Ces travaux proposent une méthode d’assistance à la sélection des techniques d’assemblage et à l’allocation de tolérances sur les écarts géométriques des composants dans le cadre de l’assemblage de structures aéronautiques composites. Cette méthode consiste à formuler et à résoudre un problème d’optimisation multiobjectif afin de minimiser un indicateur de cout et un indicateur de non-conformité des structures assemblées. L’indicateur de coût proposé prend en compte le coût associé à l’allocation des tolérances géométriques ainsi que le coût associé aux opérations d’assemblage. Les indicateurs de non-conformités proposés sont évalués à partir des probabilités de non-respect des exigences géométriques sur les structures assemblées. Ces probabilités sont évaluées en propageant les tolérances géométriques allouées et les dispersions des techniques sélectionnées au travers d’une fonction appelée Relation de Comportement de l’assemblage (RdCa). Dans le cas de l’assemblage de structures aéronautiques composites, des exigences peuvent porter sur les jeux aux interfaces entre composants. Dans ce cas, la RdCa est évaluée par la résolution d’un problème mécanique quasi-statique non-linéaire par la méthode des éléments finis. Un méta-modèle de la RdCa est construit afin de la rendre compatible avec les méthodes probabilistes utilisées pour évaluer la non-conformité. Finalement, la définition d’un modèle structuro-fonctionnel du produit et d’une bibliothèque de techniques d’assemblage permet de construire un avant-projet de gamme d’assemblage paramétrique. Ce paramétrage permet de formuler le problème d’optimisation multiobjectif résolu à l’aide d’un algorithme génétique. / The purpose of this PhD is to develop a method to assist assembly technique selection and component geometrical tolerance allocation in the context of composite aeronautical structure assembly. The proposed method consists in formulating and solving a multiobjective optimisation problem aiming at minimising a cost indicator and a non-conformity indicator. The cost indicator account for both the cost involved by the geometrical tolerance allocation and the cost associated with the assembly operations. The proposed non-conformity indicators are evaluated according to the probabilities of non-satisfied requirements on the assembled structures. These probabilities are computed thanks to Geometrical Variation Propagation Relation (GVPR) that expresses the characteristics of the product as a function of the geometrical deviation of the components and the dispersion occurring during the assembly. In the case of composite aeronautical structures, the product characteristics can be gaps at interfaces between components. In this case, the GVPR is evaluated by solving a non-linear quasi-static mechanical problem by the mean of the finite element method. A metamodel of the GVPR is built in order to reduce the computing time and to make it compatible with the probabilistic methods used to evaluate the non-conformity. Finally, the use of a structure-functional model of the product together with an assembly technique library allows defining a parametric assembly process plan. The multiobjective optimisation problem built thanks to set of parameters defining the assembly process plan is solved using a genetic algorithm.

Les structures aérospatiales sont de plus en plus légères, ce qui les rend sensibles aux vibrations. Pour ces structures le frottement pourrait fournir plus d’amortissement que les polymères d’une part à cause des températures extrêmes de fonctionnement (<-20°C et >100°C) et d’autre part parce qu’il est plus efficace que les absorbeurs actifs ou passifs à masse ajoutée qui ne sont pas adaptés aux problèmes sur larges bandes de fréquence, qui comprennent plusieurs fréquences propres. Pour que l’amortissement induit par frottement soit efficace, il faut asservir la charge normale aux amplitudes vibratoires. Le premier objectif de la thèse est de définir un coefficient indicateur de la capacité du changement des forces normales de serrage de vis à contrôler les niveaux vibratoires. Ce coefficient sera un outil de dimensionnement des structures réelles à contrôler. Le deuxième objectif est de concevoir des lois de contrôle semi-actif de la force de serrage pour des régimes libre et forcé d’un problème modal à deux degrés de liberté. L’objectif final est de concevoir un dispositif pouvant s’intégrer à une structure assemblée pour contrôler la charge normale dans les liaisons et de tester expérimentalement l’efficacité des lois de contrôle conçues pour une structure académique ou industrielle. Le contrôle des forces de serrage s’effectue avec l’utilisation des patchs piézoélectriques. / Because of their lightness the aerospace structures are vulnerable to vibrations whose the amplitudes need to be mitigated through the active and the semi active methods. For extreme temperatures (<20oC and > 100oC), Coulomb friction might provide more structural damping than polymers. Nevertheless, there is a consensus to say that these friction-damping values are often lower than 5%. Moreover friction damping is amplitudedependent. Therefore, engineers have to tune the normal load in order to get the maximum damping for the average vibration level. The first objective of the thesis is to define a coefficient indicator of the ability of the tightening force to control the vibration levels. This coefficient is a design tool of real structures witch need controlling. The second objective is to design semi-active control laws of the clamping force for free and forced modal problem of two degrees of freedom. The ultimate goal is to design a device that can be integrated to an assembly structure for controlling the normal load in the joints and then experimentally test the effectiveness of the laws control for an academic or an industrial structure. The tightening control forces is effected with the use of piezoelectric patches.

