Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-06-27T04:20:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 346382.pdf: 2254834 bytes, checksum: c7329745b16fad665ca5c57d63a02308 (MD5) Previous issue date: 2017 / As células-tronco cancerosas (CTCs) foram observadas e isoladas em diversas lesões malignas com base na expressão de seus marcadores proteicos. Essas células estão associadas à iniciação e progressão tumoral, bem como, à resistência ao tratamento. Este trabalho teve como objetivo investigar a presença das proteínas marcadoras de CTCs NANOG, NESTIN e ß-tubulina, em queilite actínica (QA), carcinoma epidermoide de lábio (CEL) e epitélio não neoplásico (ENN). Trinta casos de QA, trinta casos de CEL e 20 casos de ENN foram submetidos à técnica de imuno-histoquímica para avaliação das três proteínas. A imunomarcação de NANOG foi significativamente mais presente em QA quando comparada com ENN (Núcleo p=0,007; Citoplasma p=0,012) e, na comparação entre os diferentes graus de displasia em QA, foi mais presente nos casos de alto risco (AR) segundo a classificação binária (Núcleo p=0,017; Citoplasma p=0,044). Já em CEL, sua expressão foi maior nos casos bem diferenciados (BD), sugerindo fortemente sua participação nas fases iniciais da carcinogênese. A expressão de NESTIN foi predominante citoplasmática e significantemente menos presente em ENN quando comparada com QA (p=0,001) e com CEL (p=0,003). Além disso, apresentou tendência a maior expressão em QA com displasia epitelial intensa (DEI) ou AG e CEL BD (sem significância estatística), fato que poderia sugerir a participação de NESTIN também nas fases iniciais da carcinogênese. A marcação de ß-tubulina foi predominantemente citoplasmática e intensa em todas as lesões estudadas, sem relevância estatística. Os resultados sugerem a participação das proteínas marcadoras de CTCs NANOG e NESTIN no comportamento biológico de QA e CEL principalmente no desenvolvimento e transformação da lesão pré-maligna (QA) em maligna (CEL).<br> / Abstract : Cancer stem cells have been observed and isolated in several malignant lesions based on the expression of their protein markers. These cells are associated with tumor initiation and progression as well as resistance to treatment. In this study we investigated the presence of cancer stem cells protein markers NANOG, NESTIN and ß-tubulin in actinic cheilitis (AC), lip squamous cell carcinoma (LSCC) and non-neoplastic epithelium (NNE). Thirty cases of AC, thirty cases of LSCC and twenty cases of NNE were submitted to the immunohistochemical protocol to evaluate the presence of the three proteins. Immunostaining of NANOG was significantly higher in AC when compared to NNE and (Nucleus p=0,007; Cytoplasm p=0,012), when comparing different degrees of dysplasia in AC, it was more present in high grade cases, according to the binary classification (Nucleus p=0,017; Cytoplasm p=0,044). In LSCC, its expression was higher in well differentiated cases, strongly suggesting its participation in the early stages of carcinogenesis. The expression of NESTIN was predominantly cytoplasmic and significantly less present in NNE when compared to AC (p=0,001) and LSCC (p=0,003). In addition, there was a trend of higher expression in intense epithelial dysplasia or high grade AC and well differentiated LSCC (without statistical significance), which could suggest a participation of NESTIN also in the early stages of carcinogenesis. The labeling of ß-tubulin was predominantly cytoplasmic and intense in all studied lesions, with no statistical relevance. The results suggest the participation of NANOG and NESTIN in the biological behavior of AC and LSCC, mainly in the development and transformation of premalignant (AC) to malignant (LSCC) lesions.