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Avaliação comparativa da viabilidade celular imediata após osteotomia para implantes com fresas e piezocirurgia em tíbias de coelhos : análise imunoistoquímica /Pereira, Cassiano Costa Silva. January 2010 (has links)
Resumo: O propósito desse trabalho foi avaliar o efeito da osteotomia para implantes sobre a viabilidade celular óssea imediata, comparando a utilização de fresas do sistema convencional com a piezocirurgia em tíbias de coelhos. Foram utilizados 6 coelhos machos, divididos em 2 etapas: (1) Fresas - 5 grupos (G1 a G5) correspondentes às osteotomias 10, 20, 30, 40 e 50 vezes, respectivamente. Cada leito ósseo recebeu a sequência de fresas: lança e helicoidais de 2,0 mm, 2,8 mm, 3,0 mm e 3,15 mm; (2) Piezocirurgia - 5 grupos (P1 a P5) correspondentes às osteotomias 10, 20, 30, 40 e 50 vezes, respectivamente, efetuadas pela sequência de pontas de 2,0 e 3,0 mm, mediante vibração ultrassônica piezoelétrica. As áreas osteotomizadas foram coletadas e processadas laboratorialmente. A análise imunoistoquímica demonstrou equilíbrio das expressões de OPG e RANKL, ou seja, formação e reabsorção óssea, tanto nas osteotomias com fresas, quanto na piezocirurgia, embora mais intensas nesta última. A expressão de OC apresentou-se bastante intensa nos grupos de piezocirurgia, mas com redução da imunomarcação a partir da 30ª osteotomia, enquanto manteve-se constante nos grupos fresados. A CAS3 evidenciou a viabilidade osteoblástica a partir da 20ª osteotomia com piezocirurgia e manteve-se constante até a 50ª. No grupo de fresas, notou-se aumento gradativo da expressão dessa proteína, conforme o aumento do número de osteotomias. De acordo com a metodologia aplicada, foi possível concluir que a piezocirurgia propicia maior viabilidade celular osteoblástica do que o sistema de fresas convencional / Abstract: The purpose of this study was to evaluate the effect of the osteotomy implant on bone cell viability immediately, comparing the use of conventional drilling system with piezosurgery® in tibiae of rabbits. We used 6 male rabbits were divided into 2 stages: (1) Drilling - 5 groups (G1 to G5) corresponding to the 10 osteotomies, 20, 30, 40 and 50 times respectively. Each received a bone bed following drills: Spear drill and 2.0 mm, 2.8 mm, 3.0 mm and 3.15 mm helicoidal drills, (2) Piezosurgery® - 5 groups (P1 to P5) corresponding to the 10 osteotomies, 20, 30, 40 and 50 times, respectively, analyzed by the sequence of inserts 2 and 3 mm by piezoelectric ultrasonic vibration. The receptor-beds were collected and processed in a laboratory. The immunohistochemical analysis showed balance expressions of OPG and RANKL, ie bone formation and resorption in both the osteotomies with drills and piezosurgery®, although more intense in the latter. The expression of OC had become quite intense in piezosurgery® groups, but with reduced immunostaining from the 30th osteotomy, while remained unchanged in groups drilled. The CAS3 showed the viability of the osteoblast from the 20th osteotomy with piezosurgery® and remained constant until the 50th. In the group of drills noticed a gradual increase in the expression of this protein, as the increase in the number of osteotomies. According to the methodology, it was concluded that the piezosurgery® provides greater osteoblastic cell viability than the system of conventional drilling / Orientador: Roberta Okamoto / Coorientador: Cristina Antoniali Silva / Banca: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Darceny Zanetta Barbosa / Mestre
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Infecção por Leishmania chagasi em gatos com dermatopatias provenientes de área endemica para Leishmaniose visceral /Vides, Juliana Peloi. January 2010 (has links)
Orientador: Mary Marcondes / Banca: Marcia Marinho / Banca: Marcia Dalastra Laurenti / Os anexos referem-se a resultados individuais da pesquisa / Resumo: Leishmaniose felina foi descrita pela primeira vez por Sergent e colaboradores em 1912 e, desde então, vários relatos de casos clínicos encontramse dispostos na bibliografia mundial. O objetivo do presente estudo foi pesquisar a infecção por Leishmania chagasi em 55 gatos com dermatopatias provenientes do município de Araçatuba, São Paulo, Brasil, área endêmica para leishmaniose visceral. A avaliação desses animais foi realizada por meio de exame parasitológico direto de órgãos linfóides; exame histopatológico e reação de imunoistoquímica para pesquisa de formas amastigotas do parasito em pele hígida e lesionada; ensaio imunoenzimático (ELISA) indireto e a reação de imunofluorescência indireta para pesquisa de anticorpos antiLeishmania chagasi; além da pesquisa de coinfecções por vírus da imunodeficiência felina e vírus da leucemia felina e ainda, nas lesões cutâneas, a pesquisa de ácaros, fungos e bactérias coexistentes. Dos 55 gatos avaliados, foram identificados 27 animais com