Submitted by MARCOS LEANDRO TEIXEIRA DE OLIVEIRA (marcosteixeira@ufv.br) on 2019-01-17T10:40:41Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2983647 bytes, checksum: fd9291c53138df218d7d2c64e2d2d841 (MD5) / Made available in DSpace on 2019-01-17T10:40:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2983647 bytes, checksum: fd9291c53138df218d7d2c64e2d2d841 (MD5) Previous issue date: 2018-07-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Analisando o processo de transmissão de herança, percebe-se que tradicionalmente, entre agricultores familiares, a herança corresponde à terra e, em geral, é passada para um único filho homem que será o sucessor e assegurará a continuidade da exploração agrícola e a manutenção do grupo familiar. Com isso, as mulheres, normalmente, são excluídas do processo de partilha da herança. Sendo assim, o objetivo geral desta pesquisa constitui-se em analisar, por meio de uma perspectiva de relações de gênero, as representações de mulheres e homens ítalo-descendentes, envolvidos em atividades de agroturismo, sobre o processo de transferência de herança em suas respectivas famílias. O estudo foi realizado no município de Venda Nova do Imigrante que está situado na região serrana do Espírito Santo. Os participantes foram mulheres e homens ítalo- descendentes envolvidos em atividades de agroturismo. Optou-se por conjugar a observação participante e a entrevista como métodos de geração de dados. Assim, inicialmente foi realizada uma observação participante das atividades desenvolvidas na propriedade com o objetivo de conhecer um pouco da rotina dos participantes da pesquisa. Posteriormente, foram realizadas as entrevistas, sendo uma direcionada à pessoa que recebia os turistas e outra dirigida ao proprietário legal da terra. Para a análise dos dados gerados foi realizada uma análise descritiva e, em seguida, análise discursiva, que consistiu na realização de Análise de Discurso Crítica (ADC). Foram 19 propriedades participantes e 32 entrevistas realizadas, sendo 11 com pessoas responsáveis pela recepção do turista, 13 proprietários legais da terra e 8 pessoas que se enquadravam nas duas situações. Observou-se que a terra, muito além de possuir valor material, era valorizada como um bem associado à memória e ao sobrenome da família. O trabalho de recepcionar o turista era destinado às mulheres, enquanto os proprietários legais da terra, em sua maioria, eram homens. O perfil dos 32 entrevistados era de pessoas com idade entre 45 e 59 anos, casadas e com 2 ou 3 filhos. A produção predominante dos entrevistados se refere ao agroturismo, seguida das atividades agrícolas. O trabalho dentro da propriedade era dividido de acordo com o gênero, pois as mulheres eram responsáveis pelo agroturismo, e os homens, pelas atividades agrícolas. Todos os homens entrevistados receberam herança dos respectivos pais assim como a maioria das mulheres. Todavia, todos os homens receberam a herança em forma de terras, já as mulheres receberam diversas variações de herança, entre elas uma máquina de costura e um enxoval. Assim, notou-se que os homens tinham prioridade na partilha da herança instrumental. Notou-se que a partilha e transmissão de herança é um processo permeado por contradições entre a situação ideal e a real, pois a herança deixa de ser uma prática jurídica e passa a ser construída por uma prática econômica baseada na tradição do direito adquirido por meio do trabalho na terra. Pautando-se na tradição sustentada pela moral patriarcal, mulheres e homens justificam e atenuam as desigualdades geradas pela partilha de herança desigualitária. Os conflitos são marcados pela tentativa das mulheres de transgredir a tradição e a imposição dos homens às práticas de partilha desigualitária. O agroturismo representa um fator de empoderamento feminino no sentido de proporcionar independência financeira, pois as mulheres geriam o empreendimento e controlavam os gastos e lucros gerados por esta atividade. Ademais, o agroturismo proporcionou reconhecimento social, respeito entre os familiares e a ampliação dos contatos sociais e amizades. Entretanto, o agroturismo não é um fator de inclusão das mulheres na partilha da herança. Esta inclusão depende de outros fatores relacionados ao valor simbólico da terra e ao direito adquirido. Neste estudo, percebeu-se que a família não atua como instância de redistribuição de renda e proteção de seus membros. Por meio de transferências de herança realizadas de forma desigual, sendo as mulheres preteridas em relação aos homens, as famílias não só deixavam de proteger todos seus membros e minimizar as condições precárias destes, como também reforçavam e aumentavam as desigualdades sociais entre eles. No município de Venda Nova do Imigrante as desigualdades promovidas pela distribuição de herança com base em tradições patriarcais