Orientador: Yasmin Rodarte Carvalho / Co-orientador: Renata Falchete do Prado / Banca: Luana Marotta Reis de Vasconcellos / Banca: Ana Cristina Posch Machado / Resumo: As neoplasias de glândulas salivares compreendem cerca de 5% das neoplasias da região oral e maxilofacial. O estudo sobre a linfangiogênese pode permitir a melhor compreensão destas patologias. O objetivo deste estudo foi avaliar a relação entre as características histológicas, a expressão do fator de crescimento vascular endotelial linfático (VEGF-C), a densidade microvascular linfática (DML) e a proliferação celular, em neoplasias de glândulas salivares. Foram analisados 67 casos de neoplasias benignas e malignas dos arquivos do Laboratório de Patologia da FOSJC-UNESP. O diagnóstico das lesões foi confirmado pela análise de lâminas coradas por HE. O material foi submetido à reação imuno-histoquímica para avaliar a proliferação celular pela detecção do Ki-67, da DML pelo D2-40 e do VEGF-C pelo anticorpo anti-VEGF-C. Foi realizada análise quantitativa da DML e do índice de proliferação celular e semi-quantitativa do VEGF-C. Os resultados foram submetidos à análise estatística descritiva e inferencial utilizando o programa Minitab (versão 16.0), sendo aplicados os testes de Pearson, Kruskal Wallis e t-Student, adotando-se o nível de significância de 5%. Analisando as lesões separadamente, não houve significância na comparação entre o índice de proliferação celular e a DML com relação à expressão de VEGF-C, exceto no adenocarcinoma polimorfo de baixo grau, em que maior proliferação foi observada nos casos com forte marcação para VEGF-C. Em nenhuma neoplasia foi observada correlação entre o índice de proliferação celular e a DML. Comparando-se os grupos das neoplasias benignas (25 casos) e malignas (42 casos), verificou-se que o índice de marcação para o Ki-67 e a DML não apresentaram diferença estatística significante e que houve maior expressão de VEGF-C em neoplasias benignas. Concluiu-se que na maioria dos tumores de glândula... / Abstract: The salivary gland neoplasms comprise about 5% of all cancers of the oral and maxillofacial region. The study of lymphangiogenesis may provide a better understanding of these diseases. The aim of this study was to evaluate the relationship among histological features, expression of lymphatic vascular endothelial growth factor (VEGF-C), lymphatic vessel density (LVD) and cell proliferation in salivary gland neoplasms. Sixty seven cases of benign and malignant neoplasms of the Laboratory of Pathology FOSJC-UNESP were analyzed. The diagnosis of the lesions were confirmed by analysis of slides stained with HE. The material was subjected to immunohistochemical staining to evaluate cell proliferation by detection of Ki-67, LVD by D2-40 and VEGF-C by anti-VEGF-C. Quantitative analysis of LVD and cell proliferation index and semi-quantitative analysis of VEGF-C were performed. The results were analyzed by descriptive and inferential statistics using Minitab (version 16.0), applying Pearson, Kruskal Wallis and t-test, with a significance level of 5%. Analyzing the lesions separately, there was no significance when comparing cell proliferation index and LVD to the expression of VEGF-C, except in polymorphous low grade adenocarcinoma, in which a higher proliferation index was observed in cases with strong staining of VEGF-C. There was no correlation between cell proliferation and LVD in any neoplasm. Comparing the groups of benign (25 cases) and malignant neoplasms (42 cases), the labeling index for Ki-67 and LVD showed no statistically significant difference and there was increased expression of VEGF-C in benign lesions. It was concluded that in the majority of salivary gland neoplasms there is no relation among the rate of cell proliferation, the expression of VEGF-C and LVD and that the cellular proliferation does not correlate with the LVD. Between benign and malignant neoplasms, cel... / Mestre

Orientador: Paulo Sergio Cerri / Co-orientador: Juliane Maria Guerreiro Tanomaru / Banca: Manuel de Jesus Simões / Banca: Mario Tanomaru Filho / Resumo: BiodentineTM é um biomaterial à base de silicato de cálcio produzido, segundo o fabricante, com o intuito de apresentar propriedades físico-químicas e biológicas superiores ao MTA. Nosso objetivo foi avaliar a resposta tecidual promovida por BiodentineTM (BDT) e MTA Angelus Branco em subcutâneo de ratos. Foram utilizados ratos adultos distribuídos em 3 grupos (n=20/grupo), segundo o material preenchendo os tubos de polietileno implantados no subcutâneo: BDT, MTA e GC (controle, tubos vazios). Após 7, 15, 30 e 60 dias, os implantes e os tecidos adjacentes foram processados para parafina. Cortes longitudinais das cápsulas adjacentes aos implantes foram corados com H&E, tricrômico de Masson, Picrosirius e submetidos ao Alcian Blue (AB) e reações imuno-histoquímicas para IL-6 e FGF-1. Obteve-se a densidade numérica de células inflamatórias (CI), de células imunomarcadas para IL-6 e FGF-1 e de mastócitos AB-positivos, além da porcentagem de colágeno birrefringente. Os dados foram submetidos à ANOVA e teste Tukey (p≤0,05). O número de CI e de células imunomarcadas para IL-6 e FGF-1 foi significantemente maior aos 7 dias em todos os grupos. Diferenças significantes no número de células IL-6-positivas não foram observadas entre BDT e MTA aos 30 e 60 dias; aos 60 dias, diferenças significantes no número de CI também não foram detectadas. O número de células FGF-1-positivas foi significantemente maior no grupo BDT em comparação ao grupo MTA, em todos os períodos. A densidade numérica de mastócitos e a porcentagem de colágeno aumentaram significantemente ao longo do tempo. Aos 60 dias, o número de mastócitos e o conteúdo de colágeno foram significantemente maiores nos grupos BDT e MTA, respectivamente. A redução significante do processo inflamatório, concomitante à redução na imunoexpressão para IL-6, indica que ambos os materiais são biocompatíveis. A acentuada imunoexpressão de FGF-1 aos 7 dias... / Abstract: BiodentineTM is a new calcium silicate-based biomaterial which presents improved