leishmaniose visceral. Destes, 12 (44,4%) foram positivos nos exames parasitológicos de órgãos linfóides e da pele, 11 (40,7%) por sorologia e quatro (14,8%) por ambos os métodos. O exame histopatológico evidenciou a presença de formas amastigotas de Leishmania chagasi no interior de macrófagos da derme em apenas um dos gatos e, a reação de imunoistoquímica identificou o parasito em nove animais, incluindo aquele positivo na histopatologia de pele. Do total de animais positivos para leishmaniose visceral foi possível identificar a presença de anticorpos antivírus da imunodeficiência felina em cinco (18,5%). Ainda nesses animais, observouse o crescimento de colônias de Trichophytom spp., Microsporum spp., Aspergillus spp., Candida spp., Staphylococcus spp., Streptococcus spp. e Pseudomonas spp. Levandose em consideração a elevada ocorrência de Leishmania chagasi em gatos com lesões cutaneas / Abstract: Feline leishmaniasis was first described by Sergent et al. in 1912 and since then several reports of clinical cases were reported worldwide . The aim of this study was to investigate the infection by Leishmania chagasi in 55 cats with skin diseases from the municipality of Araçatuba, São Paulo, Brazil, an endemic area for visceral leishmaniasis. The evaluation of these animals consisted in direct parasitological examination of lymphoid organs, histopathological and immunohistochemical reaction for detection of amastigotes in healthy and lesioned skin and serology for visceral leishmaniasis by immunosorbent assay (ELISA) and indirect immunofluorescence. We also searched for possible coinfections with feline immunodeficiency virus (FIV) and feline leukemia virus (FeLV), and for the presence of mites, fungi or bacteria in skin lesions. From the 55 cats studied, we identified 27 animals with visceral leishmaniasis. Of these, 12 (44.4%) were positive in parasitological evaluation of lymphoid organs and skin, 11 (40.7%) by serology and four (14.8%) by both methods. Amastigote forms of Leishmania chagasi were evidenced, by histopathology, within macrophages in the dermis of only one cat. Immunohistochemical reaction identified the parasite in nine animals, including the one positive by histopathological examination. In five cats infected by Leishmania chagasi we identified the presence of antibodies against feline immunodeficiency virus (FIV). We also observed Trichophytom spp., Microsporum spp., Aspergillus spp., Candida spp., Staphylococcus spp., Streptococcus spp. and Pseudomonas spp. in one animal. Based on the evidence of the high occurrence of Leishmania chagasi infection in cats with skin lesions of this study, one must include visceral leishmaniasis in the differential diagnosis of skin diseases in cats from endemic areas / Mestre
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Caracterização da resposta imune celular pela expressão imunoistoquímica de CD4, CD8, CD28, CD152, CD56 e FOXP3 em carcinoma mamário de fêmeas caninas /Tiosso, Caio de Faria. January 2012 (has links)
Orientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Banca: Maricy Apparicio Ferreira / Banca: Marcela Marcondes Pinto Rodrigues / Resumo: O estudo dos tumores mamários em cadelas revela-se como um excelente modelo para a investigação das neoplasias mamárias em mulheres e tanto no homem quanto nos animais a resposta imune pode interferir no desenvolvimento de neoplasias. Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia e estimulação do sistema imune celular em tumores mamários de fêmeas caninas por meio da expressão de CD4, CD8, CD4+CD25+ (Foxp3), CD28, CD152 e CD56 (NK). A avaliação da expressão desses marcadores foi avaliada por imunoistoquimica, utilizando-se o método estreptoavidina-biotina-peroxidase. Para a realização desse estudo foram coletadas 20 amostras de tumores mamários de fêmeas caninas e essas divididas de acordo com a classificação histopatológica em 2 grupos: 10 carcinomas simples e 10 carcinomas complexos. Em relação aos resultados não se observou diferenças quanto à quantificação das células imunomarcadas quando comparadas segundo o tipo tumoral. No caso dos carcinomas simples evidenciou-se diferença entre a quantificação das células imunomarcadas (P< 0,05) pelo anticorpo CD28 (p=0,03) e Foxp3 (p=0,01) sendo menores que todas as demais marcações. Já para os carcinomas complexos houve diferença entre a quantificação das células imunomarcadas (P= 0,05) pelo anticorpo CD-152 que apresentou valor maior que as demais marcações com exceção do CD8. Os marcadores CD28, CD56 e Foxp3 foram menores que o CD8 (p=0,01) sendo o Foxp3 menor que todos os outros marcadores. No presente estudo observou-se que existe um controle negativo do sistema imune em ambos os casos, porém esse controle negativo foi mais evidente no carcinoma complexo / Abstract: The mammary tumor study in female dogs is revealed as an excellent model for the investigation of breast tumors in humans. On