Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2016-09-26T14:07:49Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Completa_Henia_VF-2.pdf: 4622430 bytes, checksum: d09b1f29bbf344aeaacc5347c72ee181 (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Reis (vanessa.jamile@ufba.br) on 2016-09-26T14:45:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_Completa_Henia_VF-2.pdf: 4622430 bytes, checksum: d09b1f29bbf344aeaacc5347c72ee181 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-26T14:45:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_Completa_Henia_VF-2.pdf: 4622430 bytes, checksum: d09b1f29bbf344aeaacc5347c72ee181 (MD5) / CNPq e Fapesb / “ESTUDO QUÍMICO E AVALIAÇÃO DAS ATIVIDADES ANTIMICROBIANA, ANTICOLINESTERÁSICA E LARVICIDA DO FUNGO Curvularia lunata E LEVANTAMENTO QUIMIOTAXONÔMICO DO COMPLEXO Curvularia- Bipolaris-Cochliobolus” A revisão bibliográfica sobre os metabólitos secundários isolados de espécies fúngicas dos gêneros Curvularia, Bipolaris e Cochliobolus foi realizada com o objetivo de comparar o perfil metabólico deste três gêneros visando contribuir para a classificação taxonômica deste complexo. Como resultados, foram encontrados metabólitos secundários pertencentes às classes dos policetídeos (incluindo antraquinonas, lactonas macrociclicas e compostos fenólicos), terpenoides (sesterpenoies e sesquiterpenoides), esteróides e alcalóides. Os policetídeos como as lactonas macrociclicas curvularinas foram descritas somente para fungos do gênero Curvularia e alguns Cochliobolus, enquanto que os sesterpenoides foram encontrados nos gêneros Bipolaris e Cochliobolus, permitindo sugerir que as lactonas sejam marcadores quimiotaxonômicos para o gênero Curvularia e as espécies de Cochliobolus relacionadas (teleomorficas), e que os sesterpenoides são marcadores do gênero Bipolaris e os teleomorfos do gênero Cochliobolus. A análise dos extratos oriundos do cultivo de Curvularia lunata em diferentes meios de cultura foi realizada para verificação da influencia da fonte de carbono sobre a produção de metabólitos secundários. Os métodos utilizando a cromatografia em camada delgada comparativa, cromatografia líquida de alta eficiência e ressonância magnética nuclear de hidrogênio permitiram estimar a diversidade química conforme a fonte de carbono usada. Os meios de cultura Czapeck, batata e dextrose e extrato de malte apresentaram mais sinais nos cromatogramas e nos espectros de RMN de 1H com relação aos demais, por isto estes meios foram considerados os meio de culturas ideais para o estudo do metabolismo secundário. Além disso, foi possível inferir a presença da 11-α-metoxicurvularina nos extratos do fungo cultivado em batata e dextrose e farinha de arroz. Os extratos obtidos foram submetidos a ensaios biológicos (atividade antimicrobiana, anticolinesterásica e larvicida). Os extratos obtidos do cultivo do fungo em batata e dextrose apresentaram atividade contra a levedura Candida albicans, enquanto os extratos oriundos do meio contendo extrato de levedura XV mostraram atividade antibacteriana contra Micrococcus luteus, Staphylococcus aureus e Bacillus subtilis. Com relação à atividade anticolinesterasica, todos os extratos brutos oriundos do micélio continham um sinal com fator de retenção igual 0.7 que mostrou inibição da atividade da enzima acetilcolinesterase, destacando os extratos fúngicos resultantes do cultivo em meio contendo extrato de malte e meio Czapeck enriquecido com 2% de extrato de levedura por apresentarem maior halo de inibição. Nenhum dos extratos apresentou atividade contra larvas do mosquito Aedes aegypti. Finalmente o fungo Curvularia lunata foi cultivado em larga escala em meio contendo extrato de malte selecionado pela sua atividade anticolinesterasica. A investigação química inicial resultou no isolamento de três derivados perilenoquinônicos: dois já descritos na literatura como dihidroalterperilenol e alterperilenol, mas obtidos pela primeira vez no gênero Curvularia e o perileno de estrutura inédita, identificado como 12-metil- stemfitriol. / “CHEMICAL STUDY AND BIOLOGICAL ASSAYS (ANTIMOCROBIAL, ANTICHOLINESTERASIC AND INSECTICIDAL) FROM THE FUNGUS Curvularia lunata AND QUIMIOTAXONOMIC SEARCH FROM THE FUNGAL COMPLEX Curvularia-Bipolaris-Cochliobolus” A literature revision of secondary metabolites isolated from fungal species of Curvularia, Bipolaris and Cochliobolus genera was performed with the aim of get their metabolic profile in order to contribute to the taxonomic classification on this complex. As result were found secondary metabolites belonging to the polyketides (including anthraquinones, macrocyclic lactones and phenolic), terpenoids (mainly sesterpenoids), steroids and alkaloids. Polyketides like the macrocyclic lactone curvularins were described only for fungi from the genus Curvularia and the related teleomorphic Cochliobolus species, while sesterpenoids such as ophiobolins was described for Bipolaris species as well as their related