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Análise químico-farmacêutica e estudos de estabilidade e de dissolução de comprimidos de orbifloxacino /Cazedey, Edith Cristina Laignier. January 2012 (has links)
Orientador: Hérida Regina Nunes Salgado / Banca: Elfrides Eva Scherman Schapoval / Banca: Magali Benjamim de Araújo / Banca: Álvaro José dos Santos Neto / Banca: Marlus Chorilli / Resumo: O orbifloxacino é uma fluorquinolona antimicrobiana de terceira geração aprovada para o uso veterinário em vários países. Este antimicrobiano possui excelente farmacocinética, com biodisponibilidade oral quase completa e é utilizado no tratamento de infecções causadas por bactérias Gram-negativas, incluindo Enterobacteriaceae e espécies Pseudomonas-resistentes e também por micro-organismos Gram-positivos e Mycoplasma sp. Muitos estudos têm demonstrado que o orbifloxacino é eficaz contra diversos patógenos apresentando baixa concentração inibitória mínima. A importância de se desenvolver e validar métodos analíticos para este fármaco é justificada por seu potencial terapêutico e grande emprego em terapias anti-microbianas, assim como pelo conhecimento de que a baixa qualidade dos produtos anti-infecciosos está relacionada ao desenvolvimento de cepas resistentes, como consequência da administração de doses subterapêuticas. Neste trabalho foram desenvolvidos ensaios para a análise qualitativa de orbifloxacino utilizando a espectrofotometria nas regiões do UV/VIS/IV, cromatografia líquida de alta eficiência, análise térmica, cromatografia em camada delgada e outros métodos gerais para caracterização da substância química de referência (SQR) e comprimidos de orbifloxacino. Técnicas analíticas, espectrofotométrica no UV, indicativa de estabilidade por cromatografia líquida de alta eficiência e microbiológicas - difusão em ágar e turbidimétrica foram utilizadas para o desenvolvimento e validação dos métodos para determinação quantitativa deste fármaco na forma farmacêutica... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Orbifloxacin, a new synthetic third-generation fluoroquinolone antimicrobial drug, was developed exclusively for use in veterinary medicine. This antimicrobial agent has an excellent pharmacokinetics with oral bioavailability almost complete and it is used in treatment of infections caused by Gram-negative bacteria, including Enterobacteriaceae and Pseudomonas-resistant species and also by Gram-positive microorganisms and Mycoplasma sp. Many studies have shown that orbifloxacin is effective against many pathogens and has low minimum inhibitory concentration. Analytical methods for quantitative determination of orbifloxacin are important due to its therapeutic potential and wide use in antimicrobial therapy. Moreover, it is known that the poor quality of antibiotic product is direct related to development of resistant strains, as consequence of sub therapeutic doses administration. Thus, it is important to develop efficient analytical methods for quality control commercialized products. In this work were developed methods for qualitative analysis of orbifloxacin using UV/VIS/IR spectrophotometry, high performance liquid chromatography, thermal analysis, thin-layer chromatography and other general methods for characterization of API and tablets of orbifloxacin. Analytical methods such as UV spectrophotometry, stability-indicating high performance liquid chromatography and microbiological - agar diffusion and turbidimetry were developed and validated for quantitation of this drug in tablets. All... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Bioatividade da solamargina e solasodina para diferentes sistemas celulares após metabolização in vitro por fração microssomal hepática /Corbi, Karina Ponsoni. January 2012 (has links)
Orientador: Maria Stella Gonçalves Raddi / Banca: Luís Marcos da Fonseca / Banca: Alberto Camilo Alecio / Banca: Carlos Henrique Gomes Martins / Banca: Miriam Sannomiya / Resumo: O glicoalcalóide esteroidal solamargina (SM) e sua aglicona solasodina (SD), isolados de frutos de Solanum palinacanthum (juá), foram avaliados in vitro quanto à citotoxicidade, mutagenicidade, atividade antimicrobiana na presença de sistema de metabolização microssomal hepático (fração S9). A viabilidade das linhagens celulares RAW 264.7, SiHa e HepG2 expostas a diferentes concentrações (200 - 6,25 µg/mL) dos alcalóides, na presença ou não da fração S9, foi avaliada após 24 horas pela técnica do MTT-tetrazólio e Vermelho Neutro (VN). A curva dose-resposta indicou que a fração microssomal diminui o efeito citotóxico dos alcalóides para as linhagens RAW e SiHA, entretanto essa atividade foi potencializada para a linhagem HepG2. Atividade antibacteriana para Staphylococcus aures, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, através da técnica de microdiluição, demonstrou que a fração S9 potencializou esse efeito para ambos os alcalóides, entretanto a concentração inibitória