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Clonagem e expressão de fragmentos de anticorpos (scFV) contra o vírus da leucemia felina (FeLV) por phage display /

Figueiredo, Andreza Soriano. January 2010 (has links)
Orientador: João Pessoa Araújo Júnior / Banca: Camilo Bulla / Banca: Paulo Eduardo Martins Ribolla / Banca: Julio Lopes Sequeira / Banca: Alexandre Secorum Borges / Resumo: O vírus da leucemia felina (FeLV) é um retrovírus que infecta principalmente gatos jovens. Em aglomerados de animais, a infecção pelo FeLV é a que mais contribui para a mortalidade. O emprego de técnicas moleculares de detecção viral permitiu avanços no que diz respeito à caracterização da patogenia e resposta à vacinação. Baseando-se nesses novos resultados, o diagnóstico da infecção deve ser realizado, primeiramente, com um teste de triagem de detecção da proteína de capsídeo p27, e, posteriormente, a confirmação com teste de detecção de DNA proviral. O diagnóstico e separação de animais positivos constituem o mecanismo primordial para conter a disseminação do FeLV. Diante disso, é de grande importância facilitar o acesso e baratear o diagnóstico. A construção de um teste de detecção da p27 baseia-se na produção de anticorpos monoclonais. A técnica de hibridomas é menos prática e demanda mais tempo para a obtenção de resultados satisfatórios quando comparada à técnica de Phage Display. Esta está em franco desenvolvimento e tem ganhado grande aplicabilidade na medicina veterinária. Empregamos o sistema de Phage Display desenvolvido por Krebber e colaboradores (1997). Primeiramente, foi construída uma biblioteca imune em camundongos, em seguida, foram amplificadas as regiões gênicas variáveis das cadeias leve (VL) e pesada (VH) e ligadas com um Linker de (Gli4Ser)4. Esses fragmentos geneticamente construídos derivados de anticorpos são denominados de single chain variable fragment ou scFv. Os scFvs foram fusionados à pIII e apresentados na superfície de fagos filamentos. Após três ciclos de seleção e enriquecimento contra a p27 recombinante produzida no laboratório, onze scFvs foram selecionados e caracterizados com relação à constituição nucleotídica e de aminoácidos. Dentre eles, o scFv 9 e scFv 70 foram escolhidos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The feline leukemia virus (FeLV) is a retrovirus that infects primarily young cats. In animal clusters, FeLV infection is the largest contributor to mortality. The use of molecular techniques for viral detection has allowed advances with regard to the pathogenicity and response to vaccination. Based on these new findings, the diagnosis of infection should be performed first, with a screening test for detection of p27 capsid protein, and subsequently confirmed with testing for proviral DNA. The diagnosis and segregation of positive animals is the primary mechanism to contain the FeLV spread. Therefore, it is of great importance to facilitate access and lower the diagnosis. The construction of a test for p27 detection relies on monoclonal antibody development. The hybridoma technique is less practical and more time consuming to obtain satisfactory results when compared to Phage Display technology. The latter has been improved rapidly and has gained wide application in veterinary medicine. We employed the Phage Display system developed by Krebber et al. (1997). First, an immune library was built in mice and the variable region of the light and the heavy genes were amplified and connected by a linker of (Gly4Ser)4. This genetically engineered antibody fragments are called single chain variable fragments or scFv. The scFvs were fused to the pIII protein and displayed on the surface of filamentous phages. After three rounds of selection and enrichment against recombinant p27 (produced in the laboratory), eleven scFvs were selected and characterized with respect to nucleotide and aminoacid composition. Among them, scFv 9 and scFv 70 were chosen for subcloning and expression in prokaryotic system for production of heterologous proteins. The scFvs in soluble forms were evaluated for their binding capacity to p27. The scFvs will be employed to the development of an immunoassay for FeLV detect... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Modelo clínico de uso de células-tronco mesenquimais da membrana amniótica para o tratamento da insuficiência renal crônica em gatos / Clinical trials with amniotic membrane mesenchymal stem cells for chronic kidney failure in cat model

Atanásio Serafim Vidane 23 October 2015 (has links)