En cinématique il n'existe aucune méthode permettant de générer les conditions d'assemblage sous forme symbolique pour les systèmes de solides, éventuellement surcontraints. En revanche il existe un grand nombre de formules permettant- en principe - de calculer la mobilité. Les noms de Kutzbach, Grübler et Tchebytcheff sont associés à différentes formules bien connues mais aucune formule infaillible n'a jamais été trouvée. C'est ce qui motive notre proposition de méthodes numériques et symboliques constructives. Celles-ci permettent de générer automatiquement les conditions d'assemblage et de mobilité à partir de la connaissance des équations de fermeture des boucles de solides. Les méthodes numérique et symbolique présentées dans cette thèse se basent sur un socle commun. Elles utilisent les paramètres de Denavit-Hartenberg et les classent en deux catégories: la première catégorie, notée u pour usinage, représente les dimensions géométriques des solides, la seconde, notée m pour mobilité, représente les paramètres de position relative de deux solides en contact. Ensuite, les équations de fermeture sont obtenues par une méthode ``coordinate free'' à partir d'une matrice de Gram. C'est à cette étape que les deux méthodes diffèrent. Dans le cas de l'analyse numérique locale, le système d'équations est linéarisé. La décomposition en valeur singulière est utilisée pour l'élimination des paramètres. Nous obtenons ensuite les conditions d'assemblage dans un voisinage de la configuration initiale. Les conditions de mobilité sont calculées à partir des conditions d'assemblage issues d'un nombre fini de configurations. Dans le cas de l'analyse symbolique, nous calculons formellement la base de Gröbner associée aux équations de fermeture et cela grâce à l'algorithme FGb de Faugère. Il existe peu de références sur l'utilisation des Bases de Gröbner en cinématique, et aucune ne présente une analyse exhaustive du problème. Avec l'ordre lexicographique, nous ne gardons que des paramètres u et éliminons tous les autres. Lorsque ces relations en u sont vérifiées, elles représentent les conditions d'assemblage, dites relations de surcontraintes. Cet ensemble peut être vide lorsque le système est isocontraint. Pour générer les conditions de mobilité, nous gardons tous les u et un paramètre de mobilité. En annulant les coefficients en facteur de ce paramètre de mobilité, un nouveau système qui ne dépend que de u est construit. Les conditions de mobilité sont obtenues en calculant la base de Gröbner du nouveau système. Pour atteindre les résultats désirés, nous avons également proposé deux outils: saturation et contrainte. Ils permettent de parcourir un sous-ensemble de solutions représentées par une base de Gröbner. La confrontation des résultats obtenus dans la thèse avec ceux de la littérature, pour quelques de mécanismes connus, permet d'affirmer la validité et la complétude de la méthode. / In mechanical kinematics analysis, no generic method allows to generate symbolic assembly conditions for mechanisms with rigid bodies (especially for overconstrained mechanisms). However, many formulas can help to compute mobility. Kutzbach, Grübler and Tchebitcheff are associated to different formulas but none of them works in every case. For this reason, we propose generic numerical and symbolic methods in order to obtain assembly and mobility conditions from closed-loop equations. The numerical and symbolic methods presented in this thesis have the same starting point. They both use Denavit-Hartenberg parameters. These parameters are divided into two types : the first is called u, representing geometric dimensions of rigid bodies ; the second type is called m (for parameters of mobility), representing the relative motion between two rigid bodies in contact. First of all, closed-loop equation are written using a coordinate free method based on Gram matrix. After this step, the two methods differ. In case of numerical analysis, the system of equations is linearized. The Singular Value Decomposition is used to eliminate parameters. We then compute assembly conditions in the neighborhood of the initial configuration. Mobility conditions are computed based on assembly conditions which result from a finite number of configurations. In case of symbolic analysis, we calculate the Gröbner basis associated with closed-loop equations in order to eliminate parameters of mobility. There are few references talking about