Fusarium oxysporum Schl. var. vanillae (Tucker) Gondon is known to cause root rot in Vanilla planifolia Andrews in most regions where it is grown, including the major plantations in Xishuangbanna, Yunnan Province of China. This is of serious economic concern to the Province since the vanilla flavouring extractable from the beans of the plant is a valuable food product and an important export commodity. There are no fungicides registered for the control of Fusarium root rot and the only available chemical control methods are ineffective and cause serious contamination of the soil. Breeding for resistance is difficult when no dominant gene is known or where little information is available on fungal pathogenicity. Biocontrol is the main alternative for disease control in this crop, an attractive approach because of increasing concerns for environmental protection. The investigation considers two biocontrol strategies: first the introduction of virulent, antagonistic, non-pathogenic strains, closely-related to the pathogen, to overcome pathogenic populations in infected soils; second the use of essential oils with antimicrobial properties when applied to infected soils. Pathogenicity tests have been done on 81 out of 87 F. oxysporum isolates collected in Yunnan Province. Among these, 32 isolates were non-pathogenic and 49 were pathogenic. The pathogenicity results showed the complexity of F. oxysporum in Yunnan. Seventeen isolates were recovered from the Daluo plantation, of which 14 were pathogenic isolates and 3 non-pathogenic isolates; 26 from the Menglun plantation, in which 12 were pathogenic and 14 were non-pathogenic; 18 isolates from the Manjingdai plantation, in which 12 isolates were pathogenic, whilst the other 6 were non-pathogenic and 20 were obtained from the plantation in Hekou i County, of which 11 were pathogenic isolates and 9 were non-pathogenic. Genetic diversity within this population of F. oxysporum has been investigated with respect to vegetative compatibility and to determine the relationship between VCGs and virulence. The VCG results showed that the 87 strains of Fusarium oxysporum f.sp vanillae isolated from Yunnan Province were complex. They could be distributed into 12 different VCGs and that a direct relationship between VCGs group and virulence could not be drawn. Two non-pathogenic strains, ML-5-2 and HK-5b-4-1, have been screened from 87 strains as candidate biocontrol agents by pathogenicity and VCG, which are self-incompatible and closely related to the pathogens. These two strains were effective in vanilla root rot control in controlled environments, but their effects in field experiments were less conclusive. Seven essential oils, which have long been regarded as having inhibitory effects on pathogens in nature, have also been investigated as biocontrol agents. Three oils, cinnamon oil, thyme oil and clove oil, were effective in inhibiting the growth of pathogen in vitro. These oils may develop into useful components of different management strategies with non-pathogenic strains. For the future, consideration will need to be given to the mechanism(s) of the interaction of the antagonistic components with the soil microbe population and host plant and also to appropriate formulation, to take account of soil type, crop status, cultural practices, environmental and economic factors. Biocontrol methods have considerable potential but must be acceptable to farmers as part of an overall crop management programme.

Un nouveau procédé d'extraction des huiles essentielles a été développé, mis au point et optimisé nommé «Vapo-diffusion Assistée par Micro-ondes (MSDf)». Le procédé MSDf à été appliqué à l'extraction des huiles essentielles des peaux d'oranges et de fleurs de lavande. Ce procédé est basé sur la combinaison d'une technique d'extraction classique : l'hydro-diffusion et le chauffage micro-ondes comme technologie d'intensification. Une deuxième nouvelle approche pour l'extraction des huiles essentielles à partir de matrices aromatiques sèches et sans ajout de vapeur ni d'eau nommé «Diffusion à sec générée par micro-ondes (MDG)». Le procédé MDG à été appliqué à l'extraction des huiles essentielles des graines de carvi. Le MSDf et le MDG apparaissent comme des procédures «douces» permettant un gain de temps et d'énergie considérable et la diminution des rejets de CO2 dans l'atmosphère / Microwave steam diffusion (MSDf) was developed as a cleaner and new process design and operation for isolation of essentials oils and was compared to conventional steam diffusion (SDf). This green process has been applied and tested using two aromatic matrixes: fresh orange peels and dry lavender flowers. This process is based on the combination of a traditional technique of extraction: hydro-diffusion and the microwave irradiation energy. Without adding any steam or water, we proposed also a novel and green approach for extraction of secondary metabolites from dried plant materials. This “steam and water free” approach based on a simple principle involves the application of microwave irradiation and earth gravity to extract the essential oil from dried caraway seeds. MSDf and MDG were better than SDf in terms of energy saving, cleanliness and reduced waste water