mínima (CIM) só foi definida para S. aureus (1,0 mg/mL), porém apenas com efeito bacteriostático. O teste de mutagenicidade, realizado pela técnica de AMES, demonstrou efeito mutagênico apenas para a SM na linhagem TA98 na ausência de ativação metabólica nas concentrações acima de 400 µg/mL. Espectrometria de massas foi utilizada para comparar os fragmentos gerados pelos alcalóides após metabolização com a fração S9. A análise espectral evidenciou a presença de diferentes fragmentos, indicando biotransformação dos alcalóides / Abstract: The steroidal glycoalkaloid solamargine (SM) and its aglycone solasodine (SD), isolated from fruits of Solanum palinacanthum (juá) were evaluated in vitro for cytotoxicity, mutagenicity, antimicrobial activity in the presence of hepatic microsomal metabolizing system (S9 fraction). The viability of RAW 264.7 cell lines, SiHa and HepG2 cells exposed to different concentrations (200 to 6.25 mg/mL) of alkaloids, in the presence or absence of S9 fraction was analyzed after 24 hours using the techniques of the MTT-tetrazolium and Neutral Red (RN). The dose-response curve indicated that the microsomal fraction decreased to cytotoxic of alkaloids lines for RAW and Siha, however this activity has was potentiated to the HepG2. Antibacterial activity Staphylococcus aures, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa by the microdilution technique, showed that the fraction S9 potentiated the effect to both alkaloids, however the minimum inhibitory concentration (MIC) was defined only for S. aureus (1.0 mg / mL), but without bactericidal effect. The mutagenicity test, performed by the technique of AMES, demonstrated mutagenic effect only for the SM strain TA98 in the absence of metabolic activation at concentrations above 400 mg/mL. Mass spectrometry was used to compare the fragments generated by alkaloids after metabolization with S9 fraction. Spectral analysis showed the presence of different fragments, indicating biotransformation of alkaloids / Doutor
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Atividade antimicrobiana in vitro de extratos hidroetanólicos de Astronium sp incorporados ou não em sistemas nanoestruturados /Bonifácio, Bruna Vidal. January 2014 (has links)
Orientador: Taís Maria Bauab / Banca: Izabela Dutra Alvim / Banca: Carlos Henrique Gomes Martins / Resumo: Os fitoterápicos têm apresentado resultados surpreendentes no tratamento de doenças crônicas, principalmente do trato digestório (úlceras gástricas e duodenais, colite ulcerativa e doença de Crohn), diabetes e câncer. A Política Nacional de Plantas Medicinais e Fitoterápicos - PNPMF (Ministério da Saúde - MS) propõe o estudo de diversas espécies vegetais, dentre estas, plantas do gênero Astronium (Anacardiaceae), que reúne espécies como Astronium fraxinifolium, Astronium graveolens e Astronium urundeuva, com propriedades anti-inflamatória, antiulcerogênica, cicatrizante e antimicrobiana. Nesse contexto, a inclusão da tecnologia no aprimoramento de plantas medicinais deve ser estimulada já que a estratégia de incorporação de extratos vegetais em sistemas nanoestruturados tem otimizado suas propriedades. A atividade antimicrobiana dos extratos incorporados ou não em sistemas nanoestruturados foi avaliada pela técnica de microdiluição frente aos micro-organismos Escherichia coli (ATCC 25922), Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Salmonella setubal (ATCC 19196), Helicobacter pylori (ATCC 43504) e Candida albicans (ATCC 18804). Os extratos vegetais foram testados nas concentrações de 1000 a 7,81 μg/mL e como controle foram utilizados a amoxicilina (100 μg/mL) para H. pylori; a ampicilina (50 μg/mL) para as demais bactérias, e a anfotericina B (32 μg/mL) e fluconazol (256 μg/mL) para C. albicans. Após incubação a 37 ºC/72 horas sob condição de microaerofilia para H. pylori; 37 ºC/24 horas para as demais bactérias e 37 ºC/48 horas para a levedura, foram realizadas as leituras espectrofotométrica e visual, com os reveladores resazurina 0,01% (bactérias), e cloreto de 2,3,5-trifeniltetrazólio 2% - TTC (levedura) para a determinação da concentração inibitória mínima (CIM). A incorporação foi feita em um sistema nanoestruturado constituído por 10%... / Abstract: Herbal medicines have shown amazing results for the treatment of chronic diseases, especially the ones of the digestive tract (gastric and duodenal ulcers, ulcerative colitis and Crohn's disease), diabetes and cancer. The National Policy of Medicinal Plants and Herbal Medicines (Ministry of Health) proposes the study of several plant species, including plants containing the genus Astronium (Anacardiaceae) that includes species such as A. fraxinifolium, A. graveolens and A. urundeuva, which comprise anti-inflammatory, anti-ulcerogenic, healing and antimicrobial properties. In this context, the inclusion of technology in the improvement of medicinal plants should be encouraged since the strategy to incorporate plant