Cochliobolus, suggesting these lactones and sesterpenoids as quimiotaxonomic marker for Curvularia and Bipolaris genera, respectively. An analysis of extracts derived from cultivation of Curvularia lunata on several media was performed to investigate the effect of carbon source on secondary metabolism of the fungus. As analytical strategy based on TLC (thin layer chromatography), high performance liquid chromatography with diode array detection and nuclear magnetic resonance of hydrogen allowed to get an estimative about chemical diversity under different carbon sources. Malt extract, Czapeck plus 2% of yeast extract and potato and dextrose extracts were the media that exhibited the most signals in chromatograms and 1H NMR spectra, indicating them as the ideal culture media for secondary metabolism studies. Furthermore, we can suggest that the compounds 11-α-methoxycurvularin were found in fungal extracts derived from the cultivation of Curvularia in potato and dextrose and rice flour media. In addition, those extracts were also evaluated for their biological activities (antimicrobial, anticolinesterásico and insecticidal). Extracts obtained from fungal growth in potato and dextrose media exhibited activity against the yeast Candida albicans, while extracts derived from the yeast extract cultivation showed antibacterial activity against M. luteus, S. aureus and B. subtillis. With respect the anticholinesterasic activity, all mycelial extract had a signal (Rf 0.7) that inhibited the enzyme AChE activity, being the fungal extracts from malt extracts and czapeck plus 2% yeast extract that had a marked inhibition halo. None of these XVII extracts had an activity against larval stage of the mosquito Aedes aegypti. Finally, the fungus Curvularia lunata was cultivated in large scale on malt extract medium, selected for its anticholinesterasic activity. Initial chemical investigation had resulted in the isolation of three perylene derivates: known dihydroalterperylenol and alterperylenol but being described for the first time in Curvularia genera and the novel perylene having a metabolic group, which was named as 12-methyl-stemphytriol.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-03-13T12:23:23Z No. of bitstreams: 1 Helenilza de Paula.pdf: 563470 bytes, checksum: 8516fe943f64533b1a028f0edced6282 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-13T12:23:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Helenilza de Paula.pdf: 563470 bytes, checksum: 8516fe943f64533b1a028f0edced6282 (MD5) Previous issue date: 2000-12-20 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Leaf blight, caused by Curvularia eragrostidis, is one of the main diseases of the yam in Brazilian Northeast, however studies on the pathogen variability are inexistent. In order to characterize the variability of C. eragrostidis, 42 strains obtained from yam fields in the Pernambuco State were evaluated in relation to epidemiological components, physiologic characteristics and sensibility to iprodione. In the epidemiological components study, yam plants, cv. Da Costa, were inoculated with strains of C. eragrostidis (1x104 conidia/ml) and evaluated daily for occurrence and severity of disease symptoms, to record incubation period (IP) and area under disease progress curve (AUDPC). Strains were evaluated “in vitro” for micelial growth rate (MGR), sporulation (SP) and germination of conidia (GER), as well as for sensitivity to iprodione, evaluated by the lethal dose which inhibited 50% of micelial growth (DL50) and percentage of inhibition of conidium germination (ICG). There were significant differences (P=0.05) among the strains of C. eragrostidis in relation to all variables, resulting in different similarity groups of strains according to the Scott-Knott test. There were no significant correlation (P=0.05) between the variables associated with disease (IP and AUDPC) and the other variables studied (MGR, SP, GER, DL50 and ICG). When all variables were analyzed by the Euclidean distance (single linkage), the 42 strains were gathered into seven similarity groups. Therefore, there is variability among the strains of C. eragrostidis, which causes leaf blight of yam in different planting areas in Pernambuc / A queima das folhas, causada por Curvularia eragrostidis, constitui uma importante doença do inhame no Nordeste brasileiro, embora inexistam estudos sobre a variabilidade do patógeno. Com o objetivo de analisar a variabilidade de C. eragrostidis, 42 isolados obtidos de áreas de plantio de inhame do Estado de Pernambuco foram avaliados em relação a componentes epidemiológicos, características fisiológicas e sensibilidade ao fungicida iprodione. No estudo dos componentes epidemiológicos, plantas de inhame (cv. Da Costa) com quatro meses de idade foram inoculadas com os isolados de C. eragrostidis (1x104 conídios/ml) e avaliadas diariamente quanto à presença e severidade dos sintomas de queima, sendo obtidos o período de incubação (PI) e a