O pé torto congênito idiopático é a deformidade congênita de maior prevalência na ortopedia. Estudos da locomoção podem favorecer condutas na reabilitação de crianças com tal disfunção. Neste trabalho foram analisados parâmetros biomecânicos da marcha e do salto vertical com contra-movimento, além do estudo do limiar de percepção plantar de crianças com pé torto congênito, tratadas cirurgicamente. Para análise dos resultados, foram utilizados testes estatísticos não paramétricos. Não foram identificadas alterações na sensibilidade plantar. Apesar da semelhança das curvas médias de força, variação angular e eletromiografia, as variáveis biomecânicas mostraram diferenças. Na marcha, as crianças com pé torto mostraram maior taxa de crescimento para o primeiro pico da força vertical; no apoio médio, maiores flexão do joelho e dorsiflexão do tornozelo, e menor força vertical; na fase de propulsão, menores força ântero-posterior, segundo pico da força vertical e flexão plantar. Enquanto que as mesmas crianças mostraram na fase de preparação do salto vertical, menor dorsiflexão; na impulsão, maior flexão do joelho e menores flexão plantar, força vertical e atividade do músculo gastrocnêmio medial; e na aterrissagem, maior taxa de crescimento da força vertical, menor flexão plantar e maior flexão do joelho. O entendimento de como o sistema locomotor opera durante as atividades analisadas pode contribuir para direcionamentos relacionados com os estímulos adequados de atividades físicas para essas crianças / Idiopathic clubfoot is the most prevalent congenital deformity in orthopedics. Locomotion studies in children with such a deformity can help towards better rehabilitation. The aim of this study was to analyze the gait and countermovement jump biomechanics, and to describe the perception threshold in children with congenital clubfoot who have been surgically treated. For data analysis, non-parametric statistical tests were applied. Changes in plantar sensitivity were not found. Despite similar force, kinematics, and electromyography curves along groups, it was found differences for some biomechanical variables. For gait, children with clubfoot showed higher vertical force increase to the first peak. At midstance, they showed higher knee flexion and ankle dorsiflexion, and lower vertical force. At toe off, they presented lower anterior-posterior force, second vertical force peak, and plantar flexion. For jump, during the preparation phase, they presented smaller dorsiflexion; during propulsion, they showed larger knee flexion and smaller plantar flexion, vertical force and m medial gastrocnemius activity. In landing, there was a higher vertical force growth rate, less plantar flexion, and larger knee flexion. The understanding of how the locomotion system work contributes to choose the best stimuli to be applied during physical activity for those children

O hipotireoidismo congênito, uma das alterações do metabolismo detectadas por meio da triagem neonatal, pode acarretar alterações no desenvolvimento global do indivíduo. O objetivo deste estudo foi traçar o perfil das habilidades do desenvolvimento em crianças com hipotireoidismo congênito e verificar possíveis influências dos dados da história clínica no perfil traçado. Foram avaliadas, por meio da Early Language Milestone Scale e do Inventário Portage Operacionalizado, 35 crianças (23 do gênero feminino e 12 do masculino) com hipotireoidismo congênito detectado pela triagem neonatal. As crianças pertenciam à faixa etária de 2 a 36 meses e realizavam tratamento com reposição hormonal há pelo menos um mês. Os dados da história clínica foram obtidos por meio de entrevista com os responsáveis legais pelas crianças e análise de prontuário. Na avaliação por meio da Early Language Milestone Scale, 11 crianças apresentaram desempenho alterado na função auditiva expressiva, 2 na função visual e 1 na função auditiva receptiva. Na avaliação por meio do Inventário Portage Operacionalizado, 7 crianças apresentaram desempenho alterado na área da linguagem, 5 na área cognitiva, 4 nas áreas motora e social e 3 na área de autocuidados. Não foram observadas influências dos dados da história clínica no resultado obtido. Concluiu-se que a maioria das crianças avaliadas neste estudo apresentou desempenho adequado para as habilidades avaliadas. Paras as crianças com desempenho alterado, observou-se maior déficit na área de linguagem, principalmente no que diz respeito aos aspectos expressivos e na área cognitiva. Não ficou provada a influência dos dados da história clínica no perfil traçado para as habilidades do desenvolvimento. Entretanto, observou-se tendência para desempenho adequado nas habilidades avaliadas entre as crianças que realizaram a triagem neonatal, receberam o diagnóstico e iniciaram o tratamento para o hipotireoidismo congênito mais precocemente e que receberam dosagem de levotiroxina mais elevada no início do tratamento. / The congenital hypothyroidism, one of the metabolism alterations detected through the neonatal screening, may cause alterations in the individual\'s global development. The objective of this study was to draw the profile of the development skills in children with congenital hypothyroidism and verify possible influences of the clinical history data in the drawn profile. It had assessed, through Early Languagem Milestone Scale and Inventário Portage Operacionalizado, 35 children (23 of the feminine gender and 12 of the masculine) with congenital hypothyroidism detected by the neonatal screening. The children belonged to the age group from 2 to 36 months and accomplished treatment with hormonal replacement for at least one month. The clinical history data were obtained through interview with the legal responsible for the children and handbooks analysis. In assessement through Early Languagem Milestone Scale, 11 children presented altered performance in auditory expressive function, 2 in visual function and 1 in auditory receptive function. In assessement through the Inventário Portage Operacionalizado, 7 children presented altered performance in the language area, 5 in cognitive area, 4 in motor and social areas and 3 in self-care area. Influences of the clinical history data were not observed in the obtained result. It was concluded that most of the assessed children in this study presented adequate performance for the evaluated skills. For the children with altered performance, larger deficit was observed in language area, mainly in expressive aspects and cognitive area. The influence of the clinical history data was not proven in the profile drawn for the development skills. However, tendency for appropriate performance in the assessed skills was observed among the children that accomplished the neonatal screening, received the diagnosis and began the treatment for the congenital hypothyroidism earlier and that received higher dose of thyroxine in the beginning of the treatment.