A insuficiência renal crônica (IRC) é uma afecção clínica frequente em gatos domésticos. É caracterizada por inflamação tubulointersticial, vascular, glomerular e fibrose severa. Estudos em modelos de IRC induzida em roedores têm revelado uma redução e estabilização do quadro clínico, evidenciados pela melhora nos parâmetros de função renal e redução da inflamação e da fibrose renal. Neste estudo foi testada a segurança e o efeito do transplante alogênico intra-renal e endovenosa das células-tronco mesenquimais derivadas da membrana amniótica felina (AMSCs) em gatos acometidos pela IRC natural. As AMSCs foram isoladas de âmnio de embriões coletadas em campanhas rotineiras de castração. Dez gatos, machos e fêmeas, foram incluídos neste estudo. Um gato hígido recebeu injeção intra-renal das AMSCs guiada por ultrassom em ambos rins (5x105 células/rim). Nove gatos com IRC natural receberam injeção endovenosa das AMSCs (2x106 células x 2 tratamentos). A avaliação da evolução clínica foi baseada na mensuração dos parâmetros do hemograma, bioquímica, hemogasometria, urinálise e ultrassonografia. Foi efetuada análise de variância (ANOVA) comparar diferenças entre as fases de tratamento seguido de teste de Tukey para comparação das médias entre os grupos. Na injeção intra-renal, não houve variação nos parâmetros clínicos, porém foi necessária a sedação e anestesia geral. Foi registrado elevado estresse de manipulação e ligeira hematúria após o procedimento. Os gatos com IRC que receberam injeção endovenosa das AMSCs, registraram uma variação significativa nos parâmetros de função renal (redução dos níveis de creatinina sérica, redução da proteinúria e aumento da densidade urinária). A arquitetura e morfologia renal não teve variação com o tratamento. Conclui-se que as AMSCs felinas têm um efeito renoprotetor e melhoram a função renal em gatos acometidos pela IRC, estabilizando o quadro clínico e a progressão da doença. A injeção endovenosa das AMSCs constitui uma ferramenta importante para proporcionar boa qualidade de vida aos gatos com IRC / Chronic kidney disease (CKD) is a common clinical condition in domestic cats. It is characterized by tubulointerstitial, vascular, glomerular inflammation and severe fibrosis. Studies in rodent model of induced CKD have been shown a decrease and stabilization of the clinical condition, evidenced by renal function improvement and by inflammation and renal fibrosis reduction. In this study was evaluated the safety and effect of intra-renal and intravenous infusion of allogeneic mesenchymal stem cells derived from feline amniotic membrane (AMSCs) in cats with naturally occurring CKD. The AMSCs were isolated from fetal membranes collected after routine castrations. Ten cats, male and female, were enrolled and included in this study. A healthy cat received intrarenal injection of AMSCs guided by ultrasound in both kidneys (5x105 cells/kidney). Nine cats with naturally CDK received intravenous injection of AMSCs (2x106 cells x 2 treatments). The evaluation of the clinical condition was based on the measurement of complete blood count, blood biochemistry, blood gases, urinalysis and ultrasound. Analysis of variance (ANOVA) was performed to compare differences between the phases of treatment followed by Tukey test to compare means between groups. The clinical parameters of the healthy cat (intrarenal injection) did not change, but sedation and general anesthesia was required. The number of interventions stressed the animal and he developed transient hematuria after AMSCs injection. Cats with CDK, registered a significant improvement of renal function (decrease in serum creatinine and urine protein concentrations and increase in urine specific gravity). The kidney architecture and morphology did not change with the treatment. We conclude that the feline AMSCs have a renoprotective effect and improve renal function in cats with naturally occurring CKD, stabilizing the clinical condition and disease progression. Intravenous injection of AMSCs is an important tool to provide general well-being for cats with CDK
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Hemoplasmas em gatos dom?sticos: Preval?ncia e sua associa??o ? infec??o natural pelos v?rus das imunodefici?ncia e/ou leucemia felinas. / Hemoplasmas in domestic cats: Prevalence and its association to the Feline Immunodeficiency Virus and/or Feline Leukemia Virus natural infections.

Macieira, Daniel de Barros 28 February 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-28T20:16:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008- Daniel de Barros Macieira.pdf: 1044606 bytes, checksum: 797036e36833a30609c06a68880f37c8 (MD5) Previous issue date: 2008-02-28 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Infectious diseases present high morbidity among domestic cats and a delayed or misdiagnosis may result in patient death. The association between feline immunodeficiency (FIV) and/or feline leukemia (FeLV) viruses infections with hemoplasmas has great importance in veterinary practice, since agents may act synergically increasing risks for infected animals. To date, there are no studies in Brazil critically examining whether or not hemoplasma infections are associated with retroviral infection in cat. Thus, the aim of this study was to determine the prevalence and risk factors for Mycoplasma haemofelis (Mhf) and Candidatus Mycoplasma haemominutum (Mhm) infections in domestic cats tested for FIV and FeLV with a commercial ELISA kit. Based on serologic testing, cats were grouped as i) FIV-positive (n=25); ii) FeLV-positive (n=39); iii) FIV/FeLV-positive (n=8); and