Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia de Fungos, Algas e Plantas, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-15T04:09:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334406.pdf: 2365893 bytes, checksum: 383a38e808333c6bf8826bdc6df3562b (MD5) Previous issue date: 2015 / Pleopeltis lepidopteris (Langsd. & Fisch) de la Sota (Polypodiaceae) é uma samambaia endêmica importante da vegetação de restingas do sul do Brasil. A vegetação de restinga vem sofrendo fortes ameaças com o aumento da especulação imobiliária, ocupação humana, a poluição e a extração. Esporos de P. lepidopteris foram coletados em setembro de 2013 e março de 2014 nas Dunas da Praia da Joaquina, Florianópolis, SC, Brasil. Para preservar eficazmente esporos de P. lepidopteris foram avaliados os efeitos de diferentes tratamentos na viabilidade dos esporos e desenvolvimento gametofítico. Foi analisada a viabilidade de esporos recém coletados em setembro de 2013. Os esporos foram armazenados: por um e oito meses nas frondes à temperatura ambiente; sob-refrigeração 7±1ºC; imersos em nitrogênio líquido (-196ºC) não esterilizados e esterilizados superficialmente após degelo. Foram realizadas análises morfológicas de esporos e gametófitos por meio de microscopia de luz (ML), microscopia confocal de varredura a laser (MCVL), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e microscopia eletrônica de transmissão (MET). Análises de conteúdo de pigmentos fotossintetizantes e fluorescência da clorofila a foram realizadas em gametófitos de 150 dias. Esporos de P. lepidopteris perdem rapidamente a viabilidade dentro de um mês e morrem após oito meses, quando armazenados à temperatura ambiente. Houve grande redução da viabilidade quando os esporos foram armazenados a 7±1ºC após oito meses. Em contraste, esporos sobreviveram e apresentaram as mais altas porcentagens de germinação quando armazenados em nitrogênio líquido indiferentemente da época de coleta. Esporos criopreservados analisados em MEV apresentaram a superfície e as ornamentações mais ásperas do que os esporos controles. A criopreservação aparentemente escarificou a superfície dos esporos. Houve aceleração e desenvolvimento normal de gametófitos oriundos de esporos criopreservados e surgimento antecipado de estruturas reprodutivas. Não houve diferença na ultraestrutura de esporos e gametófitos de ambos os tratamentos e nem nos conteúdos de pigmentos fotossintetizantes e nos parâmetros fotossintéticos obtidos a partir da análise da fluorescência da clorofila a. A criopreservação mostrou-se eficaz para a conservação ex situ em bancos de germoplasma de esporos de Pleopeltis lepidopteris, mantendo sua viabilidade e integridade fisiológica.<br> / Abstract : Pleopeltis lepidopteris (Langsd. & Fisch) de la Sota (Polypodiaceae) is an important endemic fern of the dunes vegetation of southern Brazil. The ?restinga? vegetation has been suffering strong threats with the human occupation, pollution and extraction. Spores of P. lepidopteris were collected in September 2013 and March 2014 in the dunes of Joaquina Beach, Florianópolis, SC, Brazil. To effectively preserve P. lepidopteris spores the effects of different treatments of conservation were analised. The viability of spores collected in September 2013 were analised and compared to different methods of conservation: spores stored for eight months in the fronds at room temperature, spores stored under refrigeration at 7±1ºC, spores immersed in liquid nitrogen (-196ºC) non-sterile or surface steriled after thaw. Morphological analysis of spores and gametophytes were performed by light microscopy (ML), confocal laser scanning microscopy (CLSM), scanning electronic microscopy (SEM) and transmission electronic microscopy (MET). Analisys of photosynthetic pigmens and fluorescence of chlorophyll a were performed in gametophytes of 150 days. Spores of P. lepidopteris rapidly lose viability within a month and die after eight months when stored at room temperature. There was a great reduction of viability when the spores were stored at 7±1ºC after eight months. In contrast, spores survived and presented the highest percentage of germination when stored in liquid nitrogen regardless the period of collection. The surface of the cryopreserved spores analyzed by SEM was rougher than that of controls. Cryopreservation apparently scarified spore surface. There was acceleration of development of gametophyte grown from criopreserved spores and early onset of reproductive structures. There were no differences in the ultrastructure of spores and gametophytes of both treatments or in the photosynthetic pigment content and the photosynthetic parameters obtained from the analysis of chlorophyll a fluorescence. Cryopreservation was effective for the ?ex situ? conservation in germplasm banks of spores of Pleopeltis lepidopteris spores, maintaining their viability and physiological integrity.