physicochemical and biological properties compared to MTA. The aim of this study was to evaluate the tissue reaction promoted by BiodentineTM (BDT) and MTA Angelus White in rat subcutaneous. Adult rats were distributed into 3 groups (n=20/group) according to the implanted materials: BDT, MTA or CG (Control group; empty tubes). After 7, 15, 30 and 60 days, the implants and adjacent tissues were fixed and embedded in paraffin. Longitudinal sections of the capsule adjacent to implants were stained with H&E, Masson's trichrome, Picrosirius and submitted to Alcian Blue (AB). Immunohistochemical reactions for IL-6 and FGF-1 were also performed. The number of inflammatory cells (IC), IL-6 and FGF-1 immunolabeled cells, AB-positive mast cells as well as birefringent collagen percentage were obtained. Data were statistically analyzed by ANOVA and Tukey test (p≤0.05). The number of IC and IL-6 and FGF-1 immunolabeled cells were significantly high at 7 days in all groups. At 30 and 60 days, significant differences in the number of IL-6-positive cells were not detected between BDT and MTA. At 60 days, statistical difference in the IC number was not observed between BDT and MTA groups. In all periods, the number of FGF-1-positive cells was significant higher in BDT group in comparison to MTA. The numerical density of mast cells and collagen percentage increased over time. At 60 days, mast cells number and collagen content were significantly high in BDT and MTA groups, respectively. A significant reduction of inflammatory process and IL-6 immunoexpression indicates that both materials are biocompatible. Intense FGF-1 immunoexpression at 7 days suggests that this factor may be responsible, at least in part, for fibroblast proliferation and subsequent collagen formation in the capsules. Since a strong correlation between mast cells number and collagen density was detected... / Mestre

Orientador: Christiane Pienna Soares / Banca: Sophie Françoise Mauricette Derchain / Banca: Maria Regina Sposto / Resumo: O mdm2 parece controlar o tráfego da proteína p53 do núcleo-citoplasma enquanto a proteína p27 é um inibidor de CDK que controla a fase G1 para S do ciclo celular. Em contraste, a catepsina B parece induzir um sinal de apoptose independente de caspase na presença do HPV. Entretanto, a influência da infecção pelo HPV na carcinogênese oral e o envolvimento na desregulação das proteínas do ciclo celular não são claras. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a associação entre a expressão de proteínas do ciclo celular, p27, mdm2 e catepsina B e câncer oral na presença do HPV. Cinqüenta e cinco biópsias orais representando lesões benignas (LB), lesões potencialmente malignas (LPM) e lesões malignas (LM). A detecção e tipagem do HPV (6/11,16,18, 31 e 33) foi realizada pela reação da polimerase em cadeia (PCR). A expressão quantitativa de p27, mdm2 e catepsina B foi analisada pela reação imunohistoquímica. Vinte e uma (38%) de 55 lesões orais foram positivas para HPV. O DNA do HPV 6/11 foi encontrado em 6 (33%), HPV 16 em 1(5%) e o HPV 18 em 14 (72%). Não foi encontrado HPV 31 e 33. De 55 biópsias, foi encontrada alta expressão de todas as proteínas: o p27 foi encontrado em 37 (67,2%) lesões, mdm2 em 17 (30,9%) e a catepsina B em 37 (67,2%). Entre lesões orais de HPV positivo, uma superexpressão de p27, mdm2 e catepsina B foi encontrada, respectivamente, em 6 (33%) de 18 lesões benignas, 4 (22%) de 18 lesões potencialmente malignas e 11 (57,9%) de 19 lesões malignas. Adicionalmente, o HPV16/18 (11/58%) foi detectado em lesões malignas com alta expressão de todas as proteínas. Nós concluímos que os tipos de HPVs de alto risco devem estar associados com carcinoma oral, bem como, com a superexpressão de p27, mdm2 e catepsina B. Estes resultados sugerem que os tipos de HPVs de alto risco podem desregular o controle do ciclo celular, contribuindo para a carcinogênese oral. / Abstract: Mdm2 seems to control p53 nucleus-cytoplasm traffic while p27 is a CDK inhibitor which control G1 to S phase of the cell-cycle. In contrast, cathepsin B is reported in HPVinduced apoptotic signalling caspase-independent. However, the influence of HPV infection in oral carcinogenesis and its involvement to this cell-cycle proteins dysfunction remain still unclear. The purpose of this study was to clarify the association between the expression of cell-cycle proteins, p27, mdm2 and cathepsin B and oral cancer HPV-related. Fifty-five oral biopsies presenting benign oral lesions (BL), potentially malignant lesions (PML) and malignant oral lesions (ML). HPV detection and typing (6/11, 16, 18, 31 and 33) was performed using polymerase chain reaction. p27, mdm2 and cathepsin B quantitative expression were performed by immunohistochemistry. Twenty one (38%) of the 55 oral lesions were positive for HPV, of which HPV6/11 DNA was found in 6 (33%), HPV 16 in 1(5%) e o HPV 18 in 14 (72%). No HPV positivity was found to HPV31 and 33. Of the 55 biopsies, a high expression of all proteins was found: to p27 in 37 (67,2%), mdm2 was observed in 17 (30,9%) slides, and cathepsin B in 37 (67,2%). Among HPV-positive oral lesions, an overexpression for mdm2, p27 and cathepsin B was found, respectively, in 6 (33%) out of 18 BL, 4 (22%) out of 18 PML and 11 (57,9%) out of 19 ML. In addition, HPV16/18 (11/58%) was detected in OSSC with high expression of all proteins. We conclude that high-risk HPV types might be associated with oral carcinoma, as well as, with the overexpression of mdm2, p27 and cathepsin B. These results suggest that high-risk HPV types might deregulate cell-cycle control, contribuiting to oral carcinogenesis. / Mestre

