Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-05T17:41:51Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 388353 bytes, checksum: 897cb0cd725d5dc562e4412ef8f785fc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-05T17:41:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 388353 bytes, checksum: 897cb0cd725d5dc562e4412ef8f785fc (MD5) Previous issue date: 2005-12-16 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O gênero Eucalyptus, da família Myrtaceae, apresenta cerca de 800 espécies e vários híbridos naturais. Além da importância biológica, é de múltiplo interesse comercial, destacando-se na indústria farmacêutica e na produção de biomassa lenhosa. A quantificação do conteúdo de DNA nuclear é útil em estudos de relações filogenéticas. Também é uma informação importante no mapeamento de genomas. Para a determinação do conteúdo de DNA nuclear em plantas, a citometria de fluxo é considerada a metodologia mais utilizada. No entanto, os estudos com Eucalyptus apresentam diferenças entre os valores encontrados. Outra técnica cujos resultados permitem a determinação da quantidade de DNA nuclear é a citometria de imagem. O objetivo deste trabalho é reavaliar as divergências nas quantificações de DNA nuclear em Eucalyptus, pela aplicação das citometrias de fluxo e de imagem. As quantificações foram realizadas com o uso do citômetro de fluxo, associado à coloração com iodeto de propídeo, dos núcleos isolados. Os padrões de referência foram folhas de Raphanus sativus Saxa (1,11 pg), Lycopersicon esculentum Stupicke (1,96 pg) e hemácias de Gallus gallus Leghorn fêmea (2,33 pg). Histogramas da intensidade de fluorescência relativa foram obtidos após a análise dos núcleos isolados dos padrões internos combinados com E. globulus, E. grandis e E. urophylla. Os valores em pg de DNA nuclear encontrados para E. globulus e E. grandis foram de 1,39 e 1,41 (padrão R. sativus), 1,20 e 1,22 (padrão L. esculentum), e 1,05 e 1,09 (padrão G. gallus). A quantificação para E. urophylla foi de 1,01 pg (padrão G. gallus). As espécies de Eucalyptus analisadas não apresentaram diferenças entre si maiores que 5,4% no conteúdo de DNA do genoma em pg. Todavia, variações em uma única planta, resultantes dos diferentes padrões, apresentaram divergências de até 32%. A citometria de imagem, dos núcleos corados pela reação de Feulgen, foi realizada para analisar o conteúdo de DNA de E. globulus, cujos valores foram de 1,16 (padrão R. sativus) e 1,02 pg (padrão L. esculentum). O uso de fluorocromos (intercalantes ou base específicos) e a interferência de compostos secundários na coloração foram considerados pontos críticos na análise pela citometria de fluxo; além dos padrões de referência e dos coeficientes de variação para ambas as citometrias. Em todas as análises os maiores coeficientes de variação foram 3,80 (citometria de fluxo) e 4,83% (citometria de imagem). Pela comparação entre as metodologias aplicadas, demonstrou-se o valor mais elevado da estimativa do conteúdo de DNA nuclear em E. globulus via citometria de fluxo, cerca de 16% maior do que na citometria de imagem. As proporções entre os padrões vegetais continuaram as mesmas em ambas as citometrias. Embora a quantificação mais precisa de DNA nuclear em picogramas para E. globulus seja proveniente da citometria de fluxo das folhas, pelo valor do CV, a mais acurada foi considerada a média dos dados obtidos via citometria de imagem dos meristemas, cujo valor foi 1,09 pg DNA/2C. / The Eucalyptus genus of Myrtaceae family has about 800 species and some natural hybrids. Beyond the biological importance, it is of multiple commercial interests, being distinguished in the pharmaceutical industry and the production of pulp biomass. The quantification of the nuclear DNA content is useful in studies of phylogenetics. Also it is important information for genome mapping. For nuclear DNA content determination, flow cytometry is considered the most appropriate methodology. However, Eucalyptus studies present differences between values. Another technique whose results allow the determination of the nuclear DNA amount is the image cytometry. The objective of this work was to reevaluate the divergences in the measures of nuclear DNA in Eucalyptus, for the application of flow and image cytometries. The measures had been carried through with the use of flow cytometer and stain with propidium iodide, of the isolated nuclei. The reference standards were leaves of Raphanus sativus cv. Saxa (1.11 pg), Lycopersicon esculentum cv. Stupicke (1.96 pg) and Gallus gallus female Leghorn erythrocytes (2.33 pg). Histograms of relative fluorescence intensity have generated after analysis of the isolated nuclei of combined internal standards with E. globulus, E. grandis and E. urophylla. The values in pg of nuclear DNA found for E. globulus and E. grandis xhad been of 1.39 and 1.41 (standard R. sativus), 1.20 and 1.22 (standard L. esculentum), and 1,05 and 1,09 (standard G. gallus). The quantification for E. urophylla pg was of 1.01 (standard G. gallus). The Eucalyptus species analyzed did not present differences among themselves greater than 5.4% in genomic DNA content in pg. However, intraspecific variations in only one plant, resultant of the different standards, presented divergences of up to 32%. The image cytometry analyses, with Feulgen reaction stain nuclei, were carried out to analyze the E. globulus DNA content, whose values were of 1.16 (standard R. sativus) and 1.02 pg (standard L. esculentum). The fluorochrome use (DNA- intercalating or base specific) and the secondary compounds interference in the staining were considered critical points in the analysis for the flow cytometry; besides the standards of reference and the coefficients of variation for both the cytometries. In all the analyses the bigger variation coefficients were 3.80 (flow cytometry) and 4.83 (image cytometry). For the comparison between the applied methodologies, the increase of the estimate of the nuclear DNA content was confirmed in E. globulus by flow cytometry, about 16% greater as compared to image cytometry. The ratios between plant standards remained the same ones in both techniques. Although the most precise nuclear DNA quantification in picogramas for E. globulus was proceeding from flow cytometry of leaves, by CV value, the most accurate was considered the average of meristem image cytometry data, whose value was 1.09 pg DNA/2C.