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia de Fungos, Algas e Plantas, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-10-06T04:08:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334512.pdf: 1521862 bytes, checksum: dd89ce7919a3d7eb28471d976638d5fa (MD5) Previous issue date: 2015 / A destruição da camada de ozônio na estratosfera principalmente pela liberação de clorofluorcarbonos (CFCs) na atmosfera teve como consequência o aumento da incidência de radiação UV. Neste trabalho avaliou-se o efeito da radiação ultravioleta B no desenvolvimento de gametófitos, na anatomia foliar, no conteúdo de clorofilas e carotenoides, além da fluorescência da clorofila em frondes de esporófitos de Acrostichum danaeifolium Langsd. & Fisch. (Polypodiopsida, Pteridaceae) submetidos a tratamentos agudos (8 horas sob RUVB) e tratamentos crônicos de RUVB (1 hora diária durante 45 dias). Os gametófitos de A. danaeifolium que receberam radiação UVB, quando comparados aos gametófitos controles mostraram?se susceptíveis a danos e alterações morfológicas quando cultivados sob o tratamento crônico, sofrendo atraso no desenvolvimento, perda da dominância apical, anomalias no desenvolvimento, e por fim senescência e morte quase total dos gametófitos. Os esporófitos mostraram menor sensibilidade à RUVB. A anatomia foliar de plantas foi afetada pela RUVB. As frondes de plântulas expostas ao tratamento crônico apresentaram enrolamento semelhante ao observado para outras espécies. Apresentaram ainda estômatos mal formados na face abaxial e perda das sinuosidades das paredes das células epidérmicas adaxiais quando observados em MEV. Em secções transversais de frondes submetidas ao tratamento crônico, coradas com azul de toluidina, os cloroplastos apresentaram-se concentrados juntamente com o núcleo, na parede interna da célula. Esse efeito foi observado apenas em células epidérmicas, indicando mecanismo de proteção. Não houve diferença estatisticamente significativa entre plantas controle e cultivadas sob RUVB na concentração de clorofila a, clorofila b, concentração de carotenóides, Houve aumento ETRMax, aETR e Ek. É possível que essa espécie possua mecanismos para evitar os danos aos fotossistemas e a degradação das clorofilas por ser uma planta que ocorre geralmente em ambiente ensolarado nos manguezais.<br> / Abstract : The destruction of ozone in the stratosphere mainly by the release of chlorofluorocarbons (CFCs) in the atmosphere has lead to an increased incidence of UV radiation. In this paper we evaluate the effect of ultraviolet B radiation in the gametophyte development and in leaf anatomy, the contents of chlorophyll and carotenoids, in addition to chlorophyll fluorescence in fronds of sporophytes of Acrostichum danaeifolium Langsd. Fisch &. (Polypodiopsida, Pteridaceae) exposed to acute treatment (8 hours under UVB) and chronic UVB radiation treatments (1 hour daily for 45 days). The gametophytes of A. danaeifolium which received UVB radiation, when compared to control gametophytes proved to be more susceptible to damage and morphological changes when grown under chronic treatment, suffering from developmental delay, loss of apical dominance, abnormal development, and finally senescence and almost total gametophyte death. The sporophytes showed less sensitivity to UVB radiation. The leaf anatomy was affected. The sporophyte fronds exposed to chronic treatment showed curling similar to that observed for other species. Still showed malformed stomata on the abaxial face and loss of sinuosity of epidermal cells on the adaxial face when observed under SEM. Sections of fronds subjected to chronic treatment, stained with toluidine blue presented chloroplasts densely stained and concentrated against the inner wall of the cell. This effect was observed only in epidermal cells, indicating protection mechanism. No statistically significant difference was observed between control and plants grown under RUVB in the concentration of chlorophyll a, chlorophyll b, concentration of carotenoids, ETRmax, aETR and Ek. It is possible that this specie presents mechanisms to prevent photosystem damage and degradation of chlorophylls since it is a specie that grows in sunny environment in the mangrove.

