Introdução: A meningite tuberculosa (MTB) é a forma mais grave e fatal de tuberculose. O diagnóstico oportuno e o tratamento adequado e precoce são os principais fatores associados com o bom prognóstico. Os métodos utilizados na prática médica diária - achados clínicos, exames de imagem e análise de líquido cefalorraquidiano (LCR) - têm baixa acurácia. A pesquisa do DNA do Mycobacterium tuberculosis no LCR através da reação em cadeia da polimerase (PCR, do inglês polimerase chain reaction) com a metodologia nested é promissora, especialmente quando associada à praticidade da amplificação do DNA em tempo real. Objetivo: Avaliar o valor diagnóstico da nested PCR em tempo real (nRT-PCR, do inglês nested real-time PCR) na investigação de pacientes com MTB. Métodos: Estudo observacional realizado em duas fases: uma prospectiva e outra retrospectiva. Na fase prospectiva, foram incluídos pacientes com suspeita de MTB internados no Instituto de Infectologia Emílio Ribas (IIER). Informações clínicas, laboratoriais e radiológicas foram coletadas, assim como amostra de LCR de todos os pacientes. A partir de critérios internacionais padronizados, os pacientes foram categorizados como \"MTB Definitiva\", \"MTB Provável\", \"MTB Possível\" e \"Não MTB\". A nRT-PCR, utilizando o gene alvo mpt64, foi realizada em todas as amostras de LCR no Laboratório de Meningites Bacterianas do Instituto Adolfo Lutz. Sensibilidade, especificidade e intervalos de confiança (IC 95%) da nRT-PCR foram calculados com base no padrão-ouro (cultura positiva para M. tuberculosis ou isolamento de BAAR no sistema nervoso central) e nos pacientes com outros diagnósticos estabelecidos (Não MTB). Também foi calculada a proporção de pacientes com a nRT-PCR positiva em cada categoria clínica. Na fase retrospectiva, foi realizada uma revisão de prontuários de pacientes que tiveram a nRT-PCR solicitada no IIER e no Centro de Referência e Treinamento em DST/AIDS. Os mesmos procedimentos de categorização diagnóstica, cálculos de sensibilidade e especificidade foram adotados. Resultados: Na fase prospectiva, foram incluídos 102 pacientes, sendo 92 deles infectados por HIV. Nove deles tiveram o padrão-ouro positivo e foram classificados como \"MTB Definitiva\" e 81 deles tiveram outros diagnósticos estabelecidos (\"Não MTB\"). A sensibilidade e a especificidade da nRT-PCR foi 100% (IC95%:70-100 e 95-100, respectivamente). A positividade da nRT-PCR na categoria \"MTB Provável\" foi 50% (4/8 pacientes) e 25% na \"MTB Possível\" (1/4). Na fase retrospectiva, 56 pacientes foram incluídos, sendo 48 infectados por HIV. A nRT-PCR teve sensibilidade de 83% (5/6) e especificidade de 100% (0/45). A positividade na categoria \"MTB Provável\" foi 60% (3/5) e não houve pacientes classificados como \"MTB Possível\". Conclusão: A nRT-PCR apresentou boa sensibilidade e ótima especificidade, demonstrando seu valor diagnóstico na identificação oportuna de casos de MTB / Background: Tuberculous meningitis (TBM) is the most serious and lethal presentation of tuberculosis. Timely diagnosis and appropriated treatment are the main factors associated with good outcome. Methods used in the daily medical practice - clinical, radiological and cerebrospinal fluid (CSF) findings - have low accuracy. Search for Mycobacterium tuberculosis DNA in the CSF by polymerase chain reaction (PCR) using the nested methodology is promising, especially when combined with the practical approach of the real time DNA amplification. Objective: To evaluate the diagnostic value of a nested real-time PCR (nRT-PCR) in the investigation of patients with TBM. Methods: A two-phase observational study was carried out: prospective and retrospective. In the prospective phase, patients with suspected TBM hospitalized at \"Instituto de Infectologia Emílio Ribas\" (IIER) were included. Clinical, laboratory and radiological data were collected, as well as CSF samples of all patients. According to international standard criteria, patients were categorized as \"TBM Definite\", \"TBM