Submitted by Luiz Felipe Barbosa (luiz.fbabreu2@ufpe.br) on 2015-04-17T13:28:09Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Mardonny Chagas.pdf: 1774580 bytes, checksum: eb35360e3dc589b04bcfcf126fcf22ca (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-17T13:28:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Mardonny Chagas.pdf: 1774580 bytes, checksum: eb35360e3dc589b04bcfcf126fcf22ca (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013 / Entre os micro-organismos endofíticos, os fungos têm despertado o interesse da comunidade científica especialmente por seu potencial na produção de metabólitos de interesse econômico, incluindo os relacionados às plantas hospedeiras. Hancornia speciosa Gomes, conhecida como mangabeira, é uma espécie frutífera da família Apocynaceae bastante utilizada na medicina popular para diversos fins. Este trabalho teve como objetivo contribuir no conhecimento da micobiota endofítica associada a H. speciosa e avaliar o potencial antimicrobiano destes micro-organismos. Os fungos endofíticos foram isolados da casca do caule de H. speciosa em diferentes períodos do ano. Foram isolados 116 fungos endofíticos pertencentes a 14 espécies, sendo Phoma cava a espécie mais frequente (13,8%), seguida de Colletotrichum gloeosporioides (12,1%) e Lasiodiplodia theobromae (11,2%). Todos os isolados foram submetidos ao ensaio antimicrobiano em meio sólido com bloco de ágar. Os micro-organismos teste utilizados foram Staphylococcus aureus - UFPEDA - 02, Bacillus subtilis - UFPEDA - 86, Escherichia coli - UFPEDA - 224, Klebsiella pneumoniae - UFPEDA - 396, Pseudomonas aeruginosa - UFPEDA - 416, Proteus mirabilis - UFPEDA - 767, Candida albicans URM - 5825, Candida krusei UFPEDA - 1002, Candida tropicalis URM - 5871 e Malassezia furfur URM - 4220. No total, 39 dos 116 fungos endofíticos apresentaram atividade antimicrobiana frente a, no mínimo, um micro-organismo teste com as médias dos halos de inibição variando de 11 a 39 mm de diâmetro. Após a triagem antimicrobiana, os isolados Aspergillus flavus (FHS012), A. flavus (FHS018), Aspergillus niger (FHS058), A. niger (FHS059), A. niger (FHS061), Fusarium solani (FHS105), F. solani (FHS106), Lasiodiplodia theobromae (FHS070), L. theobromae (FHS074) e Penicillium fellutanum (FHS089) apresentaram os melhores resultados entre todos e seguiram para o cultivo em meio semi-sólido de arroz e milho por 21 dias. Após este período, foram obtidos os extratos metanólicos brutos dos fungos endofíticos e determinadas as concentrações mínimas inibitória (CMI) e bactericida/fungicida (CMB/CMF) através do método de microdiluição em caldo. As CMI’s variaram entre 19 e 2.500 μg/mL-1 e as CMB’s / CMF’s entre 312 e >5.000 μg/mL-1. Esses resultados demonstram o grande potencial antimicrobiano dos fungos endofíticos desta planta medicinal. Em pesquisas futuras poderão ser identificados compostos bioativos, provavelmente derivados da complexa interação endofítico/hospedeiro, como sua utilização no desenvolvimento de novas drogas.

Mangaba tree (Hancornia speciosa Gomes) is a tropical fruit found in different regions of the country, being more abundant in areas of coastal tablelands and lowlands of Northeast region, where it is explored in an extractive way and it is suffering an accelerated process of erosion genetics. The development of methods for conservation of genetic resources still available it is essential. This work aimed at improving technical and scientific in vitro conservation by slow growth of mangaba tree. The work was done at the Laboratory of Plant Tissue Culture of Embrapa Coastal Tablelands. To evaluate the effect of sucrose and sorbitol nodal segments were inoculated in test tubes with 25 mL of MS medium supplemented with 1 mg.L-1 of indol acetic acid (IAA) and 1 mg.L-1 of benzylaminopurine (BAP) and different sorbitol concentrations (10; 20 and 40 g.L-1) combined with 0 and 15 g.L-1 of sucrose. To evaluate the effect of abscisic acid (ABA) and the recipient and sealing types, nodal segments were inoculated in "mayonnaise" flasks and in test tubes with 25 mL of MS medium supplemented with 30 g.L-1 of sucrose, containing 0 or 0.5 mg.L-1 of ABA combined with plastic lid and aluminum foil. To study the effect of the mannitol and cultivation time two mangaba accessions were inoculated on MS medium supplemented with 0; 5; 10; 15 and 20 g.L-1 of mannitol. The proline quantification was done in mangaba microcuttings from conservation medium containing 10 and 20 g.L-1 of sorbitol. In the recovery stage of the growth explants conserved in vitro for 120 days, in the previous experiments were inoculated on MS medium and the viability of crops evaluated at 30 and 60 days. It is feasible to maintain nodal segments in the absence of sucrose in the presence of 10 or 20 g.L-1 of sorbitol and nodal segments in the presence of 0.5 mg.L-1 of ABA in test tubes sealed with aluminum foil lid for 120 days. It is possible the conservation of seedlings germinated in vitro in MS culture medium with 15 and 20 g.L-1 of mannitol for 180 days. Larger proline accumulation is observed in stem than in leaves of mangaba tree. Explants maintained in the presence of 10 g.L-1 of sorbitol and sucrose absence and in the presence of 0.5 mg.L-1 of ABA at conservation present higher viability in the growth recovery. / A mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) é uma frutífera tropical encontrada em diferentes regiões do país, sendo mais abundante em áreas de tabuleiros costeiros e baixadas litorâneas da Região Nordeste, onde é explorada de forma extrativista e vem sofrendo acelerado processo de erosão genética. O desenvolvimento de métodos de conservação dos recursos genéticos ainda disponíveis torna-se imprescindível. Este trabalho teve como objetivo o aprimoramento técnico-científico da conservação in vitro por crescimento lento de mangabeira. Os trabalhos foram desenvolvidos no Laboratório de Cultura de Tecidos de Plantas da Embrapa Tabuleiros Costeiros. Para avaliar o efeito da sacarose e sorbitol segmentos nodais foram inoculados em tubos de ensaio com 25 mL de meio de cultura MS suplementado com 1 mg.L-1 de ácido indol acético (AIA) e 1 mg.L-1 de benzilaminopurina (BAP) e diferentes concentrações de sorbitol (10; 20 e 40 g.L-1), combinadas com 0 e 15 g.L-1 de sacarose. Para avaliar o efeito do ácido abscísico (ABA), do tipo de recipiente e vedação os segmentos nodais foram inoculados em frascos tipo maionese e em tubos de ensaio com 25 mL de meio MS, suplementado com 30 g.L- 1 de sacarose, contendo 0 ou 0,5 mg.L-1 de ABA combinadas com tampa plástica e tampa de papel alumínio. Para o estudo do efeito do manitol e tempo de cultivo dois acessos de mangabeira foram inoculados em meio MS combinados com 0; 5; 10; 15 e 20 g.L-1 de manitol. Foi realizada a quantificação da prolina em microestacas provenientes de meio de conservação contendo 10 e 20 g.L-1 de sorbitol. Na etapa de recuperação do crescimento explantes conservados in vitro por 120 dias, nos experimentos anteriores foram inoculados em meio de cultura MS sendo a viabilidade das culturas avaliadas aos 30 e 60 dias. É viável a manutenção de segmentos nodais na ausência de sacarose e na presença de 10 ou 20 g.L-1 de sorbitol assim como de segmentos nodais na presença de 0,5 mg.L-1 de ABA em tubos de ensaio vedados com tampa de papel alumínio por 120 dias. É viável a conservação de plântulas germinadas in vitro em meio com 15 e 20 g.L-1 de manitol por 180 dias. Observa-se maior acúmulo de prolina em entre-nós do que em folhas de mangabeira. Explantes mantidos na presença de 10 g.L-1 de sorbitol e na ausência de sacarose e na presença de 0,5 mg.L-1 de ABA na fase de conservação apresentam maior viabilidade na recuperação do crescimento.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-12-18T13:50:32Z No. of bitstreams: 1 Ana Kelly dos Santos Maia.pdf: 2230603 bytes, checksum: 2977bc5e48caa440b9f32ae7437e4195 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-18T13:50:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Kelly dos Santos Maia.pdf: 2230603 bytes, checksum: 2977bc5e48caa440b9f32ae7437e4195 (MD5) Previous issue date: 2017-07-21 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) is a native fruit tree of Brazil, widely distributed in the cerrado and coastal boards. It produces tasty, nutritious and widely used fruits, with great potential for economic exploration. However, the natural populations of H. speciosa are undergoing an intense process of genetic erosion as a result mainly of expansion of agricultural frontier and cities, without study on diversity and genetic structure of populations. The lack of such information is limited to the adoption of efficient collect and conservation of genetic resources. The objective of this work was to analyze the diversity and genetic structure, as well as to infer the phylogeographic patterns of the natural populations of H. speciosa on Northeast Coastal Boards of Brazil. Microsatellite or SSR (six loci) and cpDNA (trnH-psbA region) markers were used to estimate the genetic diversity indexes and to get phylogeographic inferences of four natural populations of H. speciosa (96 individuals) sampled in the States of Maranhão, Paraíba, Pernambuco and Sergipe. The species showed moderate genetic structuring (FST = 0.095) with greater genetic diversity within populations (83%) than among populations (17%). The FST values for the pair of populations showed the smallest genetic differentiation between Paraíba x Pernambuco (0.015) and a larger between Maranhão and Pernambuco (0.142). It was observed that the Maranhão population had larger differentiation among four one. In general, for the populations studied, the fixation index was zero or negative (-0.082). A cpDNA analysis revealed six haplotypes and the Sergipe population presents a greater diversity of haplotypes, showing a haplotype in common with the States of Paraíba and Pernambuco. The population of Maranhão presents haplotypes exclusive. A spatial molecular variance analysis revealed two groups with high genetic structure (FST = 0.898 and FCT = 0.899), with 89.92% of the variation between the groups. This information on diversity and genetic structure are important subsidies for optimizing ex-situ and in-situ conservation of the genetic resources of mangabeira on studied region and for search of pre-breeding research of this species. / A mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) é uma frutífera nativa do Brasil, amplamente distribuída no cerrado e nos tabuleiros costeiros. Produz frutos saborosos, nutritivos e de ampla utilização, com grande potencial para exploração econômica. Entretanto, as populações naturais de H. speciosa estão sofrendo intenso processo de erosão genética devido à especulação imobiliária e a expansão da fronteira agrícola, sem que tenha sido realizado estudo sobre a diversidade e estrutura genética. A carência de tais informações limita a adoção de estratégias eficientes de coleta e de conservação dos recursos genéticos. O objetivo deste trabalho foi analisar a diversidade e estrutura genética, bem como inferir os padrões filogeográficos das populações naturais de H. speciosa nos Tabuleiros Costeiros do Nordeste do Brasil. Marcadores microssatélites ou SSR (seis loci) e cpDNA (região trnH-psbA) foram utilizados com sucesso para estimar os índices de diversidade genética e inferências filogeofráficas de quatro populações naturais de H. speciosa (96 indivíduos) nos Estados do Maranhão, Paraíba, Pernambuco e Sergipe. A espécie mostrou moderada estruturação genética (FST=0,095) com maior variabilidade genética dentro de populações (83%) do que entre populações (17%). Os valores de FST para as populações combinadas aos pares mostrou que a menor diferenciação genética foi entre Paraíba x Pernambuco (0,015), e a maior diferenciação entre Maranhão x Pernambuco (0,142). Observou-se que a população Maranhão foi a que mais divergiu das demais. No geral, para as populações estudadas o índice de fixação foi nulo ou negativo (-0,082). A análise do cpDNA revelou seis haplótipos sendo que a população de Sergipe apresentou maior diversidade de haplótipos e um haplótipo em comum com os Estados da Paraíba e Pernambuco. A população do Maranhão apresentou haplótipos exclusivos. A análise de variância molecular espacial revelou dois grupos com elevada estruturação genética (FST = 0,898 e FCT = 0,899), com 89,92% da variação entre os grupos. Tais informações de diversidade e estrutura genética constituem importantes subsídios para aperfeiçoar a conservação ex situ e in situ dos recursos genéticos da mangabeira na região estudada e para pesquisas de prémelhoramento genético dessa espécie.