extracts in nanostructured systems has optimized their properties. The antimicrobial activity of the extracts, which were incorporated or not into nanostructured systems, was evaluated by microdilution technique for the microorganisms Escherichia coli (ATCC 25922), Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Salmonella setubal (ATCC 19196), Helicobacter pylori (ATCC 43504) and Candida albicans (ATCC 18804). The plant extracts were tested at concentrations from 1000 to 7.81 μg/mL, and the following medications were used to check in order to see if they will work with each type of microorganisms: amoxicillin (100 μg/mL) for H. pylori; ampicillin (50 μg/mL) for the other bacteria, amphotericin B (32 μg/mL) and fluconazole (256 μg/mL) for C. albicans. After the incubation at 37 ºC/72 hours under microaerophilic condition for H. pylori; 37 ºC/24 hours for the other bacteria and 37 °C/48 hours for the yeast, spectrophotometric and visual readings were performed, with the developers 0.01% resazurin (bacteria) and 2% 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride in order to determine the minimum inhibitory concentration (MIC). The incorporation was prepared into a nanostructured system com... / Mestre
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Tratamento da mastite subclínica de ovelhas no período seco com antimicrobiano convencional e antimicrobiano nanoparticulado /Santana, Raul Costa Mascarenhas. January 2014 (has links)
Orientador: Luiz Francisco Zafalon / Banca: José Jurandir Fagliari / Banca: Márcio Garcia Ribeiro / Resumo: Este estudo teve como objetivos: investigar os micro-organismos causais da mastite subclínica em ovelhas de aptidão para produção de carne, definir pontos de corte de dois métodos de diagnóstico indiretos, comparar as taxas de cura do tratamento da mastite subclínica após infusão intramamária de princípio ativo antimicrobiano no momento da secagem em duas diferentes formulações, convencional e nanoparticulada, verificar as taxas de cura espontânea, avaliar a capacidade de prevenção da ocorrência de novas infecções mamárias e verificar a presença de resíduos antimicrobianos no leite de ovelhas submetidas ao tratamento à secagem, na lactação consecutiva. O estudo foi realizado em um rebanho localizado em uma propriedade no município de São Carlos, São Paulo. Analisou-se um total de 393 mamas de ovelhas de aptidão para produção de carne, 250 das quais pertencentes a 130 ovelhas da raça Santa Inês e outras 143 mamas de 77 ovelhas da raça Morada Nova. Amostras de leite foram coletadas e submetidas ao exame de California Mastitis Test (CMT), à contagem de células somáticas (CCS) e ao exame microbiológico antes da secagem e após o parto subsequente. As glândulas mamárias com mastite subclínica foram distribuídas nos seguintes grupos: G1 (Controle; glândulas mamárias que não receberam tratamento antimicrobiano); G2 (glândulas mamárias em que foi administrado 100 mg de cloxacilina benzatina/ 10 mL em estrutura convencional) e G3 (glândulas mamárias em que foi administrado 50 mg de cloxacilina benzatina/ 86 mL em estrutura nanoencapsulada). Para avaliação dos tratamentos quanto à capacidade de prevenir novas infecções, foram utilizadas as mamas saudáveis dos animais dos grupos experimentais G1, G2 e G3, e foi acrescido o grupo G4 (glândulas mamárias saudáveis em que foi administrado 100 mg de cloxacilina benzatina/ 172 mL em estrutura nanoencapsulada) ... / Abstract: This study had as objectives: investigate the microorganisms that cause subclinical mastitis in meat producing sheep, define cut-off values of two methods of indirect diagnosis, compare cure rates of treatment of subclinical mastitis after intramammary infusion of antimicrobial active principle at the time of drying off in two different formulations, conventional and nanoparticle, check the rates of spontaneous cure, evaluate the capability of prevention of new infections and check the presence of antimicrobial residues in milk of sheep subjected to treatment during drying off, on consecutive lactation. The study was done in a flock located on a property in São Carlos city, São Paulo. We analyzed a total of 393 mammary glands of meat producing sheep, 250 of which belong to 130 Santa Inês breed sheep and other 143 mammary glands of 77 Morada Nova breed sheep. Milk samples were collected and submitted to California Mastitis Test (CMT), the somatic cell count (SCC) and microbiological exam before drying off and after subsequent parturition. The mammary glands with subclinical mastitis were as follows: G1 (Control, mammary glands that not received antibiotic treatment), G2 (mammary glands which was administered 100 mg of benzathine cloxacillin/ 10 mL in conventional structure) and G3 (mammary glands which was administered 50 mg benzathine cloxacillin/ 86 mL in nanocoated structure). For evaluation of treatments about their capability to prevent new infections, we used the mammary glands of healthy animals of experimentals groups groups G1, G2 and G3, and G4 was added group (healthy mammary glands, which was administered 100 mg of benzathine cloxacillin/ 172 mL in nanocoated structure). The occurrences of animals positive for infectious mastitis in Santa Ines breed sheep was 33.1% and 35.6% in Morada Nova breed sheep. Coagulase-negative Staphylococci were the predominant etiologic agents ... / Mestre
