Background: Black South African women are known to have a high usage rate of injectable contraceptives. Breast cancer is the second leading cancer after malignant cervical neoplasms in black South African women. There is evidence that sex hormones are associated with an increased risk of developing breast cancer. In the Western Cape, investigators suggested that injectable contraceptives, more specifically DMPA, may increase breast cancer risk. In another study conducted in the same province, a weak association between breast cancer and women taking combined oestrogen/progesterone oral contraceptives was found, though no risk associated with injectable progestogen contraceptives (DMPA) was confirmed. Study Objective: This study aimed to determine whether there is an association between hormonal contraceptive use and an increased risk of cancer of the breast. Methods: Data was obtained from an ongoing case control study set up by MRC/Wits/NHLS Cancer Epidemiology Research Group (CERG) in 1995 to investigate risk factors associated with cancer among the black population in Johannesburg. Data was processed using STATA, version8 and analysed using univariate, bivariate and multivariate unmatched logistic regression models. Results: There was evidence that an overall use of oral contraceptives increases the risk of breast cancer; cases (n= 221), controls :( n= 153), OR=2.01 (95% CI:1.45, 2.80), p<0.0001. There was evidence of an association between use of injectable contraception and the risk of breast cancer; cases (n=244), controls (n=202), OR=1.51(CI: 1.14, 2.01),p=0.004 Surprisingly, no other use characteristic of either hormonal contraceptive method was statistically significantly associated with the risk of breast cancer in our dataset. The combined use of both oral and injectable contraception was associated with an increased risk of breast cancer, OR=1.68(1.21, 2.33), p =0.002. There was a strong effect modification (interaction) between oral contraceptive use and injectable progesterone associated with the risk of breast cancer, (p=0.008). Conclusion: After adjusting for all potential risk and confounding factors, as collected in the dataset, there was evidence of an association between combined oral contraceptive use and breast cancer. An association between cancer of the breast and overall use of injectable progesterone use was also established. There was evidence of association between the use of both hormonal contraceptive methods and an increased risk of breast cancer. However, whether these findings reflect the reality in terms of causal relationship or are the result of bias must be ascertained.

Introdução: Isoflavonóides são compostos encontrados em vários vegetais e apresentam diversos efeitos farmacológicos. Dentre estes compostos, encontramos os fitoestrógenos, assim chamados por possuírem ações que mimetizam o efeito do estrógeno natural sobre as células. A soja (Glycine max), um dos vegetais ricos nos fitoestrógenos daidzeína e genisteína, tem sido indicada pela literatura como terapia alternativa para a menopausa pela atividade estrogênica que apresenta, visto que a terapia estroprogestiva para tratar os sintomas desta fase aponta um aumento da incidência de câncer de mama. Objetivo: Avaliar a promoção de apoptose e/ou necrose por um Extrato de Soja (Glycine max) Biotransformado pelo fungo Aspergillus awamori (ESBF) em células de linhagem de adenocarcinoma mamário estrógeno-dependentes (MCF-7) e estrógeno-independentes (SK-BR-3). Materiais e métodos: o ESBF foi produzido na Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP/USP), com concentração determinada de daidzeína (D) e genisteína (G) por CLAE e avaliado em dois modelos de células de adenocarcinoma mamário: estrógeno-dependentes (MCF-7) e estrógeno-independentes (SK-BR-3). Nestes modelos experimentais, foram avaliados também, o Extrato de Soja (ES) e os padrões comerciais de daidzeína (D) e genisteína (G) isoladas ou em combinação (D+G). Neste estudo avaliamos estes compostos perante os parâmetros: a) citotoxicidade pelo método de MTT; b) necrose e apoptose celular pelo ensaio de marcação por iodeto de propídio (IP) e anexina-V e IP; c) a atividade da caspase-3 por western blotting. Resultados: o ESBF nas linhagem MCF-7 e SK-BR-3 apresentou citotoxicidade dose-dependente a partir de 2,184 mg/mL; o ES apresentou aumento na viabilidade celular em todas as concentrações estudadas; os padrões D e G nas concentrações 1,3 e 1,5 µM respectivamente aumentou a viabilidade celular apenas para a linhagem MCF-7; resultado este não observado nas células SK-BR-3. Quanto aos ensaios de necrose e apoptose, encontramos que as duas linhagens celulares apresentaram marcação pelo IP a partir da concentração de 1,638 mg/mL do ESBF, enquanto que o ES e D+G não apresentaram marcação nas concentrações testadas. Somente para a linhagem MCF-7 encontramos no teste de anexina-V + IP apoptose precoce a partir da concentração 0,819 mg/mL e apoptose tardia/necrose a partir da concentração de 2,717 mg/mL frente ao ESBF, enquanto que frente ao ES e aos padrões D+G este resultado não foi observado. Utilizando apenas a linhagem MCF-7, com relação a detecção da caspase-3 íntegra, não foi possível visualizar sua presença a partir da concentração de 1,638 mg/mL do ESBF. Conclusão: Com este estudo verificamos que o ESBF favorece a indução a morte celular das linhagens MCF-7 e SK-BR-3, não acontecendo o mesmo com o ES e os padrões D+G. Nossos achados sugerem que componentes do fungo são os responsáveis por este efeito biológico, e não os metabólitos