determinaram a condição socioeconômica de várias gerações. / Inheritance transmission among family farmers usually considers the transmission of land, which is often passed to only one male child, who will be the successor and the one to ensure the continuity of the agriculture exploration and the maintenance of the family group. In such case, women are usually excluded from the process of inheritance sharing. The overall objective of this research was to analyze, through a perspective of gender relations, the representations of Italian-Brazilians, both women and men, involved with agrotourism on the process of inheritance transmission in their families. The study was carried out in Venda Nova do Imigrante, located in the mountain region of Espírito Santo. The participants were Brazilian women and men of Italian descent involved with agrotourism. The participant observation method was conjugated with interviews for data collection. A participant observation of the activities developed in the property was carried out with the objective of learning about the routine of the research participants, followed by the interviews. One type of interview was directed to the person who hosted the tourists, and another was directed to the legal landowner. For data analysis, a descriptive analysis was carried out, followed by a discursive analysis, which consisted of a Critical Speech Analysis (CSA). There were 19 participant properties and 32 interviews were carried out, with 11 people responsible for hosting the tourists, 13 legal landowners and 8 people that fit both situations. It was observed that the land was considered an asset associated to the family's memory and name, much more than just for its material value. The activity of hosting the tourists was destined to the women, whereas the legal landowners were mostly men. The 32 interviewees were people between 45 and 59 years old, married, with 2 or 3 children. The predominant production of the interviewees is agrotourism, followed by agriculture. The labor within the property was divided according to the gender: women were responsible for agrotourism and men were responsible for agriculture. All interviewed men received inheritance from their parents, as well as most of the women. However, all men inherited land, whereas women received different variations of inheritance, such as a sewing machine and household items. Also, men had priority in the sharing of instrumental items. The sharing and transmission of inheritance is a process surrounded by contradictions between the ideal and the real situation, since it is not simply considered a legal matter, but it is constructed by an economic practice based on the tradition of the vested right, given by the labor in the land. Considering the tradition supported by the patriarchal morality, women and men justify and attenuate the inequalities generated by the unequal sharing of inheritance. The conflicts are marked by the attempt of women to transgress the tradition and imposition of men to the practices of unequal sharing. The agrotourism represents a factor of female empowerment and a way to provide financial independence, since women are managing the activity and controlling its expenses and profits. In addition, the agrotourism provided social recognition, respect among family members and increase in social contact and friendship. However, agrotourism is not a factor of inclusion of women in the process of inheritance sharing. This inclusion depends on other factors related to the symbolic value of the land and also the vested right. This study showed that the family does not act as an instance of income distribution and protection of its members. By unequally transferring inheritance, with women depreciated with respect to men, families not only do not protect all of its members and minimize their precarious conditions, but also reinforce and increase the inequalities among them. In Venda Nova do Imigrante, the inequalities promoted by the distribution of inheritance based on patriarchal traditions determined the socioeconomic condition of several generations.

Made available in DSpace on 2017-07-10T16:32:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ketlyn Lucyani Olenka.pdf: 1141365 bytes, checksum: cb0b683a1a16ca0d05b2689d26ff5aa0 (MD5) Previous issue date: 2015-11-27 / The table wine plays a fundamental role in the national wine industry as a source of income for small, medium and large producers. In southwestern Paraná, the city that stands out in the production of red table wines is Salgado Filho. However there are few studies about its features. There are many techniques and thousands of research on red wines, however, the technique of Optimized Descriptive Profile (ODP), because it is a recent methodology is not aware of published works, still used it to describe