both species, the immune system can interfere on neoplasia progression. The aim of this study was to evaluate the immunolocalization and quantification of CD4, CD8, CD4+CD25+ (Foxp3), CD28, CD152 and NK in tumour lymphocyte infiltration, to evaluate the efficacy of stimulation and immune system defense in canine mammary carcinoma. The expression of these markers using immunohistochemistry was made by streptoavidin-biotin peroxidase method. The tissues were collected from twenty mammary carcinomas, subdivided in ten simple carcinomas and ten complex carcinomas of twenty female dogs. This study identified no significant differences on quantification of positive cellular staining in simple carcinoma compared with complex carcinoma. The samples of simple carcinoma resulted significant differences on positive staining between the antibodies CD28 (p=0,03) and Foxp3 (p=0,01) and these markers revealed less quantitative staining compared with the others markers (CD4, CD8, CD152 and NK). The samples of complex carcinoma resulted significant differences on cellular staining quantification by the antibody CD152 (p<0,05) compared with the others markers (CD4, Foxp3, CD28, and NK) with exception when compared with CD8. The immune quantification of positive cellular staining about the markers CD28, CD56 and Foxp3 were smaller than CD8 (p=0,01), and the Foxp3 was smallest than those others markers. It was concluded that exist a negative control of immune system to complex and simple mammary carcinoma, but, this negative control was more significant in female dogs with complex mammary carcinoma / Mestre
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Avaliação imuno-histoquímica da remodelação óssea alveolar em ratos diabéticos durante a movimentação ortodôntica associada à laserterapia /Santana-Melo, Gabriela de Fátima. January 2012 (has links)
Orientador: Mônica Fernandes Gomes / Banca: Cristiane Yumi Koga Ito / Banca: Maria das Graças Vilella Goulart / Resumo: O Diabetes mellitus é um distúrbio metabólico crônico e sua prevalência vem aumentando de forma exponencial, particularmente nos países em desenvolvimento. Concomitantemente tem aumentado a acessibilidade ao tratamento ortodôntico, incluindo pacientes diabéticos, tornando o processo de remodelação óssea frente aos estímulos ortodônticos motivo de grande preocupação. A procura por meios que possam melhorar esse processo é uma realidade atual, a aplicação do laser de baixa potência durante a movimentação ortodôntica pode ser de grande valia, principalmente com o descontrole glicêmico. Desta forma o objetivo deste trabalho foi analisar por meio de reações imuno-histoquímicas, o processo de remodelação óssea alveolar, decorrente do movimento ortodôntico em ratos diabéticos e a influência da aplicação do laser de baixa potência AsGaAl durante o período experimental de 7, 14 e 21 dias. Foram utilizados 60 ratos machos Wistar, divididos em 4 grupos por período: Grupo Controle (C), Grupo Laser (L), Grupo Diabetes (D) e Grupo Diabetes-Laser (D-L). Para a indução do diabetes foi utilizada uma dose única de aloxano (40mg/kg), a glicemia foi mensurada e sendo os ratos considerados diabéticos foram submetidos a uma força ortodôntica de 20cN, assim como todos os animais dos grupos (C) e (L). Os grupos (L) e (D-L) foram tratados com laser de baixa potência AsGaAl em dias intercalados até a eutanásia. Foram realizadas análises histomorfológicas, reação imuno-histoquímica e histomorfometria para os anticorpos RANK-L e OPG do primeiro molar inferior direito, submetido à movimentação ortodôntica. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente mediante os testes de variância (ANOVA) e TUKEY (P< 0,05)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Diabetes mellitus is a chronic metabolic disorder and its prevalence has been increasing exponentially, particularly in developing countries. At the same time the accessibility to orthodontic treatment has increased, including diabetic patients, making the point of process of bone remodeling in the face of orthodontic stimuli of great concern. The search for ways they can improve this process is a current reality, the application of low power laser during orthodontic movement can be of great value, especially with the loss of glycemic control. Thus, the objective of this study was to analyze by immunohistochemical reactions, the process of alveolar bone remodeling, due to orthodontic movement in diabetic rats and the influence of application of low power laser GaAlAs during the experimental period of 7, 14 and 21 days. Sixty male Wistar rats were divided into four groups: Control (C), Laser Group (L), Diabetes Group (D) and Diabetes Group-Laser (DL). For the induction of diabetes a single dose of alloxan (40mg/kg) was used, considered diabetic by blood glucose measure nurts and the molar was subjected to a force orthodontic 20cN as well as all the animals of group (C) and (L .) Groups (L) and (DL) were treated with low power GaAlAs laser every other day until euthanasia. Analyzes were performed by histomorphology, immunohistochemistry and histomorphometry for antibodies RANK-L and OPG in the mesial and distal and mesial interradicular septum of the interdental septum of the alveolar bone of the lower right first molar, subjected to orthodontic movement. The data were statistically analyzed by means of tests of variance (ANOVA) and Tukey is tests (P<0.05). Based on these results, it can be concluded that there was effectiveness of GaAlAs laser radiation during orthodontic movement, since the pathophysiology of diabetes... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Correlação entre a presença de antígenos de Leishmania sp, linfócitos T CD3+ e B CD79+ e alterações histopatológicas no tecido renal de cães com leishmaniose visceral /Leite, João Henrique Artero de Carvalho. January 2012 (has links)
Orientador: Mary Marcondes / Banca: Wagner Luis Ferreira / Banca: Marcia Dalastra Laurenti / Resumo: O presente estudo teve por objetivo correlacionar as alterações laboratoriais, histopatológicas e a presença de linfócitos T CD3+ e linfócitos B CD79+, com a presença de Leishmania sp no tecido renal de cães naturalmente acometidos por leishmaniose visceral. Para tanto foi utilizado um grupo (G1) constituído por 24 animais com formas amastigotas de Leishmania sp. no tecido renal, e outro (G2) composto por 43 cães sem evidências imuno-histoquímicas da presença do parasito nos rins. A prevalência de doença renal na população estudada foi de 100% nos animais de G1 e 56,09% de G2. Todos os cães de G1 e 53,6% dos cães de G2 possuíam relação proteína/creatinina urinária (P/C U) maior que 0,5, evidenciando-se uma correlação positiva entre a ocorrência de proteinúria intensa e a presença de Leishmania sp. no tecido renal (p<0,001). Todos os cães de G1 e 88,4% dos cães de G2 apresentavam alterações glomerulares, sendo que a presença do parasito nos rins esteve correlacionada com uma maior prevalência e intensidade das lesões (p<0,001). Imunomarcações para linfócitos T CD3+ foram observadas em 100% dos cães do grupo 1 e 97,7% do grupo 2, havendo uma correlação entre a presença de formas amastigotas no tecido renal e a intensidade do infiltrado inflamatório (p<0,0005). Imunomarcações para linfócitos B CD79+ foram observadas em todos os cães do grupo 1 e em 55,8% do grupo 2 (p < 0,0001). Nos cães com parasitos no tecido renal observou-se uma maior intensidade do infiltrado de linfócitos B (p<0,0001). A presença de Leishmania sp, linfócitos T CD3+ e de linfócitos B CD79+ nos rins de cães naturalmente acometidos por leishmaniose visceral confirmam a participação do parasita, da imunidade celular e da imunidade humoral na patogênese da lesão renal / Abstract: The aim of this study was to correlate the laboratory and histopathological changes and the presence of CD3+T and CD79+ B cells with the presence of Leishmania sp in the renal tissue of dogs naturally affected by visceral leishmaniasis. For this purpose two groups were used: G1 with 24 dogs with amastigotes of Leishmania sp. in the renal tissue, and G2 consisting of 43 dogs with no immunohistochemical evidence of the presence of the parasite in the kidneys. The prevalence of renal disease in the population studied was 100% in G1 and 56.1% in G2. All dogs from G1 and 53.6% of the dogs from G2 had urine protein/creatinine ratio (U/PC) > 0.5, demonstrating a positive correlation between the occurrence of severe proteinuria and the presence of Leishmania sp. in renal tissue (p <0.001). All dogs from G1 and 88.4% of the dogs from G2 had glomerular lesions, and the presence of the parasite in the kidney was correlated with a higher prevalence and intensity of the lesions (p <0.001). Immunostaining for CD3+ T cells were observed in 100% of the dogs from G1 and in 97.7% of G2. There was a correlation between the presence of amastigotes in renal tissue and the intensity of the inflammatory infiltrate (p <0.0005). Immunostaining for CD79+ B cells were observed in all dogs from G1 and in 55.8% of the dogs from G2 (p <0.0001). Dogs with parasites in the renal tissue presented a greater intensity of B cells infiltrate (p <0.0001). The presence of Leishmania sp, CD3+ T cells and CD79+ B cells in the kidney of dogs naturally affected by visceral leishmaniasis confirmed the participation of the parasite, cellular immunity and humoral immunity in the pathogenesis of renal injury / Mestre
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Estudo comparativo da resposta inflamatória crônica induzida em Piaractus mesopotamicus e Oreochromis niloticus por corpo estranho e bacilo de Calmette-Guérin /Gómez Manrique, Wilson. January 2012 (has links)