Probable\", \"TBM Possible\" and \"Not TBM\". The nRT-PCR, using the mpt64 gene, was performed on all CSF sample in the Laboratory of Bacterial Meningitis, Adolfo Lutz Institute. Sensitivity, specificity and confidence intervals (95% CI) of the nRT-PCR were calculated based on the gold standard (culture positive for M. tuberculosis or AFB isolation on the central nervous system) and on patients with other established diagnoses (\"Not TBM\"). The proportion of patients with a positive nRT-PCR in each clinical category was also calculated. In the retrospective phase, medical chart review was performed in those patients who had the nRT-PCR requested in IIER and in the \"Centro de Referência e Treinamento em DST/AIDS\". The same diagnostic categorization and calculations of sensitivity and specificity were adopted. Results: 102 patients were included in the prospective phase, 92 of them HIV-infected. Nine of them had the gold standard positive and were classified as \"TBM Definite\" and 81 of them had other diagnoses established (\"Not TBM\"). The sensitivity and specificity of the nRT-PCR were 100% (95%CI: 70-100 and 95-100, respectively). The nRT-PCR positivity in category \"TBM Probable\" was 50% (4/8 patients) and 25% in \"TBM Possible\" (1/4). In retrospective phase, the nRT-PCR had a sensitivity of 83% (5/6) and specificity of 100% (0/45), among the 56 included patients (48 of them HIV infected). Positivity in \"TBM Probable\" category was 60% (3/5) and no patients were classified as \"TBM Possible\". Conclusion: The nRT-PCR showed good sensitivity and excellent specificity, showing its diagnostic value in the timely identification of TBM

Introdução: A meningite tuberculosa (MTB) é a forma mais grave e fatal de tuberculose. O diagnóstico oportuno e o tratamento adequado e precoce são os principais fatores associados com o bom prognóstico. Os métodos utilizados na prática médica diária - achados clínicos, exames de imagem e análise de líquido cefalorraquidiano (LCR) - têm baixa acurácia. A pesquisa do DNA do Mycobacterium tuberculosis no LCR através da reação em cadeia da polimerase (PCR, do inglês polimerase chain reaction) com a metodologia nested é promissora, especialmente quando associada à praticidade da amplificação do DNA em tempo real. Objetivo: Avaliar o valor diagnóstico da nested PCR em tempo real (nRT-PCR, do inglês nested real-time PCR) na investigação de pacientes com MTB. Métodos: Estudo observacional realizado em duas fases: uma prospectiva e outra retrospectiva. Na fase prospectiva, foram incluídos pacientes com suspeita de MTB internados no Instituto de Infectologia Emílio Ribas (IIER). Informações clínicas, laboratoriais e radiológicas foram coletadas, assim como amostra de LCR de todos os pacientes. A partir de critérios internacionais padronizados, os pacientes foram categorizados como \"MTB Definitiva\", \"MTB Provável\", \"MTB Possível\" e \"Não MTB\". A nRT-PCR, utilizando o gene alvo mpt64, foi realizada em todas as amostras de LCR no Laboratório de Meningites Bacterianas do Instituto Adolfo Lutz. Sensibilidade, especificidade e intervalos de confiança (IC 95%) da nRT-PCR foram calculados com base no padrão-ouro (cultura positiva para M. tuberculosis ou isolamento de BAAR no sistema nervoso central) e nos pacientes com outros diagnósticos estabelecidos (Não MTB). Também foi calculada a proporção de pacientes com a nRT-PCR positiva em cada categoria clínica. Na fase retrospectiva, foi realizada uma revisão de prontuários de pacientes que tiveram a nRT-PCR solicitada no IIER e no Centro de Referência e Treinamento em DST/AIDS. Os mesmos procedimentos de categorização diagnóstica, cálculos de sensibilidade e especificidade foram adotados. Resultados: Na fase prospectiva, foram incluídos 102 pacientes, sendo 92 deles infectados por HIV. Nove deles tiveram o padrão-ouro positivo e foram classificados como \"MTB Definitiva\" e 81 deles tiveram outros diagnósticos estabelecidos (\"Não MTB\"). A sensibilidade e a especificidade da nRT-PCR foi 100% (IC95%:70-100 e 