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Infecção ativa por herpesvírus em pacientes com lúpus eritematoso sistêmico (LES) / Herpesvirus active infection in patients with systemic lupus

Peigo, Murilo de Freitas, 1987- 24 August 2018 (has links)
Orientadores: Sandra Cecília Botelho Costa, Sandra Helena Alves Bonon / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-24T11:43:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Peigo_MurilodeFreitas_M.pdf: 1466925 bytes, checksum: 094e2cd00645843fd5fa2c56ca66c2d5 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O Lúpus Eritematoso Sistêmico (LES) é uma patologia sistêmica do tecido conjuntivo, que se apresenta de maneira variada na dependência do órgão afetado, da gravidade de seu acometimento e da idade do paciente, tendo influência de fatores raciais, de padrões imunológicos e ambientais. Pacientes lúpicos têm grande predisposição para desenvolver infecções graças à imunossupressão induzida pela própria doença como pelo uso de vários medicamentos em seu tratamento. Infecções causadas por herpesvírus, principalmente o Citomegalovírus Humano (CMV) e o Epstein-Barr (EBV), têm sido implicadas em várias doenças autoimunes graves, incluindo o LES. A reativação dos herpesvírus 6 e 7 (HHV-6 e HHV-7) geralmente ocorre em pacientes imunodeprimidos, mas seus papéis ainda são pouco estudados. As infecções por herpesvírus têm influência tanto no início do processo autoimune quanto na exacerbação da progressão da doença. A identificação de pacientes com alto risco de desenvolver doença pelos herpesvírus pode ser realizada utilizando técnicas de detecção de infecção ativa, como a Reação em Cadeia da Polimerase (Nested-PCR) e a detecção do antígeno pp65 do CMV (Antigenemia). Dependendo do caso, estes pacientes podem receber tratamento com antivirais. Diante do exposto, os objetivos deste estudo foram: monitorizar os pacientes com LES em relação à infecção ativa por CMV, EBV, HHV-6 e HHV-7, utilizando as técnicas de Nested-PCR e de antigenemia, bem como avaliar o impacto clínico dessas infecções. Foram incluídos neste trabalho, amostras de sangue de 71 pacientes em seguimento no Departamento de Reumatologia da Faculdade de Ciências Médicas ¿ UNICAMP, com diagnóstico de LES confirmado, sendo que 20/71 (28%) estavam com o lúpus ativo (SLEDAI ? 8) e 51/71 (72%) dos pacientes não tinham atividade lúpica (SLEDAI < 8). Das amostras de sangue pesquisadas, 10/71 (14%) foram positivas para os herpesvírus estudados, sendo que 90% destes pacientes com infecção ativa apresentavam o lúpus em atividade (p?0,006). Infecção ativa pelo CMV ocorreu em 4 pacientes (5,6%). HHV-7 foi detectado em 4 amostras (5,6%). Dois outros pacientes apresentaram dupla infecção por CMV e HHV-7 (2,8%). Infecção ativa pelo EBV e HHV-6 não foi detectada em nenhuma das amostras analisadas. Dois pacientes foram a óbito, sendo que um deles evoluiu com sepse de foco pulmonar (provável doença por CMV) e o outro com sepse por Psedomonas aeruginosa. Diante dos resultados obtidos, podemos observar que a infecção ativa pode ocorrer nos pacientes com LES, principalmente naqueles com a doença em atividade. Poucos estudos têm avaliado o impacto destas infecções no cuidado diário dos pacientes com LES. Acreditamos que este trabalho seja pioneiro e será de fundamental importância, contribuindo com este grupo de pacientes. Entretanto, futuros estudos deverão ser implementados com um número maior de pacientes e de coletas/paciente, principalmente naqueles com LES em atividade, que foram demonstrados com aqueles com fator de risco aumentado / Abstract: Systemic lupus erythematosus (SLE) is a connective tissue systemic pathology that presents itself in several ways, depending on the organ affected, the seriousness of the disease and patient¿s age, being influenced by racial factors, immunologic and environmental patterns. SLE patients have great predisposition to develop infections due to the immunosuppression induced by the disease itself and by the use of medicine in the treatment. Infections caused by herpesvirus, especially Human Cytomegalovirus (CMV) and Epstein-Barr (EBV), have been developed into several serious autoimmune diseases, including SLE. Herpesvirus 6 and 7 (HHV-6 and HHV-7) reactivation