Orientador: Flávio Ruas de Moraes / Coorientador: Maria Isabel Quiroga Berdeal / Banca: Eduardo Juan Gimeno / Banca: Rogério Salvador / Banca: Laura Satiko Okada Nakaghi / Banca: Marco Antonio de Andrade Belo / Resumo: A piscicultura está caracterizada pela alta densidade de estocagem, transporte e altos níveis de arraçoamento, alterando a qualidade de água e a homeostase dos peixes. Uma das principais características frente a estas alterações é a resposta geral de adaptação, aumentando a susceptibilidade dos peixes às doenças infecciosas e parasitárias ao mesmo tempo em que a má qualidade da água particularmente quando rica em matéria orgânica, favorece a proliferação de agentes com potencial. Um dos processos fisiopatológicos de grande importância para manter a saúde do hospedeiro é a resposta inflamatória aguda que se cronifica com a persistência do agente. O implante de lamínulas de vidro no tecido subcutâneo de peixes induz a resposta inflamatória crônica, apresentando acúmulo de macrófagos e formação de células gigantes multinucleadas. O inóculo do BCG induz intenso infiltrado mononuclear com desorganização do tecido causado por edema com dissociação das fibras musculares e necrose. O surgimento de células gigantes ocorre de forma progressiva e com o tempo estas aumentam de tamanho e número de núcleos formando células gigantes tipo corpo estranho. Com o avanço do processo a disposição dos macrófagos ao redor do inóculo é maior e surgem fibroblastos, linfócitos e na maioria dos casos presença de melanomacrófagos formando o granuloma. Neste trabalho objetivou-se caracterizar morfologicamente o processo inflamatório crônico por corpo estranho induzido pelo implante de lamínulas de vidro no tecido subcutâneo e o epitelióide induzido pelo inóculo de BCG em Piaractus mesopotamicus e Oreochromis niloticus. 180 peixes de cada gênero foram utilizados no estudo, divididos em quatro grupos de 45 cada. Os tratamentos foram: Inoculados, Implantados, Inoculado e Implantados e grupo controle. Nos grupos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Fish farming is characterized by high stocking density, transport and high levels of feeding, changing water quality and fish homeostasis. A major characteristic of these changes is opposite the overall response adjustment, increasing the susceptibility of fish to infectious and parasitic diseases at the same time that poor water quality particularly when rich in organic matter, favors the proliferation of agents with potential. One of the pathophysiological processes of major importance for maintaining the health of the host is the acute inflammatory response that chronic the persistence of the agent. The implantation of glass coverslips in the subcutaneous tissue of fish induces chronic inflammatory response, with accumulation of macrophages and multinucleated giant cell formation. The inoculum of BCG induces intense mononuclear infiltrate with disruption caused by tissue dissociation with edema and necrosis of muscle fibers. The emergence of giant cells occurs gradually and over time they increase in size and number of cores forming giant cells of foreign body type. With the progress of the process layout of macrophages around the inoculum is larger and appear fibroblasts, lymphocytes and in most cases the presence of melanomacrophages forming the granuloma. This study aimed to characterize morphologically the chronic inflammatory process induced by foreign body implant glass slides in the subcutaneous tissue and epithelioid induced by inoculation of BCG in Piaractus mesopotamicus and Oreochromis niloticus. 180 fish in each sex were used in the study were divided into four groups of 45 each. The treatments were: inoculated, deployed, deployed and Inoculated and control group). In inoculated groups were given 20 μl of BCG vaccine (40 mg/mL) (n° bacilli than 2.0 x 106 CFU / mg of BCG strain Mureau Rio de Janeiro) in skeletal striated... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Remodelamento parenquimatoso pulmonar em dois modelos experimentais de fibrose /Fabro, Alexandre Todorovic. January 2012 (has links)
Orientador: Vera Luiza Capelozzi / Coorientador: Claudia Aparecida Rainho / Banca: João Lauro Viana de Camargo / Banca: Thais Helena A. Thomaz Queluz / Banca: Alexandra Muxfeldt Ab'Saber / Banca: Rimarcs Gomes Ferreira / Resumo: A fibrose pulmonar é a base patológica de uma variedade de doenças crônicas incuráveis. A IL-17A, uma glicoproteína secretada de células Th17, é uma citocina pró-fibrótica relacionada recentemente à síntese de colágeno V e fibrose pulmonar. O remodelamento parenquimatoso pulmonar da matriz extracelular pelo colágeno I e V, apoptose e resposta Th17 foi estudado em camundongos Balb/c, C57/B6J selvagens e com knockout para o receptor A da IL-17; para determinar as vias fisiopatológicas que prolongam a fase tardia do processo fibrótico induzido por bleomicina e paraquat. Microscopia eletrônica, imunofluorescência, imunohistoquímica, detecção in situ da apoptose, morfometria, reconstrução tridimensional e reação em cadeia da polimerase em tempo real foram