wines. For the wine industry to promote regional and agro-industrial development, it is necessary to know the possibilities and problems, and on this fact, have been able to establish manufacturing processes based on certain criteria for a safe product and proven quality in the physical, chemical and sensory and that they can win the market. The objective is therefore to apply the optimized descriptive profile, characterize the physical and chemical parameters and verify the acceptance of red wines produced in the municipality of Salgado Filho-PR. Also aimed to verify the adequacy of wines with current legislation and correlate the variables of sensory and instrumental measurements. In developing the methodology we used samples of eight different types of red table wines produced in the municipality of Salgado Filho, all prepared with the varietal Claret. To trace the Optimized Descriptive Profile was used the methodology proposed by Silva (2012). It used the acceptance test and purchase intention to analyze the sensory acceptance. The physical and chemical variables were density, alcohol, volatile acidity, total acidity, reducing sugars and sulfates. Data were analyzed by analysis of variance (ANOVA), Tukey test (p = 5%) and Pearson correlation test. The results show that the ODP, the wines differed as to color, acid taste and body and had no significant differences in aroma, sweet taste and astringency, it can be said that red wines analyzed table feature burgundy color and grape aroma with high intensity notes, with medium intensity for sweet taste and sour taste. light-bodied with low astringency. The acceptance there were no significant differences between the samples and all it obtained high acceptance rate. In general, the physical and chemical parameters fulfilled the Identity and Quality Standards established by Brazilian law. Instrumental and sensory variables showed some positive correlations and strong negative that made it possible to verify the importance of using both measures to reduce demand for time and cost of analysis. / O vinho de mesa exerce papel fundamental no setor vinícola nacional, como fonte de renda para pequenos, médios e grandes produtores. No sudoeste do Paraná, o município que se destaca na produção de vinhos tintos de mesa é Salgado Filho. No entanto, há poucos estudos sobre suas características. Existem muitas técnicas e milhares de pesquisas sobre vinhos tintos, porém, a técnica do Perfil Descritivo Otimizado (PDO), pelo fato de ser uma metodologia recente, ainda não se tem conhecimento de trabalhos publicados utilizando-a para descrever vinhos. Para que a vitivinicultura possa promover o desenvolvimento regional e agroindustrial, é necessário conhecer as possibilidades e problemas, e sobre esta realidade, têm-se condições de estabelecer processos de fabricação baseados em critérios determinados para um produto seguro e com qualidade comprovada nos aspectos físicos, químicos e sensoriais e que possam conquistar o mercado. Objetivou-se aplicar o perfil descritivo otimizado, caracterizar os parâmetros físico-químicos e verificar a aceitação de vinhos tintos produzidos no município de Salgado Filho-PR. Ainda, teve como objetivo verificar as adequações dos vinhos com a legislação vigente e correlacionar as variáveis de medidas sensoriais e instrumentais. No desenvolvimento da metodologia utilizou-se amostras de oito diferentes tipos de vinhos tinto de mesa, produzidos no município de Salgado Filho, todos elaborados com a varietal Bordô. Para traçar o PDO foi utilizada a metodologia proposta por Silva (2012). Foram utilizados os teste de aceitação e intenção de compra para analisar a aceitação sensorial. As variáveis físico-químicas analisadas foram a densidade, teor alcoólico, acidez volátil, acidez total, açúcares redutores e dióxido de enxofre livre e total. Os dados foram analisados por Análise de Variância (ANOVA), teste de Tukey (p=5%) e teste de correlação de Pearson. Os resultados demonstram que no PDO, os vinhos se diferenciaram quanto a cor, gosto ácido e corpo e não tiveram diferenças significativas de aroma, gosto doce e adstringência, pode-se dizer que os vinhos tintos de mesa analisados apresentam cor bordô e aroma de uva com notas de intensidade elevadas, com intensidade média para gosto doce e gosto ácido, pouco encorpados e com baixa adstringência. Quanto à aceitação não houve diferenças significativas entre as amostras e todas obtiveram alto índice de aceitabilidade. Em geral, os parâmetros físico-químicos se enquadraram nos Padrões de Identidade e Qualidade estabelecidos pela legislação brasileira. As variáveis instrumentais e sensoriais apresentaram algumas correlações positivas e negativas fortes que possibilitaram verificar a importância da utilização de ambas medidas para reduzir a demanda de tempo e custo das análises.