iv) FIV/FeLV-negative (n=77), or base-comparison group. CBCs were followed by DNA extraction, species-specific PCR (16S rRNA gene) for Mhf and Mhm and Southern blotting for all animals. Among all animals tested for retroviral infection (n=149), 16,8%, 26,2% and 5,4% were seropositive for FIV, FeLV and both retroviruses respectively. Associated factors to retroviral infections included an increased mean age (FIV, p<0,001), neutered status and history of fights/bites (FIV, p=0,033 and <0,001 respectively); presence of fleas (FeLV, p=0,018); history of blood transfusions and roaming outdoors (FIV/FeLV, p=0,028 and 0,033 respectively). Among evaluated clinical signs, anorexia and pale mucous (FIV, p=0,004 and 0,034 respectively); lethargy/depression, jaundice and tachycardia (FeLV, p=0,033, 0,036 and 0,003 respectively) were identified. Among CBC findings, anemia was related to FIV (p=0,012) and FeLV (p<0,001) infections, whereas thrombocytopenia was only related to FIV infection (p=0,015). Animals with FIV or double FIV and FeLV infections had a reduced WBC count (p=0,021 and 0,012 respectively). Mhf DNA was found in 4.0%, 2.6%, 12.5% and 7.8% of the cats from groups i, ii, iii and iv respectively, while 32.0%, 5.1%, 50.0% and 5.2% of these animals had a Mhm infection. Host factors that were associates to the presence of hemoplasma DNA included the retroviral status (p=0,001), history of fights/bites (p=0,003), roaming outdoors (p=0,001), living with other cats (p=0,008) and pale mucous (p=0,033). The logistic regression model used herein showed that cats with FIV (OR=4,25; p=0,009) and both FIV and FeLV (OR=7,56; p=0,014) were at greater risk of being hemoplasma infected than retroviral negative cats, mainly due to Mhm infection (OR=8,59, p=0,001 and OR=18,25, p=0,001 respectively). Among pure-breed cats, FIV-positive status was associated with hemoplasma infection (OR 45,0; p=0,001). / As doen?as infecto-contagiosas possuem uma alta morbidade entre os gatos dom?sticos e um diagn?stico impreciso ou retardado pode resultar no ?bito do paciente. A associa??o entre infec??es pelos v?rus da imunodefici?ncia (FIV) e/ou leucemia (FeLV) felina com hemoplasmas possui grande import?ncia na cl?nica m?dica, uma vez que os agentes podem agir de modo sin?rgico elevando os riscos para os animais acometidos. Devido ao fato de inexistirem no Brasil estudos que analisem criticamente a associa??o entre estes retrov?rus e os hemoplasmas, o presente trabalho teve como objetivo determinar a preval?ncia e poss?veis fatores associados para as infec??es por Mycoplasma haemofelis (Mhf) e Candidatus M. haemominutum (Mhm) em gatos dom?sticos, testados para a presen?a de FIV e FeLV, atrav?s de um kit comercial baseado na metodologia de ELISA. Com base no teste sorol?gico, os gatos foram agrupados como i) FIV-positivos (n=25); ii) FeLV-positivos (n=39); iii) FIV/FeLV-positivos (n=8); e iv) FIV/FeLV-negativos (n=77), ou grupo de refer?ncia para as compara??es. Hemogramas foram seguidos da extra??o/purifica??o de DNA, rea??o em cadeia da polimerase esp?cie-espec?fica para a detec??o de Mhf e Mhm e Southern Blot/hibridiza??o (SB) para todos os animais. Entre os 149 animais testados, 16,8%, 26,2% e 5,4% foram soropositivos para FIV, FeLV e ambos os retrov?rus respectivamente. Fatores associados ? infec??o por retrov?rus inclu?ram idade m?dia mais elevada (FIV, p<0,001), condi??o reprodutiva castrado e hist?rico de brigas/mordidas (FIV, p=0,033 e <0,001 respectivamente); presen?a de pulgas (FeLV, p=0,018); transfus?o de sangue e acesso ao ambiente externo (FIV/FeLV, p=0,028 e 0,033 respectivamente). Dentre as altera??es cl?nicas avaliadas, anorexia e mucosas p?lidas (FIV, p=0,004 e 0,034 respectivamente); letargia/depress?o, icter?cia e taquicardia (FeLV, p=0,033, 0,036 e 0,003 respectivamente) foram identificadas. Dentre os par?metros hematol?gicos a anemia esteve associada a presen?a de FIV (p=0,012) e FeLV (p<0,001) enquanto a trombocitopenia esteve apenas associada a infec??es por FIV (p=0,015). Animais com FIV ou com dupla infec??o (FIV e FeLV) tiveram uma contagem de leuc?citos reduzida (p=0,021 e 0,012 respectivamente). O DNA de Mhf foi achado em 4,0%, 2,6%, 12,5% e 7,8% dos gatos dos grupos i, ii, iii e iv, respectivamente, enquanto 32,0% 5,1%, 50,0% e 5,2% desses animais tinham infec??es por Mhm. Fatores inerentes ao hospedeiro que apresentaram associa??o com a presen?a do DNA de hemoplasmas inclu?ram o estado retroviral (p=0,001), hist?rico de brigas/mordidas (p=0,003), acesso ao ambiente externo (p=0,001), coabitar com outros gatos (p=0,008) e mucosas p?lidas (p=0,033). O modelo de regress?o log?stica usado mostrou que gatos com FIV (OR=4,25, p=0,009) e animais duplamente infectados para FIV e FeLV (OR=7,56, p=0,014) estavam em maior risco de serem infectados por hemoplasmas do que animais negativos para ambos os retrov?rus, principalmente em virtude de infec??es por Mhm (OR=8,59, p=0,001 e OR=18,25, p=0,001 respectivamente). Entre os animais de ra?a definida, a positividade para FIV estava associada com infec??es para hemoplasmas (OR=45, p=0,001).
