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1	Mikrobiell produktion av rekombinant protein : En undersökning av expressionssystem för industrin Sjölander, Johan, Holmdahl, Maya, Olaisson, Fredrik, Celma, Gunta, Strandgren, Mikael, Wirtanen, Alexander January 2015 (has links) No description available. Proteinproduktion expressionssystem T.reesei GE-healthcare
2	Funktionelle Interaktionen von Tau mit anderen Proteinen, die bei der Alzheimer´schen Krankheit beteiligt sind Leschik, Julia 03 November 2005 (has links) Die Alzheimer-Krankheit (AD) ist gekennzeichnet durch ein massives Absterben von Neuronen in bestimmten Gehirnregionen. Die zwei charakteristischen histopathologischen Hauptmerkmale sind extrazelluläre Amyloidplaques bestehend aus dem APP-Peptidfragment Abeta und intrazelluläre Fibrillen hyperphosphorylierten Tau-Proteins. Familiäre Formen von AD (FAD) werden verursacht durch Mutationen in den beiden sehr homologen Presenilin-Genen 1 und 2 oder dem APP-Gen. Verschiedene Studien zeigen, dass ein Zusammenhang zwischen Presenilin Mutationen, Abeta-Generierung und Tau-Phosphorylierung beim Auslösen des Neuronentods vorliegt. Immer noch ungeklärt ist, inwiefern Abeta und Presenilin die Tau-abhängige Degeneration beeinflussen. In dieser Arbeit wird gezeigt, dass eine HSV-1-vermittelte Expression von fluoreszenzmarkiertem Tau in kortikalen Primärkulturen einen neurotoxischen Effekt ausübt. Dieser ist drastisch erhöht bei Verwendung eines Konstruktes, welches die pathologische Hyperphosphorylierung von Tau simuliert (pseudohyperphosphoryliertes Tau (PHP-Tau)). Die durch PHP-Tau induzierte Neurodegeneration ist assoziiert mit einer Induktion apoptotischer Mechanismen. Die transgene Expression von wildtyp (wt), aber nicht von FAD-mutiertem PS1 (M146L), unterdrückt PHP-Tau-induzierte Neurodegeneration. Dagegen erhöht die transgene Expression mutierten APPs (SDL) die Degeneration und Phosphorylierung in der Gegenwart von wt, aber nicht von PHP-Tau. Die Daten weisen darauf hin, dass wt und FAD-mutiertes PS1 sowie Abeta die Neurodegeneration durch differentielle Mechanismen modulieren, wobei die Hyperphosphorylierung von Tau entscheidend beteiligt ist. Abeta amplifiziert die Tau-induzierte Neurodegeneration durch die erhöhte Modifikation von Tau. Während PS1 wt der Neurodegeneration durch modifiziertes Tau entgegenwirkt, besitzt FAD-mutiertes PS1 diese Funktion nicht mehr. Demnach könnte die Unterdrückung der Tau-Phosphorylierung eine effektive Therapiemöglichkeit darstellen. Alzheimer´sche Krankheit Tau Presenilin APP/Abeta Apoptose kortikale Primärkulturen HSV-1-Expressionssystem 32 - Biologie ddc:610
3	Kartläggning av bioproduktion i Sverige : Behov, hinder och drivkrafter Baczynska, Monika, Hafiz, Benjamin, MacCormack, Philip, Malmfors Sundheim, Hanna, Myhr, Nils, Skeppås, Madeleine January 2021 (has links) The market for drugs and treatments using biological products is rapidly growing. This is mainly due to the great potential that biological products have in comparison to traditional drugs. Biological products are composed of bigger molecules such as proteins and antibodies, and therefore allow a much more specific treatment. With the complexity of the molecules comes complexity in the upscaling of manufacturing. Start-up companies tend to lack knowledge of this process; consequently, outsourcing is often a requirement for the companies to grow. Outsourcing can be both risky and costly and the companies could benefit from having the skills in-house instead. This report provides information about needs, obstacles and driving forces regarding the future market for biological medicine and also outsourcing’s effect on the market. Desktop research was used to provide necessary information about the market and biological medicines, and also to find companies, research groups and investors that we mapped according to parameters, such as location and what field of medicine they engage in. Through phone and email contact, we gained further understanding about the actors we targeted. Desktop research and interviews were used to identify needs, obstacles and driving forces regarding the development of biological