Le procédé innovant d'hydrodiffusion par micro-onde a été testé et validé pour la fabrication de jus de fruit sur des raisins, abricots et prunes. Ce procédé présente des avantages au niveau technique : rapidité d'extraction, pas de préparation de l'échantillon, aucun auxiliaire de fabrication. Il permet l'obtention de jus à partir de fruits difficiles à presser, avec une pasteurisation " in line " et des produits se différenciant nettement des jus commerciaux par leur couleur et texture.Le jus est expulsé du fruit sous l'effet de la vapeur produite in situ. A partir du fruit congelé, la déstructuration liée à la croissance des cristaux de glace facilite l'extraction. Les rendements le plus élevés sont obtenus à partir de fruits congelés, et à basse puissance. Une partie de l'eau des fruits est convertie en vapeur, mais peut être récupérée en utilisant un réfrigérant, ce qui permet d'atteindre des rendements proches des rendements de jus obtenus avec un prétraitement enzymatique et pressurage. Globalement, le jus a une composition proche de celle du jus présent dans le fruit ou obtenus par pressurage. La composition du jus expulsé des fruits change au cours de l'extraction. La concentration des composés présents dans la chair et hydrosolubles (sucres, acides, acides phénoliques) baisse nettement en fin d'extraction, tandis que les anthocyanes, présentes dans l'épiderme des raisins ou des prunes, montrent un pic de concentration lors de la phase d'expulsion rapide des jus. La teneur en procyanidines est nettement plus élevée que pour des jus obtenus par pressurage

<p>&nbsp / </p> <p align="left">The domesticated apple (<i><font face="TimesNewRomanPS-ItalicMT">Malus </font><font face="TimesNewRomanPSMT">x </font><i><font face="TimesNewRomanPS-ItalicMT">domestica </font><font face="TimesNewRomanPSMT">Borkh.), belonging to the </font><i><font face="TimesNewRomanPS-ItalicMT">Malus </font><font face="TimesNewRomanPSMT">genus of the Rosaceae family, is one of the edible pomaceous fruits. Since it is one of the important commercial fruit crops worldwide, the quality of the fruit is crucial to breeders and farmers as it ultimately determines acceptance of a cultivar for consumption. Fruit quality is also a critical determinant factor that is used to estimate the potential of apples to have a long shelf life. The introduction of marker-assisted selection (MAS) has allowed hastening of traditional breeding and selection of high-quality apple cultivars. The availability of genetic linkage maps, constructed by positioning molecular markers throughout the apple genome, enables the detection and analysis of major genes and quantitative trait loci (QTLs) contributing to the quality traits of a given genotype.&nbsp / herefore, the primary aim of this study was to construct a genetic linkage map of the &lsquo / Golden Delicious&rsquo / x &lsquo / Dietrich&rsquo / population for the identification of QTLs associated with fruit quality traits and then to examine the apple fruit pulp proteome with a specific focus on fruit firmness. In this regard, genomic DNA was extracted from leaves of the &lsquo / Golden Delicious&rsquo / x Dietrich&rsquo / population and used in megaplex PCR reactions. The PCR products were analysed prior to scoring of alleles. Polymorphic markers were then used to construct genetic linkage maps. The genetic linkage maps constructed in this study comprise of 167 simple sequence repeats (SSR) markers, 33 of these were newly developed markers. The 17 linkage groups of apple were constructed and aligned to existing apple genetic maps. The maps span 1,437.8 cM and 1,491.5 cM for &lsquo / Golden Delicious&rsquo / and &lsquo / Dietrich&rsquo / , respectively.</font></i></i></i></p>

<p>&nbsp / </p> <p align="left">The domesticated apple (<i><font face="TimesNewRomanPS-ItalicMT">Malus </font><font face="TimesNewRomanPSMT">x </font><i><font face="TimesNewRomanPS-ItalicMT">domestica </font><font face="TimesNewRomanPSMT">Borkh.), belonging to the </font><i><font face="TimesNewRomanPS-ItalicMT">Malus </font><font face="TimesNewRomanPSMT">genus of the Rosaceae family, is one of the edible pomaceous fruits. Since it is one of the important commercial fruit crops worldwide, the quality of the fruit is crucial to breeders and farmers as it ultimately determines acceptance of a cultivar for consumption. Fruit quality is also a critical determinant factor that is used to estimate the potential of apples to have a long shelf life. The introduction of marker-assisted selection (MAS) has allowed hastening of traditional breeding and selection of high-quality apple cultivars. The availability of genetic linkage maps, constructed by positioning molecular markers throughout the apple genome, enables the detection and analysis of major genes and quantitative trait loci (QTLs) contributing to the quality traits of a given genotype.