Submitted by Cristhiane Guerra (cristhiane.guerra@gmail.com) on 2017-02-03T13:55:25Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3872528 bytes, checksum: 5e60729b8ed99a17f54ca9ea2044f022 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-03T13:55:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3872528 bytes, checksum: 5e60729b8ed99a17f54ca9ea2044f022 (MD5) Previous issue date: 2016-10-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Apocynaceae is a botanical family that includes between 3700 and 5100 species are distributed almost worldwide, but mainly in tropical and subtropical regions. In Brazil there are about 90 genera and 850 species, inhabiting different vegetation types. Within this large botanical family is gender Hancornia, which is considered monotypic and therefore its unique species is Hancornia speciosa Gomes, and is abundant in the northeastern cerrado. In view of this, this paper aims to study fitoquimicamente Hancornia speciosa thus contributing to the expansion of the chemical knowledge of the species. In addition to evaluating the antifungal activity of the extract and isolated compounds. For the study, the plant material after drying and pulverizing, was subjected to extraction and chromatography processes for isolation of chemical constituents. Techniques such as Cromatrografia Liquid High efficiency and Ultra-high Performance Liquid Chromatography were employed at work. The chemical structure of the substances was determined by 1H Nuclear Magnetic Resonance, 13C and dimensional comparisons with literature data. Chromatographic fractionation of the chloroform phase resulted in the isolation of caffeate acetate, the ethyl acetate phase gave the isoquecetrina beyond the narigenina, and a mix of acid 4,5-O-E- caffeoyl-quinic acid with 3,5-di –O-E- caffeoyl-quinic the butanol phase. All these compounds were first reported in Hancornia speciosa. Characterization of the extract of Hancornia speciosa leaves by Ultra-high Performance Liquid Chromatography coupled to Mass Spectrometry also provided the identification of twenty-four compounds. Since the study of the antifungal activity of the extracts provide a positive result, but compounds isolated did not provide a positive result, not being able to inhibit the growth of the strains in any concentration tested. This work contributed indicating that this species is bioprodutora phenolic compounds, as demonstrated in this phytochemical study. / Apocynaceae é uma família botânica que incluem entre 3700 e 5100 espécies, estando distribuídas praticamente no mundo todo, mas principalmente nas regiões tropicais e subtropicais. No Brasil ocorrem aproximadamente 90 gêneros e 850 espécies, habitando diversas formações vegetais. Dentro dessa grande família botânica está o gênero Hancornia, que é considerado monotípico e, por isso, sua única espécie é Hancornia speciosa Gomes, abundante no cerrado nordestino. Diante disto, este trabalho tem como objetivo estudar fitoquimicamente Hancornia speciosa contribuindo com o conhecimento químico da espécie, além de avaliar a atividade antifúngica do extrato e compostos isolados. Para realização do estudo, o material vegetal, após secagem e pulverização, foi submetido a processos de extração e cromatografia para isolamentos dos constituintes químicos. Técnicas como Cromatrografia Líquida de Alta eficiência e Cromatrografia Líquida de Eficiência Ultra Elevada foram empregadas no trabalho. A estrutura química das substâncias foi determinada por Ressonância Magnética Nuclear de 1H, 13C e bidimensionais em comparações com dados da literatura. O fracionamento cromatográfico da fase clorofórmica resultou no isolamento do cafeato de etila, da fase acetato de etila obteve-se a isoquecetrina, além da narigenina, e uma mistura do ácido 4,5-di-O-E- cafeoil-quínico com o ácido 3,5-di-O-E- cafeoil-quínico da fase butanólica. Todos esses compostos foram relatados pela primeira vez em Hancornia speciosa. A caracterização do extrato das folhas desta espécie por Cromatografia Líquida de Eficiência Ultra Elevada acoplada à Espectrometria de Massas forneceu ainda a identificação de vinte e quatro compostos. Já o estudo da atividade antifúngica do extrato forneceu um resultado positivo, porém o estudo dos compostos isolados não forneceu, não sendo capaz de inibir o crescimento das cepas em estudo em nenhuma concentração testada. Este trabalho contribuiu evidenciando que esta espécie é bioprodutora de compostos fenólicos, como demonstrado neste estudo fitoquímico.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This work deals with the phytochemical study of mangaba, Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae). The first chapter deals with the role of volatile compounds from leaves and fruits. The effect of drying time on the chemical compositions of volatile oils from leaves was investigated. Thus, it was possible to verify that there is a decrease in the abundance of alcohols such as (E)-3-hexenol (68.6% fresh leaves; 13.3% after 10 days of drying), while the percentage of oxygen-containing monoterpenes such as geraniol (2.4% fresh leaves; 54.7% after 10 days of drying) is increased. On the other hand, the effect of the stage of maturity on the volatile components of mangaba fruit was investigated at three different stages. The volatile analyses showed an obvious difference, both in qualitative and relative abundance, of major components, according to stage of maturity. Thus, it became apparent that fruits at the initial stage (immature) present oxygen-containing monoterpenes, such as (Z)-linalool oxide, (E)-linalool oxide and linalool in a higher relative percentage, while esters, alcohols, aldehydes and ketones were detected at low percentages. Nonetheless, esters, alcohols, aldehydes and ketones predominated in the fruits at the final stage (mature) while the percentage of oxygen-containing monoterpenes was very much reduced. Finally, the volatile profile of the fruits at the intermediate stage showed esters, alcohols, aldehydes and ketones like those found in mature fruits, but at an intermediate percentage. In the same way, there was an intermediate percentage of oxygen-containing monoterpenes as was also observed in higher amounts in immature fruits. The second chapter deals with