Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnologico / Made available in DSpace on 2012-10-17T02:52:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-08T22:16:07Z : No. of bitstreams: 1 108772.pdf: 17813589 bytes, checksum: dd19c4f9abbb9f999a794ff8d51c87c6 (MD5) / Este trabalho apresenta uma montagem experimental projetada para desenvolver o estudo sobre a interação plasma-superficie em tratamentos superficiais por plasma reativo em metais. Este estudo foi realizado utilizando-se a técnica de espectrometria de massa para a análise de espécies neutras e aplicado a investigação da descarbonetação de ligas Fe-C, observada na nitretação destes materiais. A primeira etapa do trabalho consistiu no desenvolvimento de um porta-amostra adequado ao experimento que suportasse alta tensão e alta temperatura. A segunda etapa, consistiu na realização de testes para verificação da funcionalidade do sistema. Para isso, escolhemos o caso da descarbonetação de ligas Fe-C em um plasma obtido numa mistura Ar-O2, tema de pesquisa desenvolvido anteriormente em nossos laboratórios. A partir destes foi possível avaliar o funcionamento do sistema e a partir daí, determinar as modificações necessárias para a viabilização em relação aos objetivos propostos acima.

Orientador: Vladimir Eliodoro Costa / Resumo: Atualmente cerca de 3% da população mundial está infectado pelo vírus da hepatite C (VHC), onde sua maior consequência é a cirrose hepática. Para o diagnóstico da cirrose hepática utiliza-se a biopsia hepática percutânea, um método invasivo de grande complexidade considerado padrão ouro. Para avaliação do estágio da cirrose utiliza-se a classificação Child-Pugh. Um outro exame experimental para classificação funcional hepática é o 13C-Aminopyrine Breath Test (13C-ABT), o qual é não invasivo. Os protocolos atuais de 13C-ABT utilizam duas horas de coleta de sopro, e não diferem o gênero dos pacientes. O objetivo do estudo foi otimizar os protocolos de aplicação do 13C-ABT para avaliação dos estágios da cirrose hepática causada pelo VHC, verificando diferença entre gênero. Foram estudados os turnovers 13C nos dos sopros dos 68 pacientes durante o 13C-ABT, divididos em 8 grupos conforme o comprometimento da função hepática e gênero. Os resultados mostraram que o 13C-ABT pode ser aplicado com apenas uma coleta do sopro em uma hora e que existe diferença entre os gêneros. / Mestre

Orientador: Fernanda da Cruz Landim / Coorientador: José Buratini Junior / Banca: Sony Dimas Bicudo / Banca: João Carlos Pinheiro Ferreira / Banca: José Antonio Visentini / Banca: Mario Binelli / Resumo: Objetivo deste experimento foi estudar os mecanismos envolvidos na sobrevivência à criopreservação de embriões Bos taurus indicus (Nelore) e Bos taurus taurus (Simental) produzidos in vitro (PIV) e in vivo (TE). Em um arranjo fatorial 2 x 2, duas subespécies (Bos taurus indicus vs Bos taurus taurus) e duas origens (PIV vs TE) foram utilizadas para testar a hipótese de que a capacidade de sobrevivência após a criopreservação é um evento multifatorial, e que a composição lipídica e o padrão de expressão gênica global afetam a criotolerância embrionária. Vacas Nelore (N=14) e Simental (N=14) foram submetidas a OPU e os oócitos recuperados (N=840 e 450, respectivamente) foram submetidos a MIV, FIV e CIV. Além disso, vacas Nelore (N=7) e Simental (N=8) foram submetidas a superestimulação ovariana, IATF e lavagem uterina. Os embriões PIV (N=349 e N=105) e TE (N=80 e N=74), respectivamente Nelore e Simental, foram submetidos as técnicas de vitrificação (N=70-94), coloração de Sudan Black (n=30), espectrometria de massas por ionização e dessorção a laser assistida por matriz (MALDI-MS; N=8 por grupo), microarray genômico (Nelore PIV N=4, Nelore TE N=4, Simental PIV N=3, Simental TE N=3) e validação no qPCR (N=8 por grupo). Modelos univariados (PROC LOGISTIC e PROC GLIMMIX- SAS 9.2) e multivariados (análise dos componentes principais-PCA- Piruete v.3.11 e MetaboAnalyst) foram utilizados na análise estatística. A análise do Microarray genômico procedeu-se no FlexArray 1.6.1.1. Genes com "fold change" de 1,5 e P≤0,05 foram considerados diferentemente expressos. Embriões