INTRODUÇÃO: O hipotireoidismo congênito (HC) é uma doença, de acometimento neonatal, caracterizada por diminuição nos níveis de hormônios tireoidianos. As causas mais comuns de HC primário permanente são as alterações no desenvolvimento da glândula tireóide (disgenesia) e os defeitos de síntese dos hormônios tireóideos (disormonogênese). A determinação da etiologia do HC tem papel importante na determinação da gravidade da doença, evolução e tratamento. Essa investigação é feita através de exames como ultrassonografia e cintilografia (CINT) da tireóide. Além disso, com o conhecimento do genoma humano, diversas mutações foram descritas, sendo a investigação molecular importante para a determinação da etiologia da doença. OBJETIVOS: 1. Determinar o diagnóstico etiológico dos pacientes com HC a partir de dosagens hormonais, tireoglobulina e exames de imagem; 2. Estabelecer a importância do uso da ultrassonografia com Doppler colorido (USDC) no diagnóstico etiológico; 3. Estabelecer a importância do uso do teste do perclorato de sódio intravenoso (PSIV) no diagnóstico diferencial de HC por disormonogênese; 4. Estudar os genes PAX8 e receptor do TSH (TSHR) em pacientes com HC causado por disgenesia tireoidiana MÉTODOS: Avaliamos 40 pacientes acompanhados na APAE - São Caetano com diagnóstico de HC primário e permanente acima de 3 anos de idade. Os pacientes realizaram dosagens de T3, T4, T4 livre, TSH, tireoglobulina (TG) e anticorpo anti-TG pelo método imunofluorimétrico, além de USDC e CINT. Os pacientes com suspeita de disormonogênese foram submetidos ao teste PSIV e avaliação com otorrinolaringologista e audiometria tonal, se necessário. Os pacientes que apresentavam disgenesia tireoidiana tiveram o DNA extraído a partir de leucócitos periféricos para o estudo dos genes PAX8 e TSHR através de PCR e sequenciamento automático. RESULTADOS: Avaliamos 28 pacientes do sexo feminino e 12 do sexo masculino, após suspensão do tratamento com levotiroxina por 4 semanas. A idade média foi de 6,5 anos. O TSH médio foi 129,9 UI/mL (normal: 0,7-6,0). Os valores de T3, T4 e T4 livre variaram de 14 217 ng/dL (normal: 105-269), <1,6 15,8 g/dL (normal: 1,5-15) e < 0,3 2,7 ng/dL (normal: 0,7-1,5), respectivamente. A TG variou de <1 287 ng/dL (normal: 1,7-35). A USDC mostrou 21 pacientes com tireóide tópica (53%), 8 pacientes com tireóide ectópica (20%) e 11 pacientes com atireose (27%). Na CINT, o mapeamento identificou tireóide tópica em 20 pacientes (51%), tireóide ectópica em 13 pacientes (32%), e atireose em 7 pacientes (17%). A captação mostrou-se aumentada em 2 horas em 10 pacientes. O teste PSIV foi realizado em 9 pacientes com bócio ou glândula de tamanho normal ao USDC, cuja captação foi aumentada. Apenas um paciente apresentou vômito ao início do teste. Seis pacientes apresentaram teste positivo, considerando uma queda maior que 20%. Nenhum desses pacientes apresentava surdez neurossensorial. Encontramos discrepância entre USDC e CINT em 9 pacientes, principalmente nos casos de ectopia. A dosagem de TG auxiliou na confirmação de atireose. Os níveis mais altos de TG encontrados foram nos casos de disormonogênese causados por defeito na organificação. Assim, determinamos o diagnóstico de ectopia em 32,5% dos pacientes, hipoplasia em 20%, defeito na organificação (defeito de TPO ou THOX2) em 17,5%, atireose em 15%, defeito na TG em 7,5% e 3 casos a esclarecer (7,5%). Vinte e sete pacientes foram diagnosticados como portadores de disgenesia tireoidiana e não apresentaram mutações nos genes PAX8 e TSHR. CONCLUSÃO: Estabelecemos o diagnóstico etiológico em 37 dos 40 pacientes estudados. A USDC mostrou-se importante no diagnóstico etiológico do HC, especialmente associada à dosagem de TG. O teste PSIV mostrou-se seguro no diagnóstico diferencial do HC por disormonogênese. Não identificamos nenhuma mutação nos genes PAX8 e TSHR nos casos estudados de disgenesia / INTRODUCTION: Congenital hypothyroidism (CH) is a disease at neonatal period characterized by low thyroid hormones levels. Most common causes of primary CH are alterations at thyroid gland development (dysgenesis) and thyroid hormone synthesis defects (dyshormonogenesis). The establishment of CH etiology has important role to define the severity, evolution and treatment of the disease. This investigation is based on thyroid ultrasound and radiouptake and radionuclide imaging (RAIU). With human genome knowledge, several mutations were described, becoming molecular investigation so important to etiology definition. OBJECTIVES: 1. Establish the etiologic diagnosis of CH patients using hormonal measurements, thyroglobulin and imaging exams. 2. Establish the importance of color Doppler ultrasound (CDUS) in etiologic diagnosis. 3. Establish the importance of intravenous perchlorate sodium test in differential diagnosis of CH due to dyshormonogenesis. 4. Study PAX8 and TSH receptor (TSHR) genes in patients with CH due to thyroid dysgenesis. METHODS: We evaluated forty patients followed-up at APAE - São Caetano with primary and permanent CH diagnosis above 3 years-old. Patients performed T3, T4, free T4, TSH, thyroglobulin (TG) and anti-TG antibody using immunofluorimetric assays, besides thyroid CDUS and RAIU. Patients with thyroid dysgenesis had their DNA extracted from peripheral leukocytes to study PAX8 and TSHR genes using PCR and automatic sequencing. Patients with dyshormonogenesis suspected were submitted to intravenous perchlorate sodium test and otorhinolaryngologist and tonal audiometric evaluation, if necessary. RESULTS: We evaluated 28 female and 12 male after levothyroxine treatment off for 4 weeks. Mean age of studied patients was 6.5 years-old. Mean TSH was 129.9 UI/mL (normal: 0.7-6.0). T3, T4 and freeT4 ranged from 14 217 ng/dL (normal 105-269) , <1.6 