CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / The production of biodiesel is generally performed by alkaline transesterification oils with low amounts of free fatty acids (FFAs). In order to decrease the costs of production of biodiesel, low quality waste cooking oils or grease have been investigated as a source alternative, but problems in the purification step due to the formation of soap are found in catalysis with sodium hydroxide. In this work, the ionic liquid choline hydroxide was produced and used as catalyst in the production of biodiesel from oils of frying food. An experimental design was carried out to investigate the influence of variables: molar ratio oil/alcohol, temperature and concentration of catalyst in the conversion of triglycerides and free fatty acids to methyl esters. The concentration of catalyst showed higher influence on conversion, followed by the molar ratio of oil / alcohol. The temperature range did not result in significant conversion changes. The kinetic analysis showed that the highest conversions were obtained with 3 hours of reaction. The statistical design allowed find optimal conditions: 5.5% w/w catalyst molar ratio of oil/methanol 1:12, temperature 40 ÂC and 3 hours of reaction. Thermodynamic properties and acid numbers were determined for reaction products of the reactions carried out in experimental design, in order to provide data for process control. The acid numbers of products of all reactions were significantly reduced, independent of conversion. To evaluate the possibility of recovery and reuse of the ionic liquid, the liquid-liquid equilibrium of systems containing water, 1-butanol and glycerin, water, 1-butanol and choline hydroxide, and the partition in the ionic liquid system water, 1-butanol and glycerin at 30  C were studied. The solubility of the components was evaluated by construction of the binodal curve and the compositions of the equilibrium phases were determined by densitometry. The results show that glycerin is distributed preferably in the phase rich in water and it was not possible to quantify all compositions the water phase system, 1-butanol and choline hydroxide in the case that an electrolytic system. / A produÃÃo de biodiesel à geralmente realizada por transesterificaÃÃo alcalina de Ãleos com baixa quantidade de Ãcidos graxos livres (AGLs). Visando diminuir os custos de produÃÃo do biodiesel, Ãleos de baixa qualidade ou residuais tÃm sido investigados como alternativa de fonte graxa, porÃm problemas na etapa de purificaÃÃo em decorrÃncia da formaÃÃo de sabÃes sÃo encontrados na catÃlise com hidrÃxido de sÃdio. Nesse trabalho, o lÃquido iÃnico hidrÃxido de colina foi produzido e aplicado como catalisador na produÃÃo de biodiesel a partir de Ãleos provenientes da fritura de alimentos. Um planejamento experimental foi realizado para investigar a influÃncia das variÃveis: razÃo molar Ãleo/Ãlcool, temperatura e concentraÃÃo de catalisador na conversÃo de triglicerÃdeos e AGLs a Ãsteres metÃlicos. A concentraÃÃo de catalisador apresentou maior influÃncia na conversÃo, seguido pela razÃo molar Ãleo/Ãlcool. A variaÃÃo de temperatura nÃo implicou em alteraÃÃes considerÃveis de conversÃo. A avaliaÃÃo cinÃtica mostrou que as maiores conversÃes foram obtidas com 3 horas de reaÃÃo. O planejamento estatÃstico permitiu encontrar condiÃÃes Ãtimas: 5,5 % m/m de catalisador, razÃo molar Ãleo/metanol de 1/12, temperatura de 40 ÂC e 3 horas de reaÃÃo. Propriedades termodinÃmicas e Ãndices de acidez foram determinados para os produtos reacionais das reaÃÃes realizadas no planejamento experimental, com o intuito de fornecer dados para o controle do processo. Os Ãndices de acidez dos produtos de todas as reaÃÃes apresentaram reduÃÃo significativa, independente da conversÃo. Para avaliar a possibilidade de recuperaÃÃo e reutilizaÃÃo do lÃquido iÃnico, o equilÃbrio lÃquido-lÃquido dos sistemas contendo Ãgua, n-butanol e glicerina, Ãgua, n-butanol e hidrÃxido de colina e a partiÃÃo do lÃquido iÃnico no sistema Ãgua, n-butanol e glicerina a 30 ÂC foram estudados. A solubilidade dos componentes foi avaliada por meio da construÃÃo da curva binodal e as composiÃÃes das fases em equilÃbrio foram determinadas atravÃs da densimetria. Os resultados mostram que a glicerina se distribui preferencialmente na fase rica em Ãgua e que nÃo foi possÃvel quantificar todas as composiÃÃes das fases do sistema Ãgua, n-butanol e hidrÃxido de colina por se tratar este de um sistema eletrolÃtico.