usados para avaliar a quantidade, estrutura e cadeias moleculares dos tipos de colágenos, apoptose e células imunes. Verificamos um aumento da síntese e secreção do colágeno V que promove a perpetuação da fibrose pulmonar de maneira IL-17A dependente. Além disso, observou-se que marcadores críticos da resposta Th17 como IL17, STAT3, TGF-β, IL-6, IL- 21, IL-23 e células T CD4+ foram significantemente aumentados em cepas susceptíveis a fibrose pulmonar e intensificadas na ausência do receptor A da IL-17. O aumento de marcadores Th17 resulta em um aumento de células T CD4+ através de uma resposta imune que efetivamente bloqueia a degradação do colágeno V, o qual contribui para o bloqueio da apoptose. Nosso estudo indica que o colágeno V participa da perpetuação da fibrose pulmonar por mecanismos IL-17 dependente e independentes, indicando o potencial alvo terapêutico do colágeno V e das vias de sinalização da resposta IL-17 no tratamento das doenças fibroproliferativas pulmonares / Abstract: Pulmonary fibrosis is the pathologic basis for a variety of incurable human chronic lung diseases. IL-17A, a glycoprotein secreted from IL-17- producing cells, has recently been shown to be a profibrotic cytokine involved in type V collagen synthesis and pulmonary fibrosis. Remodeling of the extracellular matrix by collagen I and V, cell death and Th-17 immune response were evaluated in Balb/c, wild and IL-17 receptor A knockout C57/B6J mice, to determine the pathways that prolong the late phase of the fibrotic process induced by bleomycin and paraquat. Electron microscopy, immunofluorescence, immunohistochemistry, in situ detection of apoptosis, morphometry, tridimensional reconstruction and a real-time PCR were used to evaluate the amount, structure and molecular chains of collagen types, apoptosis and immune cells. We verified increased synthesis and secretion of type V collagen that promoted the maintenance of pulmonary fibrosis in a IL-17A dependent manner. However, we observed that the critical Th17 markers, IL-17, STAT3, TGF-β, IL-6, IL-21, IL-23 and CD4+ T cells, were significantly increased in the fibrosis-susceptible strain and intensified in the absence of IL-17 receptor A. Increased Th17 markers resulted in an increase in CD4+ T cells in fibrotic lung tissue toward an immune response that effectively blocked degradation of collagen V, which contributes to block apoptosis. Our studies indicate that collagen V participates in the maintenance of pulmonary fibrosis in both Th-17 - dependent and -independent manners and that collagen V and the components of the Th-17 signaling pathway are potential therapeutic targets for the treatment of fibroproliferative lung diseases / Doutor
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Análise do processo de reparo alveolar em ratos espontaneamente hipertensos (SHR) não tratados e tratados com Losartan : estudo imunoistoquímico e histomorfométrico /Pereira, Cassiano Costa Silva. January 2013 (has links)
Orientador: Roberta Okamoto / Coorientador: Cristina Antoniali Silva / Banca: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Nicolas Homsi / Banca: Élio Hitoshi Shinohara / Banca: Luiz Guilherme Brentegani / Resumo: A hipertensão arterial sistêmica é uma condição clínica de etiologia multifatorial, com altos índices de complicações, como doenças cardiovasculares e renais, que tornam essa entidade um dos maiores problemas de saúde pública mundial. Sabe-se que esta patologia altera o padrão de regulação de cálcio induzindo a perda óssea. O objetivo deste estudo foi avaliar comparativamente o processo de reparo alveolar em ratos espontaneamente hipertensos (SHR) e Wistar e o efeito do losartan, droga inibidora dos receptores AT1 da angiotensina II na dinâmica óssea. Um total de 60 ratos foram divididos em 4 grupos com 3 períodos de avaliação: A. Wistar; B. SHR; C. Wistar tratado com losartan (30 mg/kg/dia); D:SHR tratado. Submetidos a exodontia do incisivo superior direito com eutanásia no 7º, 14º e 28º dia de pós-operatório. A análise dos mecanismos biológicos envolvidos no processo de reparo alveolar foi obtida pela histomorfometria e imunoistoquímica por meio da expressão das proteínas OPG, RANKL, TRAP e PECAM envolvidos na dinâmica do metabolismo ósseo. Os resultados foram submetidos a teste não paramétricos de Kruskal Wallis, seguido de Mann Whitney para comparação das amostras nos diferentes períodos. O grupo SHR apresentou atraso na cronologia do reparo alveolar. O losartan influenciou processo de reparo em Wistar e SHR, acarretando maior formação óssea, assim como maior espessura do trabeculado. Além disso, pode-se constatar que as referidas proteínas marcadas participam ativamente da dinâmica óssea, sofrendo ação do medicamento anti-hipertensivo proposto. Assim, sugere-se que o sistema renina-angiotensina interfere no metabolismo ósseo por meio da ação da angiotensina II / Abstract: Hypertension is a multifactorial