medicine. The result gives insight into where in Sweden the different candidates operate and it tells what pursuits and holdbacks they are facing when developing biological medicines. The major driving force is providing patients efficient treatments but also the opportunity to capitalise in a novel and successful type of industry. The major obstacle is first and foremost the great amount of money needed. Also, companies fail to grasp the many complex and time consuming steps in developing biological medicines. The interviews also showed that outsourcing is practically inevitable, especially for small companies, due to the difficulties of concentrating the competence in-house. In conclusion, the report shows that the benefits of biological medicine creates great driving forces for its development and that Sweden makes up a good climate for this. It also enlightens the importance of test beds to ensure that the future development relies on competence. Biologiska läkemedel kontraktstillverkning marknad kartläggning behov hinder drivkrafter bioproduktion mammalieceller testbäddar rekombinant produktion framtid expressionssystem läkemedelsutveckling Engineering and Technology Teknik och teknologier
4	Framtidens expressionssystem för svåruttryckta proteiner : Utvärdering av tolv expressionssystem / The future's expression systems for complex proteins : Evaluation of twelve expression systems Andersson, Pontus, Edenståhl, Selma, Eriksson, Elin, Hävermark, Tora, Nielsen, Jonas, Pihlblad, Alma January 2018 (has links) Today, recombinant expression of proteins is used for a variety of purposes. One of these is the production of allergens, which are vital components in allergy diagnostics. However, traditional expression systems such as Escherichia coli and Pichia pastoris might not have the capacity to express all proteins of interest. Thermo Fisher, which is a leading producer of allergy tests, has requested an evaluation of different microorganisms and their capacity for heterologous protein expression in order to expand their existing toolbox of expression systems. This summary was made through a literature study, where twelve organisms were evaluated. Six eukaryotic and six prokaryotic expression systems are compared based on their ability to properly glycosylate protein, need for specific culture conditions, safety, protease activity, duration, protein yield and protein solubility. The prokaryotic systems – Corynebacterium glutamicum , Lactococcus lactis , Pseudomonas fluorescens , Pseudoalteromonas haloplanktis , Ralstonia eutropha and Streptomyces lividans – are characterized by being easy to cultivate, operating in different temperature ranges and providing relatively high yields of recombinant protein. The eukaryotic systems – Aspergillus fungi, the green algae Chlamydomonas reinhardtii , the yeast Hansenula polymorpha , the parasite Leishmania tarentolae , the moss Physcomitrella patens and suspension-based plant cells – all have very different morphology and properties. In comparison with the prokaryotic systems, it can be concluded that they are generally better at folding and providing the correct glycosylation patterns for mammalian and plant proteins. However, they require more time and effort to establish a competent cell line. Furthermore, the resulting protein yield is usually less than for the prokaryotic systems. The conclusion can be drawn that no expression system is perfect. The solution is a toolbox, containing various expression systems and vector systems, providing the basis for successful expression of all kinds of complex proteins. Based on the evaluation of expression systems in this review, such toolbox can be obtained. Expressionssystem proteinuttryck Corynebacterium glutamicum Lactococcus lactis Pseudomonas fluorescens Pseudoalteromonas haloplanktis Ralstonia eutropha Streptomyces lividans Aspergillus Chlamydomonas reinhardtii Hansenula polymorpha Leishmania tarentolae Physcomitrella patens suspensionsbaserade växtceller Engineering and Technology Teknik och teknologier