This work aimed to evaluate the digestibility of ingredients and estimate the nutritional requirement of methionine for juvenile catfish (Rhamdia quelen). For this a digestibility trial was carried out by determining the apparent digestibility coefficients (ADC) of dry matter (DM), crude protein (CP) and gross energy (GE) of ingredients: catfishes flour (FJ), commercial fishmeal (FPC) of meat and bone meal (MBM), soybean protein concentrate (SPC), maltodextrin (M), corn starch (AM), gelatin (G) and casein (C) for juvenile catfish (weight 35.45 ± 12.1 g), through a reference diet (RD) and test diets (diet with 70% of DR over 30% of the tested ingredient) containing 0.3% chromic oxide as an inert marker. The digestibility coefficients were adjusted to compensate for the partial loss of nutrients through leaching by water. Ingredients test FPC, FJ, M, C and G showed higher DM, 77.03 to 95.66%, for PB the CPS showed lower digestibility (59.70%) compared to the other ingredients FPC, FCO, FJ, G and C were 87.19 to 99.59%, as well as for EB the CPS showed lower digestibility 71.59% did not differ AM with 73,59%, being the ingredients FCO, FJ, FPC, G and C with higher digestibility, with 82.70 to 85.79%. Subsequently a dose response test was conducted to estimate the methionine requirement of juvenile catfish (initial weight of 3.26 ± 0.3 g and medium length 7.17 ± 0.27 cm), using 35 animals per experimental unit, and four replications. Six isoproteic and isocaloric diets were formulated with six increasing levels of methionine (0.9, 1.6, 2.3, 3.0, 3.7 and 4.4% crude protein) holding constant the level of cystine (0 , 19% in crude protein). Each diet for fish were distributed randomly, provided twice daily (9:30 and 17:00) until apparent satiation, during 15 weeks. The values of relative weight gain (RWG) and specific growth rate (SGR) increased up to 3.0% of methionine (P <0.05) and being kept virtually the same later. The rate of protein retention increased up to 2.3% methionine level, but decreasing in the 4.4% level (P <0.05). The quadratic regression analysis on the RWG and SGR indicated that optimal levels of methionine in the diet recommended for the growth of juvenile catfish, are estimated at 3.59% and 3.46% in crude protein, respectively, and maintaining a constant level of cystine (0.19% in crude protein), thus corresponding to 1.33 and 1.28% in the diet, or total sulfur amino acid to 3.65 and 3.78% in the crude protein, respectively. / Este trabalho teve por objetivo avaliar a digestibilidade de ingredientes e estimar a exigência nutricional em metionina para juvenis de jundiá (Rhamdia quelen). Para isso realizou-se um ensaio de digestibilidade determinando os coeficientes de digestibilidade aparente (CDA) da matéria seca (MS), proteína bruta (PB) e energia bruta (EB), dos ingredientes: farinha de jundiá (FJ), farinha de peixe comercial (FPC), farinha de carne e ossos (FCO), concentrado protéico de soja (CPS), maltodextrina (M), amido de milho (AM), gelatina (G) e caseína (C), para juvenis de jundiá (peso 35,45±12,1 g), através de uma dieta referência (DR) e dietas-teste (dieta com 70% de DR mais 30% do ingrediente testado) contendo 0,3% de óxido de cromo como marcador inerte. Os coeficientes de digestibilidade foram ajustados para compensar as perdas parciais dos nutrientes por lixiviação pela água. Os ingredientes teste FPC, FJ, M, C e G apresentaram maior digestibilidade da MS, de 77,03 a 95,66%, já para PB o CPS apresentou menor digestibilidade (59,70%) comparado aos demais ingredientes FPC, FCO, FJ, G e C que foram de 87,19 a 99,59%, assim como para EB o CPS apresentou menor digestibilidade 71,59% não diferindo do AM com 73,59%, sendo os ingredientes