&nbsp / herefore, the primary aim of this study was to construct a genetic linkage map of the &lsquo / Golden Delicious&rsquo / x &lsquo / Dietrich&rsquo / population for the identification of QTLs associated with fruit quality traits and then to examine the apple fruit pulp proteome with a specific focus on fruit firmness. In this regard, genomic DNA was extracted from leaves of the &lsquo / Golden Delicious&rsquo / x Dietrich&rsquo / population and used in megaplex PCR reactions. The PCR products were analysed prior to scoring of alleles. Polymorphic markers were then used to construct genetic linkage maps. The genetic linkage maps constructed in this study comprise of 167 simple sequence repeats (SSR) markers, 33 of these were newly developed markers. The 17 linkage groups of apple were constructed and aligned to existing apple genetic maps. The maps span 1,437.8 cM and 1,491.5 cM for &lsquo / Golden Delicious&rsquo / and &lsquo / Dietrich&rsquo / , respectively.</font></i></i></i></p>

Doutor -- Escola Nacional de Saude Publica, Rio de Janeiro, 2002.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-06-22Bitstream added on 2014-06-13T18:44:27Z : No. of bitstreams: 1 caetano_ag_dr_jabo.pdf: 1343619 bytes, checksum: 387f2f16ea3939c118f65585ece520a6 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O vírus da Bronquite infecciosa (VBI) é um Coronavírus aviário que infecta aves domésticas de corte e postura, ocasionando grandes perdas econômicas na indústria avícola. Dada a natureza altamente contagiosa e aguda da doença, há uma grande necessidade do desenvolvimento de métodos diagnósticos que possam ajudar na detecção e/ou caracterização de estirpes variantes do VBI. Sendo assim, para auxiliar no diagnostico laboratorial da infecção, foi construída uma biblioteca de fragmentos de anticorpos monoclonais pela técnica de Phage-display. Para tanto, após a imunização de galinhas com a estirpe vacinal H120, foi extraído o RNA total do baço das aves imunizadas e amplificadas as cadeias variáveis leve e pesada que foram unidas por linker, originando o fragmento gênico de cadeia única scFv. Após a realização de três ciclos de seleção foram obtidos 400 clones que foram avaliados em ensaios de ELISA e Western blotting para averiguação da especificidade dos mesmos frente às proteínas da estirpe H120. Após realização dos testes foram selecionados dois clones, um que apresentou grande reatividade para com a proteína de nucleocapsídeo (N) (scFv-N) e o outro com reatividade para com a subunidade 1 da glicoproteína de superfície (S) (scFv-S1). O anticorpo scFv-S1 quando utilizado em ensaio de vírus-neutralização em ovos embrionados mostrou titulo significativo de proteção. Já em testes de ELISA utilizando estirpes de referência e isolados brasileiros de campo do VBI, o anticorpo scFv-N foi capaz de detectar todas as estirpes (H120, M41, Arkansas, IBVPR05, IBVPR02, IBVPR01, IBVSC01), enquanto que o scFv-S1 pode discriminar as estirpes pertencentes ao sorotipo Massachusetts (H120, M41 e IBVSC01) das demais estirpes variantes avaliadas. Os fragmentos de anticorpos scFv-N e scFv-S1 também mostraram bons resultados quando utilizados na técnica... / Infectious bronchitis virus (IBV), the coronavirus of the chicken, is one of the main causes of economic loss within the poultry industry, affecting the performance of meattype and egg-laying domestic fowls. Given the highly contagious and acute nature of the disease, there is an urgent need for the development of diagnostic assays that can detect and/or characterize IBV strains. In order to improve the laboratory diagnosis of IBV infection, phage-displayed recombinant antibody library derived from splenic mRNA of chickens immunized with H120 vaccine strain of infectious bronchitis virus (IBV) was constructed as single chain variable fragments (scFv) by overlap extension polymerase chain reaction (PCR) of the individual heavy (VH) and light (VL) chain variable gene segments. After three rounds of panning selection, ten scFv phage display antibodies of 400 randomly chosen clones were demonstrated to react with IBV antigens by ELISA. The western blot analysis selected two scFv antibodies reacting strongly with nucleocapsid (N) (scFv-N) protein or subunit 1 of spike glycoprotein (S1) (scFv-S1) of IBV. The anti-S1 scFv antibody showed a significant neutralization titre in embryonating chicken egg test. In ELISA analysis using reference IBV strains and Brazilian field isolates, the anti-N scFv antibody was able to detect all strains (H120, M41, ARKANSAS, IBVPR05, IBVPR02, IBVPR01, IBVSC01), while the anti-S1 could discriminate Massachusetts serotype (H120, M41 and IBVSC01) between variant strains. A scFv-based indirect immunoperoxidase (IP) procedure was also applied to detect infectious bronchitis virus (IBV) antigens in formalin-fixed tracheal tissue sections. Thus, the results showed that scFv-N and scFv-S1 antibodies can be used for the detection and differentiation of IBV strains.

