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Estudos histopatológicos e ciclos biológicos de Meloidogyne mayaguensis e M. javanica em tomateiros com gene Mi /

Westerich, Juliana Nogueira, 1983- January 2010 (has links)
Resumo: A espécie Meloidogyne mayaguensis vem causando grande preocupação por ser capaz de vencer a resistência de tomateiros portadores do gene Mi. O objetivo do trabalho foi estudar o ciclo biológico e a histopatologia de M. mayaguensis em tomateiros resistentes a meloidoginose e compará-los com os aspectos biológicos e histopatológicos de Meloidogyne javanica nas mesmas plantas. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, sendo para o estudo do ciclo biológico composto de vinte tratamentos (dois porta-enxertos de tomateiro, 'Magnet' e 'Helper M'; duas espécies de nematoides das galhas, M. mayaguensis e M. javanica; e cinco épocas de coleta, 3 DAI, 10 DAI, 17 DAI, 24 DAI e 31 DAI), com cinco repetições. Para o estudo da histopatologia, composto por 12 tratamentos (dois porta-enxertos de tomateiro, 'Magnet' e 'Helper M'; duas espécies de nematoides das galhas, M. mayaguensis e M. javanica; e três épocas de coleta, 10 DAI, 17 DAI e 24 DAI), com três repetições. As plantas foram inoculadas com 500 juvenis infectivos (J2) de M. mayaguensis ou M. javanica. As avaliações foram realizadas em cinco épocas de coleta. Em cada coleta, cinco plantas foram retiradas ao acaso e suas raízes separadas em duas porções. Uma das partes foi submetida à coloração com Fucsina Ácida e dissecada sob microscópio estereoscópico para a contagem dos diferentes estádios de desenvolvimento dos nematoides. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Na outra porção do sistema radicular, foram feitos cortes histológicos transversais com 8 μm de espessura, corados com Floxina B seguido de Azul de Toluidina 0,05%, para determinação dos números e áreas das células gigantes e dos sítios de alimentação presentes no cilindro vascular da raiz. Os dados obtidos foram submetidos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The species Meloidogyne mayaguensis is causing great concern for being able to overcome the resistance of tomatoes carrying the Mi gene. The objective of this work was to study the life cycle and the histopathological changes of M. mayaguensis in nematode-resistant tomatoes and compare them with biological and histopathological aspects of Meloidogyne javanica in the same plants. The experimental design was completely randomized, and to study the life cycle composed of twenty treatments (two varieties of tomato, 'Magnet' and 'Helper M', two species of nematodes, M. javanica and M. mayaguensis and five harvest dates, 3 DAI, 10 DAI 17 DAI 24 DAI and 31 DAI), with five replicates. To study the histopathology, composed of 12 treatments (two varieties of tomato, 'Magnet' and 'Helper M', two species of nematodes, M. javanica and M. mayaguensis and three harvest dates, 10 DAI, 17 DAI and 24 DAI), with three replications. The plants were inoculated with 500 infective juveniles (J2) of M. mayaguensis or M. javanica. The evaluations were conducted in five sampling times. At each harvest, five plants were taken at random and their roots separated into two parts. The first was stained with Acid Fuchsin and dissected under a stereomicroscope to count the different developmental stages of nematodes. The data were subjected to analysis of variance and means compared by Tukey test at 5% probability. In the another portion of the root system, 8 microns thick transversal sections were obtained, stained with Phloxine B followed by Toluidine Blue 0.05%, for determining the numbers and areas of giant cells and feeding sites in the vascular cylinder. The data were subjected to Multivariate Cluster Analysis and Principal Component Analysis. The results showed that the species M. mayaguensis was able to develop normally in the root-stocks, completing its cycle 24 days after inoculation (DAI)... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Silvia Renata Siciliano Wilcken / Coorientador: Roberto Antonio Rodella / Banca: Rosana Bessi / Banca: Francisco Andre Ossamu Tanaka / Mestre
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Aspectos histopatológicos da esofagite eosinofílica em crianças e adolescentes

Daud, Juliana Salomão 10 July 2017 (has links)
Introdução: Esofagite eosinofílica (EoE) é uma desordem clínico-patológica, caracterizada por sintomas de disfunção esofágica e alterações histopatológicas com inflamação composta principalmente por eosinófilos, sendo necessário, pelo último consenso, 15 ou mais eosinófilos/campo microscópico de grande aumento (cmga). Contudo, esse achado histopatológico geralmente está acompanhado de outras alterações morfológicas na mucosa esofágica que fazem parte do quadro de resposta inflamatória e que têm sido cada vez mais investigadas. Objetivos: Descrever achados histopatológicos em biópsias de pacientes pediátricos e adolescentes com EoE e compará-las aos de pacientes com quadro clínico de epigastralgia. Material e métodos: Foram analisadas biópsias esofágicas, sendo dezessete com diagnóstico de EoE e dezessete com epigastralgia. Analisaram-se aspectos histopatológicos e imuno-histoquímicos, como número máximo de eosinófilos, alongamento das papilas, hiperplasia de células da camada basal, espaços intercelulares, microabscessos e expressão de CD1a. Resultados: Entre os achados histopatológicos, alongamento das papilas e hiperplasia da camada basal foram observados em todos os participantes com EoE e em nenhuma amostra do grupo epigastralgia. Aumento do espaço intercelular foi encontrado em todos os pacientes com EoE e em 29,41% dos pacientes com epigastralgia. Conclusões: A quantidade de eosinófilos pode não mostrar por si só a complexidade da EoE. Estudos futuros devem ser realizados tentando definir se algum achado morfológico pode ajudar no diagnóstico diferencial entre EoE e eosinofilia esofágica responsiva ao inibidor de bomba de prótons e se poderiam ser utilizados para acompanhamento da eficácia do tratamento da EoE. / Introduction: Eosinophilic esophagitis (EoE) is a clinical-pathological disorder, characterized by symptoms related to esophageal dysfunction and histopathological alterations with inflammatory reactions primarily composed of eosinophils, being necessary, by the last consensus, 15 or more eosinófilos / high-power field (hpf). However, this histopathological finding is usually accompanied by other morphological changes in the esophageal mucosa that are part of an inflammatory response that has been increasingly investigated. Objective: To describe the histopathological findings from biopsies of pediatric and adolescent patients with EoE and to compare them with those from patients with clinical symptoms of epigastralgia. Material and methods: The results of esophageal cultures from biopsies were analyzed, seventeen with EoE diagnosis and seventeen with epigastralgia. The histopathological and immunohistochemical aspects, such as maximum number of eosinophils, papillary elongation, basal cell hyperplasia, dilatation of intercellular spaces, microabscesses, and CD1a expression were analyzed. Results: Among the histopathological findings, papillary elongation and basal cell layer hyperplasia were observed in all participants with EoE and in any of the sample of the epigastralgia group. Dilated intercellular space was found in all patients with EoE and in 29.41% of patients with epigastralgia. Conclusions: The amount of eosinophils may not by itself show the complexity of EoE. Future studies should be carried out in order to determine if any morphological findings may help in the differential diagnosis between EoE and proton-pump inhibitor-responsive esophageal eosinophilia, and whether they could be used to monitor the effectiveness of the EoE treatment. / Dissertação (Mestrado)
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Caracterização histológica e imuno-histoquímica da Influenza A Suina, Brasil, 2009-2010 / Histopathological and immunohistochemical characterization of swine influenza a in Brazil, 2009-2010

Watanabe, Tatiane Terumi Negrão January 2012 (has links)