FCO, FJ, FPC, G e C com maior digestibilidade, apresentando 82,70 a 85,79%. Posteriormente realizou-se ensaio de dose resposta para estimar a exigência de metionina de juvenis de jundiás (peso médio inicial de 3,26±0,3 g e comprimento médio 7,17±0,27 cm), utilizando 35 animais por unidade experimental, e quatro repetições. Seis rações isoproteica e isoenergética foram formuladas com seis níveis crescentes de metionina (0,9; 1,6; 2,3; 3,0; 3,7 e 4,4% na proteína bruta) mantendo constante o nível de cistina (0,19% na proteína bruta). Cada dieta foi distribuída aleatoriamente aos peixes, fornecida duas vezes ao dia (09:30 e 17:00 h), até a saciedade aparente, por 15 semanas. Os valores de ganho em peso relativo (GPR) e taxa de crescimento específico (TCE) aumentaram até o nível de metionina 3,0% (P<0,05) e mantendo-se praticamente o mesmo posteriormente. A taxa de retenção proteica aumentou até o nível de metionina 2,3%, mas diminuindo no nível 4,4% (P<0,05). A análise de regressão quadrática sobre o GPR e TCE indicou que os níveis ideais de metionina na dieta, recomendadas para o crescimento de juvenis de jundiá, são estimados em 3,59% e 3,46% na proteína bruta, respectivamente, mantendo o nível de cistina constante (0,19% na proteína bruta), correspondendo assim a 1,33 e 1,28% na dieta, ou um total de aminoácido sulfurado de 3,78 e 3,65% na proteína bruta, respectivamente.

A colina é um nutriente essencial nas dietas de frangos de corte. Os valores de exigências nutricionais são variáveis e foram estabelecidos há muitos anos. Assim, o objetivou-se com este trabalho reavaliar as respostas de frangos de corte de alto potencial genético de 1 a 7, 1 a 14 e 1 a 21 dias de idade como também modelar as respostas por diferentes funções matemáticas. Foram conduzidos dois experimentos sob dois níveis de metionina na dieta, tendo como base o método dose-resposta. Para os ensaios, foram utilizados 2.160 pintos de corte machos da linhagem Cobb 500 (1.080 em cada experimento), distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado, com seis tratamentos, seis repetições e 30 aves por unidade experimental. Os tratamentos consistiram em rações com níveis de 390, 715, 1.040, 1.365, 1.690 e 2.015 mg/kg de colina. As rações experimentais foram formuladas utilizando-se a técnica da suplementação. Foi formulada uma ração basal à base de milho, farelo de soja, concentrado proteico de soja, açúcar e amido contendo 390 mg/kg de colina total e 0,596% de metionina digestível. O cloreto de colina (62,5%) comercial foi suplementado para obter os demais níveis. O segundo experimento consistiu nos mesmos tratamentos do primeiro, porém com atendimento de 0,440% da metionina digestível. As variáveis mensuradas em ambos os ensaios foram: consumo de ração, consumo de colina, conversão alimentar e ganho de peso. Para modelar as respostas considerou-se o consumo de colina como variável independente e ganho de peso como variável dependente. As respostas foram modeladas por cinco modelos matemáticos: broken line, broken line com ascendência quadrática, cinética de saturação, logístico e monomolecular e o melhor modelo foi selecionado pelo critério de Akaike. As análises estatísticas foram realizadas com auxílio do programa computacional SAS® utilizando o procedimento PROC GLM para análise das pressuposições e análise de variância e PROC NLIN para o ajuste dos modelos. Os modelos que melhor se ajustaram foram: Broken line com ascendência quadrática (1,26 mg/g de GP ensaio 1) e Logístico (1,26 mg/g de GP ensaio 2) para o período de 1 a 7 dias. No período de 1 a 14 dias os modelos selecionados para o experimento com metionina normal e reduzida foram Logístico (1,16 mg/g de GP) e Broken line com ascendência