isolation and structure elucidation of twelve compounds from the latex of fruits of H. speciosa: 3-β-O-hexadecanoyl lupeol, 3-β-O-(3 -hydroxyhexadecanoyl) lupeol, 3-β-O-(9-octadecenoyl) lupeol, 3-β-O-octadecanoyl lupeol, 3-β-O-(3 -hydroxyoctadecanoyl) lupeol, 3-β-O-(3 -hydroxyeicosanoyl) lupeol, 3-β-O-(3 -hydroxydocosanoyl) lupeol, 3-β-O-(3 ,5 -dihydroxyeicosanoyl) lupeol, α-amyin, β-amyrin, lupeol and sucrose octaacetate. For structure elucidation of these natural compounds IR, EM and NMR techniques (1H, 13C, DEPT) were used. Finally, in the last chapter the extracts and some fractions of H. speciosa were screened for their biological activities in vitro. / Neste trabalho apresentamos os resultados sobre o estudo fitoquímico da mangabeira, Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae). Na primeira parte do trabalho foi investigada a composição química dos voláteis das folhas e dos frutos variando-se o tempo de secagem e o estádio de maturação, respectivamente. As análises através de CG-EM dos óleos essenciais das folhas nos permitiu observar que há mudanças significativas na percentagem relativa dos constituintes majoritários quando se varia o tempo de secagem. Desta forma, foi possível verificar um decréscimo nas percentagens dos álcoois como (E)-3-hexenol (68,6% nas folhas frescas; 13,3% após 10 dias de secagem); enquanto houve um aumento significativo no percentual dos monoterpenos oxigenados como geraniol (2,4% nas folhas frescas; 54,7% após 10 dias de secagem). Já nas análises da composição química dos voláteis dos frutos nos três estádios de maturação (verde, de vez e maduro), foi possível verificar uma clara diferenciação na proporção dos componentes principais, de acordo com o estádio de maturação. Assim, o aroma dos frutos verdes possui um teor maior de monoterpenos oxigenados como o óxido de cis-linalool, óxido de trans-linalool e linalool, enquanto a proporção de ésteres, álcoois, aldeídos e cetonas são menores. Por outro lado, na composição química dos voláteis dos frutos maduros, observamos um predomínio de ésteres, álcoois, aldeídos e cetonas, enquanto a proporção de monoterpenos oxigenados foi bastante reduzida. Já na composição dos voláteis dos frutos de vez , verificamos proporções intermediárias tanto dos ésteres, álcoois, aldeídos e cetonas quanto dos monoterpenos oxigenados como o óxido de cis-linalool, óxido de trans-linalool e linalool. Na segunda parte do trabalho, o estudo fitoquímico do látex dos frutos de H. speciosa nos permitiu o isolamento e identificação de 12 substâncias: 3-β-O-hexadecanoato de lupeoíla, 3-β-O-3 -hidroxihexadecanoato de lupeoíla, 3-β-O-9-octadecenoato de lupeoíla, 3-β-O-octadecanoato de lupeoíla, 3-β-O-3 -hidroxioctadecanoato de lupeoíla, 3-β-O-3 -hidroxiicosanoato de lupeoíla, 3-β-O-3 -hidroxidocosanoato de lupeoíla, 3-β-O-3 ,5 -diidroxiicosanoato de lupeoíla, α-amina, β-amirina, lupeol e a sacarose na sua forma peracetilada. A determinação estrutural das substâncias foi baseada na análise dos dados espectrais de EM, IV e RMN (1H, 13C e DEPT). Por fim, na terceira parte do trabalho, foram realizados ensaios para verificação de atividade biológica com os extratos e frações isoladas das várias partes da planta estudada.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This work deals with the phytochemical study of mangaba, Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae). The first chapter deals with the role of volatile compounds from leaves and fruits. The effect of drying time on the chemical compositions of volatile oils from leaves was investigated. Thus, it was possible to verify that there is a decrease in the abundance of alcohols such as (E)-3-hexenol (68.6% fresh leaves; 13.3% after 10 days of drying), while the percentage of oxygen-containing monoterpenes such as geraniol (2.4% fresh leaves; 54.7% after 10 days of drying) is increased. On the other hand, the effect of the stage of maturity on the volatile components of mangaba fruit was investigated at three different stages. The volatile analyses showed an obvious difference, both in qualitative and relative abundance, of major components, according to stage of maturity. Thus, it became apparent that fruits at the initial stage (immature) present oxygen-containing monoterpenes, such as (Z)-linalool oxide, (E)-linalool oxide and linalool in a higher relative percentage, while esters, alcohols, aldehydes and ketones were detected at low percentages. Nonetheless, esters, alcohols, aldehydes and ketones predominated in the fruits at the final stage (mature) while the percentage of oxygen-containing monoterpenes was very much reduced. Finally, the volatile profile of the fruits at the intermediate stage showed esters, alcohols, aldehydes and ketones like those found in mature fruits, but at an intermediate percentage. In the same way, there was an intermediate percentage of oxygen-containing monoterpenes as was also observed in higher amounts in immature fruits. The second chapter deals with isolation and structure elucidation of twelve compounds from the latex of fruits of H. speciosa: 3-β-O-hexadecanoyl lupeol, 3-β-O-(3 -hydroxyhexadecanoyl) lupeol, 3-β-O-(9-octadecenoyl) lupeol, 3-β-O-octadecanoyl lupeol, 3-β-O-(3 -hydroxyoctadecanoyl) lupeol, 3-β-O-(3 -hydroxyeicosanoyl) lupeol, 3-β-O-(3 -hydroxydocosanoyl) lupeol, 3-β-O-(3 ,5 -dihydroxyeicosanoyl) lupeol, α-amyin, β-amyrin, lupeol and sucrose octaacetate. For structure elucidation of these natural compounds IR, EM and NMR techniques (1H, 13C, DEPT) were used. Finally, in the last chapter the extracts and some fractions of H. speciosa were screened for their biological activities in vitro. / Neste trabalho apresentamos os resultados sobre o estudo fitoquímico da mangabeira, Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae). Na primeira parte do trabalho foi investigada a composição química dos voláteis das folhas e dos frutos variando-se o tempo de secagem e o estádio de maturação, respectivamente. As análises através de CG-EM dos óleos essenciais das folhas nos permitiu observar que há mudanças significativas na percentagem relativa dos constituintes majoritários quando se varia o tempo de secagem. Desta forma, foi possível verificar um decréscimo nas percentagens dos álcoois como (E)-3-hexenol (68,6% nas