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Síntese e avaliação biológica de bioisósteros de nitrofural ativos contra Leishmania amazonensis /Jornada, Daniela Hartmann. January 2015 (has links)
Orientador: Chung Man Chin / Coorientador: Priscila Longhin Bosquesi / Banca: Eduardo René Pérez González / Banca: Renato Farina Menegon / Resumo: A leishmaniose tegumentar possui ampla distribuição mundial, segundo dados da Organização Mundial da Saúde (OMS) e estima-se que haja o surgimento de 500 mil a um milhão de casos por ano. Segundo dados do Departamento de Informática do Sistema Único de Saúde (DATASUS), no ano de 2005 registraram-se mais de 180 milhões de casos de leishmaniose tegumentar no Brasil. Apesar da existência de tratamentos disponíveis, a cura da leishmaniose é um processo complexo, em virtude das dificuldades na administração dos fármacos injetáveis, dos inúmeros efeitos adversos e da toxicidade hepática, renal e cardíaca. Dessa forma o desenvolvimento de novos fármacos mais eficazes e menos tóxicos torna-se urgente. O bioisosterismo é uma ferramenta de modificação molecular que visa à obtenção de novos análogos com a mesma atividade biológica. Assim, tem sido utilizado na pesquisa de novos fármacos, buscando a melhoria na eficácia e segurança no tratamento de diversas doenças. O nitrofural (NF), 5-nitro-2-furaldeído semicarbazona, é um fármaco utilizado como antimicrobiano de uso tópico em vários tipos de lesões de pele, que apresenta atividade descrita contra formas amastigotas de L. donovani, L. enriettii e L. major. Baseando-se nas diversas atividades do fármaco, o trabalho proposto objetivou a síntese de bioisósteros de nitrofural e avaliação dos compostos quanto à atividade leishmanicida in vitro. Foram sintetizados e caracterizados através de métodos analíticos oito compostos, sendo um inédito. Sete deles foram avaliados quanto à atividade biológica frente às formas amastigotas de L.amazonensis, através do ensaio de MTT (brometo de 3-metil[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5 difeniltetrazólio). O composto Lapdesf-MetSFS (8) apresentou atividade comparável à da pentamidina, fármaco padrão utilizado na terapêutica. / Abstract: Cutaneous leishmaniasis is a world widely distributed disease and it is estimated, by the World Health Organization (WHO), the incidence of 500,000 to one million cases per year. According to the Department of the Unified Health System (DATASUS), in 2005 it was registered more than 180 million cases of cutaneous leishmaniasis in Brazil. Although treatments for leishmaniasis are available, it is a complex process, because of difficulties in administration, once the majority of the drugs are injectable, the several numbers of adverse effects, and liver, renal and cardiac toxicity. Due to that, the development of more effective and less toxic drugs becomes urgent. The bioisosterism is a molecular modification strategy that aims to obtain new analogues with the same biological activity. It has been used in the research for new drugs, in order to improve the effectiveness and safety in the treatment of various diseases. The nitrofural (NF) 5-nitro-2-furaldehyde semicarbazone, is a drug used as topical antimicrobial in various types of skin lesions is described which has activity against L. donovani, L. enriettii and L. major amastigote forms. Based on the various drug activities, the proposed work aimed the synthesis of bioisosters of nitrofural and evaluation of compounds for in vitro leishmanicidal activity. Were synthesized and characterized via analytical methods eight compounds, one unpublished. Seven of them were evaluated for biological activity against the amastigotesn forms of L. amazonensis by MTT assay (3-methyl bromide [4,5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphenyltetrazolium bromide). The Lapdesf-MetSFS (8) compound showed activity comparable to that of pentamidine, standard drug used in therapy. / Mestre
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Estudo fitoquímico e propriedades biológicas da Dipteryx alata Vogel (baru) /Sanchez, Rodolfo Marcchiori. January 2014 (has links)