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-06T13:54:11Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 478379 bytes, checksum: c2cc7065a75ae315ac59a7a3f7216538 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-06T13:54:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 478379 bytes, checksum: c2cc7065a75ae315ac59a7a3f7216538 (MD5) Previous issue date: 2003-08-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Capsicum é um dos membros economicamente mais importantes de Solanaceae. Das 25 espécies reconhecidas, cinco são extensivamente cultivadas, sendo C. annuum L. a mais importante comercialmente, sobretudo pelo seu valor agronômico como especiaria. Apesar da sua importância econômica, a caracterização citogenética em C. annuum é conflitante na literatura quanto à posição do centrômero, do satélite e da região organizadora do nucléolo (NOR). Essas regiões têm sido reconhecidas citogeneticamente pela presença de constrições secundárias, por métodos convencionais de preparação e coloração; e pelas marcações produzidas pelo bandeamento AgNOR. O presente estudo teve como objetivos desenvolver metodologias para sincronização do ciclo celular de regiões meristemáticas, aplicar técnicas de dissociação celular e secagem ao ar, identificar prováveis pontos de fusão cromossômica e utilizar a metodologia RFA (bandeamento reverso com laranja de acridina) para verificar o seu potencial na identificação de segmentos associados à NOR. As preparações citogenéticas de meristemas radiculares de C. annuum ‘Fortuna Super’, ‘Criollo de Morelos’, ‘Athenas’ e milho foram realizadas pelas técnicas de maceração enzimática, dissociação celular e secagem ao ar. O milho foi utilizado como padrão de NOR, conhecida no cromossomo de número 6. As amostras foram submetidas à coloração convencional Giemsa, enquanto outras, à técnica de RFA. As metáfases foram observadas com objetiva e capturadas diretamente por uma videocâmera acoplada ao microscópio e a um computador. Determinou-se que a concentração e o tempo de exposição apropriados em C. annuum foram de 2 mM de hidroxiuréia por 18 h, enquanto o tratamento com orizalina a 5 μM, durante 3 e 4 h, permitiu o acúmulo de células sincronizadas em prometáfases e metáfases. Em milho, os mesmos pré-tratamentos permitiram o acúmulo de células em prometáfases. Nos três acessos de C. annuum, foi evidenciado um cariótipo- padrão diplóide de 2n=24 cromossomos, sendo 10 pares metacêntricos (1-10), um submetacêntrico com satélite (11) e um acrocêntrico (12). A morfologia desses cromossomos permitiu a diferenciação das constrições primárias e secundárias e a detecção de possíveis pontos de fusão entre cromossomos de C. annuum ‘Fortuna Super’. O bandeamento com laranja de acridina, nos três acessos de C. annuum, revelou uma banda fluorescente verde-amarelada, subterminal no cromossomo 5, e duas bandas mais fortemente marcadas, flanqueando a constrição secundária, no braço curto do cromossomo 11. Já no milho utilizado como padrão de NOR conhecida no cromossomo de número 6 esse bandeamento resultou em bandas flanqueando a constrição secundária desse cromossomo, mostrando a especificidade da técnica nessa região. A técnica RFA aplicada em plantas teve a sua nomenclatura substituída pela Hsc-FA (bandeamento fluorescente da heterocromatina associada à constrição secundária com uso de laranja de acridina). / Capsicum is a Solanaceae member with higher economic importance. From the 25 species that are known, 5 are extensively cultivated, being C. annuum L. the most important commercially, mainly by its agronomic value as spice. Despite its economical importance, the cytogenetic characterization in C. annuum, is still unclear in the literature in relation to centromeric, satellite and nucleolar organized region (NOR) positions. In C. annuum, these regions have been recognized cytogenetically by the presence of secondary constrictions, staining conventional methods and banding AgNOR. In this study, methods of cell cycle synchronization in meristematics regions were developed. It was also used the cell dissociation technique and air dryness and the RFA method (R-bands by fluorescence using acridine orange). Pepper and maize, used as standard, root tips were washed and placed in freshly prepared enzyme solution. Slides were prepared by meristematic celular dissociation, air-dried and placed on a hot-plate (50 °C). Some samples were immediately stained with a Giemsa solution, washed twice in distilled water and air-dried. Others samples were stained by RFA technique of the. Figures of chromosomes were captured with a CCD video camera on an Olympus TM BX 60 fluorescence microscope with a WB filter. The optimal concentration and time of exposure was 2 mM hydroxyurea for during 18 hours. The treatment with 5 μM oryzalina during 3 and 4 hours, resulted in accumulation of synchronized cells in prometaphase and metaphase. In mayze, the same pre-treatment resulted in accumulation in prometaphases cells. In C. annuum ‘Fortuna Super’, ‘Athenas’ and ‘Criollo de Morelos’, was found 2n = 24 chromosomes, being 10 pairs metacentrics (1-10), one pair submetacentric with satellite (11) and one pair acrocentric (12). The chromosomes morphology resulted in the differentiation of primary and secondary constrictions and showed probable chromosome fusions points in C. annuum, ‘Fortuna Super’. Pepper chromosomes showed one weak band emitting yellowish green fluorescence in the secondary constriction of the short arm of chromosome 5 and two more intense bands flanking the secondary constriction in chromosome 11. In the maize line 2-NOR used as a standard, the chromosome 6 showed similar results in the secondary constriction corresponding to the NOR position. In this study, RFA band nomenclature was replaced by Hsc- FA bands (secondary constriction heterochromatin-associated fluorescence using acridine orange). / Dissertação importada do Alexandria