15.8 g/dL (normal: 1.5- 15) and < 0.3 2.7 ng/dL (normal: 0.7-1.5) respectively. TG level ranged from < 1 287 ng/dL (normal 1.7-35). CDUS showed normally located thyroid in 21 patients (53%), ectopy in 8 patients (20%), and athyrosis in 11 patients (27%). At RAIU, thyroid scan identified normal located gland in 20 patients (51%), ectopy in 13 patients (32%) e athyrosis in 7 patients (17%). Two-hours uptake was elevated in ten patients. Intravenous perchlorate sodium test was performed in 9 patients with goiter or normal volume at CDUS, with normal or elevated uptake. Only one patient presented vomit. Six patients had positive test, considering more than 20% of decline. None from these patients had neurosensorial deafness. We found discrepancy between CDUS and RAIU in 9 patients, especially in ectopic cases. Thyroglobulin measurement helped to confirm athyrosis. Highest TG levels were found in dyshormonogenesis patients due to organification defects. Therefore we determined etiologic diagnosis of ectopic gland in 32,5% of patients, hypoplasia in 20%, organification defect (TPO or THOX2 defects) in 17,5%, athyrosis in 15%, thyroglobulin defect in 7,5% and three cases were undefined (7,5%). Twenty seven patients were diagnosed with thyroid dysgenesis and had no mutation in PAX8 and TSHR genes. CONCLUSION: We established the etiologic diagnosis in 37 from 40 patients here studied. CDUS was useful on etiologic diagnosis of CH, especially associated to thyroglobulin level. Intravenous perchlorate sodium test was safe and efficient in CH differential diagnosis of dyshormonogenesis. We identified no mutation in PAX8 and TSHR genes in dysgenesis cases

Made available in DSpace on 2011-03-23T21:19:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Item created via OAI harvest from source: http://www.bdtd.ufpa.br/tde_oai/oai2.php on 2011-03-23T21:19:42Z (GMT). Item's OAI Record identifier: oai:bdtd.ufpa.br:323 / Chronic diseases which require attention and continuous evaluations and have called for attention ofhealth professionals, specially those who devote themselves to the area ofPediatric Psychology, who devote themselves to the study of child development, as well as to the relationship between health and sickness and the interferences in the life quality of children and their relatives. This study aims accomplishing a descriptive study to identify variables making easier or more difficult, the adherence to the treatment of caregivers of children with Congenital Hypothyroidism, attended by the Center of Reference in Pará State. Fifty main caregivers ranging between 17 to 55 years of age. Forty mothers, four grandmothers, four fathers and two aunts took part in this study. Variables related to the adherence were identified by means of structured interviews. Program characteristics were analyzed through structured interviews carried out by the team professionals. The analyses of caregivers reports showed that some of the demands to the treatment adherence are not being supplied. Informations about the illness characteristics, etiology, diagnostics, treatment and prognostics are not part of the repertory of most caregivers, independently of age, school degree, degree of relationship with reiatives and time of participation in the Neonatal Selection Programo Significant differences were found regarding the adequate time for the exam accomplishment, which showed the delay of the treatment start. The difficulties described by the professionals as to the adherence to the treatment by the caregivers were attributed not only to the problems showed by the Program structure itselfbut also by the lack of interest to it. The study brings relevant implications to the implantation of more effective and efficacious prevention programs to attend the needs of caregivers and promote the adequate child development. / As doenças crônicas requerem atenção e avaliações continuas e têm despertado a atenção de profissionais da área da saúde, especialmente aqueles que se dedicam à Psicologia Pediátrica, campo de aplicação que se dedica ao estudo do desenvolvimento da criança, bem como das relações entre saúde e doença e as interferências na qualidade de vida da criança e de seus familiares. Esta pesquisa teve como objetivo principal realizar um estudo descritivo, a fim de identificar variáveis que estivessem facilitando ou dificultando a adesão ao tratamento por cuidadores de crianças com Hipotireoidismo Congênito atendidas em um centro de referência no Estado do Pará. Participaram deste estudo 50 cuidadores principais, com idade entre 17 a 55 anos, com diferentes graus de parentesco com a criança. As variáveis relacionadas à adesão foram identificadas por meio de entrevistas estruturadas com os cuidadores. Características do Programa foram analisadas por meio de entrevistas realizadas com os profissionais da equipe. A análise dos relatos dos cuidadores mostrou que algumas exigências para a adesão ao tratamento não estão sendo fornecidas. Informações sobre características da doença, etiologia, diagnóstico, tratamento e prognóstico não fazem parte do repertório da maioria dos cuidadores, independente da idade, escolaridade, grau de parentesco e tempo em que a criança está no Programa de Triagem Neonatal. Diferenças significativas foram encontradas quanto ao tempo adequado para a realização do exame, o que demonstrou atraso no inicio do tratamento, As dificuldades descritas pelos profissionais quanto à adesão ao tratamento pelo cuidador foram atribuídas tanto a problemas apresentados pela própria estrutura do Programa como por falta de interesse do cuidador. O estudo traz implicações relevantes para a implantação de programas de prevenção mais efetivos e eficazes que atendam os cuidadores e promovam o adequado desenvolvimento da criança.