clinical condition, with high rates of complications, such as cardiovascular and renal disease, that make this organization one of the greatest public health problems worldwide. It is known that this disease alters the pattern of calcium regulation by inducing bone loss. The aim of this study was to comparatively evaluate the process of alveolar repair in spontaneously hypertensive rats (SHR) and Wistar and the effect of losartan (30 mg / kg / day), a drug inhibiting the angiotensin II AT1 receptors in bone dynamics. A total of 60 rats were divided into 4 groups with 3 evaluation periods: A. Wistar; B. SHR; C. Wistar treated; D: SHR treated. The rats underwent dental extraction of the upper right incisor, was proceeded euthanasia on the 7th, 14th and 28th day after surgery. The analysis of the biological mechanisms involved in alveolar repair was obtained by histomorphometry and immunohistochemistry through the expression of OPG protein, RANKL, TRAP and PECAM dynamics involved in bone metabolism. Results were submitted to nonparametric test of Kruskal Wallis followed by Mann Whitney test for comparison of samples in different periods. The SHR was late in the chronology of alveolar repair. Losartan influenced repair process in Wistar and SHR, resulting in increased bone formation, as well as greater trabecular thickness. Moreover, it can be seen that these tagged proteins actively participate in the dynamic bone, suffering the action of the antihypertensive drug proposed. Thus, it is suggested that losartan and the renin-angiotensin interfere with bone metabolism through the action of angiotensin II / Doutor
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O efeito da carga oclusal no processo de reparo do ligamento periodontal após reimplante imediato em molar de ratos : avaliação histológica e imunoistoquímica /Beneti, Igor Mariotto. January 2012 (has links)
Orientador: Daniela Atili Brandini / Co-orientador: Claudio Aparecido Casatti / Banca: Idelmo Rangel Garcia Junior / Banca: Ligia Antunes Pereira Pinelli / Resumo: Busca-se ainda encontrar o melhor tratamento para os casos de reimplantes imediatos ou tardios, visto que estes seriam considerados os tratamentos ideais em caso de avulsão. Fatores como período extra-alveolar, meios de conservação, contaminação, fase de rizogênese dental, uso de contenção e trauma oclusal podem interferir no prognóstico dos reimplantes. A função oclusal favorável é um estímulo mecânico necessário para a manutenção da homeostasia dos tecidos periodontais, já a falta ou o excesso de carga oclusal resulta na desarmonia do funcionamento dos tecidos periodontais. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da carga oclusal após o processo de reparo de reimplante imediato em molares de ratos. Foram utilizados 280 ratos wistars divididos em três grupos experimentais(oclusão normal, infraoclusão e supraoclusão) e um grupo controle total, os mesmos foram divididos em nove períodos. As análises qualitativas e quantitativas foram realizadas em cortes histológicos corados pelo método da hematoxilina e eosina, e imunorreatividade para apoptose celular. Os dados foram comparados através da análise de variância (ANOVA), Kruskal-Wallis e Bonferroni como teste post-hoc, considerando p<0,05 como significante. No período inicial (1 a 3 ou 5 dias) a espessura do espaço do LPD (ligamento periodontal) do terço cervical dos dentes reimplantados, apresentou um aumento estatisticamente significante da espessura em todos os grupos experimentais quando comparados ao grupo controle total. O grupo oclusão normal e infraoclusão apresentaram uma redução na porcentagem da área de vasos, perfil celular e espessura do espaço do LPD, na maioria dos períodos estudados. O grupo supraoclusão apresentou uma maior ... / Abstract: An ideal protocol treatment for cases of immediate or delayed tooth replantation hasn't been developed yet, although tooth replantation is considered the best treatment in cases of tooth avulsion. Factors like extra-alveolar time, storage, contamination, dental rizogenesis phase, use of a splint, and occlusal trauma can interfere in the replantation prognosis. The normal occlusal function is a mechanical stimulus that is necessary for the maintenance of the homeostasis of periodontal tissue, whereas the absence or excess of occlusal load results in a disharmonic functioning of periodontal tissues. The aim of this study is to assess the influence of occlusal load during the repair process of immediate and delayed replantation of rat molars. They used 280 Wistar rats divided into three groups (normal occlusion, and infraocclusion supraoclusão) and a control group total, they were divided into nine periods. Qualitative and quantitative analysis will be performed in histological cuts, using the hematoxylin eosin staining protocol, and cells that display immunoreactivity to cellular apoptosis. The data will be submitted to variance