quadrática (1,28 mg/g de GP), respectivamente. Já para o período de 1 a 21 foram o cinética de saturação, estimando uma exigência de 1,35 mg/g de GP para o experimento com metionina normal, e Broken line com ascendência quadrática estimando uma exigência de 1,21 mg de colina/g de GP para o experimento com metionina reduzida. / Choline is an essential nutrient in the diets of chicks. Supplementation levels in feeds is variable and requirements have been established many years ago. Thus, the objective of this study was to reassess the responses of high genetic potential chicks from 1-7, 1-14 and 1 to 21 days as well as modeling the responses of different mathematical functions. Two trials were conducted using two dietary levels of methionine, based on the dose-response method. For the trials were used 2,160 Cobb 500 male broiler chicks (1,080 birds in each experiment), distributed in a completely randomized design with six treatments and six replicates and 30 birds per experimental unit. The treatments consisted of diets with levels of 390, 715, 1,040, 1,365, 1,690 and 2,015 mg/kg of choline. The diets were formulated using the supplementation method. The basal diet was formulated based on corn, soybean meal, soy protein concentrate, sugar and starch, and contained 390 mg/kg of choline and 0.596% of digestible methionine. Commercial choline chloride (62.5%) was supplemented to obtain the other levels. The second trial consisted of the same treatments of the first, but with 0.440% of digestible methionine. The variables measured in both trials were: feed intake (FI), intake of choline (IC), feed conversion (FC) and weight gain (WG). To model the responses, the variables used were the intake of choline as an independent variable and weight gain as the dependent variable. The responses were modeled by five mathematical models: broken line (ascending linear and quadratic segments), saturation kinetic, 4-parameter logistics and monomolecular models and the best model was selected by Akaike information criterion. Statistical analyzes were performed using the computer program SAS® using PROC GLM for analysis of the assumptions and analysis of variance and PROC NLIN to fit the models. The models that best fit were: broken line quadratic segments (1.26 mg/g of WG - trial 1) and Logistics (1.26 mg/g of WG - trial 2) for the period 1-7 days. In the period 1-14 days, the models selected for the experiment with normal and deficient methionine were Logistic (1.16 mg/g WG) and broken line quadratic segments (1.28 mg/g WG), respectively. For the period 1-21days, the models were the saturation kinetics, estimating a requirement of 1.35 mg/g of WG for the experiment with normal methionine, and broken line quadratic segments estimating a requirement of 1.21 mg choline/g of WG for the experiment with deficient methionine.

The distribution of urotensin-II-immunoreactivity (irU-II) was studied in the rat brainstem and spinal cord with the use of an antiserum against the human urotensin II (U-II) peptide. A population of ventral horn neurons in the spinal cord, hypoglossal nucleus, dorsal motor nucleus of the vagus, facial motor nucleus, nucleus ambiguus, abducens nucleus and trigeminal motor nucleus exhibited irU-II of varying intensities. The number of irU-II motor neurons was higher in the lumbar segments as compared to that of cervical, thoracic and sacral segments. Double-labeling the sections with U-II- and choline acetyltransferase (ChAT)-antisera revealed that nearly all irU-II ventral horn and brainstem neurons were ChAT-positive. The result provides the first immunohistochemical evidence of the presence of irU-II in cholinergic motoneurons of the rat spinal cord and brainstem.