Orientador: Rosangela da Silva de Laurentiz / Banca: Jean Richard Dasnoy Marinho / Banca: Lizandra Guidi Magalhães / Resumo: Devido à importância do bioma cerrado, inclusive para a manutenção de outros biomas interligados, nas últimas décadas pesquisadores das mais variadas áreas vêm propondo alternativas de uso das espécies do cerrado como forma de preservar a fauna e flora local. Uma das formas para auxiliar na preservação dessas espécies esta o estudo sobre constituintes fitoquímicos e propriedades medicinais de plantas desse bioma usadas na medicina tradicional. O objetivo desse estudo é a confirmação do potencial terapêutico bem como da toxicidade dessas plantas usadas na medicina tradicional local, bem como estudar o potencial medicinal de plantas ainda não investigadas. A espécie Dipteryx alata Vogel (baru) é uma das espécies nativas do cerrado que apresenta grande potencial nutricional e farmacológico a ser investigado, pois segundo a medicina tradicional ela é utilizada no combate à bronquite, diarreia, disenteria, dor, dor de garganta, gripe, picada de cobra, tosse e como cicatrizante, entretanto, apenas a atividade contra picada de cobra foi cientificamente comprovada. Desta forma, na tentativa de aliar o valor nutricional da polpa dos frutos do baru a um possível efeito terapêutico, foram realizados estudos sobre os fitoconstituintes presentes nesta parte da planta, a fim de guiar estudos sobre as possíveis propriedades biológicas valorizando o fruto como um alimento nutracêutico, em áreas de ocorrência da planta que apresentam elevados índices de doenças negligenciadas. Os resultados dos estudos fitoquímicos mostraram a presença de alcaloides, taninos, flavonoides, glicosídeos cardiotônicos e saponinas em consideráveis concentrações e antraquinonas em baixa concentração. A presença desses fitoconstituintes forneceu suporte para a realização de ensaios para a determinação do potencial antiparasitário. A atividade antimicrobiana também foi avaliada devido ao uso medicinal da planta para infecções do trato ... / Abstract: Due to the importance of the cerrado biome, including the maintenance of other interconnected biomes in recent decade's researchers from different fields have proposed alternative use of the cerrado species as a way to preserve the local fauna and flora. One way to help the preservation of species is the study of the medicinal properties of plants of this biome used in traditional medicine. The objective of these studies is to confirm the therapeutic potential and the toxicity of these plants used in traditional local medicine as well as studying the medicinal potential of plants yet to be investigated. The specie Dipteryx alata Vogel (baru) is a native species of the cerrado with great nutritional and pharmacological potential to be investigated, because according to traditional medicine it is used to combat bronchitis, diarrhea, dysentery, pain, sore throat, flu, snakebite, cough and as cicatrizant, however, only the activity against snakebite has been scientifically proven. Therefore, trying to combine the nutritional value of baru fruits pulp to the potential therapeutic effect, studies on the determination of phytochemicals present were performed to guide studies on possible biological properties valuing the fruit as a nutraceutical food in areas of occurrence of the plant that show high negligible diseases indices. The results of the phytochemical studies showed the presence of alkaloids, tannins, flavonoids, saponins and cardiotonic glycosides in considerable amounts and anthraquinones at low concentration. The presence of these phytochemicals has given support for conducting tests to determine the antiparasitic potential. Antimicrobial activity was also evaluated due to the medicinal use of the plant for the urinary tract infections. In addition, the cytotoxicity of the pulp was also evaluated on LLC- MK 2 cells to support the safe use of the fruit. Antimicrobial assays were performed using the bacterial strains Proteus sp., E. ... / Mestre
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Desenvolvimento de método analítico para estudo de degradação forçada de cefalotina sódica na forma farmacêutica pó liofilizado para solução injetável /Rugani, Karen de Souza. January 2015 (has links)
Orientador: Hérida Regina Nunes Salgado / Banca: Adriano Antunes de Souza Araújo / Banca: Anil Kumar Sing / Resumo: A cefalotina (CET) é um antimicrobiano β-lactâmico semi-sintético, bactericida e representa o protótipo das cefalosporinas, pertencente à classe da primeira geração. As cefalosporinas apresentam um espectro de atividade mais amplo do que as penicilinas e são amplamente prescritas. Poucos métodos analíticos são descritos na literatura para a análise de CET, e ao nosso conhecimento, nenhum método rápido e indicativo de estabilidade por cromatografia líquida para este composto foi publicado anteriormente. Foi desenvolvido um método indicativo de estabilidade por cromatografia líquida em fase reversa para determinação quantitativa de CET, na presença de impurezas e produtos de degradação gerados a partir dos estudos de degradação forçada em amostras de pó liofilizado para injeção. O método desenvolvido é também aplicável para a determinação de substâncias relacionadas em matéria-prima e em formas farmacêuticas. A separação cromatográfica foi obtida com a coluna