da soja, visto que os padrões de daidzeína e genisteína, bem como o ES, não apresentaram os resultados de morte celular evidenciados aqui. / Introduction: Isoflavones are compounds found in various vegetables and have different pharmacological effects. Among these compounds there are phytoestrogens, so called because they have actions that mimic the effects of natural estrogen on cells. Soybean (Glycine max), a plant rich in phytoestrogens genistein and daidzein, have been cited in the literature as an alternative therapy for menopause because this plant has estrogen activity. Since oestroprogestative therapy to treat the symptoms of this phase, has many collateral effects, like increased incidence of breast cancer. Objective: To evaluate the promotion of apoptosis and/or necrosis caused by an extract of soybean (Glycine max) biotransformed by the fungus Aspergillus awamori (ESBF) by cell lineage of estrogen-dependent (MCF-7) and estrogen-independent (SK- BR-3) breast adenocarcinoma. Materials and methods: ESBF was produced at the Faculty of Pharmaceutical Sciences of Ribeirão Preto (FCFRP / USP), with known concentration of daidzein (D) and genistein (G) by HPLC and subjected to two models of breast adenocarcinoma cells: estrogen- dependent (MCF-7) and estrogen-independent (SK-BR-3). In these experimental models were also evaluated, Soy Extract (ES) and the commercial standards of daidzein (D) and genistein (G) alone or in combination (D+G). In this study we evaluated all these compounds the following parameters: a) cytotoxicity by MTT method; b) necrosis and apoptosis assay by dialing propidium iodide (PI) and annexin-V + PI; c) the activity of caspase-3 by western blotting. Results: ESBF in cell line MCF-7 and SK-BR-3 showed dose-dependent cytotoxicity starting from 2.184 mg/mL, the ES showed an increase in cell viability at all concentrations studed, D and G standards at concentrations of 1, 3 and 1.5 mM respectively increased cell viability only in line MCF-7, this result not observed in SK-BR-3. For the tests of necrosis and apoptosis, we found that that two cell lines presented labeling IP from the concentration of 1.638 mg/mL of ESBF, while the ES and D + G showed no labeling at all concentrations tested. Only line MCF-7 in the test of annexin-V + PI early apoptosis from the concentration 0.819 mg / mL and late apoptosis or necrosis from the concentration of 2.717 mg / mL against the ESBF, while facing the ES and D+G standards this result was not observed. Using only the cell line MCF-7 in assay to detection of caspase-3 intact, we could not see his presence from the concentration of 1.638 mg/mL ESBF. Conclusion: This study verified that the ESBF favors the induction of cell death in cell line MCF-7 and SK-BR-3, the same not happening with the ES and D+G standards. Our findings suggest that components of the fungus are responsible for this biological effect and not the soy metabolites, since the standards of daidzein and genistein, as well as the ES, the results showed no cell death.

Entre as mulheres brasileiras, a principal causa de mortalidade são as doenças cardiovasculares, seguida em freqüência pelo câncer, sendo o mais comum o de mama. É bastante conhecida a associação de câncer com eventos tromboembólicos, mas pouco estabelecida sua relação com os demais eventos cardiovasculares. Para estudar estes eventos desde suas alterações primordiais, como a lesão e disfunção endotelial e a formação da placa aterosclerótica, vários métodos têm sido utilizados. É clara a associação entre câncer, em especial o de mama, com lesão endotelial e risco cardiovascular. A terapia endócrina para tumores de mama com receptores hormonais positivos é amplamente usada tanto de forma paliativa no câncer de mama metastático, quanto na adjuvância, para tumores iniciais. O tamoxifeno (TMX) tem sido usado como droga de escolha com este propósito há cerca de 30 anos com boa eficácia e perfil razoavelmente seguro. O desenvolvimento do os inibidores de aromatase (IAs) de terceira geração promoveu estudos comparativos que têm demonstrado superioridade dos IAs em relação ao TMX na adjuvância, favorecendo seu uso tanto em substituição, quanto de forma seqüencial. Em geral, os IAs são tão bem tolerados quanto o TMX, preocupando ainda questões como aumento de risco cardiovascular, de osteoporose e alterações no perfil lipídico. Neste cenário temos alguns estudos demonstrando um menor número de eventos cardiovasculares em mulheres previamente tratadas de câncer de mama, o que indica um possível efeito protetor do tratamento com tamoxifeno. O efeito cardiovascular dos inibidores da aromatase permanece controverso. O objetivo deste estudo foi comparar alguns marcadores de risco cardiovascular entre mulheres sobreviventes do câncer de mama após tratamento com tamoxifeno, letrozol ou sem tratamento endócrino. Para isso, avaliamos o total de 103 sobreviventes de câncer de mama: 35 em uso de tamoxifeno (TMXg), 34 em uso de letrozol (LTZg) e 34 sem tratamento endócrino (STEg). Os parâmetros estudados foram: a dilatação da artéria braquial mediada por fluxo (DMF), a espessura da íntima-média (EIM) e o índice de rigidez (?) da artéria carótida, colesterol total, HDL e triglicérides. Observamos que os três grupos apresentaram valores semelhantes de HDL e EIM. No TMXg foi encontrado o menor valor de colesterol total (219,29±36,31mg/dL vs. 250,59±38,37mg/dL vs. 245,09±35,35mg/dL; TMXg vs. LTZg vs. STEg respectivamente; p<0,01 -ANOVA), o maior valor de triglicérides (139,34±41,82mg/dL vs. 111,35±28,22mg/dL vs. 