área abaixo da curva de progresso de doença (AACPD). Cada isolado foi também avaliado “in vitro” quanto a características fisiológicas como taxa de crescimento micelial (TCM), esporulação (ESP) e germinação de conídios (GER), assim como em relação à sensibilidade ao fungicida iprodione, avaliada pela dose do fungicida suficiente para inibir 50% do crescimento micelial (DL50) e pela porcentagem de inibição da germinação dos conídios (IGC). Foram constatadas diferenças significativas (P=0,05) entre os isolados de C. eragrostidis em relação a todas as variáveis avaliadas, sendo possível a separação dos isolados em diferentes grupos de similaridade pelo teste de Scott-Knott. Não foram constatadas correlações significativas (P=0,05) das variáveis associadas à doença (PI e AACPD) com as demais variáveis (TCM, ESP, GER, DL50 e IGC). Utilizando o conjunto das variáveis, a análise da distância Euclidiana por ligações simples permitiu a separação dos 42 isolados de C. eragrostidis em sete grupos de similaridade. Os resultados obtidos indicam a existência de variabilidade entre os isolados do patógeno causando queima das folhas em diferentes áreas de cultivo de inhame de Pernambuco.

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O uso de extratos de plantas no controle de fungos fitopatogênicos tem aumentado significativamente, principalmente pelo fato dos defensivos serem onerosos ao produtor e pelos danos ocasionados ao meio ambiente. A lobeira (Solanum lycocarpum St. Hill.) é amplamante usada no controle de doenças causadas ao homem evidenciando assim o seu potencial fungicítico perante a outros fungos de interesse agrícola. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a ação fungitóxica do extrato metanólico e hidrometanólico de folhas de lobeira controle dos fungos Didymella bryoniae e Curvularia spp. . Foram utilizados solventes em concentracções difrentes, formas de aplicação distribuída e difundida destes solventes em meio de cultura e doses de aplicação 0, 10, 20, 30, 40 e 50 μL adicionados ao meio de cultura e via foliar em plântulas. Foram realizadas avaliações diária para o crescimento micelial dos fungos e mortalidade das plântulas de melancia. Em plântulas de milho doce foram realizadas avaliaçoes a cada 48 horas após a inoculação do fungo. Ambos os experimentos forma instalados em delineamento inteiramente casualizados, sendo que para o teste in vitro em esquema fatorial 2 x 5 x 2 (concentração do extrato, doses, forma de aplicação) e para o teste in vivo em esquema fatorial 2 x 5 (concentação do extrato e doses). Os dados foram submetidos a anáise de variância e regressão.Para o teste in vitro, observou-se que para D. bryoniae o extrato bruto a dose de 50μL foi o que melhor inibiu o crescimento micelial do fungos. Para a Curvularia spp. a dose foi indeferente ao crescimento micelial porém, o extrato difundido ao meio de cultura reduziu o seu desenvolvimento. Para o teste in vivo, a maior eficiencia no controle das doencas para o extrato bruto foi 30μL e o extrato aquoso 50μL para a Curvularia spp. e para a Didymella bryoniae o extrato bruto a 10 μL e o extrato aquoso a 20 μL. / The use of plant extracts in the control of phytopathogenic fungi has increased significantly, mainly because of pesticides are costly to the producer and the damage caused to the environment. The lobeira (Solanum Lycocarpum St. Hill.) is largely used to control diseases caused to man thus highlighting their fungicide potential before the other fungi of agricultural interest. The aim of this study was to evaluate the fungitoxic action of methanol extract and hydromethanolic leaves of lobeira in the control of the Didymella bryoniae and Curvularia spp. fungi. Solvents were used with different concentrations, application forms of these solvents were distributed and spread among culture medium and application rates of 0, 10, 20, 30, 40, and 50 added among the culture medium and foliar application into plantlets. Daily evaluations were performed for mycelial growth of fungi and mortality of watermelon plantlets, as for the evaluation of sweet corn plantlets evaluations were performed every 48 hours after inoculation of the fungus. Both experiments were installed in a completely randomized design, and for the in vitro test factorial 2 x 5 x 2 (extract concentration, dose, method of application) and the in vivo test in factorial 2 x 5 (concentration, extract and doses). The data were submitted to the variance and regression analysis. For the in vitro test it was observed that for D. bryoniae crude extract 50 dose was the best inhibited the mycelial growth of the fungi. For Curvularia spp. the dose was indifferent mycelial growth but the extract was spread to the culture medium decreased its development. For the in vivo test, the highest efficiency in the control of diseases to the crude extract was 30μL and the aqueous extract 50 to Curvularia spp. and to D. bryoniae the crude extract to 10 and the aqueous extract to 20 .

