Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2016-10-04T19:18:31Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Sabrina_Concluída 22.04.15_Corrigido_VERSÃO FINAL sem assinaturas_com ficha catalografica_com menção de APROV~1.pdf: 1129690 bytes, checksum: 50a74fb8c1db07ca01d5877c4b969206 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-04T19:18:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Sabrina_Concluída 22.04.15_Corrigido_VERSÃO FINAL sem assinaturas_com ficha catalografica_com menção de APROV~1.pdf: 1129690 bytes, checksum: 50a74fb8c1db07ca01d5877c4b969206 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Facepe / Pigmentos carotenóides são largamente distribuídos na natureza, podendo ser encontrados em vegetais, animais, e micro-organismos tais como as leveduras do gênero Rhodotorula que apresentam elevada produção destes compostos. O objetivo deste estudo foi avaliar a produção de pigmentos carotenóides por Rhodotorula spp. em fermentação submersa, utilizando como fonte de carbono o resíduo (glicerina residual) da produção de biodiesel. As leveduras utilizadas foram: R. glutinis UFRPE; R. glutinis URM6683; R. aurantiaca URM6687; R. glutinis URM6691; R. glutinis URM6692; R. minuta URM6693; e R. glutinis URM6695. A seleção das leveduras foi realizada determinando-se o crescimento em meio de cultivo a base de glicerina residual (30 a 100 g.L-1) como substrato (único ou adicionado de glicose) e duas diferentes fontes de nitrogênio (uréia e sulfato de amônio). A extração dos carotenóides foi realizada com os solventes DMSO (Dimetil Sulfóxido), acetona e éter de petróleo. Os carotenóides totais foram determinados por espectrofotometria e o betacaroteno por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC/CLAE). O estudo demonstrou que o fornecimento de glicerina residual e sulfato de amônio numa relação carbono/nitrogênio (C/N) igual a 1,07 favoreceu o crescimento das leveduras e a produção de carotenóides. Todas as leveduras produziram carotenóides em quantidades variáveis sendo que a R. minuta URM6693 apresentou uma produção volumétrica de betacaroteno igual a 1,021 mg.L-1 determinado pelo HPLC. Conclui-se que a glicerina residual pode ser utilizada como fonte de carbono para a produção de carotenóides, entre eles o betacaroteno. / Pigments carotenoids are widely distributed in nature and can be found in plants, animals, and microorganisms such as the Rhodotorula yeasts that present high production of these compounds. The objective of this study was to evaluate the production of carotenoid pigments by Rhodotorula spp. in submerged fermentation, using as a source of carbon residue (residual glycerin) of biodiesel production. The yeasts were: R. glutinis UFRPE; R. glutinis URM6683; R. aurantiaca URM6687; R. glutinis URM6691; R. glutinis URM6692; R. minuta URM6693; and, R. glutinis URM6695. The selection of yeast was performed by determining growth in the fermentation medium based on the residual glycerin (30 a 100 g.L-1) as substrate (single or glucose added) and two different nitrogen sources (urea and ammonium sulfate). The extraction of carotenoids was performed with the solvents DMSO (Dimethyl Sulfoxide), acetone and petroleum ether. Total carotenoids were determined by spectrophotometry and beta-carotene by High Performance Liquid Cromatography (HPLC). The study showed that the supply of residual glycerine and ammonium sulfate in a ratio carbon/nitrogen (C/N) equal to 1,07 favored the growth of yeast and production of carotenoids. All yeasts produced carotenoids in varying amounts being that R. minuta URM6693 presented a volumetric production of beta-carotene equal to 1,021 mg.L-1 certain by HPLC. It follows that the residual glycerin can be used as a carbon source for the production of carotenoids, including beta-carotene.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-12-29T15:35:19Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação - Tereza Cristina de Deus Honório - 2013.pdf: 1533455 bytes, checksum: 94b316a371dbbb095635e691df80c2b3 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-12-29T15:40:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação - Tereza Cristina de Deus Honório - 2013.pdf: 1533455 bytes, checksum: 94b316a371dbbb095635e691df80c2b3 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-29T15:40:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação - Tereza Cristina de Deus Honório - 2013.pdf: 1533455 bytes, checksum: 94b316a371dbbb095635e691df80c2b3 (MD5) Previous issue date: 2013-03-19 / Introduction: Aromatic organic solvents (AOS) are widely used in diverse industrial and laborer activities among others involving manipulating of products likes lacquers, inks and varnishes. Among the most commonly used AOS are toluene, xylene, styrene, ethylbenzene and phenol. Occupational exposure to these compounds can cause damage to the body, which leads to a concern about the health of the worker. Biological monitoring is an important tool used to evaluate exposition to chemical substances in the work environment, that consists of quantify the biomarkers of occupational exposure in biological samples. Brazilian values of AOS biomarkers and maximum allowable biological index (IBMP) are described in the NR7 of the Brazilian legislation (Ministério do Trabalho e Emprego, MTE). Objective: The aim of this work was to validate technical in HPLC-PDA for quantifying the exposure’s biomarkers and than evaluate the exposure’s profile to toluene, xylene, styrene, ethylbenzene and phenol in workers exposed in university community. Methods: To analyze the AOS biomarkers in urine samples by HPLC-PDA, method validation was done according to the preconized parameters by ANVISA described in RE 899/2003. Participate of the study 30 occupationally exposed volunteers that provided urine samples and asked a questionnaire survey to characterize the sampling. The sampling’s characterization was done by applying a survey to volunteers. Both descriptive and multivariate statitical analysis was performed to the analytical and surveying data. Results: The analytical method was to validate and appropriated for the purposes established. About 3,3 % of the volunteers presented levels of hipuric acid above of the allowed by the law. Besides, it was detected 3,4-methylhipuric acids in 13,3 % of volunteers in concentration below the maximum allowable limit. The main symptoms reported were headache, dyspnea, numbness and cough. Conclusion: The analytical method was within acceptable limits. It was observed that higher levels of hippuric acid in volunteers may be linked to a lack of protective equipment and collective environmental protection equipment, and high weekly workload. Additionally, methyl hippuric acid was found below IBMP. It was demonstrated a correlation between exposure to AOS biomarkers and symptoms reported by the volunteers. / Introdução: Os solventes orgânicos aromáticos (SOA) são substâncias amplamente utilizadas em várias atividades industriais laborais, dentre outras que envolvem a manipulação de produtods como tintas, vernizes e lacas. A exposição ocupacional a estes compostos pode causar danos à saúde, o que leva a uma preocupação em relação à saúde do trabalhador. Dentre os solventes aromáticos utilizados, citam-se, pela elevada frequência de exposição, o tolueno, o xileno, o estireno, o fenol e o etil-benzeno. Uma das ferramentas utilizadas para avaliar a exposição ocupacional a agentes químicos é a monitoração biológica que se baseia na quantificação de biomarcadores de exposição ocupacional. Os marcadores disponíveis e os valores de índice biológico máximo permitido (IBMP) se encontram descritos na NR 7 do Ministério do Trabalho e Emprego do Brasil (MTE). Objetivo: O objetivo do trabalho foi validar técnica analítica em HPLC-PDA para quantificar os biomarcadores de exposição aos SOA para avaliar o perfil de exposição ao tolueno, xileno, estireno, etilbenzeno e fenol em voluntários expostos em comunidade universitária. Métodos: Para a quantificação dos biomarcadores dos SOA, realizou-se a validação analítica do método por HPLC-PDA seguindo parâmetros estabelecidos pela RE 899 da ANVISA. Participaram do estudo 30 voluntários expostos aos SOA, os quais fornecerem amostra de urina, além de responderem a um questionário antropométrico e sócio-epidemiológico ocupacional para a caracterização da amostragem. Utilizou-se análise estatística descritiva para a validação analítica e análise multivariada para os dados obtidos do questionário. Resultados: O método analítico foi validado e adequado para os propósitos definidos. Os resultados demonstraram que 3,3 % dos voluntários apresentaram níveis de ácido hipúrico acima dos limites estabelecidos pela legislação e 13,3 % apresentaram níveis de ácido hipúrico acima dos valores de referência e abaixo do Indice Biológico Máximo Permido. Os ácidos 3 e 4- metilhipúricos foram detectados em 16,6 % dos voluntários e as concentrações desses metabólitos estavam abaixo dos limites de tolerância estabelecidos pelo MTE. Os principais sintomas reportados foram cefaleia, dispneia, parestesia e tosse. Conclusão: O método analítico estava dentro dos limites aceitáveis. Observou-se que a elevação dos níveis de ácido hipúrico nos voluntários pode estar ligada à falta de equipamentos de proteção coletiva no ambiente e de equipamentos de proteção individual, além de elevada carga horária de trabalho. Adicionalmente, o ácido metilhipúrico encontrado estava abaixo do IBMP. Demonstrou-se correlação entre exposição a SOA, biomarcadores e sintomatologia relatada pelos voluntários.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:29:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao amanda.pdf: 733204 bytes, checksum: a454e4fc6823529e279a29fcaea465c3 (MD5) Previous issue date: 2009-10-01 / The therapeutic drug monitoring is an important tool to predict the therapeutic efficacy and possible toxicity of antirretroviral agents used to treat infection by human immunodeficiency virus (HIV). The goals of this study was to develop and validate a method of analysis and extraction to quantify the antirretrovirals efavirenz and zidovudine in human plasma, to know the clinical profile and quantify the drugs efavirenz and zidovudine in plasma of volunteers using treatment regimen efavirenz / lamivudine / zidovudine. Blood samples were collected approximately 8 h after administration of AZT and 20 h of the EFZ, were obtained from adult volunteers HIV positive in clinic monitoring at Hospital das Clínicas, Universidade Federal de Goiás and therapeutic protocol EFZ 600 mg once daily and lamivudine 150 mg + zidovudine 300 mg twice a