Simental apresentaram maior sobrevivência após a vitrificação que os Nelore (34,6 vs 20,2%; P<0,05). Apesar disso, os embriões Simental apresentaram maior conteúdo lipídico do que os Nelore (3,4±0,3 vs 2,4±0,3 intensidade de cinza x 10-4 / μm3 ; P<0,05)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective was to study mechanisms involved in the post-cryopreservation survival of Bos taurus indicus (Nellore) and Bos taurus taurus (Simmental) in vitro (IVP) and in vivo (ET) produced embryos. In a 2x2 factorial experimental design, two subspecies (Bos taurus indicus vs Bos taurus taurus) and two origins (PIV vs ET) were used to test the hypotheses that the postcryopreservation embryo survival capacity is a multifactorial event and that the lipid composition and the global gene expression pattern affect embryo cryotolerance. Nellore and Simmental cows (N=14) were submitted to OPU sessions and recovered oocytes (840 and 450, respectively) underwent IVM, IVF and IVC. Moreover, Nellore (N=7) and Simmental (N=8) cows were submitted to ovary superstimulation, FTAI, and uterine flushing. The IVP (N=349 and N=105) and ET (N=80 and N=74) embryos, Nellore and Simmental respectively, were used in the vitrification (N=70-94), Sudan Black B stain (N=30), matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry (MALDIMS) (N=8 per group), genomic microarray (Nellore IVP N=4, Nellore ET N=4, Simmental IVP N=3, Simmental ET N=3) and qPCR (N=8 per group) techniques. Univariate (PROC LOGISTIC and PROC GLIMMIX, SAS 9.2) and multivariate (PCA - Piruete v.3.11 and MetaboAnalyst) models were used for the statistical analysis. Microarray data analysis was performed in FlexArray 1.6.1.1 software. Genes with a fold change of at least 1.5 and a probability of P<0.05 were considered differentially expressed. Simmental embryos had higher post-vitrification survival (34.6 vs 20.2%; P<0.05) compared with Nellore. Nevertheless, Simmental embryos had higher lipid content than Nellore (3.4±0.3 vs 2.4±0.3 gray intensity x 10-4 / μm3; P<0.05). When compared ET with PIV embryos, it was observed that the former had higher post-vitrification... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Raghuvir Krishnaswamy Arni / Banca: José Geraldo da Cruz Pradella / Banca: Roberto Ruller / Banca: Eleni Gomes / Banca: Roberto da Silva / Resumo: Neste trabalho foram estudados os sistemas enzimáticos hidrolítico e oxidativo do ascomiceto termotolerante Myceliophthora thermophila M.7.7. Seis diferentes secretomas foram avaliados por espectroscopia de massas que identificou o total de 187 proteínas confirmando a presença do clássico sistema enzimático hidrólitico revelando também a produção de enzimas do sistema oxidativo de degradação. As enzimas mais abundantes foram celobiose desidrogenase e glicosídeo hidrolase família 7 secretadas principalmente nos bagaços de cana-de-açúcar in natura e explodido a vapor. A abundante produção de glicosídeo hidrolases foi identificada quando polissacarídeos de hemiceluloses foram a fonte de carbono empregada, mostrando que o produção de enzimas é substrato específica. O isolamento, a caracterização bioquímica e o estudo cinético enzimático de uma β-glicosidase do M. thermophila M.7.7. também foram realizados. A β-glicosidase purificada apresentou excelentes parâmetros para sua aplicabilidade como enzima suplementar a coquetéis enzimáticos ou até mesmo sua clonagem e expressão em organismos deficientes em β-glicosidase. Experimentos de hidrolíse enzimática também foram executados empregando o extrato bruto de M. thermophila, que resultou em uma conversão de 21% em bagaço in natura e 16% em celulose comercial mesmo com baixa carga de proteínas, indicando maior especificidade e sinergia do complexo enzimático à polímeros de celulose com maior índice de cristalinidade e grau de polimerização em sua estrutura / Abstract: In terms of the here presented PhD research project the hydrolytic and oxidative enzymatic properties from the ascomycota and themotolerant fungae Myceliophthora thermophila M.7.7. were investigated in detail. Six different secretomes were analysed by mass spectroscopy and 187 proteins were identified. Within