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Avalia??o cl?nica dos gatos submetidos ? t?cnica de uretrostomia perineal / Clinical evaluation of the cats submitted to perineal urethrostomy

Corgozinho, Katia Bar?o 17 January 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006-Katia Barao Corgozinho.pdf: 1754960 bytes, checksum: e41b81ec345f919ab44aeb86dc073f65 (MD5) Previous issue date: 2006-01-17 / Perineal urethrostomy is a surgical procedure used in male cats to create a new opening between the pelvic urethra and skin in the perineal region. Indications for it include recorrent urethral obstruction and urethral obstruction that cannot be relieved by catheterization and reverse flushing. Perineal urethrostomy, when indicated and propely perfomed, is benefical to the patient and plagued with few complications. The purpose of this study was perform clinical evaluation of seventeen cats submitted to the perineal urethrostomy and evaluate the surgical complications in six months. This report evaluated the cats in the first day and up to six months after the surgery which were followed with biochemical, radiological analysis and urinalysis in this period, using questionnaires for better organization of the data. Sixteen cats had penile urethral trauma by catheterization and one cat had recurrent urethral obstruction. Complications observed after this procedure included hemorrhage, wound dehiscence, heamaturia or/and straining and urinary bacterial infection. None had urine burns or irritation or was incontinent or died. The most serious complication, urethral stricture, didn`t occur. The penile trauma was the major cause to indicate the urethrostomy. This study concluded that perineal urethrostomy predispose the urinary tract to increased bacterial contamination and subsequent infection. But many cats enjoy a long-term disease-free outcome and the clients consider their cats to have a good quality of life following surgery. / A uretrostomia perineal ? um procedimento cir?rgico realizado em gatos machos com o intuito de criar um novo orif?cio entre a uretra p?lvica e a pele na regi?o perineal. As indica??es dessa t?cnica incluem a obstru??o uretral recorrente e a obstru??o que n?o pode ser aliviada por cateteriza??o e lavagem reversa. A uretrostomia perineal quando indicada e realizada adequadamente, ? ben?fica para o paciente e gera poucas complica??es. O objetivo desse trabalho foi avaliar clinicamente 17 gatos submetidos ? uretrostomia perineal e as complica??es p?s-cir?rgicas no per?odo de seis meses. A an?lise foi efetuada no primeiro dia de atendimento at? o sexto m?s p?s-cir?rgico e os animais foram acompanhados com an?lises bioqu?micas, radiografias e com urin?lise, usando question?rios para melhor organiza??o dos dados. Dezesseis gatos tinham traumatismo na uretra peniana em conseq??ncia da cateteriza??o uretral e um gato apresentou obstru??o uretral recorrente. As complica??es p?s-operat?rias observadas foram hemorragia, deisc?ncia de sutura, hemat?ria/dis?ria e infec??o bacteriana urin?ria. Nenhum paciente teve irrita??o da ferida, queimadura por urina, incontin?ncia ou veio a ?bito. A complica??o mais s?ria, a estenose uretral, n?o aconteceu. A iatrogenia foi a maior causa para a indica??o da uretrostomia perineal nesses animais. Esse estudo indicou que a uretrostomia perineal predisp?e ao aumento da contamina??o bacteriana e infec??o urin?ria. Por?m muitos gatos ficam longos per?odos sem apresentar sinais cl?nicos de doen?a do trato urin?rio inferior e os propriet?rios consideram que seus gatos t?m boa qualidade de vida ap?s a cirurgia.
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Avalia??o cl?nica, laboratorial e ecocardiogr?fica de gatos dom?sticos hipertire?ideos no per?odo entre 2007 e 2008. / Clinical, laboratorial and echocardiographic evaluation of hyperthyroid domestic cats between 2007 and 2008.

Faria, Vanessa Pimentel de 25 March 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009 - Vanessa Pimentel de Faria.pdf: 2466878 bytes, checksum: b861fc3c8a06c44e7646fb5d2a403ae8 (MD5) Previous issue date: 2009-03-25 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Hyperthyroidism is the most common endocrine disorder of older cats. Due to the progressive nature of the disease, the identification of a sublcinical stage is essential in order to have a better control of the disease. The present study was a survey of the frequency of feline hyperthyroidism in Rio de Janeiro, from March, 2007 to April, 2008. The purpose of this study was to perform an evaluation of the clinical, laboratorial and echocardiographic aspects in a feline population of naturally acquired hyperthyroidism. Moreover, this study wants to emphasize the palpation and classification of thyroid lobes. This is the first report in Brazil that classifies the thyroid lobes in a standardized scale. A total of 51 cats coming from 20 different districts of Rio de Janeiro and also from Niter?i were evaluated in a feline practice in Botafogo. The selection of the cats was done by the documentation of an elevation of total T4 levels by radioimmunoassay. The animals were dividided in two groups according to the thyroid palpation: group I (nonpalpable thyroid lobe) and group II (palpable thyroid lobe). Laboratorial and complete clinical evaluation were performed in all cats. The clinical evaluation included behavioral evaluation, body weight, body condition, dermatologic, cardiopulmonary auscultation, thyroid palpation and systolic blood pressure reading. Besides the total T4, the following exams were performed: urea, creatinine, alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP) and glucose. Thirty one cats had an echocardiogram performed. This study concluded that the clinical, laboratorial and echocardiographic parameters were similar between the two groups. However, the T4 levels were significantly lower in the nonpalpable thyroid group. Vocalization, tachypnea, changes in cardiopulmonary auscultation, hypertension, increase in alanine aminotransferase and echocardiographic changes observed in cats from group I emphasizes the importance of an early diagnosis before the disease attacks organs as liver, kidneys and heart. / O hipertireoidismo ? a endocrinopatia mais comum em gatos idosos. Devido ? natureza progressiva da doen?a, a identifica??o de um est?gio subcl?nico se torna essencial para melhor controle da doen?a. O presente estudo compreendeu um levantamento da freq??ncia de gatos hipertire?ideos durante o per?odo de mar?o de 2007 a abril de 2008, no estado do Rio de Janeiro. O objetivo deste trabalho foi avaliar os aspectos cl?nicos, laboratoriais e ecocardiogr?ficos em uma popula??o de gatos dom?sticos com hipertireoidismo naturalmente adquirido, al?m de enfatizar a palpa??o dos lobos tireoidianos, assim como a classifica??o dos mesmos. Este ? o primeiro estudo no pa?s que classifica lobos tireoidianos dentro de uma escala padronizada. A popula??o estudada foi composta por 51 gatos, provenientes de 20 bairros distintos dentro do munic?pio do Rio de Janeiro e tamb?m do munic?pio de Niter?i. Esses animais foram atendidos em uma cl?nica privada exclusiva para gatos no bairro de Botafogo. A sele??o dos animais foi realizada atrav?s da detec??o do valor de T4 total acima dos valores de refer?ncia com a t?cnica de radioimunoensaio. Os animais foram divididos em dois grupos com base na identifica??o de aumento da tire?ide ? palpa??o: grupo I (tire?ide n?o palp?vel) e grupo II (tire?ide palp?vel). Avalia??es cl?nica e laboratorial completas foram realizadas em todos os gatos do estudo. A avalia??o cl?nica incluiu avalia??o comportamental, peso, escore de condi??o corporal, pele e pelagem, ausculta??o cardiopulmonar, palpa??o tireoidiana e aferi??o da press?o arterial sist?lica. Al?m do T4 total, os seguintes exames laboratoriais foram realizados: hemograma, ur?ia, creatinina, alanina aminotransferase (ALT), fosfatase alcalina (FA) e glicose. Trinta e um animais foram submetidos ? avalia??o card?aca, atrav?s de ecocardiograma. Este estudo concluiu que os par?metros cl?nicos, laboratoriais e ecocardiogr?ficos foram muito semelhantes entre os dois grupos. No entanto, os n?veis s?ricos de T4 total foram significativamente menores nos gatos com tire?ide n?o palp?vel. Vocaliza??o, taquipn?ia, altera??es em ausculta cardiopulmonar, hipertens?o arterial sist?mica, aumento da enzima alanina aminotransferase e altera??es em ecocardiograma observados em gatos do grupo I enfatizam a import?ncia do diagn?stico precoce para que o hipertireoidismo seja identificado antes do acometimento de ?rg?os como f?gado, rins e cora??o.