A influenza suína (IS) é uma doença altamente contagiosa, de curso rápido e pronta recuperação, causada pelo vírus Influenza tipo A (VIS). Os principais sinais clínicos são tosse, febre, anorexia e baixo desenvolvimento. A doença está presente em outros países e, geralmente, está associada com outros agentes infecciosos. Porém, no Brasil, a sua primeira descrição ocorreu em 2011 e foi associada ao vírus H1N1 pandêmico (pH1N1). O principal objetivo deste estudo foi caracterizar as alterações histológicas mais importantes em casos de doença respiratória suína sugestiva de IS e estudar a associação dessas alterações com os resultados de imuno-histoquímica (IHQ) anti-vírus da influenza A (VIA), anti-circovírus suíno tipo 2 (PVC2) e anti-vírus da síndrome reprodutiva e respiratória suína (PRRSV). Para tanto, foram estudadas 60 amostras de pulmões suínos selecionadas dos materiais do arquivo do Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS), de casos de doença respiratória remetidos no período de 2009 a 2010 e que apresentavam alterações histopatológicas compatíveis com pneumonia viral causada pelo VIS. Trinta e uma amostras (52%) foram provenientes do estado do Rio Grande do Sul, 14 (23%) do Paraná, 11 (18%) de Santa Catarina e quatro (7%) do Mato Grosso do Sul. A IHQ para IA confirmou a presença do agente viral em 45% das amostras analisadas. Os achados histológicos mais significativos associados à IHQ positiva para IA foram bronquiolite necrótica, atelectasia, broncopneumonia purulenta e hiperemia. Por outro lado, as alterações histológicas dos pulmões estudados mais significativamente associadas à IHQ negativa para IA foram hiperplasia dos pneumócitos tipo II, estruturas alveolares e bronquiolares similares a pólipos, hiperplasia de tecido linfoide associado a brônquios (BALT) e pleurite, que são alterações associadas a processos crônicos. Somente dois casos apresentaram marcação positiva na IHQ para PCV2 e nenhum pulmão foi positivo para PRRSV. Esses resultados sugerem que as lesões histológicas encontradas no presente estudo foram compatíveis com as causadas pelo VIS. Os casos negativos de IHQ para IA (55%) podem ser explicados pela baixa frequência do antígeno viral nos tecidos estudados. Como o curso da doença é muito rápido, o teste de IHQ é mais indicado para diagnóstico no início da infecção. Este estudo evidenciou novas alterações em amostras de pulmões de suínos com problemas respiratórios enviadas para o SPV UFRGS a partir de 2009, com ênfase para bronquiolite necrótica, e reforça a importância do estudo histopatológico dos casos de campo para auxiliar na monitoria da sanidade dos rebanhos. / Swine influenza is caused by swine influenza type A virus (SIV). It is a highly contagious disease with a rapid course and recovery. The main clinical signs are cough, fever, anorexia and poor performance. Usually, it is associated with other infectious agents in many countries; however, it has not been described yet in Brazil. The first report of pandemic H1N1 influenza A virus in Brazilian swine herd occurred in 2011. The main aim of this study was to characterize histological features in association with immunohistochemical (IHC) results for influenza A (IA), porcine circovirus type 2 (PCV2) and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) from lung samples from 60 pigs with lesions suggestive of viral pneumonia and collected during the period 2009-2010 and diagnosed at the Setor de Patologia Veterinária of Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS), Brazil. All the pigs in this study had clinical respiratory disease. Sample distribution was 31 (52%) from Rio Grande do Sul, 14 (23%) Paraná, 11 (18%) from Santa Catarina State and four (7%) from Mato Grosso do Sul State. Positive anti-IA IHC was observed in 45% of the cases and was associated with necrotizing bronchiolitis, atelectasia, purulent bronchopneumonia and hyperemia. Moreover, type II pneumocyte hyperplasia, alveolar and bronchiole polyp-like structures, BALT (bronchus-associated lymphoid tissue) hyperplasia and pleuritis were the significant features of negative samples by anti-IA IHC, which were associated with chronic lesions. Only two cases were positive to PCV2 and none to PRRSV, supports the hypothesis that SIV was the viral agent infecting swine’s lungs. Negative IHC to IA (55%) cases could be explained due to the absence of viral antigens associated with the rapid progress of SI; hence, IHC should be requested in the beginning of the infection. This work has shown how important a careful histological evaluation should be done in order to give the diagnosis. Since 2009, a new histological feature of swine pneumonia from animals with respiratory clinical sign has been observed at samples submitted to SPV-UFRGS. In addition, these results described here proved the importance of histological evaluation in swine herd health management.
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A relevância do marcador imunohistoquímico CD30 e dos eosinófilos no diagnóstico diferencial das doenças inflamatórias intestinais / The relevance of immunohistochemical marker cd30 and eosinophils in differential diagnosis of inflammatory bowel disease

Flores, Cristina January 2013 (has links)
As doenças inflamatórias intestinais (DII) são doenças crônicas incapacitantes com significativa morbidade. A Doença de Crohn (DC) e a Retocolite Ulcerativa (RCU) são as maiores representantes. O diagnóstico é baseado na suspeita clínica e complementado por achados endoscópicos, histopatológicos e radiológicos. Como não existe um teste padrão, o diagnóstico destas doenças permanece sendo um problema para gastroenterologistas e patologistas. O desenvolvimento de terapias mais específicas torna cada vez mais importante o diagnóstico preciso para uma escolha terapêutica individualizada. A imunidade inata está ativada de forma semelhante nas duas DII, porém na RCU os linfócitos CD4 TH2 são os principais envolvidos. Estes linfócitos expressam o receptor CD30 na sua membrana plasmática e produzem citocinas que ativam os eosinófilos. Levando em consideração o conhecimento fisiopatológico atual, este estudo tem como principal objetivo avaliar a relevância da expressão do marcador CD30 por imuno-histoquímica, a contagem de eosinófilos e as características histopatológicas no diagnóstico diferencial das DII. Foram avaliados 185 pacientes de um ambulatório especializado em um Hospital Universitário (105 com DC 80 com RCU). O diagnóstico foi estabelecido pelos critérios de Lennard-Jones, revisados por um gastroenterologista especializado e corroborado por cinco anos de seguimento. As biópsias foram realizadas por diversos profissionais na rotina assistencial, porém todas foram analisadas por um patologista com experiência em tubo digestivo. Nenhum paciente estava usando tratamento no momento da coleta das biópsias. As variáveis histopatológicas que demonstraram poder estatístico para auxiliar no diagnóstico diferencial foram a extensão do processo inflamatório para a submucosa, a presença de granuloma, erosões aftóides e variabilidade de acometimento entre os fragmentos. Avaliando estas características em conjunto, foi possível obter uma acurácia de 69.1% para o diagnóstico diferencial entre DC e RCU. Estudando o segmento mais alterado encontrou-se uma mediana de eosinófilos de 42 (25,5 – 63,5), nos pacientes com DC e 107 (67 – 123) nos pacientes com RCU (p< 0.001). Assumindo como ponto de corte um número V a 70 eosinófilos, a sensibilidade foi de 78,3% e a especificidade de 71% favorecendo o diagnóstico de RCU, a área sob a curva ROC foi de 0,767 (IC 95%: 0,696–0,838). A imuno-histoquímica com CD30 demonstrou uma mediana de 3 células CD30+ (2-6) na DC e 33 (24-52) na RCU, demonstrando uma diferença estatística significativa para o diagnóstico diferencial entre as duas doenças (p<0,001). Além disso, nos pacientes com RCU as células CD30+ estavam distribuídas mais frequentemente em agrupamentos nos centros dos folículos linfoides. O ponto de corte determinado pela curva ROC foi de 15 células marcadas (S = 97,5%, E = 94,3%, RV + = 17,1; RV = 0.03, área sob a curva: 0.967, IC 95%: 0.941 - 0.993). Todos estes parâmetros estudados tiveram capacidade discriminatória para o diagnóstico de DC e RCU. Designando um valor para cada variável, baseado no poder estatístico de cada uma e de forma a obter uma soma de 10 pontos no total, foi construído um escore