Dentre as substâncias químicas secretadas pelas plantas, contra os insetos herbívoros, os inibidores de peptidases são de grande interesse. A atenção dada a esses inibidores deve-se ao fato, de eles serem uma boa alternativa no controle de insetos praga, uma vez que não causam danos ao meio ambiente. Contudo, muitas espécies de insetos são capazes de escapar dos efeitos negativos dos inibidores de peptidases das plantas, via diferentes mecanismos adaptativos. Devido a esse fato, é importante compreender os mecanismos desenvolvidos pelos insetos para burlar os efeitos dos inibidores de peptidases das plantas. Diante desse panorama, este trabalho teve como objetivo estudar o mecanismo adaptativo das serina endopeptidases de Spodoptera frugiperda aos inibidores de endopeptidases de soja. Foram realizadas análises do transcriptoma dos intestinos das lagartas mantidas em exposição crônica ao inibidor. Para averiguar os efeitos causados devido à exposição crônica ao inibidor, foram realizadas comparações da expressão relativa, dos genes de tripsinas e quimotripsinas, de intestinos de lagartas de sexto instar. Contudo, para entender o efeito da exposição aguda ao inibidor, lagartas de S. frugiperda foram criadas em dieta artificial controle até o primeiro dia do sexto instar, após esse período elas foram transferidas para dieta artificial acrescida com 0,5 % dos inibidores de endopeptidases de soja, durante 48 horas. Para verificar a ocorrência de um possível controle epigenético na expressão dos genes, as lagartas foram conduzidas até a fase adulta e os adultos, de cada tratamento, foram acasalados entre si, constituindo uma segunda geração. Dados de expressão relativa foram obtidos, de indivíduos da primeira e segunda geração, e foram então comparados. Foram identificados 14 possíveis genes de quimotripsinas e nove possíveis genes de tripsinas. Os genes de tripsina foram divididos em dois grupos distintos em relação a sua sensibilidade aos inibidores de endopepetidases de soja e expressão relativa. Houve uma resposta diferenciada na ativação dos genes de serina endopeptidases de S. frugiperda, a qual dividiu os genes em dois grupos, os responsivos e os não responsivos ao inibidor. A exposição aguda ao inibidor ativou um pequeno grupo de genes, enquanto que a exposição crônica promoveu uma maior amplitude de expressão gênica, sugerindo mecanismos temporalmente regulados. Por último, evidências indicam, pela primeira vez, a possível ocorrência de um mecanismo epigenético, na resposta das enzimas digestivas aos inibidores de serina endopeptidases de soja. / Among the chemicals secreted by plants against insect herbivores, peptidase inhibitors (PIs) are of great interest. The attention given to PIs is due to the fact that they are a good alternative to control insect pests since they do not cause damage to human health and the environment. However, many species of insects are able to escape the negative effects of PIs plants via different adaptive mechanisms. Because of this, it is important to understand the mechanisms developed by insects to circumvent the effects of PIs plants. Against this background, this research aimed to study the adaptive mechanism of serine endopeptidases Spodoptera frugiperda to soybean endopeptidase inhibitors. For this purpose, larvae of S. frugiperda were reared on artificial diet and control artificial diet plus 0.5% of endopeptidase inhibitors of soybean. We conducted a transcriptome midgut of worms maintained in chronic ingestion of the inhibitor. The relative expression of the genes, trypsin and chymotrypsin, was also compared the midgut of sixth instar larvae kept in these diets. In another experiment, the larvae were conducted to moth, then the treatments were mated forming a second generation. Relative expression data were obtained for individuals of the first and second generation, and then compared. Identified 14 genes with potential of chymotrypsin and 9 trypsin like genes. The trypsin gene were divided into two groups for both their sensitivity to PI soybean endopeptidase, and for their relative expression pattern. There was a differentiated response on the genes activation of S. frugiperda serina endopeptidases. The genes were clustered in 2 groups, the responsive ones and the non responsive to the inhibitor. The acute exposition to the inhibitor activated a small group of genes and the chronic exposition affected several genes, indicating the existence of temporal regulated mechanism. Besides, there is a possible occurance of an epigenetic mechanism, which is related to the digestive serina endopeptidases inhibitors of soybean.