generally occurs in immunodepressed patients, but their roles are unclear. Herpesvirus infections have influence both on the beginning of the autoimmune process and on the aggravation of the disease progression. The patients that present high risks of developing herpesvirus related diseases can be identified using active infection detection techniques, such as the Nested polymerase chain reaction (Nested-PCR) and the CMV pp65 antigen detection (antigenemia). Depending on the case, the patients can receive treatment with antivirals. Face to the exposed, the objectives of this study were: to monitor the patients with SLE with regard to active infection by CMV using Nested-PCR and antigenemia techniques, and EBV, HHV-6, HHV-7 in serum, as well as to evaluate the clinic impact to these infections. There were included in this work blood samples of 71 patients that are being treated at the Department of Rheumatology, Faculty of Medical Sciences ¿ University of Campinas - UNICAMP, with a confirmed SLE diagnosis, given that 20/71 (28%) had active lupus (SLEDAI ? 8) and 51/71 (72%) of the patients didn¿t present lupic activity (SLEDAI < 8). Considering the blood samples researched, 10/71 (14%) were positive for the studied herpesvirus, and 90% of the patients with active infection presented lupus in activity (p ? 0,006). Active infection by CMV was observed in 4 patients (5,6%). HHV-7 was detected in 4 samples (5,6%). Two other patients presented double infection by CMV and HHV-7 (2,8%). Active infection by EBV and HHV-6 was not detected in any of the analyzed samples. Two patients have deceased, whose conditions developed into pulmonary sepsis (probable disease by CMV) and into Psedomonas aeruginosa sepsis, respectively. After analyzing the achieved results, we observe that active infection can appear in patients with SLE, especially in those with the disease in activity. Few studies have evaluated the impact of these infections on the daily care of patients with SLE. In this sense, we believe that this work is pioneer and that it will be of fundamental importance, contributing to this group of patients. However, future studies should be implemented, with a larger number of patients and samples, especially those with SLE in activity, which are the ones with increased risk factor as shown / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica
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Natural killer cell receptors and their MHC ligand interactions in innate resistance to mouse cytomegalovirus

Kielczewska, Agnieszka. January 2007 (has links)
Le premier but de mon projet de doctorat a ete la caracterisation moleculaire de l'interface entre les recepteurs activateurs des cellules Natural Killer (NK) et de leurs ligands exprimes dans les cellules infectees ainsi que l'implication de cette interaction sur la reponse a l'infection par le cytomegalovirus (MCMV). / J'ai tire un avantage de la variation naturelle au sein des membres lies aux recepteurs Ly49C ainsi que de la disponibilite des structures cristallines des Ly49 afin de comprendre les determinants moleculaires des interactions Ly49H-m157 et egalement identifier les residus des acides amines qui permettent de discriminer entre les recepteurs qui se lient et ceux qui ne se lient pas a m157. Mes decouvertes suggerent que le "site 2" du contact entre le CMH de classe I et Ly49 n'est visiblement pas implique dans la liaison avec m157. Au contraire, les residus localises au niveau de l'interface homodimere-recepteur seraient probablement critiques a la reconnaissance fonctionnelle de la glycoproteine m157. Notre approche fonctionnelle et de modelisation tridimensionnelle suggerent que l'architecture du dimere Ly49H est cruciale pour l'accessibilite de m157 mais non pour les molecules de CMH de classe I et relient la variabilite dans l'homodimerisation des Ly49 a la reconnaissance directe des produits pathogeniques. / Un autre mecanisme de la reponse de l'hote contre MCMV provient de l'etude de la souche de souris MA/My, laquelle, malgre l'absence du gene Ly49h ainsi que la proteine pour laquelle il code, y est hautement resistant. Des etudes anterieures ont demontre qu'une interaction epistatique entre un gene issu du groupe des genes Ly49 sur