the application of Gröbner basis in kinematics analysis. None of these references provides a well explained analysis of kinematics problem. Since we have been collaborating with Mr. Faugère, we use the package “FGb” for the elimination of parameters of mobility. With a specified order, relations between the u parameters could be computed by eliminating the m parameters. When verified, these relations are assembly conditions, also named over-constrained assembly conditions. This set of relations may be empty when the studied system is iso-constrained. To generate mobility conditions, one has to keep all u parameters and only one parameter of mobility. When mobility parameter’s coefficients vanish, the mechanism is mobile with 1 degree of freedom. To determine two kinds of conditions, we propose also two tools : saturation and constraint. They allow browsing a subset of system’s solutions which is represented by a Gröbner basis. Since our results are identical to the ones found in literature, our method is valid and complete.

Dans le contexte économique actuel, il faut proposer des produits personnalisés dequalité, à faible coût et dans des délais de plus en plus courts. La société MABI a choisi devoir chacune de ces contraintes comme une opportunité de repenser ses produits en misantsur l’innovation. Il faut alors optimiser certaines tâches routinières d’ingénierie afin dedégager du temps pour la conception des nouveaux produits. Le travail de recherche réalisés’inscrit dans le cadre d’une thèse en convention CIFRE en partenariat entre la société MABIet le laboratoire IRTES-M3M de l’UTBM. MABI conçoit, assemble, commercialise et assurele service après-vente de produits propres dans le domaine de la protection et la rénovationdes bâtiments. Ses besoins d’amélioration concernent le processus de développement deproduits qui doivent répondre aux besoins des clients tout en respectant des contraintesd’assemblage spécifiques à l’entreprise. La finalité industrielle de la thèse consiste à décliner au niveau du domaine du« Produit », la méthodologie générique élaborée sur la base de notre travail de recherchescientifique. A ce niveau, notre problématique scientifique consiste à rendre opérationnel etdynamique le modèle Multi-Domaines et Multi-Vues (MD-MV), structuré de manière «plutôtstatique», en y apportant des éléments de raisonnement contribuant à créer des interactionsinter-domaines et inter-points de vue. Pour ce qui est du domaine du « Produit », il endécoule la méthodologie FARD (Functional And Robust Design) qui vise à concevoir et àgénérer rapidement l’ensemble des variantes de produits d’une même famille modulaire touten assurant le respect des besoins clients (conception fonctionnelle) et des contraintesd’assemblage à travers une aide à la décision pour le choix de la séquence d’assemblage,contribuant ainsi à créer une interaction dynamique avec le domaine du « Process ». Quatrethèmes de recherche sont abordés : la modularité, la conception fonctionnelle, la conceptionpour l’assemblage (dès les phases amont du processus de conception) et la simulation(accélérée grâce au paramétrage du maillage). Habituellement, le domaine de la modularitéest souvent associé à celui de la conception fonctionnelle ou encore à celui de la conceptionpour l’assemblage, mais rarement les trois ensemble, ce qui constitue la spécificité de nostravaux. Enfin, l’aspect paramétrique de la méthodologie FARD, à travers les liens établisentre les quatre thèmes de recherche évoqués précédemment, rend possible la générationrapide des produits d’une même famille à partir d’un produit générique et ainsi de gagner dutemps de conception, en vue d‘atteindre nos objectifs de conception routinière « HautementProductive ». Trois cas d’études industriels et académiques illustrent l’application et lafaisabilité la méthodologie FARD... / In current economic context, enterprises must provide quality custom products at alower cost and a shorter delay. MABI Company chose to consider these constraints as anopportunity to rethink its products through innovation. Then certain routine tasks must beoptimized to free up time in order to have more time to innovate and design new products.This thesis is part of a CIFRE partnership between the MABI Company and the IRTES-M3Mlaboratory at UTBM. MABI designs, assembles, sells and provides after-sales service ofproducts in the field of the protection and the renovation of buildings. MABI