Made available in DSpace on 2012-09-05T18:24:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 315.pdf: 2607034 bytes, checksum: 837d3d9859302e028197ebb6c62ccde4 (MD5) Previous issue date: 2008 / Com base na idéia de que esporos bacterianos são estruturas extremamente resistentes, fomos capazes a partir da utilização de várias técnicas de cultivar e identificar de coprólitos humanos e animais, datados entre 3490 ± 120 a 430 ± 70 anos, recuperados de escavações arqueológicas no Brasil, bactérias da família Bacillaceae. Os coprólitos inicialmente foram tratados com radiação ultravioleta com o objetivo de eliminar possíveis contaminantes externos e posteriormente perfurados assepticamente para retirada de material da porção mais interna. Esse material foi então cultivado emdiferentes meios de cultura, possibilitando o isolamento de bastonetes Gram positivos. Esses microorganismos foram então submetidos a reações bioquímicas clássicas e a técnicas moleculares, como a reação em cadeia da polimerase (PCR), a clonagem e o seqüenciamento gênico. A análise de todos os dados possibilitou não somente concluir que se tratavam de representantes da família Bacillaceae, mas em alguns casos definir ogênero e a espécie mais provável, demonstrando que estas metodologias conjugadas permitem este grau de definição e que será possível no futuro um estudo mais minucioso da microbiota antiga associada a este material.

ARRUDA, F. V. S. Atividade de lectinas de leguminosas sobre a germinação de esporos de fungos fitopatogênicos. 2009. 69 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2009. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2015-01-23T21:08:38Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_fvsarruda.pdf: 4076915 bytes, checksum: f6c6665743e913178363f22bd996eb14 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-02-25T20:45:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_fvsarruda.pdf: 4076915 bytes, checksum: f6c6665743e913178363f22bd996eb14 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-25T20:45:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_fvsarruda.pdf: 4076915 bytes, checksum: f6c6665743e913178363f22bd996eb14 (MD5) Previous issue date: 2009 / Lectins represent a diversified group of proteins, both in terms of size and structure, as well as in relation to biological activities that they play on different organisms. Most of lectins have been isolated from plants and some of them can exert remarkable antifungal activities. This work shows the effect of five structurally related lectins, which were purified from the seeds of Canavalia ensiformis (ConA), C. boliviana (Cbol), C. maritima (ConM), C. brasiliensis (ConBr) and C. gladiata (ConG), respectively, on the in vitro growth of phytopathogenic fungi Mucor sp., Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae and C. lindemuthianum. In order to determine the effect of lectins, fungal spores were properly isolated, treated with each lectin in a concentration of 500 μg/ml for 24 hours and then inoculated to growth at 27°C in 96-well polystyrene plates containing potato dextrose broth. The fungal growth was assessed at different times by measuring the optical density at 620 nanometers. The negative control was performed with 0.15 M NaCl. In order to verify if the effect on fungal growth occurred merely by the presence of protein, the fungi were grown in the presence of bovine serum albumin (BSA). The results showed that the growth of Mucor sp. is decreased when spores were treated with ConA. On the other hand, all the other lectins enhanced its growth. With respect to other species, it was observed that fungal growth is increased when the spores were treated with lectins. / Lectinas representam um grupo diversificado de proteínas, tanto em termos de tamanho e estrutura, quanto com relação às atividades biológicas que desempenham sobre diferentes organismos. A maioria das lectinas tem sido isolada de plantas e algumas podem exercer atividades antifúngicas marcantes. Este trabalho apresenta o efeito de cinco lectinas estruturalmente relacionadas, as quais foram purificadas, respectivamente, das sementes de Canavalia ensiformis (ConA), C. boliviana (Cbol), C. maritima (ConM), C. brasiliensis (ConBr) e C. gladiata (ConG), sobre o crescimento in vitro dos fungos fitopatogênicos Mucor sp., Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae e C. lindemuthianum. No sentido de determinar o efeito das lectinas, os esporos fúngicos foram devidamente isolados, tratados com cada uma das lectinas na concentração de 500 μg/mL durante 24 horas e então inoculados para crescimento a 27ºC em placas de poliestireno de 96 poços contendo caldo batata dextrose. O crescimento dos fungos foi avaliado em diferentes tempos através da determinação da densidade óptica a 620 nanômetros. O controle negativo foi feito com NaCl 0,15 M. No sentido de verificar se o efeito das lectinas sobre o crescimento fúngico era meramente proteico, os fungos foram crescidos na presença de albumina sérica bovina (BSA). Os resultados mostraram que o crescimento de Mucor sp. foi diminuído quando seus esporos foram tratados com ConA. Por outro lado, todas as outras lectinas promoveram o aumento de seu crescimento. Com relação às outras espécies, observou-se que o crescimento fúngico é aumentado quando os esporos são tratados com as lectinas.