these proteins beside already known and expected enzymes also several oxidative active enzymes were confirmed. Enzymes belonging to the cellobiose dehydrogenase and glycoside hydrolase family 7 were most abundant, when in natura and steam exploded sugar cane bagasses were used as carbon source. Particular a high abundance of glycoside hydrolases was identified when a mixture of hemicelluloses was applied as sole carbon source. In this case the secretome analysis showed a substrate-specific secretion for this fungae. The isolation, purification and characterization of a β-glycosidase from M. thermophila M.7.7. showed and confirmed excellent enzymatic charateristics and parameters for future potential applications as a supplemental enzyme in enzyme cocktails, or implimanting by molecular biology in organisms deficient in β-glucosidase. Even at low protein concentration the enzymatic hydrolysis, utilizing the crude extract, resulted in a conversion of approx. 21% in natura bagasse and approx. 16% in commercial cellulose, indicating a high specificity and synergy of the enzyme complex to cellulose polymers with a higher degree of polymerization and crystallinity index in its structure / Doutor

Este trabalho teve como objetivo avaliar o ultra-som como técnica alternativa ao processo Soxhlet para a extração de material orgânico, em especial os hidrocarbonetos poliaromáticos (HPAs) e saturados, em amostra de carvão mineral do Brasil. Para este fim foram usados diclorometano, tolueno e tetraidrofurano como solventes para as duas técnicas de extração utilizadas. Os extratos foram também comparados ao alcatrão comercial obtido por pirólise da mesma amostra de carvão. A extração com ultra-som apresentou rendimento semelhante à extração com Soxhlet, entretanto com um tempo total de análise muitas vezes inferior (75 minutos versus 48 horas na extração com Soxhlet). Desenvolveu-se uma metodologia analítica para o fracionamento cromatográfico isolando-se duas frações: hidrocarbonetos saturados e poliaromáticos. Os extratos de tetraidrofurano apresentaram o mais alto rendimento de material orgânico e o mais elevado teor de compostos polares. O diclorometano e o tolueno mostraram-se eficientes na extração das frações de hidrocarbonetos poliaromáticos. Os extratos obtidos com tolueno, através dos dois procedimentos usados, apresentaram maior seletividade para a recuperação de hidrocarbonetos a partir da amostra de carvão estudada. As frações de hidrocarbonetos foram posteriormente analisadas por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas. Para ambas as frações de todos os extratos, os perfis cromatográficos apresentaram-se muito semelhantes, com diferenças apenas nos aspectos quantitativos. / In this work, sonication was evaluated as an alternative to Soxhlet for the extraction of organic material from a high-ash Brazilian mineral coaI. The goal was to assess the influence of the on the characteristics of the extracts and then to compare the results obtained by the two techniques. For this purpose three organic solvents (dichloromethane, tetrahydrofurane and toluene) were used in both techniques. The composition of the extracts was also compared with a sample of coai tar obtained from the some parent coaI. Ultrasonic and Soxhlet techniques showed similar liquid yields, although sonication extraction required much less time (75 minutes versus 48 hours in the Soxhlet extraction). Samples were extracted in bulk, then the extracts were submitted to fractionation steps in order to isolate the saturated and the polynuclear aromatic hydrocarbons and were also analyzed regarding their CHN content. The tetrahydrofuran presented the highest yields of organic material; the extracts were rich in polar compounds and showed a lower aromatic character. On the other hand, both dichlorometane and toluene were able to better extract the polynuclear aromatic hydrocarbons fractions. The two hydrocarbon extraction fractions were further analyzed by GC-MS and the resulting chromatographic profiles were compared. In both fractions, for ali extracts, the compounds are basically the same, differing slightly in their relative concentrations.