le chromosome 6 et le CMH (H2) sur le chromosome 17 est associee avec la resistance au virus. Utilisant une methode de co-culture de cellules reportrices NFAT-GFP exprimant les recepteurs activateurs Ly49 et de fibroblastes primaires infectes, j'ai montre que le recepteur activateur Ly49P des cellules NK reconnait specifiquement les cellules infectees par MCMV et que cette reconnaissance depend de la presence de l'haplotype H2k. Ce signal etait bloque par l'utilisation des anticorps anti-H2-D k mais non par anti-H2-Kk. Ces resultats indiquent l'existence d'un nouveau mecanisme des cellules NK implique dans la resistance au MCMV, lequel depend de l'interaction fonctionnelle entre le recepteur Ly49P et la molecule du MHC de classe I, H2-Dk, dans les cellules infectees par MCMV. Comme contribution directe de ce travail, nous avons demontre que la resistance chez MA/My est au moins partiellement dependante des interactions entre le recepteur Ly49P et la molecule H2-Dk modifiee par le virus dans les cellules infectees. Comme MCMV regule negativement l'expression des molecules du CMH de classe I, j'ai confirme la presence de H2-Dk dans les cellules infectees par l'utilisation d'un virus MCMV recombinant portant un gene rapporteur GFP. En permutant la plateforme peptidique de liaison, les domaines transmembranaires et intracellulaires entre les molecules H2-Db et H2-D k, j'ai demontre que la plateforme peptidique de liaison est critique pour la reconnaissance des cellules infectees. Par le criblage d'un panel de mutants MCMV portant des genes impliques dans l'evasion immune, j'ai demontre que l'infection de fibroblastes par le MCMV depourvu du gene m04 (Deltam04) abolit totalement l'activation de Ly49P. (Abstract shortened by UMI.)
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Analysis of the principle latent promoter of Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus

Staudt, Michelle Ruth. January 2006 (has links) (PDF)
Thesis (Ph. D.)--University of Oklahoma. / Includes bibliographical references.
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Atividade antiviral de extratos de plantas do Cerrado contra herpesvírus / Antiviral activity of Brazilian Cerrado plants extracts against Herpesvirus

Padilla, Marina Aiello, 1986- 07 August 2011 (has links)
Orientador: Clarice Weis Arns / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-18T22:42:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Padilla_MarinaAiello_M.pdf: 819976 bytes, checksum: ee10d49c35496b65a75f47504870ce54 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Os herpesvírus são responsáveis por enfermidades importantes em humanos e animais. Em animais, estão associados a doenças que causam grandes perdas econômicas. Em humanos, a gravidade da enfermidade é maior quando os pacientes são imunossuprimidos. Além disso, já existem cepas mutantes resistentes aos medicamentos disponíveis. Visto as dificuldades associadas a prevenção e tratamento das infecções por herpesvírus, a utilização de produtos de plantas como antivirais apresenta - se como alternativa. O Cerrado Brasileiro é um bioma que localiza -se praticamente todo no Brasil e apresenta mais de 10.000 espécies de plantas. Essas plantas podem potencialmente servi r de fonte de compostos farmacologicamente ativos. Assim, o presente trabalho teve como objetivos avaliar a atividade antiviral , atividade virucida e o índice de seletividade (SI) de extratos de plantas do Cerrado contra os herpesvírus suíno tipo 1 (SuHV-1), equinotipo 1 (EHV-1) e vírus do herpes simplex tipo 1 (HSV-1) . Inicialmente, os extratos liofilizados foram submetidos aos testes de citotoxicidade em células MDBK e Vero para determinar a concentração máxima não tóxica (CMNT). Dos extratos, quatro apresentaram as mesmas CMNT's em ambas as linhagens mas, em geral , os extratos foram mais citotóxicos para células Vero. A seguir, com base na CMNT, foram realizados os testes de atividade antiviral para os vírus HSV-1 e EHV-1 em células Vero, e SuHV-1 em MDBK. Os resultados demonstraram que 50% dos extratos apresentaram atividade contra pelo menos um dos herpesvírus estudados, com destaque para as espécies Banisteriopsis variabil is , Byrsonima intermedia e Xylopia aromática que foram ativas contra os t