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-06-07T15:49:56Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 430787 bytes, checksum: 6ec48931712c3fcf85fd2aace6ba1913 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T15:49:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 430787 bytes, checksum: 6ec48931712c3fcf85fd2aace6ba1913 (MD5) Previous issue date: 2005-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo deste trabalho foi verificar o efeito de soluções homeopáticas sobre o crescimento, produção de princípios ativos e anatomia foliar de plantas Achillea millefolium L. (milfolhas). Os rizomas foram plantados em vasos mantidos sob telado. As características de crescimento avaliadas foram: altura, número de folhas, comprimento e largura da maior folha, comprimento e largura da menor folha, número de brotações massa fresca e seca da parte aérea e raiz. Foram caracterizadas as respostas morfológicas, o teor de tanino, teor de clorofila a e b, razão clorofila a/b e teor de flavonóides. A hipótese de patogenesia e de plantas sadias foi considerada no primeiro ensaio, mediante a aplicação de Sulphur 3CH, que exerceu influência no teor de tanino em função da época de aplicação. No segundo ensaio foram utilizados Natrum muriaticum, Kali carbonicum, Silicea, Sulphur 3CH e a testemunha (água). Os preparados homeopáticos exerceram efeito pouco expressivo nas variáveis de crescimento altura, número de folhas, comprimento e largura da menor folha, mas causaram acúmulo de matéria seca da parte aérea. O teor de tanino e clorofila a e b foram influenciados pelas homeopatias. O teor de flavonóides foi oscilatório de acordo com os preparados. Os descritores anatômicos foram: espessura da epiderme, área de parênquima paliçádico, de parênquima incolor, de colênquima e de feixes vasculares, além da área total da epiderme. A aplicação das soluções homeopáticas exerceu efeito na produção de metabólitos secundários, embora a organização anatômica não tenha sido alterada. / The objective of this work was to verify the effect of homeopathic solutions on the growth, production of active compounds and leaf anatomy of plants Achillea millefolium L. (milfolhas). The rhizomes were planted in pots maintained under greenhouse. The growth variables measured were: height, number of leaves, length and width of the largest leaf, length and width of the smallest leaf, number of sprouts, fresh mass and it evaporates of the aerial part and root. It was described the morphological traitis: tannin content, chlorophyll tenor the and b, ratio chlorophyll a/b and flavonoids contetnt. It was considered in the first trial hypothesis of patogenesia and earsal, Sulphur 3CH did influence tannin content as function of time treatment: Natrum muriaticum, Kali carbonicum, Silicea, Sulphur 3CH and control (water). The homeopathic solutions caused little effect or variables (growth height, number of leaves, length and width of the smallest leaf) but they caused dry matter accumulation of aerial part. The tannin content and chlorophyll the and b were influenced by the homeopathies. The flavonoids content was oscillatory in agreement with the solutions. The anatomical descriptors were: thickness of the epidermis, area of parenchym paliçádico, of colorless parenchym, of colenqym, of vascular bunches, besides the total area of the epidermis. The application of the solutions homeopathic exercised effect the production of secondary metabolitos, although the anatomical organization has not been altered.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-07T16:48:55Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 634888 bytes, checksum: 4ec638739a5f775dea9249079cadca45 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T16:48:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 634888 bytes, checksum: 4ec638739a5f775dea9249079cadca45 (MD5) Previous issue date: 2000-08-07 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Este trabalho teve como principais objetivos: 1) caracterizar os eventos idade à puberdade e maturidade sexual em novilhas compostas Montana Tropical (MT); 2) caracterizar as fases pré-puberal, puberal e maturidade sexual, por meio das concentrações plasmáticas de progesterona; 3) avaliar o desempenho ponderal em regime de pasto, com suplementação na seca; e 4) avaliar o desempenho reprodutivo em estação de monta de 72 dias. Foram utilizadas 226 novilhas, sendo 163 compostas MT, 24 1⁄2 sangue Red Angus, 16 1⁄2 sangue South Devon, 8 puras de raças Adaptadas e 15 da raça Nelore. A puberdade manifestou-se em média aos 426,11 dias de idade com peso corporal de 309,49 kg, não se constatando diferenças entre os grupos genéticos. Não foram observadas diferenças entre as novilhas estudadas, para idade e peso à maturidade sexual; o primeiro e o segundo ciclo estral consecutivos, subseqüentes à puberdade, apresentaram duração média, respectivamente, de 19,98 e 20,38 dias. Durante a fase pré-puberal, os valores médios para a progesterona (P4) foram de 1,16 ng/mL e os valores acima de 1 ng/mL, não- associados com a presença de corpo lúteo, indicaram atividade luteal. A manifestação de estro não foi constatada em 48 novilhas, das quais 15 da raça Nelore, 30 compostas MT e três Adaptadas, entretanto, nove apresentaram valores superiores a 1 ng/mL. Durante a fase puberal, as concentrações de P4 diferiram em função dos dias de coleta, dentro de cada grupo estudado, sendo explicada por um modelo curvilíneo quadrático, mostrando