Neste trabalho, estudou-se a pirólise da palha de cana-de-açúcar, um resíduo orgânico de considerável impacto ambiental. A biomassa foi submetida a um processo de pirólise rápida, a uma taxa de aquecimento que promova a maior formação de produtos voláteis e semi-voláteis. Usou-se um forno elétrico tubular e um reator de quartzo de leito fixo. Foram definidas as principais variáveis do processo de pirólise e seus respectivos valores (5 g de palha de cana-de-açúcar em granulometria fina, temperatura de pirólise de 700 ºC, taxa de aquecimento de 60 ºC min-1 e fluxo de nitrogênio de 1 mLmin-1) foram obtidos e analisados o produto sólido, líquido e gasoso. O resíduo sólido mostrou-se rico em matéria mineral, predominando a sílica, confirmando a queima total do material carbonoso. A composição química do bio-óleo e dos voláteis foi determinada usando cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (mono e bidimensional) e microextração em fase sólida. O bio-óleo e material volátil apresentaram composições químicas semelhantes com predominância de compostos oxigenados (fenóis, cetonas, aldeídos, éteres, açúcares e ácidos carboxílicos) e alguns hidrocarbonetos. A biomassa mostrou-se interessante tanto para fins energéticos como para a indústria química e de fármacos, pela presença marcante de fenóis, especialmente guaiacóis. / In this work it was studied the pyrolysis of sugar cane straw, an organic waste with considerable environmental impact. The biomass was subjected to a fast pyrolysis, at a relativelly high heating rate, sufficient to promote a formation of volatile and semi-volatile compounds. It was used a electrical vertical oven and a quartz fixed bed reactor. The main variables and their values were defined as 5 g of sugar cane straw ground, maximum pyrolysis temperature at 700 ºC, heating rate at 60 ºC min-1 and a nitrogen flow of 1 mL min-1. It was obtained three main products of the pyrolysis: solid, liquid and gases. The solid residue showed to be rich in mineral material, mainly silica, which confirms the total burning of the carbonous material. The composition of bio-oil and volatile fraction were determined by gas chromatography coupled to mass spectrometric detector (mono and bi dimensional) and solid phase microextraction. The bio-oil and the volatile fraction showed similar composition with predominance of oxigenated compounds (phenols, ketones, aldehydes, ethers, carboxylic acids, sugars) and some hydrocarbons. The studied biomass showed to be intersting for energetic purposes and also for chemical and pharmaceutical industry, due to the presence of phenols and, specially, guaiacols.

Fungos filamentosos produzem uma ampla diversidade de metabólitos secundários que tem significativo impacto na sociedade. Alguns metabólitos são explorados pela sua atividade como antibióticos e fármacos e outros estão envolvidos em doenças, na interação dos fungos com plantas e animais. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi obter metabólitos secundários como pigmentos e metabólitos biologicamente ativos produzidos por fungos filamentosos. Foram selecionadas cinco linhagens sendo elas Diplodia sp, Fusarium graminearum, Monascus purpureus, Penicillium expansum e Penicillium sp. Estes fungos foram selecionados devido à sua capacidade de produzir e secretar pigmentos em meio ágar batata dextrose. Para confirmação ou identificação em nível de espécie dos fungos, foram utilizados o sequenciamento parcial da região intergênica (ITS) do DNA ribossomal e uma região do gene da β-tubulina. Quatro dos cinco fungos foram identificados como Fusarium graminearum, Monascus purpureus e duas linhagens de Penicillium chrysogenum (linhagens 1 e 2), sendo os primers para região ITS mais adequados para a identificação em nível de espécie. As quatro linhagens produziram pigmentos em resíduos agroindustriais sob cultivo submerso. Devido à diversidade de metabólitos com atividades antibióticas produzidos por fungos filamentosos, estes filtrados coloridos foram testados contra fungos e bactérias, sendo que de quinze filtrados testados onze apresentaram inibição contra fungos e bactérias de importância médica, alimentar e agronômica. Os filtrados de resíduo de uva e soro de queijo do fungo Penicillium chrysogenum 1 se destacaram, apresentando, também, atividade amebicida contra linhagem de Acanthamoeba polyphaga ATCC 30461. Utilizando a técnica ESI-MS, foi realizado um perfil metabólico do filtrado de soro de queijo, sendo confirmada a presença de penicilina G, pela massa molar protonada e pelo perfil de fragmentação por ESI-MS/MS. Além disso, foi sugerida a presença dos metabólitos penicilina V e rugulosina, com comprovada atividade