rês herpesvírus, e o extrato da Stryphnodendron adstringens , ativo contra o HSV-1 e SuHV-1. Os extratos que apresentaram atividade antiviral foram então testados quanto a atividade virucida e os resultados submetidos ao cálculo do SI. O extrato foi considerado ativo quando o índice de inibição viral ( IIV) foi maior ou igual a 1,5 ou apresentou PI% (porcentagem de inibição) maior ou igual a 97%. Quanto ao SI, foram considerados ativos os extratos que apresentaram valores iguais ou superiores a 4. A atividade virucida foi observada em 75% dos extratos contra pelo menos um dos herpesvírus testados. As espécies que apresentaram os resultados mais promissores foram: B. variabil is, X. aromática, S. adstringens e B. intermedia. Esta última foi então utilizada em testes adicionais com a variação da concentração, e demonstrou atividade antiviral e virucida em concentrações inferiores a CMNT contra os herpesvírus testados. Assim, o presente trabalho demonstra o potencial de plantas do Cerrado como fonte de compostos com atividade antiviral e virucida. Estudos adicionais são necessários para avaliar os mecanismos de ação e os compostos químicos responsáveis pela atividade observada / Abstract: Herpesviruses are responsible for important diseases in humans and animals. In animals, they are associated with economically important diseases worldwide. In humans, they represent serious threats to public health, and the severity of the illness increases in immunocompromised patients. In addition, there are mutant strains that are resistant to available drugs. Because of the difficulties associated with the prevent ion and treatment of herpesvirus infect ions, the use of plant products as antivirals can be an alternative. The Brazilian Cerrado is a biome located almost entirely in Brazil has over 10,000 species of plants. These plants can potentially be used as a source of pharmacologically active compounds. There for , this study aimed to evaluate the antiviral activity, virucidal activity and the selectivity index (SI) of extracts from Cerrado plants against suid herpesvirus type 1 (SuHV-1) equid type 1 (EHV-1) and herpes simplex virus type 1 (HSV-1). Initially, the lyophilized extracts were tested for cytotoxicity in MDBK and Vero cells to identify t he maximum nontoxic concentration (MNTC). Of the extracts, four showed the same MNTC for both cells, but the extracts were generally more toxic to Vero cells. Then, based on the MNTC, antiviral activity tests were performed against HSV-1 and EHV-1 in Vero cells and SuHV-1 in MDBK cells. The results demonstrated that 50% of the extracts showed activity against at least one of the herpesviruses studied. In particular, the extracts from Banisteriopsis variabil is, Byrsonima intermedia and Xylopia aromatica, were active against all of the herpesviruses, and the extract from Stryphnodendron adstringens was active against HSV-1 and SuHV-1. The extracts that showed antiviral activity were also tested for virucidal activity, and the SI was calculated. An extract was considered active when the viral inhibition index (VII) was greater than or equal to 1.5 or showed a PI% (percent inhibition) greater than or equal to 97%. As for the SI, extracts were considered active when the displayed values greater than or equal to four. Virucidal activity was observed in 75% of the extracts against at least one of the herpesviruses tested. The species that showed the most promising results were: B. variabil is , X. aromatica, S. adstringens and B. intermedia. Was used for additional testing with varying concentrations, and demonstrated antiviral and virucidal activities at concentrations lower than the MNTC against the herpesviruses tested. Therefore, this study demonstrates the potential of Cerrado as a source of compounds with antiviral and virucidal activities. Additional studies are necessary to evaluate the mechanisms of act ion and the chemical compounds responsible for the observed activity / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica
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Natural killer cell receptors and their MHC ligand interactions in innate resistance to mouse cytomegalovirus

Kielczewska, Agnieszka. January 2007 (has links)
No description available.