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2012 / Made available in DSpace on 2013-07-16T04:42:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 313849.pdf: 1321173 bytes, checksum: 8d0f627f25cbefd2a70e226d23d6118b (MD5) / Introdução: Na atualidade o sobrepeso e a obesidade, induzidos pela dieta e pelo sedentarismo, são doenças muito prevalentes em vários países. Considerados uma epidemia mundial pela Organização Mundial da Saúde (OMS), são importantes fatores de risco para inúmeras afecções, entre elas as neoplasias colorretais. Estudos prévios sugerem que em portadores de obesidade ou sobrepeso há aumento da incidência desse tipo de neoplasia e a piora do prognóstico. Com a descoberta da grelina, em 1999, que é um hormônio orexígeno com potente ação sobre a liberação do hormônio do crescimento (GH) e atuação em diversos sistemas orgânicos, fisiológicos e na carcinogênese, desenvolveram-se diversas pesquisas para elucidar o seu papel e sua importância em todas essas funções. Recentemente, evidenciou-se aumento da expressão de grelina em amostras teciduais de neoplasias colorretais quando comparadas à tecidos colônicos normais. Objetivos: Investigar o impacto da dieta de cafeteria na expressão imuno-histoquímica retal da grelina e avaliar o tipo morfológico das células identificadas. Desenho do Estudo: Estudo analítico experimental do tipo corte transversal com intervenção. Método: Vinte e quatro ratos Wistar machos foram distribuídos em 4 subgrupos de 6 animais cada denominados: SGR1 (ração e água) e SGC1 (dieta de cafeteria, ração e água) por um período de 30 dias; SGR2 (ração e água) e SGC2 (dieta de cafeteria, ração e água) por um período de 60 dias. O peso dos animais e do reto amputado, o número e o tipo de células imunorreativas à grelina foram registrados e comparados entre os subgrupos. Na análise estatística foram utilizados os testes ANOVA com correção de Bonferroni, qui quadrado, teste t pareado e teste t de Student. Resultados: Houve aumento significativo do peso corporal em todos os subgrupos (P 0,001). O peso no dia da cirurgia foi significativamente maior na comparação do SGC2 com os demais subgrupos: SGR1 (P=0,003), SGC1 (P= 0,010) e SGR2 (P= 0,001). Não houve diferença na comparação da média do número absoluto de células imunorreativas (P= 0,685) e na comparação entre expressão e não expressão (P=0,330) entre os subgrupos, nem entre o peso final (P=0,993) e o peso retal (P= 0,230) com a imunoexpressão. Todas as células imunorreativas identificadas foram do tipo "fechado". Conclusão: Os resultados do presente estudo não demonstraram influência da dieta de cafeteria sobre o número de células retais imunorreativas à grelina quando comparado aos controles nem aos dois períodos de ingesta e apenas células imunorreatoras do tipo "fechado" foram identificadas no reto de ratos Wistar.<br> / Abstract : Introduction: Obesity and overweight induced by diet and lifestyle are considered a global epidemic by the World Health Organization (WHO), especially in western countries. They are important risk factors for several conditions, including colorectal cancer. Obese and overweight patients have already demonstrated an increased incidence and worse prognosis associated with colorectal cancer. Since discovery of ghrelin in 1999, which is a potent orexigenic hormone and releaser of the growth hormone (GH) that has many physiologic functions, several studies began to elucidate its role and importance in several areas including carcinogenesis. Recently it was demonstrated an increase on tissue ghrelin expression in colorectal cancers samples. Objectives: To investigate the impact of cafeteria diet on ghrelin expression in rectal tissue and identify the morphologic cell type. Study Design: Analytical and experimental transversal study with intervention. Methods: Twenty-four male Wistar rats were divided into 4 subgroups of 6 animals each: RCG1 (rat chow and water) and CAFG1 (cafeteria diet, rat chow and water) for a period of 30 days; RCG2 (rat chow and water) and CAFG2 (cafeteria diet, rat chow and water) for a period of 60 days. The animal and rectal weight, the number and the type of immunoreactive ghrelin cells were recorded and compared between the subgroups. ANOVA with Bonferroni correction, chi square, t student and paired t tests were applied. Results: There was a significant increase in body weight in all subgroups (P=0,001). The weight on the operation day was significantly higher in the CAFG2 in comparison with others subgroups: RCG1 (P=0,003), CAFG1 (P=0,010) and RCG2 (P=0,001). There was no difference in the total of immunoreactive cells (P=0,685), presence or absence of ghrelin expression between the subgroups (P=0, 330), nor in the final weight (P= 0,993) and rectal weight (P=0,230) in comparison with imunoexpression. All the immunoreactive cells identified were closed-type. Conclusion: The present study showed no influence of cafeteria diet on the amount of immunoreactive rectal cells of ghrelin when compared to controls and with two periods of exposure. Only one type (closed-type) of immunoreactive cells was expressed in the rectum.