needs ofimprovement are in the development process of its products that must meet customer needs,while respecting its assembly constraints.The industrial purpose of the thesis is to decline in the Product domain, the genericmethodology developed on the basis of our scientific research work. At this level, ourscientific problematic is to make operational and dynamic the Multi-Domains and Multi-Viewsdesign model (MD-MV), structured in a "rather static" way, and to enriched these models byadding reasoning procedures. It follows the FARD methodology (Functional And RobustDesign) which aims to design and quickly generate variants of a modular product family whileensuring compliance with customer requirements (functional design) and assemblyconstraints. Four domains are covered: modularity, functional design, design for assembly (atthe early stages of the design process) and simulation (accelerated through theparameterisation of the mesh). Usually the domain of modularity is often associated withfunctional design or with the design for assembly, but rarely the three together, thatconstitutes one of our added values. Finally, the parametric aspect of the FARDmethodology, that is the link between the four domains, allows accelerated the generation ofproducts of the same family from a generic product and thus saving design time to achieveour goal of "High Productive" routine design. Three industrial and academic case studiesillustrate the application and the feasibility of the FARD methodology...

Lors d’une infection chronique, le virus de l'hépatite C (HCV) circule sous forme de lipoviroparticule (LVP) : particules hybrides associant des composants viraux (ARN, les protéines structurelles) et des composants cellulaires (apolipoprotéines, cholestérol). Au cours de ma thèse, nous nous sommes intéressés à identifier la plateforme d'assemblage du HCV, et le rôle du rassemblement des protéines virales par NS2 dans sa formation. Nous avons montré que des interactions de natures différentes sur la membrane du RE sont impliquées dans cette association protéique. Nos résultats suggèrent que des interactions complexes (directes ou via des « membranes résistantes aux détergents » (DRM)) entre les protéines complexées par NS2, peuvent immédiatement précéder la formation LVP. Nous avons également démontré que l’hétérodimère E1E2, les apolipoprotéines B et E (ApoB, ApoE) s’associent en un complexe de protéines dans le réticulum endoplasmique (RE) lorsqu'elles sont exprimées ensembles. Ce complexe se forme au début de l'assemblage du HCV, quelle que soit l'expression des autres protéines virales, et est conservée sur les LVP sécrétées. Basé sur ces données, nous avons proposé un mécanisme expliquant l’initiation de la morphogenèse des LVP. Ensuite, nous avons évalué l'importance de l'association E1E2/ApoE pour le cycle de vie du virus. Nous avons initié une étude pour identifier les acides aminés E1E2 impliqués dans l'interaction avec les apolipoprotéines. Avec ces données, nous souhaitons proposer une meilleure compréhension des mécanismes de la morphogenèse du HCV. / In chronic infection, the hepatitis C virus (HCV) circulates as lipoviral particles (LVP): hybrid particles associating viral (RNA, structural proteins) and cellular components (apolipoproteins, cholesterol). During my PhD, we were interested in identifying the HCV assembly platform, and the role of the association of the viral proteins by NS2 during its formation. We showed that different natures of interactions on the ER membrane are involved in this proteic association. Our results suggest that a complex interplay between proteins of the complex formed by NS2, directly or through “detergent resistant membranes” (DRMs) may be immediately followed by LVPs formation. We also demonstrated that E1E2 heterodimer, apolipoproteins B and E (ApoB, ApoE) associate as a protein complex in the endoplasmic reticulum (ER) when expressed together. This complex is formed early in HCV assembly, regardless the expression of other viral proteins, and is conserved on the secreted LVPs. Based on these data, we proposed a mechanism explaining LVP morphogenesis initiation. Then we assessed the importance of E1E2/ApoE association for viral life cycle. We initiate a study to identify the E1E2 amino acids involved in the interaction with apolipoproteins. With these data, we wished to provide a better understanding of the mechanisms of the HCV morphogenesis.