valores baixos e elevados no dia do estro e durante a fase luteal, respectivamente. O mês de nascimento influenciou os pesos corporais das fêmeas, traduzidos por respostas superiores (P<0,05) nas novilhas que nasceram mais cedo na estação de parição. O peso e o escore da condição corporal apresentaram um comportamento linear, em função dos meses do experimento (P<0,05). Foram observados efeitos do ganho de peso corporal sobre os grupos genéticos, somente nos meses de outubro e novembro (P<0,05). Constatou-se, após a primeira, a segunda e a terceira inseminação artificial (IA) taxas de prenhez de 47,79%; 14,16% e 4,86%, respectivamente; a taxa de prenhez e de concepção geral no rebanho foram 66,81% e 84,83%, respectivamente, enquanto o índice de concepção foi de 1,36 doses de sêmen por fêmea gestante. Esses resultados permitem afirmar que as novilhas de todos os grupamentos genéticos estudados manifestaram a puberdade precocemente, apresentando bons desempenhos ponderal reprodutivo, em condições de pastagens com suplementação nas secas. / This work had as main objectives to: 1) characterize the phases age at puberty and sexual maturity in Montana Tropical (MT) composite heifers; 2) characterize the pre pubertal, pubertal and sexual maturity phases by means of plasmatic concentrations of progesterone; 3) evaluate ponderal performance under pasture conditions with feed supplementation during the drought period and 4) evaluate the reproductive performance during a breeding season of 72 days. A total of 226 heifers were used, with 163 being MT composites, 24 Red Angus halfbreds, 16 South Devon halfbreds, 08 pure adapted breeds and 15 Nelore breeds. Puberty manifested itself on average at 426,11 d of age, and body weight of 309,49 kg, with no differences being found among the genetic groups. In addition, no differences were found among the heifers studied regarding age and weight at sexual maturity; the first and the second consecutive oestrous cycles following puberty presented an average duration of, respectively, 19,98 and 20,38 d. During the pre pubertal phase, the average values for progesterone xii(P4) were 1,16 ng/mL and values above 1 ng/mL, not associated with the presence of corpus luteum, indicated luteal activity. Oestrous manifestation was not detected in 48 heifers, out of which 15 were Nelore, 30 MT composites and 03 adapted. However, nine of them presented values higher than 1 ng/mL. During the puberal phase, P4 concentrations differed as a function of the collecting days, for each group studied, expressed by a quadratic curve model, showing low and high values on the oestrous day and during the luteal phase, respectively. The month of birth influenced female body weight, expressed by higher responses (P<0,05) for heifers born earlier during the calving season. Weight and body condition score presented a linear behavior as a function of the experimental months (P<0,05). Body weight gain effects on the genetic groups were observed only in the months of October and November (P<0,05). Pregnancy rates of 47,79; 14,16 and 4,86% were observed after the first, second and third artificial inseminations (IA), respectively; pregnancy and conception rates were 66,81 and 84,83%, respectively, while the conception index was of 1,36 doses of semen per pregnant female. These results allow us to affirm that heifers of all the genetic groups studied have manifested early puberty, presenting good ponderal and reproductive performances under pasture conditions with feed supplementation during drought.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-07T18:18:45Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1726245 bytes, checksum: 6b807f47eb4a34d92f3a8fca156aaf74 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T18:18:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1726245 bytes, checksum: 6b807f47eb4a34d92f3a8fca156aaf74 (MD5) Previous issue date: 2002-12-07 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O presente estudo objetivou avaliar o uso da matriz óssea desmineralizada (MOD) isoladamente ou associada à medula óssea (MO), como agente de união vertebral dorsolateral lombar, em 48 coelhos da raça Nova Zelândia Branca. Vinte e quatro animais receberam a MOD sobre os processos transversos de L 5 -L 6 , previamente descortificados. Outros vinte quatro constituíram o grupo que recebeu a MOD associada à MO na mesma localização e, em nove coelhos, grupo controle, foi realizado apenas a descortificação destes processos transversos. Oito animais de ambos os grupos tratados e três do grupo controle foram sacrificados às 5, 7 e 9 semanas após a cirurgia e submetidos a avaliações radiográfica, histológica e por palpação manual. O teste de resistência biomecânica foi realizado somente nos dois primeiros grupos. No grupo controle, nas diferentes avaliações, foi observado insignificante reação periosteal local. Dentre os que receberam somente a MOD, às 5 semanas, 37,5% dos animais apresentaram união à palpação, que estava presente em 50% nas semanas seguintes. As análises radiográficas demonstraram índice de união de 25% às 5 semanas, seguido por um índice de 100% de não-união às 7 semanas e 33,3% de união às 9 semanas. A avaliação histológica demonstrou predominantemente a fragmentação seguida pela reabsorção da MOD sendo esta substituída em quase sua totalidade por tecido conjuntivo fibroso. A formação óssea endocondral se deu a partir dos processos transversos descortificados. As evidências histológicas demonstraram que a MOD comportou-se como agente osteocondutor, com ação osteoindutora apenas na interface dos processos transversos com a MOD. O teste biomecânico demonstrou diferença significativa (p < 0,05), referente à força e resistência, entre os segmentos operados e os adjacentes. Com os resultados foi possível concluir que a matriz óssea homóloga desmineralizada serviu como arcabouço para a formação óssea. Contudo, o baixo índice de união