Introdução e objetivos: a patogênese da hepatopatia alcoólica envolve três mecanismos patogênicos. O primeiro corresponde à agressão direta do álcool e de seus resíduos metabólicos sobre os hepatócitos, o segundo é devido ao aporte de endotoxinas provenientes da circulação portal o que desencadeia uma resposta inflamatória inata, e o terceiro, uma provável resposta imunológica adquirida contra neoantígenos. Considerando a possibilidade deste último mecanismo patogênico ser similar ao da hepatite crônica, estudamos explantes de pacientes com cirrose alcoólica em abstinência e comparamos suas características imunoistoquímicas com cirróticos de etiologia viral C. Materiais e métodos: foram estudados imunoistoquimicamente o infiltrado linfocitário septal e perisseptal de 34 explantes de cirróticos alcoólicos e 40 explantes de cirróticos virais C. Resultados: na avaliação das colorações de HE, não houve diferença significativa entre os dois grupos. As alterações estatisticamente significativas encontradas foram: (a) nas C-VHC o componente T-CD8+ intenso tanto na hepatite de interface como no infiltrado septal, neste último acompanhado pelos T-CD4+; (b) nas C-HA intenso componente linfocitário B-CD20+ com presença de folículos linfóides nos septos fibrosos e, componente igualmente intenso, na hepatite de interface. Conclusões: a hepatite de interface também ocorre nas C-HA e não difere, nas preparações histológicas habituais, daquela encontrada na C-VHC. O infiltrado linfocitário septal e perisseptal T-CD4+ e T-CD8+ tende a ser mais difuso e intenso nas C-VHC e mais focal nas C-HA que apresenta um componente mais significativo de B-CD20+. O modelo por nós estudado, na medida em que afasta a ação direta do álcool e a da resposta inflamatória inata constitui um modelo promissor para o estudo da resposta inflamatória adquirida na patogênese da hepatopatia alcoólica. / Introduction and objectives: the pathogenesis of alcoholic liver injury involves different cell types of the liver and leucocytes present in the innate immune response. Two different pathways are known: mitochondrial direct injury and damage related to endotoxins proceeding from the portal circulation. An immune adaptive response as a third mechanism of alcoholic liver injury was suggested by Thiele et. al. Considering this possibility, a similar mechanism usually seen in chronic hepatitis may be present. We studied the main immunohistochemical features on explants livers from C-HA patients in abstinence and compared them with explants from C-HCV patients. Materials and Methods: an immunohistochemical study was achieved on 34 explants of the C-HA group of patients and on 40 explants of the C-HCV group. We focused our study on the septal lymphocyte inflammatory infiltrate and on interface hepatitis. Results: the C-HCV group presented a diffuse septal lymphocyte inflammatory infiltrate, and lymphocytes focally positive for T-CD4, T-CD8 and B-C D20. An interface hepatitis was seen in 90% of the samples and lymphocytes were strongly positive for T-CD8, weakly positive for T-CD4 and negative for B-CD20(55,6%) The C-HA group also presented a diffuse septal lymphocyte inflammatory infiltrate and lymphocytes focally positive for T-CD4, TCD8 and B-CD20. In a great number of samples (88,2 %) lymphoid follicles were identified. An interface hepatitis was seen in 70,6% of the explants and these lymphocytes were strongly positive for T-CD8 and B-CD20 and weakly positive for T-CD4. Conclusion: an interface hepatitis may also occur in C-HA. By removing the effects of direct alcoholic injury and those of the innate inflammatory response we strongly recommend this model to study the immune adaptive response in the pathogenesis of alcoholic liver disease.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:05:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Fundo de Auxílio aos Docentes e Alunos (FADA) / Programa de Apoio a Núcleos de Excelência (Pronex) / A distrofia muscular de Duchenne (DMD) é uma distrofia muscular que se expressa com déficit cognitivo em 20-30% dos casos. Apesar do cérebro destas crianças parecer normal, já foram encontradas alterações diversas, não explicando, porém o acometimento cognitivo. O gene da distrofina é muito grande e codifica a distrofina em várias isoformas. Deleções e duplicações em locais de ligação às isoformas distais como a Dp140, Dp71 favorecem a incidência de retardo mental. A distrofina se liga a um complexo de proteínas (CPAD), entre elas, as distroglicanas. Dentro do complexo das distroglicanas, a α-distroglicana tem sido demonstrada como importante no mecanismo, não só de estabilização da musculatura esquelética à contração e relaxamento musculares, mas também na sinaptogênese, migração neuronal e plasticidade neuronal. Seus diferentes papéis, na musculatura esquelética e no sistema nervoso central (SNC), nos levam a pensar sobre os mecanismos envolvidos em sua deficiência, bem como da distrofina, na fisiopatologia do déficit cognitivo dos pacientes com DMD. Foram avaliados 19 pacientes com DMD, sendo encontrada uma alta proporção (42,1%) com quociente de inteligência (QI) abaixo da média. Os pacientes apresentavam na época da biopsia muscular, entre 4 anos e 2 meses e 10 anos e 5 meses; e, na época das avaliações, entre 6 e 12 anos de idade. Dos 19 pacientes, 2 foram avaliados pelo Stanford-Binet. Dos 17 pacientes avaliados pelo WISC-III, 52,9% apresentaram um QI verbal menor do que a faixa média de inteligência, sendo que destes 29,4% um QI abaixo de 70. A proporção de pacientes com QI verbal dentro da faixa média de inteligência, isto é, entre a média inferior e a média superior, foi de 47%. Em nossa amostra de musculatura esquelética de biopsias de pacientes com DMD, obteve-se que, 89,5% dos pacientes apresentaram a imunoexpressão da α-distroglicana entre 0 e 25% do total das fibras musculares. Porém, um indivíduo apresentou uma imunoexpressão de 70,4%, e outro de 43,2%, ambos com performance cognitiva dentro da faixa média de inteligência, achado este não mencionado em literatura. Não houve uma relação estatisticamente significante entre os valores de QI total, verbal e de execução com a imunoexpressão da α-distroglicana em fragmentos musculares destes pacientes. A presença da α-distroglicana no cérebro, bem como da distrofina, sugere o seu papel na fisiopatologia do déficit cognitivo das crianças com DMD. Os mecanismos que envolvem a inteligência são complexos. Podemos atribuir fatores genéticos, estruturais, mas também devemos considerar os fatores ambientais e psicossociais, no caso