Orientador: Fúlvio Rieli Mendes / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Biossistemas, 2013

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:41:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ErileideCR_DISSERT.pdf: 2520187 bytes, checksum: cbaac2eaf2812c34709374f87564cb10 (MD5) Previous issue date: 2010-07-12 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Corrosion is an important phenomenon that frequently occurs in the oil industry, causing surface ablation, such as it happens on the internal surfaces of oil pipes. This work aims to obtain new systems to reduce this specific problem. The surfactants SDS, CTAB, and UNITOL L90 (in micellar and microemulsionated systems) were used as corrosion inhibitors. The systems were obtained using a C/S ratio of 2, butanol as cosorfactant, kerosene as oil phase and, as water phase, NaCl solutions of 0.5M with pH = 2, 4, and 7. Microemulsion regions were found both for direct and inverse micelles. SDS had the higher microemulsion region and the area was not dependent of pH. The study of micellization of these surfactans in the liquid-gas interface was carried out via the determination of CMC from surface tension measurements. Regarding microemulsionated systems, in the case of CTAB, CMC increased when pH was increased, being constant for SDS and UNITOL L90. Concerning micellar systems, increase in pH caused decrease and increase in CMC for SDC and CTAB, respectively. In the case of UNITOL L90, CMC was practically constant, but increased for pH = 4. The microemulsionated systems presented higher CMC values, except for UNITOL L90 L90. The negative values of free energy of micellization indicated that the process of adsorption was spontaneous. The results also indicated that, comparing microemulsionated to systems, adsorption was less spontaneous in the case of SDS and CTAB, while it did not change for UNITOL L90. SAXS experiments indicated that micelle geometry was spherical, existing also as halter and flat micelles, resuting in a better inght on the adsorption at the liquid-solid interface. Efficiency of corrosion inhibition as determined by electrochemical measurements, from corrosion currents calculated from Tafel extrapolation indicuting heat showed surfactants to be efficient even at low concentrations. Equilibrium isotherm data were fitted to the Freundlich model, indicating that surfactant adsorption occurs in the form of multilayers / A corros?o ? um fen?meno presente em diversos seguimentos da ind?stria do petr?leo, causando desgastes em superf?cies de equipamentos met?licas, como exemplo a corros?o interna nos oleodutos. Este trabalho visa obter novos sistemas qu?micos para diminuir tal problema. Os tensoativos utilizados como inibidores de corros?o foram o SDS, CTAB e UNITOL L90 em sistemas micelares e microemulsionados. Para obten??o dos sistemas microemulsionados utilizou-se uma raz?o C/T=2, butanol como cotensoativo, querosene como fase ?leo e como fase aquosa utilizou-se solu??es de NaCl 0,5M nos pH s 2, 4 e 7. As regi?es de microemuls?o encontradas para os tr?s tensoativos s?o formadas por micelas diretas e inversas. A ?rea se mant?m constante com a varia??o do pH, o SDS tem maior regi?o de microemuls?o. O estudo da miceliza??o destes tensoativos na interface l?quido-g?s foi realizado a partir de medidas de tens?o superficial obtendo os valores de c.m.c, os quais foram particamente constantes para os sistemas microemulsionados com os tensoativos SDS e UNITOL L90 L90, e aumentaram para o CTAB quando elevou-se o pH. Os valores de c.m.c para os sistemas micelares com os tensoativos SDS e CTAB diminu?ram e aumentaram, respectivamente, quando aumentou-se o pH. J? o UNITOL L90 apresentou valores praticamente constantes, por?m foi maior em pH 4. Os sistemas microemulsionados apresentaram valores de c.m.c maiores, exceto para o tensoativo UNITOL L90. Os valores negativos de energia livre de miceliza??o indicaram que o porcesso de adsor??o ? espont?neo. Os resultados mostraram que os sistemas microemulsionados para os tensoativos SDS e CTAB foram menos espont?neos comparados ao sistema micelar, enquanto o UNITOL L90 apresentou valores praticamente constantes. Experimentos com SAXS mostraram que as geometrias das micelas foram esf?ricas, existindo ainda na forma de halteres ou de micelas achatadas, o que facilitou a compreens?o do estudo de adsor??o na interface l?quido-s?lido. As efici?ncias de inibi??o ? corros?o foram determinadas mediante medidas eletroqu?micas, a partir das correntes de corros?o encontradas atrav?s da extrapola??o de Tafel. Os tensoativos estudados se mostraram eficientes mesmo em baixas concentra??es. Os dados experimentais de ajustaram ao modelo da isoterma de Freundlich, indicando que a adsor??o dos tensoativos ocorre em multicamadas