day. After solid phase extraction using cartridge Strata 18E C 500mg, 3 mL capacity, the drugs and internal standard (5 - (4-methylphenyl)-5-fenilidantoína - MPPH) were separated by reversed-phase column ACE 5 C18 100 x 4 6 mm. The mobile phase consisted of acetonitrile and diethanolamine in water (pH 7.8), flow rate 0.5 to 2.0 mL/min and detection at wavelength of 249 nm (EFZ), 267 nm (AZT) and 240 nm (MPPH). The method showed linearity at concentration range of 50 to 5000 ng/mL for both drugs, with recovery of 84 and 92% for EFZ and AZT, respectively. The limit of quantification (50 ng/mL), precision (coefficient of variation <15%) and accuracy (relative errors <15%) are in accordance with requirements of ANVISA. To evaluate the applicability of the method, we analyzed plasma of volunteers (n = 12) with mean plasma concentration of 1960 ± 766 ng/ mL to EFZ and 62.12 ± 16.21 ng/mL to AZT. The method agree analytical parameters suitable for use in therapeutic monitoring of patients using AZT and EFZ / A monitoração terapêutica de fármacos é uma importante ferramenta para prever a eficácia terapêutica e a possível toxicidade dos agentes antirretrovirais utilizados no tratamento da infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV). Os objetivos deste estudo foram desenvolver e validar uma técnica de análise e extração para quantificar os antirretrovirais efavirenz e zidovudina no plasma humano, conhecer o perfil clínico e quantificar os fármacos efavirenz e zidovudina no plasma dos sujeitos da pesquisa em uso do esquema terapêutico efavirenz/lamivudina/zidovudina. Amostras de sangue, coletadas aproximadamente 8 h após administração do AZT e 20 h do EFZ, foram obtidas de sujeitos adultos com diagnóstico HIV positivo em acompanhamento no Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Goiás com protocolo terapêutico EFZ 600 mg uma vez ao dia e lamivudina 150 mg + zidovudina 300 mg duas vezes ao dia. Após extração em fase sólida utilizando cartucho Strata C 18E 500mg, 3mL de capacidade, os fármacos e padrão interno (5-(4-metilfenil)-5-fenilidantoína MPPH) foram separados em coluna fase reversa ACE 5, C18 100 x 4,6 mm. A fase móvel utilizada foi composta por acetonitrila e dietanolamina em água (pH 7,8), vazão de 0,5 a 2,0 mL/min e detecção no comprimento de onda 249 nm (EFZ), 267 nm (AZT) e 240 nm (MPPH). A técnica apresentou linearidade no intervalo de 50 a 5000 ng/mL para ambos os compostos, com recuperação média de 84 e 92% para a AZT e EFZ, respectivamente. O limite de quantificação (50 ng/mL), precisão (coeficiente de variação < 15%) e exatidão (erros relativos < 15%) estão de acordo com exigências da ANVISA. Para avaliar a aplicabilidade da técnica, analisou-se amostras de plasma de sujeitos (n = 12), obtendo uma concentração plasmática média de 1960 ± 766 ng/mL para EFZ e 62,12 ± 16,21 ng/mL para o AZT. A técnica apresentou parâmetros analíticos adequados à sua utilização em monitoração terapêutica de pacientes em uso de AZT e EFZ

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Julliana Rodrigues Moura.pdf: 204207 bytes, checksum: 56a1561a44aeb00b316511d72cd22e73 (MD5) Previous issue date: 2009-12-14 / Olanzapine is an antipsychotic active ingredient and its marketing in Brazil, in the form of terminated product, is protected by patent up to 2011. As it is recent in the pharmaceutical market and there is not a methodology described in officials forms that is capable of assuring the quality of new formulations, the objective of this paper was to characterize Olanzapine physical-chemical parameters, to develop and validate, in accordance with RE N°899, from May 29 th 2003, the analytical methodology for assay and dissolution and to apply the developed and validated methodologies in the pharmacotechnical development of tablets. It was characterized some physicalchemical parameters of solubility and of light absorption (from 200 to 400nm) in several solvents and it was developed and validated assay and dissolution methodologies by spectrophotometry with ultraviolet detection (UV) and the assay by high efficiency liquid chromatography with ultraviolet detection (HPLC-UV) for the quantification of olanzapine present in film coated tablets of 2.5, 5.0 and 10.0mg. The active ingredient presented a low solubility in water and the wave lengths of maximum light absorption were within the range of 254 and 273nm. For the dissolution methodology by UV spectrophotometry, the parameters were chloride acid 0.1 mol/L as the dissolution media, volume of 1,000mL (5 and 10mg of Olanzapine) and 500mL (2.5mg of Olanzapine), apparatus II (paddles) and a rotation of 50 rpm. The spectrophotometric parameters were chloride acid 0.1 mol/L as blank and 259nm of wave length. For the assay methodology by UV spectrophotometry, it was used as a solvent and as a blank solution chloride acid 0.1 mol/L and a wave length of 259nm. It was used a ProStar 210 UV/VIS VARIAN high efficient liquid chromatographer, a C18 (150x4,6)mm 5&#956;m column in room temperature (25ºC), a flux of 0,8mL/min, a wave length of 254nm and a mobile phase constituted of a mixture of monobasic potassium phosphate buffer 0,01 mol/L pH 2,5 and acetonitrile (70:30) for the assay methodology by HPLC-UV. The results found from the parameters of specificity, linearity, accuracy, precision, quantification