de nossos pacientes, de grande valia no que se refere à carência de estímulos e oportunidades de aprendizado. / The Duchenne muscular Dystrophy (DMD) is a muscular dystrophy with cognitive impairment present in 20-30% of the cases. Despite of the fact that theses children’s brain looks like normal, it has already been bound a great variety of abnormalities, however not explaining the cognitive impairment. The dystrophin gene is very large and encodes several dystrophin isoforms. Deletions and duplications in linking sites to distal isoforms like Dp140, Dp71 favor mental retardation incidence. The dystrophin connects to a proteic complex (CDG), among these proteins, the dystroglicans. Within the dystroglycan complex, the α-dystroglycan, have been known as important in several mechanisms, not only at skeletal muscle stabilization at muscular contraction, but also at synaptogenesis, neuronal migration, neuronal plasticity. Its different roles, at skeletal muscle and Central Nervous System (CNS), bring us to think about the mechanisms involved when it is deficient, as well, as the dystrophin, at cognitive impairment physiopathology in DMD patients. Nineteen DMD patients were assessed, and a high proportion (42%) performed the intelligence quotient (IQ) below the average. The patients aged at the time of the muscle biopsy, between 4 and ten years, and, at the assessment time, between 6 and 12 years old. Among the 19 patients, 2 were assessed by the Stanford-Binet. Among the 17 assessed by WISC-III, 52.9% performed a verbal IQ below the average, and 29.4% below 70. The proportion of patients who performed an average verbal IQ, was 47%. In our muscle biopsies samples of DMD patients, 89.5% presented α-dystroglycan immunostaining between 0 and 25%. However, one patient presented a α-dystroglycan immunostaining of 70.4%, and the other 43.2% and who performed an average IQ, finding not mentioned in literature. There was no significant statistic relationship among total IQ, verbal IQ and execution IQ and α-dystroglycan immunostaining at these patients muscle samples. The presence of α-dystroglycan in the brain, as well as, the dystrophin, suggest their role on the pathophysiology of cognitive impairment in DMD children. The mechanisms involved in intelligence are complex. We can atribute genetic factor, structural ones, but also consider the environment and psychosocials ones, in the case of our patients, worthy if we consider the lack of stimulus and learning opportunities. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-03-25 / Objetivo: Avaliar histologicamente e através da imuno-histoquímica as alterações celulares decorrentes do tratamento com Luz Intensa Pulsada (LIP) na região cervical de portadores de poiquilodermia de Civatte (PC). Métodos: Foram estudados 14 pacientes com poiquilodermia de Civatte na região cervical. Os pacientes foram submetidos a três sessões mensais de Luz Intensa Pulsada (LIP). Foi feita uma biópsia prévia e outra após o término do tratamento. Para cada paciente foram confeccionadas cinco lâminas, perfazendo um total de 70 lâminas para exame histopatológico e imuno-histoquímica. Foram estudadas com as seguintes colorações: Hematoxilina-Eosina (HE), Tricrômio de Masson (para o colágeno), Verhoeff-van-Gieson (para as fibras elásticas), Fontana-Masson (para a melanina) e a imuno-histoquímica com o CD 34. Resultados: Observamos melhoria tanto da pigmentação quanto da textura da pele de todos os pacientes. Verificamos na coloração pelo Tricrômio de Masson a proliferação e compactação (neocolagenese), bem evidente de fibras colágenas na derme papilar fato também confirmado pela análise de imagem digital. Pela coloração Fontana-Masson observou-se regularização na distribuição do pigmento melânico; o padrão mosqueado melhorou. Verificamos pela coloração Verhoeffvan Gieson que as fibras elásticas aumentaram em número, sobretudo nos casos onde a densidade do colágeno aumentou. Na imuno-histoquímica também observamos que não houve alterações significativas nos vasos, após tratamento com a Luz Intensa Pulsada (LIP). Conclusões: Evidenciamos aumento significativo na densidade e intensidade das fibras de colágeno, aumento do número de fibras elásticas e redistribuição do pigmento melânico, quando comparamos os grupos antes e depois do tratamento com a Luz Intensa Pulsada (LIP). Em relação aos vasos, houve diminuição do diâmetro vascular em cinco pacientes (35,7%). / Objective: To assess through histological and immunohistochemical analyses the cell changes after Intense Pulsed Light therapy in the cervical region of patients with poikiloderma of Civatte. Methods: Fourteen patients with poikiloderma of Civatte in the cervical region were studied. They were submitted to three monthly sessions of Intense Pulsed Light. Biopsies were performed before and after treatment. Five slides were prepared for each patient summing up 70 slides for histological and immunohistochemical analyses. The slides were stained with hematoxilyn-eosin (HE), Masson trichrome (for colagen), Verhoeffvan- Gieson (for elastic fibers), Fontana-Masson (for melanin) and CD 34 immunohistochemistry. Results: Improvement in both skin pigmentation and texture was observed in all patients in Masson Trichrome staining, showed evident proliferation and compaction (neocollagenesis) of collagen fibers in the papillary dermis, which was confirmed by digital imaging analysis. By Fontana- Masson staining even distribution of melanin pigment was found; the mottled pattern improved. In slides stained by Verhoeff-van-Gieson, the elastic fibers increase in number, mainly in the cases with higher collagen density. In Immunohistochemistry, there were no significant alterations in vessels after Intense Pulsed Light therapy. Conclusions: A significant increase in density and intensity of collagen fibers, increase in number of elastic was observed in papillary dermis and redistribution of melanin when comparing the groups before and after treatment with Intense Pulsed Light. The vessel diameter was smaller in five patients (35,7%). / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2014-09-05T18:31:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 69296.pdf: 2396150 bytes, checksum: 6453587a423516cefeb368c7db601724 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-05T15:56:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 isabele_santos_ipec_dout_2011.pdf: 2396150 bytes, checksum: 6453587a423516cefeb368c7db601724 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2014-09-05 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas, Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A leishmaniose é uma doença infecto-parasitária que acomete seres humanos e animais, causada por protozoários do gênero Leishmania. As leishmanioses são importante problema de saúde pública em vários países e estão incluídas entre as seis endemias de maior relevância mundial. Classicamente a leishmaniose visceral canina (LVC) se caracteriza por caquexia progressiva, anemia, febre intermitente, linfadenomegalia generalizada, sinais oculares (conjuntivite, ceratoconjuntivite, uveite) e lesões cutâneas (dermatite exfoliativa, úlceras e alopecia). Para a confirmação do diagnóstico da LVC, é necessária a demonstração do agente etiológico nas amostras biológicas obtidas de lesões, aspirados de fígado, baço, medula óssea, pele íntegra ou de gânglios linfáticos. O presente estudo avaliou os exames citopatológico, histopatológico, imunohistoquímico e imunocitoquímico no diagnóstico da LVC, utilizando como padrão de referência a cultura parasitológica. Oitenta e um cães foram avaliados, foram incluídos no estudo 44 cães com isolamento em cultura parasitológica e caracterização de Leishmania (Leishmania) chagasi, isolada a partir de amostras de pele íntegra da orelha e/ou baço e/ ou lesão cutânea. Os cães foram submetidos à eutanásia e posteriormente a coleta de amostras biológicas para a realização do exame citopatológico (CP), exame histopatológico (HP), reação de imunocitoquímica (ICQ) e reação de imuno-histoquímica (IHQ). A maioria dos cães era do sexo masculino (61,3%; n=27) Treze cães (29,5%) foram provenientes do município do Rio de Janeiro e 70,5% (n=31) do município de Bauru-SP. A maioria dos cães apresentava bom estado geral (47,7%; n=21); 38,6% (n=17) estado geral ruim; 11,3% (n=5) estado geral regular. A presença de lesão cutânea foi observada em 11 (25%) animais. No CP foi possível à visualização de formas amastigotas em 29,5% (n=13) de raspados da escápula, 29,5% (n=13) de raspados da orelha; em 29.5% (n=13) de raspados do focinho; 45,5% (n=20) nos aspirados de medula óssea, 25% (n=11) nos aspirados de linfonodo cervical e 52,7% (n=23) nos aspirados do linfonodo poplíteo. No HP formas amastigotas foram observadas em 45,5% (n=20) de amostras de pele íntegra da escápula, 65,9% (n=29) do focinho e 52,3% (n=23) da orelha. Na ICQ formas amastigotas foram observadas em 47,8% (n=21) das amostras provenientes de pele íntegra da escápula, 68,2% (n=30) pele íntegra do focinho; 56,8% (n=25) pele íntegra da orelha; 63,6% (n=28) nos aspirados de medula óssea, 36,7% (n=16) nos aspirados de linfonodo cervical e 68,2% (n=30) nos aspirados do linfonodo poplíteo. Na IHQ formas amastigotas foram observadas em 52,3% (n=23) das amostras provenientes de pele íntegra da escápula, 88,6% (n=39) do focinho e 72,7% (n=31) da orelha. A IHQ dos fragmentos de pele íntegra do focinho apresentou maior sensibilidade quando comparado com CP e de raspados de pele íntegra da orelha, focinho, escápula e de lesões cutâneas e de aspirados de linfonodos e medula óssea e ao HP dos fragmentos de pele íntegra da escápula, do focinho e da orelha. A boa sensibilidade da IHQ em amostras biológicas obtidas de fragmentos de pele íntegra do focinho sugere a utilização desta técnica no diagnóstico parasitológico da leishmaniose canina, apesar do custo mais elevado, quando comparada ao CP e ao HP / Leishmaniasis is a parasitic infectious disease caused by pr otozoa of the genus Leishmania, that affects humans and animals. In many countries Leishmaniasis are important public health problem and are included among the six world's most significant endemic diseases. According to literature canine visceral leishmaniasis (CVL) is usuall y characterized by progressive emaciation, anemia, intermittent fever, generalized lymphadenopathy, eye signs (conjunctivitis, keratitis, uveitis) and skin lesions (exfoliative dermatitis, alopecia and ulcers). To grant CVL diagnosis, the identification o f the etiologic agent in biological samples obtained from lesions is primal. S ampling can be obtained from aspirates of liver, spleen, bone marrow, intact skin or lymph nodes. The aim of this study was to compare the cytopathological, histopathological, im munohistochemical and immunocytochemical diagnosis of leishmaniasis in dogs, using as reference the standard parasitological culture. Forty - four dogs with parasitological culture isolation and characterization of Leishmania (Leishmania) chagasi isolated an d from samples of intact skin of the ear and / or spleen and / or skin lesion, were included in the study. Subsequently the animals were euthanized and collection of biological samples for citopahatol ogy test (CP), histopathology ( H P ), immunocytochemistry (ICC) and immunohistochemistry (IHC). Most dogs were male (61.3%, n = 27). Thirteen dogs (29.5%) were from Rio de Janeiro and 70.5% (n = 31) from Bauru, Brazil. There were 47.7%, ( n = 21) intact dogs, 38.6% (n = 17) dogs in poor general health condition and 11.3% (n = 5) in regular general health state. S kin lesions were observed in 11 (25%) animals. In the C P was possible to identify the amastigotes in 29.5% (n = 13) from scapula scrapings, 29.5% (n = 13) of ear scrapings, 29.5% (n = 13) from snouts scra pings, 45.5% (n = 20) in bone marrow aspirates, 25% (n = 11) in cervical lymph node aspirates and 52.7% (n = 23) in the popliteal lymph node aspirates. In H P amastigotes were detected in 45.5% (n = 20) samples of shoulders , 65.9% (n = 29) snout and 52.3% ( n = 23) the ear healthy skin. In ICQ amastigotes were observed in 47.8% (n = 21) samples from shoulder intact skin, 68.2% (n = 30) intact snout skin, 56.8% (n = 25) intact ear skin , 63.6% (n = 28) in bone marrow aspirates, 36.7% (n = 16) in cervical lymph node aspirates and 68.2% (n = 30) in the popliteal lymph node aspirates. In IHC amastigotes were placed in 52.3% (n = 23) samples from shoulder healthy skin, 88.6% (n = 39) of snout and 72.7% (n = 31) of the ear. IHC from fragments of intact snout skin sho wed higher sensitivity when compared with CP and shaved intact skin of the ear, nose, scapula and skin lesions and lymph node aspirates and bone mar row and also compared with the H P fragments of intact shoulder skin, muzzle and ear . The good sensitivity o f IHC in biological samples obtained from fragments of intact snout skin suggests the use of this technique in parasitological diagnosis for canine leishmaniasis, despite th e higher cost compared to the CP and HP