histopatológico para o diagnóstico da DC. Considerando-se a soma das variáveis V 5 obteve-se uma especificidade de 100% e uma sensibilidade de 86,8%. Considerando 4 como ponto de corte do escore, a sensibilidade aumenta para 95,3%, e a especificidade reduz de 100% para 94,9%. Concluindo, o uso rotineiro da avaliação das características histopatológicas descritas em associação com a contagem de eosinófilos e células CD30+ proporciona uma alta acurácia no diagnóstico diferencial entre DC e RCU. Todos os parâmetros estudados são de fácil avaliação tanto por patologistas especialistas quanto generalistas. Sugere-se a realização de um estudo prospectivo para validação deste escore. / Inflammatory bowel diseases (IBD) are chronic disabling diseases with significant morbidity, being Crohn’s disease (DC) and Ulcerative colitis (UC) their greatest representatives. Diagnosis is based on clinical suspicious and complemented by endoscopic, histopathological and radiological findings. However, there is not a gold standard test, so it remained a problem for gastroenterologists and pathologists. The development of more targeted therapies makes it even more important to establish an accurate diagnosis for a better individualized therapeutic approach. Innate immune response is activated in both IBD, but in UC the lymphocytes CD4 TH2-like are mainly engaged, this kind of lymphocytes has CD30 expressed in their plasma membrane and produces cytokines that activate eosinophils. Considering the current pathophysiological knowledge, this study aimed to evaluate the relevance of CD30 expression by immunohistochemical, eosinophil count and histopathological features in differential diagnosis of IBD. A total of 185 patients were evaluated (105 CD/ 80 UC). Patients were followed at a specialized clinic of a university hospital, diagnosed according to Lennard- Jones criteria reviewed by a gastroenterologist expert and corroborated by five years of follow up. Biopsy samples were taken by different professionals in routine care, but analyzed by an experienced gastrointestinal pathologist. None of the patients were using treatment at the time of biopsy. Of all the pathological variables assessed, those that had statistical capacity to assist in the differential diagnosis were extension of the inflammatory process to submucosa, granuloma, aphthous erosion and variability of involvement between fragments. Evaluating these variables together, an accuracy of 69.1% in the differential diagnosis between CD and UC was found. Assessing the most altered sample the median of eosinophils was 42 (25.5 – 63.5) in CD patients and 107 (67 – 123) in UC patients (p< 0.001). Assuming a cutoff V 70 eosinophils, the sensitivity was 78,3% and specificity of 71% favoring the UC diagnosis, the area under the ROC curve was 0.767 (CI 95%: 0,696–0,838). Immunohistochemical CD30+ cells presented with a median of 3 cells (2-6) in CD and 33 cells (24-52) in UC, demonstrating a highly significant statistical difference between the two diseases (p<0.001). Besides, CD30+ cells were distributed most clustered in the center of lymphoid follicles in UC patients. The cutoff determined by ROC curve was 15 (S = 97.5%, E = 94.3%, LR + = 17.1;-RV = 0.03, AUC: 0.967, 95% CI: 0.941 - 0.993). All these parameters studied had discriminatory capacity for diagnosis of CD and UC. A value was assigned to each variable based on the statistical power of each, making a total sum of 10 points to build a histopathological score for the CD diagnosis. Setting the cutoff as V 5 we found a specificity of 100% and a sensitivity of 86.8%. When we consider as cutoff as V 4 points the score sensitivity comes to 95.3%, and reduces the specificity of 100% to 94.9%. In conclusion, the use of routine assessment of the histopathological features described previously in association with the eosinophils and CD30+ cells count provides a high accuracy for CD and UC differential diagnosis. All parameters assessed here are easily performed by pathologists specialists and generalists. The next step seems to be the validation of this score in a prospective study.
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Avaliação da sensibilidade de métodos diagnósticos e da carga fúngica durante o tratamento com itraconazol na esporotricose felina

Silva, Jéssica Nunes January 2016 (has links)
A esporotricose é uma micose subcutânea causada por espécies do complexo Sporothrix schenckii que acomete seres humanos e animais, principalmente os gatos. Desde 1998 o Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas/Fiocruz no Rio de Janeiro vem acompanhando uma epidemia dessa doença envolvendo seres humanos, cães e gatos, onde as principais formas de transmissão são arranhadura, mordedura e/ou contato com o exsudato das lesões cutâneas de gatos doentes. O diagnóstico definitivo da esporotricose felina é obtido a partir do isolamento do Sporothrix sp. em meios de cultura, entretanto, o resultado desse exame pode demorar até quatro semanas, o que em algumas situações pode retardar o início do tratamento antifúngico. Os exames citopatológico, histológico e imuno-histoquímico são opções viáveis e mais rápidas para o diagnóstico dessa micose em gatos, principalmente em situações quando não é possível realizar o isolamento fúngico. O diagnóstico precoce da esporotricose felina é importante na implementação rápida do tratamento antifúngico, melhorando o prognóstico na maioria dos casos. O objetivo deste estudo foi avaliar e comparar as diferentes técnicas utilizadas no diagnóstico da esporotricose felina antes e durante o tratamento antifúngico. Na primeira etapa do estudo foram comparados os exames citopatológico (coloração pelo método panótico rápido), histológico (impregnação pela prata de Grocott) e imuno-histoquímico de 184 gatos no diagnóstico da esporotricose sem tratamento antifúngico prévio utilizando o cultivo fúngico como teste padrão de referência. Estruturas leveduriformes foram observadas em 160 (87,0%) casos no exame citopatológico, 168 (91,3%) na histopatologia e 163 (88,3%) na imunohistoquímica. A associação das três técnicas elevou a sensibilidade do diagnóstico para 98,3%, o que enfatiza a necessidade de sua implementação como ferramentas de rotina, sobretudo quando a cultura fúngica não está disponível. Na etapa seguinte, a carga parasitária e o isolamento de Sporothrix sp. das lesões cutâneas de 74 gatos foram avaliados mensalmente antes e durante o tratamento com itraconazol por um período de 12 semanas. A mediana da carga fúngica observada antes do início do tratamento antifúngico foi maior (pMW = 0,013) nos gatos nos quais foi observada a persistência da lesão (Med=98,6) em relação aqueles em que houve cicatrização (Med=15,0). A redução da carga fúngica ocorreu em todas as lesões estudadas, assim como a redução da positividade da cultura fúngica e do exame citopatológico. Estes resultados sugerem uma redução no potencial zoonótico dos gatos, enfatizando a importância do tratamento precoce como medida de controle. Adicionalmente, o isolamento do fungo e a presença de estruturas leveduriformes nas lesões de gatos com esporotricose podem ser fatores preditores da falência terapêutica, indicando a necessidade da implementação de alternativas terapêuticas. / Sporotrichosis is subcutaneous mycose caused by species of fungus from the Sporothrix schenckii complex and affects humans and animals, especially cats. Since 1998, the Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas/Fiocruz in Rio de Janeiro has been describing in Rio de Janeiro an epidemic of sporotrichosis, involving humans, cats and dogs, with most of cases related to transmission through scratches, bites or contact with lesions from infected cats. The definitive diagnosis is based on the isolation of the fungus in culture; however, the results may take up to four weeks and postpone treatment outset. The cytopathology, histopathology and immunohistochemistry should be considered as rapid and accessible alternatives for the diagnosis in cats, especially when the fungal culture is not available. The early diagnosis of feline sporotrichosis is desirable for the prompt beginning of the antifungal treatment, improving the prognosis in most of the cases. The aim of this study was to evaluate and compare different techniques