A 18FCH é um biomarcador promissor para imagem de tumores usando a tecnologia PET, sendo eficaz no diagnóstico de tumores metastáticos e específico para tumores cerebrais, de próstata, de pulmão, entre outros. Apesar de já ser utilizada em alguns países como na França, Alemanha, Eslovênia, Polônia, România e Portugal, a 18FCH ainda não é produzida nem comercializada no Brasil. Este trabalho propôs o desenvolvimento de um novo radiofármaco baseado em colina marcada com o isótopo 18F para diagnóstico de imagens PET por ser uma demanda crescente na medicina nuclear nacional. Também foi proposto o desenvolvimento de ensaios para o controle de qualidade de modo a avaliar o radiofármaco antes de sua utilização em pacientes; testes in vitro de toxicidade em células não tumorais (MRC-5), avaliando possíveis alterações na proliferação celular causadas pelas impurezas do radiofármaco; e, testes de saturação da interação da 18FCH com células tumorais (PC-3 e U-87) e a competição com HC-3 e DMAE, realizados para caracterizar a eficiência da captação do radiofármaco por células tumorais que expressam o transportador de colina CHT. A 18FCH foi sintetizada por duas etapas principais, a primeira pela reação do dibromometano com fluoreto-18, assistida por Kryptofix2.2.2, formando o 18F-fluorobromometano (18FBrCH2) e, em seguida, o 18FBrCH2 reagiu com o segundo precursor, DMAE, gerando o produto final,18FCH. O tempo de síntese foi de 45 minutos. A 18FCH foi obtida com rendimento radioquímico de 4,68 a 8,32%, pureza radioquímica maior que 99% e mostrou-se estável por até 8 horas após a sua produção. As metodologias analíticas testadas foram adequadas para o uso rotineiro no controle de qualidade da 18FCH. A avaliação do potencial citotóxico das impurezas da 18FCH, pelo teste clonogênico, mostrou que, nas concentrações avaliadas, os componentes não alteram a capacidade proliferativa das células sadias humanas. A interação da 18FCH com as linhagens celulares foi saturável, com ligação específica maior que 94%, atestando a eficácia do radiofármaco. O HC-3 e DMAE mostraram significativa inibição da captação do radiofármaco, demonstrando que, sua captação nestas células ocorre parcialmente, pelo transportador CHT. Os valores de IC50 para HC-3 foram de 795,9+ 221,1; 409,3 + 353,6 e 778,4 + 95,3M para PC-3, U-87 e MRC-5, respectivamente e para DMAE foram de 11,0 + 8,7; 4,7 + 1,2 e 6,3 + 2,2M para PC-3, U-87 e MRC-5, respectivamente, mostrando-se potentes inibidores da captação da colina. Todos os testes realizados contribuíram, em parte, para o processo de registro conforme normas da ANVISA.

Numerous studies have investigated how bulk lipid metabolism is influenced in obesity and in particular how the composition of triglycerides found in the cytosol change with increased adipocyte expansion. However, in part reflecting the analytical challenge the composition of cell membranes, and in particular glycerophospholipids, an important membrane component, have been seldom investigated. Cell membrane components contribute to a variety of cellular processes including maintaining organelle functionality, providing an optimized environment for numerous proteins and providing important pools for metabolites, such as choline for one-carbon metabolism and S-adenosylmethionine for DNA methylation. Here, I have conducted a comprehensive lipidomic and transcriptomic study of white adipose tissue in mice that become obese either through genetic modification (ob/ob genotype), diet (high-fat diet) or a combination of the two across the life course. Specifically, I demonstrated that the changes in triglyceride metabolism that dominate the overall lipid composition of white adipose tissue were distinct from the compositional changes of glycerophospholipids. These latter lipids became more unsaturated to maintain the fluidity and normal function of the membrane in the initiation of obesity but then turned saturated after long-term administration of HFD and aging. This suggests that while triglycerides within the adipose tissue may be a relatively inert store of lipids, the compositional changes occur in cell membranes with more far-reaching functional consequences in both obesity and aging. The two-phase change of phospholipids can be correlated well with transcriptional and one-carbon metabolic changes within the adipocytes. The transcriptomic study demonstrated that the lipid metabolic pathways regulated by the peroxisome, AMPK, insulin and PPARγ signaling were activated in the initiation of obesity but inhibited in the adipose tissue of old ob/ob mice along with up-regulated inflammation pathways. The brown and white adipose tissue of PPARα-knock-out mice were also studied by lipidomic tools to get a deeper understanding of the effect of the peroxisome and PPAR system on adipose tissue and lipid metabolism during obesity. Most of the lipids were increased and became more saturated and shorter in adipose tissues of PPARα null mice, which is in good accordance with the results of the former animal study. In conclusion, my work using different rodent models and multi-omics techniques demonstrated a protective metabolic mechanism activated in the initiation but impaired at the end of the processes of obesity and aging, which could be an explanation of the similarity of obesity and aging in terms of high incidence of the metabolic syndrome and related diseases.