Sá, Kelvia Miranda. Imunoexpressão de marcadores de linfócitos natural killer (nk), cd16+ e cd56+, em biópsias cutâneas de pacientes com hanseníase. 2015. 89 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-10-16T16:22:48Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_kmsá.pdf: 1739711 bytes, checksum: 871a53040708714d705afaf7a43824ac (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-10-16T16:24:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_kmsá.pdf: 1739711 bytes, checksum: 871a53040708714d705afaf7a43824ac (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-16T16:24:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_kmsá.pdf: 1739711 bytes, checksum: 871a53040708714d705afaf7a43824ac (MD5) Previous issue date: 2015 / Immune response to M leprae is determinant to leprosy evolution and NK cells are important constituents of the innate immune response and can contribute to the adaptive response activation. The aim of this study was to evaluate the immunoexpression of NK cells markers CD16+ and CD56+ in skin lesions of patients with leprosy, before any treatment. A total of 54 skin biopsies of patients with leprosy were evaluated by immunohistochemistry using rabbit anti-human CD16a (clone SP189) from Spring Bioscience® and mouse anti-human CD56 (clone 123C3) from Dako®, together with Envision Flex kit from Dako®. Nineteen cases were from tuberculoid (TT) clinical form, 14 were borderline (BT, BB, BL) and 20 were lepromatous (LL), while one case was from indeterminate form (I). Among them 31 (57,4%) were from male gender and 30 (55,5%) presented positive baciloscopy. The samples were collected at the “Centro de Dermatologia Dona Libânia” in Fortaleza, Ceará, Brazil, and were analysed at the “Laboratório de Técnicas Cito-histopatológicas Especiais do Departamento de Patologia e Medicina Legal da Universidade Federal do Ceará”. Positive controls for the CD16 and CD56 expression were lung tissue and carcinoid tumor, respectively. Fisher, Chi-square, Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests were used to statistical analysis and a p value of <0.05 was considered significant. Differences were observed when expression of CD16+ cells was compared between tuberculoid and borderlines forms (p=0.0329), as also among gender comparisons (p=0.0129). The CD16+ cells in the three different clinical forms groups were also statistically different achieving a p value of 0.0085, and showing a higher median of expression of CD16+ in the TT group. These data suggests that a protective immune response against M. leprae in leprosy requires a balance between NK cells subgroups (CD16+ and CD56+) and that the tuberculoid form presents higher levels of CD16+ cells expression when compared to borderlines and LL forms. In addition, the study suggests that there are possible hormonal or genetic influences on the distribution of NK cell function markers. / A resposta imunológica ao Mycobacterium leprae é componente determinante na evolução da doença. As células Natural Killer (NK) são constituintes importantes da resposta imune inata, podendo participar da ativação da resposta adaptativa. Este estudo objetivou avaliar a imunoexpressão de marcadores de células NK, CD16+ e CD56+, em lesões cutâneas de pacientes com hanseníase antes do tratamento, por imunoistoquímica. Foram analisadas 54 biópsias cutâneas de lesões de paciente com hanseníase. Sendo 19 casos da forma clínica tuberculóide (TT), 14 da forma borderline (BT, BB e BL) e 20 da forma lepromatosa (LL) e 1 caso da forma clínica indeterminada (I). Destes pacientes 31 (57,4%) eram do gênero masculino, 30 (55,5%) eram baciloscopia positiva. As amostras foram provenientes do Centro de Dermatologia Dona Libânia e analisadas no Laboratório de Técnicas Cito-histopatológicas Especiais do Departamento de Patologia e Medicina Legal da Universidade Federal do Ceará. Para a imunistoquímica foram utilizados os anticorpos monoclonais primários: rabbit anti-human CD16a (clone SP189) da Spring Bioscience® e o mouse anti-human CD56 (clone 123C3) da Dako®, juntamente com o kit Envision Flex da Dako®. Os controles positivos para CD16 e CD56 foram obtidos a partir de secções de tecidos de pulmões e tumor carcinóide, respectivamente. Os testes de Fisher, Qui-quadrado, Kruskal-Wallis e Mann-Whitney foram utilizados para análise estatística, sendo considerado significante quando p<0,05. A comparação entre a imunoexpressão de CD16+ em linfócitos teciduais da forma tuberculóide em relação às formas borderlines apresentou diferenças estatísticas significantes (p=0,0329), como também em relação ao gênero (p=0,0129). Através do teste Kruskal-Wallis, comparando os três grupos das formas clinicas da doença em relação ao número de células imunomarcadas com CD16+, foi observado que a mediana do grupo tuberculóide foi maior, conferindo p=0,0085. Pode-se concluir que o estudo sugere que uma resposta imunológica protetora na hanseníase requer um equilíbrio entre subgrupos de células NK CD16+ e CD56+, e que a forma tuberculoide cursa com predomínio dessas células NK citotóxicas quando comparadas às formas borderline e lepromatosas. Em adição, o estudo sugere que há possíveis influências hormonais ou genéticas na distribuição destes marcadores de função de células NK.