122,09±33,42mg/dL; p<0,01), o maior valor de DMF (6,32±2,33% vs. 4,10±2,06% vs. 4,66±2,52%; p<0,01) e o valor mais baixo do índice de rigidez (?) (5,08±1,68 vs. 6,28±1,75 vs. 5,99±1,86; p=0,01). O LTZg não diferiu significantemente do STEg em nenhum dos parâmetros estudados. Nós não observamos nenhuma diferença entre o LTZg e o STEg em nenhum dos parâmetros de risco cardiovascular avaliados. Desta forma, a diferença observada nos valores dos lipídios séricos, no índice de rigidez (?) e na DMF entre as mulheres em tratamento com tamoxifeno e letrozol pode ser mais bem atribuída a um efeito benéfico do tamoxifeno do que a um efeito prejudicial do letrozol. / The main cause of death among Brazilian women is cardiovascular disease followed by cancer; breast cancer is the most incident in this population. The relationship between cancer and thrombosis is well known, although its association with other cardiovascular events is poorly understood. In order to study these events since its primordial findings, as endothelial injury and dysfunction and the evolving atherosclerotic plaque, many methods are currently being used. There is a clear association between cancer, meanly breast cancer with endothelial injury and cardiovascular risk. Endocrine therapy for breast cancer with positive receptors has been widely applied either for advanced metastatic cancer as for initial tumors. For more than 30 years tamoxifen (TMX) has been the first choice for this purpose with an acceptable safety profile. The emerging third generation aromatase inhibitors (IA) promoted comparative trials which have proved the IA to be superior to TMX in the adjuvant setting - what supported its use both in substitution and in a sequential manner. Broadly, the IA are as well tolerated as TMX, still concerning issues as cardiovascular risk and osteoporosis increase and lipid profile changes. In this scenario, studies have shown that women previously treated for breast cancer present fewer cardiovascular events, indicating a possible protective effect of tamoxifen treatment. The effects of the aromatase inhibitors on cardiovascular protection remain controversial. The aim of this study was to compare some cardiovascular risk markers among breast cancer survivors following treatment with tamoxifen, letrozole or no endocrine treatment. So a total of 103 breast cancer survivors: 35 using tamoxifen (TMXg), 34 using letrozole (LTZg) and 34 using no endocrine treatment (NETg) were evaluated. Ultrasonographic evaluation of brachial artery flow-mediated dilation (FMD), carotid intima-media thickness (IMT) and stiffness index (?); and blood total cholesterol, HDL and triglycerides were assessed. All three groups presented similar values of HDL and IMT. TMXg showed the lowest total cholesterol (219.29±36.31mg/dL vs. 250.59±38.37mg/dL vs. 245.09±35.35mg/dL; TMXg vs. LTZg vs. NETg respectively; p<0.01 - ANOVA), the highest triglycerides (139.34±41.82mg/dL vs. 111.35±28.22mg/dL vs. 122.0933±42mg/dL; p<0.01), the highest FMD (6.32±2.33% vs. 4.10±2.06% vs. 4.66±2.52%; p<0.01) and the lowest stiffness index (?) (5.08±1.68 vs. 6.28±1.75 vs. 5.99±1.86; p=0.01). LTZg did not differ significantly from NETg on any evaluated parameter. We did not observe any difference of LTZg on the evaluated cardiovascular risk parameters compared to NETg. As such, the observed difference on lipid values, stiffness index (?) and FMD between women receiving tamoxifen and letrozole might be best attributed to the beneficial effect of tamoxifen than to a detrimental effect of letrozole.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:55:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AUGUSTO RIBEIRO GABRIEL.pdf: 384497 bytes, checksum: 946deef6eea89b916759b0ac33c03a8a (MD5) Previous issue date: 2008-10-21 / This paper is based on the environmental factors influence on disease development, especially cancer and, more specifically, prostate cancer and anemia and the prevalence of anemia in patients suffering from prostate cancer was studied, relating the presence of anemia with the applied treatment to control the disease, the presence of metastasis and the time since diagnosis. The present research is a retrospective and descriptive analytical study of a transverse section of all patients from HEMOLABOR clinical oncology outpatient service, situated in Goiânia, Goiás, from August/2007 to April/2008, in which data related to time, disease-stage and treatment at the time of evaluation was analyzed. The results were submitted to statistical treatment utilizing Chi-square Test, Risk Evaluation and Multivariate Analysis, and also basic statistics. The prevalence of anemia occurred in 50% of the patients and it was correlated to the presence of bone metastasis, the disease in activity and chemotherapy usage, in addition to a weak correlation with orchiectomy and no relation to time since diagnosis. The data collected partially validate the data from the literature, with a smaller than expected prevalence, which is probably related to the kind of hormonal treatment. / Esta dissertação tem como base a influência dos fatores ambientais no desenvolvimento das doenças, principalmente do câncer de modo geral e mais especificamente do câncer de próstata e da anemia, e estuda a prevalência da anemia nos pacientes portadores do câncer de próstata, correlacionando a presença da anemia com o tratamento utilizado para o controle da doença, a presença de metástases e com o tempo de diagnóstico. Trata-se de um estudo analítico descritivo e retrospectivo, feito em corte transversal