La géométrie d'une pièce fabriquée réelle diffère de la pièce virtuelle de CAO (Conception Assistée par Ordinateur. Cette différence est due à la somme des écarts inhérents à la fabrication. L'objectif de ce travail est d’introduire des pièces virtuelles ayant des défauts de forme (Skin Model Shape) dans les applications d'ingénierie afin de répondre aux exigences croissantes de l'industrie en matière de gestion de la qualité de la géométrie des produits. Les travaux traitent de divers aspects, particulièrement de la génération de défauts de forme, de la simulation d'assemblage et de la métrologie virtuelle.Les méthodes permettant de générer des défauts de forme sur des surfaces simples sont analysés et classées. En raison des défauts de forme, la combinaison de surfaces simples pour générer une pièce entière induit une incohérence géométrique au niveau des arêtes. Une méthode globale basée sur les éléments finis et une méthode locale basée sur le lissage local de maillage sont utilisées pour résoudre ce problème.Pour prédire l'écart des caractéristiques fonctionnelles, la simulation d'assemblage est effectuée en utilisant des surfaces avec défauts de forme. Une approche est développée sur la base de la condition de complémentarité linéaire et du torseur de petits déplacements pour prendre en compte les conditions aux limites de l'assemblage, telles que les déplacements et les charges.Des méthodes pour évaluer les écarts sur les modèles de surfaces avec défauts de forme sont également étudiées. Les spécifications sur le produit sont exprimées avec GeoSpelling et évaluées à l'aide du torseur de petits déplacements. Les méthodes développées sont intégrées dans un laboratoire virtuel pour l'apprentissage en ligne.Les études susmentionnées complètent et étendent les méthodes de gestion des tolérances basées sur GeoSpelling et le « skin » modèle. / The geometry of a real manufactured part differs from the virtual workpieces designed in Computer Aided Design (CAD) systems. This difference is due to the accumulation of unavoidable manufacturing deviations. The objective of this work is to implement virtual workpieces with form defects (Skin Model Shape) in engineering applications to meet the industry’s increasing demands in product geometry quality management. Various aspects are covered here, in particular form defect generation, assembly simulation and virtual metrology.Methods to generate form defects on simple surfaces are reviewed and classified. Due to form defects, the combination of simple surfaces to generate a whole part led to inconsistency on the edges. A global FEA-based method and a local mesh smoothing based method are used to overcome this issue.To predict the deviation of functional characteristics, assembly simulation is conducted using skin model shapes. An approach is developed based on the Linear Complementarity Condition and the Small Displacement Torsor to take into account assembly boundary conditions, such as displacements and loads.Methods to evaluate deviation values on skin model shapes are also studied. Product specifications are expressed with GeoSpelling, and evaluated using the Small Displacement Torsor method. The developed methods are integrated into an online Virtual Laboratory for e-learning.The above-mentioned studies complement and extend the tolerance management methods based on GeoSpelling and skin models.