and detection limits and stability in the methodologies validations confirm that they were adequate for the purpose proposed. The methodologies developed and validated were applied in Olanzapine determination in several formulation propositions which have been developed and they assisted the pharmacotechnical development team in the definition of the best olanzapine formulation in the 2.5mg strength. / A olanzapina é um fármaco antipsicótico e sua comercialização no Brasil, na forma de produto acabado, está protegida por patente até 2011. Como é recente no mercado farmacêutico e não há descrição da metodologia em formulários oficiais capazes de assegurar a qualidade das novas formulações, o objetivo deste trabalho foi caracterizar os parâmetros físico-químicos da olanzapina, desenvolver e validar, segundo RE N°899, de 29 de maio de 2003, método analítico para doseamento e dissolução e aplicar os métodos desenvolvidos e validados no desenvolvimento farmacotécnico dos comprimidos. Foram caracterizados alguns parâmetros físico-químicos, de solubilidade e de absorção da luz (200 a 400 nm) em diversos solventes e foram desenvolvidos e validados métodos de doseamento e dissolução por espectrofotometria com detecção ultravioleta (UV) e de doseamento por cromatografia líquida de alta eficiência com detecção ultravioleta (HPLC-UV) para quantificação de olanzapina presente em comprimidos revestidos de 2,5, 5,0 e 10,0 mg. O fármaco apresentou baixa solubilidade em água e os comprimentos de onda de máxima absorção da luz ficaram entre 254 e 273 nm. Para o método de dissolução por espectrofotometria UV, os melhores parâmetros foram ácido clorídrico 0,1 mol/L como meio de dissolução, volume de 1.000 mL (5 e 10 mg de Olanzapina) e 500mL (2,5mg de Olanzapina), aparato II (pás) e rotação de 50rpm. Os parâmetros espectrofotométricos foram ácido clorídrico 0,1 mol/L como branco e 259nm de comprimento de onda. Para o método de doseamento por espectrofotometria UV foi utilizado como solvente e solução branco ácido clorídrico 0,1 mol/L e comprimento de onda de 259 nm. Foi utilizado cromatógrafo líquido de alta eficiência ProStar 210 UV/VIS VARIAN, coluna C18 (150x4,6) mm 5&#956;m a temperatura ambiente (25ºC), fluxo de 0,8mL/min, comprimento de onda de 254 nm e fase móvel constituída por uma mistura de tampão fosfato de potássio monobásico 0,01 mol/L pH 2,5 e acetonitrila (70:30) para o método de doseamento por HPLC-UV. Os resultados encontrados dos parâmetros de especificidade, linearidade, exatidão, precisão, limites de quantificação e detecção e estabilidade nas validações dos métodos confirmam que os mesmos foram adequados para a finalidade proposta. Os métodos desenvolvidos e validados foram aplicados na determinação de olanzapina em várias propostas de formulações que foram desenvolvidas e auxiliou a equipe de desenvolvimento farmacotécnico na definição da melhor formulação da olanzapina na concentração de 2,5mg.

As recentes técnicas miniaturizadas de preparo de amostra, microextração em fase sólida (SPME) e in tube SPME, apresentam uma série de vantagens em relação aos métodos clássicos de extração (extração líquido-líquido e extração em fase sólida), tais como: não requer instrumentação analítica sofisticada, utilização de pequenas quantidades de solventes orgânicos, rápido processo operacional, permite automação das análises, a reutilização das fases extratoras, e integra em um único sistema a extração, concentração e introdução da amostra no cromatográfico. Esta dissertação tem como objetivo a padronização, validação e comparação dos métodos SPME/LC-UV com dessorção off line e in tube SPME/LC-UV, para a análise dos antidepressivos da nova geração (mirtazapina, citalopram, paroxetina, duloxetina, fluoxetina e sertralina) em amostras de plasma para fins de monitorização terapêutica. As variáveis: fase extratora, pH da matriz, tempo e temperatura de extração e de dessorção e força iônica apresentaram grande influência na eficiência do processo SPME. O método SPME/LC-UV padronizado, apresentou limite de quantificação (LQ) de 25 a 50 ng mL-1, ampla faixa de linearidade (LQ ? 500 ng mL-1, r2 > 0,9970) e precisão inter ensaios com coeficientes de variação menor que 15% para todos os analitos. Apesar das baixas taxas de recuperação obtidas, de 8,1% (citalopram) a 17,1% (mirtazapina), o método SPME/LC-UV apresentou seletividade e sensibilidade analítica adequada. As variáveis: pH da matriz, fluxo e número de ciclos aspirar/dispensar e volume de amostra apresentaram grande influência na eficiência do processo in tube SPME. A etapa de precipitação de proteínas do plasma, anterior ao processo de extração, foi necessária para a eliminação dos compostos endógenos. O método in tube SPME/LC-UV padronizado apresentou seletividade adequada, precisão inter ensaios com coeficiente de variação menor que 10%, LQ de 20 a 50 ng mL-1, linearidade na faixa de concentração do LQ a 500 ng mL-1, com r2 > 0,9983 para todos os analitos e recuperação absoluta de 5,32% (mirtazapina) a 43,5% (sertralina). A técnica in tube SPME, quando comparada à SPME, permitiu a automação das análises, menor exposição do analista às amostras biológicas e solventes orgânicos, menor tempo de análise e menor volume de amostra de plasma. A eficácia dos métodos, SPME/LC-UV e in tube SPME/LC-UV, foi comprovada