95-100, respectivamente). A positividade da nRT-PCR na categoria \"MTB Provável\" foi 50% (4/8 pacientes) e 25% na \"MTB Possível\" (1/4). Na fase retrospectiva, 56 pacientes foram incluídos, sendo 48 infectados por HIV. A nRT-PCR teve sensibilidade de 83% (5/6) e especificidade de 100% (0/45). A positividade na categoria \"MTB Provável\" foi 60% (3/5) e não houve pacientes classificados como \"MTB Possível\". Conclusão: A nRT-PCR apresentou boa sensibilidade e ótima especificidade, demonstrando seu valor diagnóstico na identificação oportuna de casos de MTB / Background: Tuberculous meningitis (TBM) is the most serious and lethal presentation of tuberculosis. Timely diagnosis and appropriated treatment are the main factors associated with good outcome. Methods used in the daily medical practice - clinical, radiological and cerebrospinal fluid (CSF) findings - have low accuracy. Search for Mycobacterium tuberculosis DNA in the CSF by polymerase chain reaction (PCR) using the nested methodology is promising, especially when combined with the practical approach of the real time DNA amplification. Objective: To evaluate the diagnostic value of a nested real-time PCR (nRT-PCR) in the investigation of patients with TBM. Methods: A two-phase observational study was carried out: prospective and retrospective. In the prospective phase, patients with suspected TBM hospitalized at \"Instituto de Infectologia Emílio Ribas\" (IIER) were included. Clinical, laboratory and radiological data were collected, as well as CSF samples of all patients. According to international standard criteria, patients were categorized as \"TBM Definite\", \"TBM Probable\", \"TBM Possible\" and \"Not TBM\". The nRT-PCR, using the mpt64 gene, was performed on all CSF sample in the Laboratory of Bacterial Meningitis, Adolfo Lutz Institute. Sensitivity, specificity and confidence intervals (95% CI) of the nRT-PCR were calculated based on the gold standard (culture positive for M. tuberculosis or AFB isolation on the central nervous system) and on patients with other established diagnoses (\"Not TBM\"). The proportion of patients with a positive nRT-PCR in each clinical category was also calculated. In the retrospective phase, medical chart review was performed in those patients who had the nRT-PCR requested in IIER and in the \"Centro de Referência e Treinamento em DST/AIDS\". The same diagnostic categorization and calculations of sensitivity and specificity were adopted. Results: 102 patients were included in the prospective phase, 92 of them HIV-infected. Nine of them had the gold standard positive and were classified as \"TBM Definite\" and 81 of them had other diagnoses established (\"Not TBM\"). The sensitivity and specificity of the nRT-PCR were 100% (95%CI: 70-100 and 95-100, respectively). The nRT-PCR positivity in category \"TBM Probable\" was 50% (4/8 patients) and 25% in \"TBM Possible\" (1/4). In retrospective phase, the nRT-PCR had a sensitivity of 83% (5/6) and specificity of 100% (0/45), among the 56 included patients (48 of them HIV infected). Positivity in \"TBM Probable\" category was 60% (3/5) and no patients were classified as \"TBM Possible\". Conclusion: The nRT-PCR showed good sensitivity and excellent specificity, showing its diagnostic value in the timely identification of TBM

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:25:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Denise Sisterolli Diniz.pdf: 6293055 bytes, checksum: d5c5b19907b7602ca5e99aa0414271f7 (MD5) Previous issue date: 2011-09-12 / Systemic Lupus Erythematosus - LES is an autoimmune disease involving multiple systems. In the Central nervous system-SNC is one of his more severe manifestations. One of the frames of Lupus neuropsychiatric - LES-NP, is a Demyelinating Syndrome - SD. SD in rare cases, may be the first manifestation of LES, resembling multiple sclerosis - MS in their symptoms. MS is autoimmune disease with involvement of SNC with components, degenerative and inflammatory, which can produce autoantibodies