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Comparação da esplenectomia laparoscópica usando pneumoperitônio e técnica de elevação da parede abdominal (lift laparoscopy) em cadáveres de gatos

D'Avila, Gabriela Friedrich Lobo January 2018 (has links)
A esplenectomia laparoscópica, na medicina, foi introduzida em 1992. Desde então, diversos estudos tem demonstrado que a esplenectomia laparoscópica leva a menor tempo de hospitalização, menor perda sanguínea e recuperação mais rápida quando comparada a esplenectomia convencional. A laparoscopia convencional é realizada através do pneumoperitônio adquirido por meio do CO2, o que aumenta a pressão intraabdominal (PIA) e pode causar complicações cardiorrespiratórias. Em humanos, estas alterações foram reduzidas ou eliminadas com a laparoscopia com elevação da parede abdominal (gasless ou lift laparoscopy). Os felinos apresentam uma parede abdominal delgada e maleável, podendo esta espécie ser favorecida pela técnica de elevação da parede abdominal. O presente estudo teve como objetivo comparar a técnica cirúrgica de esplenectomia laparoscópica convencional com a mesma cirurgia utilizando o dispositivo de elevação da parede abdominal (gancho) em cadáveres de gatos, avaliando o tempo cirúrgico, curva de aprendizado e espaço de trabalho Foram utilizados 40 cadáveres de gatos, distribuídos em dois grupos (G1 – pneumoperitônio, G2 – elevação da parede abdominal) e realizada a técnica de esplenectomia laparoscópica com três portais. Na análise dos tempos cirúrgicos não foram encontradas diferenças significativas entre os dois grupos, mas a esplenectomia com elevação da parede abdominal mostrou menor espaço de trabalho. Em relação a curva de aprendizado, em ambos os grupos observou-se tempo cirúrgico total decrescente. O estudo demonstrou que a esplenectomia laparoscópica com três portais com elevação da parede abdominal é factível em cadáveres de gatos, apresentando tempo cirúrgico semelhante ao mesmo procedimento com o uso do pneumoperitônio. / In medicine, laparoscopic splenectomy was introduced in 1992. Since then, several studies have demonstrated that laparoscopic splenectomy leads to shorter hospitalization time, lower blood loss and faster recovery when compared to conventional splenectomy. Conventional laparoscopy is performed through the pneumoperitoneum acquired through CO2, this technique increases the intraabdominal pressure (IAP), which can cause cardiorespiratory complications. In humans, these changes have been reduced or eliminated with gasless or lift laparoscopy. The felines present a thin and malleable abdominal wall and can be favored by lift laparoscopy. The present study aimed to compare the surgical technique of conventional laparoscopic splenectomy with the same surgery using lift laparoscopy in cat cadavers, evaluating surgical time, learning curve and working space. A total of 40 cat cadavers were used, distributed in two groups (G1 - pneumoperitoneum, G2 – lift laparoscopy) and laparoscopic splenectomy with three portals was performed. In the analysis of surgical times, no significant differences were found between the two groups, but splenectomy with lift laparoscopy showed a smaller working space. In relation to the learning curve, in both groups, a total decreasing surgical time was observed. The study demonstrated that laparoscopic splenectomy with three portals with lift laparoscopy is feasible in cat cadavers, presenting similar surgical time with the same procedure using pneumoperitoneum.