Pouco ainda se sabe das respostas do orégano frente às condições brasileiras de cultivo agrícola. Esta dissertação tem por objetivo verificar as respostas do orégano em produção de biomassa e óleo essencial frente ao déficit hídrico ocasionado por diferentes potenciais matriciais da água no solo. Em casa de vegetação, foram realizados dois experimentos em vasos de 15 L. O primeiro ensaio foi realizado na primavera/verão de 2014/2015 e o segundo ensaio no outono/inverno de 2015, em um delineamento em blocos casualizados em fatorial 4 X 3 + 1 composto por quatro potenciais mátricos da água no solo (-60,8; -91,2; - 121,2 e -152,0 kPa) adotados em três fases do cultivo (ciclo todo, fase vegetativa e fase de pré-florescimento) e o tratamento adicional (-19,7 kPa equivalente a capacidade de campo), com 6 repetições, totalizando 78 parcelas. Aos 96 dias após o transplantio das mudas foram realizadas as colheitas e a avaliação das plantas cultivadas, por meio da determinação da biomassa fresca e seca, teor e rendimento de óleo essencial e produtividade da água em função da biomassa seca e óleo essencial. O potencial mátrico -60,8 kPa adotado no manejo da irrigação durante todo o cultivo do orégano resultou no maior teor e rendimento de óleo essencial, já o potencial mátrico -91,2 kPa adotado no manejo da irrigação durante o préflorescimento do orégano resultou na melhor média de biomassa seca. O potencial mátrico -60,8 kPa adotado no manejo da irrigação durante o pré-florescimento do orégano resultou na melhor média de biomassa fresca. A maior produtividade da água em função do óleo essencial foi alcançada manejando a irrigação do orégano a -60,8 kPa durante todo ciclo de cultivo, a maior produtividade da água em função da biomassa seca foi obtida manejando a irrigação do orégano a -91,2 kPa durante todo ciclo de cultivo. A melhor estação sazonal para cultivo do orégano tendo por foco a extração de óleo essencial foi à primavera/verão e ambas estações sazonais são recomendadas para o cultivo do orégano tendo por foco a produção de biomassa seca e fresca. / Little is known about the responses of oregano against the brazilian conditions of agricultural cultivation. This dissertation aims to verify the oregano responses in biomass and essential oil production against water deficit caused by different matric potentials of water in the soil. At the greenhouse, two experiments were conducted in 15L pots. The first trial was conducted in the spring / summer 2014/2015 and the second during the autumn / winter 2015, in a randomized block design in a factorial 4 x 3 + 1 consisting of four potential matric of water in the soil (-60, 8; -91.2; -121.2 and -152.0 kPa) adopted in three different stages of cultivation (the whole cycle, vegetative phase and pre-flowering) and the additional treatment (- 19.7 kPa equivalent to the field capacity), with 6 repetitions, totaling 78 plots. At 96 days after transplanting the seedlings, plants were harvested and evaluated by determining the weight of fresh and dried biomass, content and yield of essential oil and water productivity according to the dried biomass and essential oil. The matric potential of -60.8 kPa adopted in the management of irrigation throughout the oregano cultivation resulted in higher content and essential oil yield, while the matric potential of -91.2 kPa adopted in the management of irrigation during the preflowering oregano resulted in the best average of dry biomass. The matric potential of -60.8 kPa adopted in the management of irrigation during the oregano pre-flowering resulted in a better fresh biomass average. The highest yield of water in function of essential oil was achieved during oregano irrigation with -60.8 kPa throughout the growing season while the highest water productivity in function of dry biomass was obtained managing oregano irrigation to -91,2 kPa throughout the crop cycle. The best season for seasonal oregano cultivation focusing on essential oil extraction was the spring / summer and both seasonal stations are recommended for oregano cultivation focusing on the production of fresh and dry biomass.