de todos os pacientes atendidos no ambulatório de oncologia clínica do HEMOLABOR, em Goiânia, Goiás, no período de agosto/2007 a abril/2008, que analisou dados referentes ao tempo, estágio da doença bem como o tratamento no momento da avaliação. Os resultados foram submetidos a tratamento estatístico utilizando-se das técnicas de Qui quadrado, Cálculo de Risco e Análise Multivariada, além do uso da estatística básica. Observou-se uma prevalência de anemia de 50% nestes pacientes e esta apresentou correlação com a presença de metástases, a doença em atividade e o uso de quimioterapia, além de uma fraca correlação com a orquiectomia e não se relacionou com o tempo do diagnóstico. Esses dados corroboram em parte com os dados da literatura, estando a prevalência menor que a esperada, provavelmente devido ao tipo de tratamento hormonioterápico utilizado.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:55:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ary Henrique de Souza Junior.pdf: 593464 bytes, checksum: 97cf99e0707363cc47b40b7b24df7ef3 (MD5) Previous issue date: 2005-04-14 / This work proposes an informational system for a clinical laboratory to control the post analytical phase of the exams. The system can automatically liberate the results of clinical exams. To assess the system we developed a prototype able to liberate FSH and Estradiol hormones based on rules that confront FSH and Estradiol results. The prototype was able to autonomously liberate 67,10% of the FSH results and 98,38% of the Estradiol results when analyzed independently and 82,74% of the results when applying the confrontations rules. The rules are based on elements of fuzzy logic and can provide a reduction in therapeutic length and costs, reduction of the diagnosis time and increase the safety of the procedures involved. / Foi proposto um sistema de informatização de laboratório clínico com aplicação na fase pós-analítica, com a capacidade de liberar clínico&#8211;laboratorialmente resultados de exames. Para demonstrar a funcionalidade do projeto foi desenvolvido um protótipo para liberar resultado de exames de FSH e Estradiol. Em teste, o protótipo foi capaz de liberar 67,10% dos resultados de FSH e 98,38% de E2, atendendo ao conjunto de regras estabelecidas. Quando utilizados os preceitos de confrontação de resultados de FSH contra os de E2, baseados no comportamento fisiológico dos hormônios, a liberação ocorre em 82,74% dos resultados. Os 17,25% dos resultados restantes são colocados em arquivo próprio para a liberação supervisionada. O uso de regras baseadas em elementos de lógica difusa na liberação de resultados de exames laboratoriais pode oferecer, dentre outros ganhos, diminuição de prazo terapêutico e custos, aumento da rapidez do diagnóstico e da segurança de todos os envolvidos nas ações de saúde.

A tibolona é um fármaco cuja estrutura química derivada da 19-nortestosterona e devido as suas atividades estrogênicas, androgênicas e progestogênicas é utilizada para tratamento de sintomas da menopausa relacionados a deficiência estrogência em mulheres pós-menopausadas e também com indicação na prevenção da osteoporose. Não há monografia oficial para quantificação de tibolona na forma farmacêutica cápsulas nem teste de dissolução. Sendo assim, o objetivo desse estudo foi desenvolver, validar e aplicar um método rápido, seletivo, preciso e indicador de estabilidade por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) para a determinação de tibolona em cápsulas e um teste de dissolução para quantificação in vitro de sua liberação no meio de dissolução. O método indicador de estabilidade foi desenvolvido baseado no ensaio de degradação forçada, submetendo o fármaco a degradação ácida, alcalina, neutra, oxidativa, térmica e luz UV. A separação foi realizada em uma coluna de fase reversa C18 (250 mm x 4,0 mm; 5 µm), com acetonitrila:água (60:40) como fase móvel, vazão de 1 mL/min e detecção UV em 205 nm. O método foi validado e todos os parâmetros ficaram dentro dos limites aceitáveis, segundo o ICH e ANVISA. O método proposto foi aplicado e apresentou resultados satisfatórios na análise quantitativa de tibolona em cápsulas. Também foi desenvolvido um método de dissolução para cápsulas de tibolona, onde o melhor perfil de dissolução obtido, foi alcançado com 0,5% de lauril sulfato de sódio (LSS) em água como meio de dissolução, aparato pá a 100 rpm e tempo de coleta de 45 minutos, na qual a percentagem de tibolona liberada foi maior 80% (Q = 75). A quantificação foi realizada por CLAE a 205 nm. Todos os parâmetros de validação foram considerados satisfatórios. Portanto, os métodos desenvolvidos são adequados para análise de controle de qualidade, estudos de estabilidade, ensaios de dissolução e perfil de dissolução de cápsulas contendo este fármaco. / Tibolone is a drug with chemical structure derived from 19-nortestosterone and estrogenic, androgenic and progestogenic activities. Due to these characteristics, it has been used to treat menopausal symptoms related to estrogen deficiency in postmenopausal women and it has also been indicated for osteoporosis prevention. There is no official monograph for quantification and dissolution tests of tibolone capsules. Hence, the objective of this study was to develop, validate and apply a quick, selective, precise and stability indicating method by high performance liquid chromatography (HPLC) for determination of tibolone in capsules and an in vitro dissolution test for quantification of their release into the dissolution media. Three different