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Biotecnologia IgY aplicada ao imunodiagn?stico da infec??o pelo v?rus da imunodefici?ncia felina / Applied biotechnology IgY to the feline immunodeficiency virus infection immunodiagnostic

SIDONI, Marli 01 December 2016 (has links)
Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2018-08-24T19:19:55Z No. of bitstreams: 1 2016 - Marli Sidoni.pdf: 1735106 bytes, checksum: 03907fc3437a44bf96b94d6040184407 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-24T19:19:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016 - Marli Sidoni.pdf: 1735106 bytes, checksum: 03907fc3437a44bf96b94d6040184407 (MD5) Previous issue date: 2016-12-01 / This work focused on deploying IgY technology into developing ELISA immunoenzymatic test to FIV diagnose, contributing to the establishment of a production model for a kit in the field of veterinary medicine. The first stage of this work consisted in analyzing the literature of the veterinary documents aimed to diagnose animal diseases, as stated in our current legislation. The access to both national and international optimized the enlightenment of developing parameters and method validation criteria for the development of this new product, named ELISA r-p24 IgY. The second stage consisted in establishing purification production and physicochemical characterization of the recombinant protein p24 of FIV. The biological activity maintenance was proved by way of Western Blot test with the banda presence of approximately 25 kDa, referring to the p24 protein. The third stage was to obtain IgY cat anti-IgG, derived from hens inoculation. The kinetics were monitored by ELISA and the outcome demonstrated that as of the second week, there was a gradual increase in antibody in the yolk, and remained high throughout the period of five months. Reference to the chicken 1, the average concentration was 40,1 mg/mL e for the chicken 2 was 32,2 mg/mL, throughout the period of 5 months. The fourth stage was the use of IgY technology to develop, standardize e validate the r-p24 IgY ELISA related to its use to diagnose the infection caused by FIV. The results were: 99% accuracy, 97.7% sensitivity, 99.5% specificity and 99.1% kappa index. In the fifth stage was carried out a comparative study between ELISA r-p24 IgY and ELISA r-p24 IgG, and it was demonstrated superior performance of the ELISA r-p24 IgY. The ELISA r-p24 IgY to have favorable characteristics from a commercial perspective, such as high precision and maintenance of reactivity for a minimum period of 12 months. Therefore, the above described procedure was efficient and enabled the development of a FIV test. The predominance of IgY technology may contribute to research and development of new tests, following both international regulation related to animal welfare and validation, thus boosting national development of diagnostic kits, for the benefit of human health or animal. / O objetivo deste trabalho foi aplicar a tecnologia IgY no desenvolvimento de um teste imunoenzim?tico, ELISA, para o diagn?stico do FIV, contribuindo no estabelecimento de um modelo de produ??o para um kit nacional na ?rea de medicina veterin?ria. A primeira etapa do desenvolvimento deste trabalho consistiu na revis?o da literatura dos documentos pr?prios para produtos de uso veterin?rio, destinados a diagnosticar doen?as dos animais, disponibilizados na legisla??o vigente. A consulta aos documentos nacionais e internacionais potencializou o esclarecimento de par?metros de desempenho ou crit?rios de valida??o de m?todos, para o desenvolvimento deste novo produto, denominado ELISA r-p24 IgY. A segunda etapa consistiu no estabelecimento da produ??o, purifica??o e caracteriza??o f?sico-qu?mica da prote?na recombinante p24 do FIV. A preserva??o da atividade biol?gica foi demonstrada por Western Blot com a presen?a de uma banda pept?dica de aproximadamente 25 kDa, referente ? prote?na r-p24. A terceira etapa deste trabalho, consistiu na obten??o de anticorpos IgY anti-IgG de gato, a partir da inocula??o em galinhas poedeiras. A cin?tica foi acompanhada por ELISA demonstrando um aumento gradativo do t?tulo de anticorpos na gema a partir da segunda semana, com um aumento significativo no 2? m?s, e mantendo-se elevado durante todo o per?odo de cinco meses. As concentra??es m?dias de prote?nas na galinha 1 foi de 40,1 mg/mL a partir de uma gema e na galinha 2 foi de 32,2 mg/mL por gema, no per?odo de 5 meses. A quarta etapa deste trabalho consistiu no emprego da tecnologia IgY para o desenvolvimento, padroniza??o e a valida??o do teste de Elisa r-p24 IgY para o diagn?stico da infec??o causada pelo FIV. Os resultados obtidos foram: a acur?cia de 99%, a sensibilidade de 97,7%, a especificidade de 99,5%, e o ?ndice kappa de 99,1%. Na quinta etapa deste trabalho realizou-se o estudo comparativo do ELISA r-p24 IgY frente ao ELISA r-p24 IgG, e foi demonstrado o desempenho superior no ELISA r-p24 IgY. A valida??o do ELISA r-p24 IgY mostrou caracter?sticas desej?veis para o uso comercial, tais como alta precis?o e manuten??o da reatividade por um per?odo m?nimo de 12 meses. Conclui-se que o procedimento elaborado foi eficiente e possibilitou o desenvolvimento de um teste para o diagn?stico do FIV. O dom?nio da Tecnologia IgY poder? contribuir com a pesquisa e o desenvolvimento de novos ensaios atendendo ?s normas e diretrizes nacionais e internacionais, tanto de bem-estar animal como de valida??o, impulsionando o desenvolvimento nacional de kits diagn?sticos de interesse em sa?de humana ou animal.