Este trabalho teve como objetivo o mapeamento da composição do óleo essencial (OE) de Corymbia citriodora produzido no Brasil pelas principais destilarias, Três Barras (FTB) e Meneghetti (FMG), e a extração do OE e oleoresina (OR) a partir das folhas utilizando a tecnologia de fluidos supercríticos. Foram estudados os efeitos das condições do processo, pressão (P) e temperatura (T), sobre a composição química e rendimento dos extratos, além da atividade antioxidante de alguns ensaios. As folhas picotadas apresentaram umidade de 7,33±1,1 e 8,66±0,5% para a FMG e FTB, respectivamente. As extrações, a partir das folhas com CO2 em condições sub e supercríticas, foram realizadas em duas etapas. Na primeira etapa, obteve-se o OE e, em seguida, as condições foram reajustadas para se fazer a extração da OR. As combinações das variáveis P e T foram determinadas conforme um delineamento composto central rotacional (DCCR), sendo feito um para cada etapa de extração. Para todos os extratos obtidos na primeira etapa, bem como dos OEs obtidos por arraste à vapor (AV) e hidrodestilação (HD), determinou-se o perfil de voláteis por cromatografia gasosa acoplado ao espectrofotômetro de massa (GC/MS). Os ensaios de maior rendimento em OE sem a coextração de pigmentos (100 bar e 60ºC, FTB=1,59% e FMG= 1,56%) e OR (220 bar e 70ºC, FTB=1,59% e FMG= 1,56%) tiveram sua atividade antioxidante determinada pelos métodos DPPH e branqueamento do β-caroteno. A OR também foi avaliada quanto ao seu teor de compostos fenólicos totais, pelos métodos Folin Ciocalteu e Azul da Prússia, e flavonoides totais. Para a amostra FTB, verificou-se a influencia positiva da P no rendimento de óleo essencial (p<0,05), enquanto que para a amostra FMG nenhuma variável teve influencia significativa (p>0,05). Na resposta rendimento da OR, as variáveis independentes P e T não tiveram influencia significativa. A concentração do citronelal (CC) teve influencia significativa da P para a amostra FTB e da interação P × T, para a FMG. Para a amostra FTB, na condição supercrítica de 100 bar e 60ºC, o rendimento em OE foi semelhante ao obtido por HD (1,59% e 1,6±0,15%, respectivamente), porém o teor de citronelal foi superior (de 87,6%) ao método convencional (79,5%). Nestas mesmas condições para a amostra FMG, os rendimentos foram de 1,53 e 1,16±0,15% e os teores de citronelal de 71,8% e 57,9% para os OE obtidos por SFE e HD, respectivamente. Os OEs obtidos por AV das amostras FTB e FMG apresentaram teores de citronelal de 79,8 e 76,6%, respectivamente. Nestes OEs foram identificados diversos compostos com atividade biológica comprovada; verificou-se variações tanto na quantidade quanto na qualidade dos compostos encontrados em cada amostra. As ORs obtidas das folhas FTB e FMG apresentaram alta capacidade antioxidante em ambos os métodos testados, branqueamento do β-caroteno e DPPH, com 81,6±3,0 e 81,7±1,6% de inibição e EC50 de 18,04±0,6 e 12,6±0,4 mg/mL, respectivamente. A capacidade redutora dos compostos da OR foi maior para o método do Azul da Prússia (FTB= 15,7±1,6 e FMG= 12,9±0,5 mg EAG/100g de folhas) em relação ao reagente Folin-Ciocalteu (FTB=74,2±4,0 e FMG= 84,8±2,4, em mg EC/100g de folhas). Os teores de flavonoides (FTB=26,7±3,9 e FMG=20,4±0,9, em mg EC/100g de folhas) foram superiores aos valores dos compostos fenólicos obtidos pelo método de Folin-Ciocalteu, provavelmente porque o extrato foi testado em sua forma bruta. Os resultados encontrados demonstram que através das condições adequadas de extração com CO2 supercrítico é possível a obtenção de um OE enriquecido em citronelal e de uma OR com alta atividade biológica. A técnica também permite um melhor aproveitamento da matéria-prima, através da extração sequencial e seletiva de OE e OR, em relação aos métodos convencionais. / The aim of this work was to evaluate the Corymbia citriodora essential oil (EO) composition produced by the main Brazilian distilleries; Meneghetti and Três Barras moreover evaluate the yield, composition and biological activity of (EO) and oleoresin (OR) obtained from leaves by using supercritical fluids technology. The effects of operational conditions, pressure (P) and temperature (T), on chemical composition and yield were studied. The cut leaves showed moisture content of 7,33±1,1 and 8,66±0,5% to FMG and FTB samples, respectively. The extractions using CO2 in sub and supercritical conditions were performed in two steps. In the first step the EO was obtained. After, the operational conditions were readjusted to make the OR extraction. The P and T values were determined using a complete factorial experimental design (CFED). It was used two experimental designs, one for each step. The volatile profile of all EO, obtained by steam distillation (AV), hydrodistillation (HD) and SFE were determined using a gas chromatography coupled with mass spectrometer (GC/MS) equipment. The experiments that provide the higher yields in EO without pigments