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Three isolates of Curvularia belonging to Curvularia tuberculata (isolates 93-020 and 93-022) and Curvularia oryzae (isolate 93-061) were obtained from diseased Cyperus difformis, Cyperus iria, and Fimbristylis miliacea, respectively, in the Philippines in 1993. Under greenhouse conditions, these fungal isolates caused high mortality and significant plant dry weight reduction in C. difformis, C. iria, and F. miliacea when sprayed at the rate of 1 x 108 spores/m3. Cross-pathogenicity of the isolates was demonstrated in three other sedge weed species. C. difformis, C. iria, and F. miliacea were killed but C. rotundus was resistant. Most of the thirteen rice varieties tested were resistant to the fungal isolates. The order of decreasing pathogenicity to rice was C. oryzae (93-061), C. tuberculata (93-020), and C. tuberculata (93-022). The infection process of C. tuberculata and C. oryzae was similar. Spore germination was polar for C. tuberculata and bipolar for C. oryzae. Germ tube growth was random and branching. Appressoria were formed preferentially over epidermal cell wall junctions on sedge hosts and over stomatal apertures in rice. Complex infection cushions were observed only on sedge hosts. Infection hyphae developed inter- and intracellularly, causing epidermal cell walls to separate and mesophyll cells to shrink and collapse. The vascular bundles were not invaded. Colonization of susceptible weeds was rapid and conidiophores emerged from the stomatal aperture between 96 to 120 hours post inoculation (HPI). Resistance to C. tuberculata and C. oryzae in C. rotundus and rice was expressed as a delay in appressorial formation, inhibition of fungal growth after penetration, and lack of sporulation.

The purpose of this work was to evaluate biometric, metabolic and physiological four of the most promising varieties of RIDESA s sugar cane at 150 and 240 days, where in this second period, under the influence of the fungus Curvularia inaequalis, causal agent of the Curvularia s spot.The gas exchange, fluorescence, chlorophyll content and biometry of varieties of sugar cane (Saccharumofficinarum) RB 872552, RB 962962, RB 98710 and RB 92579 were assessed under controlled conditions in vessels, maintained in a greenhouse. The measurements of gas exchange were made at 8:00 am using the following parameters: photosynthetic assimilation of CO2 (A), stomatal conductance (gS), the internal concentration of carbon (Ci), transpiration (E) and vapor pressure deficit between leaf and air (DPVairleaf). Fluorescence measurements were performed at 9:00 am being used the initial fluorescence (Fo), maximum (Fm), variable (Fv), the ratio between variable and maximum fluorescence (Fv / Fm), photochemical quenching (qP) and quenching non-photochemical (qN). The content of chlorophyll a, b and total was collected after elapsed previous analyzes. The quantification of the PAL enzyme was subsequently performed in the laboratory using the leaf +1 of sugar cane.At 150 days of gas exchange, the parameters of photosynthetic CO2 assimilation and transpiration showed abnormalities, and the variety 98710 presented the best results. The same tendency was repeated in the data of chlorophyllous pigments and biometrics. The data of chlorophyll fluorescence did not change.At 240 days of the gas exchange showed difference for the parameters of photosynthetic assimilation CO2, stomatal conductance and internal carbon, and the varieties 872552 and 962962 had values that indicate infection by the fungus.The same