tornou-a ineficaz na formação de uma união vertebral dorsolateral lombar estável. No grupo que recebeu a MOD associada à MO, às 5 semanas, 87,5% dos animais apresentaram união à palpação, seguido por 75 e 100 % às 7 e 9 semanas. As análises radiográficas demonstraram índice de união de 50% às 5 semanas, 62 % às 7 semanas e 75 % de união às 9 semanas. Na avaliação histológica, às 5 semanas havia características de osteintegração da MOD com o processos transversos, a matriz sendo penetrada por vasos sanguíneos e tecido cartilaginoso no centro do enxerto. Nas semanas seguintes a MOD foi sendo fragmentada e substituída por tecido cartilaginoso seguido por ossificação endocondral, que continuou a evoluir, sendo a MOD substituída em quase sua totalidade por tecido ósseo trabecular, formando uma ponte de osso maduro entre os processos transversos adjacentes. O teste biomecânico demonstrou diferença significativa (p < 0,05), referente à força e resistência, entre os segmentos operados e os adjacentes. Os resultados demonstraram que a matriz óssea homóloga desmineralizada associada à medula óssea autógena fresca determinou um tecido ósseo de união homogêneo em toda sua extensão, cuja vascularização originou-se nos processos transversos decortificados e na interface osso/enxerto a ossificação endocondral gradativamente substitui a matriz. Além da ação osteoindutora sobre as células tronco, a matriz foi responsável pela deposição óssea de forma organizada e restrita ao ambiente, atuando como arcabouço osteocondutor. Os trabalhos apresentados como parte integrante desta tese estão seguindo as normas da Revista Brasileira de Ortopedia, órgão de publicação científica da Sociedade Brasileira de Ortopedia e Traumatologia, que é uma publicação indexada ao Index Medicus Latino Americano (IMLA), Excepta Medica e Biologlent Abstract. IBICT: 0102-3616. / The present study evaluated the behavior of demineralized bone matrix (DBM) associated or not to autogenous bone marrow in the dorsolateral lumbar vertebral fusion in forty-eight New Zealand white rabbits. Twenty-four animals (group 1) received the DBM over the previously decorticated L 5 -L 6 transverses processes. Others twenty-four animals (group 2) received the association of DBM to autogenous bone marrow at the same site and nine rabbits, control group, only the decortication of the transverses processes was made. Eight animals from both treated groups and three animals from control group were killed at 5, 7 and 9 weeks after surgery and underwent to radiographic, microscopic, manual palpation. Only the treated groups were submitted to biomechanical evaluations. In the control group, in all evaluations made, it was observed only a minimum periosteal reaction without union. Among those who received only the DBM, at 5 weeks, the union rate on manual palpation was 37,5 %, followed by 50 % at next weeks. The radiographics analysis demonstrated a union rate of 25 % at 5 weeks; 100 % of nonunion, at 7 weeks and 33,3 % of union at 9 weeks. Microscopic evaluation, at 5 weeks, showed predominantly the fragmentation followed by DBM reabsorption that was substituted almost entirely by fibrous connective tissue. In the cases where the union was observed, the endocondral ixossification originated from decorticated transverses processes. Microscopic evidences demonstrated that DBM was osteoconductive but it was osteoconductive only in the interface transverse processes/DBM. The biomechanical test showed a significant difference (p < 0,05) referred to force and resistance between the operated and adjacent segments. The presented results allowed concluding that the DBM acts as a scaffold to bone formation. Although its osteoconductive action, the low union rate made the DBM ineffective in the dorsolateral lumbar vertebral union. In the group who received DBM associated to bone marrow, at 5 weeks, the union rate on manual palpation was 87,5 %, followed by 75 and 100 % at 7 and 9 weeks, respectively. The radiographics analysis demonstrated a fusion rate of 50 % at 5 weeks; 62 %, at 7 weeks and 75 % at 9 weeks. Microscopic evaluation, at 5 weeks, showed incorporation between DBM and the transverses processes, site where the majority of the blood vessels came from toward the graft. It was observed the presence of cartilaginous tissue in the graft center. In the follows weeks the endocondral ossification continues and the DBM was almost entirely substituted by trabecular bone tissue, forming a mature bone bridge between and over the adjacent transverses processes. The biomechanical test showed a significant difference (p < 0,05) referred to force and resistance between the operated and adjacent segments. The results demonstrated the formation of a homogeneous fusion mass in all graft extension. The vascularization came from the decorticated transverses processes and, the interface bone/graft endocondral ossification gradually substituted the matrix. Besides the osteoinductive actions over the stem cells, the matrix is responsible from the organized and restricted bone deposition to local environment, acting as osteoconductive scaffold. The results permitted to conclude that the association of these compounds may be used with success as a promoter agent of posterolateral lumbar spinal fusion.