coextraction (100 bar e 60ºC, FTB=1,59% e FMG= 1,56%) and OR (220 bar e 70ºC, FTB=1,59% e FMG= 1,56%) had their antioxidant activity determined by DPPH test and β-carotene bleaching assay. The OR was also evaluated for its content of total flavonoids and total phenolics by two different methods, Prussian Blue and Folin-Ciocalteu. In the FTB sample, SFE, to the sample FTB was observed the positive influence of P on essential oil yield (p<0,05), whereas to FMG the variables P and T or its interaction do not have significantly influence in this response. The citronellal concentration (CC) had a positive influence of P to FTB sample and P x T interaction to FMG sample. To FTB, at 100 bar and 60ºC, the EO yield was similar from that obtained by HD (1,59% e 1,6±0,15%, respectively). However the citronelal concentration was higher than ( 87,6%) that obtained by the convencional method (79,5%). At the same conditions, to the FMG sample at the same conditions, the yields were 1,53 e 1,16±0,15% and the citrionelal concentration were 71,8% e 57,9% to the EO obtained by SFE and HD, respectively. OE obtained by AV from FTB and FMG showed citronellal concentrations of 79,8 e 76,6%, respectively. In this EO were identified a variety of compounds with biological activity; it was verified variations in both quantity and the quality of the compounds in each sample. The ORs obtained from FTB and FMG showed a high antioxidant capacity in both, β-carotene bleaching assay and DPPH test, with inhibition of 81,6±3,0 e 81,7±1,6% and EC50 of 18,04±0,6 e 12,6±0,4 mg/mL, respectively. Reducing capacity of OR compounds was higher in Prussian Blue method (FTB= 15,7±1,6 e FMG= 12,9±0,5 mg EAG/100g of leaves) in relation to Folin-Ciocalteu reagent (FTB=74,2±4,0 e FMG= 84,8±2,4, em mg EC/100g de folhas). Total flavonoids (FTB=26,7±3,9 e FMG=20,4±0,9, em mg EC/100g of leaves) were higher than the value of phenolic compounds obtained in Folin-Ciocalteu reagent, probably because the extract was tested crude. The results obtained suggest that by using the SFE it is possible to obtain an EO with a high citronellal concentration. OR also showed a high antioxidant capacity. The SFE technique also improve the raw material utilization by the sequencial and selective extraction of EO and OR, in relation of conventional methods.

Campomanesia phaea L, espécie da família Myrtaceae, popularmente denominada de \'cambuci\' foi estudada através de uma abordagem botânica, química e farmacológica. A planta foi coletada e é cultivada no Instituto de Agronomia da Estação Experimental de Ubatuba no litoral norte do Estado de São Paulo. O estudo morfo-anatômico das folhas foi realizado conjuntamente com uma triagem fitoquímica de seus constituintes químicos mais importantes e seus extratos foram ensaiados farmacológica e microbiologicamente. O ensaio de toxicidade aguda foi realizado em camundongos e a avaliação da atividade antimicrobiana foi realizada com o extrato liofilizado contra bactérias Staphylococcus aureus (ATCC 6538) e Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9027), em levedura, Candida albicans (ATCC 10231), e bolor, Aspergillus niger (ATCC 16404). O óleo volátil presente nas folhas da espécie, foi extraído por hidrodestilação em aparelho de Clevenger. O óleo bruto obtido, foi submetido à análise para identificação de seus componentes por cromatografia em camada delgada preparativa, cromatografia a gás e cromatografia a gás acoplada à espectrometria de massa (CG/EM) com banco de dados. Dentre 38 componentes reconhecidos, 34 foram identificados. A planta é rica em óleo essencial contendo linalol (11,1%), componente de grande valor comercial para a indústria de cosméticos e na indústria farmacêutica, óxido de cariofileno (11,8%), beta-cariofileno (6,3%), beta-selineno (6,9%) e alfa-cadinol (7,5%). / One of the most important species of Myrtaceae, commonly known in the Atlantic coast shore of São Paulo State, is Campomanesia phaea L, \'cambuci\'. It is widespread near the seashore, utilized not only in folklore medicine, due to a high tanin content of its stem bark, but also due to the exotic fruits that offers special flavor in alcoholic beverages. Botanical, chemical and farmacological approach has been performed to study the plant. Acute toxicity test has been perform in mice and the antimicrobial studies were performed against Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Pseudomonas Aeruginosa (ATCC 9027), Candida albicans (ATCC 10231), and Aspergillus niger (ATCC 16404). The composition of the water-destilled volatile oil in the leaves has been analysed using gas chromatography, GC/MS and TLC . Among 38 compounds recorded by GC, GC-MS and TLC, 34 components were identified. The volatile oil was found to be rich in linalool (11,1%), important substance that can be utilized in pharmacy and cosmetics, caryophyllene oxyde (11,8%), beta-caryophyllene (6,3%), beta-selinene (6,9%), and alfa-cadinol (7,5%).