analysis A or Kruskal-Wallis), using SPSS 16.0 at a significance level of p<0.05. In the initial period the thickness of the cervical third of the PDL of replanted teeth showed a statistically significant increase in all test groups, compared to the control group. A percentage reduction of blood vessel area, cell profile and PDL thickness was observed in the majority of studied periods. The supra-occlusal group showed a higher level of radicular resorption, followed by the normal and infra-occlusion groups. In face of the limitations of this study, it was concluded that the occlusal load absorbed by replanted teeth modifies the repair process of the PDL. Occlusal trauma accelerates the radicular resorption of replanted teeth significantly. / Mestre
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Genotipagem de HPV e imunorreatividade da ciclina D1 em adenocarcinoma de colo do útero /Back, Simony dos Reis Segovia da Silva. January 2013 (has links)
Orientador: Mariângela Esther Alencar Marques / Coorientador: Márcia Guimarães da Silva / Banca: Gisele Alborghetti Nai / Banca: Rozany Mucha Dufloth / Resumo: A incidência do adenocarcinoma do colo do útero (AC) está aumentando em muitos países. A associação entre a infecção pelo Papillomavirus Humano (HPV) e o AC ainda permanece incerta. A imunoistoquímica pode auxiliar no diagnóstico nos casos duvidosos, pois algumas condições benignas reativas podem mimetizar processos neoplásicos. Marcadores como bcl-2, Ki-67 e proteína p16INK4A (p16) já foram descritos para ajudar nas dúvidas relacionadas ao epitélio glandular cervical. Trabalhos recentes demonstraram a importância da adição da marcação da proteína Ciclina D1 ao painel imunoistoquímico. A Ciclina D1 é uma proteína sensor chave e integrador dos sinais extracelulares nas células em início até meados da fase G1 do ciclo celular, sendo importante na regulação da proliferação e diferenciação celular. Foram estudados 74 casos de biópsias com diagnóstico de adenocarcinoma de colo do útero, sendo 24 de adenocarcinoma cervical in situ e 50 de adenocarcinoma cervical invasor. No grupo controle, foram incluídas 79 biópsias de colo do útero que continham endocérvice normal ou em condições benignas reativas. A pesquisa de HPV nas biópsias foi realizada pela técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando os primers específicos (MY09/11 e GP5+/GP6+) e a genotipagem foi realizada empregando-se a técnica de PCR Multiplex utilizando primers específicos para os genótipos 6, 16, 18 e 33. A imunoistoquímica foi realizada nos 74 casos com diagnóstico de adenocarcinoma cervical (tipo in situ e invasor) para os marcadores Ciclina D1, proteína p16, Ki-67 e bcl-2 e em 79 casos controle para a Ciclina D1. O DNAHPV foi observado em 100% dos casos de adenocarcinoma cervical. O genótipo mais frequente foi o HPV18. A Ciclina D1 se apresentou negativa nos casos da doença e positiva nos casos benignos e reativos. O painel imunoistoquímico associando Ciclina D1, p16 e Ki-67 pode ser ferramenta útil na ... / Abstract: The incidence of cervical adenocarcinoma (AC) is increasing in many countries. The association between Human Papillomavirus (HPV) infection and the AC remains uncertain. Immunohistochemistry may help in the diagnosis in doubtful cases, because some benign reactive conditions can mimic neoplastic processes. Markers such as bcl-2, Ki-67 and protein p16INK4A (p16) have been described to assist with questions related to cervical glandular epithelium. Recent studies have shown the importance of adding protein labeling Cyclin D1 into immunohistochemical panel. The Cyclin D1 protein is a key sensor and integrator of extracellular signals into cells in early to mid G1 phase of the cell cycle, which is important in the regulation of cell proliferation and differentiation. We studied 74 patients with biopsy diagnosis of adenocarcinoma of the cervix, 24 of cervical adenocarcinoma in situ and 50 invasive cervical adenocarcinoma, The control group included 79 cervical biopsies containing endocervix normal or benign reactive conditions. The research of HPV in biopsies was performed by the polymerase chain reaction (PCR) using specific primers (MY9/11 and GP5 + / GP6 +) and genotyping was carried out using the Multiplex PCR using primers specific for genotypes 6, 16, 18 and 33. Immunohistochemistry was performed in 74 cases diagnosed with cervical adenocarcinoma (type in situ and invasive) for markers Cyclin D1, p16, Ki-67 and bcl-2, and 79 cases control for Cyclin D1. The HPV DNA was observed in 100% of cases of cervical adenocarcinoma. The most common genotype was HPV18. The Cyclin D1 was found negative in cases of illness and positive in benign and reactive samples. The immunohistochemical panel associating Cyclin D1, p16 and Ki-67 may be useful tool in the characterization and diagnosis of cervical adenocarcinoma / Mestre
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