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-02-23T13:23:39Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávia Cristina da Silva - 2015.pdf: 1680001 bytes, checksum: 3d5116e971ca03d4464ee6b64ab4a913 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-02-23T13:26:06Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávia Cristina da Silva - 2015.pdf: 1680001 bytes, checksum: 3d5116e971ca03d4464ee6b64ab4a913 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-23T13:26:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávia Cristina da Silva - 2015.pdf: 1680001 bytes, checksum: 3d5116e971ca03d4464ee6b64ab4a913 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / The discovery and development of drugs consist of a complex process, requiring the integration of various strategic areas such as knowledge, innovation, technology, management and high investments in Research, Development and Innovation (RD&I). No drug can be approved for use in humans without first go through extensive studies aimed at ensuring its effectiveness and safety. On the other hand, a drug that inhibits the activity of a metabolic enzyme cytochrome P450 family (CYP450) can affect the pharmacokinetics of other drugs, resulting in drug-drug interactions (DDIs), which potentially lead to side effects and toxic effects. The main oxidative enzymes responsible for drug metabolism have as main representatives CYP450 superfamily, wherein the CYP3A4 isoform is the most important because it is responsible for metabolizing approximately 50% of the drugs on the market. Several computational methods have been developed as a strategy to predict human metabolism in the early stages of research and development of drugs. In silico models of metabolism have advantages such as faster, lower cost and ease of operation when compared to traditional models in vitro and in vivo. The work aimed mainly at the development of Quantitative Relations between models chemical structure and activity / property (QSAR / QSPR) robust and predictive, to identify CYP3A4 substrates and inhibitors. To this were collected, integrated and prepared larger data sets available in the literature substrates and inhibitors of CYP3A4. Several QSAR models were generated and validated for both properties using a workflow that contemplated carefully the recommendations of the Organization for Economic Co-operation Development (OECD). The combination of different descriptors and machine learning methods have led to obtain robust and predictive QSAR models, with correct classification rate (CCR) ranging from 0.65 to 0.83 and 0.69 to 0.89 of coverage, showing a statistically significant values for classification of compounds with high accuracy whether or not substrates of CYP3A4 substrates. The binary Morgan RFgenerated model to classify compounds inhibitors and non-inhibitors also proved highly robust and predictive with sensitivity values of 0.77 and accuracy of 0.76, and the Morgan-RF model multiclass obtained values of 0.68 sensitivity and 0.69 for accuracy. The map of predicted probability proved useful as it could encode major structural fragments to classify compounds inhibitors or not CYP3A4 inhibitors. In conclusion, have been developed and validated many QSAR to predict the interaction with the CYP450 enzyme that may be useful in the early stages of the development of new drugs. The next step is the online availability of the models obtained in LabMol server (http://labmol.farmacia.ufg.br). / A descoberta e o desenvolvimento de fármacos consistem um processo complexo, sendo necessária a integração de várias áreas estratégicas como conhecimento, inovação, tecnologia, gerenciamento e altos investimentos em Pesquisa, Desenvolvimento e Inovação (PD&I). Nenhum fármaco pode ser aprovado para uso em humanos sem que antes passe por extensivos estudos que visem garantir sua eficácia e segurança. Um fármaco que inibe a atividade metabólica de uma