Os hormônios tiroxina (T4) e triiodotironina (T3) apresentam especial importância para o desenvolvimento e crescimento normal. A deficiente produção destes hormônios ao nascimento leva ao hipotireoidismo congênito (HC), caracterizado por severo retardo mental devido ao atraso no desenvolvimento do Sistema Nervoso Central. Crianças com HC devem iniciar o tratamento com tiroxina assim que o diagnóstico for confirmado. O rastreamento neonatal, portanto, é fundamental para detecção precoce desta doença metabólica que ocorre em cerca de 1 a cada 3.500 a 4.000 nascidos vivos. O estresse oxidativo é resultado do desequilíbrio entre a formação de compostos oxidantes e defesas antioxidantes do organismo levando ao dano potencial. Estudos prévios com modelos animais de hipotireoidismo mostraram uma alteração do status antioxidante cerebral associado ao aumento do estresse oxidativo. Considerando que estudos realizados em humanos adultos revelaram envolvimento de radicais livres com a patogênese do hipotireodismo, o objetivo deste estudo foi avaliar o estresse oxidativo em neonatos com hipotireoidismo congênito primário no momento do diagnóstico e ao longo do tratamento com tiroxina (10-15 μg/Kg/d). Para tanto, foram avaliados os níveis de malondialdeído (MDA) e a reatividade antioxidante total (TAR) em plasma, bem como a medida da atividade das enzimas antioxidantes catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GSH-Px) nos eritrócitos de neonatos portadores de HC. Foi observado um aumento significativo dos níveis de MDA bem como uma redução da TAR em neonatos portadores de HC quando comparados ao grupo controle. Além disto, foi observada uma redução significativa na atividade enzimática da CAT e da GSH-Px em eritrócitos de recém-nascidos com HC quando comparados ao grupo controle. A atividade enzimática da SOD manteve-se inalterada. Todavia, não foram encontradas diferenças significativas dos parâmetros estudados após o tratamento com tiroxina. Ainda, não foi verificada correlação significativa entre os níveis de TSH e T4 livre e os parâmetros de estresse oxidativo. Desta forma, presume-se que ocorre estresse oxidativo em neonatos com HC e que o tratamento com tiroxina não é capaz de reverter a lipoperoxidação e a redução das defesas antioxidantes enzimática e não enzimática em neonatos com HC. / Thyroxine (T4) and Triiodothyronine (T3) are important for normal growth and development. Insufficient production of these hormones lead to congenital hypothyroidism (CH), characterized by severe mental retardation due to delay of the central nervous system maturation. CH infants must start treatment with thyroxine replacement as soon as diagnosed. Neonatal screening program is, therefore, essential to early identification of this disease with an incidence of 1 in 3500 - 4000 newborns. Oxidative stress is a disturbance in the prooxidant-antioxidant balance in favor of the former, leading to potencial damage. Previous studies using animal models of hypothyroidism showed an alteration of the cerebral antioxidant status associated with increased oxidative stress. Considering that human studies in adults revealed that oxidative stress may play a role in hypothyroidism pathogenesis, the objective of the present study was to evaluate oxidative stress parameters in neonates with primary CH before and after treatment with thyroxine (to 10-15 μg/Kg/d). We measured malondialdehyde levels (MDA) and total antioxidant reactivity (TAR) in plasma and the enzymatic activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GSH-Px) in erythrocytes from CH neonates. It was observed a significant increase of plasma MDA measurement as well as a decrease of total antioxidant reactivity (TAR) when compared to the control group. Furthermore, a significant decrease of erythrocyte CAT and GSH-Px activities were also found in CH patients, in contrast with SOD activity which was normal. However, we did not find significant differences in any of these parameters after CH thyroxine treatment. Also, it wasn’t verified any correlation between TSH and free T4 levels and oxidative stress parameters. Therefore, it is presumed that oxidative stress occurs in neonates with CH and that treatment with thyroxine cannot revert the induced lipoperoxidation and the reduction of enzymatic and non enzymatic antioxidant defenses in neonates with CH.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-08-30T20:27:31Z No. of bitstreams: 1 Taise Lima de Oliveira Caracterização clínica e molecular de pacientes com hipertireodismo....pdf: 583769 bytes, checksum: 1d1d8e16ece954c3ead88d0648b4eeea (MD5) / Made available in DSpace on 2012-08-30T20:27:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Taise Lima de Oliveira Caracterização clínica e molecular de pacientes com hipertireodismo....pdf: 583769 bytes, checksum: 1d1d8e16ece954c3ead88d0648b4eeea (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / O hipotireoidismo congênito (HC) é uma das doenças metabólicas mais comuns na infância, com incidência de HC é de 1:3.000 a 1:5.000 nascidos-vivos. Quando primário, o HC caracteriza-se por altos níveis de TSH podendo ser originado por disormonogênese, deficiente produção hormonal ou decorre de disgenesia tireoidiana, defeito embriológico que leva a agenesia, hemiagenesia ou ectopia. Na ausência do tratamento hormonal, o HC leva a grave retardo mental, além de outras alterações clínicas. A interação do hormônio TSH com o seu receptor (TSHR) tem importante função biológica estimulando o crescimento, diferenciação e função tireoidiana. Mutações no gene do TSHR têm sido identificadas como causa de HC hereditário ou congênito, mas parecem ser raras. Objetivos: 1) Obter genealogia das famílias afetadas para determinação do padrão de herança, identificação de afetados e possíveis portadores; 2) Descrever as características clínica-demográficas dos pacientes com HC; 3) Determinar a distribuição mutacional no gene do receptor do hormônio estimulante da tireoide (TSHR) nos afetados; 4) Sugerir ações de saúde pública e de otimização do aconselhamento genético. Material e Métodos: Foram estudados 12 pacientes provenientes de Monte Santo-BA, sendo oito diagnosticados pela triagem neonatal e quatro diagnosticados tardiamente durante expedição à cidade. Estes últimos foram identificados durante a coleta dos dados genealógicos das famílias dos afetados. Todos foram investigados para mutações no gene do TSHR. Toda a região codificadora do gene foi amplificada através do DNA genômico, seguido de SSCP e sequenciamento. Resultados: À época da primeira avaliação, os pacientes apresentaram níveis elevados de