for the diagnosis of feline sporotrichosis before and during the treatment with itraconazol. In the first part of the study, cytopathological (Quick Panoptic), histopathological (Grocott silver stain) and immunohistochemical examinations were compared regarding the diagnosis of sporotrichosis in 184 cats without previous treatment, by using fungal culture as a reference standard. The yeast-like cells were observed in 160 (87.0%) cases by cytopathological examination, in 168 (91.3%) by histopathology and in 163 (88.3%) by immunohistochemistry. The combination of the three methods led to the diagnosis of 98.3% of cases, pointing to the need of their implementation as regular tools, notably when fungal culture is not available. In the second part of the study, the fungal burden and the isolation of Sporothrix sp. in cutaneous lesions of 74 cats were monthly evaluated before and during the treatment with itraconazole for twelve weeks. The median of the fungal load detected before the outse of the antifungal treatment was higher (pMW=0.013) in cats in which there was a persistence of the cutaneous lesion (Med=98.6) in comparison to those in which healing of the lesion was observed (Med=15.0). The decrease of the fungal burden occurred in all the lesions in this study as well as the reduction of the positivity of the fungal culture and the cytopathological examination. These results suggest a reduction in the zoonotic potential of cats and emphasize the importance of the early treatment as a control measure. In addition, the isolation of the fungus and the presence of yeast-like cells in lesions of cats with sporotrichosis during the treatment can be a predictor of treatment failure and should alert for the need of alternative therapeutic regimens.
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Eficácia da ultrassonografia endorretal tridimensional em relação ao exame anatomopatológico nas neoplasias de reto extraperitoneal / Efficacy of three-dimensional endorectal ultrasound in comparison to histopathology for evaluation of extra peritoneal rectal neoplasms

Rodrigo Ambar Pinto 26 November 2015 (has links)
INTRODUÇÃO: O câncer do reto médio e distal ainda é assunto bastante controverso, especialmente no que se refere ao estadiamento locorregional e opções terapêuticas. Busca-se um método sensível e específico para a avaliação da profundidade de invasão da parede retal e o envolvimento linfonodal. O adequado estadiamento da neoplasia do reto extraperitoneal é de suma importância no manejo terapêutico e prognóstico do paciente. Diversos métodos têm sido descritos para a avaliação da disseminação locorregional das neoplasias do reto, que variam desde o toque retal até a ressonância magnética da pelve e a ultrassonografia endorretal bi e tridimensional. OBJETIVO: Correlacionar os achados da profundidade de invasão tumoral na parede retal (T), comprometimento linfonodal (N), extensão e porcentagem de acometimento da lesão à ultrassonografia endorretal tridimensional (USER-3D) com o exame anatomopatológico (AP) de pacientes portadores de neoplasia de reto extraperitoneal submetidos a procedimento cirúrgico após o diagnóstico e estadiamento clínico prévio. MÉTODO: Estudo prospectivo foi realizado com pacientes portadores de neoplasia de reto médio e distal seguidos no Instituto Central (IC) e no Instituto do Câncer do Estado de São Paulo (ICESP), do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (HCFMUSP) que foram submetidos a USER-3D pré-operatório. Os parâmetros analisados por meio do USER-3D foram comparados aos achados da anatomia patológica do espécime cirúrgico obtido após o procedimento. Os exames de USER-3D foram realizados pelo mesmo médico, sendo cego dos outros métodos diagnósticos e dos achados da patologia, a qual também não tinha os resultados do estadiamento clínico pré-operatório. Todos os pacientes foram submetidos a enema evacuatório no dia anterior e na manhã do exame. Foram avaliados a sensibilidade, especificidade, valores preditivos positivo e negativo, área sobre a curva e o índice Kappa do USER-3D em comparação ao anatomopatológico, considerado exame padrão ouro. O coeficiente de correlação intraclasse (CCI) foi utilizado para analisar a extensão e porcentagem de acometimento da lesão na parede retal. RESULTADOS: No período de 3 anos, 44 pacientes foram estudados, 27 mulheres, com idade média de 63,5 anos. Houve 12 lesões benignas e 32 malignas de reto, sendo 30 submetidas à ressecção local e 14 à radical. O USER-3D determinou a diferenciação da profundidade de invasão tumoral na submucosa com sensibilidade de 77,3% (CI95% - 54,6%-92,2%), especificidade de 86,4% (CI95% - 65.1%-97.1%), valor preditivo positivo de 85% (CI95% - 62,1%-96,8%), valor preditivo negativo de 79,2% (CI95% - 57,8%-92,9%) e área sobre a curva de 0,82% (CI95% - 0,7%-0,96%). O índice Kappa ponderado para profundidade de invasão da parede retal (T) foi de 0,672 (IC95%: 0,493; 0,850), considerado grau de concordância substancial. Para o envolvimento linfonodal (N) não houve concordância adequada entre o USER-3D e o anatomopatológico (k=-0,164) nos 14 casos analisados. A CCI calculada para extensão da lesão foi moderada (0,45) para a extensão em centímetros, mas adequada (0,66) para porcentagem de envolvimento da circunferência. O gráfico de Bland-Altman mostrou que lesões com extensão de até 5 cm e 50% de acometimento têm melhor correlação com o espécime cirúrgico. CONCLUSÕES: USER-3D foi eficaz para a determinação da invasão da parede retal, sendo seguro na determinação da extensão de lesões até 5 cm e porcentagem de acometimento da circunferência até 50%. O método mostrou baixa eficácia na avaliação linfonodal, em subgrupo limitado de pacientes / INTRODUCTION: Loco-regional staging and treatment of extra peritoneal rectal neoplasms is still a controversial subject. There is no perfect method, substantially sensitive and specific for staging rectal wall invasion and lymph node involvement. Adequate oncologic staging of rectal neoplasias has major importance in both, treatment and prognostic evaluation. Therefore, the use of supplementary diagnostic methods such as endorectal ultrasound (ERUS) and magnetic resonance imaging (MRI) of the pelvis can promote an accurate assessment of tumor invasion in the rectal wall and lymph node involvement. OBJECTIVE: To correlate the findings of three-dimensional (3D) ERUS with pathology specimen of extra peritoneal rectal neoplasia referred directly to surgery after diagnosis, in regards to depth of rectal wall invasion (T), lymph node involvement, percentage of circumferential rectal wall invasion and tumor extension. METHODS: A prospective study was performed in patients with middle and distal rectal tumors followed at University of São Paulo, School of Medicine and Cancer Institute of State of São Paulo (ICESP), who underwent 3D-ERUS for preoperative evaluation. The parameters analyzed with 3D-ERUS were compared with pathology findings of the surgical specimen obtained after the procedure. A single doctor who performed the exams reported the 3D-ERUS studies and was blind of other methods as well as the pathologic findings. All patients underwent retrograde bowel enema the day before and in the morning of the test. The authors evaluated sensitivity, specificity, positive and negative predictive values, area under curve and kappa index of the 3D-ERUS as compared to pathologic findings, considered the gold standard. For extension and percentage of tectal wall involvement intraclass correlation index was applied. RESULTS: At 3-years period, 44 patients were studied, 27 females, with a mean age of 63.5 years, who had 12 rectal adenomas and 32 adenocarcinomas and underwent local resection (30) or radical resection (14). Value for 3D-ERUS to determine depth of rectal wall invasion sensitivity was 77.3% (CI95% - 54.6%-92.2%), specificity was 86.4% (CI95% - 65.1%- 97.1%), positive predictive value was 85% (CI95% - 62.1%- 96.8%), negative predictive value was 79.2% (CI95% - 57.8%-92.9%) and area under curve was 0,82% (CI95% - 0.7%-0.96%). The weighted kappa index for the depth of invasion in the rectal wall (T) evaluation was 0.67 (IC95%: 0.49; 0.85), considered substantial agreement. For N involvement there was any agreement between 3D-ERUS and histopathology, with K=-0.164. Intraclass correlation was calculated for lesion extension and was moderate (0.45) for extension in centimeters and adequate (0.66) for percentage of circumference involvement. A Bland-Altman graph was performed and showed that tumor extensions until 5 cm and 50% of wall involvement have a good correlation to specimen size. CONCLUSION: 3D-ERUS was effective for determining rectal wall invasion and evaluation of extension of lesions until 5 cm and 50% of rectal wall involvement. However, this method showed a lack of efficacy for evaluation of lymph node involvement for early rectal tumors in this limited subset of patients