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2012-10-19T18:04:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-26T02:20:55Z : No. of bitstreams: 1 222010.pdf: 4341478 bytes, checksum: 103c239774cfc5a2cae047d38e12d56e (MD5) / Introdução: A mutação do gene p53 é a alteração genética mais freqüentemente detectada em tumores de cabeça e pescoço, sendo fundamental em sua carcinogênese. Porém, o significado clínico e a correlação histopatológica desta alteração ainda não foram elucidados. Objetivos: Estudar a taxa de expressão da proteína p53 no serviço de Oncologia do Hospital Municipal São José de Joinville/SC e seu significado pprognóstico e correlação histopatológica. Método: Realizou-se, em 31 casos de tumores da região de cabeça e pescoço , um estudo tipo corte retrospectivo, enter agosto de 1996 e agosto de 1997, do serviço de Oncologia do Hospital Municipal de São José de Joinville/SC. A mutação do gene p53 foi pesquisada através da expressão da proteína p53 por imunohistoquímica em carcinomas epidermpoides de cabeça e pescoço. Resultados: A expressão da proteína p53 foi encontrada em 74,2% dos casos. Utilizando-se o teste exato de Fischer não se detectou correlação entre a presença de p53 e a graduação histopatológica (WHO), com p>0,05. Considerando-se os pacientes em estádio III e IV, a sobrevida global média do grupo p53 positivo foi de 11,87 meses, já nos pacientes p53 negativo foi de 30,24 meses, diferença estatisticamente significativa, com p>0,005. A sobrevida média em 02 anos também foi melhor em pacientes p53 negativos (57,1%) vs 6,25%), com valor de p=0,006. Conclusão: A taxa da expressão de p53 neste estudo de 74,2%, sem estabelecer-se correlação entre a presença da proteína p53 e a gradução histopatológica. A expressão da proteína p53 em carcinomas epidermóides de cabeça e pescoço parece influenciar a sobrevida global, porém estudos com maior número de casos e controle de variáveis como graduação histopatológica e modalidades de tratamento são necessários.

A cinomose canina é uma doença viral e afeta principalmente os sistemas respiratório, gastrintestinal e nervoso. O presente trabalho analisou 54 cães com cinomose de um total de 760 cães necropsiados no período de julho de 2006 a outubro de 2007. As lesões macroscópicas observadas eram caracterizadas por secreção ocular e nasal mucopurulentas, hiperqueratose dos coxins digitais, pulmões de coloração avermelhada e não colabados, atrofia do timo, conteúdo intestinal diarréico e evidenciação das placas de Peyer. Os achados microscópicos caracterizavam-se principalmente por pneumonia intersticial, rarefação linfóide, desmielinização da substância branca, manguitos perivasculares e corpúsculos de inclusão viral na mucosa do estômago, epitélios da bexiga, brônquios e bronquíolos, pelve renal, coxins digitais, pálpebra e orelha, no sistema nervoso central (principalmente em astrócitos) e em células mononucleares dos linfonodos, baço e tonsilas. O teste de imunoistoquímica foi positivo em 94,4% dos casos analisados. Os tecidos foram marcados pela técnica imunoistoquímica utilizando o anticorpo monoclonal anti-cinomose canina (VMRD) na diluição de 1:400. O coxim digital se apresentou como o órgão com o maior número de casos marcados positivamente (67,4%), seguido pelo estômago com 62,7%. A utilização da imunoistoquímica auxiliou na identificação do antígeno viral em diferentes tecidos e foi importante como diagnóstico complementar da cinomose canina. / Canine distemper is a viral disease that affects mainly, respiratory, gastrointestinal and nervous system. The present study analyzed 54 dogs with