TSH, confirmando o caráter primário da doença, associados a sinais e sintomas do HC. Observou-se grande heterogeneidade clínica entre os pacientes mesmo aqueles com grau de parentesco muito próximo. Nenhuma mutação patogênica foi encontrada no gene TSHR. Conclusão: a análise das genealogias permitiu observar a heterogeneidade clínica e genética da doença. Não foi encontrada nenhuma mutação no gene TSHR. O estudo de outros genes poderá ajudar no esclarecimento do HC na região. / Congenital hypothyroidism (CH) is one of the most common metabolic disease in childhood, with an incidence of HC is 1:3,000 to 1:5,000 live births. When primary, CH is characterized by high levels of TSH and may be caused by dyshormonogenesis deficient hormone production, or due to thyroid dysgenesis, embryological defect that leads to agenesis, ectopic or hypoplastic. In the absence of hormonal treatment leads to the CH severe mental retardation and other clinical manifestations. The interaction of stimulanting thyroid growth, differentiation and function. Mutations in the TSHR gene have been identified as a cause of hereditary or congenital CH, but appear to be rare. Objectives: 1) Get genealogy of the affected families to detemine the pattern of inheritance, and possible identification of affected patients; 2) Describe the clinical and demographic characteristics of patients witc CH; 3) Determine the mutational distribution in the TSHR gene in the affected individuals; 4) Suggest public health actions and for genetic counseling optimization. Methods: We studied 12 patients from Monte Santo-Bahia, eight were diagnosed by newborn screening and four diagnosed late during an expedition to the city. The latter were identified during the collection of genealogical data of families those affected. All were investigated for mutations in the TSHR. The entire coding region of the gene was amplified using genomic DNA followed by SSCP and sequencing. Results: At first evaluation, all patients had elevated TSH levels, confirming the primary nature of the disease, associated with signs and/or symptoms of CH. As there was a familial recurrence of the disease, we noticed a large clinical heterogeneity among patients, even those with close family relationship. No pathogenic mutation was found in the TSHR gene. Conclusion: The analysis of pedigrees allowed to observe the clinical and genetic heterogeneity of the disease. We not found mutation in the TSHR. The study of other genes may help in clarifying the CH i the region.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-07-13T11:47:34Z No. of bitstreams: 1 Taíse Lima de Oliveira Cerqueira Estudo... 2016.pdf: 4519247 bytes, checksum: 571b6a53cf6e9f3fb58c96cdf62cacb8 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-07-13T11:55:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Taíse Lima de Oliveira Cerqueira Estudo... 2016.pdf: 4519247 bytes, checksum: 571b6a53cf6e9f3fb58c96cdf62cacb8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T11:55:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Taíse Lima de Oliveira Cerqueira Estudo... 2016.pdf: 4519247 bytes, checksum: 571b6a53cf6e9f3fb58c96cdf62cacb8 (MD5) Previous issue date: 2016 / CNPq / FAPESB / Fundação Gonçalo Moniz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / INTRODUÇÃO: Hipotireoidismo Congênito (HC), é uma das doenças metabólicas mais comuns na infância com incidência de 1:3.000 a 1:4.000 recém-nascidos. Um grupo de doenças relacionadas às alterações no desenvolvimento da tireoide, denominadas disgenesias tireoidianas (DT), responsabiliza-se por aproximadamente 85% de todos os casos de HC, sendo sua patogênese pouco conhecida. OBJETIVOS: Geral: Caracterização clínica e genética de pacientes com HC diagnosticados com disgenesia tireoidiana. Específicos: 1. Caracterizar clínica dos indivíduos com HC em acompanhamento na APAE/Salvador (Associação de Pais e Amigos dos Excepcionais); 2. Avaliar a existência de associação entre malformações tireoidianas e malformações cardiacos; 3. Pesquisar polimorfismos e mutações nos genes candidatos: PAX8, TSH-R, NKX2.5 e HES1, em pacientes diagnosticados com disgenesia tireoidiana; 4. Pesquisar o gene TSH-R numa coorte de pacientes com HC diagnosticados no programa de triagem neonatal da França. METODOLOGIA: Até o ano de 2016, 1.188 crianças foram diagnosticadas com HC e 773 estão em acompanhamento. Duzentos e dezoito crianças confirmadas com HC foram caracterizadas clinicamente através de testes de função da tireoide (TT4 e TSH), ultrassonografia e cintilografia, seguidas de dosagem de tireoglobulina. Toda a região codificantes dos genes PAX8, TSH-R, NKX2.5 e HES1 incluindo íntrons e éxons foram amplificados a partir do DNA genômico através da PCR (Reação em cadeia da Polimerase) utilizando-se técnicas padrão seguida de Sequenciamento direto. RESULTADOS: Sessenta e três pacientes foram diagnosticados com DT e 155 com glândula tópica normal. Hipoplasia representou 33,4% dos casos de DT, agenesia 19%, ectopia 27% e hemiagenesia 20,6%. Altos concentrações de TSH no teste do pezinho foram detectados no grupo das agenesias seguido das hipoplasias. Na análise genética/molecular, 31 (49,2%) dos pacientes foram identificados com o polimorfismo p.D727E em heterozigose e 4 (6,4%) em homozigose, no gene TSH-R; 4/63 pacientes tiveram o polimorfismo p.P52T em heterozigose; 14/63 apresentaram a variante polimórfica p.N181N e 2/63 apresentaram a substituição sinônima conhecida p.L645L, todos no gene TSH-R. o polimorfismo p.Glu21 foi encontrado em 54% dos pacientes e p.Gln181 encontrado em 1 paciente no gene NKX2.5. Nenhuma alteração foi encontrada no gene HES1, bem como em PAX8. CONCLUSÕES: Este é o primeiro estudo realizado na população de HC no Estado da Bahia. Análises clínicas revelaram um padrão distinto entre os subgrupos da DT quando comparados com glândula normal; 6 polimorfismos já descritos foram encontrados em dois genes candidatos. Nenhuma mutação patogênica foi encontrada. A descrição fenotípica é essencial para a correta avaliação genética e os mecanismos nela implicados, além de utilizados para predição da gravidade do HC. A identificação de novos genes ou eventos moleculares que controlam a função tireoidiana pós-natal seria de grande utilidade no esclarecimento das DT. Palavras-chave: / INTRODUCTION: Congenital hypothyroidism (CH), is the most common metabolic diseases in childhood with incidence of 1: 3000-1: 4000 newborns. A group of diseases related to alterations in the development of the thyroid, called thyroid dysgenesis (TD), is responsible for approximated 85% of all HC cases, and the majority has unknown