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Avaliação da atividade antiviral do peptídeo P34 e moléculas da classe da 4-tiazolidinona frente a vírus de importância veterinária / Evaluation of the antiviral activity of the P34 peptide and molecules from the class of thiazolidin-4-one against virus veterinary importance

Castro, Clarissa Caetano de 24 March 2016 (has links)
Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-06-07T15:21:51Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Clarissa Caetano de Castro.pdf: 1512780 bytes, checksum: 8bb13b97653dff0e33b2ee2f520be9f0 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-06-08T13:02:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Clarissa Caetano de Castro.pdf: 1512780 bytes, checksum: 8bb13b97653dff0e33b2ee2f520be9f0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-08T13:02:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Clarissa Caetano de Castro.pdf: 1512780 bytes, checksum: 8bb13b97653dff0e33b2ee2f520be9f0 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-03-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A busca de novas substâncias com atividade antiviral levou este estudo a investigar a ação do peptídeo antimicrobiano P34, produzido pelo Bacillus sp. P34, frente ao herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e de moléculas sintetizadas da 2-picolilamina e 2-aminoetilpiperidina derivadas da classe da 4-tiazolidinona denominadas V19 (2a), V20 (2b), V23 (2c), V28 (2d), V29 (2e), AK11 (1a), AK16 (1d), AK17 (1e), AK18 (1b) e AK20 (1c) frente a diversos vírus que infectam animais. Inicialmente foram determinadas as concentrações não citotóxicas dos diferentes compostos, em diferentes linhagens celulares, através dos métodos MTT e vermelho neutro. A seguir a atividade antiviral foi avaliada mediante um ensaio de inibição do efeito citopático. Em todos os testes, o título viral em cultivo celular foi comparado ao título viral na presença de cada composto para a determinação do percentual de inibição (PI). O P34 demonstrou um PI de 99,94% e alto índice de seletividade (SI de 22,9). Os testes para identificar o modo de ação indicaram que o peptídeo P34 não atua sobre as células MDBK, ou receptores celulares. Em concentrações citotóxicas o P34 obteve efeito virucida e 100% de inibição viral nos ensaios de redução viral e de penetração. Foi evidenciada total inibição na produção das partículas de BoHV-1 quando as células foram tratadas com o P34 posterior a 8 h de infecção. Houve redução significativa (p< 0.01) do título do BoHV-1 na presença do P34 após 8 h de infecção (PI de 90%), chegando a 99,9% de PI após 18 h de tratamento pós-infecção. O P34 inibiu o BoHV-1 tanto no meio extracelular, inibindo a infecção celular, quanto no meio intracelular, após a infecção, impedindo o egresso. Com relação às moléculas derivadas da 4-tiazolidinona a menos tóxica foi a AK 16 (157 μg/mL) nas quatro linhagens de células (RK13, MDCK, CRFK e MDBK) e as mais tóxicas foram as AK11, AK18 e AK20 (19 μg/mL). O PI da molécula AK16 foi de 96,9%, 90,1% e 90,1% contra o EAV, FCV e CPV-2, respectivamente. O composto AK17 mostrou PI de 90,1% contra o EAV, a V20 de 78% contra BVDV, a V28 de 94,4% contra EIV e 78% contra BVDV e a V29 de 94,4% contra CPV-2. As moléculas V20 e V28 foram escolhidas para dar continuidade ao estudo frente ao BVDV. Foram determinados para V20 um SI de 16,8 e de 14,73 para V28. Nos ensaios de inibição da produção de partículas virais, adsorção, competição com receptores celulares, penetração viral e efeito virucida não foram observadas diferenças significativas entre os títulos do BVDV com e sem tratamentos com as moléculas. A associação das moléculas V20 e V28 aumentou de 78 para 82% o PI, não sendo verificada alteração no PI quando as moléculas foram associadas com os antivirais interferon-α 2b ou ribavirina. Através da determinação da curva de crescimento do BVDV foi evidenciada atuação no período entre 1 a 5 h pós-infecção com o BVDV, sugerindo ação posterior à entrada viral, mas antes do egresso, provavelmente no período de síntese do RNA e enzimas virais. Os resultados demonstram que o peptídeo P34 e os compostos V20 e V28 derivados da 4-tiazolidinona podem ser considerados promissores antivirais contra BoHV-1 e BVDV. / The search for new substances with antiviral activity has led this study to investigate the action of the antimicrobial peptide P34, produced by Bacillus sp. P34 against bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) and of the synthetic molecules 2-picolylamine and 2-aminoethylpiperidine, which are derived from the class of thiazolidin-4-one named V19 (2a), V20 (2b), V23 (2c), V28 (2d), V29 (2e), AK11 (1a), AK16 (1d), AK17 (1e), AK18 (1b) and AK20 (1c) in opposition to several viruses that infect animals. Initially non-cytotoxic concentrations of the different compounds were determined, in different cell lines, through the MTT and neutral red methods. Then, the antiviral activity was evaluated by an assay of the cytopathic effect inhibition. In all tests, the viral titer in cell culture was compared to the viral titer in the presence of each compound to determine the percentage of inhibition (PI). The P34 demonstrated a PI of 99.94% and high selectivity index (SI 22.9). Tests to identify the mode of action indicated that the peptide P34 has no effect on MDBK cells, or cell receptors. In cytotoxic concentrations P34 obtained virucidal effect and 100% inhibition in viral reduction viral and penetration assays. Total inhibition was observed in the production of the BoHV-1 particles when cells were treated with P34 after 8 h of infection. There was a significant reduction (p <0.01) in BoHV-1 titer in the presence of P34 after 8 h of infection (PI 90%), reaching 99.9% PI after 18 h post-infection treatment. P34 inhibited BoHV-1 as extracellularly, inhibiting cell infection, as intracellularly, after infection, preventing its egress. Regarding molecules derived from thiazolidin-4-one the less toxic was AK16 (157 μg/mL) in the four cell lines (RK13, MDCK, CRFK and MDBK), and the most toxics were AK11, AK18 and AK20 (19 μg/mL). The PI of AK16 molecule was 96.9%, 90.1% and 90.1% against EAV, FCV and CPV-2, respectively. The compound AK17 showed PI of 90.1% against EAV, V20 of 78% against BVDV, V28 of 94.4% against EIV and 78% against BVDV and the V29 of 94.4% against CPV-2. V20 and V28 molecules were chosen to continue the study against BVDV. To V20 and V28 molecules, were determined SI of 16.8 and 14.73, respectively. In assays of inhibition of production of viral particles, adsorption, competing with cellular receptors, viral penetration and virucidal effect no significant differences were observed between titers the BVDV with and without treatment with the molecules. The association of V20 and V28 molecules increased the PI from 78 to 82%, and changes in the PI were not verified when the molecules were associated with antiviral interferon-α 2b and ribavirin. Through the determination of BVDV growth curve, was observed activity in the period between 1 to 5 h post-infection with BVDV, suggesting further action on viral entry, but probably, before the egress, in the period of RNA synthesis and viral enzymes. The results demonstrate that peptide P34 and compounds V20 and V28 derived from thiazolidin-4-one can be considered as promising antiviral against BoHV-1 and BVDV.
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Cell cycle inhibitors in control of chronic gammaherpesvirus infection /

Williams, Lisa Marie. January 2007 (has links)
Thesis (Ph.D. in Microbiology) -- University of Colorado Denver, 2007. / Typescript. Abstract available online via ProQuest Digital Dissertations. Includes bibliographical references (leaves 207-223).
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Prevalência das infecções causadas por herpesvírus humanos em portadores do HIV através de diagnóstico diferencial

Lopes, Amanda de Oliveira January 2016 (has links)
Submitted by Angelo Silva (asilva@icict.fiocruz.br) on 2016-07-13T18:45:42Z No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 71853.pdf: 2511930 bytes, checksum: c11c765cbeaf1ef6dbaa98b8cb800465 (MD5) / Approved for entry into archive by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2016-07-25T18:06:52Z (GMT) No. of bitstreams: 2 71853.pdf: 2511930 bytes, checksum: c11c765cbeaf1ef6dbaa98b8cb800465 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-25T18:06:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 71853.pdf: 2511930 bytes, checksum: c11c765cbeaf1ef6dbaa98b8cb800465 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Os herpesvírus humanos (HHV) (herpes simples 1 e 2, varicella-zoster, Epstein-Barr, citomegalovírus humano, herpesvírus humanos 6A, 6B, 7 e 8) estão associados à diversas doenças, porém são nos indivíduos portadores do vírus da imunodeficiência humana (HIV) que estes herpesvírus causam infecção grave e duradoura, podendo levá-los ao óbito. Contudo, no Brasil, pouco é conhecido sobre a verdadeira prevalência das infecções causadas por HHV nesses indivíduos devido a poucos estudos realizados no país. Portanto, este trabalho visou determinar a prevalência desta co-infecção HIV/Herpesvírus humanos através de um diagnóstico diferencial que detecta simultaneamente as nove espécieis de