canine distemper from total of 760 necropsies done in dogs between July 2006 to October 2007. The macroscopic lesion were characterized by mucopurulent oculonasal discharge, hyperkeratosis of footpads, red and not collapsed lungs, thymic atrophy, watery intestinal, hyperemia and Peyer’s patches enlarged. The microscopic findings were characterized by interstitial pneumonia, lymphoid depletion, white matter demylization, perivascular cuffs and viral inclusion bodies located in stomach mucosa, bladder, bronchial, renal pelvis, footpads, eyelid, skin of the ear epithelium, central nervosus system (mainly in astrocytes) and mononuclear infiltrates in lymph nodes, spleen, and tonsils. The immunohistochemistry test was positive in 94,4% of analyzed cases. Tissues were strained by an immunohistochemical procedure with mouse monoclonal anti-cinomose (VMRD) diluted 1:400. The footpads was the best tissue with majority of positive marked cases (67,4%), followed by stomach with 62,7%. This observation suggests that the immunohistochemistry technique aided to identify distemper virus antigens in different tissue making it an important test for complementary diagnostic of canine distemper.

Tese (doutorado) - Universidade de São Paulo, Departamento de Fisiologia e Biofisica / Made available in DSpace on 2013-07-15T21:13:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0

A cinomose canina é uma doença viral e afeta principalmente os sistemas respiratório, gastrintestinal e nervoso. O presente trabalho analisou 54 cães com cinomose de um total de 760 cães necropsiados no período de julho de 2006 a outubro de 2007. As lesões macroscópicas observadas eram caracterizadas por secreção ocular e nasal mucopurulentas, hiperqueratose dos coxins digitais, pulmões de coloração avermelhada e não colabados, atrofia do timo, conteúdo intestinal diarréico e evidenciação das placas de Peyer. Os achados microscópicos caracterizavam-se principalmente por pneumonia intersticial, rarefação linfóide, desmielinização da substância branca, manguitos perivasculares e corpúsculos de inclusão viral na mucosa do estômago, epitélios da bexiga, brônquios e bronquíolos, pelve renal, coxins digitais, pálpebra e orelha, no sistema nervoso central (principalmente em astrócitos) e em células mononucleares dos linfonodos, baço e tonsilas. O teste de imunoistoquímica foi positivo em 94,4% dos casos analisados. Os tecidos foram marcados pela técnica imunoistoquímica utilizando o anticorpo monoclonal anti-cinomose canina (VMRD) na diluição de 1:400. O coxim digital se apresentou como o órgão com o maior número de casos marcados positivamente (67,4%), seguido pelo estômago com 62,7%. A utilização da imunoistoquímica auxiliou na identificação do antígeno viral em diferentes tecidos e foi importante como diagnóstico complementar da cinomose canina. / Canine distemper is a viral disease that affects mainly, respiratory, gastrointestinal and nervous system. The present study analyzed 54 dogs with canine distemper from total of 760 necropsies done in dogs between July 2006 to October 2007. The macroscopic lesion were characterized by mucopurulent oculonasal discharge, hyperkeratosis of footpads, red and not collapsed lungs, thymic atrophy, watery intestinal, hyperemia and Peyer’s patches enlarged. The microscopic findings were characterized by interstitial pneumonia, lymphoid depletion, white matter demylization, perivascular cuffs and viral inclusion bodies located in stomach mucosa, bladder, bronchial, renal pelvis, footpads, eyelid, skin of the ear epithelium, central nervosus system (mainly in astrocytes) and mononuclear infiltrates in lymph nodes, spleen, and tonsils. The immunohistochemistry test was positive in 94,4% of analyzed cases. Tissues were strained by an immunohistochemical procedure with mouse monoclonal anti-cinomose (VMRD) diluted 1:400. The footpads was the best tissue with majority of positive marked cases (67,4%), followed by stomach with 62,7%. This observation suggests that the immunohistochemistry technique aided to identify distemper virus antigens in different tissue making it an important test for complementary diagnostic of canine distemper.