pathogenesis. OBJECTIVES: General: clinical and genetic characterization of CH patients diagnosed with TD. Specific: 1. CH clinical characterization in individuals followed at APAE/Salvador; 2. evaluating the association between thyroid abnormalities and other abnormalities or syndromes; 3. search polymorphisms and mutations in known candidate genes for TD: PAX8, TSH-R, NKX2.5 and HES1; 4. XX METHODS: Until the year 2016, 1.188 children were diagnosed for CH and 773 were actually follow in APAE-Salvador. A continuous series of 218 children with confirmed HC were characterized clinically through thyroid function tests (TT4 and TSH), thyroid ultrasound and scintigraphy, followed by serum thyroglobulin measurement. The entire coding region of the candidate genes (PAX8, TSH-R, NKX2.5 and HES1), including exon/intron boundaries, was amplified from genomic DNA by polymerase chain reaction (PCR) using standard techniques, followed by direct sequencing. Results: Sixty-three patients were diagnosed with DT and 155 with in situ thyroid gland (ISTG). Hypoplasia represented 33,4% of all cases of DT, agenesis (19%), ectopy (27%) and hemiagenesis (20,6%). The higher screening TSH levels was in the agenetic group followed by hypoplasia. In the genetic/molecular analysis, 31 (49,2%) patients were identified with a polymorphism of TSH-R gene (p.D727E); 4/63 patients had a heterozygous p.P52T; 14/63 patients showed p.N187N polymorphic variants of the gene; and 2/63 patients presented a known p.L645L synonimous substitution. The polymorphism p.Glu21was found in 54% of patients, and p.Gln181 found in only one patient in the NKX2.5 gene. None alteration was detected in HES1 gene. CONCLUSIONS: This is the first CH population-based study in State of Bahia, Brazil. Clinical analysis revealed distinct hormonal patterns in DT subgroup when compared with ISTG, with only 6 known polymorphisms identified in few cases of TD in TSH-R, PAX8, NKX2.5 and HES1 genes. No mutation was found in a candidate genes studied. A detailed description of phenotype might be essential to target the correct genetic and mechanism implicated, and useful to predict CH severity. The identification of additional genes or molecular events controlling early postnatal thyroid function would be helpful.

Os hormônios tiroxina (T4) e triiodotironina (T3) apresentam especial importância para o desenvolvimento e crescimento normal. A deficiente produção destes hormônios ao nascimento leva ao hipotireoidismo congênito (HC), caracterizado por severo retardo mental devido ao atraso no desenvolvimento do Sistema Nervoso Central. Crianças com HC devem iniciar o tratamento com tiroxina assim que o diagnóstico for confirmado. O rastreamento neonatal, portanto, é fundamental para detecção precoce desta doença metabólica que ocorre em cerca de 1 a cada 3.500 a 4.000 nascidos vivos. O estresse oxidativo é resultado do desequilíbrio entre a formação de compostos oxidantes e defesas antioxidantes do organismo levando ao dano potencial. Estudos prévios com modelos animais de hipotireoidismo mostraram uma alteração do status antioxidante cerebral associado ao aumento do estresse oxidativo. Considerando que estudos realizados em humanos adultos revelaram envolvimento de radicais livres com a patogênese do hipotireodismo, o objetivo deste estudo foi avaliar o estresse oxidativo em neonatos com hipotireoidismo congênito primário no momento do diagnóstico e ao longo do tratamento com tiroxina (10-15 μg/Kg/d). Para tanto, foram avaliados os níveis de malondialdeído (MDA) e a reatividade antioxidante total (TAR) em plasma, bem como a medida da atividade das enzimas antioxidantes catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GSH-Px) nos eritrócitos de neonatos portadores de HC. Foi observado um aumento significativo dos níveis de MDA bem como uma redução da TAR em neonatos portadores de HC quando comparados ao grupo controle. Além disto, foi observada uma redução significativa na atividade enzimática da CAT e da GSH-Px em eritrócitos de recém-nascidos com HC quando comparados ao grupo controle. A atividade enzimática da SOD manteve-se inalterada. Todavia, não foram encontradas diferenças significativas dos parâmetros estudados após o tratamento com tiroxina. Ainda, não foi verificada correlação significativa entre os níveis de TSH e T4 livre e os parâmetros de estresse oxidativo. Desta forma, presume-se que ocorre estresse oxidativo em neonatos com HC e que o tratamento com tiroxina não é capaz de reverter a lipoperoxidação e a redução das defesas antioxidantes enzimática e não enzimática em neonatos com HC. / Thyroxine (T4) and Triiodothyronine (T3) are important for normal growth and development. Insufficient production of these hormones lead to congenital hypothyroidism (CH), characterized by severe mental retardation due to delay of the central nervous system maturation. CH infants must start treatment with thyroxine replacement as soon as diagnosed. Neonatal screening program is, therefore, essential to early identification of this disease with an incidence of 1 in 3500 - 4000 newborns. Oxidative stress is a disturbance in the prooxidant-antioxidant balance in favor of the former, leading to potencial damage. Previous studies using animal models of hypothyroidism showed an alteration of the cerebral antioxidant status associated with increased oxidative stress. Considering that human studies in adults revealed that oxidative stress may play a role in hypothyroidism pathogenesis, the objective of the present study was to evaluate oxidative stress parameters in neonates with primary CH before and after treatment with thyroxine (to 10-15 μg/Kg/d). We measured malondialdehyde levels (MDA) and total antioxidant reactivity (TAR) in plasma and the enzymatic activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GSH-Px) in erythrocytes from CH neonates. It was observed a significant increase of plasma MDA measurement as well as a decrease of total antioxidant reactivity (TAR) when compared to the control group. Furthermore, a significant decrease of erythrocyte CAT and GSH-Px activities were also found in CH patients, in contrast with SOD activity which was normal. However, we did not find significant differences in any of these parameters after CH thyroxine treatment. Also, it wasn’t verified any correlation between TSH and free T4 levels and oxidative stress parameters. Therefore, it is presumed that oxidative stress occurs in neonates with CH and that treatment with thyroxine cannot revert the induced lipoperoxidation and the reduction of enzymatic and non enzymatic antioxidant defenses in neonates with CH.