and general symptoms that make your final diagnosis. The disease occurs more in young women than in men, typically evolve with outbreaks and remissions. In order to contribute to the diagnosis of these two illnesses, we proposed a comparative analysis, considering clinical, laboratory, and image aspects. As there is a lack of definition of SD, aims to contribute to the definition and establishment of standards of compromise of the SNC by SD of LES-NP, comparing patients with LES-NP and MS (the prototype of CNS demyelinating disease), attended in rheumatology and neurology of the HC/FM/UFG, Goiania. GO, from 2009 to 2010, according to the demographic aspects (sex and age), clinical (time of illness, functional systems and EDSS), laboratory (Autoantibodies and liquid Cerebroespinhal - LCR), image (Conventional magnetic resonance - RM) and Neuropsychological - NPS (cognitive and emotional). It is one epidemiological, analytical and comparative cross-sectional study of LES-NP and MS, which was approved by the CEP/HC/UFG. Were used in the survey questionnaires: an analysis of demographic and personal and family background; other symptoms; Neurological exams and NPS; Analysis: image by RM, laboratory of autoantibodies and LCR; and symptoms of depression and anxiety by Beck inventory (BAI and BDI). The results demonstrated an increased frequency in patients of age; time of disease; Visual symptoms; changes of sensitivity; of coordination; of the March; retention and urinary incontinence; changes of speech and swallowing; depressive and psychotic symptoms in family and personal history; WMHs in parietal and frontal lobes, occipitais, corpus callosum, periventricular, justacortical, brain stem; the cerebellum; spinal cord and the Barkhof and Tintoré criteria - CBT. Other findings in the RM were: infarcts; Vasculitis; menigioma and thrombosis in patients with LES-NP. The involvement of SNC in LES was measured by clinical symptomatology, neurological examination, EDSS, image findings and neuropsychological tests. RM was predictive analytics to relate workload post-lesional adaptation in brain regions typically involved in in. The application of CBT in patients with SD of LES-NP, associated with the qualitative assessment of WMHs may define the differences of neurological involvement pattern of injury of the SD of LES-NP, those at. The dosage of autoantibodies was predictive analytics for the diagnosis of LES, especially the anti DNA, the anti-ENA and the LAC, which were unique in the LES-NP. The clinical examination and laboratory research, neurological autoantibodies antinuclear antibodies and image by RM offers great security in diagnosis of the two diseases.Show that there are aspects of the involvement of the SD in LES needing new assessments, using the markers of neuronal injury, the more specific and with studies of Immunogenetics compared with in, the prototype of CNS demyelinating disease. / Lúpus Eritematoso Sistêmico - LES é a doença auto-imune que envolve vários sistemas. No Sistema Nervoso Central - SNC é uma de suas manifestações mais graves. Um dos quadros neurológicos do Lúpus Neuropsiquiátrico - LES-NP, é a Síndrome Desmielinizante - SD. Em raros casos, SD pode ser a primeira manifestação do LES, se assemelhando a Esclerose Múltipla - EM em sua sintomatologia. EM é doença autoimune com envolvimento do SNC com componentes, inflamatório e degenerativo, que pode apresentar auto-anticorpos e sintomas gerais que dificultam seu diagnóstico final. As doenças ocorrerem mais em mulheres jovens que em homens, evoluem tipicamente com surtos e remissões. Com o intuito de contribuir para o diagnóstico dessas duas enfermidades, propusemos uma análise comparativa, considerando aspectos clínicos, laboratoriais e de imagem. Como há uma carência de definição da SD, pretende-se contribuir com a definição e o estabelecimento de padrões de comprometimento do SNC pela SD do LES-NP, comparando os pacientes com LES-NP e EM (o protótipo da doença desmielinizante), atendidos no serviço de reumatologia