O nervo depressor aórtico (NDA) é, primariamente, um conjunto de fibras aferentes que transmitem informações oriundas de alterações da pressão arterial (PA) a partir dos barorreceptores arteriais (mecanorreceptores localizados no arco da aorta ou seio carótico) aos centros de controle cardiovascular localizados no sistema nervoso central (SNC). Este mecanismo é responsável pela regulação reflexa da função cardíaca e vascular, promovendo ajustes nos centros vasoconstritor e vasodilatador, atuando simultaneamente sobre os sistemas simpático e parassimpático. Fato este que, contribui para o aumento da atividade vagal cardíaca e inibição de descargas simpáticas para vasos e coração, garantindo a manutenção dos níveis pressóricos dentro de uma faixa de normalidade. Diversos neurotransmissores foram descritos atuando nos centros de controle cardiocirculatório localizados no tronco encefálico, mais especificamente no bulbo, participando da regulação da PA. Nestas regiões centrais, os neurotransmissores glutamato, GABA (Àcido Gama Aminobutírico) e substância P (SP) foram amplamente investigados. Entretanto, em nenhum destes trabalhos foi realizado um estudo detalhado, investigando a presença da SP em nervos depressores aórticos de forma direta, sendo esta informação ainda desconhecida. Acredita-se que a SP seja um transmissor do reflexo barorreceptor, atuando na modulação deste circuito, na tentativa de atenuar elevações da pressão sanguínea. Existe portanto a necessidade de uma investigação morfológica e imunohistoquímica com o intuito de promover o esclarecimento sobre os neurotransmissores presentes no NDA. Os nervos frênicos foram utilizados como controle positivo, já que neste território a SP já se encontra caracterizada. Inúmeros são os estudos que descrevem a existência da SP em nervos frênicos, fato este que justifica a aplicação do referido nervo como controle do NDA, foco de estudo deste projeto. Baseados nestas necessidades, o objetivo do presente estudo foi primeiramente o de promover a padronização da técnica imunohistoquímica (IHQ), bem como a verificação da viabilidade de utilização do glutaraldeído à 2,5% como um fixativo primário, auxiliando na identificação de neurotransmissores dentro do sistema nervoso periférico. Em seguida, a identificação e quantificação da SP em NDA de ratos normotensos através do método imunohistoquímico indireto (3,3\'- Diaminobenzidina \"DAB\") foram realizados. O referido estudo foi desenvolvido em duas etapas. A primeira parte corresponde a padronização e otimização da técnica de imunohistoquímica em nervos frênicos de ratos Wistar através da localização e caracterização da SP e da enzima colina acetiltransferase (CAT). A segunda fase, trata-se da identificação e quantificação da SP no NDA, sendo este, um possível neurotransmissor ou neuromodulador do reflexo barorreceptor. Para este estudo foram utilizados no total 38 ratos da linhagem Wistar (Rattus Norvegicus), normotensos, com 20 semanas de idade, machos e fêmeas. Deste total, 16 animais machos foram destinados à padronização da técnica de IHQ em nervos frênicos. E para a caracterização e quantificação da SP no NDA foram utilizados 22 ratos Wistar, sendo 12 machos e 10 fêmeas. Nossos resultados demonstram de forma inédita a presença da SP em fibras amielínicas (tipo C) e fibras de pequeno diâmetro (A-delta) no NDA de forma bastante pontualizada em segmentos proximais e difusa distalmente, sugerindo a existência de subpopulações de fibras amielínicas do tipo C. Estes achados confirmam inúmeras suposições de que a SP atue como um dos neurotransmissores de aferências barorreceptoras, podendo participar na modulação do Sistema Nervoso Autônomo (SNA), uma vez que encontra-se localizada em centros responsáveis pela regulação reflexa da PA. Adicionalmente, a análise do percentual de marcação positiva à SP entre os gêneros apresentou um aparente predomínio da SP em machos mas sem diferença significativa entre os grupos. De forma semelhante, a padronização imunohistoquímica em cortes transversais e longitudinais de nervos frênicos apresentaram uma imunomarcação positiva e aleatória da SP em conjuntos de fibras amielínicas (tipo C) e em fibras de pequeno diâmetro localizadas próximo a periferia do espaço