tendency occurred in fluorescence of chlorophyll a, in the parameters minimal fluorescence, maximal fluorescence, maximum quantum yield (Fv / Fm), photochemical quenching and non-photochemical quenching. The chlorophyllous pigments showed no change.Confirming the trend, quantified the enzyme phenylalanine ammonia-lyase showed variation, with varieties RB 872552 and 962962 with the major activity of this enzyme in the inoculated treatment.Biometrically varieties RB 92579 and 98710 showed the best development in both treatments. We conclude that under optimal conditions, the varieties generally had the same trends at 150 and 240 days after transplanting, already under the influence of the fungus Curvularia inaequalis, the varieties RB 92579 and 98710 were resistant, the varieties and RB 872552 and 962962 presented symptoms. / O presente trabalho teve como objetivo avaliar biométrica, metabólica e fisiologicamente quatro variedades de cana-de-açúcar (Saccharumofficinarum)da RIDESA aos 150 e 240 dias. Sendo as avaliações conduzidas aos 240 dias sob a influência do fungo Curvularia inaequalis, agente causal da mancha de curvularia. As trocas gasosas, a fluorescência, o teor de clorofila e a biometria das variedades de cana-de-açúcarRB 872552, RB 962962, RB 98710 e RB 92579 foram avaliadas em vasos, mantidos em casa de vegetaçãosob condição controlada. As medições de trocas gasosas foram realizadas às 8:00 horas da manhã utilizando os parâmetros: assimilação fotossintética de CO2 (A), condutância estomática (gS), concentração interna de Carbono (Ci), transpiração (E) e déficit de pressão de vapor entre a folha e o ar (DPVfolha-ar). As medições de fluorescência foram realizadas às 9:00 horas sendo utilizadas a fluorescência inicial (Fo), máxima (Fm), variável (Fv), razão entre as fluorescências variável e máxima (Fv/Fm), quenching fotoquímico (qP) e quenching não-fotoquímico (qN). O teor de clorofila a, b e total foi coletado depois de decorridas as análises anteriores. A quantificação da enzima fenilalanina amônia-liase(PAL) foi realizada posteriormente em laboratório, utilizando a folha +1 da cana-de-açúcar. Aos 150 dias para as trocas gasosas, os parâmetros assimilação fotossintética de CO2 e transpiração apresentaram alteração, sendo a variedade 98710 a que apresentou os maioresvalores. A mesma tendência se repetiu para os dados de pigmentos clorofilados e biometria. Os dados de fluorescência da clorofila a não variaram. Aos 240 dias, as trocas gasosas apresentaram diferença para os parâmetros assimilação fotossintética de CO2, condutância estomática e carbono interno, sendo que as variedades RB 872552 e RB 962962 apresentaram valores que indicam infecção pelo fungo. A mesma tendência ocorreu na fluorescência da clorofila a, nos parâmetros fluorescência mínima, fluorescência máxima, rendimento quântico potencial (Fv/Fm), quenching fotoquímico e não-fotoquímico. Os pigmentos clorofilados não apresentaram nenhuma alteração. Confirmando a tendência, a enzima quantificada fenilalanina amônia-liase (PAL) apresentou variação, sendo as variedades RB 872552 e RB 962962 caracterizadas com maior atividade dessa enzima nos tratamentos inoculados. Biometricamente as variedades RB 92579 e 98710 apresentaram o maior desenvolvimento em ambos os tratamentos. Conclui-se que em condições ótimas, as variedades em geral tiveram tendências iguais aos 150 e 240 dias após o transplantio, já sob a influência do fungo Curvularia inaequalis, as variedades RB 92579 e RB98710 não apresentaram sintomas e as variedades RB 872552 e RB 962962 apresentaram sintomas.