enzima da família citocromo P450 (CYP450), pode afetar a farmacocinética de outros fármacos, resultando em interações fármaco-fármaco (DDIs), que podem conduzir potencialmente a efeitos colaterais e tóxicos. As principais enzimas oxidativas responsáveis pelo metabolismo de fármacos possuem como principais representantes a superfamília CYP450, em que a isoforma CYP3A4 é a mais importante, pois é responsável por metabolizar aproximadamente 50 % dos fármacos disponíveis no mercado. Diversos métodos computacionais têm sido desenvolvidos como estratégia para predizer o metabolismo humano nos primeiros estágios de pesquisa e desenvolvimento de fármacos. Modelos in silico do metabolismo apresentam vantagens como maior rapidez, menor custo e maior facilidade de operação, quando comparados aos modelos tradicionais in vitro e in vivo. O trabalho teve como objetivo central o desenvolvimento de modelos de Relações Quantitativas entre estrutura química e atividade/propriedade (QSAR/QSPR) robustos e preditivos, visando identificar substratos e inibidores de CYP3A4. Para isso, foram compilados, integrados e preparados os maiores conjuntos de dados disponíveis na literatura de substratos e inibidores de CYP3A4. Vários modelos de QSAR foram gerados e validados para ambas as propriedades usando um fluxo de trabalho que contemplou criteriosamente as recomendações da Organization for Economic Co-operation Development (OECD). A combinação de diferentes descritores e métodos de aprendizado de máquina levaram a obtenção de modelos QSAR robustos e consistentes, com taxa de classificação correta (CCR) que variam entre 0,65-0,83 e cobertura de 0,69-0,89,demonstrando valores estatisticamente significativos para classificação com alta precisão de compostos em substratos ou não substratos de CYP3A4. O modelo Morgan-RF binário gerado para classificar compostos em inibidores e não inibidores se mostraram também altamente robusto e preditivo com valores de sensibilidade de 0,77 e acurácia de 0,76, e o modelo Morgan-RF multiclasse obteve valores de 0,68 para sensibilidade e 0,69 para acurácia. O mapa de probabilidade predita se mostrou útil, pois conseguiu codificar fragmentos estruturais importantes para classificar compostos em inibidores ou não inibidores de CYP3A4. Como conclusões foram desenvolvidos e validados diversos modelos de QSAR para prever a interação com a enzima CYP450 que podem ser úteis nos estágios iniciais do desenvolvimento de novos fármacos. O próximo passo será a disponibilização online dos modelos obtidos no servidor do LabMol (http://labmol.farmacia.ufg.br).

Tratamentos de metais contra a corrosão usando formulações contendo derivados de cromo hexavalente (Cr6+) tem sido padrão na indústria de tratamento de superfície durante muitas décadas. Esses tratamentos oferecem excelente proteção contra a corrosão, fornecem boa base para pinturas, são baratos e relativamente fáceis de aplicar. Além do mais oferecem proteção ativa ao substrato devido à capacidade de autorregeneração. Porém, restrições ambientais e de saúde, tornadas mais severas a partir das últimas décadas, requerem a substituição destes tratamentos por processos que sejam ambientalmente corretos e não agressivos à saúde humana. Neste contexto, a indústria aeroespacial, amplamente dependente de ligas de alumínio com elevada resistência mecânica para a construção das aeronaves, é uma das mais atingidas, visto que várias das etapas do tratamento superficial e dos processos de proteção contra a corrosão destas ligas utilizam compostos de Cr6+. Dentro dessa nova realidade, a utilização de revestimentos híbridos derivados de silanos, obtidos pelo processo sol-gel, tem se apresentado como uma das alternativas mais investigadas para a substituição dos pré-tratamentos à base de cromato. Estes revestimentos formam uma cadeia polimérica compacta sobre a superfície do metal constituindo uma barreira efetiva contra espécies agressivas, podendo também ser funcionalizados para apresentarem compatibilidade com revestimentos orgânicos. Entretanto os mesmos não exibem proteção ativa contra a corrosão. Nesse trabalho o comportamento anticorrosivo, em solução de NaCl 0,1 M, de um revestimento híbrido produzido pela hidrólise e condensação do 3-glicidóxipropiltrimetóxisilano (GPTMS) e do tetraetil ortosilicato (TEOS) aplicado sobre a liga AA2024-T3 foi investigado por espectroscopia