INTRODUÇÃO: O hipotireoidismo congênito (HC) é uma doença, de acometimento neonatal, caracterizada por diminuição nos níveis de hormônios tireoidianos. As causas mais comuns de HC primário permanente são as alterações no desenvolvimento da glândula tireóide (disgenesia) e os defeitos de síntese dos hormônios tireóideos (disormonogênese). A determinação da etiologia do HC tem papel importante na determinação da gravidade da doença, evolução e tratamento. Essa investigação é feita através de exames como ultrassonografia e cintilografia (CINT) da tireóide. Além disso, com o conhecimento do genoma humano, diversas mutações foram descritas, sendo a investigação molecular importante para a determinação da etiologia da doença. OBJETIVOS: 1. Determinar o diagnóstico etiológico dos pacientes com HC a partir de dosagens hormonais, tireoglobulina e exames de imagem; 2. Estabelecer a importância do uso da ultrassonografia com Doppler colorido (USDC) no diagnóstico etiológico; 3. Estabelecer a importância do uso do teste do perclorato de sódio intravenoso (PSIV) no diagnóstico diferencial de HC por disormonogênese; 4. Estudar os genes PAX8 e receptor do TSH (TSHR) em pacientes com HC causado por disgenesia tireoidiana MÉTODOS: Avaliamos 40 pacientes acompanhados na APAE - São Caetano com diagnóstico de HC primário e permanente acima de 3 anos de idade. Os pacientes realizaram dosagens de T3, T4, T4 livre, TSH, tireoglobulina (TG) e anticorpo anti-TG pelo método imunofluorimétrico, além de USDC e CINT. Os pacientes com suspeita de disormonogênese foram submetidos ao teste PSIV e avaliação com otorrinolaringologista e audiometria tonal, se necessário. Os pacientes que apresentavam disgenesia tireoidiana tiveram o DNA extraído a partir de leucócitos periféricos para o estudo dos genes PAX8 e TSHR através de PCR e sequenciamento automático. RESULTADOS: Avaliamos 28 pacientes do sexo feminino e 12 do sexo masculino, após suspensão do tratamento com levotiroxina por 4 semanas. A idade média foi de 6,5 anos. O TSH médio foi 129,9 UI/mL (normal: 0,7-6,0). Os valores de T3, T4 e T4 livre variaram de 14 217 ng/dL (normal: 105-269), <1,6 15,8 g/dL (normal: 1,5-15) e < 0,3 2,7 ng/dL (normal: 0,7-1,5), respectivamente. A TG variou de <1 287 ng/dL (normal: 1,7-35). A USDC mostrou 21 pacientes com tireóide tópica (53%), 8 pacientes com tireóide ectópica (20%) e 11 pacientes com atireose (27%). Na CINT, o mapeamento identificou tireóide tópica em 20 pacientes (51%), tireóide ectópica em 13 pacientes (32%), e atireose em 7 pacientes (17%). A captação mostrou-se aumentada em 2 horas em 10 pacientes. O teste PSIV foi realizado em 9 pacientes com bócio ou glândula de tamanho normal ao USDC, cuja captação foi aumentada. Apenas um paciente apresentou vômito ao início do teste. Seis pacientes apresentaram teste positivo, considerando uma queda maior que 20%. Nenhum desses pacientes apresentava surdez neurossensorial. Encontramos discrepância entre USDC e CINT em 9 pacientes, principalmente nos casos de ectopia. A dosagem de TG auxiliou na confirmação de atireose. Os níveis mais altos de TG encontrados foram nos casos de disormonogênese causados por defeito na organificação. Assim, determinamos o diagnóstico de ectopia em 32,5% dos pacientes, hipoplasia em 20%, defeito na organificação (defeito de TPO ou THOX2) em 17,5%, atireose em 15%, defeito na TG em 7,5% e 3 casos a esclarecer (7,5%). Vinte e sete pacientes foram diagnosticados como portadores de disgenesia tireoidiana e não apresentaram mutações nos genes PAX8 e TSHR. CONCLUSÃO: Estabelecemos o diagnóstico etiológico em 37 dos 40 pacientes estudados. A USDC mostrou-se importante no diagnóstico etiológico do HC, especialmente associada à dosagem de TG. O teste PSIV mostrou-se seguro no diagnóstico diferencial do HC por disormonogênese. Não identificamos nenhuma mutação nos genes PAX8 e TSHR nos casos estudados de disgenesia / INTRODUCTION: Congenital hypothyroidism (CH) is a disease at neonatal period characterized by low thyroid hormones levels. Most common causes of primary CH are alterations at thyroid gland development (dysgenesis) and thyroid hormone synthesis defects (dyshormonogenesis). The establishment of CH etiology has important role to define the severity, evolution and treatment of the disease. This investigation is based on thyroid ultrasound and radiouptake and radionuclide imaging (RAIU). With human genome knowledge, several mutations were described, becoming molecular investigation so important to etiology definition. OBJECTIVES: 1. Establish the etiologic diagnosis of CH patients using hormonal measurements, thyroglobulin and imaging exams. 2. Establish the importance of color Doppler ultrasound (CDUS) in etiologic diagnosis. 3. Establish the importance of intravenous perchlorate sodium test in differential diagnosis of CH due to dyshormonogenesis. 