Agilent Eclipse XDB-Phenyl, de 250 mm x 4,6 mm, 5 μm, em fase móvel composta por uma mistura das soluções A (tampão fosfato de amônio, pH 4,5) e B (acetonitrila), no modo de eluição gradiente. A vazão utilizada foi de 1,0 mL/min e o comprimento de onda 238 nm. O fármaco foi submetido a condições de estresse por hidrólise, oxidação, fotólise, umidade e degradação térmica. Obteve-se degradação considerável nas condições de hidrólise alcalina, ácida e estresse oxidativo. No método desenvolvido por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), a resolução entre CET e os seus potenciais produtos de degradação foi maior que 2,4; além disso, a pureza de pico de CET em todas as condições foi maior que 99%, demonstrando o poder indicativo de estabilidade do método. A impureza B (desacetilcefalotina) que é um metabólito menos ativo da CET foi identificada e apresentou formação significativa, especialmente na condição... / Abstract: Cephalothin (CET) is a semi-synthetic β-lactam antimicrobial compound, bactericidal, and it represents the prototype of cephalosporins, which belongs to the first-generation class. Cephalosporins present a larger spectrum of activity than penicillins and they are widely prescribed. Few analytical methods are described in the literature for the analysis of CET and to our knowledge rapid stability-indicating liquid chromatography (LC) methods for this compound have not been published elsewhere. A stability-indicating gradient reversed phase liquid chromatography (RP-LC) method has been developed for the quantitative determination of CET, in the presence of its impurities and degradation products generated from forced degradation studies, in samples of lyophilized powder for injection. The developed method is also applicable for the related substances determination in bulk drugs and pharmaceutical forms. The chromatographic separation was achieved on an Agilent Eclipse XDB-Phenyl, 250 mm x 4.6 mm, 5 μm column with mobile phase containing a gradient mixture of solutions A (aqueous ammonium phosphate buffer, pH 4.5) and B (acetonitrile) as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min and the detection wavelength was 238 nm. The drug substance was subjected to stress conditions of hydrolysis, oxidation, photolysis, humidity and thermal degradation. Considerable degradation was found to occur in base, acid and oxidative stress conditions. In the developed high performance liquid chromatography (HPLC) method, the resolution between CET and its potential degradation products was found to be greater than 2.4, further, the peak purity of CET in all conditions were more than 99% proving the stability-indicating power of method. The less active metabolite of CET, desacetylcephalothin (impurity B), was identified and is showed significant formation especially in alkaline condition. This method is able to detect the degradation products of CET at a ... / Mestre
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Análise químico-farmacêutica do ácido fusídico em formulações de creme /Curbete, Mariane Machado. January 2015 (has links)
Orientador: Hérida Regina Nunes Salgado / Banca: Marlus Chorilli / Banca: Martin Steppe / Resumo: O ácido fusídico é um antimicrobiano esteroide, indicado no tratamento de infecções graves causadas por micro-organismos do gênero Staphylococcus e de outras espécies de bactérias Gram-positivas, incluindo espécies resistentes à penicilina e a outros antimicrobianos. Pesquisas envolvendo o desenvolvimento de métodos analíticos mais práticos são relevantes para otimizar as análises de rotina na indústria farmacêutica e garantir a qualidade do produto comercializado. Desta forma, este trabalho teve como principal objetivo o desenvolvimento de métodos analíticos mais rápidos, seguros para os operadores, econômicos e de fácil execução, em comparação aos métodos descritos na literatura para a determinação do ácido fusídico na forma farmacêutica de creme dermatológico. O ácido fusídico foi analisado quanto às suas características organolépticas e físico-químicas. Também foi realizada análise qualitativa pelo método de espectrofotometria de absorção na região do visível e por cromatografia em camada delgada. Para quantificação do ácido fusídico, foram desenvolvidos e validados dois métodos: método por cromatografia líquida de alta eficiência indicadivo de estabilidade, na faixa de concentração de 5,0 a 95,0 μg/mL, utilizando fase móvel composta por acetonitrila e água (72:28, v/v), pH 3,5 ajustado com ácido acético e comprimento de onda de 210 nm, este método apresentou tempo de retenção médio de 8,12 minutos, exatidão de 101,22% e teor de 104%; ensaio microbiológico pelo método turbidimétrico, na faixa de concentração de 0,25 a 2,25 μg/mL, utilizando caldo casoy e 6% do micro-organismo Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, cuja exatidão e percentual médio foram de 101,95% e 104,60%, respectivamente. Os métodos foram validados de