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A relevância do marcador imunohistoquímico CD30 e dos eosinófilos no diagnóstico diferencial das doenças inflamatórias intestinais / The relevance of immunohistochemical marker cd30 and eosinophils in differential diagnosis of inflammatory bowel disease

Flores, Cristina January 2013 (has links)
As doenças inflamatórias intestinais (DII) são doenças crônicas incapacitantes com significativa morbidade. A Doença de Crohn (DC) e a Retocolite Ulcerativa (RCU) são as maiores representantes. O diagnóstico é baseado na suspeita clínica e complementado por achados endoscópicos, histopatológicos e radiológicos. Como não existe um teste padrão, o diagnóstico destas doenças permanece sendo um problema para gastroenterologistas e patologistas. O desenvolvimento de terapias mais específicas torna cada vez mais importante o diagnóstico preciso para uma escolha terapêutica individualizada. A imunidade inata está ativada de forma semelhante nas duas DII, porém na RCU os linfócitos CD4 TH2 são os principais envolvidos. Estes linfócitos expressam o receptor CD30 na sua membrana plasmática e produzem citocinas que ativam os eosinófilos. Levando em consideração o conhecimento fisiopatológico atual, este estudo tem como principal objetivo avaliar a relevância da expressão do marcador CD30 por imuno-histoquímica, a contagem de eosinófilos e as características histopatológicas no diagnóstico diferencial das DII. Foram avaliados 185 pacientes de um ambulatório especializado em um Hospital Universitário (105 com DC 80 com RCU). O diagnóstico foi estabelecido pelos critérios de Lennard-Jones, revisados por um gastroenterologista especializado e corroborado por cinco anos de seguimento. As biópsias foram realizadas por diversos profissionais na rotina assistencial, porém todas foram analisadas por um patologista com experiência em tubo digestivo. Nenhum paciente estava usando tratamento no momento da coleta das biópsias. As variáveis histopatológicas que demonstraram poder estatístico para auxiliar no diagnóstico diferencial foram a extensão do processo inflamatório para a submucosa, a presença de granuloma, erosões aftóides e variabilidade de acometimento entre os fragmentos. Avaliando estas características em conjunto, foi possível obter uma acurácia de 69.1% para o diagnóstico diferencial entre DC e RCU. Estudando o segmento mais alterado encontrou-se uma mediana de eosinófilos de 42 (25,5 – 63,5), nos pacientes com DC e 107 (67 – 123) nos pacientes com RCU (p< 0.001). Assumindo como ponto de corte um número V a 70 eosinófilos, a sensibilidade foi de 78,3% e a especificidade de 71% favorecendo o diagnóstico de RCU, a área sob a curva ROC foi de 0,767 (IC 95%: 0,696–0,838). A imuno-histoquímica com CD30 demonstrou uma mediana de 3 células CD30+ (2-6) na DC e 33 (24-52) na RCU, demonstrando uma diferença estatística significativa para o diagnóstico diferencial entre as duas doenças (p<0,001). Além disso, nos pacientes com RCU as células CD30+ estavam distribuídas mais frequentemente em agrupamentos nos centros dos folículos linfoides. O ponto de corte determinado pela curva ROC foi de 15 células marcadas (S = 97,5%, E = 94,3%, RV + = 17,1; RV = 0.03, área sob a curva: 0.967, IC 95%: 0.941 - 0.993). Todos estes parâmetros estudados tiveram capacidade discriminatória para o diagnóstico de DC e RCU. Designando um valor para cada variável, baseado no poder estatístico de cada uma e de forma a obter uma soma de 10 pontos no total, foi construído um escore histopatológico para o diagnóstico da DC. Considerando-se a soma das variáveis V 5 obteve-se uma especificidade de 100% e uma sensibilidade de 86,8%. Considerando 4 como ponto de corte do escore, a sensibilidade aumenta para 95,3%, e a especificidade reduz de 100% para 94,9%. Concluindo, o uso rotineiro da avaliação das características histopatológicas descritas em associação com a contagem de eosinófilos e células CD30+ proporciona uma alta acurácia no diagnóstico diferencial entre DC e RCU. Todos os parâmetros estudados são de fácil avaliação tanto por patologistas especialistas quanto generalistas. Sugere-se a realização de um estudo prospectivo para validação deste escore. / Inflammatory bowel diseases (IBD) are chronic disabling diseases with significant morbidity, being Crohn’s disease (DC) and Ulcerative colitis (UC) their greatest representatives. Diagnosis is based on clinical suspicious and complemented by endoscopic, histopathological and radiological findings. However, there is not a gold standard test, so it remained a problem for gastroenterologists and pathologists. The development of more targeted therapies makes it even more important to establish an accurate diagnosis for a better individualized therapeutic approach. Innate immune response is activated in both IBD, but in UC the lymphocytes CD4 TH2-like are mainly engaged, this kind of lymphocytes has CD30 expressed in their plasma membrane and produces cytokines that activate eosinophils. Considering the current pathophysiological knowledge, this study aimed to evaluate the relevance of CD30 expression by immunohistochemical, eosinophil count and histopathological features in differential diagnosis of IBD. A total of 185 patients were evaluated (105 CD/ 80 UC). Patients were followed at a specialized clinic of a university hospital, diagnosed according to Lennard- Jones criteria reviewed by a gastroenterologist expert and corroborated by five years of follow up. Biopsy samples were taken by different professionals in routine care, but analyzed by an experienced gastrointestinal pathologist. None of the patients were using treatment at the time of biopsy. Of all the pathological variables assessed, those that had statistical capacity to assist in the differential diagnosis were extension of the inflammatory process to submucosa, granuloma, aphthous erosion and variability of involvement between fragments. Evaluating these variables together, an accuracy of 69.1% in the differential diagnosis between CD and UC was found. Assessing the most altered sample the median of eosinophils was 42 (25.5 – 63.5) in CD patients and 107 (67 – 123) in UC patients (p< 0.001). Assuming a cutoff V 70 eosinophils, the sensitivity was 78,3% and specificity of 71% favoring the UC diagnosis, the area under the ROC curve was 0.767 (CI 95%: 0,696–0,838). Immunohistochemical CD30+ cells presented with a median of 3 cells (2-6) in CD and 33 cells (24-52) in UC, demonstrating a highly significant statistical difference between the two diseases (p<0.001). Besides, CD30+ cells were distributed most clustered in the center of lymphoid follicles in UC patients. The cutoff determined by ROC curve was 15 (S = 97.5%, E = 94.3%, LR + = 17.1;-RV = 0.03, AUC: 0.967, 95% CI: 0.941 - 0.993). All these parameters studied had discriminatory capacity for diagnosis of CD and UC. A value was assigned to each variable based on the statistical power of each, making a total sum of 10 points to build a histopathological score for the CD diagnosis. Setting the cutoff as V 5 we found a specificity of 100% and a sensitivity of 86.8%. When we consider as cutoff as V 4 points the score sensitivity comes to 95.3%, and reduces the specificity of 100% to 94.9%. In conclusion, the use of routine assessment of the histopathological features described previously in association with the eosinophils and CD30+ cells count provides a high accuracy for CD and UC differential diagnosis. All parameters assessed here are easily performed by pathologists specialists and generalists. The next step seems to be the validation of this score in a prospective study.