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Pesquisa de imunoglobulinas anti-Leishmania spp. e avalia??o cl?nica de gatos residentes em ?reas end?micas do Rio de Janeiro / Immunoglobulin anti-Leishmania spp. and clinical evaluation of cats resident in endemic areas of Rio de Janeiro

PADUA, Elisa Domingues 25 July 2017 (has links)
Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2018-09-12T17:52:35Z No. of bitstreams: 1 2017 - Elisa Domingues Padua.pdf: 1950908 bytes, checksum: d9644f85d3b5935e0ad3f149d04d4f4b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-12T17:52:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Elisa Domingues Padua.pdf: 1950908 bytes, checksum: d9644f85d3b5935e0ad3f149d04d4f4b (MD5) Previous issue date: 2017-07-25 / Despite some reports of the occurrence of Leishmaniasis in felines, the literature is scarce with regard to its research on populations of cats from areas endemic to the disease. In this way, the present study aimed to investigate the possibility of infection in cats by means of a rapid qualitative test of the antibody test in Serop?dica and Itagua?, metropolitan region of Rio de Janeiro, an endemic area for tegumentary and visceral canine leishmaniasis Anti-Leishmania chagasi by indirect immunoenzymatic assay (ELISA) and indirect immunofluorescence (RIFI). For this purpose, blood samples were collected and the serum of 255 cats was sent to the Escola Nacional de Sa?de P?blica (FIOCRUZ). In this population of cats five animals (1.9%, 5/255) were reactive to the rapid test (TR DPP?), 44 (17.3%) had anti-Leishmania spp. Identified by the RIFI. The main clinical signs observed in the seropositive animals were ocular secretion (16/44 - 36%), nasal secretion (16/44 - 36%), weight loss (7/44 - 15.9%), alopecia (6/44 - 13 , 6%) and ulcerated skin lesions (5/44 - 11.3%), in addition to hepatosplenomegaly (2/44 - 4.5%), lymphadenomegaly (5/44 - 11.3%), corneal opacity 2/44 - 4.5%) and gingivitis (2/44 - 4.5%). It was not possible to establish a standardization for the ELISA. Detection of anti-Leishmania spp. in felines, calls attention to this species that must be further investigated in relation to its power as a source of infection in relation to the parasite. / Apesar de alguns relatos da ocorr?ncia de Leishmaniose em felinos, a literatura ? escassa no que diz respeito ? sua pesquisa em popula??es de gatos de ?reas end?micas para a doen?a. Desta forma, o presente estudo teve por objetivo pesquisar, em Serop?dica e Itagua?, regi?o metropolitana do Rio de Janeiro, ?rea end?mica para Leishmaniose tegumentar e visceral canina, a possibilidade de infec??o em gatos, por meio de teste r?pido qualitativo, da pesquisa de anticorpos anti-Leishmania chagasi pelas t?cnicas de ensaio imunoenzim?tico indireto (ELISA) e rea??o de imunofluoresc?ncia indireta (RIFI). Para tanto, foram colhidas amostras de sangue e soro de 255 gatos, os quais foram encaminhados ? Escola Nacional de Sa?de P?blica (FIOCRUZ). Nessa popula??o, cinco gatos (1,9%, 5/255) foram reagentes ao teste r?pido (TR DPP?), 44 (17,3%) apresentaram anticorpos anti-Leishmania spp. identificados pela RIFI. Os principais sinais cl?nicos observados nos animais soropositivos foram secre??o ocular (16/44 ? 36%), secre??o nasal (16/44 ? 36%), emagrecimento (7/44 ? 15,9%), alopecia (6/44 ? 13,6%) e les?o ulcerada na pele (5/44 ? 11,3%), al?m de hepatoesplenomegalia (2/44 ? 4,5%), linfadenomegalia (5/44 ? 11,3%), opacidade de c?rnea (2/44 ? 4,5%) e gengivite (2/44 ? 4,5%). N?o foi poss?vel estabelecer uma padroniza??o para o ELISA. A detec??o de anticorpos anti-Leishmania spp. em felinos chama a aten??o para essa esp?cie que deve ser mais investigada em rela??o ao seu poder como fonte de infec??o em rela??o ao parasito.
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Modelo clínico de uso de células-tronco mesenquimais da membrana amniótica para o tratamento da insuficiência renal crônica em gatos / Clinical trials with amniotic membrane mesenchymal stem cells for chronic kidney failure in cat model

Vidane, Atanásio Serafim 23 October 2015 (has links)
A insuficiência renal crônica (IRC) é uma afecção clínica frequente em gatos domésticos. É caracterizada por inflamação tubulointersticial, vascular, glomerular e fibrose severa. Estudos em modelos de IRC induzida em roedores têm revelado uma redução e estabilização do quadro clínico, evidenciados pela melhora nos parâmetros de função renal e redução da inflamação e da fibrose renal. Neste estudo foi testada a segurança e o efeito do transplante alogênico intra-renal e endovenosa das células-tronco mesenquimais derivadas da membrana amniótica felina (AMSCs) em gatos acometidos pela IRC natural. As AMSCs foram isoladas de âmnio de embriões coletadas em campanhas rotineiras de castração. Dez gatos, machos e fêmeas, foram incluídos neste estudo. Um gato hígido recebeu injeção intra-renal das AMSCs guiada por ultrassom em ambos rins (5x105 células/rim). Nove gatos com IRC natural receberam injeção endovenosa das AMSCs (2x106 células x 2 tratamentos). A avaliação da evolução clínica foi baseada na mensuração dos parâmetros do hemograma, bioquímica, hemogasometria, urinálise e ultrassonografia. Foi efetuada análise de variância (ANOVA) comparar diferenças entre as fases de tratamento seguido de teste de Tukey para comparação das médias entre os grupos. Na injeção intra-renal, não houve variação nos parâmetros clínicos, porém foi necessária a sedação e anestesia geral. Foi registrado elevado estresse de manipulação e ligeira hematúria após o procedimento. Os gatos com IRC que receberam injeção endovenosa das AMSCs, registraram uma variação significativa nos parâmetros de função renal (redução dos níveis de creatinina sérica, redução da proteinúria e aumento da densidade urinária). A arquitetura e morfologia renal não teve variação com o tratamento. Conclui-se que as AMSCs felinas têm um efeito renoprotetor e melhoram a função renal em gatos acometidos pela IRC, estabilizando o quadro clínico e a progressão da doença. A