Les zones humides sont des écosystèmes dynamiques en perpétuel changement, dans le temps et dans l'espace et demeurent parmi les plus menacés au monde. Ce travail de thèse est une contribution à la connaissance et la conservation des zones humides. Nous avons étudié la végétation de différents milieux, appartenant à un réseau de zones humides de Gironde, allant des landes humides aux prairies alluviales. Nous les avons choisies pour leur intérêt patrimonial et les enjeux de gestion qu'elles représentent dans le département. Nous avons utilisé plusieurs approches descriptives et expérimentales. La première partie vise à étudier l’organisation des communautés des deux grands systèmes, les landes humides et les prairies alluviales, le long de gradients environnementaux. Dans un deuxième temps, une approche combinant données anciennes et récentes, nous a permis de caractériser les changements de végétation à long terme selon différentes stratégies d’étude de la végétation. La troisième partie, par une approche expérimentale a été conduite sur une communauté végétale à fort enjeu patrimonial : les prairies à Molinie (code 6410 de la Directive Natura 2000). Cette troisième partie a permis de mettre en évidence la part respective des filtres stochastiques (dispersion de graines) et déterministes (compétition) dans une communauté soumise à de fortes contraintes environnementales (inondation). Enfin, dans une analyse prospective, nous avons considéré les enjeux de biodiversité ainsi que les services écosystémiques, cette fois, à l'échelle du département. Cette analyse envisage les outils à développer pour une approche multi-taxon et multi-services sur l'ensemble des zones humides de Gironde. L’ensemble de ce travail a permis de construire un dispositif de suivi de la biodiversité végétale au niveau départemental. Les résultats de ce travail contribuent aujourd’hui à considérer la gestion de ces communautés végétales de façon intégrée et proposent des outils d’aide à la décision pour la gestion de ces espaces. / Wetlands are dynamic ecosystems, constantly changing in time and space, and remaining among the most threatened ecosystems in the world. This thesis contribute to wetland knowledge and conservation. We studied the vegetation of different communities belonging to a network of wetlands in Gironde and ranging from wet heathlands to alluvial meadows. Wetlands were selected from the department council historical interest and management issues. We used several descriptive and experimental approaches. The first part aims to study the organization of the communities of the two major systems, heathlands and alluvial grasslands, along environmental gradients. Then, in a second time, an approach combining old and recent data allowed us to characterize long-term vegetation changes according to different strategies of vegetation study. The third part was conducted on a plant community with a strong conservation issue: Molinia caerulea wet meadow (Code 6410 of the Natura 2000 Directive) with an experimental approach. We highlight here the importance of stochastic filters (seed dispersion) and deterministic filters (competition) in a community controlled by environmental constraints (flooding). Finally, within a prospective analysis, we considered biodiversity issues and supply in ecosystems services at the departmental level. This analysis investigate tools to develop for a multi-taxon and multi-service approach in any Gironde wetlands. This work allowed us to create a monitoring device for plant biodiversity in the department. These results lead to consider nowadays the management of these plant communities in an integrated way and offer tools of decision support for the management of these communities.