através das análises de amostras de plasma de pacientes em terapia com os antidepressivos, para fins de monitorização terapêutica. / The recent miniaturized sample techniques preparation, solid phase microextraction (SPME) and in tube SPME, present several advantages when compared with classic extraction methods (liquid-liquid extraction and solid phase extraction), such as: it does not require sophisticated analytical instrumentation, use small organic solvent amounts, fast operational process, automation of the analyses, reuse extraction phases, and incorporates, into a single procedure, sample extraction, concentration and sample introduction. The aim of this work is development, validation and comparison of methods SPME/LC-UV with off line desorption and in tube SPME/LC-UV, for analyses of antidepressants of the new generation (mirtazapine, citalopram, paroxetine, duloxetine, fluoxetine and sertraline) in plasma samples for therapeutic drug monitoring. Variables: extraction phase, matrix pH, time and temperature of extraction and desorption and ionic strength showed great influence in SPME process efficiency. The method SPME/LC-UV presented limit of quantification (LOQ) variety from 25 to 50 ng mL-1, wide range the of linearity (LOQ 500 ng mL-1, r2 > 0.9970) and interassays precision with coefficient of variation lower than 15% for all analytes. Although the low recovery, from 8.1% (citalopram) to 17.1% (mirtazapine), the method SPME/LC-UV presented adequate selectivity and analytical sensitivity. Variables: matrix pH, flow and number of aspirate/dispense cycles and sample volume showed great influence in the in tube SPME process efficiency. The protein precipitation of the plasma steps, previous to the extraction process, was necessary for the endogenous compounds elimination. The method in tube SPME/LC showed adequate selectivity, interassays precision with coefficient of variation lower than 10%, LOQ variety from 20 to 50 ng mL-1, linearity in range concentration from LOQ to 500 ng mL-1, with r2 > 0.9983 for all analytes and recovery from 5.32% (mirtazapine) to 43.5% (sertraline). The technique in tube SPME, compared with the SPME, permitted the automation of the analyses, minor exposition of the analyst to the biological samples and organic solvent, shorter analyses time and minor plasma sample volume. The effectiveness methods, SPME/LC-UV and in tube SPME/LC-UV, was proven through the analyses of plasma samples of patients in therapy with antidepressants, for therapeutic drug monitoring.

Neste trabalho duas espécies de grãos, de kefir e do tibet, popularmente conhecidas e utilizadas para fermentar o leite, foram estudados neste trabalho, no que se refere aos produtos formados durante a fermentação. O grão de kefir é uma associação simbiótica de microganismo pertencente a diversas espécies incluindo no geral bactérias ácidas láticas (Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc), leveduras (Saccharomyces cereviseae) e bactérias ácidas acéticas (Acetobacter). O grão de tibet é, também composto por uma associação simbiótica de leveduras e bactéria ácida lática. No entanto, grãos de kefir e tibet são muitos similares em quantidade microbiológica, procedimento de cultivo, muito similar em estrutura e produtos de fermentação, mas diferem em aspecto visual. A voltametria cíclica e cromatografia líquida de alta eficiência, em fase reversa (HPLC) com detecção no UV em 210nm operando no modo de eluição isocrático, foram aplicadas para determinar ácidos orgânicos em leite fermentados pelos grãos kefir e do Tibet e em amostra de iogurte comercial. Em ambos os métodos utilizados os resultados obtidos mostraram a presença de ácidos orgânicos em leite e no leite fermentado pelos grãos kefir e do Tibet e em amostra comercial de iogurte. Essas matrizes mostraram eletroatividade em ultramicroeletrodo de ouro. E nas análises por HPLC foi comprovado a presença de ácidos orgânicos e em grandes quantidades para cinco ácidos dos oito presentes nas amostras. Neste trabalho, foi efetuada a determinação de 8 ácidos orgânicos. Nas amostras citadas foram identificados os ácidos lático, oxálico, pirúvico, acético, úrico, cítrico, succínico e fórmico. Esta identificação foi feita por comparação entre os tempos de retenção dos compostos nas amostras de leite fermentado com os tempos de retenção dos padrões dos ácidos injetados individualmente para a técnica de HPLC. E quanto a aplicação da voltametria na análise de leite fermentado, o grão de Tibet demonstrou maior resposta analítica entre corrente e concentração, comparado ao grão de kefir e amostra comercial de iogurte. Fazendo uma análise comparativa das duas técnicas a HPLC tornou-se mais adequada devido a maior seletividade. / The products formed during the milk fermentation using the kefir and tibet grains (popularly known species) were studied in this work. The kefir grain is a symbiotic association of microorganisms that includes several species of lactic acid bacteria (Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc), yeasts (Saccharomyces cereviseae) and acetic acid bacteria (Acetobacter). The tibet grain is also composed by a symbiotic association of yeasts and lactic acid bacteria. In spite of, the kefir and tibet grains are very similar in microbiologic components, cultivation procedure, structure