Orientador: Isabel Cristina Boleli / Banca: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Banca: Nilce Maria Soares Queiroz Gama / Resumo: O experimento foi realizado com o objetivo de avaliar os pesos corporal (PC), do fígado (PF) e da bursa de Fabrício (PB), o perfil hematológico (eritrograma, leucograma e glicemia), a integridade e o desenvolvimento da mucosa intestinal de pintos de corte de submetidos ao tratamento por exclusão competitiva (EC) antes e após infecção experimental por Salmonella Enteritidis (SE). Foram utilizados 128 pintos, distribuídos num delineamento ao acaso com esquema fatorial 2 x 4 [2 sexos e 4 tratamentos (NI: não infectados com SE; I: infectados com SE; IEC: infectados com SE e tratados com EC 24 h após infecção; ECI: tratados com EC e infectados com SE 24 h após tratamento)]. Os animais foram sacrificados com 1, 3, 5 e 7 dias pós-infecção (dpi) para obtenção do conteúdo cecal (microbiológico), fígado, bursa de Fabrício e fragmentos do intestino delgado. Os dados demonstram que o uso de EC após infecção não evita a colonização cecal por SE, mas que a mesma é evitada quando a EC é realizada antes da infecção. A partir do 7° dpi as aves infectadas apresentaram os menores valores de PC e PB, e não se evidenciou diferenças na glicemia e no PF. As alterações do eritrograma ficaram restritas aos três primeiros dpi e os resultados do leucograma mostraram uma resposta sexo-específica frente à infecção por SE. Em relação à integridade, o presente trabalho mostrou que os vilos do intestino delgado dos pintos de corte apresentam um grande processo de renovação celular ao final da primeira semana de vida e que EC acelera este processo. O desenvolvimento intestinal variou de acordo com o segmento, o sexo, o tratamento e a idade analisada. / Abstract: The present experiment was carried out with the objective to evaluate the weights corporal 0NC), of the liver 0NF) and bursa of Fabrício (WB), the hematology profile (erytrogram, leucogram and glycemia), the integrity and the development of the intestinal mucosa by young chickens submitted to competitive exclusion treatment (CE) before and after experimental infection with Salmonella Enteritidis (SE). 128 young chickens, distributed in completely randomized design in 4 x 2 factorial arrangement [had been used 2 sex and 4 treatments (NI: not infection with SE - Control; I: infection with SE; ICE: infection with SE and treated with CE 24 h after infection; CEI: treated with CE and infection with SE 24 h after treatment)]. The animais had been sacrificed with 1, 3, 5 and 7 days post infection (dpi) for attainment of the cecal content (microbiological), liver, bursa of Fabrício and fragments of the thin intestine. The data demonstrate that the CE use after infection does not prevent the cecal settling for SE, but that the same one is prevented when the CE is carried through before the infection. From 7° dpi the infections birds had presented the lesser values of WC and WB, and it did not prove differences in the glycemia and the WF. The alterations of the erytrogram had been restricted to three first dpi, and the results of the leucogram had shown to a sex-specific reply front to the infection for SE. In relation to the integrity, the present work showed that the vilos of the thin intestine of young chickens present a great process of cellular renewal to the end of the first week of life and that CE speeds up this processo The intestinal development in accordance with varied the segment, the sex, the treatment and the analyzed age. / Mestre

Esta tese alia dois enfoques principais dentro da Química Farmacêutica. Por um lado, busca explorar uma nova fonte de insumos naturais, cascas de Malus  domestica, com vistas a obtenção dos triterpenos ácidos ursólico (AU) e betulínico (AB); e por outro lado, estuda a relação dos derivados triterpênicos semissintéticos obtidos com a proteína-alvo (PfATP6) destacada atualmente na literatura da terapia da malária com vistas ao planejamento de novos antimaláricos. O primeiro Capítulo inclui o desenvolvimento de um método eficiente, fácil e extremamente rápido onde são combinadas as técnicas de extração por ultrassom (UAE) e análise por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência Acoplada a Detector de Espectroscopia de Massas (LC-MS), para identificação e doseamento dos ácidos ursólico (AU) e betulínico (BA) em extratos de cascas frescas de maçã de cinco clones das cultivares Gala e Fuji (“Baigent”, “Fuji Mishima”, “Fuji Suprema”, “Fuji Select” and “Maxi Gala”) oriundas da Região Sul do Brasil. Os parâmetros cromatográficos do método analítico incluem: ionização por eletro spray em modo positivo (ESI+), fluxo de 1,0 mL/min, em modo de eluição isocrático, consistindo de 80% acetonitrila e 20% acetato de amônio 10 mM em pH 6,0 e temperatura ambiente. O