OLIVEIRA, Leidelamar Rosário Alves de. Perfil imuno-histoquímico da expressão de ativadores intracelulares com e sem pré-condicionamento com l-alanil-glutamina em modelo de isquemia e reperfusão em cérebros de gerbils. 2012. 100 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-07T13:38:17Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_lraoliveira.pdf: 3711389 bytes, checksum: 0a108b377dd292b83d0b25a1130fe793 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-03-07T15:11:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_lraoliveira.pdf: 3711389 bytes, checksum: 0a108b377dd292b83d0b25a1130fe793 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-07T15:11:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_lraoliveira.pdf: 3711389 bytes, checksum: 0a108b377dd292b83d0b25a1130fe793 (MD5) Previous issue date: 2012 / We investigated the protective effects of L-alanyl-Glutamine (L-ALN-GLN) through the immunohistochemical detection of proinflammatory mediators (IL-6, TNF, NF-kB e HO-1). This was achieved by means of a experimental and controlled study. Fifty-four male gerbils with a mean weight of 150g were used. They were divided randomly and equally into 3 groups: saline with ischemia and reperfusion (SIR), saline without ischemia and reperfusion (SSI) and with L-alanyl-glutamine and with ischemia and reperfusion (GIR). They were then redistributed into three subgroups according to time: T0 (maximum time of ischemia), T30 (30 minutes of reperfusion) and T60 (60 minutes of reperfusion), containing 6 animals each. They were pretreated with saline 2.0mL 0,9% intra-venously (iv) or L-ALN-GLN 0.75% G/KG (IV) 30 min before the start of the experiments. Cerebral ischemia was performed by bilateral occlusion of the common carotid arteries (CCAs) for a period of 15 minutes. After all surgical procedures and at the end of the three time periods the animals were sacrificed and brain tissue samples immediately obtained, which were fixed in 10% formalin solution for 24 hours in order being duly processed prior paraffin embedding. The samples (brain tissue) were collected at the end of each time periods. After this and through using a microtome, tissue sections were made at 4 microns and then placed on glass slides covered with L-polylysine, a proper way for performing immunohistochemistry. The streptavivin-biotin-peroxidase method was used. The quantitative analysis was made by means of counting immunocytochemically-stained cells, both neurons and glial cells, as observed at 400X magnification under an optical microscope Olympus model BX41. Ten fields were observed for each section, with a total of 4 sections per sub-group, always at start, looking for the internal pyramidal layer. Comparing the groups (SSI) and (SIR) a significant increase in NFkB-labeled cells in the subgroup SIR T30 (238,25±218,437 versus 1234,75±144,857); p=0,001 and SIR T60 (586,50±141,210 versus 1286,25±84,968); p=0,002 was observed. There was also a significant increase in the (SIR) subgroup, of the TNF immunostaining at T30 and T60 (263,75±42,906 versus 1015,50±102,796); p=0,01 in comparison to the SSI group. Regarding the cells expressing IL-6 positive labeling, comparing the groups (SIR) and (GIR), it was observed a significant decrease at T30 and T60 in the GIR group (536,25±119,837 versus 9,00±18,000); p=0,033. Comparing the groups (SIR) and (GIR), in relation to the NFkB immunolabeling, there was a significant decrease in group T30 in the GIR group (1234,75±144,857 versus 247,50±495); p=0,001 as well as at T60 (1286,25±84,968 versus 217,75±435,500); p=0,001. There was also a significant decrease, comparing the groups (SIR) and (GIR), of the TNF expression in (GIR) group at all time periods, chiefly at T60 (1015,50±102,796 versus 3,50±7,000); p=0,001. Regarding the immunostaining of the enzyme HO-1, there has been, comparing the groups (SSI) and (SIR), a significant decrease in the expression of this anti-oxidant protein in the SIR group. In the contrary, comparing the groups SIR and GIR, a substantial and significant expression of HO-1 was documented in the group treated previously by the L-alanil-glutamina, at times T30 and T60. In conclusion, the prior administration of L-alanil-glutamina in experiments of ischemia-reperfusion in Gerbils, disclosed a protective outcome, by promoting an in situ reduction in the expression of pro-inflammatory cytokines (TNF and IL-6) and nuclear transcription factor NFkB. At the same time, there has been an increase in the induction of the expression of the anti-oxidative enzyme HO-1, supporting a protective role of this preconditioning agent, chiefly against the inflammatory-oxidative stress. caused by the ischemia reperfusion brain injury model, in Gerbils / Foi investigado o efeito da administração prévia de L-alanil-glutamina (L-ALN-GLN) nas lesões de isquemia e reperfusão em cérebros de gerbils através da detecção imunohistoquímica da expressão de mediadores pró-inflamatórios e da defesa anti-oxidante (IL-6, TNF, NF-kB e HO-1). Trata-se de um estudo experimental, controlado, utilizando 54 gerbils machos, com peso médio de 150g, distribuídos aleatoriamente em 3 grupos: salina sem isquemia e reperfusão (SSI), salina com isquemia e reperfusão (SIR), L-alanil-glutamina com isquemia e reperfusão (GIR), redistribuídos em 3 subgrupos: T0 (tempo máximo de isquemia), T30 (30 min de reperfusão) e T60 (60 min de reperfusão), com 6 animais por subgrupo. Foram pré-tratados com solução salina 2,0 mL 0,9% via endovenosa (e.v.) ou L-ALN-GLN 0,75g/Kg (e.v.), 30 min antes do início dos experimentos. A isquemia cerebral foi induzida pela oclusão bilateral das artérias carótidas comuns (ACCs), por um período de 15 minutos. Após todos os procedimentos cirúrgicos e ao final dos três tempos 0, 30, 60 minutos, os animais foram sacrificados e tiveram os tecidos cerebrais removidos e fixados em formol a 10% por 24 horas, a fim de serem devidamente processados para inclusão em parafina. Após esse procedimento, foram feitos cortes de 4 µm em micrótomo e colocados em lâminas de L-polilisina, apropriadas para a realização da imunohistoquímica. Foi utilizado o método de estreptavidina-biotina-peroxidase. A avaliação quantitativa foi feita por meio da contagem das células nervosas imunomarcadas, tanto neurônios quanto células da neuroglia, observadas com aumento de 400X em microscópio óptico modelo Olympus BX41. Foram observados dez campos de cada corte, com um total de 4 cortes por subgrupo, procurando-se sempre iniciar pela camada piramidal interna. Nas comparações entre os grupos (SSI) e (SIR) houve um aumento significante nas células NFkB-posittivas no grupo SIR nos tempos T30 (238,3±218,4 versus 1234,8±144,9); p=0,000 e T60 (586,5±141,2 versus 1286,3±85,0); p=0,000. Verificou-se