commercial formulations were evaluated. The stability indicating assay was developed based on the drug stress study carried out under conditions like acid, alkaline, neutral, oxidative, thermal and UV light degradation. The separation was performed on a C18 reversed-phase column (250 mm x 4.0 mm; 5 µm particle size) with acetonitrile: water (60:40 v/v) as mobile phase at a flow rate of 1 mL/min with UV detection at 205 nm. The method validation presented acceptable limits for all parameters according to ICH and ANVISA. The proposed method was applied in tibolone capsules and showed satisfactory results in their quantitative analysis. In the tibolone capsules dissolution test the best profile was reached with 0,5 % sodium lauryl sulphate (SLS) in water as the dissolution media, paddle apparatus at 100 rpm and collection time at 45 minutes, where the percentage tibolone released was higher than 80% (Q = 75). The quantification was performed by HPLC at 205 nm. All validation parameters were considered satisfactory. Therefore, the developed methods are appropriate for quality control analysis, stability studies, dissolution tests and dissolution profile of capsules containing this drug. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Este projeto teve por objetivo investigar se existem diferenças nos julgamentos de atratividade de faces masculinizadas e feminilizadas entre mulheres durante a etapa folicular tardia e na etapa luteal (fases do ciclo menstrual) e se estas se correlacionam às alterações dos níveis hormonais. Foram incluídas 30 mulheres voluntárias, na faixa etária de 18 a 42 anos com ciclos menstruais regulares, com duração entre 24 e 33 dias, sem uso de anticoncepcional hormonal (AH). Foram utilizados para a avaliação da atratividade facial dois protótipos faciais: um de uma face feminina e outro de face masculina. De cada um desses protótipos foram confeccionadas mais quatro faces, cujos traços de duas foram masculinizados e das outras duas foram feminilizados em diferentes graus. Foram realizadas duas sessões experimentais para cada participante. A primeira sessão foi na etapa folicular tardia do ciclo menstrual e a segunda na etapa luteal do ciclo. Em cada sessão, a participante era instruída a ordenar decrescentemente as faces conforme o quão atraente cada uma lhe parecerá. Em seguida a participante classificava as faces em três grupos: Amigo, Inimigo e Amante. Posteriormente foi colhida a amostra de sangue para posteriores análises dos níveis hormonais. Ou seja, tanto na etapa folicular tardia quanto na luteal, as participantes avaliaram as imagens das faces e doaram uma amostra de sangue. As frequências foram comparadas e verificou-se que para as faces masculinas masculinizadas e a face neutra foram consideradas as mais atraentes na fase folicular tardia e na fase lútea. Na fase folicular tardia, para as faces masculinas, quanto mais masculinizadas elas forem, maior sua pontuação no grupo Amante. Na fase lútea, a face original masculina e todas as faces masculinas masculinizadas foram mais frequentemente classificadas ao grupo Amante, mas a face 50% masculinizada teve um aumento na qualificação de Inimigo. E finalmente, não foi verificada uma correlação entre os níveis hormonais e a preferência por faces mais masculinizadas ou feminilizada. Não foi evidenciada uma mudança significativa na preferência do julgamento das faces; observando-se que existe sempre uma preferência por faces mais masculinizadas para faces masculinas, e preferência por faces mais feminilizadas para faces femininas, independente das fases do ciclo menstrual. / This project aimed to investigate whether there are differences in attractiveness judgments of masculinized and feminized faces by women during the late follicular and the luteal phases (phases of the menstrual cycle) and whether these judgments correlate with hormonal level changes. Thirty women with age between 18 and 42 years old, with regular menstrual cycles lasting between 24 and 33 days, and without use of hormonal contraceptive (AH) were volunteers in this study. Stimuli were images of a female and a male prototypical faces that by computer morphing technique generated other faces with exaggeration of the gender traits by 25% and 50%. Two experimental sessions, the first in the late follicular phase and the second in the luteal phase, were conducted for each participant to judge the attractiveness of the faces, sorting them from the highest to lowest attractive. Finishing this task, the participant classified the faces into three groups: \"Friend\", \"Enemy\" or \"Lover.\" After each session in both menstrual phases blood sample of the participant was collected for further hormone level analysis. The masculinized male face and the original male face were chosen as more attractive in the follicular phase and the late luteal phase. Besides, in the late follicular phase, the more masculinized are the male faces, the higher is their score into the \"Lover\" group. In the luteal phase, also all masculinized and the original male faces were classified more frequently into the Lover group, but also the 50% masculinized male face was more frequently classified into the Enemy group. And finally, there was no correlation between hormone levels and preference for more masculinized or more feminized faces. Then, there is no evidence that hormonal levels change the face preferences. There was always a preference for masculinized faces to male faces, and preference for feminized faces for female faces, regardless of the menstrual cycle phases.

