1min (sem inclinação), trote a 3,5m/s por 5min (sem inclinação) e passo a 1,5m/s por 5min (6% de inclinação), ao término deste período, a velocidade... / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of acute administration of maltodextrin on the physiological and metabolic responses of horses submitted to standard incremental exercise test (TPEP) and sequential sessions high intensity exercise and rapid acceleration (Sequential Test Exercises - TES ) on a treadmill. Therefore, the study was divided into two steps: Study 1 was carried out to determine the effect of maltodextrin orally administered acutely in response to three amounts (0.2 g / kg, 0.4 g / kg; 0.6g / kg) on glucose and insulin curves of horses at rest, allowing determine the amount of maltodextrin to present greater persistence of blood glucose concentrations associated with lower insulinemic stimulus, and the second study that evaluated the effect of maltodextrin in response to two types exercises: TPEP and TES. Eight were used adult horses of the Arab horses, gelding were randomly divided into two groups of four animals that underwent two treatments, supplemented with maltodextrin (GM n = 8) and control (CG n = 8). Animals was used to GM received 0.4 g / kg of maltodextrin while undergoing GC received carboxymethylcellulose orally 30 minutes before exercise. The TPEP was performed on a treadmill with incline of 6% and consisted of sequential stages of progressive speeds of 1.8 m / s for a period of 5 minutes, followed at 4.0 m / s for 3 minutes, 6.0 m / s per 2min, and subsequent phases 7,0, 8.0; 9.0 and 10,0m / s for 1 min at each speed, or even when the horses could not keep galloping even being stimulated. The TES followed the protocol with an active heating period of speed of 1.7 m / s for 1min (0% incline), trot to 3.5 m / s for 5 minutes (0% incline) and step-by-1.5m / s for 5 minutes (6% incline), at the end of this period, the speed of the treadmill was quickly increased to speed corresponding to 105% of HRmax maintained for 50s. After this period, called sprint, the speed was immediately reduced to ... / Mestre

Orientador: Sarita Leonel / Banca: Aloisio Costa Sampaio / Banca: Elizabeth Orika Ono / Banca: Elma Machado Ataíde / Banca: Luis Lessi dos Reis / Resumo: O Brasil é o segundo maior exportador de figos do mundo e tem a maior produtividade média mundial. O emprego de técnicas agronômicas subsidiárias de cultivo é sempre importante, pois tais técnicas podem promover avanços tecnológicos na cultura. Dessa forma, trabalhos que avaliem o uso de tais técnicas nesta cultura são de grande importância. Neste contexto, objetivou-se avaliar técnicas de propagação e de manejo cultural da figueira 'Roxo de Valinhos'. Foram conduzidos três experimentos. O primeiro foi em casa de vegetação e avaliaram-se os teores de carboidratos e diferentes épocas de coleta (junho, julho, agosto e setembro) de estacas para realização da técnica de estaquia. O delineamento foi em blocos inteiramente casualizados, com quatro repetições de 30 estacas por época de coleta. As características avaliadas foram: porcentagem de estacas enraizadas, brotadas, sem broto e raiz; número de brotos, folhas e raízes por estaca; comprimento da maior raiz e do maior broto; diâmetro do broto; massa fresca e seca de brotos e raízes; volume de raízes e teores de carboidratos. O segundo experimento foi realizado em viveiro com cobertura plástica e avaliou-se o uso de reguladores vegetais no desenvolvimento das mudas. O delineamento foi em parcelas subdivididas, sendo as parcelas 0, 50, 100, 150 e 200 mL L-1 de Stimulate®, aplicado via foliar, e as subparcelas 0, 7, 14 e 21 dias após a aplicação do produto. Foram utilizados quatro blocos de 20 mudas. Avaliou-se o comprimento do r... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Brazil is the second largest exporter of figs in the world, besides its highest average productivity. Choosing the best crop management practice is important to promote technological improvements. The current study aimed to evaluate techniques for propagation and management of 'Roxo de Valinhos' fig tree. Therefore, three experiments were conducted. The first was carried in a greenhouse to evaluate carbohydrates levels and different seasons of cuttings and cutting technique; being a randomized completely block design with four replicates and 30 cuttings per treatment; percentage of rooted, sprouted and without bud/root cuttings; number of branches, leaves and roots per cuttings; length of the largest root and largest branch; branch diameter; fresh and dry matter of branch and roots; roots volume and carbohydrate levels. In a nursery with plastic cover, a second experiment was carried out by using plant regulators on the seedlings development. The experimental design was subdivided into Stimulate® plots (at 0, 50, 100, 150 and 200 mL L-1) by leaf application; and subplots of days after product application (0, 7, 14 and 21). Four blocks of 20 seedlings were used, being evaluated the length of the branch; the largest root; branch diameter; number of leaves and leaf area; branches, leaf and roots dry and fresh matter; root volume; a, b and total chlorophyll levels. The third experiment was carried out at the São Manuel Experimental Farm by using hydrogenated cyanamide (Dormex®) a... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

As galectinas, proteínas que compartilham características como afinidade por ?-galactosídeos e a presença de um domínio de reconhecimento ao carboidrato (CRD), tem como importante papel a decodificação de mensagens moleculares. As galectinas são encontradas em uma grande variedade de células e tecidos animais e estão envolvidas em diversos processos celulares relacionados a resposta imune e inflamatória. O grupo tandem-repeat das galectinas é formado por proteínas que apresentam dois CRDs distintos (CRD1 e CRD2) conectados por um peptídeo de ligação, ao qual pertencem as galectinas-4 e -12 humanas, alvos de nosso estudo. Durante o desenvolvimento do presente projeto foram utilizadas abordagens multidisciplinares através de técnicas biofísicas, cristalográficas, computacionais e imunoquímicas. Foi iniciado o estudo de caracterização estrutural da galectina-4 humana (hGal4) e seus domínios hGal4-CRD1 e hGal4-CRD2, de forma independente, através da produção heteróloga das proteínas e ensaios de estabilidade térmica e cristalização. As estruturas cristalográficas dos domínios foram determinadas a 1,48 e 2,46 Å de resolução, respectivamente e utilizadas para a construção de um modelo para a hGal4. Com base nos estudos de dinâmica molecular e estabilidade térmica foi possível propor um modelo de interação entre os CRDs através do peptídeo de ligação. Ensaios de dinâmica da hGal4 com LacNAc sugeriram uma diferença de plasticidade dos CRDs no reconhecimento do ligante. Foram também realizadas incessantes tentativas de desenvolver um protocolo de expressão heteróloga para as isoformas e domínios da galectina-12 humana (hGal12). Como resultado, observamos uma alta tendência à formação de corpos de inclusão e agregados resistentes a desnaturação, além da susceptibilidade ao ataque proteolítico. Os modelos estruturais dos domínios da hGal12 não permitiram identificar nenhuma característica que justificasse o comportamento das proteínas. Foram realizados estudos de localização celular em células HL-60 e foi possível identificar a presença da hGal12 na superfície das gotas de lipídio, organelas responsáveis pelo armazenamento de energia e o processo de catabolismo celular. A alta insolubilidade observada para as isoformas e domínios da hGal12, a sua localização em gotas de lipídeos, a divergência evolutiva da hGal12 quando comparada com outras galectinas do mesmo grupo e incluindo o fato de um dos CRDs não apresentar os requerimentos estruturais básicos para ligar ?-galactosídeos, nos leva a especular se essa proteína estaria, na verdade, sendo expressa como parte de um heterocomplexo proteico, que estabilizaria a estrutura da hGal12 e a endereçaria para as gotas de lipídeo. Em nossa hipótese, o domínio hGal12-CRD2 poderia ter evoluído para favorecer a interação com outros parceiros macromoleculares. Devido ao importante papel desempenhado pelas galectinas em inúmeros processos celulares, os resultados aqui obtidos representam uma importante contribuição no entendimento do papel que as galectinas hGal4 e hGal12 exercem nos diferentes eventos celulares, além de fornecem ferramentas experimentais para desenvolvimento de futuros estudos funcionais. / Galectins are proteins that share characteristics such as affinity for ?-galactosides and the presence of a carbohydrate recognition domain (CRD). They belong to a family of proteins that display the important role of decoding molecular messages. Galectins are found in a variety of cell types and are involved in several biological phenomena related to immune response and inflammation. The tandem-repeat group of galectins consists of proteins with two distinct CRDs (CRD1 and CRD2) connected by a peptide linker, in which belong galectins-4 and -12, targets of our study. During the development of the present project a multidisciplinary approach was used including the use of biophysical, crystallographic, computational and immunochemical techniques. The structural characterization of human galectin-4 (hGal4) and its hGal4-CRD1 and hGal4-CRD2 independent domains was initiated by their heterologous protein production, thermal stability and crystallization assays. The crystallographic structure of domains were determined at 1.48 e 2.46 Å resolution, respectively, and used for constructing a model for hGal4. Based on molecular dynamics and thermal stability studies we propose a model of interaction between CRDs mediated by linker peptide. Dynamics simulation of hGal4 with LacNAc suggested a difference in plasticity between CRDs and ligand recognition. In addition, several attempts have been made towards the development of a protocol for expression of isoforms and independent domains from human galectin-12 (hGal12). As result, we observed a high tendency to body inclusion formation and denaturing resistant aggregates, besides high susceptibility to proteolytic attack. Structural models for the hGal12 domains did not allow the identification of any feature to justify proteins behavior. Cell location studies in HL-60 cells were performed and hGal12 was found to be located on the surface of lipid droplets, organelles responsible for energy storage and catabolism. The high insolubility displayed by isoforms and domains from hGal12, together with its location on lipid droplets, the evolutionary divergence of hGal12 compared to tandem-repeat proteins, and the fact that hGal12-CRD2 does not present the structural requirements for ?-galactosides binding, suggest that hGal12 is, in fact, expressed as part of a protein complex that could both stabilize hGal12 structure and guide it to the lipid droplets. In our hypothesis, the hGal12-CRD2 could have evolved in order to favor the interaction with other macromolecular partners. Due to crucial roles displayed by galectins in innumerous biological process, we believe that our results represent an important contribution for the understanding of hGal4 e hGal12 proteins roles within the cell, besides providing experimental tools for the development of further functional studies.