Orientador: Pilar Rodriguez de Massaguer / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-19T12:22:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_AlbaValeriados_M.pdf: 3650164 bytes, checksum: 441c92341459b833b0467d9ef53a4c5e (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: Entre os poucos métodos de esterilização conhecidos para produtos e materiais termo-senslveis, o óxido de Etileno é bastante difundido, especialmente no ambiente hospitalar. Além dos cuidados que devem ser tomados no uso deste gás, são estudados vários parâmetros (concentração de gás, temperatura, umidade relativa, tempo de exposição e material de suporte) que influenciam sua atividade antimicrobiana. Além destes fatores, há a variabilidade inerente a microrganismos que deve ser considerada quando se estuda Indicador Biológico para processos de esterilização. Neste trabalho avaliou-se a resistência ao óxido de Etileno (em mistura com nitrogênio - 45%EO/55%N2 ) de esporos de Bacillus subtilis var. niger (globigii) fixados em tiras de papel ( fitas carregadoras ) produzidos a partir de Indicador Biológico americano (AMSCO) e a partir de esporos liofilizados de Coleção de Culturas alemã (DSM). Verificou-se que não há diferença significativa ( com 95% de nível de confiança ) entre estas duas fontes de esporos. Os Indicadores Biológicos produzidos pela metodologia deste experimento estão padronizados ( dentro dos limites dado pela USP XXII, 1990 e AAMI, 1986 ), porém com diferença significativa ( 95% de nível de confiança ) e resistência menor (16-37% ) quando comparados ao Indicador Biológico AMSCO. Este resultado levou ã avaliação do papel suporte, substituindo o utilizado por papel de menor gramatura e higroscopicidade, não sendo observado diferença significativa entre os dois tipos de papel testados. Sendo a umidade dos esporos fator importante na definição da resistência de Indicadores Biológicos, estudou-se ainda a influência do armazenamento dos Indicadores Biológicos , comparando a refrigeração ( 5-7°C ) e refrigeração + umidade relativa controlada ( 5-7°C, 75,7% UR ), não sendo observada diferença significativa ( com 95% de nível de confiança ) entre estes armazenamentos. Na avaliação dos resultados, comparou-se duas metodologias de cálculo de resistência de Indicador Biológico ( método de Stumbo, Murphy and Cochran, 1950 - Ds e Epstein-Hachigian , 1991 - )não sendo verificado diferença significativa ( com 95% de nível de confiança ) entre os métodos. Os valores de redução decimal ( valor D ) obtidos para os Indicadores Biológicos produzidos variaram de 16 a 24 minutos, enquanto que os Indicadores Biológicos AMSCO forneceram resultados de 25 a 29 minutos. Para as características de processo aqui estudadas, as condições de esterilização definidas foram: T = 27-32 °C UR = 67-81 % C = 694-720 mg/L t = 6 h / Abstract: Within the few known sterilization methods for therraosensitive materials and products, the use of Ethylene Oxide has been widespread, mainly in the hospital environment. Besides Ethylene Oxide carefull handling requirements, several parameters that may influence antimicrobic activities are being studied (gas concentration, temperature, relative humidity, exposure time and support material). In addition to these factors, variability must also be considered when biological indicators for sterilization processes are studied. In this study it was evaluated resistance to Ethylene Oxide (mixed to nitrogen - 45%E0/55%N2 ) of Bacillus subtilis var.niger (globigii) spores in strips of paper (carrier strips) produced from American Biological Indicator (AMSCO) and from lyophilized spores of german culture collection (DSM). There were no significative differences (95% accuracy) observed between these two spores sources. The Biological Indicators produced by the methodology of 'this experiment are standardized (within the limits stated by USP XXII 1990 and AAMI, 1986) but have a significative difference (95% accuracy) and lower resistance (16-37%) if compared to AMSCO Biological Indicator. This conclusion has led to an evaluation of support paper, substituting the one used by another one of less gramature and hygroscopicity. No significative differences were found between them. Since spore humidity is very important to define resistance of biological indicators, further studies were made about influence of Biological Indicators storage by comparing refrigeration conditions ( 5-7ºC and controlled refrigeration + relative humidity (5-7°C, 75,7% RH. No significative differences (95% accuracy) were found. Comparing the two calculation methodologies of biological indicators resistance (Stumbo, Murphy and Cochran, 1950 