antibiótica. Portanto, o fungo Penicillium chrysogenum 1 foi selecionado para estudos futuros de caracterização dos pigmentos produzidos e análise mais detalhada dos metabólitos ativos, devido ao status GRAS atribuído a essa espécie, aos poucos estudos relacionados à produção de pigmentos e ao potencial de produzir metabólitos ativos em resíduos agroindustriais. / Filamentous fungi produce a diverse array of secondary metabolites that have a remarkable impact on society. Some metabolites are exploited for their antibiotic and pharmaceutical activities, other are involved in diseases, due to the fungi interactions with plants or animals. In this context, the goal of this work was the obtention of secondary metabolites as pigments and biologically active metabolites produced by filamentous fungi. Five strains were selected Diplodia sp, Fusarium graminearum, Monascus purpureus, Penicillium expansum and Penicillium sp. These fungi were selected due to the ability to produce and secrete pigments on potato dextrose agar. To confirm and/or identify the fungi at species level, we used the partial sequencing of the intergenic region (ITS) of the ribosomal DNA and a region of the β-tubulin gene. Four of the five fungi were identified as Fusarium graminearum, Monascus purpureus and two strains of Penicillium chrysogenum (strains 1 and 2) and the primers to the ITS region were more suitable for the identification at species. The four strains produced pigments on agro-industrial residues under submerged culture. Because of the diversity of antibiotic activity metabolites produced by fungi, these coloured filtrates were tested against fungi and bacteria. From the fifteen tested filtrates, eleven showed inhibition against bacteria and fungi with medical, food and agronomical importance. The filtrates of grape waste and cheese whey of the fungus Penicillium chrysogenum 1 showed higher activity, including, amoebicidal activity against a strain of Acanthamoeba polyphaga ATCC 30461. Using an ESI-MS approach, a metabolic profile was obtained for the cheese whey filtrate, being confirmed the presence of penicillin G, because of the protonated molar mass and the fragmentation profile by ESI-MS/MS. In addition, was suggested the presence of the metabolites penicillin V and rugulosin, all with proven antibiotic activity. Therefore, the fungus Penicillium chrysogenum 1 was selected for future studies as the characterization of the produced pigments and more detailed analysis of the active metabolites, due to the GRAS status attributed to this specie, to the few studies related to the pigments production and to the potential to produce active metabolites on agro-industrial residues.

O esgotamento de reservas de petróleo e a crescente poluição ambiental têm proporcionado um crescimento nas pesquisas sobre a utilização de biomassas, como fontes renováveis para obtenção de biocombustíveis e uma série de produtos químicos de maior valor agregado. O bio-óleo produzido na pirólise de biomassa é uma mistura complexa de compostos orgânicos, em especial os oxigenados. Esses óleos de pirólise podem apresentar em torno de 400 compostos, o que dificulta sua caracterização completa. Diversas técnicas cromatográficas já são empregadas para avaliação destas amostras. Neste trabalho, foram comparados os resultados obtidos na análise de seis diferentes bio-óleos, usando a cromatografia gasosa com detector de espectrometria de massas com analisador quadrupolar e a cromatografia gasosa bidimensional abrangente com detetor de espectrometria de massas por tempo de vôo. Verificou-se a presença de sete classes de compostos oxigenados predominantes nesses bio-óleos: ácidos, álcoois, aldeídos, cetonas, ésteres, éteres e fenóis, além de hidrocarbonetos e compostos nitrogenados. Os bio-óleos mostraram composição distinta conforme a biomassa original e também de acordo com o processo de pirólise usado. A GC × GC mostrou-se mais eficiente para a completa caracterização dos bio-óleos analisados em comparação com a GC/qMS, especialmente quanto ao número de compostos identificados e a sensibilidade. A partir da análise detalhada dos constituintes dos bioóleos é possível indicar aplicações adequadas para os mesmos. / The depletion of oil reserves and increasing environmental pollution, have provided an increase in the researches on the use of biomass as renewable sources for production of biofuels and a series of chemicals with higher added value. These biomasses sources have been largely used in the production of bio-oils through pyrolisis processes. The bio-oil is a complex mixture of organic compounds belonging to different classes, mainly oxygenateds. These bio-oils can present around 400 