acordo com as diretrizes do ICH e da legislação brasileira e mostraram ser precisos, robustos,... / Abstract: Fusidic acid is an antimicrobial steroid, indicated in the treatment of serious infections caused by microorganisms of the genus Staphylococcus and other Gram-positive bacteria species, including resistant species to penicillin and other antimicrobials. Research involving the development of more practical analytical methods are relevant to optimize the analysis in the pharmaceutical industry and secure the quality of commercialized product. Thus, this study aimed to develop faster analytical methods, safer for operators, economical and easy to perform, compared to the methods described in the literature for the determination of fusidic acid in the pharmaceutical form of dermatological cream. Fusidic acid was analyzed for its organoleptic and physical-chemical characteristics. Qualitative analysis was performed method by spectrophotometric absorption in the visible region and by thin layer chromatography. For quantification of fusidic acid, were developed and validated two methods: stability indicative method by high performance liquid chromatography, in the concentration range from 5.0 to 95.0 μg mL-1, using mobile phase composed by acetonitrile and water (72:28, v/v), pH 3.5 adjusted with acetic acid and at a wavelength at 210 nm, this method presented average retention time of 8.12 minutes, accuracy of 101.22% and content of 104%; microbiological assay by turbidimetric method, in the concentration range from 0.25 to 2.25 μg mL-1, using casoy broth and 6% of the microorganism Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, whose accuracy and mean percentage were 101.95% and 104.60%, respectively. The methods were validated according to ICH guidelines and Brazilian legislation and shown to be accurate, robust, selective, accurate and equivalent to quantify the fusidic acid, at a significance level of 5%. Thus, both methods can be employed in the analysis of fusidic acid in pharmaceutical form of dermatological cream in the pharmaceutical ... / Mestre
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Efeitos da doxicilina na hipertensão arterial induzida pela exposiçao ao chumbo : quantificação de pepídeos vasoativos /Nascimento, Regina Aparecida do. January 2015 (has links)
Orientador: Carlos Alan Candido Dias Junior / Banca: Alaor Aparecido Almeida / Banca: José Eduardo Tanus dos Santos / Resumo: Neste trabalho foi investigado a participação de MMP's na intoxicação aguda por chumbo, bem como se a doxiciclina reverte a hipertensão induzida pelo chumbo e a alteração dos níveis plasmáticos de CGRP- (peptídeo relacionado ao gene da calcitonina), adrenomedulina ou endotelina após hipertensão induzida pelo chumbo. Utilizamos 40 ratos machos Wistar adultos jovens (pesando 200g). Grupo Pb (n=12) foi intoxicado com acetato de chumbo (1ª dose 8 μg /100g do rato, e subsequentes doses 0.1μg/100g intra-peritoneal para cobrir a perda diária, durante sete dias) e tratados com doxiciclina 30mg/kg/dia do rato (Pb+Doxy = 12) via oral uma vez ao dia. Grupo controle (n=8) recebeu acetato de sódio para oferecer quantidade equimolar de moléculas de acetato do grupo Pb. Grupo controle também foi tratado com doxiciclina (Grupo Doxy, n=8). Todos os tratamentos foram realizados por sete dias. A concentração em chumbo em sangue total foi determinada em forno de grafite por espectrometria de absorção atômica. Concentrações plasmáticas de adrenomedulina, CGRP, endotelina e MMP-2 foram avaliadas usando kits comerciais de imunoensaio enzimático (ELISA). O comitê de ética institucional (protocolo nº 458/2013) aprovou todos os experimentos. Houve aumento na pressão sistólica (grupo Pb 167 ± mmHg vs. 142 ± 2 ou 143 ± 3 mmHg no grupo controle) (P<0.05), entretanto, doxiciclina mostrou diminuir valores (137 ± 3 mmHg no grupo Pb+Doxy). A concentração de chumbo no sangue foi significativamente aumentada em ambos os grupos intoxicados (Pb e Pb + Doxy) que apresentou 10μg/dL (± 1,0) vs. 2,0 μg/dL (± 1,0) em grupos não intoxicados (grupos Controle ou Doxy). Doxiciclina reverteu a redução de 45% nos níveis de adrenomedulina induzido pelo chumbo (grupo Pb apresentou 0.43 (± 0,2) vs. 1.0 pg/mL (± 0,2) em grupo Pb+Doxy). Não observamos mudança nos níveis plasmáticos de CGRP, endotelina e MMP-2. Sugerimos que a hipertensão... / Abstract: In this work was investigated the participation of MMP's in acute lead intoxication, as well as if doxycycline reverses the lead-induced hypertension,and whether there arechanges in CGRP (calcitonin gene related peptide),adrenomedullin or endothelinplasma levels afterlead-induced hypertension.40 Wistar young adult male rats(weighting 200g) were used. Pb group (n=12) was intoxicated with lead acetate (1st dose 8μg/100g of body weight, and subsequent doses 0.10 μg/100g, intra-peritoneal to cover daily loss, during seven days) and treated with doxycycline (30mg/kg of body weight) (Pb+Doxy