método desenvolvido foi validado e mostrou ser seletivo, sensível (LOD e LOQ de 0,087 e 0,266 μg/mL para BA, e 0,398 e 2,117 μg/ mL para UA), coeficiente de regressão linear (r >0.99), preciso, exato e robusto para os analitos de interesse. A otimização do método combinado de UAE com LC-MS permitiu concluir os procedimentos de extração e análise em tempo inferior a 4 h, uma vez que o método não requer a secagem da amostra, etapa que demanda longos tempos de processamento. Este método foi aplicado e forneceu a primeira caracterização fitoquímica dos cinco clones de maçã estudados. Os resultados demonstraram que o método combinado de UAE-LC-MS é adequado às práticas do controle de qualidade. O segundo Capítulo apresenta o estudo da interação dos ligantes semissintéticos derivados dos AU e AB, sintetizados pelo nosso grupo de pesquisa, com a proteína Ca2+-ATPase do Plasmodium falciparum (PfATP6), através do emprego da técnica de Docking Molecular. A PfATP6 é descrita como um importante alvo para novos antimaláricos como Artemisinina (ART), cujo mecanismo de ação inclui, dentre outros, a modulação da homeostasia do cálcio intracelular. Investigações conduziram à hipótese do extravasamento do cálcio, do interior do retículo sarco-endoplasmático como mecanismo plausível para ação dos derivados triterpênicos do AU e AB. Os escores de energia determinados no Docking, de cada um dos nove ligantes (derivados triterpênicos) e quatro compostos de controle (ácidos ursólico e betulínico, artemisinina (ART) e tapsigargina (TPG) foram determinados (análises realizadas em triplicata) e correlacionados com os valores de IC50, para a atividade antimalárica. Os resultados mostraram excelente correlação entre os escores de energia (com a PfATP6) e os valores de IC50, superior a 80% (r > 0,83360). O estudo fornece fortes evidências de que a PfATP6 pode constituir um alvo para os derivados pentacíclicos do estudo, bem como permitiu identificar o perfil conformacional dos ligantes e os principais resíduos do sítio de ligação (SL) da PfATP6 envolvidos nas interações; bem como, contribuiu para a melhor compreensão das propriedades envolvidas na interação do ligante com o receptor e mecanismo de ação. O terceiro Capítulo faz uso de Métodos Clássicos e Quânticos para descrever as mudanças conformacionais da proteína PfATP6. As simulações de Dinâmica Molecular do receptor na forma isolada e complexada com os ligantes foram realizadas durante 10 ns. As conformações finais obtidas para os receptores foram avaliadas em termos RMSD, efeito da presença dos ligantes no sítio de ligação e tipos de interações estabelecidas entre o ligante e o receptor. Os resultados mostraram que as proteínas PfATP6 e SERCA tendem a manter sua conformação nativa e que o modelo utilizado é adequado aos propósitos do estudo. O monitoramento dos resíduos da região citoplasmática das proteínas permitiu evidenciar o efeito alostérico da presença dos ligantes AU e ART no SL, sobre os domínios A e N, da PfATP6. Esse efeito reproduz as conformações E1 e E2, bem estabelecidas para PfATP6, na presença e ausência de Ca2+. As análises de Dinâmica Molecular corroboram os achados do Capítulo II ao evidenciarem o estabelecimento de interações de hidrogênio com os resíduos importantes do SL da PfATP6. Esses resultados fundamentam os indícios de que as bombas de Ca2+-ATPase (SERCA), possam ser de fato, um alvo para os derivados triterpênicos dos AU e AB. / This thesis combines two main focuses within Pharmaceutical Chemistry. On the one hand, it seeks to explore a new source of natural inputs, bark of Malus domestica, in order to obtain ursolic (UA) and betulinic acid (BA) triterpenes. On the other hand, it studies the relation of the semi-synthetic triterpenic derivatives obtained with the target proteins (PfATP6), currently highlighted in the literature on malaria therapy with a view to planning new antimalarial drugs. The first chapter includes the development of an efficient, easy and extremely fast method where ultrasonic extraction techniques (UAE) and high-performance liquid chromatography coupled to mass spectroscopy (LC-MS) are combined for identification and assay of ursolic acid (UA) and betulinic acid (BA) in fresh apple peel extracts from five clones of the Gala and Fuji cultivars (Baigent, Fuji Mishima, Fuji Suprema, Fuji Select and Maxi Gala ") in the Southern Region of Brazil. Chromatographic parameters of the analytical method include: electrospray ionization (ESI +), flow rate of 1.0 mL/min in isocratic elution mode, consisting of 80% acetonitrile and 20% 10 mM ammonium acetate at pH 6.0 and room temperature. The method was validated and proved to be selective, sensitive (LOD and LOQ of 0.087 and 0.266 μg/mL for BA, and 0.398 and 2.117 μg/mL for UA), linear regression coefficient (r> 0.99), accurate, robust for analytes