endoneural, corroborando com a localização relatada em estudos morfológicos e ultraestruturais, assegurando a especificidade e a reprodutibilidade do método. Distintamente, as fibras de grande e médio diâmetro (A-alfa, beta e gama), consideradas fibras mielinizadas de condução rápida, foram imunorreativas à CAT em nervos frênicos. Por fim, espera-se que a identificação deste neuropeptídeo sirva de gatilho para que futuras pesquisas envolvendo a liberação de neurotransmissores em aferências barorreceptoras sejam explorados. Fato este, que contribuirá para a agregação de informações pertinentes à modulação ou transmissão da informação neural, propiciando desta forma melhor entendimento da comunicação e atividades barorreflexas associadas a mecanismos cardiovasculares. / The aortic depressor nerve (ADN) is primarily a set of afferent fibers that transmit derived information of changes in arterial blood pressure (BP) from arterial baroreceptors (mechanoreceptors located in the aortic arch and carotid sinus) to sites of cardiovascular control located into central nervous system (CNS). This mechanism is responsible for the reflex regulation of cardiac and vascular function, promoting adjustments of vasoconstrictor and vasodilator centers, simultaneously acting on the sympathetic and parasympathetic systems. In addition, contributes to increased cardiac vagal activity and inhibition of sympathetic discharges to vessels and heart, ensuring the maintenance of blood pressure levels within the normal range. Many neurotransmitters have been described operating in cardio-circulatory control centers located in the brainstem, more specifically in the bulb, participating in the regulation of BP. In these central regions, the neurotransmitters glutamate, GABA (Gamma Aminobutyric Acid) and substance P (SP) have been widely investigated. However, none of these works was carried out a detailed study, investigating the presence of SP in aortic depressor nerves directly, and this information is still unknown. It is believed that SP can be a transmitter at the synapse of the baroreceptor reflex, operating in the modulation of this circuit in an attempt to attenuate elevation of blood pressure. Therefore, there is a need to investigate a morphological and immunohistochemical approach in order to promote the clarification on the present neurotransmitters into ADN. The phrenic nerves were used as a positive control, already as substance P (SP) is characterized in this territory. There have been numerous studies describing the existence of SP in phrenic nerves, a fact that justifies the application of the nerve as control of the ADN, study focus of this project. Based on these requirements, the aim of the present study is two-fold. Firstly, it attempts to promote the standardization of the immunohistochemical (IHC) technique as well as the verification of the feasibility of using glutaraldehyde fixative as a primary, assisting in the identification of neurotransmitters in the peripheral nervous system (PNS). Subsequently, the identification and quantification of SP immunoreactivity in the ADN of normotensive rats by indirect immunohistochemical method (3,3\'-Diaminobenzidine \"DAB\") were done. The study was developed in two stages. The first part corresponds to standardization and optimization of immunohistochemical technique in phrenic nerves of Wistar rats through location and characterization of the SP and enzyme choline acetyltransferase (ChAT). The second phase is about the identification and quantification of the SP into ADN, being a possible neurotransmitter or neuromodulator from the baroreceptor reflex. For this study we used a total of 38 Wistar rats (Rattus norvegicus), normotensive, 20 weeks old, male and female. From this total, 16 male animals were used for standardization of IHC technique in the phrenic nerves. Nonetheless, for the characterization and quantification of SP in ADN were used 22 Wistar rats, 12 males and 10 females. Our results showed an unprecedented manner the presence of SP in unmyelinated fibers (type C) and small diameter fibers (A-delta) into ADN, being quite focused on proximal segments and diffuse distally, suggesting the existence of subsets of unmyelinated fibers. These findings confirm numerous