5	Autolytische Salmonellen als Vektoren für die orale genetische Vakzinierung Lößner, Holger 27 November 2003 (has links) Die Entwicklung einer mukosal verabreichbaren, effektiven DNA-Vakzine gegen Infektionskrankheiten oder Tumorerkrankungen auf der Basis invasiver attenuierter Bakterien ist eine vielversprechende Alternative zu bisherigen parenteralen Strategien der genetischen Vakzinierung. Innerhalb dieser Arbeit wurden Salmonellen-Impfstämme für die orale Übertragung eines eukaryontischen Expressionsplasmids mit dem kleinen Oberflächenantigen des Hepatitis-B-Virus (HBsAg) als Modellantigen optimiert. Die kontinuierliche Sezernierung von Plasmiden als filamentöse Phagenpartikel wurde als ein erster Ansatz getestet, um mit lebenden Bakterien eine DNA-Vakzine innerhalb infizierter Zellen freizusetzen. Die Salmonellen-vermittelte Phagensekretion in der Wirtszelle ist jedoch nicht effizient genug, die Expression des Transgens zu vermitteln. Alternativ wurde ein Ansatz gewählt, durch eine spontan induzierte Lyse der Impfbakterien, Plasmid-DNA in die Wirtszelle zu übertragen. Dazu wurde ein neuartiges bakterielles Autolysesystem etabliert, basierend auf einem Zwei-Phasen-Expressionssystem und von Bakteriophagen abgeleiteten Lysedeterminanten. Dieses System ermöglicht erstmals die kontinuierliche Freisetzung von Plasmid-DNA und Proteinen aus einzelnen, lysierenden Salmonellen innerhalb einer sonst gesunden bakteriellen Gesamtpopulation. Innerhalb infizierter COS7-Zellen führt die Freisetzung des porenformierenden Proteins Listeriolysin O durch autolytische Salmonellen zur Zerstörung der Vakuole, in der die Impfbakterien replizieren, und erleichtert somit den Transfer der Plasmid-DNA aus den Bakterien in das Zytoplasma der Wirtszelle. Die Lysedeterminante und die eukaryontische Expressionskassette für HBsAg wurden auf einem Plasmid kombiniert, sowie eine Kassette zur konstitutiven Expression des Histon-ähnlichen Proteins aus Thermotoga maritima (TmHU) in ein solches Konstrukt integriert. TmHU stabilisiert die Plasmiderhaltung unter nicht selektiven Bedingungen und besitzt das Potential, die Effizienz der DNA-Translokation innerhalb der Wirtszelle zu erhöhen. Durch die orale Gabe optimierter autolytischer Impfbakterien konnte eine potente HBsAg-spezifische Antikörperantwort sowie eine zytotoxische zelluläre Antwort induziert werden. Bereits die einmalige Gabe der autolytischen Bakterien induzierte eine höhere antigenspezifische Antikörperantwort, als die herkömmliche intramuskuläre DNA-Vakzine. Das im Rahmen dieser Arbeit entwickelte Konzept autolytischer Salmonellen stellt also eine neuartige, effiziente Strategie für den mukosalen DNA-Transfer dar. Die Übertragung des Konzeptes der Autolyse auf andere bakterielle Trägersysteme ist möglich und kann zur Erweiterung des Anwendungspektrums bakterieller Vektoren beitragen. / The development of an effective mucosal DNA vaccine against infectious diseases or tumors based on invasive attenuated bacteria is a very promising alternative to common parenteral routes of genetic vaccination. This work aimed at the optimization of Salmonella vaccine strains for the oral delivery of an eukaryotic expression plasmid encoding the small Hepatitis B Virus surface antigen (HBsAg), here used as model antigen. The continuous secretion of plasmids as filamentous phage particles was first tested as a mean for the delivery of the DNA vaccine by living bacteria inside infected host cells. However, Salmonella-mediated phage secretion inside cells did not suffice for the induction of transgene expression. As alternative approach, inducible spontanous lysis of bacteria was used to mediate the release of plasmid DNA into host cells. For this purpose a novel bacterial autolytic system was established on the basis of a two-phase expression system and lysis determinants derived from bacteriophages. This system allows for the first time the continuous release of plasmid DNA and proteins from only few lysing Salmonella within an otherwise healthy bacterial population. Inside COS7 cells the release of the pore-forming protein listeriolysin O by autolytic Salmonella mediates the destruction of the Salmonella-harbouring vacuole, thereby facilitating the transfer of plasmid DNA from bacteria into the host cell cytoplasm. The lysis