and Epstein-Hachigian, 1991 methods) no significative differences (95% accuracy) were found in the results evaluation. The decimal reduction ( D value ) for the produced Biological Indicator varied from 16 to 24 minutes, while AMSCO Biological Indicators had values from 25 to 29 minutes. For the process, subject to this study, the defined sterilization conditions were: T = 27- 32 °C UR = 67- 81 % C = 694-720 mg/L t = 6 h / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador: Gil Martins Felippe / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-20T23:19:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Simabukuro_ElianaAkie_D.pdf: 27510102 bytes, checksum: 917f569ccbd62b9dbb3bcc844779ebf3 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Foi estudada a morfologia dos esporos das espécies de pteridófitas da mata ciliar da Estação Experimental e Reserva Biológica de Moji Guaçu. As espécies são as seguintes: Asplenium serra Langsd & Fisch., Blechnum brasiliense Desv., Blechnum glandulosum Link, Blechnum Ros., Blechnum serrulatum L. C. Rich., Salpichlaena volubilis (Kauf.) Hook., Cyathea delgadii Stemb., Trichipteris (Mart.) Barr., Lindsaea lancea(L.) Bedd., Lindsaea quadrangularis Raddi, Pteridium aquilinum (L.) Kuhn var. arachnoideum (Kaulf.) Brade, Cyclodium meniscioides (Willd.) Presl var. meniscioides, Dicranopteris Flexuosa (Shrad.) Underw., Trichomanes cristatum Kault., Trichomanes emarginatum Presl, Lycopodiella cernua (L.) Pichi-Serm., Osmunda cinnamomea L., Osmunda regalis L., Campyloneurum phyllitidis (L.) Presl, Polypodium fraxinifolium Jacq., Polypodium ptilodon Kunze, Adiantum fructuosum Spreng., Pityrogramma calomelanos (L.) Link, Pityrogramma trifoliata (L.) Tryon, Thelypteris brevisora (Ros.) Ponce, Thelypteris chrysodioides (Fée) Morton, Thelypteris dentata (Forssk.) E. P. St. John Thelypteris interrupta (Willd.) Iwats., Thelypteris longifolia (Desv.) Tryon, Thelypteris rivularioides (Fée) Abbiatti, Thelypteris serrata (Cav.) Alston. Os esporos acetolisados foram medidos e fotografados sob microscópio óptico e esporos não acetolisados foram fotografados sob microscopia eletrônica de varredura. A partir da análise destas espécies e do estudo já realizado com os esporos das espécies presentes no cerrado da Reserva (ESTEVES & MELHEM, 1992), foi feito uma chave de identificação para todas as espécies da Estação Experimental e Reserva Biológica de Moji Guaçu...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Resumo: Foi estudada a morfologia dos esporos das espécies de pteridófitas da mata ciliar da Estação Experimental e Reserva Biológica de Moji Guaçu. As espécies são as seguintes: Asplenium serra Langsd & Fisch., Blechnum brasiliense Desv., Blechnum glandulosum Link, Blechnum Ros., Blechnum serrulatum L. C. Rich., Salpichlaena volubilis (Kauf.) Hook., Cyathea delgadii Stemb., Trichipteris (Mart.) Barr., Lindsaea lancea(L.) Bedd., Lindsaea quadrangularis Raddi, Pteridium aquilinum (L.) Kuhn var. arachnoideum (Kaulf.) Brade, Cyclodium meniscioides (Willd.) Presl var. meniscioides, Dicranopteris Flexuosa (Shrad.) Underw., Trichomanes cristatum Kault., Trichomanes emarginatum Presl, Lycopodiella cernua (L.) Pichi-Serm., Osmunda cinnamomea L., Osmunda regalis L., Campyloneurum phyllitidis (L.) Presl, Polypodium fraxinifolium Jacq., Polypodium ptilodon Kunze, Adiantum fructuosum Spreng., Pityrogramma calomelanos (L.) Link, Pityrogramma trifoliata (L.) Tryon, Thelypteris brevisora (Ros.) Ponce, Thelypteris chrysodioides (Fée) Morton, Thelypteris dentata (Forssk.) E. P. St. John Thelypteris interrupta (Willd.) Iwats., Thelypteris longifolia (Desv.) Tryon, Thelypteris rivularioides (Fée) Abbiatti, Thelypteris serrata (Cav.) Alston. Os esporos acetolisados foram medidos e fotografados sob microscópio óptico e esporos não acetolisados foram fotografados sob microscopia eletrônica de varredura. A partir da análise destas espécies e do estudo já realizado com os esporos das espécies presentes no cerrado da Reserva (ESTEVES & MELHEM, 1992), foi feito uma chave de identificação para todas as espécies da Estação Experimental e Reserva Biológica de Moji Guaçu...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas

Com o objetivo de se estudar o micotrofismo de Stylosanthes guianensis e o comportamento de três associações micorrízicas vesículo-arbusculares em diferentes condições edáficas, foram feitos estudos de laboratório e casa-de-vegetação. Em laboratório foram avaliados os efeitos da calagem em um solo ácido e da adubação fosfatada na germinação de esporos de Gigaspora margarita, Glomus macrocarpus e Acaulospora scrobiculata. Os efeitos da calagem e da adubação fosfatada no desenvolvimento das micorrizas e das plantas, aos 40, 60 e 80 dias após o plantio das sementes, foram avaliados em casa-de-vegetação. De uma maneira geral, o S. guianensis, que ocorre naturalmente em solos muito pobres em P. mostrou uma grande dependência da adubação fosfatada e/ou da micorriza. O micotrofismo do S. guianensis aumenta em solos ácidos com baixos níveis de P. Os processos de germinação dos esporos dos fungos MVA e de colonização das raízes são afetados pelas diferentes condições edáficas, dependendo da adaptabilidade dos fungos e/ou das micorrizas a tais condições. Possíveis mecanismos que aumentam a tolerância do S. guianensis a níveis tóxicos de Al e Mn são discutidos / Greenhouse and laboratory experiments were carried out in order study the Stylosanthes guianensis micotrophy and the behaviour of three MVA associations under different edaphic conditions. The effects of liming and phosphate fertilization on spore germination of Gigaspora margarita, Glomus macrocarpum and Acaulospora scrobiculata were evaluated under laboratory conditions. The same effects on plant growth and mycorrhizal development were also evaluated at 40, 60 and 80 days after planting under greenhouse conditions. It was found that S. guianensis, which grows generally under low P level conditions, presented a great dependency on phosphate fertilization and/or on MVA association. At low P levels and low soil pH, the S. guianensis mycotrophy was even greater. Spore germination and root colonization were affected by different edaphic conditions according to the fungal or to the mycorrhizal adaptability to such conditions. Some mechanisms which may contribute to increase S. guianensis tolerance to Al and Mn toxic levels are also discussed

O presente trabalho visou basicamente estudar a influência dos fatores ph, temperatura de ativação e tempo de incubação na germinação dos esporos de bactérias isoladas da fermentação alcoólica. Para ativação, os esporos de Bacillus subtilis, Bacillus coagulans, <Bacillus brevis e Bacillus megaterium foram submetidos aos aquecimentos a 60, 80 e 90 ºC em caldo de cana-de-açúcar a ph 4,5; 5,5 e 6,5. Depois do tratamento de ativação, as suspensões de esporos foram resfriadas à aproximadamente 35ºC, e em seguida, pré-incubadas a 35,0 &#177; 1,0 ºC por 6 horas. Amostras foram coletadas a 0, 2, 4 e 6 horas, diluídas serialmente, plaquadas e incubadas a 35,0 &#177; 1,0 ºC por 24 horas. O número de colônias foi tomado como o número de esporos ativados e germinados. A análise estatística dos dados permite concluir que houve uma diminuição no número de esporos germinados, para todas as espécies de Bacillus empregadas, com o aumento da temperatura e tempo de incubação, sendo que a ativação a 90 ºC provocou uma certa inativação dos mesmos. Houve também redução no número de esporos germinados para todos os níveis de ph, com o aumento do tempo de incubação, e o ph 4,5 mostrou um efeito inibitório mais acentuado na germinação dos esporos, exceto para Bacillus brevis. De uma maneira geral, verificou-se que o melhor tratamento para a ativação e germinação dos esporos das quatro espécies investigadas, em meio de caldo de cana-de-açúcar foi 80 ºC e ph 5,5. / This study was undertaken to investigate the influence of pH, activation temperature and incubation time on germination of bacteria spores isolated from alcohol fermentation process. The spores of Bacillus subtilis, Bacillus coagulans, Bacillus brevis and Bacillus megaterium were activated by heating them at 60, 80 and 90 ºC in sugar- cane- juice at pH 4,5, 5,5 and 6,5. After the activation treatments the spores suspensions were cooled to 35,0 ºC and then pre-incubated at 35,0 &#177; 1,0 ºC for 6 hours. Samples were withdrawn at 0, 2, 4 and 6 hours, serial diluited plated and incubated at 35,0 &#177; 1,0 ºC for 24 hours. The number of colonies developed was taken as the number of spores activated and germinated. The statiscal analysis of data showed that there was a reduction of the number of spores germinated for all four species of Bacillus, as the temperature of activation and time of incubation increased. The higher activation temperature (90 ºC) showed and inactivation effect on the spores. There was also a reduction of the spores germinated for all pH levels with the increase of the incubation time, and pH 4,5 showed a higher inhibitory effect on the spore germination, with exception for B. brevis spores. In the overall, the best treatments for the spores activation and germination in sugar-cane-juice, was 80 ºC and pH 5,5, what means that they may germinated if present, in the sugar-cane-juice, at the heat treatment conditions, for a sugar and alcohol production.