Le développement de principe actif à partir de ressources naturelles pourrait être un moyen pour développer de nouvelles alternatives aux antibiotiques. L’huile essentielle d’arbre à thé est reconnue pour ses nombreuses propriétés et son activité antimicrobienne à spectre large, mais aussi pour sa toxicité et sa forte teneur en allergènes liée à sa composition en monoterpènes. Dans cette étude, nous cherchons de nouveaux principes actifs naturels issus de l’huile essentielle d’arbre à thé, qui auraient une activité antimicrobienne équivalente mais une toxicité et un pouvoir allergène réduit. Deux principes actifs ont ainsi été étudiés au cours de ce travail. Le Titroléane™, qui est une fraction de l’huile essentielle d’arbre à thé enrichi en monoterpène alcools mais avec un très faible taux de monoterpène, a montré des activités microbiologiques similaires à l’huile essentielle d’arbre à thé. La Synterpicine™ quant à elle, est uniquement composée des deux molécules majoritaires de l’huile essentielle, et présente une cytotoxicité réduite. La caractérisation de l’activité des principes actifs a été menée avec différentes méthodes d’études in vitro, pour définir leur activité inhibitrice et bactéricide, sur des bactéries planctoniques et en biofilm. Enfin, la recherche de nouvelles molécules actives au sein des principes actifs, s’est poursuivie à l’aide d’une méthode de chromatographie sur couche mince haute performance, couplée à une étude d’activité microbiologique par bioautographie. Cette étude a mis en évidence l’activité antimicrobienne de deux nouveaux principes actifs d’origine naturelle, pouvant être valorisés sur différents marchés notamment la santé humaine / The development of a natural bioactive compounds could be a mean of developing new alternatives to antibiotics. Tea tree essential oil is known for its numerous properties and its broad-spectrum antimicrobial activity, but also for its toxicity and its high content in allergens due to its composition in monoterpenes. In this study, we search for new natural compounds extracted from tea tree essential oil, which has equivalent antimicrobial activity but less toxicity and a reduced allergenic activity. Two bioactive compounds have been thus studied. Titroléane™ - a fraction of tea tree essential oil enriched in monoterpene alcohols but with a very low rate of monoterpenes - has shown microbiological activities similar to tea tree essential oil. As for Synterpicine™, it is only composed of the two main molecules of the essential oil, and presents a reduced cytotoxicity. The characterization of the compounds’ efficacy was carried out with different in vitro study methods, to define their inhibitory and bactericide activity, on planktonic and biofilm bacteria. Finally, the research of new active molecules within the active compounds, was pursued thanks to a high performance thin layer chromatography, paired up with a microbiological study by bioautography. This study has highlighted the antimicrobial activity of two new natural active extracts which can be valorised on different markets- especially human health

A utilização de embalagens biodegradáveis, tais como os filmes e coberturas comestíveis, apresenta-se como alternativa ao uso de recursos não-renováveis como material de embalagem. A incorporação de substâncias antimicrobianas em embalagens tem como objetivo minimizar o problema da contaminação microbiana em alimentos e, entre elas, os óleos essenciais (OE) têm recebido atenção especial por serem substâncias naturais e atenderem à preferência dos consumidores. Porém, a utilização de OE como um agente antimicrobiano natural é limitada por critérios organolépticos, sendo necessário determinar a concentração mínima necessária para inibir o desenvolvimento de microrganismos sem afetar sensorialmente as características do alimento. Assim, os objetivos desta pesquisa foram: desenvolver um filme comestível à base de alginato com incorporação de agentes antimicrobianos naturais e avaliar a adição de diferentes concentrações de cloreto de cálcio (CaCl2) como agente crosslinking na formulação do filme e na etapa complementar de formação do filme; caracterizar o filme frente às propriedades mecânicas e propriedades de barreira; determinar a concentração mínima inibitória (CIM) de óleos essenciais para Pseudomonas spp., Salmonella spp. e Listeria monocytogenes presentes em carne de frango, e verificar a aceitação pelo consumidor, através da análise sensorial (aroma), de pedaços de peito de frango in natura embalado com o filme antimicrobiano O OE de cravo foi o que se apresentou mais eficiente para os microrganismos testados com CIM de 0,2% sendo este o limite mínimo estudado no planejamento experimental para o desenvolvimento do filme antimicrobiano. As variáveis independentes neste planejamento foram: CaCl2 na faixa de concentração de 0,02 a 0,1% e OE cravo na faixa de 0,2 a 1,0%. Valores acima de 0,0316% de CaCl2, independente da concentração de OE estudada, diminuiram a zona de inibição do crescimento microbiano em testes realizados in vitro, possivelmente devido a formação de um gel muito forte que pode ter dificultado a incorporação da emulsão de OE na matriz polimérica dos filmes. Os resultados de permeabilidade ao vapor de água mostraram que a adição de CaCl2 à formulação dos filmes diminuiu a permeabilidade enquanto a adição de OE cravo foi responsável pelo aumento dessa propriedade. Com relação às propriedades mecânicas, tanto a adição de CaCl2 como a de OE cravo à formulação dos filmes aumentou a resistência máxima à tração. Porém, com relação ao alongamento máximo na ruptura, valores menores foram obtidos com a adição de CaCl2, enquanto maiores valores foram encontrados com a adição de OE cravo à formulação dos filmes. A avaliação da atividade antimicrobiana dos filmes em carne de frango foi realizada somente com a formulação que apresentou os maiores valores de zona de inibição in vitro (CaCl2=0,0316% e OE cravo=0,884%). Após 5 dias de armazenagem a 7º C, observou-se que a utilização do filme adicionado de OE de cravo como embalagem primária em amostras de carne de peito de frango promoveu o controle da multiplicação de L. monocytogenes o mesmo não ocorrendo para as populações de Salmonella spp. e Pseudomonas spp. A análise sensorial relacionada ao aroma da carne de peito de frango mostrou que o uso do filme à base de alginato incorporado de OE cravo é viável. Porém, este filme poderá