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Caracterização histológica e imuno-histoquímica da Influenza A Suina, Brasil, 2009-2010 / Histopathological and immunohistochemical characterization of swine influenza a in Brazil, 2009-2010

Watanabe, Tatiane Terumi Negrão January 2012 (has links)
A influenza suína (IS) é uma doença altamente contagiosa, de curso rápido e pronta recuperação, causada pelo vírus Influenza tipo A (VIS). Os principais sinais clínicos são tosse, febre, anorexia e baixo desenvolvimento. A doença está presente em outros países e, geralmente, está associada com outros agentes infecciosos. Porém, no Brasil, a sua primeira descrição ocorreu em 2011 e foi associada ao vírus H1N1 pandêmico (pH1N1). O principal objetivo deste estudo foi caracterizar as alterações histológicas mais importantes em casos de doença respiratória suína sugestiva de IS e estudar a associação dessas alterações com os resultados de imuno-histoquímica (IHQ) anti-vírus da influenza A (VIA), anti-circovírus suíno tipo 2 (PVC2) e anti-vírus da síndrome reprodutiva e respiratória suína (PRRSV). Para tanto, foram estudadas 60 amostras de pulmões suínos selecionadas dos materiais do arquivo do Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS), de casos de doença respiratória remetidos no período de 2009 a 2010 e que apresentavam alterações histopatológicas compatíveis com pneumonia viral causada pelo VIS. Trinta e uma amostras (52%) foram provenientes do estado do Rio Grande do Sul, 14 (23%) do Paraná, 11 (18%) de Santa Catarina e quatro (7%) do Mato Grosso do Sul. A IHQ para IA confirmou a presença do agente viral em 45% das amostras analisadas. Os achados histológicos mais significativos associados à IHQ positiva para IA foram bronquiolite necrótica, atelectasia, broncopneumonia purulenta e hiperemia. Por outro lado, as alterações histológicas dos pulmões estudados mais significativamente associadas à IHQ negativa para IA foram hiperplasia dos pneumócitos tipo II, estruturas alveolares e bronquiolares similares a pólipos, hiperplasia de tecido linfoide associado a brônquios (BALT) e pleurite, que são alterações associadas a processos crônicos. Somente dois casos apresentaram marcação positiva na IHQ para PCV2 e nenhum pulmão foi positivo para PRRSV. Esses resultados sugerem que as lesões histológicas encontradas no presente estudo foram compatíveis com as causadas pelo VIS. Os casos negativos de IHQ para IA (55%) podem ser explicados pela baixa frequência do antígeno viral nos tecidos estudados. Como o curso da doença é muito rápido, o teste de IHQ é mais indicado para diagnóstico no início da infecção. Este estudo evidenciou novas alterações em amostras de pulmões de suínos com problemas respiratórios enviadas para o SPV UFRGS a partir de 2009, com ênfase para bronquiolite necrótica, e reforça a importância do estudo histopatológico dos casos de campo para auxiliar na monitoria da sanidade dos rebanhos. / Swine influenza is caused by swine influenza type A virus (SIV). It is a highly contagious disease with a rapid course and recovery. The main clinical signs are cough, fever, anorexia and poor performance. Usually, it is associated with other infectious agents in many countries; however, it has not been described yet in Brazil. The first report of pandemic H1N1 influenza A virus in Brazilian swine herd occurred in 2011. The main aim of this study was to characterize histological features in association with immunohistochemical (IHC) results for influenza A (IA), porcine circovirus type 2 (PCV2) and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) from lung samples from 60 pigs with lesions suggestive of viral pneumonia and collected during the period 2009-2010 and diagnosed at the Setor de Patologia Veterinária of Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS), Brazil. All the pigs in this study had clinical respiratory disease. Sample distribution was 31 (52%) from Rio Grande do Sul, 14 (23%) Paraná, 11 (18%) from Santa Catarina State and four (7%) from Mato Grosso do Sul State. Positive anti-IA IHC was observed in 45% of the cases and was associated with necrotizing bronchiolitis, atelectasia, purulent bronchopneumonia and hyperemia. Moreover, type II pneumocyte hyperplasia, alveolar and bronchiole polyp-like structures, BALT (bronchus-associated lymphoid tissue) hyperplasia and pleuritis were the significant features of negative samples by anti-IA IHC, which were associated with chronic lesions. Only two cases were positive to PCV2 and none to PRRSV, supports the hypothesis that SIV was the viral agent infecting swine’s lungs. Negative IHC to IA (55%) cases could be explained due to the absence of viral antigens associated with the rapid progress of SI; hence, IHC should be requested in the beginning of the infection. This work has shown how important a careful histological evaluation should be done in order to give the diagnosis. Since 2009, a new histological feature of swine pneumonia from animals with respiratory clinical sign has been observed at samples submitted to SPV-UFRGS. In addition, these results described here proved the importance of histological evaluation in swine herd health management.