O principal objetivo desta pesquisa foi o acompanhamento clínico-laboratorial do ciclo reprodutivo de jabuti-piranga (Geochelone carbonaria, SPIX, 1824) e jabuti-tinga (Geochelone denticulata, Lineu, 1766) servindo-se de métodos minimamente invasivos como imagens radiográficas, ultrassonográficas e alterações hormonais séricas em fêmeas hígidas em idade reprodutiva. Para tanto, ao longo de 13 meses seguidos, foram utilizadas 7 fêmeas de G. carbonaria e 5 fêmeas de G. denticulata mantidas em recinto comum, hígidas e em idade reprodutiva. As variações médias de umidade do ar, índices pluviométricos, temperatura e fotoperíodo foram acompanhados semanalmente. Todos os animais foram avaliados uma vez ao mês. As imagens radiográficas dorso-ventrais foram feitas com os animais em estação na Fundação Parque Zoológico de São Paulo em aparelho fixo e submetidos a exposições de 300 mA por 1/60 segundo. Cada fêmea radiografada teve seus ovos mensurados com o auxílio de um paquímetro. No acompanhamento ultrassonográfico utilizou-se aparelho com microtransdutor convexo de freqüência dupla 4 e 7,5 mHz, enfatizando-se as estruturas ovarianas (folículos em desenvolvimento e desenvolvidos) e a presença ou não de ovos com casca no oviduto. Esta avaliação foi feita através das janelas acústicas craniais e inguinais por período um pouco maior que 10 minutos. As estruturas ovarianas foram mensuradas seguindo uma escala interna ao aparelho durante o exame e as imagens foram gravadas digitalmente para posterior recuperação. Realizou-se o acompanhamento do ciclo reprodutivo através de colheitas seriadas de sangue para a dosagem de estrógeno, progesterona, testosterona e corticosterona. Para as colheitas de sangue os animais foram fisicamente contidos, permanecendo sustentados por suporte metálico. Estas foram feitas prioritariamente através de punção da veia jugular. As amostras foram dosadas no Laboratório de Dosagens Hormonais do Departamento de Reprodução Animal da Faculdade de Medicina Veterinária da USP, por meio de kits comerciais de radioimunoensaio (RIA) em fase sólida. Onde foi possível se verificar alterações entre as duas espécies no que diz respeito ao ciclo anual. Foi possível verificar um pico de progesterona dois meses antes do pico de folículos em desenvolvimento na G. carbonaria enquanto que na G. denticulata, houve início de desenvolvimento folicular dois meses após uma marcada elevação dos níveis séricos de progesterona, porém o pico de progesterona só se verificou no início do verão. Os níveis séricos de testosterona e corticosterona observados em fêmeas de ambas as espécies não mostraram variações significativas ao longo do ano. Pela ultrassonografia foi possível verificar a vitelogênese nas fêmeas estudadas. A G. carbonaria apresentou pico de estradiol no início do verão enquanto a G. denticulata no final deste, coincidindo coma maior freqüência de observação de folículos desenvolvidos pelo exame ultrassonográfico. As fêmeas de G. carbonaria se mostraram mais eficientes na produção de ovos que as G. denticulata. Ambas as espécies realizaram uma postura anual. / The main objective of this study was to evaluate the reproductive cycle of red-foot (Geochelone carbonaria, SPIX, 1824) and yellow-foot tortoises (Geochelone denticulata, Lineu, 1766) using minimally invasive clinical and laboratory methods, such as radiographic and ultrasound images and hormone dosages. Seven G. carbonaria and 5 G. denticulata healthy females at reproductive age were kept together for 13 consecutive months. Mean variations in air humidity, pluviometric indexes, temperature and photoperiod were recorded weekly. All animals were evaluated once a month. Dorsoventral radiographic images of the animals in a standing position were obtained at the Fundação Parque Zoológico de São Paulo, by means of a fixed x-ray device, using 300 mA for 1/60 second. Eggs of each female that was analyzed by x-ray were measured using a caliper. Ultrasound examination was carried out using a convex micro transducer at two frequencies, 4 and 7.5 mHz. Ovarian structures (developing and developed follicles) were analyzed, as well as the presence or absence of shelled eggs inside the oviduct, using the cranial and inguinal acoustic windows for a little longer than 10 minutes. Ovarian structures were measured during the examination according to an internal scale of the device, and images were digitally recorded to be recovered later. Reproductive cycle was analyzed by means of serial blood collections for estrogen, progesterone, testosterone, and corticosterone dosage. Animals were physically restrained and blood samples were collected, which was preferentially performed by means of a puncture in the jugular vein. Samples were analyzed in the Laboratório de Dosagens Hormonais at the Departamento de Reprodução Animal, Faculdade de Medicina Veterinária at USP, using commercial solid phase radioimmunoassay kits (RIA) in order to assess differences in the annual cycle of the two species. A progesterone peak was observed two months before the peak of developing follicles in G. carbonaria, whereas G. denticulata showed follicular development two months after a marked increase in progesterone serum levels. However, progesterone peak was only observed in the beginning of the summer while in G. denticulata it was observed at the end. Testosterone and corticosterone serum levels observed in females of both species did not show significant variations throughout the year. Ultrasound examination showed vitellogenesis in females studied. An estradiol peak was observed in G. carbonaria in the beginning of the summer, and in G. denticulata in the end of this season, coinciding with a greater rate of developed follicles in ultrasound images. G. carbonaria females were more efficient in egg production than G. denticulata. Both species laid eggs once during the year.