Dans le contexte actuel marqué par l’instabilité des marchés, les clients sont de plus en plus exigeants. un client qui n’est pas approvisionné à une date souhaitée peut soit remettre son achat à plus tard, soit aller chercher le produit chez un concurrent. de plus, l’entreprise doit faire face à de multiples imprévisibilités internes, de la concurrence ou d’événements extérieurs. ces aléas induisent de l'incertitude dans la planification de la production et génèrent des sources nombreuses de retard, de désynchronisation et de pertes de productivité. ce travail de thèse s’intègre dans la problématique de la planification de la production dans un environnement incertain. nous étudions des problèmes de la planification des réapprovisionnements pour un système d’assemblage à plusieurs niveaux, quand les délais d’approvisionnement sont incertains. nous avons choisi comme indicateur de performance l’espérance du coût total moyen qui est égal à la somme du coût de stockage des composants, le coût de rupture du produit fini et le coût de stockage du produit fini. des propriétés théoriques, des modèles analytiques ainsi que des méthodes d’optimisation ont été proposés. nous avons montré que la résolution du problème ne dépend pas seulement de la méthode de résolution et du nombre de niveaux, mais aussi du coût de rupture en produit fini et de la structure du système d’assemblage. / In the current industrial context, the offer is largely higher than the demand. Therefore, the customers are more and more exigent. To distance themselves, companies need to offer to their customers the best quality products, the best costs, and with controlled lead times as short as possible. Last years, the struggle for reducing costs was accentuated within companies. However, stocks represent an important financial asset, and therefore, it is essential to control them. In addition, a bad management of stocks led either to delays in delivery, which generate additional production costs, either to the unnecessary inventory. The latter one can occur at different levels (from components at the last level to finished product), it costs money and immobilize funds. That is why, planners have to look for efficient methods of production and supply planning, to know exactly for each component, and when to order and in which quantity.The aim of this doctoral thesis is to investigate the supply planning in an uncertain environment. We are interested in a replenishment planning for multi-level assembly systems under a fixed demand and uncertainty of components lead times.We consider that each component has a fixed unit inventory cost; the finished product has an inventory cost and a backlogging cost per unit of time. Then, a general mathematical model for replenishment planning of multi-level assembly systems, genetic algorithm and branch and bound method are presented to calculate and to optimize the expected value of the total cost which equals to the sum of the inventory holding costs for the components, the backlogging and the inventory holding costs for the finished product. We can state by the different results that the convergence of the GA doesn't depend only on the number of components in the last level but also on the number of levels, the type of the BOM and the backlogging cost for the finished product.

Plusieurs études ont permis la caractérisation de la structure et de la fonction du ribosome. En ce qui attrait à la biogénèse du ribosome, nombreux aspects restent à être découverts et compris de façon plus dynamique. En effet, cette biogénèse englobe une variété de voies de modifications et d’assemblages requises pour la maturation des ARNr et pour leurs liaisons avec les protéines ribosomales. De ce fait, les protéines Noc ont été caractérisées comme des facteurs d’assemblages et ont permis la découverte d’une des premières indications sur l’ordre spatio-temporel de la maturation du ribosome. Ainsi, en utilisant la levure comme modèle, notre objectif est d’étudier d’avantage l’échange des complexes composés des protéines Noc ainsi que leur localisation intranucléaire. Ainsi, la nature des interactions de Noc2p avec Noc1p et Noc3p et l’influence de l’arrêt du transport intranucléaire ont été étudiés en utilisant des promoteurs inductibles, la microscopie à fluorescence, des immunobuvardages, qRT-PCR et des purifications par affinité. / Several studies have been performed to characterize the ribosome as far as to understand its structure and its function. However, major aspects of ribosome biogenesis remain elusive or gave only a static picture of the process. In fact, ribosome biogenesis involves dynamic processing and assembly pathways that are required for rRNA modification and folding, in addition to rRNA binding with some ribosomal proteins. One set of assembly factors, the Noc proteins, allowed one of the first indications about the spatio-temporal ordering of ribosome maturation. By using yeast as model, our objective is to provide a dynamic picture of the Noc proteins complexes exchange and nuclear localization by determining the nature of Noc2p interactions with Noc1p and Noc3p and by studying the influence of reversibly arrested intranuclear transport on these proteins and on Rix7p, an AAA-ATPase. In order to achieve these aims, inducible promoter, fluorescent microscopy, western blot, qRT-PCR and affinity purification analyses were used.