de impedância eletroquímica (EIS) e analisado por SEM/EDX. Com a finalidade de melhorar o desempenho dos revestimentos, as soluções de hidrólise foram modificadas pela introdução de 0,005 M de inibidores de corrosão derivados de triazol (benzotriazol (BTAH) e toliltriazol (TTA)) ou de organofosfonatos (ácido trimetileno fosfônico (ATMP) e ácido 1-hidróxietileno 1,1-difosfônico (HEDP)). Os resultados dos ensaios eletroquímicos mostraram que, apesar de eficientes para a proteção contra a corrosão da liga, o BTAH e o TTA interferem negativamente nas propriedades anticorrosivas do revestimento híbrido. Por sua vez, a modificação do híbrido com o ATMP ou HEDP melhorou a resposta de impedância do revestimento e aumentou sua estabilidade, se mostrando como um enfoque promissor para aumentar o desempenho do revestimento. A espectroscopia por emissão de fotoelétrons (XPS) e a espectroscopia Raman foram utilizadas para caracterizar o híbrido modificado com os organofosfonatos. Através da primeira técnica foi possível evidenciar a interação das moléculas de inibidor com a superfície metálica. Já os resultados de espectroscopia Raman indicaram a incorporação dos inibidores no revestimento, tendo sido mais eficaz para esta finalidade que as análises por XPS. Entretanto, para evidenciar esse processo, foi necessário aumentar a concentração dos inibidores em 10 vezes com relação à quantidade empregada nos ensaios eletroquímicos. / Anticorrosion metals treatments using formulations containing derivatives of hexavalent chromium (Cr6+) have been standard in the surface treatment industry for many decades. These treatments afford excellent corrosion protection, offer good base for paintings, are inexpensive and relatively easy to apply. Besides, they provide active protection to the substrate due to their selfhealing abilities. However, environmental and health restrictions, made more severe from the end of the eighties, require replacement of these treatments by processes that are environmentally friendly and not aggressive to human health. In this context, the aerospace industry, which is strongly dependent on high strength aluminium alloys, is one of the most heavily affected, as (Cr6+) compounds are used in several steps of the surface treatment and corrosion protection processes. Within this new reality, the use of hybrid coatings derived from silanes and obtained by the sol-gel process, has emerged as one of the most investigated alternatives to replace the chromate based pre-treatments. These coatings form a compact polymer network on the metal surface providing an effective barrier against aggressive species, they may also be tailored to present compatibility with organic coatings. However they do not exhibit active corrosion protection. In this study the corrosion behavior, in 0.1 M NaCl, of a hybrid coating produced by hydrolysis and condensation of 3glycidoxypropyltrimethoxysilane (GPTMS) and tetraethyl orthosilicate (TEOS) applied on AA2024-T3 alloy was investigated by means of electrochemical impedance spectroscopy (EIS) and analysed by SEM/EDX. Aiming to improve the coatings performances, the hydrolysis solutions were modified by the addition of 0.005 M of triazoles (benzotriazole (BTAH) and tolyltriazole (TTA)) or organophosphates (trimethylene phosphonic acid (ATMP) and 1hydroxyethylidene-1 1-diphosphonic acid (HEDP)) based corrosion inhibitors. The results of the electrochemical tests showed that, although effective for corrosion protection of the alloy, BTAH and TTA adversely impacted the anticorrosive properties of the hybrid coating. In turn, the modification of the hybrid with ATMP or HEDP improved the impedance response of the coating and increased its stability, proving to be a promising approach to enhance the coating performance. X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) and Raman spectroscopy were used to characterize the hybrid modified with organophosphates. With the first technique it was possible to demonstrate the interaction of the inhibitor molecules with the metal surface. Raman spectroscopy results indicated the incorporation of the inhibitors in the coating, being more effective for this purpose than the XPS analysis. However, to demonstrate this process, it was necessary use the concentration of the inhibitors 10 times more than the amount employed in the electrochemical tests.