O folículo ovariano é composto pelo oócito (gameta feminino) e por várias camadas de células foliculares somáticas, sendo que destas, as mais intimamente associadas com o oócito são as células do cumulus oophorus (CCs), as quais estão em contato direto com o gameta feminino e formam o complexo cumulus-oócito (CCO), e as células murais da granulosa (CGs), que revestem a parede do folículo ovariano. Visto que estas CGs e CCs são facilmente acessadas durante tratamentos de reprodução assistida (RA), que podem ser coletadas sem comprometimento do oócito e que são descartadas após a recuperação do oócito é possível que elas sejam utilizadas em pesquisas que visam elucidar a fisiologia ovariana. No entanto, quando recuperadas, nos ciclos de reprodução assistida, estas células se encontram em um estado luteinizado, devido ao tratamento hormonal que as pacientes realizam. Sabe-se que o uso de CGs luteinizadas em cultura celular para o estudo do processo molecular ovulatório é limitado visto esta prévia exposição celular às gonadotrofinas e ao seu estado luteinizado. Porém, foi demonstrado que CGs luteinizadas podem readquirir sua capacidade de resposta à estimulação por gonadotrofinas, recuperando características semelhantes às daquelas de folículos não luteinizados nos estágios iniciais de diferenciação (early antral não luteinizado). A estimulação destas células com FSH causa aumento na expressão de genes que caracterizam CGs típicas de folículos pré-ovulatórios (pré-ovulatório não luteinizado). Ainda, outra questão importante com relação ao folículo ovariano diz respeito à ação dos androgênios nesta estrutura ovariana, sendo que já se sabe que a ativação do receptor de androgênio, localizado nas células foliculares, é capaz de modular a expressão e a atividade de genes importantes para a manutenção do desenvolvimento do folículo ovariano. Desta forma, sugere-se que o efeito reprodutivo do tratamento com dehidroepiandrosterona (DHEA) e seu sulfato (SDHEA), importantes androgênios, pode ser devido às suas ações justamente no microambiente folicular. Portanto, o objetivo deste trabalho foi analisar a exposição de células foliculares desluteinizadas (estágios early antral e pré-ovulatório) ao SDHEA. Para isto, células da granulosa e do cumulus foram obtidas de pacientes submetidas à fertilização in vitro e foram cultivas separadamente. Inicialmente, fez-se a determinação do melhor tempo de cultivo deste modelo celular proposto, dentre 6, 8 ou 10 dias de cultivo. As análises de viabilidade celular realizadas mostraram que o melhor tempo para o cultivo primário folicular, para as próximas etapas do trabalho, seria de oito dias. Após, também por análises de viabilidade celular, a melhor dose de SDHEA para exposição às células foliculares foi determinada dentre cinco doses testadas em comparação a um controle sem exposição hormonal. As análises mostraram que a dose mais adequada a ser utilizada era a dose de 0,08 μM de SDHEA. Posteriormente, tendo definido o melhor tempo de cultivo e a dose ideal de exposição das células em questão ao SDHEA, os experimentos foram realizados com dois grupos experimentais distintos: células early antral não luteinizadas e células pré-ovulatórias não luteinizadas – expostas ao FSH. Ambos os grupos foram divididos em dois subgrupos: grupo controle (sem exposição hormonal) e grupo SDHEA (com exposição ao SDHEA). Foram feitas dosagens hormonais de SDHEA, de estradiol e de progesterona nos dias 1, 4, 6 e 8 do sobrenadante do cultivo celular. A análise ao longo do tempo mostrou que os valores das dosagens de SDHEA se mantiveram constantes no grupo controle durante todo o período de cultivo celular, não havendo diferença estatística entre as quatro dosagens hormonais feitas neste grupo. Por outro lado, no grupo tratado houve diferença nos valores deste hormônio nos dias 6 e 8, em comparação aos dias 1 e 4, devido justamente ao tratamento com SDHEA realizado neste grupo experimental. Com relação ao estradiol, independente do tipo celular e do estágio de desenvolvimento, foi possível ver que a sua secreção era elevada no primeiro dia de cultivo, diminuindo nos outros dias devido às condições e ao tempo de cultivo do protocolo de desluteinização celular. Além disso, as células tratadas com SDHEA apresentaram uma secreção de estradiol superior àquelas não tratadas. Por fim, as dosagens de progesterona revelaram que o tratamento com SDHEA não alterou a secreção deste hormônio pelas células, em nenhum dos dois estágios de desenvolvimento. Ainda, as células apresentaram uma secreção aumentada de progesterona no sexto dia de cultivo celular em comparação ao primeiro e ao quarto dia; porém, esta secreção começou a diminuir quando do oitavo dia de cultivo. Tendo em vista os resultados obtidos, podemos concluir que o tratamento com SDHEA é capaz de aumentar a secreção de estradiol de células foliculares não luteinizadas, não alterando a secreção de progesterona dessas mesmas células. Mais estudos são necessários para um melhor entendimento dos efeitos do SDHEA nos processos que compõem a foliculogênese. / Ovarian follicle is formed by the oocyte (female gamete) and somatic follicular cells. Those closer to the oocyte are cumulus oophorus cells (CCs), which are in direct contact with the female gamete, and the granulosa mural cells (GCs), which form the wall of the ovarian follicle. As GCs and CCs are easily accessed during assisted reproduction procedures and are discarded after oocyte retrieval, they can be used in research aimed at elucidating ovarian physiology. However, when recovered in assisted reproduction cycles, these cells are in a luteinized state due patient hormonal treatment. It is known that the use of luteinized GCs to study the molecular ovulatory process is limited due to this prior cellular exposure to gonadotrophins and their luteinized state. However, luteinized CGs have been shown to reacquire similar characteristics to those of non-luteinized follicles in early stages of differentiation (non-luteinized early antral). Stimulation of these cells with follicle stimulating hormone (FSH) increases expression of genes that characterize CGs typical of pre ovulatory follicles (non-luteinized pre ovulatory). Another important question regarding the ovarian follicle relates to androgens action in this ovarian structure. As it is known, androgen receptor activation, located in follicular cells, is able to modulate expression and activity of important genes for the maintenance of ovarian follicle development. Thus, authors suggest that the reproductive effect of dehydroepiandrosterone (DHEA) and their sulfate (SDHEA) treatment, important androgens, may be due their actions precisely in the follicular microenvironment. Consequently, the aim of this work was to analyze the exposure to SDHEA of non-luteinized follicular cells (early antral and pre-ovulatory stages). Granulosa and cumulus cells were obtained from patients submitted to in vitro fertilization and were separately cultivated. Initially, the best culture time of this proposed cellular model was determined among 6, 8 or 10 days of culture. Cellular viability analysis showed that primary follicular culture for the next steps of the study would be of 8 days. Thereafter, cellular viability assays were used to determine the best SDHEA dose among 5 doses to follicular cells exposure in comparison to a control without hormonal exposure. The analysis showed that the best dose to use was 0,08 μM of SDHEA. Subsequently, after defined the best culture time and the ideal exposure dose of the cells to SDHEA, experiments were performed with two different experimental groups: non-luteinized early antral cells and non-luteinized pre ovulatory cells – exposed to FSH. Both groups were divided in two subgroups: control group (no hormonal exposure) and SDHEA group (with SDHEA exposure). SDHEA, estradiol and progesterone hormonal dosages of the cell culture supernatant were done on days 1, 4, 6 and 8. Over time analysis revealed that SDHEA values were constant in control group during all the cell culture period, without statistical difference between the four hormonal dosages performed in this group. However, treated group showed a difference in the values of this hormone on days 6 and 8, compared to days 1 and 4, due to treatment with SDHEA of these experimental group . Regarding estradiol, independent of cell type and stage of development, it was possible to see that its secretion was high on the first day of culture, decreasing in others due to conditions and time of culture of the non-luteinized cells protocol. In addition, the SDHEA treated cells presented higher estradiol secretion than those not treated. Finally, progesterone dosages revealed that treatment with SDHEA did not alter this hormone secretion from the cells in either of the two development stages. Besides that, the cells had an increased progesterone secretion on the sixth cell culture day compared to first and fourth day; however, this secretion began to decrease on the eight day of culture. In conclusion, SDHEA treatment is able to increases the non-luteinized follicular cells secretion of estradiol, but it is not able to modify the progesterone secretion of the same cells. More studies are needed to better understand the effects of SDHEA on the process that make part of folliculogenesis.