folhas frescas; 13,3% após 10 dias de secagem); enquanto houve um aumento significativo no percentual dos monoterpenos oxigenados como geraniol (2,4% nas folhas frescas; 54,7% após 10 dias de secagem). Já nas análises da composição química dos voláteis dos frutos nos três estádios de maturação (verde, de vez e maduro), foi possível verificar uma clara diferenciação na proporção dos componentes principais, de acordo com o estádio de maturação. Assim, o aroma dos frutos verdes possui um teor maior de monoterpenos oxigenados como o óxido de cis-linalool, óxido de trans-linalool e linalool, enquanto a proporção de ésteres, álcoois, aldeídos e cetonas são menores. Por outro lado, na composição química dos voláteis dos frutos maduros, observamos um predomínio de ésteres, álcoois, aldeídos e cetonas, enquanto a proporção de monoterpenos oxigenados foi bastante reduzida. Já na composição dos voláteis dos frutos de vez , verificamos proporções intermediárias tanto dos ésteres, álcoois, aldeídos e cetonas quanto dos monoterpenos oxigenados como o óxido de cis-linalool, óxido de trans-linalool e linalool. Na segunda parte do trabalho, o estudo fitoquímico do látex dos frutos de H. speciosa nos permitiu o isolamento e identificação de 12 substâncias: 3-β-O-hexadecanoato de lupeoíla, 3-β-O-3 -hidroxihexadecanoato de lupeoíla, 3-β-O-9-octadecenoato de lupeoíla, 3-β-O-octadecanoato de lupeoíla, 3-β-O-3 -hidroxioctadecanoato de lupeoíla, 3-β-O-3 -hidroxiicosanoato de lupeoíla, 3-β-O-3 -hidroxidocosanoato de lupeoíla, 3-β-O-3 ,5 -diidroxiicosanoato de lupeoíla, α-amina, β-amirina, lupeol e a sacarose na sua forma peracetilada. A determinação estrutural das substâncias foi baseada na análise dos dados espectrais de EM, IV e RMN (1H, 13C e DEPT). Por fim, na terceira parte do trabalho, foram realizados ensaios para verificação de atividade biológica com os extratos e frações isoladas das várias partes da planta estudada.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Trees native to Brazil, mangaba (Hancornia speciosa Gomes) is a species mainly extractive, occurrence in various regions of the country. The Northeast holds of 99% of all production, being the Sergipe state the largest producer. The potential for the use of the pulp is quite varied, is used for fresh consumption and industrialization of various foods and drinks. The species has been threatened with extinction by several factors that are contributing to reduction of their naturally occurring areas. To enlarge the database for the use and knowledge of the variability of this species, as well as support to its domestication, it is necessary to carry out studies and characterization of genetic diversity. The present work was developed with the purpose to display and evaluate morphological descriptors, physico-chemical and molecular in germplasm of mangaba. The genebank of mangaba (BGmangaba) of Embrapa Coastal Tablelands was implemented in 2006 and has 213 individuals, representing 22 accessions. For morphological and physico-chemical characterization, 21 descriptors were used on 54 plants, from 10 access on fruit-bearing stage. There was wide variation and significance among and with access, without direct relationship with its origins. Fourteen descriptors were considered of significant importance for studies of characterization of mangaba, without loss of information on characterization. The accesses that presented the most significant values were AB, BI, CA, LG, TC, with greater development when compared to the others, the accesses TC, AB, AD, stand out as attractive, due to their physicochemical characteristics and the accesses BI and TC with fruits of larger masses, characteristic of interest for the in natura consumption and agroindustrial processing. All accesses of the BAG were used for molecular characterization and genetic structure, using nine microsatellite markers (SSR). 100% of polymorphism was observed with the use of SSR. 147 alleles were identified, with an average of 16 alleles for loco. Reliability was verified with stress values (0.042) and correlation (0.988). The alleles showed high frequency of heterozygosity (Ho>Ho). Fst values (0.22) and f (0.07) indicated moderate population structure, being presented greater diversity within the traffic. Bayesian analysis indicated a group with k=2, confirmed with the UPGMA. Were formed two distinct groups, grouped according to similarity. The pairs of individuals PM5 and GX2; CN1 and CN9; G18 and PA1; JA14 and JA15; OI8 and OI9, all belonging to the G2 were those closest genetically. The combination of the keywords used in this study, favors the identification of different individuals and with features of interest. The germplasm evaluated has diversity among and within access.The results will collaborate in the conservation of this material strategies and future breeding programs. The proposed descriptors will be used by FAO/Biodiversity. / Frutífera nativa do Brasil, a mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) é uma espécie de cultivo predominantemente extrativista, que ocorre em várias regiões do país. A região Nordeste detém 99% de toda a produção, e o estado de Sergipe é o maior produtor. O potencial para o aproveitamento da polpa é bastante variado, é utilizada para o consumo in natura e industrialização de diversos alimentos e bebidas. Para ampliar a base de dados e conhecimento da variabilidade desta espécie, bem como dar suporte à sua domesticação, é necessário que se realizem estudos de caracterização e de diversidade genética. O presente trabalho foi desenvolvido com a finalidade de indicar e avaliar descritores morfológicos, físico-químicos e moleculares em germoplasma de mangaba. O Banco de Germoplasma de Mangaba (BGMangaba) da Embrapa Tabuleiros Costeiros foi implantado em 2006 e possui 213 indivíduos, que representam 22 acessos. Para a caracterização morfológica e físico-química, 21 descritores foram utilizados em 54 plantas, oriundas de 10 acessos em fase de frutificação. Observou-se ampla variação e significância entre e dentro dos acessos, sem relação direta com a sua origem. Quatorze descritores foram considerados de significativa importância para estudos de caracterização de mangabeira, sem perda de informações na caracterização. Os acessos que apresentaram