and fermentation products, they differ in visual aspect. For the determination of the organic acids contained in fermented milk by the kefir or tibet grains and in a sample of commercial yogurt, the cyclic voltammetry and high performance liquid chromatography (HPLC) in reverse phase techniques were applied, the later was operated in isocratic elution mode with detection in the UV (210nm) region. In both techniques used, the obtained results showed the presence of organic acids in milk and in the fermented milk by the grains kefir and tibet and in the sample of commercial yogurt. Those matrixes showed electroactivity on a gold ultramicroelectrode and their analyses using HPLC was also possible. Thus, the presence of organic acids in great amounts for five acids of the eight presents in the samples was confirmed. In this work, the detection of 8 organic acids was carried out. In the mentioned samples were identified the lactic, oxalic, pyruvic, acetic, uric, citric, succinic and formic acids. This identification was performed by comparison among the retention times of the compounds in the samples of fermented milk with the retention times of the patterns of the acids, injected individually for the HPLC technique. Nevertheless, in the voltammetry application for the analysis of the fermented milk, the tibet grain demonstrated larger analytical signals (current – concentration relationship), compared to the kefir grain and the commercial sample of yogurt. Making a comparative analysis of the two techniques, HPLC became more appropriate due its larger selectivity.

Residuos de fármacos estão presentes em diversas matrizes ambientais e estudos focados na determinação destes tem ganhado grande importância nos últimos anos, devido ao aumento do consumo de medicamentos pela população. A questão do controle de resíduos de compostos farmacologicamente ativos no meio ambiente aquático foi reconhecida como uma das questões emergentes na Química Ambiental, e tem-se dado maior importância visto que os fármacos são encontrados em matrizes em estudos em concentrações de &mu;gL-1 e ngL-1. Nesta pesquisa estudou-se três fármacos antiflamatórios que são amplamente consumidos pela população: diclofenaco, nimesulida e paracetamol. O método analítico foi desenvolvido e validado para a determinação destes fármacos em amostras de águas superficiais da cidade de São Carlos (SP). Inicialmente foi feita a validação do método proposto segundo a Resolução DOQ-CGCRE-008 do INMETRO. Os limites de detecção, e de quantificação e inferior de quantificação do método para a determinação do diclofenaco, nimesulida e paracetamol, foram, respectivamente, 0,5; 1,1 e 1,1 &mu;gL-1. A linearidade, desvio-padrão relativo, exatidão e recuperação média para o diclofenaco foram, respectivamente, R de 0,99, 3,03%, 100,55% e 97,94%. Para a nimesulida, os valores de linearidade, desvio-padrão relativo, exatidão e recuperação, foram, R de 0,98, 2,43%, 101,46% e 100,67%. Já para o paracetamol obteve-se os seguintes valores para linearidade, desvio-padrão relativo, exatidão e recuperação, R de 0,99, 3,50%, 97,94% e 93,17%, respectivamente. Na segunda etapa deste estudo aplicou-se o método validado na análise de amostras de águas coletadas na cidade de São Carlos (SP). Para o método de extração utilizou-se a extração em fase sólida (SPE) e como técnica analítica utilizou-se o HPLC/DAD. Os resultados não indicaram a presença dos fármacos diclofenaco, nimesulida e paracetamol até o limite de detecção do método empregado. / Residues of drugs are present in various environmental matrices and studies focused on the determination of these have gained in importance in recent years, due to increased drug consumption by the population. The issue of control of residues of pharmacologically active compounds in the aquatic environment was recognized as one of the emerging issues in environmental chemistry, and has given greater importance since the drugs are found in studies in matrices at concentrations &mu;gL-1 and ngL-1. In this study was studied three drugs that are widely consumed by the population: diclofenac, nimesulide and acetaminophen. The analytical method was developed for the determination of these drugs in surface water samples from São Carlos (SP). Initially, made a validation of the method proposed second resolution DOQ-008-CGCRE INMETRO. The detection, quantification and lower quantification limits of method for determining of diclofenac, nimesulide and paracetamol were 0.5, 1.1 and 1.1 &mu;gL-1, respectively. The linearity, relative standard , accuracy and average recovery of the method for diclofenac were, respectively, R equal to 0.99, 3.03%, 100.55% and 97.94%. For nimesulide, the values of linearity, relative standard, accuracy and recovery were R equal to 0.98, and 2.43%, 101.46% and 100.67%. For acetaminophen obtained the following values for linearity, relative standard, accuracy and recovery, R equal to 0.99, 3.50%, 97.94% and 93.17% respectively. In the second stage of the study applied the validated method in the analysis of water samples collected in the São Carlos (SP). For extracting the drugs, SPE cartridges were used followed by HPLC / DAD. The results indicate the absense of the studied drugs diclofenac, nimesulide and acetaminophen down to the detection limits of the method employed.