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-07T19:38:54Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 633033 bytes, checksum: c748f1b0f141a1d3290f72efa2a8a458 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T19:38:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 633033 bytes, checksum: c748f1b0f141a1d3290f72efa2a8a458 (MD5) Previous issue date: 2002-02-07 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Com o objetivo de avaliar a utilização da técnica da imunoperoxidase como método auxiliar para a detecção de Mycoplasma hyopneumoniae em pulmão de suínos naturalmente infectados, foram colhidos 80 fragmentos de pulmão, sendo 40 de animais provenientes de granjas consideradas negativas e 40 de granjas com diagnóstico positivo para pneumonia enzoótica. Os resultados obtidos com a utilização de soro policlonal específico (IgG de coelho anti- M. hyopneumoniae) demonstraram uma correlação positiva de 77% entre os diagnósticos microscópicos e imunohistoquímicos, enquanto a correlação entre os diagnósticos macroscópicos e imunohistoquímicos foi inferior, equivalendo a 49%. Nas granjas negativas observou-se a presença de discreta imunorreação em 22,5% dos casos, o que poderia indicar a existência de reação cruzada com outros microrganismos. Já nas granjas com diagnóstico positivo para pneumonia enzoótica, a técnica da Peroxidase-anti- Peroxidase (PAP) revelou diferentes graus de intensidade de imunomarcação, variando de discreto até espesso depósito amarronzado no epitélio ou na luz das vias aéreas, ou ainda no interior de macrófagos, com uma relação direta entre a intensidade das lesões morfológicas e da imunomarcação. Verificou-se ainda que a técnica imunohistoquímica possui sensibilidade de 95% e especificidade de 77,5%, podendo a mesma ser recomendada como ferramenta auxiliar, rápida e de baixo custo, para o diagnóstico da pneumonia enzoótica suína em laboratórios de rotina em histopatologia. / The aim of this work is to evaluate the use of the imunoperoxidase technique as a supporting method for the detection of the Mycoplasma hyopneumoniae in the lungs of naturally infected swine. For this purpose, 80 lung fragments were collected - 40 of animals from pig farms considered to be "negative" and 40 of animals from pig farms with positive diagnosis of enzootic pneumonia. The results obtained with the use of specific policlonal serum (rabbit anti M. hyopneumoniae IgG) show a positive correlation at the rate of 77% between the microscopical and imunohistochemical diagnoses, whereas correlation between macroscopical and immunohistochemical diagnoses occured at the lower rate of 49%. In the "negative" farms, discrete immunereaction was observed in 22.5% of cases, which could point to cross reaction with other microorganisms. In the other hand, in the farms with positive diagnosis for enzootic pneumonia, the peroxidase-anti-peroxidase technique (PAP) showed different grades of intensity of immunomarking. It was also observed that the immunohistochemical technique has 95% sensitivity and 77.5% specificity. This would enable this technique to be a recommendable fast and cost-effective supporting tool for the diagnosis of enzootic pneumonia in routine laboratories Histopathology.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-07T19:51:19Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2564154 bytes, checksum: ee2fe00d1c7a56d422a883011419d135 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T19:51:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2564154 bytes, checksum: ee2fe00d1c7a56d422a883011419d135 (MD5) Previous issue date: 2002-09-09 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Foram isoladas células endoteliais de veia umbilical bovina (BUVECs) com a finalidade de determinar a expressão de moléculas de adesão como ICAM-1, VCAM, PECAM-1, E-selectina e trombospondina na fisiopatologia de B. bovis num estudo in vitro. Posteriormente esta expressão foi confirmada, num estudo in situ, em tecidos (cérebro, pulmão e rim) de animais que morreram após inoculação com amostra patogênica de Babesia bovis (BbovUFV1 7 a passagem). Eritrócitos dos animais infectados foram testados quanto à capacidade de aderir em BUVECs determinando a cinética de adesão. Os mesmos testes de adesão foram realizados em BUVECs estimuladas com plasma de animais infectados com B. bovis e sobrenadante de cultura de PBMC bovino estimulado com peptídeo sintético proveniente da RAP-1 de B. bovis contendo citocinas quantificadas (IFN-γ, TNF-α e IL-12). Houve aumento significativo na adesão de eritrócitos de animais inoculados em BUVECs estimuladas com plasma e sobrenadante de PBMC. Entretanto, adesão foi observada somente para eritrócitos não parasitados, sugerindo que antígenos livres de B. bovis no soro marcam eritrócitos não parasitados, ou ainda uma possível expressão de uma isoforma de VESA-1 não aderente. Aderência não foi observada nos testes com amostras dos animais negativos. As células estimuladas com plasma de animais infectados e com sobrenadante de PBMC mostraram imunomarcação positiva muito mais intensa de ICAM-1, VCAM, PECAM-1, E-selectina e trombospondina que as células que não receberam estímulo. Igualmente no estudo in situ foi observado aumento na expressão de ICAM- 1, VCAM, PECAM-1, E-selectina e trombospondina em tecidos como cérebro, pulmão e rim dos bovinos infectados com B. bovis em comparação ao grupo controle. Estes resultados sugerem que as interleucinas, liberadas na fase aguda da babesiose, estimulam a expressão das moléculas de adesão relacionadas à fisiopatologia da babesiose causada por B. bovis, fato demonstrado in vitro pela expressão das moléculas em BUVECs e a citoaderência de eritrócitos. Estes achados demonstram similaridades na fisiopatologia de B. bovis e do Plasmodium falciparum. / Endothelial cells from bovine umbilical vein (BUVECs) were isolated with the purpose of determining the expression of ICAM-1, VCAM, PECAM- 1, E-selectin and thrombospondin in the physiopathology of Babesiosis caused by B. bovis. Later, this expression was confirmed by in situ study, using tissue samples (brain, lung and kidney) of animals that died after inoculation with a pathogenic strain of B. bovis (BbovUFV1 7th passage). Erythrocytes of infected animals were tested in order to observer capacity of binding to BUVECs and its adhesion kinetics. The same adhesion tests were made on BUVECs stimulated with plasma of animals infected with B. bovis and culture supernatant of bovine PBMC, stimulated with the synthetic peptide RAP-1 of B. bovis containing quantified cytokines (IFN-γ, TNF-α and