e neurologia do HC/FM/UFG, Goiânia/GO, de 2009 a 2010, segundo os aspectos demográficos (sexo e idade), clínicos (tempo de doença, sistemas funcionais e EDSS), laboratoriais (Autoanticorpos e Líquido Cerebroespinhal - LCR), de imagem (Ressonância Magnética Convencional - RM) e Neuropsicológicos - NPS (cognitivo e emocional). É um estudo epidemiológico, analítico, transversal, comparativo de LES-NP e EM, que foi aprovado pelo CEP/HC/UFG. Foram utilizados na pesquisa análise de questionários: um demográfico e de antecedentes pessoais e familiares; outro de sintomas; exames: neurológico e de NPS; avaliações: imagem por RM e laboratorial de auto-anticorpos e LCR; e sintomas de depressão e ansiedade pelo inventário de Beck (BAI e BDI). Os resultados demonstraram uma frequência aumentada nos pacientes de EM, em idade; tempo de doença; sintomas visuais; alterações de sensibilidade; da coordenação; da marcha; retenção e incontinência urinária; alterações da fala e deglutição; sintomas depressivos e psicóticos na história pessoal e familiar; alterações focais da substância branca (WMHs) nos lobos frontais, parietais e occipitais, corpo caloso, periventricular, justacortical, tronco encefálico; cerebelo; medula espinhal e os critérios de Barkhof e Tintoré - CBT. Outros achados na RM foram: infartos cerebrais; vasculites; meningioma e trombose nos pacientes com LES-NP. O envolvimento do SNC no LES foi mensurado pela sintomatologia clínica, exame neurológico, EDSS, achados de imagem e testes neuropsicológicos. RM foi preditiva em relacionar carga lesional em regiões cerebrais tipicamente envolvidas na EM. A aplicação dos CBT nos pacientes com SD do LES-NP, associado à avaliação qualitativa das WMHs pode definir as diferenças de padrão de envolvimento neurológico da lesão da SD do LES-NP, daquelas da EM. A dosagem de autoanticorpos foi preditiva para o diagnóstico de LES, especialmente o anti DNA, o anti-ENA e o LAC, os quais foram exclusivos no LES-NP. O exame clínico e neurológico, da investigação laboratorial de auto-anticorpos antinucleares e da imagem por RM oferece segurança no diagnóstico das duas enfermidades. Mostram que há aspectos do envolvimento da SD no LES que necessitam de novas avaliações, utilizando os marcadores de lesão neuronal, mais específicos e com estudos de imunogenética comparados com a EM, o protótipo da doença desmielinizante do SNC.

Objetivos: Malformação de Chiari do tipo I (MC-I) é a principal doença malformativa congênita da junção craniovertebral, manifestando-se com ampla variedade de sinais e sintomas neurológicos. A melhor técnica cirúrgica a ser empregada no tratamento dos pacientes com malformação de Chiari do tipo I é ainda controversa. A descompressão das estruturas da fossa craniana posterior com plástica de ampliação dural é considerada procedimento padrão. Embora efetiva e de baixa morbidade, a craniectomia occipital isolada, sem abertura e ampliação dural, implica maior taxa de recidiva dos sintomas. Métodos que selecionam os pacientes quanto a necessidade da duroplastia não foram estabelecidos. O presente trabalho avalia a eficácia da mensuração intraoperatória da velocidade do fluxo do líquido cefalorraquidiano através da ultrassonografia (USG) na seleção da técnica cirúrgica a ser utilizada. Métodos: Foram analisados de forma prospectiva 49 pacientes submetidos à cirurgia para MC-I. A indicação de craniectomia da fossa posterior associada ou não à plástica de ampliação da dura-máter baseou-se na velocidade do fluxo do líquido cefalorraquidiano, mensurada pela ultrassonografia intraoperatória. Dor cervical, cefaleia e qualidade de vida foram avaliadas antes e após o tratamento cirúrgico. Resultados: Dos 49 pacientes incluídos, 36 pacientes (73%) apresentavam fluxo do líquido cefalorraquidiano superior a 3 cm/s e não foram submetidos a duroplastia ampliadora. Nos 13 (27%) pacientes com fluxo inicial inferior a 3 cm/s, indicou-se craniectomia occipital com duroplastia de ampliação. Não houve diferença significativa entre os dois grupos com