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Avaliação da retinopatia diabética em ratos induzidos pela estreptozotocina após tratamento com melatonina

MELO, Ismaela Maria Ferreira de 25 February 2016 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-07-27T14:16:50Z No. of bitstreams: 1 Ismaela Maria Ferreira de Melo.pdf: 3186927 bytes, checksum: 77c803b8ff84ef399aa780d93c4df4bf (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-27T14:16:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ismaela Maria Ferreira de Melo.pdf: 3186927 bytes, checksum: 77c803b8ff84ef399aa780d93c4df4bf (MD5) Previous issue date: 2016-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Diabetic retinopathy is a metabolic disease with cardiovascular involvement with high risk of vision loss. It causes structural and functional damage to the retina increases the expression of inflammatory cytokines (IL-6 and TNF-α) and induces pathological intraocular neovascularization. The aim of this study was to evaluate the effect of melatonin on histopathology, oxidative stress (retina and pancreas) and electrical retinal activity and if she would be able to mediate the expression of VEGF, IL-6 and TNF-α, in addition to index apoptotic. We used 50 rats divided into the following groups: GC: no induction mice diabetes by streptozotocin; GD: rats with diabetes induced by streptozotocin treated and placebo; GDM: rats by streptozotocin induced diabetes mellitus and after confirmation treated with melatonin at dosage of 10 mg / kg body weight for 20 days; GDMS: mice induced by streptozotocine diabetes and simultaneously treated with melatonin at dosage of 10 mg / kg for 20 days; GDI: rats by streptozotocin induced diabetes mellitus and after confirmation treated with insulin for 20 days. Diabetes was induced by intraperitoneal administration of streptozotocin (60mg / kg), melatonin was administered subcutaneously at night, and insulin (5U / day) by the same route. For apoptosis was performed TUNEL assay and immunohistochemistry targets were analyzed for IL-6, TNF-α and VEGF. The pancreatic oxidative stress was assessed by measurement of lipid peroxidation and reduced glutathione levels while stress in the retina was analyzed for the production of superoxide anions. The results showed that melatonin attenuated histopathological changes; decreased inflammation and regulated the mechanisms that caused oxidative stress and electroretinography interfere with the amplitude of the wave of the joint examination between the GC and GD groups. It is concluded that this hormone may be an important contributing factor in the treatment of diabetic retinopathy due to its antioxidant property and modulating inflammatory processes, softening the changes of this pathology, especially when administered concurrently with diabetes induction it was observed a significant improvement retinal preservation in increased serum insulin and decreased hyperglycemia. / A retinopatia diabética é uma doença metabólica com comprometimento microvascular com alto risco de perda da visão. Ela ocasiona danos estruturais e funcionais na retina, aumenta a expressão de citocinas inflamatórias (IL-6 e TNF-α) e induz a neovascularização intraocular patológica. O objetivo desse trabalho foi avaliar a ação da melatonina sobre a histopatologia, estresse oxidativo (retina e pâncreas) e atividade elétrica da retina bem como se ela seria capaz de mediar à expressão de VEGF, IL-6 e TNF-α, além do índice apoptótico. Utilizou-se 50 ratos divididos nos seguintes grupos: GC: ratos sem indução ao diabetes pela estreptozotocina; GD: ratos com diabetes induzidos pela estreptozotocina e tratados com placebo; GDM: ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e após confirmação do diabetes tratados com melatonina na dosagem de 10 mg/kg de peso corporal durante 20 dias; GDMS: ratos induzidos ao diabetes pela estreptozoticina e simultaneamente tratados com melatonina na dosagem de 10 mg/kg durante 20 dias; GDI: ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e após confirmação do diabetes tratados com insulina durante 20 dias. O diabetes foi induzido pela administração intraperitoneal de estreptozotocina (60mg/kg), a melatonina foi administrada à noite por via subcutânea, e a insulina (5U/dia) pela mesma via. Para apoptose foi realizado o método de TUNEL e para a análise imunohistoquímica foram analisados os alvos para IL-6, TNF-α e VEGF. O estresse oxidativo pancreático foi avaliado através da mensuração da peroxidação lipídica e níveis de glutationa reduzida, enquanto o estresse na retina foi analisado pela produção de ânions superóxidos. Os resultados mostraram que a melatonina atenuou as alterações histopatológicas; diminuiu o processo inflamatório e regulou os mecanismos que ocasionaram estresse oxidativo e no eletrorretinograma interferiu na amplitude da onda a do exame da mista entre os grupos GC e GD. Concluímos assim, que esse hormônio pode ser um importante fator coadjuvante no tratamento da retinopatia diabética devido a sua propriedade antioxidante e moduladora de processos inflamatórios, amenizando as alterações decorrentes desta patologia, principalmente quando administrado simultaneamente à indução do diabetes onde foi observado uma melhora expressiva na preservação da retina no aumento da insulina plasmática e na diminuição da hiperglicemia.
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Uso da Thuya occidentalis no tratamento da papilomatose bovina: aspectos clínicos, histopatológicos e moleculares

MONTEIRO, Vanda Lucia da Cunha 08 February 2007 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-08T15:55:50Z No. of bitstreams: 1 Vanda Lucia da Cunha Monteiro.pdf: 2562841 bytes, checksum: a00a188e7c5dc2c8b041adfbeca80f48 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-08T15:55:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vanda Lucia da Cunha Monteiro.pdf: 2562841 bytes, checksum: a00a188e7c5dc2c8b041adfbeca80f48 (MD5) Previous issue date: 2007-02-08 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The bovine viral papillomatosis is an infect-contagious disease with high prevalence in dairy bovines, causing considerable economical losses in this sector. Aiming to contribute with therapeutic research for this pathology, this work had as objective evaluating the efficacy of Thuya occidentalis in the treatment of cutaneous papillomatosis in dairy bovines by the clinical, histopathological and molecular aspects. This research was divided in 4 experiments. Were used in the experiments females of Holstein Friesian crossbred, nuliparous, primiparous and multiparous, exhibiting different types of cutaneous papilloma (typical, atypical, engastated atypical, filamentous and mixing) and of degrees defined for this study: light (25% of the body affected), moderate (with 50% of the body affected) and intensive (with more than 50% of affected body). The animals were kept in a semi intensive system of raising and were randomly distributed in groups with tem animals each. In the experiments I and II the animals were divided into 4 groups, were the groups 1 and 2 received solution of sodium chloride at 0.9% and cereal alcohol, respectively, being these considered controls, and the groups 3 and 4 received the phytotherapic medicines Thuya occidentalis (Simões®) mothre tincture (T.M.) at 30% and Thuya occidentalis mother tincture at 30% with propolis, respectively. The animals received, daily by oral via, 10mL of the products during 63 days. For histopathological evaluation, 50% of the animals were submitted to cutaneous biopsy of the lesions on the zero moment (M0) and the final moment (FM). In the present experiments, the partial and total regression were not observed in any group, once during the clinical and histopathological evaluations, in all moments and groups, the papillomas did not presented macroscopic alterations of remission, color and consistence. In the histopathological analysis it was observed epithelial and conjunctive hyperplasic alterations, with extensive vegetative growth of the epithelium with wide and deep epidermal crest, results that characterize development phase with viral replication and synthesis, being a characteristic finding of papillomatosis. It may be concluded that