sofrer interferência da matriz alimentar caso esta matriz apresente exsudação. / The use of biodegradable packaging such as edible films and coatings are an alternative to the use of non-recyclable packaging. The incorporation of antimicrobial substances in packaging aims at reducing food microbial contamination among which, essential oils (EO) have received special attention being natural and attending consumer demand. However, the use of EO as a natural antimicrobial agent is limited by organoleptic criteria making it necessary to determine the minimum concentration to inhibit the multiplication of microorganisms without affecting the sensory characteristics of the food. Therefore, the aims of this research were: to develop an alginate based edible film with natural antimicrobial agents, evaluating the addition of different concentrations of calcium chloride as a crosslinking agent in the formulation of the film and in the complementary stage; to characterize the mechanical properties and barrier properties; to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of EO for Pseudomonas spp, Salmonella spp and Listeria monocytogenes found in chicken meat and to verify consumer acceptance of the product through sensorial analysis (aroma). Among the studied EO, the concentration of 0.2% of clove oil was effective in inhibiting the microorganisms tested, this concentration being the minimum limit used in the experimental design for film development. The independent variables studied in this design were calcium chloride in the range of 0.02 to 0.01% and clove EO in the range of 0.2 to 1.0%. Concentrations of CaCl2 above 0.0316%, independent of the EO concentration, reduced the inhibition zone of microbial growth in in vitro tests, possibly due to the formation of a very strong gel which could have made the incorporation of the EO emulsion in the polymeric matrix of the film very difficult. The results of water vapor permeability tests showed that the addition of CaCl2 to the formulation of the films reduced the permeability while the addition of clove EO increased this property. Regarding to mechanical properties, the addition of CaCl2 as well as clove EO to the film formulation increased the values of tensile strength. On the other hand, relating to elongation at the break, smaller values were obtained with the addition of the salt while the addition of EO provided higher values. The evaluation of antimicrobial activity of the films in chicken meat was performed only with the formulation that showed the highest inhibition values presented in vitro (CaCl2=0.0316% and clove EO=0.0884%). After five days of storage at 7° C, it was observed that the use of the film added by clove EO as primary packaging provided the control of L. monocytogenes growth in samples of chicken meat but not of Salmonella spp and Pseudomonas spp. The sensorial analysis - aroma - showed that the use of alginate based film incorporated with clove EO is viable in food. However, when the food matrix presents exudation, it can interfere in this film.

Lippia sidoides Cham (alecrim pimenta) é uma planta medicinal e aromática nativa do nordeste brasileiro, se extrai o óleo essencial para uso bactericida, fungicida, moluscida e larvicida. O presente trabalho avaliou o efeito da idade de corte, horário de colheita e condições para as plantas de Lippia sidoides Cham. sobre a produção do seu óleo essencial nas condições da região sul do Tocantins. A extração do óleo essencial foi realizada por hidrodestilação em aparelho Clevenger, pelo tempo de uma hora e vinte minutos igualmente para todas as amostras. Foram realizados três experimentos. No experimento 1, comparou-se a produção de óleo essencial das plantas aos 90, 120, 150, 180, 210 e 240 DAT. No experimento 2, comparou-se o teor do óleo de amostras de folhas colhidas nos horários de 0, 4, 8, 12, 16 e 20 horas. E, no experimento 3, comparou-se o teor de óleo essencial em função de temperatura (30, 40 e 50ºC) e tempo de secagem (24, 48 e 72 horas). A tendência de maior teor de óleo seria em torno dos 87,5 DAT, diminuindo para cortes anteriores ou posteriores a esta. Os maiores valores para massa seca situando-se aos 210 DAT seguindo-se a tendência de redução desta variável a partir do citado período. Os maiores valores de produtividade de óleo essencial por planta ocorrem em torno dos 220 DAT, evidenciando essa data como a de tendência de maior produtividade. Conclui-se, que aos 220 dias após o transplantio ocorre uma produção de 5,75 g de óleo essencial por planta, alcançado a produtividade de óleo essencial de 57,5 kg ha-1. O tempo na secagem não influenciou no teor de óleo essencial. Porém a temperatura de 40 °C proporciona máxima conservação do óleo essencial de Lippia sidoides Cham. e consequentemente maior teor do mesmo. / Lippia sidoides Cham. (Rosemary pepper) is a native medicinal and aromatic plant in northeastern Brazil, extract the essential oil for use bactericide, fungicide, molluscicide and larvicide. This study evaluated the effect of cutting age, harvest time and conditions for the plant Lippia sidoides Cham. on the production of essential oil in the conditions of southern Tocantins region. The essential oil extraction was performed by hydrodistillation in Clevenger apparatus, the time of one hour and twenty minutes for all samples equally. Three experiments were conducted. In one experiment, we compared the production of essential oil from plants at 90, 120, 150, 180, 210 and 240 DAT. In experiment 2, compared the leaf samples Oil content collected at the times of 0, 4, 8, 12, 16 and 20 hours. And in experiment 3 compared the essential oil content in function of temperature (30, 40 and 50 ° C) and drying time (24, 48 and 72 hours). The tendency to higher oil content would be around 87.5 DAT decreasing to previous cuts or subsequent thereto. The highest values for dry mass standing at 210 DAT followed the downward trend of this variable from that period. The largest essential oil yield per plant values occur around 220 DAT, showing that date as the greater productivity trend. It follows that to 220 days after transplanting is a production of 5.75 g of essential oil per plant, achieved the essential oil yield of 57.5 kg ha-1. The drying time did not influence the essential oil content. However, the temperature of 40 ° C provides maximum conservation of essential oil of Lippia sidoides Cham. and consequently higher content thereof.