O presente trabalho teve como ênfase avaliar a atividade herbicida de aleloquímicos em extratos aquosos de sementes da Canavalia ensiformis (feijão-de-porco) através de ensaios de alelopatia e determinação de compostos fenólicos com atividade alelopática, utilizando a técnica de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). Com este objetivo realizaram-se bioensaios de germinação, medida do crescimento da radícula e produção de biomassa em placas de Petri, usando como substrato solo e papel e como planta alvo as ervas daninhas corda-de-viola (Ipomoea sp.) e trapoeraba (Commelinna sp). Para os ensaios de alelopatia foram preparados extratos aquosos de sementes de Canavalia ensiformis em diferentes concentrações. Os bioensaios mostraram que os aleloquímicos presentes no extrato de feijão-de-porco quando aplicado em solo, têm um efeito fitotóxico menor do que aqueles bioensaios realizados em papel. Os resultados apontam que a espécie estudada apresenta potencial alelopático. Dentre os metabólitos secundários responsáveis pela atividade alelopática observada nos extratos desta espécie, estão os compostos fenólicos: ácido clorogênico, ácido ferúlico, ácido p-anísico e genisteína. As concentrações determinadas para os compostos fenólicos foram de 13,78 mg L-1 para o ácido clorogênico, 3,75 mg L-1 para o ácido ferúlico, 35,34 mg L-1 para o ácido p-anísico e 7,83 mg L-1 para a genisteína. Esses compostos apresentaram-se como fortes inibidores de germinação. Esta investigação mostra que na presença de solo os aleloquímicos presentes nesta leguminosa possivelmente diminuem sua atividade fitotóxica. / The objective of the present work was to study the herbicide activity of the allelochemicals in aqueous extracts from Canavalia ensiformis seeds through the allelopathy assays and phenolic compounds determination with allelopathi c activity, by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). With this goal, germination bioassays, radicle length and biomass production in Petri plates were done, using paper and soil as substrate and the weeds species Ipomoea grandifolia and Commelinna benghalensis as target plants. For the allelopathy assays aqueous extracts from Canavalia ensiformis seeds were prepared in different concentrations. The bioassays showed that the allelochemicals present in the Canavalia ensiformis seeds, has a less phytotoxic effect compared to the bioassays done in paper. The results show that the studied specie has allelopathi c potential. Among the secondary metabolites responsibles for that allelopathic activity in this specie, are founded the phenolic compounds: chlorogenic acid, ferulic acid, p-anisic acid and genistein. The concentrations for the phenoli c compounds were determined: 13,78 mg L-1 for chlorogenic acid, 3,75 mg L-1 for ferulic acid, 35,34 mg L-1 for p-anisic acid and 7,83 mg L-1 for genistein. These compounds present themselves as strong germination inhibitors. This study shows that the allelochemicals present in the Canavalia ensiformis seeds have a lesser phytotoxic activity in soil.

O presente trabalho teve como objetivo o desenvolvimento e validação de um método analítico para a especiação de mercúrio em água com preparação de amostra por microextração em sorvente empacotado (MEPS) e determinação das espécies de mercúrio utilizando cromatografia líquida de alta eficiência hifenada à espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado (HPLC-ICP-MS). Para isso foram otimizadas as condições do sistema cromatográfico, do sistema de detecção e do procedimento de extração, considerando os parâmetros que influenciam diretamente na eficiência da análise, como o solvente de eluição, o agente complexante, o número de ciclos de extração e a velocidade de amostragem da seringa semi-automática eVol®. As melhores condições para o preparo de amostra foram encontradas com o uso de ditizona 0,001% m/v como agente complexante e eluição com 50?L de fase móvel, composta por 2-mercaptoetanol 0,05% v/v + L-cisteína 0,4% m/v + acetato de amônio 0,06 mol.L-1. Esse método apresentou valores de limite de detecção (LOD) de 0,19ng/L, 0,13ng/L e 0,16ng/L e recuperação de 100 ± 3%, 112 ± 0,9% e 91 ± 0,9% para mercúrio inorgânico (IHg), metilmercúrio (MeHg) e etilmercúrio (EtHg), respectivamente. A precisão intra-dia para cada espécie apresentou valores inferiores a 6,2% e a precisão inter-dia, valores interiores a 8,3%. Finalmente, o método proposto é uma excelente alternativa para a especiação química de mercúrio em amostras de água, garantindo uma melhor sensibilidade e reduzido volume de amostra. Além disso, poderá ser uma boa opção para pré-concentração de espécies de mercúrio in loco em estudos de contaminação ambiental em locais de difícil acesso e com pouca infraestrutura. / The aim of this