também um aumento significante do TN no grupo SIR nos tempos T30 (214,0±17,3 versus 333,0±395,6); p=0,999 e fortemente, em T60 (263,8±42,9 versus 1015,5±102,8); p=0,00 e observou-se um aumento significante da IL-6 no tempo T60 no grupo SIR em comparação ao grupo SSI, (206,8±248,3 versus 316,0±365,4); p=0,999. Entretanto, as células marcadas pela HO-1, no grupo SIR, comparativamente ao grupo SSI, diminuíram significativamente nos tempos T30 (25,8±3,9 versus 11,3±13,0) p=1,000 e T60 (18,5±7,6 versus 9,8±13,7) p=1,000. Para as células expressando marcação para as citocinas IL-6 em T0 (311,0±246,5 versus 14,8±29,5); p=0,817. T30 (536,3±119,8 versus 9,0,3±18,0); p=0,033. T60 (316,0±365,4 versus 28,5±57,0); p=0,591. E TNF em T0 (30,3±36,0 versus 3,5±7,0); p=1,000 e T30 (333,0±395,6 versus 3,5±7,0); p=0,503, T60 (1015,5±102,8 versus 3,5±7,0); p=0,000 comparando-se os grupos (SIR) e (GIR), observou-se uma diminuição significante, em todos os tempos, no grupo GIR, contrariamente à imunomarcação da HO-1, que aumentou significativamente no grupo (GIR) tratado pela L-alanil-glutamina em T0 (32,5±9,7 versus 0,0+0,0); p=1,000. T30 (11,3±13,0 versus 6,8±13,5); p=1,000 e T60 (9,8±13,7 versus 7,5±15,0); p=1,000. Nas comparações entre os grupos (SIR) e (GIR), em relação ao NFkB, houve uma diminuição significante no grupo GIR em T30 (1234,8±144,9 versus 247,5±495,0); p=0,000 e T60 (1286,3±85 versus 217,8±435,5); p=0,000. Em conclusão, a administração prévia de L-alanil-glutamina, no presente experimento de isquemia/reperfusão cerebral, em gerbils, revelou efeito protetor da mesma, ao promover redução in situ na expressão de citocinas e fator de transcrição de genes pró-inflamatórios: TNF, IL-6 e NFkB. Concomitantemente, houve indução aumentada da expressão da enzima antioxidante HO-1, corroborando a ação protetora deste nutracêutico na injúria de isquemia/reperfusão, mormente do estresse inflamatório-oxidativo, em gerbils

TEIXEIRA, André Costa. Avaliação imuno-histoquímica dos marcadores de angiogênese VEGF e angiopoietina-2 em carcinoma hepatocelular e lesões precursoras em explantes de pacientes cirróticos. 2016. 67 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-29T13:31:37Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_acteixeira.pdf: 3325877 bytes, checksum: 48fafcbfab6d9c28ab3095e17cdf9d26 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-03-29T13:51:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_acteixeira.pdf: 3325877 bytes, checksum: 48fafcbfab6d9c28ab3095e17cdf9d26 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-29T13:51:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_acteixeira.pdf: 3325877 bytes, checksum: 48fafcbfab6d9c28ab3095e17cdf9d26 (MD5) Previous issue date: 2016 / Hepatocellular carcinoma (HCC) is a global health problem and is associated with chronic liver disease, especially in the cirrhotic phase. This tumor can be preceded by precursor lesions, namely low and high grade dysplastic nodules, and regenerative nodules, typical of cirrhosis. The current study evaluated the immunohistochemical expression of VEGF and angiopoietin-2 in HCC and precursor lesions is a single institution series of liver explants between 2013-2015 using tissue microarray methods. Immunohistochemical variables were correlated with angiogenesis and prognostic parameters. 107 nodules from 67 patients were studied, including 26 HCC and 5 dysplastic nodules. There was no significant epidemiologic difference between HCC, dysplastic nodules and regenerative nodule groups. Angiopoietin-2 was significantly more expressed in HCC nodules when compared with regenerative lesions (p < 0,0001*). VEGF and Ang-2 expression correlated with each other (p=0,006) and with number of unpaired arteries within nodules (p=0,03 – VEGF) and with the percentage of CD34 positive sinusoids (p < 0,0001 – VEGF and p< 0,007 – Ang-2). There was no significant correlation between any of the immunohistochemical parameters with clinical staging, number of gross lesions and histologic grade in cases of HCC. Angiopoietin-2 had a sensitivity of 54% and 96,25% of specificity for HCC diagnosis, and VEGF had a sensitivity of 69,23% and specificity of 31,25%. Our study shows that Ang-2 may be a good marker for HCC diagnosis when compared to others that are routinely used for this purpose. VEGF is not a good marker due to its lack of specificity, although other studies showed that it may be associated with prognostic parameters. Finally, our data reinforce the importance of angiogenesis evalutation in the development of HCC and its potential applicability as a diagnostic tool. / O carcinoma hepatocelular (CHC) constitui um problema de saúde global e está relacionado a hepatopatias crônicas em fase de cirrose. Esta neoplasia é geralmente precedida por lesões precursoras denominadas nódulos displásicos de baixo grau (LGDN) e alto grau (HGDN), os quais por sua vez são provenientes dos nódulos regenerativos (NR) típicos da cirrose. Este trabalho avaliou a expressão imuno-histoquímica dos marcadores VEGF e Angiopoietina-2 no CHC e nas lesões precursoras de explantes de pacientes cirróticos transplantados no Hospital Geral de Fortaleza nos anos de 2013 a 2015, correlacionando esta expressão a outros parâmetros de angiogênese e prognósticos. Foram incluídos no estudo 107 nódulos de 67 pacientes com CHC e/ou lesões precursoras para confecção de “tissue microarray” (TMA). Não houve diferenças demográficas entre os pacientes com CHC e nódulos displásicos ou regenerativos. O marcador Angiopoietina-2 apresentou diferença de imunoexpressão entre as classes de nódulos (p < 0,0001*), sendo maior nos pacientes com CHC. Os marcadores VEGF e Angiopoietina-2 mostraram correlação significativa entre si (ρ=0,006) e com outros parâmetros, tais como número de artérias (p=0,03 para VEGF) e positividade à imuno-histoquímica para CD34 (p < 0,0001 para VEGF e p = 0,007 para Ang-2). Não houve associação entre os marcadores avaliados e parâmetros utilizados para determinação de estadiamento e prognóstico do CHC, tais como tamanho, número de lesões no explante e grau histológico. A Angiopoietina-2 apresentou sensibilidade de 54% e especificidade de 96,25% para o diagnóstico de malignidade, enquanto o VEGF apresentou sensibilidade de 69,23% e especificidade de 31,25%. Nosso estudo mostrou que a angiopoietina-2 representa um bom marcador para o diagnóstico do CHC quando comparado aos que são utilizados atualmente, enquanto o VEGF, embora tenha apresentado correlação com parâmetros prognósticos em outros estudos, não se mostra um bom marcador por sua baixa especificidade. Por fim, os dados reforçam a importância de melhor avaliação da angiogênese no desenvolvimento do CHC e seu papel no diagnóstico anatomopatológico destas lesões.