Os fungos micorrízicos arbusculares (FMA) têm papel fundamental na absorção de nutrientes, sobrevivência vegetal e na estruturação dos solos. Recentemente uma série de pesquisadores verificou que plantas associadas com FMA também podem se associar com os fungos de micélio escuro (DSE do inglês, dark septate endophytes). Embora de estudo recente, já se observou que os endófitos de micélio escuro igualmente podem promover o crescimento de plantas em diversos ambientes. O objetivo desse trabalho é realizar um levantamento de espécies de FMA e DSE em áreas de Mata Atlântica em um gradiente altitudinal, podendo advir respostas de relevância ecológica maior, como a influência da planta hospedeira, dos parâmetros do solo, da sazonalidade e da altitude sobre a ocorrência e diversidade desses fungos. Espera-se também esclarecer melhor a lacuna existente no conhecimento dos benefícios dos DSE para as plantas e dar o primeiro passo para a compreenção da interação dos FMA com os DSE. Avaliaram-se os atributos químicos, físicos e microbiológicos do solo e, entre estes, a ocorrência e diversidade dos FMA e DSE na raiz e solo rizosférico de diferentes espécies arbóreas da Mata Atlântica do Parque Estadual da Serra do Mar, Estado de São Paulo, Brasil, em um gradiente altitudinal: 80m, 600m e 1000m. As coletas de solo e raízes foram realizadas em quatro estações. Os dados foram submetidos à análise de variância ANOVA, teste LSD, análise canônica discriminante (ACD) e análise de redundância (RDA). Uma vez que muitas espécies de DSE são conhecidas por serem patogênicas sobre certas plantas, os isolados de DSE foram avaliados quanto à sua eventual patogenicidade. Os isolados não patogênicos foram selecionados para um bio-teste, sozinhos ou em combinação com um FMA em plantas de arroz. Foram identificadas no solo rizosférico 58 espécies de FMA e os gêneros Acaulospora e Glomus foram dominantes, enquanto que nas raízes, apenas 14 grupos de FMA foram encontrados e todos apresentaram elevada similaridade com a família Glomeraceae. Foram encontrados 251 isolados de DSE que se agruparam em 35 UTO. A maioria dos isolados de DSE foram patogênicos para as plantas de arroz. A época de amostragem teve efeito sobre a colonização radicular e diversidade dos FMA. A altitude foi importante em selecionar espécies de FMA e também agiu sobre o número de esporos e colonização por DSE e FMA. A maioria dos FMA e DSE ocorreu de forma generalizada nas diferentes espécies hospedeiras, apesar de existirem algumas espécies fúngicas com preferências para certas árvores. Os atributos do solo tiveram forte influência sobre a colonização pelos FMA, enquanto que para os DSE as diferenças na colonização foram pouco infuenciadas pelos parâmetros do solo. No entanto, as propriedades do solo foram responsáveis por dirigir a ocorrência de certas espécies de FMA e DSE. A interação entre FMA e DSE e os seus benefícios para as plantas hospedeiras ainda necessita de maiores estudos principalmente com relação a compreenção das condições fornecidas em experimentos que favoreçam ambas as associações. / Arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) play a fundamental role in the absorption of nutrients, plant survival and soil structure. Recently a number of researchers found that plants associated with AMF may also be associated with dark mycelium fungi. In a recent study, it was observed that the dark septate endophytes (DSE), usually Ascomycetes, can promote the growth of plants in different environments. The aim of this study was to survey the diversity of AMF and DSE in Atlantic Forest areas in altitudinal gradients, which result in responses of greater ecological relevance, as the influence of the host plant, soil attributes, seasonality and altitude on occurrence and diversity of these fungi. We also expect to clarify the gap in the knowledge of the benefits of DSE for plants and take the first step towards the comprehension of the interaction of AMF and DSE. We evaluated the chemical, physical and microbiological attributes, and