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2017-05-03T11:26:21Z No. of bitstreams: 1 2013 - Valeria Polese.pdf: 1777501 bytes, checksum: c11ce694e66877535a131581bb746469 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-03T11:26:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013 - Valeria Polese.pdf: 1777501 bytes, checksum: c11ce694e66877535a131581bb746469 (MD5) Previous issue date: 2013-04-15 / AMPLA Energia e Servi?os S. A. / LIGHT Servi?os de Eletricidade S.A. / The present study looked for alternatives of growth handling and of pruning in plants used in the urban forestation, seeking to the decrease of conflicts of these with electric power spinnings. In the chapter I experiments were accomplished with Flamboyant in soil and simple nutritious solution containing Al, with objective of studying handling alternatives seeking to reduce the growth and development of plantules Flamboyant. The aluminum atrophies roots could affect the growth. Six experiments were accomplished with plantules (soil and simple nutritious solution) in conditions of growth camera and vegetation house, Department of Fitotecnia - UFRRJ. In the soil experiments they were used two sources of sulfate of aluminum, being a commercial one and a pure source analytically, in the concetrations 0, 100, 200, 300 and 400 kg ha-1 in the soils Planossolo and Argissolo, with four repetitions. The experiments accomplished in simple nutritious solution just received calcium (0,001 mM) and they had as source AlCl3 with doses that varied from 0,075 to 5,0 mM. Through the results of the chapter I was ended that in same or superior conditions of soil concentrations to 0,4 Cmolc/dm3 of Al caused toxicity to the plantules of Flamboyant, with effects mainly in the length root, and in solution simple nutritious doses same or upper to 0,075 mM of AlCl3 paralyzed the growth root. Al can be used as inhibitor of vegetable growth in plantules of Flamboyant. The chapter II had as objective studies the effects of the pruning and association with growth inhibitors in arboreal species. Four experiments were accomplished with the plants Sabi?, Sombreiro, and Cucumber (phytotoxicity Evaluation the herbicides). The experiments were installed in the Department of Fitotecnia-UFRRJ, Serop?dica. In the experiment 1 (Sabi?) all the plants were cut off 2 m of height, and they were applied the treatments: control, 2.4-D+Picloram, and Picloram. In the experiment 2 (Sabi?) all the plants were pruned removing 1/3 of the cup and applying the treatments: control, HCl, AlCl3, Picloram and nearby Cut (Without pruning of 1/3 of the cup). The experiment 3 (Sombreiro) had as treatments cut types in relation to the main trunk: nearby, leaving stub of 20 cm and of 40 cm. The experiment 4 (Pepino) it was installed in the originating from soil the first experiment with Sabi?. In the experiment 1, the treatment with Picloram delayed the beginning of the regrowth, important factor for the present study, so that they delay to arrive to the electric power spinning. In the experiment 2, just the treatment Picloram presented length and diameter of sprouts a little smaller in relation to the other treatments. In the experiment 3 it was verified that the nearby cut didn't present new budding until the 145 days after the pruning. In the experiment 4 the cucumber presented more intense toxicity in the treatment with Picloram. Was ended that Picloram and 2,4-D+Picloram were efficient for budding handling in adult plants of Sabi?, because they presented budding with small lengths, delaying the accomplishment of new pruning. In plants of Sombreiro the nearby cut was efficient, not presenting budding. It happened toxicity for Picloram in plants of Pepino. / O presente estudo buscou alternativas de manejo de crescimento e de poda em plantas utilizadas na arboriza??o urbana, visando ? diminui??o de conflitos destas com fia??es de energia el?trica. No cap?tulo I