valores mais significativos foram AB, BI, CA, LG TC com maior desenvolvimento quando comparado aos demais, os acessos TC, AB, AD, se destacam como atrativos, por suas características físico-químicas, e os acessos BI e TC com frutos de maiores massas, característica de interesse para o consumo in natura e processamento agroindustrial. Todos os acessos do BGMangaba foram utilizados para a caracterização molecular e estrutura genética, utilizando nove marcadores microssatélites (SSR). Observou-se 100% de polimorfismo com o uso dos SSR. Foram identificados 147 alelos, com média de 16 alelos por loco. A confiabilidade foi verificada com valores de estresse (0,042) e de correlação (0,988). Os alelos apresentaram alta frequência de heterozigosidade (He>Ho). Os valores de Fst (0,22) e de f (0,07) indicaram moderada estrutura populacional, sendo apresentada maior diversidade dentro dos acessos. A análise Bayesiana indicou um agrupamento com k=2, confirmado com o UPGMA. Foram formados dois grupos distintos, agrupados de acordo com a similaridade. Os pares de indivíduos PM5 e GX2; CN1 e CN9; G18 e PA1; JA14 e JA15; OI8 e OI9, todos pertencentes ao G2 foram os mais próximos geneticamente. A combinação dos descritores utilizados nesse estudo, favorece a identificação de indivíduos mais divergentes e com características de interesse. A diversidade entre e dentro dos acessos foi confirmada com as análises moleculares. Os resultados irão colaborar nas estratégias de conservação desse material e futuros programas de melhoramento. A proposta de descritores será utilizada pela FAO/Biodiversity. / São Cristóvão, SE

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This work describes the chemical study of renewable natural resources of the State of Sergipe, Brazil, in that we analyzed the leaves and branches of mangabeira, Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae).This work is divided into 3 chapters. In the first part of the research was investigated the volatile chemical composition from leaves varying the drying time and harvest time. Analysis by GC/MS and GC/FID showed that there was a significant increase in the content of some oxygenated monoterpenes according to the drying of leaves, such as -terpineol (0,08±0,20 - 3,89±1,78 in fresh leaves to 0,93±0,03 - 5,21±0,65 in dried leaves), linalool (2,95±1,45 - 12,46±2,24 in fresh leaves to 2,78±1,08 - 17,16±2,83 in dried leaves), geraniol (1,04±0,34 - 12,80±1,23 in fresh leaves to 25,67±6,45- 46,56±4,67 in dried leaves), as well and a decrease in the relative percentage of alcohols such as (Z)-3-hexenol (46,81±3,27 - 78,45±7,75 in fresh leaves to 10,70±4,87 - 19,15±4,28 in dried leaves) and 1-hexanol (1,65±0,33 - 10,15±0,80 in fresh leaves to 0,07±0,05 - 4,59±1,55 in dried leaves).In the months with higher rainfall and temperature we observed a higher yield of essential oils from leaves of H. speciosa. In the second part of the work, the phytochemical study of the leaves and branches of this species allowed the isolation of 3 mixtures. Those containing a mixture of triterpenes -amyrin, -amirin and lupeol were isolated from the hexane partition of methanolic extract of the leaves, while a mixture of 9 3--O-acyl lupeol esters and another mixture of n-alkanes were isolated from hexane extract of the branches.Structure determination of the isolated compounds was based on analysis of spectroscopic methods. In the third part, we evaluated the antioxidant activity of essential oils from fresh and dried leaves, and the methanol extract of leaves and branches and their partitioned extracts, which was seen to goodability to scavenge free radicals butanol partition of the mathanol extract of leaves. We also investigate the cytotoxic activity of hexane and methanol extracts of leaves and branches against cancer cell lines MDA-MB-435 (melanoma) and SF-295 (brain) and HCT-8 (human colon carcinoma), which was not observed an inhibitory effect. / O presente trabalho descreve o estudo químico dos recursos naturais renováveis do estado de Sergipe, onde foram analisadas as folhas e ramos da mangabeira, Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae). Na primeira parte do trabalho foi investigada a composição química dos voláteis das folhas variando-se o tempo de secagem e a época de colheita. As análises através de CG/EM e CG/DIC permitiram verificar que, com a secagem das folhas, houve um aumento significativo nas percentagens relativas de alguns monoterpenos oxigenados como -terpineol (0,08±0,20 - 3,89±1,78 nas folhas frescas para 0,93±0,03 - 5,21±0,65 nas folhas secas), linalol (2,95±1,45 - 12,46±2,24 nas folhas frescas para 2,78±1,08 - 17,16±2,83 nas folhas secas), geraniol (1,04±0,34 - 12,80±1,23 nas folhas frescas para 25,67±6,45- 46,56±4,67 nas folhas secas), assim como um decréscimo nas percentagens de alcoóis como (Z)-3-hexenol (46,81±3,27 - 78,45±7,75 nas folhas frescas para 10,70±4,87 - 19,15±4,28 nas folhas secas) e 1- hexanol (1,65±0,33 - 10,15±0,80 nas folhas frescas para 0,07±0,05 - 4,59±1,55 nas folhas secas). Nos meses com valores de índice de pluviometria e temperatura elevados observou-se um maior rendimento de óleo essencial de H. speciosa. Na segunda parte do trabalho, o estudo fitoquímico das folhas e dos ramos desta espécie permitiu a identificação de 3 misturas. Destas uma mistura de triterpenos contendo -amirina, - amirina e lupeol foi identificada da partição hexânica do extrato metanólico das folhas, enquanto uma mistura contendo 9 ésteres 3--O-acil lupeol e uma outra mistura contendo 12 n-alcanos foram identificadas do extrato hexânico dos ramos. A determinação estrutural das substâncias foi baseada na análise dos dados espectroscópicos obtidos. Na terceira parte do trabalho, foram realizados testes de atividade antioxidante com os óleos essenciais das folhas frescas e secas, e com o extrato metanólico das folhas e dos ramos e suas respectivas partições, onde foi observada a boa capacidade de sequestrar radicais livres da partição butanólica do extrato metanólico das folhas. Além da investigação da citotoxicidade dos extratos hexânicos e metanólicos das folhas e dos ramos frente às linhagens de células tumorais MDA-MB435 (mama - humano) e SF-295 (glioblastoma - humano) e HCT-8 (colon), onde não foi observado um efeito inibitório.