assumptions that the SP acts as a neurotransmitter from afferent baroreceptor and may participate in the modulation of the Autonomic Nervous System (ANS), since it is located in centers responsible for regulating reflex of BP. Further, an analysis of the percentage of positive SP staining between genders, presented an apparent predominance of SP in males but no significant difference between the groups were found. Similarly, IHC standardization in transverse and longitudinal sections of phrenic nerves showed a positive random and immunostaining of SP in sets of unmyelinated fibers (type C) and small diameter fibers located near the periphery of endoneural space, corroborating location reported on morphological and ultrastructural studies, ensuring the specificity and reproducibility of the method. Distinctly, the fibers of large and medium diameters (A-alpha, beta and gamma), considered myelinated fibers of fast conducting, were immunoreactive to ChAT in phrenic nerves. Finally, it is expected that the identification of neuropeptide serve as a trigger for that future studies involving the release of neurotransmitters into afferent baroreceptors be explored. These results could contribute to the aggregation of relevant information for the modulation and transmission of neural information, thus providing better understanding of communication and baroreflex activities associated with cardiovascular mechanisms.

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Para avaliar o efeito do gadolínio sobre os metabólitos Colina (CO), Creatina (CRE) e N-acetil-aspartato (NAA) foi realizada espectroscopia por ressonância magnética em 25 pacientes com tumores intracranianos antes e após a injeção venosa do meio de contraste. Foram quantificadas e comparadas as relações CO/CRE, CO/NAA e NAA/CRE bem como a largura a meia altura dos picos dos metabólitos CO, CRE e NAA nos espectros pré e pós-contraste. Verificou-se redução das relações CO/CRE e CO/NAA e da largura a meia altura do pico do NAA nos espectros pós-contraste / In order to evaluate the gadolinium effect on the metabolites choline (CHO), creatine (CRE) and N-acetyl-aspartate (NAA) we performed multivoxel spectroscopy in 25 patients with intracranial tumors before and after the injection of the contrast material. The metabolite ratios CHO/CRE, CHO/NAA and NAA/CRE and the peak width at half height of the metabolites were calculated and compared between the pre and post contrast spectra. Measurements showed reduction of the CO/CRE and CO/NAA ratios and of the NAA width after the administration of the contrast material

Early cortical injury has been attributed to the consequential effects of various factors, such as alcohol, drug addiction, smoking, and inadequate nutrient intakes during periods of pregnancy and lactation, or delivery of infants by forceps, and premature deliveries. These are only a few examples of circumstances, or "injury", that may result in disorders ranging from mild learning difficulties to aggressive behaviour. Injury to the cortex during the early years of development has been know to result in poor behavioural outcome into adulthood. Presently, the most common form of treatment includes a pharmacological agent, which may be accompanied with behavioral modification therapies supported by families. As an alternative form of therapy towards the treatment of early cortical injury, choline and a vitamin and mineral supplement (EM Power+) were used to determine the possibilities of nutrition intervention in an animal model. The injuries were incurred by aspiration lesion at days three, (Exp.1) and four, (Exp.2) and lesions were localized to the midline medial frontal cortex in some rats, while a different group of rats received lesions in the posterior parietal cortex. The pre-and postnatal choline treated animals showed favorable results for the medial frontal lesions, and the postnatal vitamin supplement treated animals showed favorable results for treatment in both medial frontal and posterior parietal lesions. All animals were tested in adulthood indicating that nutrition intervention is very beneficial for alleviating some of the functional deficits commonly seen from early cortical injury. / xiv, 191 leaves : ill. ; 28 cm.