La protéine Bcd1 est un facteur nucléaire essentiel à la viabilité cellulaire de la levure Saccharomyces cerevisiae. Il est décrit comme requis pour assurer la stabilité des snoRNA à boîtes C/D. Ces petits ARN non codants s’assemblent à un jeu de 4 protéines invariables pour former les snoRNP à boîtes C/D qui sont des acteurs cruciaux de la biogenèse des ribosomes. En effet, quelques-unes de ces particules participent aux mécanismes assurant la maturation du précurseur des ARN ribosomiques et la grande majorité des autres particules sont des catalyseurs de la modification par 2’-O-méthylation des riboses. Bcd1p n’est pas présente au sein des particules matures, mais fait partie de ses facteurs d’assemblage, au même titre que les sous-complexes Rsa1p:Hit1p et R2TP (Rvb1p:Rvb2p:Tah1p:Pih1p). Notre analyse de différents fragments de Bcd1p a dans un premier temps montré que sa région N-terminale (résidus 1 à 96) suffit à lui conférer son caractère essentiel. Cette région comprend un domaine à double doigt à zinc de la famille zf-HIT, également présent chez un autre facteur d’assemblage des snoRNP à boîtes C/D, la protéine Hit1. Nous avons résolu la structure 3D en solution de ces doigts à zinc et montré que ce sont des modules d’interaction avec les protéines Rvb1/2. Dans un second temps nous avons identifié la région C-terminale (résidus 120 à 303) de la protéine Bcd1 comme étant suffisante pour interagir avec la chaperonne d’histone Rtt106p. La structure 3D en solution de ce domaine a été déterminée par RMN. Différentes approches de cinétique d’échange hydrogène/deutérium et d’expériences de cross-link suivies par des analyses par spectrométrie de masse, des expériences de titrage par RMN et de SAXS nous ont permis d’obtenir des informations sur les surfaces d’interaction de chacune de ces deux protéines. Un fragment, défini à partir des données de RMN de Bcd1p libre, nous a permis d'obtenir des cristaux du complexe Bcd1p:Rtt106p ouvrant la perspective de résoudre sa structure 3D par diffraction aux rayons X. De plus, des études fonctionnelles ont débuté visant à déterminer l’importance de la formation de ce complexe sur la biogenèse des snoRNP à boîtes C/D et l’impact de Bcd1p sur l’interaction entre Rtt106p et les nucléosomes / The protein Bcd1 is a nuclear factor essential for the cellular viability of the yeast Saccharomyces cerevisiae. It is described as required to ensure box C/D snoRNA stability. These small non-coding RNAs associate with an invariable set of 4 proteins to form the box C/D snoRNPs that are crucial players in ribosome biogenesis. Indeed, some of these particles participate in mechanisms for the maturation of the ribosomal RNA precursor (prerRNA) and the vast majority of the other particles are catalysts of 2’-O-methylation of riboses. Bcd1p is not present in mature particles, but is one of the assembly factors in addition to the Rsa1p:Hit1p and R2TP (Rvb1p:Rvb2p:Tah1p:Pih1p) sub-complexes. Our analysis of the different Bcd1p fragments has firstly shown that the essential function of Bcd1p relies on its N-terminal region (residues 1 to 96). It comprises a double zinc finger domain from the zf-HIT family, also present in another box C/D snoRNP assembly factor, the protein Hit1. We solved the 3D solution structure of these two zinc fingers and showed that these are modules for the interaction of Bcd1p with the Rvb1/2 proteins. Secondly, we identified the C-terminal region (residues 120 to 303) of Bcd1p as being sufficient to interact with the histone chaperone Rtt106p. The 3D solution structure of this domain of Bcd1p was determined by NMR. Different approaches of hydrogen/deuterium kinetic exchange and cross-link experiments followed by mass spectrometry analysis, NMR titration, and SAXS allowed us to obtain information about the interaction surfaces on each of the two proteins. A fragment defined from NMR data on the free Bcd1p allowed us to obtain crystals of the Bcd1p:Rtt106p complex, opening the perspective to solve its 3D structure by X-ray diffraction. Furthermore, functional studies started in order to determine the importance of this complex formation in box C/D snoRNP biogenesis and the impact of Bcd1p on the interaction of Rtt106p with nucleosomes