Pour la première fois, l’étude de la flore fongique endophytique de cinq plantes médicinales soudanaises : Calotropis procera (Ait.), Catharanthus roseus (L.), Euphorbia prostrata (Ait.), Trigonella foenum-graecum (L.), and Vernonia amygdalina (Del.) a été réalisée. Un total de 23 souches de champignons endophytes ont été isolées à partir des plantes après la stérilisation de surface puis les différentes analyses biologiques ont été effectuées. Les extraits bruts d’acétate d’éthyle de 21 endophytes ainsi que de leurs plantes hôtes ont été évalués pour leur teneur en phénols totaux et leur activité antioxydante en utilisant respectivement la méthode colorimértrique Folin-Ciocalteu et le piégeage des radicaux libres par la méthode 1,1,-diphényl-2-picrylhydrazil (DPPH) in vitro. Une évaluation générale de la cytotoxicité de 16 endophytes sélectionnés ainsi que de leurs plantes hôtes a été réalisée selon le test MTT sur trois types de cellules cancéreuses : carcinome du sein humain (MCF7), adénocarcinome du côlon (HT29 et HCT116). Ces extraits ont été aussi testés, selon la méthode de dilution en bouillon, sur deux souches bactériennes représentatives, Escherichia coli et la souche résistante à la méthicilline de Staphylococcus aureus. La teneur en phénols totaux (89,9 ±7,1 mg Equivalent d’Acide Gallique EAG/g) ainsi que l’activité antioxydante (IC50: 18±0,1 µg/mL) les plus élevées ont été observées pour l’endophyte, Aspergillus terreus 2 isolé à partir des graines de T. foenum-graecum. Byssochlamys spectabilis a montré l’activité cytotoxique la plus importante (1,51 ± 0,2 µg/mL), suivi par Cladosporium cladosporioides 2 (10,5 ± 1,5 µg/mL), puis par Alternaria sp. (13,5 ± 1,8 µg/mL). Seules six souches ont montré une activité contre S. aureus avec des valeurs de MIC qui se situent entre 0,125 et 2 mg/mL dont: Alternaria alternata (0,125 mg/mL), Alternaria sp. (0,250 mg/mL), Byssochlamys spectabilis (0,5 mg/mL). 10 composés purs (0,3 à 40 mg) ont été isolés à partir des extraits bruts d’acétate d’éthyle de Curvularia papendorfii. Le nouveau composé pur (AFB) 3,7,11,15-Tetrahydroxy-18-hydroxymethyl-14,16,20,22,24-pentamethyl-hexacosa-4E,8E,12E,16,18-pentaenoic acid (acide Khartomique) a montré une activité antibactérienne modérée contre S. aureus avec une CIM de 62,5 µg/mL et une faible activité cytotoxique sur les cellules MCF7 avec une IC50 > 100 µM. Le composé pur AF1 a montré une activité cytotoxique modérée sur les cellules HT29 avec une IC50 de 29,78 µM et une très faible activité antibactérienne contre S. aureus. Ces deux composés ne présentent pas d’activité antioxydante. / This study investigated, for the first time, the endophytic fungi flora of five Sudanese medicinal plants: Calotropis procera (Ait.), Catharanthus roseus (L.), Euphorbia prostrata (Ait.), Trigonella foenum-graecum (L.) and Vernonia amygdalina (Del.). A total of 23 endophytic fungal strains were isolated from the plants after surface disinfection and different biological tests were performed. Total phenolic content (TPC) and total antioxidant activity of ethyl acetate crude extracts of 21 endophytes and their host plants were estimated using respectively the Folin-Ciocalteu colorimetric method and 1,1,-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging in vitro method. General evaluation of the cytotoxicity of 16 selected endophytes and their host plants was performed by the MTT assay using cancer cells type: Human breast carcinoma (MCF7) and Colon adenocarcinoma (HT29 and HCT116). Preliminary antibacterial screening was done for the 16 endophytes. These extracts were also tested against two representative bacterial strains, Escherichia coli and methicillin-resistant Staphylococcus aureus, by broth dilution tests. The endophyte, Aspergillus terreus 1 from T. foenum-graecum seeds had the highest TPC in term of Gallic Acid Equivalent (89.9 ± 7.1 mg GAE/g) and antioxidant activity (IC50: 18±0.1µg/mL). Byssochlamys spectabilis showed strong cytotoxicity (1.51 ± 0.2 µg/mL) followed by Cladosporium cladosporioides 2 (10.5 ± 1.5 µg/mL), then Alternaria sp. (13.5 ± 1.8 µg/mL). Only six strains showed activity against methicillin-resistant S. aureus with MIC values ranging between 0.125-2 mg/mL, Alternaria alternata (0.125 mg/mL) Alternaria sp. (0.250 mg/mL) and Byssochlamys spectabilis values (0.5 mg/mL). Ten pure compounds (0.3 to 40 mg) were isolated from ethyl acetate crude extract of Curvularia papendorfii .The new pure compound (AFB) 3,7,11,15-Tetrahydroxy-18-hydroxymethyl-14,16,20,22,24-pentamethyl-hexacosa-4E,8E,12E,16,18-pentaenoic acid (Khartoumic acid) revealed moderate antibacterial activity against S. aureus with MIC value 62.5 µg/mL and weak cytotoxicity with a IC50 > 100 µM against MCF7 cells. The pure compound AF1 showed moderate cytotoxic activity with IC50 value of 29.78 µM against HT29 and weak antibacterial activity with MIC 250 µg/mL against S. aureus. Both compounds displayed no antioxidant activity.