foram realizados experimentos com Flamboyant em solo e solu??o nutritiva simples contendo Al, com objetivo de estudar alternativas de manejo visando diminuir o crescimento e desenvolvimento de pl?ntulas Flamboyant. O alum?nio atrofia ra?zes podendo afetar o crescimento. Foram realizados seis experimentos com pl?ntulas (Solo e solu??o nutritiva simples) em condi??es de c?mara de crescimento e casa de vegeta??o, Departamento de Fitotecnia - UFRRJ. Nos experimentos de solo foram utilizadas duas fontes de sulfato de alum?nio, sendo uma comercial e uma fonte pura analiticamente, nas concentra??es 0, 100, 200, 300 e 400 kg ha-1 nos solos Planossolo e Argissolo, com quatro repeti??es. Os experimentos realizados em solu??o nutritiva simples receberam apenas c?lcio (0,001 mM) e tiveram como fonte AlCl3 com doses que variaram de 0,075 a 5,0 mM. Atrav?s dos resultados do cap?tulo I conclui-se que em condi??es de solo concentra??es iguais ou superiores a 0,4 Cmolc/dm3 de Al causaram toxicidade ?s pl?ntulas de Flamboyant, com efeitos principalmente no comprimento radicular, e em solu??o nutritiva simples doses iguais ou superiores a 0,075 mM de AlCl3 paralisaram o crescimento radicular. O Al pode ser utilizado como inibidor de crescimento vegetal em pl?ntulas de Flamboyant. O cap?tulo II teve como objetivo estudar os efeitos da poda e da sua associa??o com inibidores de crescimento em esp?cies arb?reas. Foram realizados quatro experimentos com as plantas Sabi?, Sombreiro, e Pepino (Avalia??o de fitotoxidade a herbicidas). Os experimentos foram instalados no Departamento de Fitotecnia-UFRRJ, Serop?dica-RJ. No experimento 1 (Sabi?) todas as plantas foram decepadas a 2 m de altura, e foram aplicados os tratamentos: Testemunha; 2,4-D+Picloram; e Picloram. No experimento 2 (Sabi?) todas as plantas foram podadas retirando 1/3 da copa e aplicando os tratamentos: Testemunha, HCl, AlCl3, Picloram e Corte rente (Sem poda de 1/3 da copa). O experimento 3 (Sombreiro) teve como tratamentos tipos de corte em rela??o ao tronco principal: rente, deixando toco de 20 cm e de 40 cm. O experimento 4 (Pepino) foi instalado no solo proveniente do primeiro experimento com Sabi?. No experimento 1, o tratamento com Picloram atrasou o in?cio da rebrota, fator importante para o presente estudo, a fim de que demorem chegar ? fia??o de energia el?trica. No experimento 2, apenas o tratamento Picloram apresentou comprimento e di?metro de brotos um pouco menores em rela??o aos demais tratamentos. No experimento 3 foi verificado que o corte rente n?o apresentou novas brota??es at? os 145 dias ap?s a poda. No experimento 4 o pepino apresentou toxidez mais intensa no tratamento com Picloram. Conclui-se que o Picloram e 2,4-D+Picloram foram eficientes para manejo de brota??es em plantas adultas de Sabi?, pois apresentaram brota??es com comprimentos pequenos, atrasando a realiza??o de nova poda. Em plantas de Sombreiro o corte rente foi eficiente, n?o apresentando brota??es. Ocorreu toxidez por Picloram em plantas de Pepino

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Depression and chronic pain coexist in several patients and may be modulated by the same neurotransmitter systems. In this context, various studies have demonstrated that antidepressants from the class of the inhibitors of monoamine oxidase-A (MAO-A) enzyme presented antinociceptive effect in different pain models in experimental animals, as well as analgesic action in clinic studies. Thus, in the present study were evaluated the MAO-A inhibitory properties, as well as the antidepressant and antinociceptive potential of the novel imidazoline compound 2-(3,4-dimethoxy-phenyl)-4,5-dihydro-1H-imidazole (2-DMPI) in mice. 2-DMPI showed to be a mixed, reversible and preferential MAO-A inhibitor. The treatment with 2-DMPI (100-1000 μmol/kg, s.c.) produced an antidepressant-like effect in the tail suspension test without affecting motor activity of the animals. The mice