injeção endovenosa das AMSCs constitui uma ferramenta importante para proporcionar boa qualidade de vida aos gatos com IRC / Chronic kidney disease (CKD) is a common clinical condition in domestic cats. It is characterized by tubulointerstitial, vascular, glomerular inflammation and severe fibrosis. Studies in rodent model of induced CKD have been shown a decrease and stabilization of the clinical condition, evidenced by renal function improvement and by inflammation and renal fibrosis reduction. In this study was evaluated the safety and effect of intra-renal and intravenous infusion of allogeneic mesenchymal stem cells derived from feline amniotic membrane (AMSCs) in cats with naturally occurring CKD. The AMSCs were isolated from fetal membranes collected after routine castrations. Ten cats, male and female, were enrolled and included in this study. A healthy cat received intrarenal injection of AMSCs guided by ultrasound in both kidneys (5x105 cells/kidney). Nine cats with naturally CDK received intravenous injection of AMSCs (2x106 cells x 2 treatments). The evaluation of the clinical condition was based on the measurement of complete blood count, blood biochemistry, blood gases, urinalysis and ultrasound. Analysis of variance (ANOVA) was performed to compare differences between the phases of treatment followed by Tukey test to compare means between groups. The clinical parameters of the healthy cat (intrarenal injection) did not change, but sedation and general anesthesia was required. The number of interventions stressed the animal and he developed transient hematuria after AMSCs injection. Cats with CDK, registered a significant improvement of renal function (decrease in serum creatinine and urine protein concentrations and increase in urine specific gravity). The kidney architecture and morphology did not change with the treatment. We conclude that the feline AMSCs have a renoprotective effect and improve renal function in cats with naturally occurring CKD, stabilizing the clinical condition and disease progression. Intravenous injection of AMSCs is an important tool to provide general well-being for cats with CDK
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Determinação das concentrações de macro e micro minerais e metais pesados em alimentos caseiros para cães e gatos adultos / Concentrations of macro and micro minerals and heavy metals in home-prepared diets for adult dogs and cats

Pedrinelli, Vivian 11 October 2018 (has links)
Cada vez mais os proprietários de cães e gatos procuram dietas caseiras, porém muitos desconhecem a necessidade de formulação por um profissional capacitado. Assim, podem utilizar receitas de fontes como internet, fornecendo dietas inadequadas e que podem resultar em riscos à saúde do animal. O objetivo deste estudo foi avaliar a composição de minerais de alimentos caseiros e compará-las com as recomendações do National Research Council (NRC, 2006) e da Fédération Européenne de lIndustrie des Aliments pour Animaux Familiers (FEDIAF, 2018), além de avaliar as concentrações de metais pesados nestes mesmos alimentos. Foram avaliados 100 alimentos caseiros para animais adultos saudáveis, 75 para cães e 25 para gatos, produzidos de acordo com receitas obtidas de websites. Análises bromatológicas foram realizadas por métodos convencionais e, análises de minerais e metais pesados foram realizadas por espectrometria de emissão ótica com plasma indutivamente acoplado (ICP-OES). Os resultados obtidos foram analisados no programa estatístico SAS pelo emprego de testes paramétricos e não paramétricos (P&lt;0,05). Das 100 dietas avaliadas, nenhuma atingiu os valores recomendados de todos os nutrientes e, mais de 84,0% das dietas apresentaram três ou mais nutrientes abaixo da recomendação. Os nutrientes com maior incidência de valores abaixo da recomendação foram: selênio, cálcio e potássio nos alimentos para cães; e selênio, ferro e zinco nos alimentos para gatos. Quanto às concentrações de metais pesados, os teores de chumbo, cobalto, mercúrio, urânio e vanádio estavam acima dos níveis máximos tolerados (NMT) para cães e gatos. Estes resultados apontam a necessidade de formulação de dietas por profissional treinado para evitar riscos à saúde dos animais por desequilíbrios nutricionais. / Owners of dogs and cats increasingly seek home-prepared diets, however many of them dont acknowledge the need of formulation by a trained professional. Therefore, owners may end up using diets from sources such as internet, providing diets often imbalanced and that may cause health risks for the animal. The aim of this study was to evaluate mineral composition of home-prepared diets and to compare it to recommendations of the National Research Council (NRC, 2006) and Fédération Européenne de lIndustrie des Aliments pour Animaux Familiers (FEDIAF, 2018), and also evaluate concentrations of heavy metals on these diets. For the present study, 100 recipes for healthy adult animals, 75 for dogs and 25 for cats, were prepared according to recipes obtained from websites and were evaluated. Bromatological analyses were performed according to conventional methods and mineral and heavy metal analyses were performed by inductively coupled plasma optical emission spectrometry (ICP-OES). Results were analyzed by SAS software with parametric and non-parametric tests (P&lt;0.05). Of the 100 recipes evaluated, none met recommended levels for all nutrients and more than 84.0% of diets presented three or more nutrients below recommendation. Nutrients with higher incidence of levels below recommendation were: selenium, calcium and potassium in recipes for dogs; and selenium, iron and zinc in recipes for cats. As for heavy metal concentrations, levels of lead, cobalt, mercury, uranium and vanadium were above maximum tolerable levels (MTL) for dogs and cats. These results point to the need of diet formulation by a trained professional to avoid health risks to animals caused by nutritional imbalances.

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