study was to develop and validate a novel preconcentration method for determination of mercury species in water using a microextraction by packed sorbent (MEPS) based protocol followed by high performance liquid chromatography hyphenated to inductively coupled plasma mass spectrometry (HPLC-ICP-MS). The optimized conditions of the HPLC and ICP-MS were determined and critical factors in MEPS protocol were established, including elution solvent, complexing agent, number of extraction cycles and sample flow rate of the semi-automated MEPS format (eVol®). The best sample preparation conditions were found with the use of dithizone 0,001% m/v as complexing agent and elution in 50?L of the mobile phase, containing 2-mercaptoethanol 0,05% v/v + L-cysteine 0,4% m/v + ammonium acetate 0,06 mol/L. The proposed method detection limit (LOD) was 0,19ng/L, 0,13ng/L and 0,16ng/L and the recovery was 100 ± 3%, 112 ± 0,9% and 91 ± 0,9% for inorganic mercury (IHg), methylmercury (MeHg) and ethylmercury (EtHg), respectively. The within-day precision was always lower than 6,2%, while the between-day precision was lower than 8,3% for the species determined. Finally, the proposed method is an excellent alternative for mercury speciation in water samples, ensuring a better sensitivity associated to small sample volume. Additionally, it may be a good option for preconcentration of mercury species in situ for environmental contamination studies in places of difficult access and poor infrastructure

A ezetimiba e a sinvastatina são fármacos hipolipidêmicos. A ezetimiba pertence à nova classe das 2 - azetidinona, inibidores e bloqueadores do colesterol intestinal. A sinvastatina pertence à classe dos inibidores competitivos da hidroxi-3-metilglutarilcoenzima A redutase (HMG-CoA), que é a última etapa regulada na síntese do colesterol. O objetivo do trabalho foi desenvolver e validar métodos por cromatografia liquida de alta eficiência (HPLC) e eletroforese capilar (CE), rápidos, seletivos e confiáveis para determinação dos hipolipidêmicos em formulações farmacêuticas. A separação cromatográfica foi realizada usando coluna Nano separation technologies (NST) Cianopropril (CN) (150 mmx 4,6 mm, com partícula 3,5 &#181;m), e eluição isocrático usando água purificada: acetonitrila (48:52, v/v); vazão 0,8 mL/min e volume de injeção de 20 &#181;L. A temperatura da coluna foi de 35 ºC e a detecção foi realizada com detector na região do UV em 238 nm. O método por cromatografia eletrocinética micelar (MEKC) foi desenvolvido utilizando capilar de sílica fundida 30 cm (comprimento efetivo) x 50 &#181;m d.i. e eletrólito constituído de tetraborato de sódio (TBS) 20 mmol L-1: dodecil sulfato de sódio (SDS) 30 mmol L-1, pH 9,0 ajustado com 10% ácido fosfórico: acetonitrila 12% v/v. O tempo de injeção foi de 3 segundos com pressão hidrodinâmica de 20 mbar, voltagem aplicada de 30 kV e detecção no UV em 238 nm. Os métodos analíticos foram validados de acordo com os requerimentos vigentes da ANVISA, ICH e Farmacopéia Americana. Portanto, os métodos propostos demonstraram ser lineares, precisos, exatos e adequados para quantificação simultânea da ezetimiba e sinvastatina em formas farmacêuticas sólidas. / Ezetimibe and simvastatin are hipolipidemic drugs. Ezetimibe belongs to a new class of 2 - azetidione, inhibitors and blockers of intestinal chrolesterol. Simvastatin belongs a class of competitive inhibitors of 3-hydroxymethylglutaryl-coenzyme A (HMG-CoA) reductase, which is the last regulated step in the cholesterol synthesis. The aim of this project was to develop and validate fast, selective and reliable chromatographic and electrophoretic methods, to determine hypolipidemic drugs in pharmaceutical formulations. The chromatographic separation was carried out on a Nano separation technologies (NST) Cyanpropyl (CN) (150 mm x 4,6 mm, 3,5 &#181;m), isocratic elution using purified water: acetonitrila (48:52 v/v), the flow rate was 0,8 mL/min and the injection volume was 20 &#181;L. The column temperature was kept at 35 ºC and detection wavelength was set at 238 mn. The micellar electrokinetic chromatographic method was developed using a fused silica capillary column 30 cm (effective length) x 50 &#181;m i.d, the electrolyte was constituted of 20 mmol L-1 tetraborate buffer solution: 30 mmol L-1 sodium dodecyl sulphate (SDS), pH 9.0 adjusted with 10% phosphoric acid: 12 % v/v acetonitrile. The injection time was 3 s at 20 mbar, the applied voltage was 30 kV and detection was set at 238 nm. The both methods were developed and validated according to ANVISA, ICH and US Pharmacopeia guidelines. Therefore, the proposed methods proved to be linear, precise, accurate and suitable for simultaneous quantitation of ezetimibe and simvastatin in solid pharmaceutical formulations.