Orientador: Lourdes Campaner dos Santos / Resumo: Este trabalho apresenta o estudo dos efeitos de modificadores epigenéticos e eliciadores químicos na diversificação metabólica de Curvularia lunata e Fusarium fujikuroi, fungos isolados de Paepalanthus chiquitensis (Eriocaulaceae). Os fungos foram cultivados em PDB (caldo batata dextrose), e as seguintes condições foram investigadas: (PDB + SAHA) ácido hidroxâmico suberoilanilida, (PDB + AZA) 5-azacitidina, (PDB + AA) ácido anacárdico, PDB + Cu2+ e PDB + Mg2+. Essas condições foram comparadas com o controle PDB. O estudo químico de C. lunata, resultou no isolamento das novas γ-lactamas espirocíclicas C3 e C4, e outros cinco compostos conhecidos: triticonas E (C1) e F (C2), ácido 5-O-metilcurvulínico (C5), ácido curvulínico (C6) e curvulina (C7). As estruturas foram elucidadas por análises espectroscópicas e pela comparação com dados da literatura. Além disso, um estudo computacional foi realizado para determinar a configuração absoluta do C‒3' de C3 e C4. As triticonas C1 e C2 apresentaram boa atividade antibacteriana para Escherichia coli, com CIM de 62,5 μg/mL. Dos eliciadores químicos utilizados, a suplementação com Mg2+ foi a condição que apresentou as diferenças mais significativas no perfil metabólico de F. fujikuroi. O extrato PDB + Mg2+ preparado do cultivo em escala ampliada foi purificado por métodos cromatográficos e resultou no isolamento e identificação das substâncias: ácido indolacético (F3) e seus derivados F4, F8 e F17, assim como a auxina ácido fenilacético ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Eriocaulaceae, Paepalanthus chiquitensis, Fusarium fujikuroi, Curvularia lunata, fungo endofítico, epigenética / Doutor

O Andropogon L. é uma gramínea forrageira, amplamente distribuída em áreas de Cerrado e com períodos de seca prolongada. Apresenta características de ser denso com grandes touceiras e com inflorescência plumosa, tendo uma elevada capacidade na disseminação de suas sementes. Por sua vez, as sementes são consideradas principais fontes de abrigo e transporte de agentes patogênicos para áreas livres de doenças. No Tocantins, não há registros de trabalhos que relacionem a incidência de fungos em sementes de Andropogon como causadores de doenças em culturas de importância agrícola. Da mesma forma, não há pesquisas sobre o transporte, transmissibilidade e patogenicidade de fungos associados à suas sementes. O trabalho objetivou avaliar a qualidade sanitária de sementes do Andropogon, a transmissão de fungos via semente-plântula e a patogenicidade à plantas de outras espécies de importância agrícola, e também realizar a caracterização morfológica e molecular de Curvularia sp. isolados de sementes de Andropogon. Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Pesquisa em Fitopatologia, Laboratório de Controle Biológico de Doenças e Casa de Vegetação da Universidade Federal do Tocantins. No capítulo 1, utilizou-se o método blotter test para a avaliação da sanidade das sementes com e sem desinfestação. A incidência dos fungos foi avaliada a partir da análise individual das sementes com auxílio de microscópio estereoscópico e ótico. A germinação das sementes foi avaliada após 10 dias de instalação do teste, juntamente com a identificação de fungos associados às sementes não germinadas. Para os fungos detectados na análise sanitária avaliou-se a capacidade de transmissão via semente-plântula. A patogenicidade dos fungos oriundos das sementes de Andropogon foi avaliada por meio da inoculação na própria planta e também foi avaliada a capacidade destes fungos em infectar outras plantas de interesse econômico. No capítulo 2, a identificação morfológica foi realizada a partir de observações macro e micromorfológicas utilizando-se como base as características descritas na literatura quanto ao aspecto da colônia e conídios de Curvularia sp. A caracterização molecular foi realizada a partir da extração do DNA, amplificação e sequenciamento da região do gene Clg2p. A transmissão foi avaliada a partir da semeadura de sementes sem tratamento com fungicidas, onde ao final de 40 dias observou-se sintomas típicos de mancha foliar de Curvularia. A patogenicidade foi avaliada a partir da inoculação de suspensão de conídios de Curvularia sp. nas folhas de plantas sadias, observando ao final de 10 dias, se houve sintomas do patógeno. Foram identificados