cutaneous papillomatosis in dairy bovines shows predilection for specific areas. The papillomas were most present on lateral abdomen, dewlap and snout, showing mixing lesions followed by basal and that the use of tinctures at 30% of Thuya occidentalis (Simões®) and Thuya occidentalis with propolis, on the experimental conditions used in this studies, do not cause remission of papillomas in dairy bovines. In experiment III there was used the homeopathic medicine Thuya occidentallis CH6. The animals were distributed at random in 3 groups. The groups 1 and 2 received NaCl 0.9% solution and alcohol cereal, respectively, being these considered controls, and the 3rd group received Thuya occidentalis CH6 in the treatment formula. For the three groups the administration was daily, being 10mL by oral via during 63 days. For histopathologycal evaluation, the animals were submitted to cutaneous biopsy of the papilloma lesions in the zero moment (0M) and final moment (FM). According to the achieved data, the partial or total remission occurred only in group 3 (Thuya occidentalis CH6), where were observed warts fall in 20% of the animals of this group, besides partial regression of the remaining animals, with macroscopic alterations of color and size, findings confirmed by the histopathological exam. In the histopathological analysis there was observed reduction of the thorny layer in all animals of the treated group (G3), showing reduction of epithelial layers with conjunctive tissue of dermal papilla showing active fibroblast and capillaries and rare lymphocytic inflammatory cells. Concluding that Thuya occidentallis CH6 contributes to the treatment of pedunculated papiloma in bovine, being indicated in the presence of this infection. Studies with Thuya occidentalis CH6 must have continuity with bovine carrying basal papillomas in a period of treatment superior to 63 days. The experiment IV had as objective to identify the Bthe Polimerase Chain Reaction (PCR). Using the general (FAP59/64 e MY 11/09) and the specific primers for BPV-2 there was obtained an assertiveness of 33 (82.5%) of the 40 analyzed samples. According to the obtained results it is concluded that the presence of BPV in Pernambuco State-Brazil is in agreement with the world findings, enhancing the importance of the diagnose and control of the infection and, consequently, adoption of an specific therapy. These results emphasize the therapeutic properties of the homeopathic medicine Thuya occidentallis CH6, concluding that its use contributes to the treatment of cutaneous papillomatosis in bovine, emphasizing the necessity of studies for period superior to 63 days with the phytotherapic Thuya occidentalis in bovine carrying cutaneous papilllomatosis, and the serum dosage of AST, GGT, urea and creatinine showed that the plant used in this study, during 63 days, was not able to cause hepatic and renal alterations in bovine with cutaneous papillomatosis. / A papilomatose viral bovina é uma enfermidade infecto-contagiosa que apresenta alta prevalência em bovinos leiteiros, causando consideráveis perdas econômicas para este setor. Com o objetivo de contribuir com a pesquisa terapêutica para esta virose, este trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia de Thuya occidentalis, no tratamento da papilomatose cutânea em bovinos leiteiros, por meio dos aspectos clínicos, histopatológicos e moleculares. Esta pesquisa foi dividida em 4 experimentos. Foram incluídas nos experimentos fêmeas mestiças de holandês nulíparas, primíparas e multíparas, apresentando diferentes tipos de papilomas cutâneos (típicos, atípicos, atípicos engastados, filamentosos e mistos) e de graus assim definidos para este estudo: leve (25% do corpo acometido), moderado (50% do corpo acometido) e intenso (mais de 50% do corpo acometido). Os animais mantiveram-se em sistema semi-intensivo de criação e foram distribuídos aleatoriamente em grupos, com dez animais cada. Nos experimentos I e II, os animais foram divididos em 4 grupos, onde os grupos 1 e 2 receberam solução de cloreto de sódio a 0.9% e álcool de cereal, respectivamente, sendo estes considerados controles, e os grupos 3 e 4 receberam os medicamentos fitoterápicos Thuya occidentalis (Simões®) tintura mãe (T.M.) a 30% e Thuya occidentalis tintura mãe a 30% com própolis, respectivamente. Os animais receberam, diariamente por via oral, 10mL dos produtos durante 63 dias. Para avaliação histopatológica, 50% dos animais foram submetidos à biópsia cutânea das lesões no momento zero (M0) e no momento final (MF). Nos presentes experimentos, as regressões parcial e total não foram observadas em nenhum grupo, uma vez que durante as avaliações clínicas e histopatológicas, em todos os momentos e grupos, os papilomas não apresentaram alterações macroscópicas de remissão, coloração e consistência. Nas análises histopatológicas verificaram-se alterações hiperplásicas epiteliais e conjuntivas, com extenso crescimento vegetativo do epitélio com cristas epidérmicas extensas e profundas, estes resultados caracterizam fase de desenvolvimento com replicação e síntese viral, sendo um achado característico de papilomatose. Pode-se concluir que a papilomatose cutânea em bovinos leiteiros apresenta predileção por áreas específicas. Os papilomas estavam mais presentes no abdômen lateral, barbela e focinho,apresentando lesões mistas seguidas de basais e que o uso das tinturas a 30% de Thuya occidentalis (Simões®) e Thuya occidentalis com própolis, nas condições experimentais utilizadas nestes estudos, não provocam remissão de papilomas em bovinos leiteiros. No experimento III utilizou-se o medicamento homeopático Thuya occidentallis CH6. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em 3 grupos. Os grupos 1 e 2 receberam solução de NaCl 0.9% e álcool de cereal, respectivamente, sendo estes considerados controles, e o grupo 3 recebeu a Thuya occidentalis CH6 na forma de tratamento. Para os três grupos a administração foi diária, sendo 10 mL por via oral, durante 63 dias. Para avaliação histopatológica, os animais foram submetidos à biópsia cutânea dos papilomas, no momento zero (M0) e no momento final (MF). De acordo com os dados obtidos, as regressões parcial e total ocorreram apenas no grupo 3 (Thuya occidentalis CH6), observando-se queda das verrugas em 20% dos animais deste grupo, além de regressão parcial em 80% nos animais restantes, com alterações macroscópicas de coloração e tamanho, achado este confirmado pelo exame histopatológico. Na análise histológica observou-se redução da camada espinhosa em todos os animais do grupo tratado (G3), evidenciando-se redução nas camadas epiteliais, com tecido conjuntivo da papila dérmica apresentado fibroblastos ativos e capilares e raras células inflamatórias linfocitárias. Concluindo-se que a Thuya occidentalis CH6 contribuiu no tratamento de papilomas pedunculados em bovinos, podendo ser indicada na presença desta infecção. Estudos com a Thuya occidentalis CH6 devem ter continuidade com bovinos portadores de papilomas basais, com período de tratamento superior a 63 dias. O experimento IV teve como objetivo identificar o BPV-2 em amostras de verrugas cutâneas de bovinos, utilizando a Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR). Utilizando-se os primers gerais (FAP59/64 e MY 11/09) e específico para BPV-2 obteve-se uma positividade de 33 (82,5%) das 40 amostras analisadas. De acordo com os resultados obtidos, conclui-se que a presença da BPV no Estado de Pernambuco está em concordância com os achados mundiais, destacando-se a importância do diagnóstico no controle da infecção e, conseqüentemente, adoção de uma terapia específica. Estes resultados enfatizam as propriedades terapêuticas do medicamento homeopático Thuya occidentallis CH6, concluindo-se que o seu uso contribuiu no tratamento da papilomatose cutânea em bovinos, ressaltando a necessidade de estudos por períodos superiores a 63 dias com a Thuya occidentalis fitoterápica em bovinos portadores de papilomatose cutânea, e as dosagens séricas de AST, GGT, uréia e creatinina revelaram que a planta utilizada neste estudo, durante 63 dias, não foi capaz de causar alterações hepáticas e renais em bovinos com papilomatose cutânea.

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