MARQUES, Samuel Pedro Dantas. Nova proposta para rápida formação/combate dos produtos de glicação avançada (AGES) e propriedades farmacológicas de Hancornia speciosa Gomes. 2017. 191f. Tese (Doutorado em Química)- Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Weslayne Nunes de Sales (weslaynesales@ufc.br) on 2017-09-04T11:04:28Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_spmarques.pdf: 10801669 bytes, checksum: a960953c891c563db1c4666105f96c56 (MD5) / Approved for entry into archive by Weslayne Nunes de Sales (weslaynesales@ufc.br) on 2017-09-04T11:05:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_spmarques.pdf: 10801669 bytes, checksum: a960953c891c563db1c4666105f96c56 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-04T11:05:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_spmarques.pdf: 10801669 bytes, checksum: a960953c891c563db1c4666105f96c56 (MD5) Previous issue date: 2017 / This study reports the development of methodologies for formation and combat possibilities to Advanced Glycation Products (AGEs), and evaluate the chemical constitution and pharmacological properties of Hancornia speciosa Gomes(HSG). Regarding the obtaining of the AGEs, considering in vitro procedures, the current methodologies need an incubation period of up to 4 weeks. The methods developed in this work allowed a significant reduction of the reaction time (48 hours-glucose and fructose tests) (3 hours-tests with glyoxal and methylglyoxal), due to the coupling to the free radical generation system called hypoxanthine/xanthine oxidase. Thus, the methodologies presented in this work consisted in promoting the reaction between sugar solutions (glucose, fructose), or dicarbonyl compounds (methylglyoxal, glyoxal), with bovine serum albumin (BSA) protein solution, using different reaction media. The enzyme xanthine oxidase (XO) was added to the system in order to promote the formation of AGEs in a reaction environment with excess hydroxyl free radicals (.OH). The presence of these radicals in excess during the glycation and glycooxidation of the protein indicate to have promoted the oxidation of the chain of amino acid residues thereof, as well as sugars, thus giving α-dicarbonyl derivatives (glyoxal and methylglyoxal) more rapidly, the which made possible the significant reduction of the time of formation of the AGEs. The higher reactivity of fructose to glucose, to producer AGEs, was present in all conditions evaluated. The ability of different chemical species to combat the glycation process, acting as capture agents of α-dicarbonyl species, was shown to be effective for aminoguanidine (standard indicated in the literature), methanolic extracts of HSG leaves and rutin. The rutin was more active for the capture of dicarbonyl species than the standard indicated by the literature, due to the formation of more stable mono and/or disubstituted adducts. The measurement of the formation/combat of AGEs was determined by spectrofluorimetry. The qualitative analysis by high performance liquid chromatography coupled to a mass spectrometer (HPLC-DAD-ESI-MS) of HSG methanolic extracts showed a great variety of polyphenolic compounds (phenolic acids and flavonoids), confirming the potential as a source of bioactive compounds. In the leaves and bark, the greatest number of polyphenolic compounds were verified when compared to the fruits. The following species were identified for the first time in HSG: vanillic acid glucoside, 3,4-dihydroxybenzoic acid, para-hydroxybenzoic acid, vanillin, trans-para-coumaric acid; cis-para-coumaric acid, trans-ferulic acid quinate, trans-ferulic acid, cis-ferulic acid, cis-ethyl chlorogenic acid, trans-ethyl chlorogenic acid, quercetin, quercetin pentoside, quercetin glucoside, quercetin rhamnoside, quercetin galactoside, quercetin rhamnogalactoside, quercetin rhamnoglucocoumarate, quercetin rhamnogalactocoumarate, kaempferol rhamnoglucoside, kaempferol rhamnogalactoside, kaempferol rhamnoglucocoumarate, kaempferol rhamnogalactocoumarate, isorhamnmetin rhamnoglucoside, afzelechin-C-glucoside. For the values of the antioxidant potential and inhibition of angiotensin I (antihypertensive effect), leaves and bark extracts were more active, presenting promising IC50 values when compared to the synthetic form of vitamin E (Trolox). The capacity of HSG extracts to inhibit the action of the enzyme acetylcholinesterase, which is related to Alzeimer treatment, has been shown to be quite significant for the hexane bark extract (EHC). The fractionation of the same, led to obtaining a mixture as a more active fraction. Through the use of magnetic resonance and literature data, the presence of lupeol in this fraction was identified. / Este estudo relata o desenvolvimento de metodologias para formação e possibilidades de combate dos Produtos de Glicação Avançada (AGEs),assimcomo a avaliação da constituição química e propriedades farmacológicas de Hancornia speciosaGomes (HSG). No que se refere a obtenção dos AGEs, considerando procedimentos in vitro, as metodologias atuais nescessitam de um período de incubaçãode até 4 semanas. Os métodos desenvolvidos neste trabalho, possibilitaram a redução significativa do tempo de reação (48 horas-ensaios com glicose e frutose) (3 horas-ensaios com glioxal e metilglioxal), em virtude do acoplamento ao sistema de geração de radicais livres denominado hipoxantina/xantinaoxidase.Assim, as metodologias apresentadas neste trabalho, consistiram em promover a reação entre soluções de açúcares (glicose, frutose), ou compostos dicarbonílicos (metilglioxal, glioxal), com solução proteica de albumina de soro bovino (BSA), utilizando diferentes meios reacionais.A enzima xantinaoxidase (XO),foi adicionada ao sistema com o intuito de promover a formação dos AGEs em ambiente reacional com excesso de radicais livres hidroxila (.OH).A presença em excesso destes radicais durante a glicação e glicooxidação da proteína, parecem ter promovido a oxidação da cadeia de resíduos de aminoácidos da mesma, bem como dos açúcares,originandoassim derivados α-dicarbonílicos (glioxal e metilglioxal) de forma mais rápida, o que possibilitou a redução tão significativa do tempo de formação dos AGEs. A maior reatividade da frutose frente a glicose, para originar os AGEs, se apresentou em todas as condições avaliadas.A capacidade de diferentes espécies químicas em combater o processo de glicação, atuando como agentes capturadores de espécies α-dicarbonílicas, se mostrou efetivo para aminoguanidina (padrão indicado pela literatura), extratos metanólicos das folhas de HSG eo flavonóide rutina. A rutina, apresentou-se mais ativa para captura de espécies dicarbonílicas que o próprio padrão indicado pela literatura, em virtude da formação de adutos mono e/ou dissubstituídos mais estáveis.A mensuração da formação/combate dos AGEs, foi determinada através de espectrofluorimetria.A análise qualitativa por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a espectrômetro de massa (HPLC-DAD-ESI-MS) dos extratos metanólicos de HSG,exibiram grande variedade de compostos polifenólicos (ácidos fenólicos e flavonóides), confirmando o potencial como fonte de compostos bioativos. Nas folhas e caule, observou-se maior número de compostos polifenólicos quando comparados aos frutos. Foram identificadas pela primeira vez em HSG as seguintes espécies: ácido vanílico glicosídeo, ácido 3,4-di-hidroxibenzóico, ácido para-hidroxibenzóico, vanilina, ácidotrans-para- cumárico, ácidocis-para-cumárico, ácidotrans-ferúlico quinato, ácidotrans-ferúlico, ácidocis-ferúlico, ácidocis-etil-clorogênico, ácidotrans-etil-clorogênico, quercetina, quercetina pentosídeo, quercetina glicosídeo, quercetina ramnosídeo, quercetina galactosídeo, quercetina ramnogalactosídeo, quercetina ramnoglicocumarato, quercetina ramnogalactocumarato, canferol ramnoglicosídeo, canferol ramnogalactosídeo, canferol ramnoglicocumarato, canferol ramnogalactocumarato, isoramnetina ramnoglicosídeo e afzelequina-C-glicosídeo. No que se refere aos valores do potencial antioxidante e inibição da angiotensina I (efeito anti-hipertensivo),os extratos das folhas e caule se mostraram mais ativos, apresentando valores de IC50 promissores, quando comparado a forma sintética da vitamina E (Trolox).A capacidade dos extratos de HSG em inibir a ação da enzima acetilcolinesterase, que está relacionada ao tratamento do Alzheimer se mostrou bastante significativa para o extrato hexânico do caule (EHC). O fracionamento do mesmo, levou a obtenção de uma mistura como fração mais ativa. Atravésda utilização de ressonância magnética e dados da literatura, foi identificada a presença de lupeolnesta fração.