e quantificados nas sementes de Andropogon L. fungos dos gêneros Alternaria sp., Bipolaris sp., Curvularia sp., Fusarium sp., Phoma sp., Aspergillus sp., Cladosporium sp., Penicillium sp. e Rhizopus sp. A realização da desinfestação das sementes reduziu os fungos presentes nas sementes. O fungo Curvularia sp. foi transmitido das sementes para as plantas de Andropogon. As sementes de Andropogon L. transportaram e disseminaram fungos que uma vez inoculados causaram infecção na própria planta e em outras culturas de importância econômica, tais como: arroz, feijão-caupi, melancia, melão, milho, sorgo e aos capins marandu, mombaça, piatã e quicuia. Baseado em marcadores morfológicos e moleculares, o fungo identificado com elevada incidência associado às sementes de Andropogon coletadas em diferentes regiões produtoras agrícolas, trata-se de Curvularia lunata. C. lunata é transmitido para as plantas de Andropogon via semente, sendo patogênico a esta espécie de gramínea forrageira, causando manchas necróticas foliares. / Andropogon L. is a forage grass, widely distributed in Cerrado areas and with prolonged drought periods. It presents dense characteristics with large clumps and with plumose inflorescence, with high capacity in the seeds dissemination. In turn, seeds are considered the main sources of shelter and transport of pathogens to disease-free areas. In Tocantins, there are no studies records relate the fungi incidence in Andropogon grass seeds as diseases cause in agricultural importance crops. Likewise, there is no research about the transport, transmissibility and pathogenicity of fungi associated with their seeds. The work aim was evaluate the sanitary quality of Andropogon grass seeds, the fungi transmission by seed-seedlings and the fungis pathogenicity to other species plants of agricultural importance, and also perform the Curvularia sp. morphological and molecular characterization, isolated from Andropogon grass seeds. The experiments were conducted at the Phytopathology Research Laboratory, Biologic Control of Disease Laboratory and green house of Tocantins Federal University. In chapter 1, the blotter test method was used to evaluate seed health with and without disinfestation. The fungi incidence was evaluated from seeds individual analysis using stereoscopic and optical microscope. The seeds germination was evaluated after 10 days after test installation, together with the fungi identification associated with non-germinated seeds. For the detected fungus in the sanitary analysis was evaluated the transmission capacity of seed-seedling. The fungi pathogenicity from the Andropogon seeds grass was evaluated by inoculation in the plant itself and was also evaluated the ability of these fungi to infect other plants of economic interest. In chapter 2, the morphological identification was performed from macro and micromorphological observations using as basis the characteristics described in literature regarding the aspect of the colony and conidia of Curvularia sp. Molecular characterization was performed from DNA extraction, amplification and sequencing gene Clg2p region. Transmission was evaluated from seed sowing whitout treatment with fungicides, where at the end of 40 days typical leaf spot symptoms of Curvularia. The pathogenicity was evaluated from the inoculation of conidia suspension on leaves of healthy plants, observing at the end 10 days, if there were symptoms of the pathogen. Were identified and quantified in the seeds of Andropogon L. fungi of the genera Alternaria sp., Bipolaris sp., Curvularia sp., Fusarium sp., Phoma sp., Aspergillus sp., Cladosporium sp., Penicillium sp. and Rhizopus sp. The seed disinfestation reduced the fungi present in the seeds. The fungus Curvularia sp. it was transmitted seed to Andropogon plant. Andropogon L. seeds carried and spread fungi the once inoculated caused infection in the plant itself and other economically important crops, such as rice, cowpea, watermelon, melon, corn, sorghum and grasses marandu, mombaça, piatã and quicuia. Based on morphological and molecular markers, the fungus identified with high incidence associated with Andropogon seeds collected in different agricultural producing regions, is Curvularia lunata. C. lunata is transmitted to plants of Andropogon by seed, being pathogenic to this species of forage grass, causing foliar necrotic spots.