compounds which difficult their complete characterization. Several techniques are described in the literature for evaluating bio-oils, mainly gas chromatography. In this work it was compared the results obtained in the analysis of six different bio-oils, using gas chromatography with quadrupole mass spectrometry (GC/qMS) and comprehensive two dimensional gas chromatography with time of flight mass spectrometry (GC × GC/TOFMS). It was verified the presence of seven major oxygenated compound classes: acids, alcohols, aldehydes, ketones, esters, ethers and phenols besides hydrocarbons and nitrogenated compounds. The bio-oils showed a distinct composition according the original biomass and also according the pyrolisis process used. GC × GC showed to be mor efficient for the complete characterizatin of bio-oils if compared with GC/qMS, mainly in the number of and in the sensitivity of the technique. From the detailed analysis of constituents of bio-oils is possible to indicate suitable applications for them.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-22T17:13:14Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1578494 bytes, checksum: d7fa5a752b4c56f8611d2e504d7afa84 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-22T17:13:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1578494 bytes, checksum: d7fa5a752b4c56f8611d2e504d7afa84 (MD5) Previous issue date: 2017-02-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os carrapatos são artrópodes parasitas que se alimentam obrigatoriamente de sangue, sendo capazes de parasitar diversos hospedeiros vertebrados. O intestino dos carrapatos machos e fêmeas possui diferenças morfológicas, tendo como principal função a digestão intracelular dos componentes do sangue obtidos durante a alimentação. Este órgão possui várias proteínas relacionadas com o desenvolvimento, metabolismo e mecanismo de digestão da hemoglobina. Neste trabalho, as proteínas do intestino de carrapatos Amblyomma sculptum, machos e fêmeas foram analisadas com o auxílio da cromatografia líquida acoplada com a espectrometria de massas. O algoritmo PEAKS identificou um maior número de proteínas do intestino nas estratégias fracionadas e não fracionadas em relação aos algoritmos MASCOT e SCAFFOLD, tanto para o banco de dados Chelicerata quanto para o banco de dados Oryctolagus, utilizando os analisadores Ion Trap e QTOF. Pelo KOG, as classes das proteínas analisadas no intestino dos carrapatos machos e fêmeas que se destacaram estão envolvidas na dinâmica e estrutura da cromatina, tradução, biogênese e estrutura ribossomal, modificação pós-traducional, turnover proteico, chaperonas, citoesqueleto, conversão e produção de energia, metabolismo e transporte de carboidratos, lipídeos e íons inorgânicos. Na identificação das proteínas do hospedeiro, a hemoglobina, componente de maior volume no sangue, foi encontrada em ambos os sexos. As informações obtidas neste trabalho podem fornecer uma base sobre a fisiologia do intestino de machos e fêmeas A. sculptum e auxiliar na escolha de proteínas como alvos moleculares potenciais, visando avanço nas estratégias de controle aplicadas para estes artrópodes. / Ticks are parasitic arthropods that feed necessarily of blood, being able of parasitizing various vertebrate hosts. The midgut of males and females ticks has morphological differences, having as main function the intracellular digestion of blood components obtained during feeding. This organ has several proteins related to the development, metabolism, and mechanism of hemoglobin digestion. In this work, the midgut proteins of Amblyomma sculptum ticks, males and females were analyzed with aid of liquid chromatography coupled with mass spectrometry. The PEAKS algorithm identified a larger number of proteins in fractional and non-fractionated strategies in relation to algorithms MASCOT and SCAFFOLD for both Chelicerata and Oryctolagus databases, using Ion Trap and QTOF analyzers. By KOG, the classes of proteins analyzed in the midgut of the males and females ticks are involved in the chromatin structure and dynamics, translation, ribosomal structure and biogenesis, post- translational modification, protein turnover and chaperones, cytoskeleton, energy production and conversion, metabolism and transport of carbohydrates, lipids and inorganic ions. In the identification of the host proteins, the hemoglobin, greater blood volume component, was found in both genders. The informations obtained in this work can provide a basis about the midgut phisiology of males and females A. sculptum and assist in the selection of proteins as potencial molecular targets, aiming advance in the control strategies applied to these arthropods.