Submitted by JULIANA SILVA RODRIGUES CABRAL null (jsrcabral@gmail.com) on 2016-08-30T23:49:11Z No. of bitstreams: 1 TESE - JULIANA SILVA RODRIGUES CABRAL.pdf: 1613065 bytes, checksum: 9d267faa19bdb0318205440f3bd75671 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-08-31T18:43:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 cabral_jsr_dr_ilha.pdf: 1613065 bytes, checksum: 9d267faa19bdb0318205440f3bd75671 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-31T18:43:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 cabral_jsr_dr_ilha.pdf: 1613065 bytes, checksum: 9d267faa19bdb0318205440f3bd75671 (MD5) Previous issue date: 2016-07-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) se destaca entre as árvores frutíferas nativas do cerrado como uma das mais promissoras para programas de exploração sustentável. Apesar do potencial econômico, a falta de informações sobre esta cultura vem restringindo seu cultivo comercial. A propagação sexuada desta espécie é dificultada, pois suas sementes têm curta longevidade e a redução do teor de água prejudica sua viabilidade e vigor. A técnica de micropropagação possibilita a multiplicação em massa de mudas com características geneticamente superiores, uniformes, em espaço físico reduzido e curto período de tempo. Entretanto, ela elimina os microrganismos associados ao tecido vegetal, incluindo mutualistas como os fungos micorrízicos arbusculares (FMA), além dos promotores de crescimento vegetal, que podem melhorar o desempenho da planta sob condições de estresse, além de aumentar o rendimento. A inoculação destes microrganismos durante a micropropagação tem sido recomendada para reduzir o tempo de formação das mudas e de aclimatização, aumentar a tolerância a estresses bióticos e abióticos, resistência a patógenos e porcentagem de sobrevivência das mudas após o transplante. Objetivou-se com este trabalho a aclimatização de plantas micropropagadas de mangabeira com diferentes substratos e câmara úmida, inoculadas com fungos promotores do crescimento vegetal (FPCV) in vitro e ex vitro, associados com o FMA Glomus clarum, em casa de vegetação, para maximizar a produção de mudas a serem utilizadas em programas de formação de pomares e reflorestamento. Os experimentos foram conduzidos na UNESP - Universidade Estadual Paulista, Campus de Ilha Solteira e Instituto Federal Goiano – Campus Rio Verde (IF Goiano – Campus Rio Verde). O material vegetal utilizado na propagação in vitro foi retirado de frutos de diferentes plantas de mangabeira coletados na Fazenda de Ensino, Pesquisa e Extensão da UNESP Campus Ilha Solteira e na Fazenda Gameleira, município de Montes Claros de Goiás - GO. Todos os experimentos foram realizados e conduzidos por 120 dias. A associação do saco plástico como câmara úmida com o substrato Bioplant®, seguido da pulverização de FPCV e inoculação do G. clarum é o método mais adequado para aclimatização de plantas micropropagadas de mangabeira, em casa de vegetação. / Mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) stands out among the native fruit trees of the Cerrado as one of the most promising for sustainable exploitation programs. Despite the economic potential, lack of information about this culture is limiting its commercial cultivation. The sexual propagation of this species is difficult as its seeds have a short longevity, and reduced water content impairs their viability and vigor. The micropropagation technique enables the mass multiplication of plants with genetically superior features, uniform, in a reduced physical space and a short length of time. However, it eliminates the microorganisms associated with plant tissue, including mutualistcs, as mycorrhizal fungi (AMF), in addition to plant growth promoters, which can improve plant performance under stress conditions, and increase the yield. Inoculation of these microorganisms during micropropagation has been recommended to reduce the time of seedlings formation and acclimatization, and to increase tolerance to biotic and abiotic stresses, resistance to pathogens and percentage of seedling survival after transplantation. This study aimed the acclimatization of micropropagated plants with different substrates and moister chamber, inoculated with plant growth-promoting fungi (PGPF) vitro and ex vitro, associated with AMF Glomus clarum, in a greenhouse, to maximize seedlings production to be used in the mangabeira and reforestation programs. Experiments were conducted at UNESP- Universidade Estadual Paulista, Ilha Solteira Campus, and Federal Institute Goiano - Rio Verde Campus (IF Goiano - Campus Rio Verde). The plant material used in the in vitro propagation was removed from fruits of different mangabeira plants collected in Teaching, Research and Extension Farm of the UNESP Ilha Solteira Campus and Gameleira Farm, Montes Claros de Goiás-GO. All experiments were performed and conducted for 120 days. The association of plastic bag as a moist chamber with Bioplant® substrate, followed by spray PGPF and inoculation of G. clarum is the most appropriate method for acclimatization of micropropagated plants mangabeira in the greenhouse. The association of plastic bag as moist chamber with Bioplant® substrate, followed by spray PGPF and inoculation of G. clarum is the most appropriate method for acclimatization of micropropagated of mangabeira plants in the greenhouse. / FAPESP: 2012/14489-9