relação aos parâmetros estudados. Conclusão: A ultrassonografia intraoperatória com avaliação da dinâmica e velocidade do fluxo do líquido cefalorraquidiano da junção craniovertebral auxilia a indicação de duroplastia durante descompressão da fossa craniana posterior em pacientes adultos com MC-I / Objectives: Chiari malformation Type I (CM-I) is the main congenital malformation disease of the craniovertebral junction, and may be responsible for a variety of neurological symptoms. The ideal surgical technique used to treat patients with CM-I is still controversial. Invasive procedures that enters CSF space and are associated with dural repair, are considered the gold standard. Although effective and less morbidity, isolated bone decompression without dural opening, implies greater recurrence of symptoms. Objective parameters to select patients, who need or not to have a duroplasty performed, have not been established. Our study evaluates the efficacy of intra-operative CSF flow measurement through the use of ultrasonography (USG) as a determining parameter in the selection of these patients. Methods: We analyzed prospectively 49 posterior fossa surgeries for patients with CM-I. Patients underwent decompressive surgery with or without opening of the dura mater after conducting USG intra-operatively with measured flow rate, being adopted 3cm/s flow rate as a determining value. The quality of life before and after surgery and the improvement of neck pain and headache were the parameters evaluated. Results: Of the 49 patients enrolled, 36 patients (73%) had adequate CSF flow above 3 cm / s and have not undergone duroplasty. In 13 (27%) patients with initial flow < 3 cm / s an opening in dura mater was performed together with duroplasty. There was no significant difference between the two groups regarding the parameters studied. Conclusion: Intraoperative ultrasound with measurement of CSF flow, having a flow of 3 cm / s as cut-off, allows the proper selection of patients with CM-I that can have a less invasive surgery with bone decompression without duroplasty

Mass spectrometry has in recent years been established as the standard method for protein identification and characterization in proteomics with excellent intrinsic sensitivity and specificity. Fourier transform ion cyclotron resonance is the mass spectrometric technique that provides the highest resolving power and mass accuracy, increasing the amount of information that can be obtained from complex samples. This thesis concerns how useful information on proteins of interest can be extracted from mass spectrometric data on different levels of protein structure and how to obtain this data experimentally. It was shown that it is possible to analyze complex mixtures of protein tryptic digests by direct infusion electrospray ionization Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry and identify abundant proteins by peptide mass fingerprinting. Coupling on-line methods such as liquid chromatography and capillary electrophoresis increased the number of proteins that could be identified in human body fluids. Protein identification was also improved by novel statistical methods utilizing prediction of chromatographic behavior and the non-randomness of enzymatic digestion. To identify proteins by short sequence tags, electron capture dissociation was implemented, improved and finally coupled on-line to liquid chromatography for the first time. The combined techniques can be used to sequence large proteins de novo or to localize and characterize any labile post-translational modification. New computer algorithms for the automated analysis of isotope exchange mass spectra were developed to facilitate the study of protein structural dynamics. The non-covalent interaction between HIV-inhibitory peptides and the oligomerization of amyloid β-peptides were investigated, reporting several new findings with possible relevance for development of anti-HIV drug therapies and understanding of fundamental mechanisms in Alzheimer’s disease.