A cinomose canina é uma doença viral e afeta principalmente os sistemas respiratório, gastrintestinal e nervoso. O presente trabalho analisou 54 cães com cinomose de um total de 760 cães necropsiados no período de julho de 2006 a outubro de 2007. As lesões macroscópicas observadas eram caracterizadas por secreção ocular e nasal mucopurulentas, hiperqueratose dos coxins digitais, pulmões de coloração avermelhada e não colabados, atrofia do timo, conteúdo intestinal diarréico e evidenciação das placas de Peyer. Os achados microscópicos caracterizavam-se principalmente por pneumonia intersticial, rarefação linfóide, desmielinização da substância branca, manguitos perivasculares e corpúsculos de inclusão viral na mucosa do estômago, epitélios da bexiga, brônquios e bronquíolos, pelve renal, coxins digitais, pálpebra e orelha, no sistema nervoso central (principalmente em astrócitos) e em células mononucleares dos linfonodos, baço e tonsilas. O teste de imunoistoquímica foi positivo em 94,4% dos casos analisados. Os tecidos foram marcados pela técnica imunoistoquímica utilizando o anticorpo monoclonal anti-cinomose canina (VMRD) na diluição de 1:400. O coxim digital se apresentou como o órgão com o maior número de casos marcados positivamente (67,4%), seguido pelo estômago com 62,7%. A utilização da imunoistoquímica auxiliou na identificação do antígeno viral em diferentes tecidos e foi importante como diagnóstico complementar da cinomose canina. / Canine distemper is a viral disease that affects mainly, respiratory, gastrointestinal and nervous system. The present study analyzed 54 dogs with canine distemper from total of 760 necropsies done in dogs between July 2006 to October 2007. The macroscopic lesion were characterized by mucopurulent oculonasal discharge, hyperkeratosis of footpads, red and not collapsed lungs, thymic atrophy, watery intestinal, hyperemia and Peyer’s patches enlarged. The microscopic findings were characterized by interstitial pneumonia, lymphoid depletion, white matter demylization, perivascular cuffs and viral inclusion bodies located in stomach mucosa, bladder, bronchial, renal pelvis, footpads, eyelid, skin of the ear epithelium, central nervosus system (mainly in astrocytes) and mononuclear infiltrates in lymph nodes, spleen, and tonsils. The immunohistochemistry test was positive in 94,4% of analyzed cases. Tissues were strained by an immunohistochemical procedure with mouse monoclonal anti-cinomose (VMRD) diluted 1:400. The footpads was the best tissue with majority of positive marked cases (67,4%), followed by stomach with 62,7%. This observation suggests that the immunohistochemistry technique aided to identify distemper virus antigens in different tissue making it an important test for complementary diagnostic of canine distemper.