among these, the occurrence and diversity of AMF and DSE in the root and rhizospheric soil of different tree species of the Atlantic Forest of Serra do Mar State Park, State of Sao Paulo, Brazil, along an altitudinal gradient: 80m, 600m and 1000m. Samplings of the soil and roots were performed in four seasons. The data were submitted to ANOVA, LSD test, canonical discriminant analysis (CDA) and redundancy discriminant analysis (RDA). Since many species of DSE are known to be pathogenic on certain plants, DSE fungal isolates were evaluated for their eventual pathogenic activity. The isolates non-pathogenic were used in a bio-test to either alone or in combination with the AMF in rice plants. In the rhizosphere 58 AMF species were identified. The genera Acaulospora and Glomus were predominant. However, in the roots, only 14 AMF sequences were found and all had high similarity to the family Glomeraceae. In an analysis of the DNA ITS sequences of the 251 DSE isolates we found that they clustered into 35 UTOs. Most DSE found were considered pathogenic for rice. The season had no effect on root colonization and AMF diversity. Altitude was important in selecting AMF species and also acted on the number of spores and colonization by AMF and DSE. Most of the AMF and DSE were generalists, without a specificity for host plants, although there are some fungal species with preferences for certain trees. The soil properties had a strong influence on colonization by AMF while, for the DSE, differences in colonization do not seem to be related to soil attributes. However, soil attributes were responsible for directing the diversity of AMF and also of DSE species. The interaction between AMF and DSE and their benefits to the host plants require further studies to comprehend the conditions that favor both associations.

Com o objetivo de se estudar o micotrofismo de Stylosanthes guianensis e o comportamento de três associações micorrízicas vesículo-arbusculares em diferentes condições edáficas, foram feitos estudos de laboratório e casa-de-vegetação. Em laboratório foram avaliados os efeitos da calagem em um solo ácido e da adubação fosfatada na germinação de esporos de Gigaspora margarita, Glomus macrocarpus e Acaulospora scrobiculata. Os efeitos da calagem e da adubação fosfatada no desenvolvimento das micorrizas e das plantas, aos 40, 60 e 80 dias após o plantio das sementes, foram avaliados em casa-de-vegetação. De uma maneira geral, o S. guianensis, que ocorre naturalmente em solos muito pobres em P. mostrou uma grande dependência da adubação fosfatada e/ou da micorriza. O micotrofismo do S. guianensis aumenta em solos ácidos com baixos níveis de P. Os processos de germinação dos esporos dos fungos MVA e de colonização das raízes são afetados pelas diferentes condições edáficas, dependendo da adaptabilidade dos fungos e/ou das micorrizas a tais condições. Possíveis mecanismos que aumentam a tolerância do S. guianensis a níveis tóxicos de Al e Mn são discutidos / Greenhouse and laboratory experiments were carried out in order study the Stylosanthes guianensis micotrophy and the behaviour of three MVA associations under different edaphic conditions. The effects of liming and phosphate fertilization on spore germination of Gigaspora margarita, Glomus macrocarpum and Acaulospora scrobiculata were evaluated under laboratory conditions. The same effects on plant growth and mycorrhizal development were also evaluated at 40, 60 and 80 days after planting under greenhouse conditions. It was found that S. guianensis, which grows generally under low P level conditions, presented a great dependency on phosphate fertilization and/or on MVA association. At low P levels and low soil pH, the S. guianensis mycotrophy was even greater. Spore germination and root colonization were affected by different edaphic conditions according to the fungal or to the mycorrhizal adaptability to such conditions. Some mechanisms which may contribute to increase S. guianensis tolerance to Al and Mn toxic levels are also discussed