4. Study PAX8 and TSH receptor (TSHR) genes in patients with CH due to thyroid dysgenesis. METHODS: We evaluated forty patients followed-up at APAE - São Caetano with primary and permanent CH diagnosis above 3 years-old. Patients performed T3, T4, free T4, TSH, thyroglobulin (TG) and anti-TG antibody using immunofluorimetric assays, besides thyroid CDUS and RAIU. Patients with thyroid dysgenesis had their DNA extracted from peripheral leukocytes to study PAX8 and TSHR genes using PCR and automatic sequencing. Patients with dyshormonogenesis suspected were submitted to intravenous perchlorate sodium test and otorhinolaryngologist and tonal audiometric evaluation, if necessary. RESULTS: We evaluated 28 female and 12 male after levothyroxine treatment off for 4 weeks. Mean age of studied patients was 6.5 years-old. Mean TSH was 129.9 UI/mL (normal: 0.7-6.0). T3, T4 and freeT4 ranged from 14 217 ng/dL (normal 105-269) , <1.6 15.8 g/dL (normal: 1.5- 15) and < 0.3 2.7 ng/dL (normal: 0.7-1.5) respectively. TG level ranged from < 1 287 ng/dL (normal 1.7-35). CDUS showed normally located thyroid in 21 patients (53%), ectopy in 8 patients (20%), and athyrosis in 11 patients (27%). At RAIU, thyroid scan identified normal located gland in 20 patients (51%), ectopy in 13 patients (32%) e athyrosis in 7 patients (17%). Two-hours uptake was elevated in ten patients. Intravenous perchlorate sodium test was performed in 9 patients with goiter or normal volume at CDUS, with normal or elevated uptake. Only one patient presented vomit. Six patients had positive test, considering more than 20% of decline. None from these patients had neurosensorial deafness. We found discrepancy between CDUS and RAIU in 9 patients, especially in ectopic cases. Thyroglobulin measurement helped to confirm athyrosis. Highest TG levels were found in dyshormonogenesis patients due to organification defects. Therefore we determined etiologic diagnosis of ectopic gland in 32,5% of patients, hypoplasia in 20%, organification defect (TPO or THOX2 defects) in 17,5%, athyrosis in 15%, thyroglobulin defect in 7,5% and three cases were undefined (7,5%). Twenty seven patients were diagnosed with thyroid dysgenesis and had no mutation in PAX8 and TSHR genes. CONCLUSION: We established the etiologic diagnosis in 37 from 40 patients here studied. CDUS was useful on etiologic diagnosis of CH, especially associated to thyroglobulin level. Intravenous perchlorate sodium test was safe and efficient in CH differential diagnosis of dyshormonogenesis. We identified no mutation in PAX8 and TSHR genes in dysgenesis cases

Introdução: O hipotireoidismo congênito é a causa mais comum de retardo mental evitável em crianças, sua incidência varia de 1:2000 a 1:3000 nascidos vivos. É estimado que 15-20% dos casos de HC são conseqüentes de falhas na síntese dos hormônios tireoidianos. Entre as alterações genéticas mais freqüentes destaca-se o defeito na atividade da tireoperoxidase. Objetivos: rastrear mutações em duas pacientes com HC, com defeito parcial de incorporação de iodeto e verificar o efeito funcional de alterações do gene da tireperoxidase. Casuística e métodos: duas pacientes com HC, bócio e diagnóstico molecular não conhecido. Amostras de sangue periférico e de tecido tireoidiano das pacientes e amostras de DNA de indivíduos controles. Sequenciamento dos genes TPO, DUOX2 e DUOXA2. Análise da expressão gênica de TPO, TG, NKX2.1, PDS, PAX8, NIS e rTSH por PCR bem tempo real. Avaliação da expressão de luciferase sob controle do promotor da TPO e avaliação da atividaede da TPO do tecido as pacientes. Resultados: Nas pacientes foi identificada a alteração -95G>T, em homozigose, na região promotora da TPO. Verificamos diminuição da atividade enzimática da TPO no tecido tireoideano das pacientes e diminuição da expressão do RNAm desse gene. Também se encontrou diminuída a expressão dos genes NKX2.1 e PAX8. Já os genes TG, rTSH, PDS, NIS, a expressão do RNAm apresentou-se aumentada. A análise funcional da alteração -95G>C não mostrou diminuição da expressão do gene repórter. Conclusão: O HC das pacientes deve-se a diminuição da atividade enzimática da TPO, contudo alterações de sequência não foram encontradas no gene da TPO que expliquem a diminuição da atividade. Alterações epigenéticas ou nos introns no gene da TPO poderiam explicar o HC das pacientes. / Introduction: Congenital hypothyroidism is the most common cause of preventable mental retardation in children, its incidence varies from 1:2000 to 1:3000 live births. It is estimated that 15-20% of cases of CH are consistent failures in the synthesis of thyroid hormones. Among the most frequent genetic changes highlight the defect in the activity of thyroid peroxidase. Objectives: Identify mutations in two patients with CH and partial defect in iodide incorporation and verify the functional effect of changes in gene tireperoxidase. Methods: Two patients with CH, goiter and molecular diagnosis unknown. Samples of peripheral blood and thyroid tissue of patients and DNA samples from control subjects. Sequencing of the TPO gene, DUOX2 and DUOXA2. Analysis of gene expression of TPO, TG, NKX2.1, PDS, PAX8, NIS and TSHr by real time. Evaluation of the expression of luciferase under control of the promoter of TPO and TPO activity evaluation of the patients tissue. Results: The patients were identified change-95G> T homozygous, in the promoter region of TPO. We observed decrease in enzymatic activity of TPO in thyroid tissues of patients and decreased RNAm expression of this gene. Also found decreased expression of genes NKX2.1 and PAX8. Since the genes TG, TSHr, PDS, NIS mRNA expression presented increased. Functional analysis of the change -95G>T showed no descrease in reporter gene expression. Conclusion: The CH of patients due to decreased enzymatic activity of TPO, but changes were not found in the sequence of TPO gene to explain the decrease in activity. Epigenetic alterations in introns or in the TPO gene could explain the HC patients