group, = 12) or saline (Pb group, = 12) by gavage, once a day. Control groups (n=8) received sodium acetate in order to offer the same amount of acetate molecules asPb group. Control group was also treated with doxycycline (Doxy group, n=8). All treatments were performed for seven days. Lead concentrations in whole blood were determined by graphite furnace atomic absorption spectrometry. Plasma adrenomedullin, CGRP, endothelin and MMP-2 concentrations were evaluated using commercials enzyme immunoassays (ELISA) kits. All experiments were approved by the Institution ethics committee (protocol nº 458/2013). There was an increase (P<0.05) in the systolic blood pressure of Pb group (167 mmHg vs. 142 ± 2 ou 143± 3 mmHg in Control group), however, doxycycline showed a decrease in these values (137± mmHg in Pb+Doxy group). The lead concentrations in blood were significantly increased in both intoxicated groups (Pb and Pb+Doxy groups) which presented 10μg/dL±1,0 μg/dLvs. 2μg/dL±1,0 μg/dL, in non-intoxicated groups (Saline or Doxy groups). Doxycycline reversed the reduction of 45% in the levels ofadrenomedullin induced by lead (Pb group presented 0.43 pg/mL vs. 1.0 pg/mL in Pb+Doxy group). We did not observe changes in the plasmatic levels of CGRP, endothelin and MMP-2.We suggest that hypertension induced by lead exposure (8 μg/100g ... / Mestre
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Efeito de diferentes terapias locais para o tratamento de periodontite crônica em indivíduos diabéticos tipo 2: estudo clínico controlado randomizado triplo cego de boca dividida com acompanhamento de seis meses /Santos, Nídia Cristina Castro dos. January 2016 (has links)
Orientador: Mauro Pedrine Santamaria / Co-orientador: Lúcio Murilo dos Santos / Banca: Fábio da Silva Matuda / Banca: Andréa Carvalho de Marco / Resumo: O objetivo do estudo foi comparar diferentes abordagens para o tratamento da periodontite crônica em pacientes portadores de diabetes mellitus tipo 2 (DM2). Em 20 pacientes portadores de diabetes mellitus tipo 2 com periodontite crônica generalizada moderada a avançada foram selecionadas 3 bolsas periodontais com profundidade de sondagem e perda de inserção ≥5mm que receberam debridamento ultrassônico (DU) somente (Grupo Controle), DU associado à Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (Grupo PDT) e DU associado à Terapia com Laser de Baixa Intensidade (Grupo LLLT). As medidas clínicas avaliadas, como Profundidade de Sondagem (PS), Nível Clínico de Inserção (NIC), Recessão Gengival (RG), Sangramento à Sondagem (SS), Índice Gengival (IG) e Índice de Placa (IP), foram coletadas e comparadas no baseline (BL), 30, 90 e 180 dias. Houve redução estatisticamente significante do BL para 180 dias na PS de 5,75±0,91mm para 3,47±0,97mm no Grupo Controle, de 6,15±1,27mm para 3,71±1,63mm no Grupo PDT e de 6,50±1,61mm para 4,16±1,78mm no Grupo LLLT. Porém a diferença entre os grupos não foi significante. Em RG, o Grupo LLLT apresentou diferença estatisticamente significante em relação aos demais grupos. Pode-se concluir que a aplicação adicional de LLLT mostrou melhores resultados em RG do que as demais terapias. As aplicações adjuntas de PDT e LLLT ao DU não apresentaram benefícios adicionais na redução de PS e no ganho de NIC, sendo as três terapias eficientes no tratamento da periodontite crônica em diabéticos tipo 2 / Abstract: The aim of this study was to compare the local effect of different approaches for the treatment of moderate to severe generalized chronic periodontitis in type 2 diabetic patients. Twenty type 2 diabetic patients with moderate to severe generalized chronic periodontitis were selected. Three periodontal pockets with Probing Depth and Attachment Loss ≥ 5mm received ultrasonic debridement (UD) only (Control Group), UD with adjunct antimicrobial Photodynamic Therapy (PDT Group), or UD with Low Level Laser Therapy (LLLT Group). Clinical measures, such as Probing Depth (PD), Clinical Attachment Level (CAL), Gingival Recession (GR), Bleeding on Probing (BP), Gingival Bleeding Index (GBI), and Plaque Index (PI), were collected and compared at baseline, 30, 90, and 180 days. After 180 follow-up days there was statistically significant reduction in PD from 5.75±0.91mm to 3.47±0.97mm in Control Group, from 6.15±1.27mm to 3.71±1.63mm in PDT Group, and from 6.50±1.61mm to 4.16±1.78mm in LLLT Group. However, intergroup analysis did not reveal any statistically significant difference (p>0.05). For GR, intergroup analysis presented statistically significant difference for LLLT Group. It can be concluded that additional LLLT application showed better results for GR then the other therapies. The adjunct application of PDT and LLLT to UD had no additional benefits for PD reduction and CAL gain, meaning that all the investigated therapies are efficient for the treatment of chronic periodontitis in type 2 diabetics / Mestre
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