Para identificar, quantificar e correlacionar os eosinófilos, mastócitos, miofibroblastos e células TGF-beta positivas nos pólipos nasais de pacientes com e sem asma foi realizado a imunoistoquímica. A quantidade de eosinófilos, miofibroblastos e células TGF-beta positivas esteve aumentada no pólipo nasal de indivíduos asmáticos. O número de mastócitos não mostrou diferença entre os grupos. O miofibroblasto foi o denominador comum na correlação entre eosinófilos, mastócitos, células TGF-beta positivas e presença de asma / Introduction: Nasal polyposis is a chronic inflammatory disease of the nasal mucosa or paranasal sinuses characterized by the formation of benign polyps. The pathogenesis is not known, although nasal polyps are associated with several systemic diseases, with asthma being the most frequent. The aim of the present study was to identify, quantify, compare and correlate eosinophils, mast cells, myofibroblasts and TGF-ß-positive cells in nasal polyps of patients with and without asthma. Material and Methods: Seventy-eight subjects with nasal polyps undergoing endoscopic sinus surgery were selected. Control specimens were obtained from eight subjects with a normal sinus mucosa. One group consisted of polyps from 56 patients with asthma and the other of polyps from 22 patients without asthma. Immunohistochemistry was performed using monoclonal antibodies against eosinophil cationic protein to stain eosinophils, against tryptase to stain mast cells, against alpha-smooth muscle actin to stain myofibroblasts, and against TGF-ß to stain TGF-ß-positive cells. Results: The number of eosinophils, myofibroblasts and TGF-ß-positive cells was significantly higher in the asthma group than in the nonasthma group, whereas no significant difference in the number of mast cells was observed between the two groups. The number of eosinophils, mast cells, myofibroblasts and TGF-ß-positive cells was significantly higher in nasal polyps than in the control group. Myofibroblasts showed a significant correlation with eosinophils, mast cells, TGF-ß-positive cells, and asthma. Conclusion: Eosinophils, mast cells, myofibroblasts and TGF-ß-positive cells were identified in all nasal polyps, although the number of eosinophils, myofibroblasts and TGF-ß-positive cells was higher in the asthma group. The number of mast cells was similar regardless of the presence or absence of asthma. Myofibroblasts were a common denominator in the correlation between eosinophils, mast cells, TGF-ß-positive cells, and asthma

Para identificar, quantificar e correlacionar os eosinófilos, mastócitos, miofibroblastos e células TGF-beta positivas nos pólipos nasais de pacientes com e sem asma foi realizado a imunoistoquímica. A quantidade de eosinófilos, miofibroblastos e células TGF-beta positivas esteve aumentada no pólipo nasal de indivíduos asmáticos. O número de mastócitos não mostrou diferença entre os grupos. O miofibroblasto foi o denominador comum na correlação entre eosinófilos, mastócitos, células TGF-beta positivas e presença de asma / Introduction: Nasal polyposis is a chronic inflammatory disease of the nasal mucosa or paranasal sinuses characterized by the formation of benign polyps. The pathogenesis is not known, although nasal polyps are associated with several systemic diseases, with asthma being the most frequent. The aim of the present study was to identify, quantify, compare and correlate eosinophils, mast cells, myofibroblasts and TGF-ß-positive cells in nasal polyps of patients with and without asthma. Material and Methods: Seventy-eight subjects with nasal polyps undergoing endoscopic sinus surgery were selected. Control specimens were obtained from eight subjects with a normal sinus mucosa. One group consisted of polyps from 56 patients with asthma and the other of polyps from 22 patients without asthma. Immunohistochemistry was performed using monoclonal antibodies against eosinophil cationic protein to stain eosinophils, against tryptase to stain mast cells, against alpha-smooth muscle actin to stain myofibroblasts, and against TGF-ß to stain TGF-ß-positive cells. Results: The number of eosinophils, myofibroblasts and TGF-ß-positive cells was significantly higher in the asthma group than in the nonasthma group, whereas no significant difference in the number of mast cells was observed between the two groups. The number of eosinophils, mast cells, myofibroblasts and TGF-ß-positive cells was significantly higher in nasal polyps than in the control group. Myofibroblasts showed a significant correlation with eosinophils, mast cells, TGF-ß-positive cells, and asthma. Conclusion: Eosinophils, mast cells, myofibroblasts and TGF-ß-positive cells were identified in all nasal polyps, although the number of eosinophils, myofibroblasts and TGF-ß-positive cells was higher in the asthma group. The number of mast cells was similar regardless of the presence or absence of asthma. Myofibroblasts were a common denominator in the correlation between eosinophils, mast cells, TGF-ß-positive cells, and asthma