of interest. The optimization of the combined method of UAE with LC-MS allowed to complete the procedures of extraction and analysis in less than 4 h, since the method does not require drying the sample, a stage that demands long processing times. This method was applied and provided the first phytochemical characterization of the five apple clones studied. The results demonstrated that the combined UAE-LC-MS method is suitable for quality control practices. The second chapter presents the study of the interaction of the semi-synthetic ligands derived from the UA and BA, synthesized by our research group, with the Plasmodium falciparum Ca2+-ATPase protein (PfATP6), using the Molecular Docking technique. PfATP6 is described as an important target for new antimalarials such as Artemisinin (ART), whose action mechanism includes, among others, the modulation of intracellular calcium homeostasis. Investigations led to the hypothesis of extravasation of calcium from the interior of the sarco-endoplasmic reticulum as a plausible mechanism for the action of the triterpenic derivatives of UA and BA. The Docking energy scores (binding energy) of each of the nine ligands (triterpenic derivatives) and four control compounds (ursolic and betulinic acids, artemisinin (ART) and tapsigargine (TPG)) with PfATP6, were calculated (analyses performed in triplicate) and correlated with its antimalarial IC50 value. The results showed an excellent correlation between energy scores (with PfATP6) and IC50 values, higher than 80% (r > 0.83360). The study supplies strong evidence that PfATP6 may be a target for the pentacyclic derivatives of the study, and also allowed identifying the conformational profile of the ligands and the main residues of the PfATP6 binding site (BS) involved in the interactions. It further contributed to a better understanding of the properties involved in the interaction of the ligand with the receptor and its action mechanism. The third chapter uses Classical and Quantum Methods to describe the conformational changes of the PfATP6 protein. The Molecular Dynamics simulations of the receptor in the isolated and complexed form with the ligands were performed for 10 ns. The final conformations obtained for the receptors were evaluated in RMSD terms, effect of the presence of ligands at the binding site and types of interactions established between the ligand and the receptor. The results showed that the PfATP6 and SERCA proteins tend to maintain their native conformations and that the model used is adequate for the purposes of the study. The monitoring of the residues of the cytoplasmic region of the proteins allowed evidencing the allosteric effect of the presence of UA and ART ligands in BS, on the A- and N-domains of PfATP6. This effect reproduces the well-established E1 and E2 conformations for PfATP6, in the presence and absence of Ca2+, respectively. Molecular Dynamics analyses corroborate the findings of Chapter II, by showing the possibility of establishing hydrogen interactions with the important residues of PfATP6 BS. These results support the evidence that Ca2+-ATPase (SERCA) pumps may be a target for the triterpenic derivatives of UA and BA.

Orientador: Adriane Pinto Wasko / Coorientador: Claudia Aparecida Rainho / Resumo: Em contraste ao padrão de cromossomos sexuais de mamíferos (XX/XY), as aves apresentam um sistema de determinação sexual em que os machos representam o sexo homogamético (ZZ) e as fêmeas constituem o sexo heterogamético (ZW). Adicionalmente, embora mamíferos apresentem um mecanismo de compensação de dose, a inativação completa de um dos cromossomos Z não é observada em machos de aves e, portanto, estes possuem um maior nível de expressão de vários genes presentes nesse cromossomo. A despeito disso, um mecanismo ainda não completamente esclarecido de compensação de dose parcial em aves resulta em expressão equivalente entre os sexos para alguns genes do cromossomo Z. A região MHM (Male Hypermethylated), localizada no cromossomo Z de Galliformes, está associada a um padrão de hipermetilação em machos e hipometilação em fêmeas, levando à síntese de um RNA não-codificante longo (lncRNA) somente em fêmeas. A presença deste lncRNA é associada ao aumento da expressão de genes próximos à região MHM em fêmeas, o que parece resultar em uma compensação de dose local entre os sexos. Dado que, até o momento, segmentos MHM foram somente identificados em Galiformes e Anseriformes, o presente estudo visou isolar e caracterizar esta região em Galliformes (galinha doméstica, codorna européia, peru) e também em Struthioniformes (avestruz), Strigiformes (coruja-orelhuda, corujinha-do-mato, coruja-da-igreja, coruja-buraqueira), Piciformes (tucanuçu), Psittaciformes (arara-azul-grande) e Apodiform... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre