Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-07-18Bitstream added on 2014-06-13T20:26:09Z : No. of bitstreams: 1 silva_rb_dr_botfmvz.pdf: 496820 bytes, checksum: 055e35414ee23830cc537670a4ae215b (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Durante o desenvolvimento ovariano fetal, a formação folicular inicial é decisiva para a fertilidade da fêmea, pois define sua reserva gametogênica. Tem sido proposto que a progesterona e o estradiol desempenham papel regulatório na foliculogênese pré-antral, de forma que sua produção reduzida em ovários fetais bovinos antecede o surgimento de folículos primordiais e primários. Recentemente, os FGFs 10 e 18 foram reportados em folículos ovarianos bovinos como redutores dos níveis de esteróides, o que parece envolver a inibição da expressão de enzimas necessárias à esteroidogênese. Em adição, a expressão do FGF10 foi observada durante o desenvolvimento ovariano fetal bovino, e esteve positivamente associada ao aumento no número de folículos primários. O presente estudo investigou primeiramente o padrão de expressão do RNAm das enzimas esteroidogênicas (StAR, CYP11A1, 3β-HSD, CYP17A1, CYP19A1 e 17β-HSD) em ovários de fetos bovinos em idades gestacionais específicas (60, 75, 90, 120, 150 e 210 dias). Todos os genes investigados se mostraram expressos e regulados ao longo da gestação. Os níveis de RNAm da CYP19A1 diminuíram dos 60 para os 90 dias, sugerindo envolvimento desta enzima com a produção decrescente de estradiol observada previamente durante este período gestacional. A expressão das demais enzimas foi elevada ao longo da gestação, coincidente com o aumento da competência esteroidogênica descrito preliminarmente durante o desenvolvimento folicular inicial. Em adição, foi investigada a participação dos FGFs 10 e 18 na esteroidogênese ovariana fetal bovina. A expressão do FGF18 e de seus receptores (FGFR2C, FGFR3C e FGFR4) foi detectada em ovários fetais bovinos ao longo da gestação (60, 75, 90, 120, 150 e 210 dias). A abundância de RNAm do FGF18 aumentou... / During fetal ovarian development, early follicular formation is essential to female fertility, when the gametogenic reserve is defined. It has been proposed that progesterone and estradiol play regulatory role on preantral folliculogenesis, once its reduced production in bovine fetal ovaries precedes primordial and primary follicle assembly. Recentlly, FGFs 10 and 18 were reported in bovine ovarian follicles as reducers of steroids levels, and this seems to involve the inhibition of enzymes necessary to steroidogenesis. In addition, FGF10 expression was observed during bovine fetal ovary development, and it was positively associated with the elevation on primary follicles number. The present study first investigated the mRNA expression patterns for steroidogenic enzymes (StAR, CYP11A1, HSD3B1, CYP17A1, CYP19A1 and HSD17B1) in bovine fetal ovaries at specific gestational ages (60, 75, 90, 120, 150 e 210 days). Expression of all investigated genes was detected and regulated through gestation. Messenger RNA levels of CYP19A1 decreased from days 60 to 90 of gestation, suggesting involvement of this enzyme on decrescent estradiol production previously observed during this gestational period. The expression of other enzymes was elevated during gestational period, which was coincident with the enhance of steroidogenic competence previously described during early follicular development. In addition, the participation of FGFs 10 and 18 on steroidogenesis in bovine fetal ovaries was investigated. The expression of FGF18 and its receptors (FGFR2C, FGFR3C and FGFR4) was detected in bovine fetal ovaries through gestation (60, 75, 90, 120, 150 e 210 days). The mRNA abundance of FGF18 enhanced between 90 and 120 days and decreased at 210 days. The expression of FGFR2C and FGFR4 did not vary during... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-14. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:03Z : No. of bitstreams: 1 000830081_20160101.pdf: 121876 bytes, checksum: 342f21a15b1d2e738af168b1e2467da5 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-01-04T10:26:29Z: 000830081_20160101.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-04T10:28:25Z : No. of bitstreams: 1 000830081.pdf: 809941 bytes, checksum: ea53cd5ef0cec7fb993a2745e82dad53 (MD5) / The antimicrobial peptides LL-37, hBD-1, hBD-2 and hBD-3 are considered an endogenous antibiotic, with important role in the prevention of periodontal diseases due to their ability to regulate the immune response. However those peptides could be degraded by periodontal pathogens. Therefore, therapies able to up regulate the secretion of those peptides by human cells, and the association of antimicrobial peptides with natural compounds, which may act in synergism to modulate the immune response, may be a novel approach for effectively controlling periodontal diseases. The aim of this in vitro study were: i) investigate the ability of green tea extract and EGCG to induce hBD-1 and hBD-2 secretion and gene expression by gingival epithelial cells (B11) and to protect hBDs from degradation by P. gingivalis, ii) A 3D co-culture model of gingival epithelial cells and fibroblasts stimulated with A. actinomycetemcomitans LPS (1 μg/ml) were used to investigated the anti-inflammatory properties of the hBD-3, LL-37, ACPACs and EGCG and to determine whether LL-37 acts in synergy with AC-PACs, EGCG and hBD-3. Gingival epithelial cells were stimulated with green tea extract or EGCG in the presence and absence of specific inhibitors. The secretion and gene expression of hBD-1 and hBD-2 was respectively measured by ELISA and qPCR. The ability of green tea extract and EGCG to prevent hBDs degradation by P. gingivalis present in a bacterial culture supernatant was evaluated by ELISA. A 3D co-culture model composed of gingival fibroblasts embedded in a collagen matrix overlaid with gingival epithelial cells had a synergistic effect with respect to the secretion of IL-6 and IL-8 in response to A. actinomycetemcomitans LPS stimulation compared to fibroblasts and epithelial cells individually. The 3D co-culture model was stimulated with noncytotoxic concentrations of: i) hBD-3 (10 and 20 μM) ...(Complete abstract electronic access below)

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Nonociência e Nanobiotecnologia, 2016. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2016-09-06T15:50:33Z No. of bitstreams: 1 2016_FabianaVieiradaSilva.pdf: 1865090 bytes, checksum: d001b4587a27eddd99d9939f2d9db97e (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-10-22T19:25:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_FabianaVieiradaSilva.pdf: 1865090 bytes, checksum: d001b4587a27eddd99d9939f2d9db97e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-22T19:25:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_FabianaVieiradaSilva.pdf: 1865090 bytes, checksum: d001b4587a27eddd99d9939f2d9db97e (MD5) / A nanotecnologia é uma ciência em expansão e dentre as suas aplicações, destaca-se o uso de nanopartículas (NPs) de óxido de níquel. O objetivo deste estudo foi investigar o efeito citotóxico de diferentes suspensões de nanopartículas de óxido de níquel, frente a viabilidade de células de fibroblastos (linhagem NIH-3T3) e de queratinócitos (linhagem HaCat). Assim, neste trabalho, realizou-se a síntese, caracterização e preparação de suspensões de óxido de níquel por meio de três metodologias, utilizando-se diferentes precursores metálicos (NiCl2, NiCl₂.6H₂O ou Ni(C2H3O2)2·4H2O) e/ou solventes (água ou etanol). As formulações produzidas foram denominadas respectivamente: NiO-Cl, NiO-Et e NiO-OAc e foram caracterizadas por difratometria de raios – X (DRX), termogravimetria (TG), análise textural (B.E.T.), microscopia eletrônica de transmissão (MET) e espectroscopia de infravermelho (FTIR). As suspensões foram caracterizadas por espalhamento dinâmico de luz (DLS) e foi feito um estudo da estabilidade dessas, usando como parâmetros o potencial zeta, o diâmetro hidrodinâmico, o índice de polidispersão (PDI) e o pH. O teor de níquel em suspensão foi quantificado por espectroscopia de absorção atômica (EAA). Por meio das análises de DR-X notou-se; respectivamente, que NiO-Cl, NiO-Et e NiO-OAc apresentaram diâmetro médio de 13, 19 e 21 nm e, por meio da análise de B.E.T., verificou-se que a área superficial destas NPs foram de 33, 31 e 27 m2/g respectivamente. Em relação à análise TG, verificou-se que a formação de óxido de níquel ocorreu acima de 385 °C para as três formulações investigadas. Também, foi notado que estas formulações apresentaram forma, predominantemente esférica e com tendência à aglomeração. Quanto a estabilidade observou-se que a formulação NiO-Et manteve - se estável em todos os parâmetros avaliados, enquanto que as demais formulações apresentaram estabilidade moderada. Ainda, o efeito citotóxico das três formulações foi avaliado pelo método do MTT e notou-se que todas as formulações induziram maior citotoxicidade com o aumento da dose e tempo de tratamento. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Nanotechnology is a science in expansion and among its applications, there is the use of nanoparticles (NPs) of nickel oxide. However, there are few studies on the toxicity of these types of NPs especially those involving occupational risk. The aim of this study was to investigate the cytotoxic effect of different suspensions of nickel oxide nanoparticles front viability of fibroblast cells (NIH-3T3 line) and keratinocytes (HaCaT line). In this work, we carried out the synthesis, characterization and preparation of nickel oxide slurries by using three methods where different metal precursor were used (NiCl2, NiCl₂.6H₂O or Ni (C2H3O2)2•4H2O) and/or solvents (water or ethanol). The produced formulations were called: NiO-Cl, NiO-Et and NiO-OAc and were characterized by - ray diffraction (XRD), thermogravimetry (TG), texture analysis (B.E.T.), transmission electron microscopy (TEM) and infrared spectroscopy (FTIR). The suspensions were characterized by light scattering (DLS) and was made a study of the stability of these parameters using as the zeta potential, the hydrodynamic diameter, the polydispersity index (PDI) and pH. The nickel content of the suspension was quantified by atomic absorption spectroscopy (AAS). Through DR-ray analyzes are noted, respectively, that NiO-Cl, NiO-Et NiO-OAc had an average diameter of 13, 19 and 21 nm, and B.E.T. analysis, it was found that the surface area these NPs were 33, 31 and 27 m2/g respectively. Regarding the TG analysis showed that the nickel oxide formation occurred above 385 °C for three fomulações investigated. Also, it was noted that these formulations exhibited form predominantly spherical and prone to agglomeration. The stability was observed that the NiO-Et formulation maintained - stable in all parameters, while the other formulations showed moderate stability. Also, the cytotoxic effect of the three formulations was evaluated by the MTT method, and it was observed that all formulations induced higher cytotoxicity with increasing dose and duration of treatment. In most cases it was noticed greater cytotoxic effect at 72 h in the NIH-3T3 line.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Curso de Ciências Farmacêuticas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas, 2016. / Texto liberado parcialmente pelo autor. Conteúdo restrito: Metodologia, Resultados e Discussão. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-12-20T10:42:29Z No. of bitstreams: 1 2016_ÁdriadoPradoBarros_PARCIAL.pdf: 1775734 bytes, checksum: 6269358cc5ee36c2fc9cad58fedeb789 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-01-26T17:29:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_ÁdriadoPradoBarros_PARCIAL.pdf: 1775734 bytes, checksum: 6269358cc5ee36c2fc9cad58fedeb789 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-26T17:29:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_ÁdriadoPradoBarros_PARCIAL.pdf: 1775734 bytes, checksum: 6269358cc5ee36c2fc9cad58fedeb789 (MD5) / O envelhecimento da pele em humanos é um processo complexo e pode ser induzido por fatores intrínsecos e extrínsecos. Uma das alterações observadas é a redução no número de fibroblastos que além de produzirem componentes da matriz extracelular, como diferentes tipos de colágeno, fibronectina e proteoglicanos, produzem também as metaloproteinases (MMP). No envelhecimento cronológico, o que se observa é um aumento dos níveis de MMP com a idade, uma menor taxa da síntese de colágeno e redução dos inibidores teciduais das MMP (TIMP), o que explica o aspecto flácido da pele envelhecida. Nesse estudo, a influência de diferentes concentrações de L-arginina na síntese de colágeno em cultura de fibroblastos dérmicos humanos e, consequentemente, na elasticidade da pele foi avaliada. A L-arginina é o substrato da síntese de óxido nítrico, o qual pode estar envolvido na angiogenese, proliferação celular e na síntese de colágeno, uma vez que aumenta a expressão de COL1A1. Ao mesmo tempo, ela também pode ser precursora indireta da síntese de colágeno, atuando como fonte de prolina, componente da fibra de pró-colágeno. Para avaliar a influência da L-arginina na síntese de colágeno e, consequentemente, na elasticidade da pele, foram estudados a citotoxicidade desse ativo, a expressão gênica de COL1A1, MMP-1 e TIMP-1 por RT-PCRq, a síntese de colágeno, os níveis de glutationa reduzida e oxidada, a atividade da catalase e da superóxido dismutase, os níveis de metabólitos oxidativos gerados após os tratamentos e o efeito estimulante da L-arginina na síntese de colágeno via óxido nítrico sintase. Os resultados encontrados mostraram que a Larginina não é citotóxica e que, nas concentrações de 1000 µM, 2500 µM e 6000 µM, tende a induzir um aumento na expressão gênica e na síntese de colágeno. No entanto, na concentração de 6000 µM foi observado um aumento da expressão de MMP-1 e uma diminuição na expressão de TIMP-1. Por ser um doador de NO, o tratamento com a L-arginina aumentou os metabólitos oxidativos, mas em contrapartida as células aumentaram a atividade da superóxido dismutase (SOD) e da catalase (CAT), mantendo o estado redox das células, que foi observado através da relação entre glutationa reduzida e glutationa oxidada. Diante desses resultados e da possibilidade de utilizar a L-arginina como um ativo cosmético, foi iniciado o estudo de pré-formulação com a avaliação da hidroxipropil-β-ciclodextrina (HP β C) e β -ciclodextrinas (β C). No entanto, esses dois sistemas de inclusão aumentaram a atividade de MMP-2 e a HP β C diminuiu a expressão de COL1A1. Portanto, a Larginina se mostrou um excelente candidato a ativo cosmético, capaz de aumentar a síntese de colágeno em fibroblastos dérmicos humanos. / Skin aging in humans is a complex process and can be induced by intrinsic and extrinsic factors. One of the observed changes is a reduction in the number of fibroblasts that not only produce extracellular matrix components, such as different types of collagen, fibronectin and proteoglycans, but also produce metalloproteinases (MMPs). In chronological aging, it is observed an increase in MMP levels with age, a lower rate of collagen synthesis and reduction of tissue inhibitors of MMPs (TIMPs), which explains the flaccid appearance of aged skin. In this study, it was evaluated the influence of different L-arginine concentrations in collagen synthesis, in cultured human dermal fibroblasts, and, consequently, in skin elasticity. L-arginine is the substrate for nitric oxide synthesis, which may be involved in angiogenesis, cell proliferation and collagen synthesis, since it increases the expression of COL1A1. Also, it can be an indirect precursor of collagen synthesis, acting as a source of proline, pro-collagen fiber component. To evaluate the effect of L-arginine on collagen synthesis and, consequently, on skin elasticity, cytotoxicity, COL1A1, MMP- 1 and TIMP-1 gene expression by RT-qPCR, collagen synthesis, levels of reduced and oxidized glutathione, catalase activity and superoxide dismutase activity, levels of oxidative metabolites generated after treatment and the stimulating effect of Larginine in collagen synthesis via nitric oxide synthase were studied. The results showed that L-arginine is not cytotoxic and at concentrations of 1000 μM, 2500 μM and 6000 μM tends to lead to an increase in gene expression and synthesis of collagen. However, at concentration of 6000 μM L-arginine induced an increase in MMP-1 expression and a decrease in TIMP-1 expression. Since it is a NO donor, treatment with L-arginine increased oxidative metabolites but, by the other hand, the cells increased the activity of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT), maintaining the redox state of cells, what was observed through the rate of reduced and oxidized glutathione. Considering these results, and the possibility of using Larginine as an active cosmetic, the pre-formulation study was started by evaluation of hydroxypropyl--cyclodextrin (HPC) and -cyclodextrins (C. However both the excipients increased MMP-2 activity and HPC promoted a decrease in COL1A1 expression. In conclusion, L-arginine shown to be an excellent candidate to cosmetic active, once it was able to increase collagen synthesis in human dermal fibroblasts.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-29Bitstream added on 2014-06-13T19:56:59Z : No. of bitstreams: 1 grandi_f_me_botfm.pdf: 914284 bytes, checksum: 7e8beca0af748a53dac236ca291fea62 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O melanoma é uma das neoplasias cutâneas mais comumente diagnosticadas no homem e nos cães. O microambiente tumoral é composto pelas células neoplásicas e células estromais interagindo constantemente para garantir a progressão tumoral. Os fibroblastos associados ao câncer (FAC) representam uma população heterogênea de células caracterizadas pela expressão de diversos marcadores incluindo a proteína α-SMA e S100A4. Acredita-se que estas células originem-se de diversas fontes incluindo a transição endotelial fibroblástica. Neste trabalho, quantificamos a imunoexpressão da prpteína S100A4 nos fibroblastos associados ao câncer em melanomas cutâneos caninos, verificamos a potencial contribuição das células endoteliais na gênese desta população e correlacionamos os achados com parâmetros patológicos, incluindo a microdensidade vascular. Quarenta e oito casos de melanoma dermais caninos (21 epitelióides, 14 fusiformes e 13 mistos) previamente categorizados nos níveis de Clark 4, 5 e até 4 foram submetidos a imunofluorescência dupla utilizando os anticorpos primários α-SMA, fator de Von Willebrand (vWF) e S100A4 objetivando-se caracterizar os fibroblastos associados ao câncer e a contribuição da transição endotelial mesenquimal. Os melanomas não pigmentados foram caracterizados pela imunoistoquímica utilizando-se os anticorpos vimentina, pancitoqueratina, S100 e Melan A. A densidade microvascular foi analisada utilizando-se a técnica de imunofluorescência e o anticorpo primário anti-fator de Von Willebrand. O cálculo do número de vasos foi realizado selecionando-se cinco campos microscópicos de 200x contendo o maior número de vasos. O percentul de expressão da proteína S100A4 foi calculado através da técnica de segmentação de conglomerados de cor. Apenas um caso demonstrou... / Skin melanoma is one of the most common skin neoplasm seen in humans and dogs. Tumor microenvironment is composed by cancer cells and stromal cells that interacts to guarantee tumor progression. Cancer associated fibroblasts (CAF) represents a heterogeneous cell population characterized by expression of several markers including α-SMA and S100A4 proteins. These cells are thought to derive from different sources including endothelial-to-fibroblast transition. Here we characterize CAF in canine skin melanomas, verify the potential contribution of the endothelial cells to this population and correlate findings to pathological parameters, including microvascular density (MVD). Forth-eight cases of canine dermal melanomas (21 epithelioid, 14 spindle and 13 mixed) classified under Clark´s level 4 and 5 were submitted to a double immunofluorescence assay using primary antibodies α-SMA, Von Willebrand Factor (vWF) and S100A4 in order to characterize cancer associated fibroblasts and verify the contribution of endothelial to fibroblast transition. Non-pigmented samples were characterized by immunohistochemistry using primary antibodies pan-cytokeratin, vimentin, S100 and Melan A. Microvascular density was evaluated by immunofluorescent assay using vWF and by calculating total number of vessels in five 200x fields (“hotspots”).S100A4 imunoexpression was calculated using K-means clustering segmentation method. Only one case showed α-SMA and vWF co-expression restricted to myofibroblasts in tumor stroma. The cells were predominantly peritumoral and periadnexal. S100A4 expression was significantly different among three histotypes with mixed melanomas displaying lesser percentage of positive cells. Some neoplastic cells mainly in spindle cell melanomas were also positive for S100A4. There were no significant differences between MVD/histotypes... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-18Bitstream added on 2014-06-13T18:39:53Z : No. of bitstreams: 1 nascimento_ngc_me_botfm.pdf: 2651674 bytes, checksum: 781b578e87643fbe1e16f82d19ca0913 (MD5) / Ministério da Saúde / O hemocomponente gerador da cola de fibrina home made é a fração do plasma fresco congelado. Neste os fatores I (fibrinogênio), VIII, XIII, von Wilebrand e fibronectina estão presentes em elevada concentração. O fibrinogênio, fator I da coagulação sangüínea, sofre ativação nos processos de injúria tecidual onde são desencadeados os fenômenos hemostáticos que culminam com a formação de uma rede resistente de fibrina na qual existem leucócitos, hemácias e plaquetas. O gel de plaquetas é um hemocomponente obtido a partir de concentrado de plaquetas ou de plaquetaféres com adição de gluconato de cálcio e trombina e tem sido alvo de muitos estudos na última década sua participação no processo de cicatrização, especialmente porque libera fatores de crescimento no leito de feridas promovendo a reparação fisiológica tecidual. Neste estudo avaliou a ação de curativos bioativos home made: células tronco mesenquimais incorporadas ao gel de plaquetas laminares com laserterapia, no processo de cicatrização de feridas crônicas. Foram avaliados feridas crônicas em membros inferiores, de 5 pacientes, sendo predominantemente feridas decorrentes de seqüelas de hanseníase. O gel laminar de plaquetas mostrou-se ser um promissor meio de microencapsulação de células tronco mesenquimais, fibroblastos e queratinócitos. Nas feridas tratadas com células tronco mesenquimais, incorporadas ao gel laminar de plaquetas, foi observada melhora clínica considerável, tanto na cicatrização, quanto na redução das manifestações inflamatórias e dolorosas, nos 5 pacientes / The blood components of fibrin glue generator home made is the fraction of fresh frozen plasma. In the factors I (fibrinogen), VIII, XIII, von Wilebrand and fibronectin are present in high concentration. Fibrinogen, blood coagulation factor I, undergoes activation in the processes of tissue injury where the phenomena are triggered hemostatic culminating in the formation of a strong fibrin network in which there are leukocytes, red blood cells and platelets. The platelet gel is a blood components obtained from platelet concentrate with the addition of calcium gluconate and thrombin and has been the subject of many studies over the last decade due to their involvement in the healing process, especially because it releases factors growth in the wound bed to promote the physiological tissue repair. This study evaluated the action of bioactive dressings home made: mesenchymal stem cells embedded in the laminar platelet gel with laser therapy in the healing of chronic woundsChronic wounds were evaluated in the lower limbs of five patients, predominantly due to wounds sequelae of leprosy. The laminar platelet gel showed to be a promising be means of microencapsulation of mesenchymal stem cells, fibroblasts and keratinocytes. In wounds treated with mesenchymal stem cells embedded in the laminar platelet gel, significant clinical improvement was observed both in healing and in reducing inflammatory and painful manifestations in 5 patients

Os componentes protéticos que fazem a união entre implante e prótese são importantes para a manutenção da saúde peri-implantar sendo responsáveis pela vedação permucosa e impedindo a penetração de agentes químicos ou bacterianos desencadeadores de processos destrutivos nas estruturas ao redor do implante. Assim faz-se importante o desenvolvimento de técnicas que preservando as características de citocompatibilidade dos componentes protéticos que incorporem a sua estrutura, agentes antibacterianos que assegurem a saúde peri-implantar e que não permitam o desenvolvimento de resistência dos micro-organismos sendo ainda inócuos aos tecidos circunjacentes e ao organismo como um todo. Este trabalho teve o objetivo de testar a citocompatibilidade de discos de titânio com uma cobertura revestida usando nanotecnologia de prata em cultura de fibroblastos gengivais humanos. Discos de titânio de 5,9 mm foram preparados para o ensaio, sendo compostos por disco controle ST (N=1) sem nenhuma espécie de tratamento e disco com tratamento CT (N=3) com 3 camadas de cobertura com filme carregado com partículas de prata. O aditivo antimicrobiano à base de prata foi obtido pelo método wet chemistry por impregnação de metal homogeneamente distribuída sobre a superfície do disco. Fragmentos de gengiva foram cortados e colocados em placas de petri com meio de cultura Eagle modificado por Dulbecco. Com aproximadamente 15 dias foram retirados os fragmentos de gengiva, seguido da tripsinização das células para sua expansão. O meio de cultura foi trocado a cada 2-3 dias e a progressão da cultura foi avaliada por microscópio de fase. Os FGHs (fibroblastos de gengiva humana) na terceira passagem (p3) foram contados em um hemocitômetro e plaqueados em placas de 96 e 24 poços. As análises foram feitas com 24, 48 e 72 horas após o plaqueamento. Após a solubilização, as soluções foram transferidas para uma nova placa de 96 poços, e efetuada a leitura. A citotoxicidade dos materiais foi avaliada por espectrofotometria no aparelho Leitor de Elisa, com comprimento de onda de 590 nm. As amostras foram metalizadas e o MEV foi usado para avaliar a morfologia das células. O comportamento da cultura de fibroblastos sobre os discos de titânio em um período de 24 horas mostrou-se mais favorável na superfície ST mesmo após 48 horas quando CT apresentou valores inferiores ao ST, porém estatisticamente não significantes ao tempo de armazenamento. A avaliação após 72 horas indica que CT apresentou queda no desenvolvimento da cultura de fibroblastos em relação a ST sendo o resultado estatisticamente significante o que sugere menor característica de citocompatibilidade do material utilizado no tratamento de superfície que se potencializa com o aumento do tempo de exposição visto que quando comparado aos demais espécimes com meio de cultura com nutrientes (CC), controle sobre a superfície da placa em H2O sem nutrientes (H2O) e controle sobre a superfície da placa com meio de cultura com nutrientes acrescido de fenol a 1 % (CM) o espécime CT somente teve valores absolutos superiores para presença das células quando comparado ao espécime CM. Nossos dados indicaram a necessidade de se promover aperfeiçoamento no complexo estrutural do material de cobertura dos discos de forma que se tornem mais citocompatíveis. / The prosthetic components that make the bond between implant and prosthesis are important for maintaining healthy peri-implant permucosal being responsible for sealing and preventing penetratíon of chemicals or bacterial triggers of destructive processes in the structures around the implant. So it is important to develop techniques that preserve the characteristics of cell compatibility of prosthetic components that incorporate its structure, antibacterial agents to ensure the peri-implant health and not allow the development of resistance of micro-organisms are harmless to the tissues even and surrounding the body as a whole. This study aimed to test the cell compatibility of titanium disks coated with a covering of silver using nanotechnology in cultured human gingival fibroblasts. Titanium disks of 5.9 mm were prepared for trial, being composed of hard control ST (N = 1) without any kind of treatment and treatment disc with CT (n = 3) with 3 layers of film cover loaded with silver particles. The additive antimicrobial silver-based was obtained by wet chemistry by impregnatíon of metal homogeneously distributed over the disk surface. Gingival fragments were distributed in petri dishes with culture medium Dulbecco\'s modified Eagle. With approximately 15 days they were removed, followed by trypsinizatíon of the cells for their expansíon. The culture medium were changed every 2-3 days of culture and progressíon was evaluated by phase microscopy. The FGHs (human gingival fibroblasts) in the third passage (p3) were counted in a hemocytometer and plated in a 96 and 24 wells. Analyses from 24, 48 and 72 hours after plating were made. After solubilizatíon, the solutíons were transferred to a new 96-well plate, and made reading. The cytotoxicity of the materials were evaluated by spectrophotometric ELISA reader device with a wavelength of 590 nm. The samples were metallized and SEM was used to assess cell morphology. The behavior of cultured fibroblasts on titanium disks in a period of 24 hours was more favorable on the surface of ST even after 48 hours when the CT were lower than the ST but not statistically significant at the time of storage. The evaluatíon afetr 72 hours indicates that the CT fell in the development of cultured fibroblasts in relatíon to the ST and the result was statistically significant which suggests lower cell compatibility characteristic of the material used in surface treatment that enhances with increasing time exposure as compared to other disk with culture medium with nutrients (CC), control over the surface of the plate without nutrients H2O and control over the surface of the plate with culture medium with nutrients plus phenol 1 % (CM) the CT only had higher absolute values for the presence of cells when compared to CM. Our data indicated the need to promote improvement in the structural complex of the covering material so that the disks become more compatibility.

Orientador: Sergio Roberto Peres Line / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-21T02:23:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Navarro_ClaudiaMaria_D.pdf: 3700565 bytes, checksum: aa25885dcde069bed131d60d67433dab (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A fibromatose gengival pode ser hereditária ou induzida por drogas. O padrão da doença sugere que os fibroblastos gengivais podem produzir grandes volumes de substância extracelular. Um dos efeitos colaterais da ciclosporina A (CsA) é a indução de fibromatose gengival. Os efeitos de 3 diferentes concentrações de CsA sobre a morfologia, síntese de colagenase, de fibroneotina e atividade colagenolítioa, foram estudados "in vitro" em 6 linhagens de fibroblastos, 3 de gengivas normais e 3 de fibromatose gengival hereditária. Os fibroblastos foram cultivados com meio contendo concentrações de 250,500 e 1.000 ng/ml de CsA, por 24,48 e 72 h. O meio foi coletado e submetido a ensaios enzimográfioos e de atividade colagenolítica. A síntese de fibronectina foi avaliada através de "dot blot" e 4e proteína total pela análise eletroforética do sobrenadante. As diferentes concentrações de CsA não alteraram a viabilidade celular. Após 72 h. com 1.000 ng/mI de CsA todas as linhagens apresentaram alterações morfológicas. A determinação da densidade celular em câmara de Neubauer não revelou diferenças significativas na contagem celular das linhagens, quando incubadas oom diferentes concentrações de CsA...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Gingival fibromatosis may be hereditary or drug-induced. The disease features suggests that gingival fibroblasts produce high levels of extracellular matrix. The activity of the fibroblasts of gingival fibromatosis cyclosporin A-induced may be influenced by direct action of the drug on cell function. The effects of 3 different cyclosporin A (CsA) concentrations on morphology, collagenase and fibronectin synthesis and collagenolytic activity were studied in vitro using 6 fibroblasts strains, 3 of normal gingiva and 3 of hereditary gingival fibromatosis. Cell were cultured with medium containing CsA (250, 500 and 1.000 nglml) during 24, 48 and 12 h. The medium was collected and submitted to enzymographic and collagenolytic activity assays. The fibronectin synthesis was studied by dot blot analysis. Total protein synthesis was studied through electrophoretic analysis. CeUular viability was not changed by the different concentrations of CsA. After 72 h. with 1.000 ng/mI of CsA, all strains showed morphologic changes. Cellular density was determined by Neubauer chamber and no significative differences on proliferation were found between the strains when inoubated with different concentration of CsA ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Doutor em Ciências

Orientador: Maria Edwirges Hoffmann / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T06:05:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soraggi_ClaudiadeLourdes_M.pdf: 3971152 bytes, checksum: 2c9cdc0034b1af2dd8a732337813ec00 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Estudos sobre as relações de estrutura e atividade citotóxica tem sido essenciais para o desenvolvimento de novas drogas farmacológicas. Neste trabalho nós investigamos a citotoxicidade de uma série de novas estruturas relacionadas a compostos sintéticos, denominados y-aminoálcoois: 2-pentanolbenzilamina (PBA) e 2-pentanol-fenilamina PP A), e as tetrahidro-1,3-oxazinas correspondentes 2-pentanol benziloxazina (PBO) e 2-pentanol-feniloxazina (PPO). A relevância biológica dos y-aminoálcoois e seus derivados é devida à sua vasta aplicação farmacológica. Primeiramente, nós analisamos a citotoxicidade de alguns compostos padrões como: Álcool Alflico, Butanol-1 e Heptanol-1 em culturas de células V79 (fibroblastos de hamster chinês), por diferentes técnicas in vitro. O método que apresentou maior sensibilidade para as análises de citotoxicidade dos álcoois estudados, foi o ensaio da proliferação celular, o qual utilizamos para as avaliações de toxicidade celular dos y-aminoálcoois PBA, PP A e seus derivados PBO e PPO, respectivamente. As potências relativas de toxicidade foram comparadas, através da determinação dos valores de ID50, (dose requerida para induzir 50% de inibição), obedecendo a seguinte ordem: PPO>PBO>Heptanol1>PBA>PP A>Butanol1>A.Alílico Também analisamos a atividade de cada composto sintetizado em relação à inibição da taxa de síntese de DNA. A síntese de DNA foi determinada pela medida da incorporação de [3H]-timidina nas culturas expostas. Os resultados nos mostraram que as oxazinas PBO e PPO, comportaram-se como potentes inibidores sobre a síntese de DNA para células V79, enquanto que os y-aminoálcoois PBA e PPA afetaram fracamente a taxa de síntese, na mesma faixa de concentração (0,5-5,0 mM) e que as oxazinas derivadas dos y-aminoálcoois, P BO e P PO são agentes genotóxicos potentes para fibroblastos V79, indicando que a atividade antireplicativa destes compostos está provavelmente relacionada com a ciclização das moléculas, apontando assim para o possível uso destes derivados de y-aminoálcoois como agentes antineoplásicos / Abstract: Studies on structure-activity relationships are essential for the development of new pharmacological drugs. In this work we have investigated the cytotoxicity of new structurally related synthetic compounds, the y-aminoalcohols 2-pentanol-4 benzylamine (PBA), 2-pentanol-4-phenylamine (PPA) and the corresponding tetrahydro-I,3-oxazines, 2-pentanol-4benzyloxazine (PBO) and 2-pentanol-4-phenyloxazine (PPO). The biological relevance of y-aminoalcohols and derivatives is based on their wide pharmacological application. We have firstly analysed the cytotoxicity of standard compounds to cultured hamster cells (V79 line), the alcohols Butanol-1, Heptanol-land Allyl Alcohol, by measuring of different endpoints. The Growth Inhibition Assay was the most sensitive endpoint to evaluate alcohols cytotoxicity. For this reason it was been used for evaluation of the y-aminoalcohols PBA, PPA and the oxazines PBO,PPO, respectively. The relative potencies were compared by determining the midpoint cytotoxicity, or ID50 value (dose required to induce 50% inhibition) for each compound. According to this, it was obtained the following order: PPO>PBO>Heptanol-l>PBA>PP A>But-l>A. Alcohol We analysed further the activity of each synthetic compound upon DNA synthesis in V79 cells. The DNA synthesis rate was determined by measuring 3H-thymidine uptake in exposed cultures. The results showed that the oxazines PBO and PPO were potent inhibitors of DNA synthesis in V79 cells, while the yaminoalcohols PBA and PP A affected only slightly the rate of synthesis, in the same concentration range (0.5-5.0 mM). These results indicate that the antireplicative activity of these oxazines is probably related to molecular cyclization. Our data point to the possible use of the oxazines PBO and PPO as antineoplasic agents / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Pedro Duarte Novaes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:32:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barbosa_SimonedeCassiaPortela_D.pdf: 19084475 bytes, checksum: 48a5c7f93d08c78c28a6f73b298043e7 (MD5) Previous issue date: 2004 / Doutorado