SILVA, Romézio Alves Carvalho da. Plantas medicinais do Nordeste do Brasil - Ximenia americana Linn: investigação química dos grãos e seu uso como biocatalisador. 2016. 170 f. Tese (Doutorado em Química)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Aline Mendes (alinemendes.ufc@gmail.com) on 2016-12-22T18:30:59Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_racsilva.pdf: 8059679 bytes, checksum: 0779bc039b0a7babf39adc4e2c54c166 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2016-12-27T16:26:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_racsilva.pdf: 8059679 bytes, checksum: 0779bc039b0a7babf39adc4e2c54c166 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-27T16:26:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_racsilva.pdf: 8059679 bytes, checksum: 0779bc039b0a7babf39adc4e2c54c166 (MD5) Previous issue date: 2016 / This work consisted in the study of hexane and ethanol extracts of Ximenia americana grains, abundant plant species in the Northeast of Brazil, especially in Ceará, where it is known as the plum of the woods. Parts of the plant, especially the husks, are popularly used to treat various diseases. The chemical investigation was divided into two parts, the first being directed to the identification of the chemical components of the grain X. americana by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC/MS) and the second one related to the possibility of using these grains as biocatalyst. Identification of chemical components by GC/MS without the knowledge of the possible types of compounds, required as a preliminary step, obtaining volatile derivatives. Thus, in a first step, the hexane extract of the grains after silylation reaction allowed the identification of 18 constituents highlighting, as the major, the octadec-9-enoic acid (38.14%), (9Z, 12Z)-octadec-9,12-dienoic acid (18.83%), ethanedioic (8.21%) and (Z, Z, Z) -9,12,15-octadecatrienoic (7.22%). Meanwhile, the ethanolic extract after silylation possible to identify components having 18 to D-Sucrose (29.36%), L-Sorbose (9.19%), inositol (8.34%) and D-Glucose (7.45%) as major. The constituents were identified as trimethylsilyl (TMS) ethers by using chromatographic and spectrometric techniques mainly GC/MS. In addition to fatty acids and carbohydrates as highlights, it detected the presence of steroids (β-sitosterol) in hexane and triterpene extract (Betulinic and Ursolic acid) in ethanol extract. In a second step, the hexane extract of the beans after saponification reactions/methylation allowed the identification ten fatty acids having main, oleic acid (55%) ximeninic (17%) and cis-19-octacosenoico (10%). The acids were identified as their methyl esters using GC/MS. The fragmentation pattern of the components outlined in the mass spectra, was considered in the review process. They were also carried out some tests of biological activities from hexane and ethanol extracts of the grains. The second part of the study investigated the use of grain as X. americana biocatalyst in the form of integral material biotransformation reactions in the reduction of aldehydes and ketones, alcohols esterification and ester hydrolysis. In the reduction reactions the used substrates were: acetophenone, 3-methoxyacetophenone, 4-fluoroacetophenone, 4-chloroacetophenone, 2,4-dichloroacetophenone, cyclohexanone, octan-2-one, undecan-2-one, benzaldehyde, 3-methoxybenzaldehyde, 4-methoxybenzaldehyde, 3-hydroxy-4-methoxybenzaldehyde (vanillin) and 1-naphthaldehyde. The conditions that allowed the reduced product to be obtained in the best yield were: 50.0 mg of the substrate, 5.0 g of the grains, pH 5 (ketones) and 7 (aldehydes), 175 rpm on the shaker table, 72 hours at 30 °C. The bioconversion in the reduction occurred from low to excellent yield and, as expected, aldehydes were more reactive than ketones. In the hydrolysis reactions the used substrates were: methyl benzoate, ethyl benzoate, benzyl acetate, p-chloro-phenylethyl acetate and phenylethyl acetate. The conditions that allowed the hydrolyzed product to be obtained with the best yield were: 50.0 mg of the substrate, 2.0 g of the grains, 30 mL of distilled water (pH 5), 175 rpm on the shaker table, 72 hours at 30 °C. The bioconversion in the hydrolysis occurred from medium to excellent yield. In the esterification reactions of the alcohols the used substrates were: benzyl alcohol, 3-methoxy benzyl, 4-methoxy benzyl, 1-phenylethanol, cyclohexanol and n-octanol. The