O presente estudo visou avaliar os efeitos da administração de isoflavonas da soja (ISOs) sobre parâmetros bioquímicos e atividade imunológica em ratas ovariectomizadas. As ISOs foram administradas na apresentação não isolada nas doses de 100, 300 e 900 mg/kg, por gavage, durante 28 dias. Ao longo do tratamento foram avaliados o peso e o consumo de ração que evidenciaram efeito moderador na ingesta de alimentos e perda de peso com as maiores doses das ISOs. Foram avaliadas também a bioquímica sérica e urinária, que revelaram alteração do perfil lipídico (&uArr; HDL) de forma dose-dependente, aumento de glicemia e diminuição de glicosúria, embora esta última não diferente estatisticamente do controle. No grupo de 900 mg/kg, o estresse oxidativo foi maior e caracterizado pelo aumento de glutationa oxidada (GSSG). No sistema imune foram avaliados diversos parâmetros, a saber: peso relativo de baço e timo e suas celularidades; celularidade de medula óssea; atividades de neutrófilos circulantes e macrófagos peritoneais; resposta imune do tipo tardia (DTH); fenotipagem de linfócitos T e B no sangue e baço e proliferação de linfócitos esplênicos em resposta a ConA e LPS. As maiores doses de ISOs causaram diminuição do peso absoluto do timo e aumento do peso relativo do baço, além de aumento da intensidade de fagocitose de macrófagos na dose de 900 mg/kg. Com a dose de 300 mg/kg de ISOs foi observado menor intensidade na fagocitose de neutrófilos. Assim, pode-se concluir que a utilização de ISOs, na apresentação não isolada, não induziu melhora no perfil lipídico, na proteção ao estresse oxidativo e nem alterou a capacidade de resposta do sistema imune de ratas ovariectomizadas, e, ainda, que a exposição a doses mais elevadas de ISOs apresenta potente efeito sobre a ingesta de alimentos, piora do perfil lipídico, aumento de glicemia e alteração na sinalização redox das células, portanto, futuros experimentos são necessários para melhor caracterizar os efeitos destas agliconas sobre o metabolismo dos lipídeos e também na proteção ao estresse oxidativo. / The present study aimed to evaluate the effects of administration of soybean isoflavones (ISOs) on biochemical and immunological parameters in ovariectomized rats. For this, the ISOs were administered in non-isolated presentation at doses of 100; 300 and 900 mg/kg by gavage for 28 days. Throughout the treatment, the body weight gain and feed intake were evaluated and higher doses of ISOs showed a moderating effect on food intake and weight loss. It were also evaluated the serum and urine biochemistry, which showed altered lipid profile (&uArr; HDL), increase in blood glucose and decreased glycosuria in a dose-dependent fashion, although the latter is not statistically different from the control. In the group of 900 mg/kg, the oxidative stress was higher, characterized by increased in oxidized glutathione (GSSG) levels. In the immune system several parameters were evaluated, relative weight of thymus and spleen and their cellularity, bone marrow cellularity, neutrophils and peritoneal macrophages activity, delayed type immune response (DTH), T and B lymphocytes phenotyping in the blood and spleen and splenic lymphocyte proliferation in response to ConA and LPS. Higher doses of ISOs caused decreased in the absolute thymus weight and increase in relative spleen weight. In addition, the dose of 900 mg/kg increased the intensity of phagocytosis of macrophages. On the other hand, it was observed lower phagocytic activity of the neutrophils in the group of 300 mg/kg. Thus, it can be concluded that the use of ISOs in a non-isolated presentation did not induce an improvement in the lipid profile, in the cellular protection to oxidative stress and did not alter the immune response of ovariectomized rats; furthermore, the exposure to higher doses of ISOs has potent effect on food intake, worsening lipid profile, increased blood glucose and changes in redox signaling cells, so further experiments are needed to better characterize the effects of these aglycones on the metabolism of lipids and also in protecting the oxidative stress.