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Made available in DSpace on 2014-07-29T15:28:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Denise Sisterolli Diniz.pdf: 6293055 bytes, checksum: d5c5b19907b7602ca5e99aa0414271f7 (MD5) Previous issue date: 2011-09-12 / Systemic Lupus Erythematosus - LES is an autoimmune disease involving multiple systems. In the Central nervous system-SNC is one of his more severe manifestations. One of the frames of Lupus neuropsychiatric - LES-NP, is a Demyelinating Syndrome - SD. SD in rare cases, may be the first manifestation of LES, resembling multiple sclerosis - MS in their symptoms. MS is autoimmune disease with involvement of SNC with components, degenerative and inflammatory, which can produce autoantibodies and general symptoms that make your final diagnosis. The disease occurs more in young women than in men, typically evolve with outbreaks and remissions. In order to contribute to the diagnosis of these two illnesses, we proposed a comparative analysis, considering clinical, laboratory, and image aspects. As there is a lack of definition of SD, aims to contribute to the definition and establishment of standards of compromise of the SNC by SD of LES-NP, comparing patients with LES-NP and MS (the prototype of CNS demyelinating disease), attended in rheumatology and neurology of the HC/FM/UFG, Goiania. GO, from 2009 to 2010, according to the demographic aspects (sex and age), clinical (time of illness, functional systems and EDSS), laboratory (Autoantibodies and liquid Cerebroespinhal - LCR), image (Conventional magnetic resonance - RM) and Neuropsychological - NPS (cognitive and emotional). It is one epidemiological, analytical and comparative cross-sectional study of LES-NP and MS, which was approved by the CEP/HC/UFG. Were used in the survey questionnaires: an analysis of demographic and personal and family background; other symptoms; Neurological exams and NPS; Analysis: image by RM, laboratory of autoantibodies and LCR; and symptoms of depression and anxiety by Beck inventory (BAI and BDI). The results demonstrated an increased frequency in patients of age; time of disease; Visual symptoms; changes of sensitivity; of coordination; of the March; retention and urinary incontinence; changes of speech and swallowing; depressive and psychotic symptoms in family and personal history; WMHs in parietal and frontal lobes, occipitais, corpus callosum, periventricular, justacortical, brain stem; the cerebellum; spinal cord and the Barkhof and Tintoré criteria - CBT. Other findings in the RM were: infarcts; Vasculitis; menigioma and thrombosis in patients with LES-NP. The involvement of SNC in LES was measured by clinical symptomatology, neurological examination, EDSS, image findings and neuropsychological tests. RM was predictive analytics to relate workload post-lesional adaptation in brain regions typically involved in in. The application of CBT in patients with SD of LES-NP, associated with the qualitative assessment of WMHs may define the differences of neurological involvement pattern of injury of the SD of LES-NP, those at. The dosage of autoantibodies was predictive analytics for the diagnosis of LES, especially the anti DNA, the anti-ENA and the LAC, which were unique in the LES-NP. The clinical examination and laboratory research, neurological autoantibodies antinuclear antibodies and image by RM offers great security in diagnosis of the two diseases.Show that there are aspects of the involvement of the SD in LES needing new assessments, using the markers of neuronal injury, the more specific and with studies of Immunogenetics compared with in, the prototype of CNS demyelinating disease. / Lúpus Eritematoso Sistêmico - LES é a doença auto-imune que envolve vários sistemas. No Sistema Nervoso Central - SNC é uma de suas manifestações mais graves. Um dos quadros neurológicos do Lúpus Neuropsiquiátrico - LES-NP, é a Síndrome Desmielinizante - SD. Em raros casos, SD pode ser a primeira manifestação do LES, se assemelhando a Esclerose Múltipla - EM em sua sintomatologia. EM é doença autoimune com envolvimento do SNC com componentes, inflamatório e degenerativo, que pode apresentar auto-anticorpos e sintomas gerais que dificultam seu diagnóstico final. As doenças ocorrerem mais em mulheres jovens que em homens, evoluem tipicamente com surtos e remissões. Com o intuito de contribuir para o diagnóstico dessas duas enfermidades, propusemos uma análise comparativa, considerando aspectos clínicos, laboratoriais e de imagem. Como há uma carência de definição da SD, pretende-se contribuir com a definição e o estabelecimento de padrões de comprometimento do SNC pela SD do LES-NP, comparando os pacientes com LES-NP e EM (o protótipo da doença desmielinizante), atendidos no serviço de reumatologia e neurologia do HC/FM/UFG, Goiânia/GO, de 2009 a 2010, segundo os aspectos demográficos (sexo e idade), clínicos (tempo de doença, sistemas funcionais e EDSS), laboratoriais (Autoanticorpos e Líquido Cerebroespinhal - LCR), de imagem (Ressonância Magnética Convencional - RM) e Neuropsicológicos - NPS (cognitivo e emocional). É um estudo epidemiológico, analítico, transversal, comparativo de LES-NP e EM, que foi aprovado pelo CEP/HC/UFG. Foram utilizados na pesquisa análise de questionários: um demográfico e de antecedentes pessoais e familiares; outro de sintomas; exames: neurológico e de NPS; avaliações: imagem por RM e laboratorial de auto-anticorpos e LCR; e sintomas de depressão e ansiedade pelo inventário de Beck (BAI e BDI). Os resultados demonstraram uma frequência aumentada nos pacientes de EM, em idade; tempo de doença; sintomas visuais; alterações de sensibilidade; da coordenação; da marcha; retenção e incontinência urinária; alterações da fala e deglutição; sintomas depressivos e psicóticos na história pessoal e familiar; alterações focais da substância branca (WMHs) nos lobos frontais, parietais e occipitais, corpo caloso, periventricular, justacortical, tronco encefálico; cerebelo; medula espinhal e os critérios de Barkhof e Tintoré - CBT. Outros achados na RM foram: infartos cerebrais; vasculites; meningioma e trombose nos pacientes com LES-NP. O envolvimento do SNC no LES foi mensurado pela sintomatologia clínica, exame neurológico, EDSS, achados de imagem e testes neuropsicológicos. RM foi preditiva em relacionar carga lesional em regiões cerebrais tipicamente envolvidas na EM. A aplicação dos CBT nos pacientes com SD do LES-NP, associado à avaliação qualitativa das WMHs pode definir as diferenças de padrão de envolvimento neurológico da lesão da SD do LES-NP, daquelas da EM. A dosagem de autoanticorpos foi preditiva para o diagnóstico de LES, especialmente o anti DNA, o anti-ENA e o LAC, os quais foram exclusivos no LES-NP. O exame clínico e neurológico, da investigação laboratorial de auto-anticorpos antinucleares e da imagem por RM oferece segurança no diagnóstico das duas enfermidades. Mostram que há aspectos do envolvimento da SD no LES que necessitam de novas avaliações, utilizando os marcadores de lesão neuronal, mais específicos e com estudos de imunogenética comparados com a EM, o protótipo da doença desmielinizante do SNC.

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of thesis Diagnostics of neuroinfection caused by human herpesviruses using nucleic acid amplification methods author: MUDr. Klára Labská supervisor: doc. MUDr. Vilma Marešová, CSc. In recent years, the diagnosis of neuroinfections has undergone a shift towards molecular biology methods. Our research focused on the predictive value of the capture of herpesvirus (HV) DNA in cerebrospinal fluid. In the first study, we examined the presence of DNA neurotropic herpes viruses (HSV1, HSV2, VZV and HHV6) in cerebrospinal fluid in immunocompetent patients with laboratory-confirmed tick-borne meningoencephalitis and enterovirus meningitis and meningoencephalitis. The control group consisted of patients with proven absence of an inflammation in the cerebrospinal fluid. Patients were followed for 6 months. The course of the disease and its consequences, including laboratory tests, were compared between groups of patients with and without the presence of HV DNA. In the second study, we tried to demonstrate the presence of HSV1 DNA in cerebrospinal fluid during its symptomatic reactivation in patients with purulent meningitis. In our group of immunocompetent patients with non-purulent inflammation in the cerebrospinal fluid, the proportion of HV DNA positive patients reached 7.5% (13 out of 173), we also...

Capillary zone electrophoresis is frequently used in various analyses. In this diploma thesis a hydrodynamic sample introduction method controlled by pressure pulse has been proposed for short-capillary electrophoresis. The base electrolyte flushes sample from the loop of a six-way sampling valve and is carried to the injection end of the capillary. At the time when the sample zone reached the capillary, a short pressure impulse is generated in the electrolyte stream, which provides injection of the sample into the capillary. Then the electrolyte flow is stopped and the separation voltage is turned on. The amount of sample introduced to the capillary is controlled by the duration of the pressure pulse. This new sample introduction method was tested in the determination of ammonia, histidine, creatinine, uric acid and hippuric acid in human urine and for rapid screening of the contents of the inorganic ions in cerebrospinal fluid and blood plasma. The determination was performed in a capillary with an overall length of 10,5 cm and two base electrolytes was tested - 50 mM MES + 5 mM NaOH (pH 5,10) and 1 M acetic acid + 1,5 mM crown ether 18-crown-6 (pH 2,40). Using dual detection techniques contactless conductivity and UV spectrometric detection, anorganic and organic substances in the sample could...