determinant was combined with the eukaryotic expression cassette for HBsAg on one plasmid. In addition, a cassette for the constitutive expression of TmHU, a histon-like protein derived from Thermotoga maritima, was integrated in such vector. TmHU stabilizes the plasmid propagation in the absence of selective pressure and has the potential to increase the efficiency of plasmid translocation inside the host cell. The oral administration of the optimized autolytic bacteria stimulated a potent HBsAg-specific antibody response as well as a cytotoxic cellular response. Already a single inoculation of the oral vaccine induced a higher specific antibody response than the conventional intramuscular DNA vaccine. Therefore the concept of autolytic Salmonella carrier strains developed in this work constitutes a novel efficient strategy for mucosal DNA delivery. The transfer of this concept to other bacterial carriers is possible and may widen the application field for bacterial vectors. Attenuierte Salmonellen Autolyse Filamentöse Bakteriophagen HBsAg Listeriolysin O Orale DNA-Vakzine Plasmid-DNA-Transfer TmHU Zwei-Phasen-Expressionssystem attenuated Salmonella autolysis filamentous bacteriophage HBsAg listeriolysin O oral DNA vaccine plasmid DNA transfer TmHU two-phase expression system 570 Biowissenschaften, Biologie 32 Biologie WF 7500 XD 3300 ddc:570
6	Analysis of Tribolium head patterning by forward and reverse genetics and transgenic techniques / Analyse der Kopfmusterung in Tribolium castaneum durch Vorwärts- und Rückwärtsgenetik und transgene Techniken Schinko, Johannes Benno 04 September 2009 (has links) No description available. 570 Biowissenschaften, Biologie Mathematics and Computer Science Tribolium castaneum Insertionsmutagenese UAS GAL4 binäres expressionssystem Kopflückengene Misexpression überexpression Tribolium castaneum UAS GAL4 binary expression system Insertional mutagenesis head gap genes misexpression overexpression 42.23 42.13
7	Stabil och antibiotikafri läkemedelsproduktion i rekombinant Escherichia coli Benevides, Kristina, Broström, Oscar, Elison Kalman, Grim, Swenson, Hugo, Vlassov, Andrei, Ågren, Josefin January 2017 (has links) Den här rapporten presenterar ett antibiotikafritt, stabilt och kromosombaserat expressionssystem för läkemedelsproduktion i Escherichia coli på beställning av företaget Affibody AB. E. coli-stammen BL21(DE3) valdes som värdorganism för expressionssystemet. Systemet består av en genkassett som innehåller en T7-promotor, en 5′-UTR från genen ompA och en terminatorsekvens från RNA-operonet rrnB. Fyra kopior av genkassetten ska integreras i pseudogenerna caiB, yjjM, hsdS och yjiV. En datormodell som modellerar det egentliga kopietalet i cellerna har skapats i mjukvaran MATLAB, vilket visar att det uppskattas vara maximalt 32 kopior av genkassetten per cell på grund av replikation av kromosomen. Ett högt pH i fermentorn; att använda fed-batch och blandade kolhydratkällor; och att använda stammen BL21(DE3) minskar acetatproduktionen i cellen. En lägre acetatproduktion kan leda till en högre produkthalt. En proteinutbytesmodell för mjukvaran MATLAB har konstruerats för att uppskatta koncentrationen av Affibody®-molekylen i en E. coli cell. copynumber copy-number copy number origin of replication rekombinant proteinexpression läkemedel E. coli antibiotikafri antibiotika expressionssystem expression system escherichia coli kromosom kromosombaserad kromosomal plasmidfri plasmid T7-promotor T7 promotor ompA rrnB autoinduktion auto induktion matlab kopietalmodell utbytemodell stabil pH pseudogen pseudo gen caiB yjjM hsdS yjiV fermentor batch fed-batch kontinuerlig fed batch fermentation Affibody affibody-molekyl affibody-molekyler affibodymolekyl affibodymolekyler bioreaktor acetat acetatbildning acetatproduktion acetatreduktion acetatreducering peptidläkemedel peptider peptid T7-system operator lac-operator operon 5'-UTR 3'-UTR sekundärstruktur mRNA T1 T2 terminator termineringssekvens optimering lac-operon repressor inducering BL21(DE3) BL21 B-stam B stam modell kopietal kopie tal OriC Pharmaceutical Biotechnology Läkemedelsbioteknik

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