A espécie Minthostachys setosa (Briq.) Epling é uma planta arbustiva aromática da família Lamiaceae que ocorre ao longo dos Andes, da Venezuela até a Argentina. A utilização popular dessa planta para diferentes fins medicinais demanda a investigação dos seus efeitos farmacológicos. O objetivo proposto foi a avaliação da atividade antimicrobiana do óleo essencial, e dos seus componentes majoritários, e do extrato hidroalcoólico liofilizado das partes aéreas da Minthostachys setosa. A planta foi submetida à extração, por percolação, obtendo-se o extrato hidroalcoólico, e por arraste a vapor, o óleo essencial. O extrato hidroalcoólico e o seu liofilizado foram submetidos à análise cromatográfica em camada delgada, mostrando a presença de flavonoides e taninos. O óleo essencial foi submetido à cromatografia a gás acoplada à espectrometria de massas (CG-EM) e apresentou 39 compostos, sendo os majoritários a pulegona (28,6%), a mentona (12,6%) e a isomentona (11%). O método de diluição em meio líquido em microplacas foi utilizado para avaliação da atividade antimicrobiana do extrato liofilizado, do óleo essencial e dos seus compostos majoritários. As amostras foram desafiadas frente Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Candida albicans ATCC 10231 e Aspergillus niger ATCC 16404, comparando-se a eficácia com antibióticos específicos. O extrato liofilizado mostrou Concentração Inibitória Mínima (CIM) de 1,25 mg/mL para todos os microrganismos estudados, com exceção do Aspergillus niger, que não apresentou atividade. O óleo essencial mostrou valores de CIM entre 0,4 e 2,8 µg/mL, conforme o microrganismo desafiado. A pulegona mostrou valores de CIM entre 0,8 e 1,6 µg/mL e a mentona apresentou somente atividade frente S. aureus, com CIM de 2,9 µg/mL antimicrobiana. Portanto, o extrato liofilizado, o óleo essencial e os seus compostos majoritários da Minthostachys. setosa podem ser considerados candidatos à utilização como antimicrobianos em formulações cosméticas e farmacêuticas. / The Minthostachys setosa (Briq.) Epling specie plants aromatic shrub of the Lamiaceae family occurs throughout Andes, since Venezuela until Argentina. The popular use of this plant for different medicinal ends has been as indicative to the inquiry of the pharmacologic effect. The aim of the work was to evaluate the antimicrobial activity of the essential oil and his majority components, and hydroalcoholic extract and his lyophilized product of the Minthostachys setosa aerial parts. The plant had been submitted to the extraction by percolating and to obtain the hydroalcoholic extract, and by steam distillation the essential oil. The hydroalcoholic extract and his lyophilized product have submitted to the chromatographic analysis in thin layer, showing in its composition the presence of flavonoids and tannins. The chemical composition of essential oils were determined by spectrometry of masses (CG-EM) and it has presented 39 composites, being majority a pulegone (28.6%), the mentone (12.6%) and isomentone (11%). The antimicrobial activity of the lyophilized extract, the essential oil and majority components were assessed by microdilution method. The samples had challenged against the Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, the Candida albicans ATCC 10231 and the to Aspergillus niger ATCC 16404, and the specific antibiotics have been used as positive control. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) determined of the lyophilized extract for all the microorganisms studied has been of 1,25 mg/mL, with exception of the to A. niger that it has not presented activity. The essential oil has showed lower MIC, between 0,4 and 2,8 µg/mL, against different challenged microorganisms. Pulegone has showed MIC between 0,8 - 1,6 µg/mL and mentona the MIC against S. aureus of 2,9 µg/mL. Therefore, the lyophilized extract, the essential oil and its majority components of the M. setosa can be considered candidates the use as antimicrobial in cosmetic and pharmaceutical formulations.