HHV (Pan-herpesvírus). Este método é baseado na amplificação, por reação em cadeia da polimerase (PCR) Nested, de uma região altamente conservada (DPOL) do genoma desses vírus e na identificação da espécie viral por sequenciamento do genoma viral. Além disso, este estudo visou avaliar possíveis fatores associados com a prevalência desta co-infecção, como sexo, idade e taxas de linfócitos T CD4+ (LT CD4+), e destinou-se comparar a prevalência das infecções causadas por HHV entre indivíduos HIV reagentes (grupo teste) e indivíduos não reagentes para este vírus (grupo controle). Para isso, 241 amostras de soro de indivíduos portadores do HIV coletadas durante os anos de 2012 (95 amostras), 2013 (89 amostras) e 2014 (57 amostras), e 94 amostras de soro de indivíduos HIV não reagentes coletadas durante o ano de 2013 foram testadas através de PCR Nested As amostras amplificadas foram sequenciadas para a identificação da espécie viral. Com isso, neste estudo foi encontrada prevalência da co-infecção HIV/HHV de 14,1% (34/241), sendo 13% (31/241), 0,8% (2/241) e 0,4% (1/241) relacionado às co-infecções HIV/HSV-1, HIV/HHV-6 e HIV/HHV-8, respectivamente. Também foi observada diminuição estatisticamente significativa (p-valor < 0,0001) da prevalência da co-infecção HIV/HHV durante os anos estudados. Já o grupo controle obteve menor prevalência da infecção causada por HHV (1,1%; 1/94) e foi referente à infecção causada por HHV-6. Ademais, foi verificada associação estatisticamente significativa da detecção da co-infecção HIV/HSV-1 com as taxas de LT CD4+, evidenciando que a taxa LT CD4+ <500 células/mm³ é um fator de risco para infecções causadas por HSV-1 em indivíduos HIV reagentes (p-valor < 0,0327/ p-valor <0,0186). A partir disto, foi verificado que o Pan-herpesvírus foi eficiente na detecção das co-infecções HIV/HSV-1, HIV/HHV-6 e HIV/HHV-8. Sendo assim, este trabalho contribuiu para a investigação da prevalência das infecções causadas por herpesvírus humanos em indivíduos HIV reagentes no Rio de Janeiro/Brasil / The human herpesviruses (HHV) (herpes simplex 1 and 2, varicella-zoster, Epstein-Barr virus, human cytomegalovirus, human herpesviruses 6A, 6B, 7 and 8) are associated with several diseases, but these herpesviruses cause serious and lasting infection in individuals infected by the human immunodeficiency virus (HIV) and can lead to death. However, in Brazil few is known about the true prevalence of human herpesviruses infection in these individuals because of few studies in the country. Therefore, this study aimed to determine the prevalence of co-infection HIV/human herpesviruses through a differential diagnosis that simultaneously detects nine HHV species (Pan-herpesviruses). This method is based on amplification a highly conserved region (DPOL) genome of these viruses by Nested polymerase chain reaction (PCR) and on viral species identification by sequencing of the viral genome. In addition, this study aimed to evaluate possible factors associated with the prevalence of co-infection, such as sex, age and T CD4+ lymphocytes rates (LT CD4+), and aimed to compare the prevalence of infections caused by HHV among individuals HIV reagents and no reagents for this virus (control group). For this, 241 serum samples from individuals with HIV collected during the years 2012 (95 samples), 2013 (89 samples) and 2014 (57 samples), and 94 serum samples from individuals without HIV collected during the year 2013 were tested by Nested PCR The amplified samples were sequenced for identification of the viral species. This study found prevalence of co-infection HIV/HHV 14,1% (34/241), in which 13% (31/241), 0,8% (2/241) and 0,4% (1/241) were related with the co-infections HIV/HSV-1, HIV/HHV-6 and HIV/HHV-8, respectively. A decrease statistically significant (p-value <0,0001) in the prevalence of co-infection HIV/HHV was observed during the years of study. The control group had lower prevalence of infection caused by HHV (1,1%; 1/94) and was related with the infection caused by HHV-6. In addition, there was a statistically significant association between detection of co-infection HIV/HSV-1 with LT CD4+ rates, showing that LT CD4+ rate <500 cells/mm³ is a risk factor for infections caused by HSV-1 in individuals HIV reagents (p-value <0,0327 / p-value <0,0186). From this, was verified that the Pan-herpesviruses was efficient in the detection of co-infections HIV/HSV-1, HIV/HHV-6 and HIV/HHV-8. Therefore, this study contributed to the investigation of the prevalence of infections caused by human herpesviruses in people living with HIV in Rio de Janeiro/Brazil

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