conditions that allowed the esterified product to be obtained in the best yield were: 52 mg of the substrate, 2.0 g of the grains, 10 ml of hexane, 100 μL of vinyl acetate, 225 rpm on the shaker table, 24 hours at 30 °C. Bioconversion in esterification occurred from low to excellent yield. The products in the reaction mixtures were analyzed by TLC, GC/MS, GC/FID and 1H and 13C NMR. / O presente trabalho consistiu no estudo dos extratos hexânico e etanólico dos grãos de Ximenia americana, uma espécie vegetal abundante no Nordeste do Brasil, especialmente no Ceará, onde é conhecida como ameixa-do-mato. Partes desta planta, principalmente, as cascas, são utilizadas popularmente no tratamento de diversas enfermidades. A investigação química foi dividida em duas partes, sendo a primeira dirigida à identificação dos componentes químicos dos grãos de X. americana através de cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa (CG/EM) e, a segunda, relacionada a possibilidade do uso destes grãos como biocatalisador. A identificação dos componentes químicos através de CG/EM sem o conhecimento dos possíveis tipos de compostos presentes, exigiu como etapa prévia, a obtenção de derivados voláteis. Assim, numa primeira etapa, o extrato hexânico dos grãos após reação de sililação permitiu a identificação de 18 constituintes destacando-se, como majoritários, os ácidos octadec-9-enoico (38,14%), (9Z,12Z)-octadec-9,12-dienoico (18,83%), etanodioico (8,21%) e (Z,Z,Z)-9,12,15-octadecatrienoico (7,22%). Por sua vez, o extrato etanólico após sililação, possibilitou identificar 18 constituintes tendo a D-Sacarose (29,36%), L-Sorbose (9,19%), inositol (8,34%) e D-Glicose (7,45%), como majoritários. Os constituintes foram identificados como trimetilsilil (TMS) éteres através de técnicas cromatográficas e espectrométricas, principalmente, CG/EM. Além de ácidos graxos e carboidratos como destaques, foi detectada a presença de esteroides (β-Sitosterol) no extrato hexânico e triterpenos (Ac. Betulínico e Ac. Ursólico) no extrato etanólico. Numa segunda etapa, o extrato hexânico dos grãos após as reações de saponificação/metilação permitiu a identificação de dez ácidos graxos, tendo, como principais, os ácidos oleico (55%), ximeninico (17%) e cis-19-octacosenoico (10%). Os ácidos foram identificados na forma de seus metil ésteres utilizando CG/EM. O padrão de fragmentação dos componentes, delineado nos espectros de massa, foi considerado no processo de análise. Foram também realizados alguns testes de atividades biológicas a partir dos extratos hexânico e etanólico dos grãos. A segunda parte do estudo investigou o uso dos grãos de X. americana como biocatalisador na forma de material integral em reações de biotransformações na redução de aldeídos e cetonas, esterificação de alcoóis e hidrólise de ésteres. Nas reações de redução foram utilizados os substratos: acetofenona, 3-metoxi-acetofenona, 4-flúor-acetofenona, 4-cloro-acetofenona, 2,4-dicloro-acetofenona, cicloexanona, octan-2-ona, undecan-2-ona, benzaldeído, 3-metoxibenzalideído, 4-metoxibenzaldeído, 3-hidroxi-4-metoxibenzaldeído (vanilina) e 1-naftaldeído. As condições que permitiram a obtenção do produto reduzido com melhor rendimento foram: 50,0 mg do substrato, 5,0 g dos grãos, pH 5(cetonas) e 7 (aldeídos), 175 rpm na mesa agitadora, 72 horas a 30 ºC. A bioconversão na redução ocorreu de baixo a excelente rendimento e, como esperado, os aldeídos mais reativos que as cetonas. Nas reações de hidrólise foram utilizados os substratos: benzoato de metila, benzoato de etila, acetato de benzila, acetato de p-cloro-feniletila e acetato de feniletila. As condições que permitiram a obtenção do produto hidrolisado com melhor rendimento foram: 50,0 mg do substrato, 2,0 g dos grãos, 30 mL de água destilada (pH 5), 175 rpm na mesa agitadora, 72 horas a 30 ºC. A bioconversão na hidrólise ocorreu de médio a excelente rendimento. Nas reações de esterificação dos alcoóis foram utilizados os substratos: álcool benzílico, 3-metoxi-benzílico, 4-metoxi-benzílico, 1-feniletanol, cicloexanol e n-octanol. As condições que permitiram a obtenção do produto esterificado com melhor rendimento foram: 52 mg do substrato, 2,0 g dos grãos, 10 mL de hexano, 100 μL de acetato de vinila, 225 rpm na mesa agitadora, 24 horas a 30 ºC. A bioconversão na esterificação ocorreu de baixo a excelente rendimento. Os produtos, nas misturas reacionais, foram analisados através de CCD, CG/EM, CG/DIC e RMN de 1H e de 13C.