IL-12). There was a significant increase in the adhesion of erythrocytes of animals inoculated in BUVECs stimulated with plasma and supernatant of PBMC. However, adhesion was observed only on non-parasitised erythrocytes, suggesting that free antigens of B. bovis in the serum can prime erythrocytes non-parasitised, or still a possible expression of an isoform of VESA-1 non adherent. Adherence was not observed in the tests with samples of the negative animals. Cells stimulated with infected animals xiiiplasma and with supernatant of PBMC showed stronger expression of ICAM- 1, VCAM, PECAM-1, E-selectine and thrombospondin, them cells that didn't receive stimuli. In the same way, it was observed strong expression of ICAM- 1, VCAM, PECAM-1, E-selectine and thrombospondin in tissue samples of brain, lung and kidney in bovines infected with B. bovis, when comparing to the control group. These results suggest that Interleukins, liberated in the acute phase the Babesiosis, stimulate the expression of adhesion molecules related to the physiopathology of Babesiosis caused by B. bovis, as demonstrated by the expression of molecules in BUVECs and erythrocytes cytoadhesion. These date demonstrate physiopathologycal similarities between B. bovis and Plasmodium falciparum.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-08T17:53:40Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 813997 bytes, checksum: 0903aab3693f5e8e4c8dfbc15a001d07 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-08T17:53:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 813997 bytes, checksum: 0903aab3693f5e8e4c8dfbc15a001d07 (MD5) Previous issue date: 2007-12-20 / O objetivo deste trabalho foi avaliar a ocorrência de efeitos colaterais ocasionados pela monofenilbutazona nos tratos digestório e renal de pôneis, assim como verificar a relação do omeprazol com a inibição da formação de úlceras gástricas. O experimento foi executado em duas etapas. Na primeira foram utilizados seis pôneis hígidos, sendo três deles tratados diariamente por via intravenosa (IV) com as doses de 3, 4,5 ou 6 mg kg -1 de monofenilbutazona durante 12 dias. Os demais, além do antiinflamatório também receberam 3 mg kg -1 de omeprazol. Já na segunda etapa foram incluídos quatro pôneis, sendo dois tratados com doses diárias de 4,5 mg kg -1 de monofenilbutazona durante 12 dias, e os demais com 5 mL de NaCl a 0,9 %, por via IV. Todos os pôneis foram submetidos à endoscopia antes e após cada etapa experimental. Adicionalmente, na primeira etapa foram realizadas urinálise e determinação dos valores de variáveis sangüíneas (volume globular, leucócitos totais, proteínas plasmáticas totais) e séricas (uréia e creatinina, aspartato aminotransferase, Ca +2 , P +3 , Cl - , Na + e K + ) antes, durante e após experimento. Na primeira etapa apenas os dois pôneis tratados com 6 mg kg -1 de monofenilbutazona apresentaram úlceras na região aglandular, ao longo da margo plicatus, sendo mais grave no animal que não recebeu omeprazol. Na segunda etapa dois animais também apresentaram úlceras gástricas sendo que, um deles, havia recebido apenas solução fisiológica. Análise estatística demonstrou que a ocorrência das úlceras não foi influenciada (P>0,05) pela administração e dose da monofenilbutazona, nem pela presença do omeprazol. O efeito da monofenilbutazona sobre as variáveis sangüíneas e séricas foi pequeno ou inexpressivo. Os resultados obtidos permitem concluir que: o aparecimento de úlcera gástrica na região aglandular de pôneis não sofre a influência da aplicação e da dose de monofenilbutazona, quando administrada durante 12 dias; úlceras vina região aglandular de pôneis não se acompanham de sintomatologia clínica; pôneis toleram a aplicação de 6 mg kg -1 de monofenilbutazona durante 12 dias sem o aparecimento de lesão renal; o efeito da monofenilbutazona sobre variáveis sangüíneas e séricas é pequeno ou ausente, pois em geral as mesmas se mantêm dentro dos valores considerados como de referência para a espécie; não foi comprovada a relação do omeprazol com a presença ou ausência de úlcera. Palavras-chave: antiinflamatórios não esteroidais, eqüinos, úlceras gástricas, lesão renal, omeprazol. / This work aimed to evaluate the occurrence of side effects caused by monophenylbutazone on the digestive and kidney tract of ponies, and to verify the relation between omeprazole with inhibition of the formation of gastric ulcers. The experiment was carried out in two phases. In the first, six normal ponies were used, with three being treated daily via intravenous (IV) monophenylbutazone doses of 3, 4.5 or 6 mg kg -1 during 12 days. The other ponies were also given 3 mg kg -1 of omeprazole, besides the anti- inflamatory drug. In the second phase, four ponies were included, with two being treated with daily doses of 4.5 mg kg -1 of monophenylbutazone during 12 days, and the remainder with 5 mL of NaCl at 0.9 %, via the IV route. All ponies were submitted to endoscopy before and after each experimental phase. Additionally, in the first phase, urine analysis and determination of blood (globular volume, total leucocytes, total plasma proteins) and serum (urea and creatinine, aspartate aminotransferase, Ca +2 , P +3 , Cl - , Na + and K + ) variable values were performed before, during and after the experiment. In the first phase, only the two ponies treated with 6 mg kg -1 of monophenylbutazone presented ulcers in the aglandular region, along the margo plicatus, being more serious in the animal not given omeprazole. In the second phase, two animals also presented gastric ulcers, with one having received only the physiological solution. Statistical analysis showed that the appearance of ulcers was not influenced (P>0.05) by administration and dose of monophenylbutazone, nor by the presence of omeprazole. The effect of the former on the blood and serum variables was small or inexpressive. The results obtained allowed to conclude that the occurrence of gastric ulcer in the aglandular region of ponies was not influenced by application and dose of monophenylbutazone when administered during 12 days; ulcers in the aglandular region of ponies do not present clinical symptomatology; viiiponies tolerate the application of 6 mg kg -1 of monophenylbutazone during 12 days without the appearance of kidney lesion; the effect of monophenylbutazone on the blood and serum variables is small or absent, since, in general, such variables are kept within values considered as reference for the species; the relation of omeprazole with the presence or absence of ulcer was not confirmed. Keywords: nonsteroidal anti- inflammatory drugs, equine, gastric ulcers, kidney lesion, omeprazole.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-12T11:34:55Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 14683 bytes, checksum: 031a660f530792989291494b96b6dc49 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-12T11:34:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 14683 bytes, checksum: 031a660f530792989291494b96b6dc49 (MD5) Previous issue date: 2001-08-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Este trabalho teve por objetivo definir os parâmetros para a obtenção e regeneração de protoplastos de Crinipellis perniciosa. O melhor estabilizador osmótico para a liberação de protoplastos foi KCl 0.8M em tampão fosfato 10 mM, pH 5.8, contendo 20 mg.mL -1 da enzima lítica Glucanex e 10 mg.mL -1 de BSA, após 1 a 2 horas de digestão enzimática do micélio. Os protoplastos foram liberados nestas condições, na ordem de 2,0 x 10 7 por mL de estabilizador osmótico, a partir de 300mg de micélio secundário de C. perniciosa crescido em meio BDA. A melhor freqüência de regeneração obtida foi de 2,0% quando sacarose 0,5M foi utilizada como estabilizador osmótico. A coloração de núcleos dos protoplastos revelou que 58,8% dos protoplastos eram anucleados, 37,5% uninucleados e 3,7% binucleados. Uma análise genética por RAPD de C. perniciosa e das colônias regeneradas a partir de protoplastos não revelou polimorfismos entre elas, embora diferenças, como crescimento lento e aspecto morfológico do micélio de algumas colônias tenham sido observadas. O micélio do isolado de C. perniciosa, bem como das colônias regeneradas a partir de protoplastos, são dicarióticas e apresentam grampos de conexão. / The conditions for the production and regeneration of protoplasts from the fungus Crinipellis perniciosa were studied. The highest release of protoplasts was obtained with 0.8 M KCl in phosphate buffer, pH 5.8, as an osmotic stabilizer; 20 mg.mL -1 of the lytic enzyme Glucanex; 10 mg.mL -1 of BSA and 1 to 2 hours of enzymatic digestion. Under these conditions, about 2.0 x 10 7 prtoplast.mL -1 were released from the secondary mycelium of C. perniciosa grown in BDA. The best regeneration frequency was achieved when 0.5M sucrose was used as an osmotic stabilizer. Nuclear Giensa staining revealed that 58,8% of the protoplasts were anucleate, 37,5% uninucleate, and 3,7% binucleate. Although differences in colony growth and mycelial aspect had been observed, RAPD analysis of colonies regenerate form protoplasts did not reveal any genetic polymorphism. The mycelium of C. perniciosa as well as those from colonies regenerate from protoplasts were dikaryotic and possessed clamp connections.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-12T12:02:35Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 14000 bytes, checksum: ebd4fe85d7e24a2a3f9b533f85bb2296 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-12T12:02:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 14000 bytes, checksum: ebd4fe85d7e24a2a3f9b533f85bb2296 (MD5) Previous issue date: 2001-07-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Os protocolos de esterilização superficial e de isolamento de bactérias endofíticas foram estabelecidos para frutos e caules de café arábica. Um isolado bacteriano produtor de pectina liase extracelular foi fisiologicamente e fenotipicamente caracterizado. A incidência de microbiota epifítica e endofítica foi constatada em amostras de frutos de café arábica oriundas de diferentes localidades. Bactérias, leveduras e fungos filamentosos foram isolados, sendo em Viçosa 1.042 isolados epifíticos e 282 potencialmente endofíticos, em Serra do Salitre 71 isolados epifíticos e 28 potencialmente endofíticos e em Patrocínio 85 isolados epifíticos e 33 potencialmente endofíticos. As bactérias foram isoladas em maior número, sendo que os bastonetes predominaram sobre os cocos e, dentre os bastonetes, as bactérias Gram negativas. A colonização de explantes de Coffea arabica L. por bactérias endofíticas foi demonstrada in situ pela técnica de imunofluorescência e comprovada pela recuperação das bactérias após sua reintrodução. Cinco isolados de bactérias endofíticas promoveram o crescimento de explantes de Coffea arabica e Coffea canephora, indicando que a sua interação não é espécie-específica. / Endophytic bacteria isolation and superficial sterilization protocols were established for fruit and stem of Arabica coffee. An extracellular pectin lyase producing bacterium was physiologically and phenotypically characterized. The epiphytic and endophytic microbiota was detected from different coffee fruits samples: 1.042 epiphytic and 282 potentially endophytic isolates from Viçosa, 71 epiphytic and 28 potentially endophytic isolates from Serra do Salitre, and 85 epiphytic and 33 potentially endophytic isolates from Patrocínio. The number of bacteria isolates was higher than yeasts or molds, and Gram negative rods were predominant. The endophytic colonization of Coffea arabica L. seedlings was observed in situ by inmunofluorescence technique and the bacteria were recovered upon seedling reintroduction. Five endophytic bacteria isolates showed plant growth-promotion in both Coffea arabica and Coffea canephora, indicating a non species-specific interaction.