Os óleos essenciais de plantas representam uma fonte de potenciais princípios ativos que podem ser utilizados como defensivos agrícolas para combate de insetos, bactérias e fungos. Vários estudos científicos relatam o potencial fungitóxico de óleos essenciais inclusive de óleos provenientes de algumas espécies de Eucalyptus. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o pontencial dos óleos provenientes de diferentes espécies de Eucalyptus, sobre a microflora natural do grão de milho em pós-colheita. Utilizou-se para isto três diferentes avaliações: a) a avaliação inicial que consistiu em avaliar o potencial antifúngico dos óleos de dez espécies de Eucalyptus sobre grãos de milho plaqueados sobre papel de filtro umedecido e considerando a microflora natural dos grãos; b) a avaliação da simulação de armazenamento dos grãos com apenas os óleos que se mostraram com maior potencial antifúngico na avaliação inicial e com misturas deles. Essa avaliação simula as condições dos grãos armazenados considerando a microflora natural e c) a avaliação em meio de cultura utilizando o meio Maize Meal Extract Agar e os fungos produtores de aflatoxinas, Aspergillus flavus e A. parasiticus. Em todas as avaliações foram avaliados os modos de exposição aos voláteis e por contato com os óleos. Os óleos de E. grandis, E. citriodora, o híbrido E. grandis x E. urophylla e o E. staigeriana, que apresentaram melhor eficiência antifúngica, na avaliação inicial, sobre a microflora natural dos grãos de milho da amostra utilizada, foram analisados quanto a sua composição por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas e utilizados nas demais avaliações. Na avaliação de armazenamento para o modo de ação por contato, a mistura E. grandis + E. staigeriana obteve o melhor resultado e no modo de ação por exposição aos voláteis, o melhor óleo foi o E. citriodora. Comparando os dois modos de ação, o por contato teve o melhor potencial antifúngico. Na avaliação em meio de cultura no modo de ação por contato, a mistura E. staigeriana + (E. grandis x E. urophylla) obteve melhor potencial antifúngico para ambos os fungos e para o modo de ação por exposição aos voláteis, o melhor potencial antifúngico foi com o óleo de E. staigeriana. Ambos os modos de ação foram estatisticamente iguais nesta avaliação para maioria dos tratamentos. Observou-se que os tratamentos apresentaram uma ação diferenciada sobre o crescimento e a produção de aflatoxinas que foi dependente do óleo, do modo de ação e da espécie aflatoxigênica avaliada. / The essential oils of plants are a potential source of active ingredients that can be used as pesticides to combat insects, bacteria and fungi. Several studies have been reported in the literature on the fungitoxic potential of essential oils, including oils from some species of Eucalyptus. This study aimed to evaluate the potential of essential oils from different species of Eucalyptus on the natural microflora of post-harvest corn. Three different assessments were used for this study: a) the initial assessment was used to grade ten Eucalyptus oils relating to its antifungal potential. In this assessment the effect of oil was checked on corn grains that were placed on moistered filter paper, considering the natural microflora of the grains, b) the second assessment was carried out just on higher antifungal potential oils observed in the initial evaluation and their binary blends. This evaluation simulates the conditions of grain storage considering the natural microflora of grain and c) the thrid assessment was carried out using basal medium (Maize Meal Extract Agar) and aflatoxigenic species, Aspergillus flavus and A. parasiticus. In all assessments, two assays were evaluated, headspace volatile exposure assay and contact assay. The oils of E. grandis, E. citriodora, the hybrid of E. grandis x E. urophylla and E. staigeriana which had the best antifungal efficiency in the initial evaluation on the natural microflora of corn were analyzed by gas chromatography with mass spectrometry for their composition. In the evaluation of grain storage for the contact assay, the mixture of E. grandis + E. staigeriana obtained the best result and for the headspace volatile exposure assay the best oil was E. citriodora. Comparing the two assays, contact and headspace volatile exposures, the contact assay had the best antifungal potential. In the evaluation using the basal medium in the contact assay, the mixture of E. staigeriana + (E. grandis x E. urophylla) achieved the best antifungal potential for both fungal species, and in the haedspace volatile exposure assay, the best antifungal potential was achieved with the oil of E. staigeriana. Both assays of this assessment were statistically identical to most treatments. It was observed that the treatments had a different influence over the fungal growth and aflatoxin production. And these depended on the oil, the assays and the aflatoxigenic species.