treated with 2-DMPI showed a decrease in serotonin and dopamine turnover in specific brain regions, suggesting that the antidepressant-like effect of this compound was mediated by serotonergic and dopaminergic systems. This was confirmed by experiments showing that the antidepressant-like effect of 2-DMPI was abolished by pretreatment with serotonergic and dopaminergic receptor antagonists. In order to evaluate a possible antinociceptive action of 2-DMPI, a mice model of neuropathic pain, induced by chronic constriction injury (CCI) of the sciatic nerve was used. It was observed that mice submitted to CCI presented an increase in MAO-A activity in lumbar spinal cord compared with sham-submitted mice and that the treatment with 2-DMPI (30-300 μmol/kg, s.c.) reversed the CCI-induced mechanical hyperalgesia. Furthermore, the antihyperalgesic effect of 2-DMPI was reversed by intrathecal injection of the serotonergic 5-HT3 receptor antagonist ondansetron (10 μg/site). These results suggest that 2-DMPI, due to its ability to modulate MAO-A activity and, consequently, the monoaminergic systems, could be a promising prototype to the development of new drugs with antidepressant and analgesic properties. / A depressão e a dor coexistem em muitos pacientes e podem ser moduladas pelos mesmos sistemas de neurotransmissores. Nesse contexto, diversos estudos têm demonstrado que antidepressivos da classe dos inibidores da enzima monoamina oxidase-A (MAO-A) apresentam efeito antinociceptivo em diferentes modelos de dor em animais experimentais, assim como ação analgésica em estudos clínicos. Em vista disso, no presente estudo foram avaliadas as propriedades inibitórias sobre a atividade da MAO-A, assim como os potenciais antidepressivo e antinociceptivo do novo composto imidazolínico 2-(3,4-dimetoxi-fenil)-4,5-diidro-1H-imidazol (2-DMPI) em camundongos. Foi observado que o 2-DMPI é um inibidor misto, reversível e preferencial da MAO-A. O tratamento com 2-DMPI (100-1000 μmol/kg, s.c.) produziu um efeito tipo-antidepressivo no teste de suspensão da cauda, sem afetar a atividade motora dos animais. Os camundongos tratados com 2-DMPI (300 μmol/kg, s.c.) apresentaram uma diminuição na taxa de renovação da serotonina e da dopamina em regiões cerebrais específicas, sugerindo que o efeito tipo-antidepressivo desse composto foi mediado pelos sistemas serotoninérgico e dopaminérgico. Isto foi confirmado por experimentos que mostraram que o efeito tipo-antidepressivo do 2-DMPI foi abolido pelo pré-tratamento com antagonistas de receptores serotoninérgicos e dopaminérgicos. A fim de avaliar um possível efeito antinociceptivo do 2-DMPI, foi utilizado um modelo de dor neuropática, induzida pela injúria por constrição crônica (CCI) do nervo ciático, em camundongos. Observou-se que os camundongos submetidos à CCI apresentaram um aumento na atividade da MAO-A na medula espinhal lombar comparado com os animais falso-operados e que o tratamento com 2-DMPI (30-300 μmol/kg, s.c.) reverteu a hiperalgesia mecânica induzida pela CCI. Além disso, o efeito antinociceptivo do 2-DMPI foi revertido pela administração intratecal do antagonista do receptor serotoninérgico 5-HT3, ondansetrona (10 μg/sítio). Esses resultados sugerem que o 2-DMPI, devido à sua capacidade de modular a atividade da MAO-A e, consequentemente, os sistemas monoaminérgicos, parece ser um protótipo promissor para o desenvolvimento de novos fármacos com propriedades antidepressiva e analgésica.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:30:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 584816 bytes, checksum: f4330ebbc024b36a1ab766369b97b738 (MD5) Previous issue date: 2008-07-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Plants previously attacked by herbivores may have their defense system activated. The defense forms may occur by different routes. Some of the unleashed routes take place right after the herbivory, when the plant starts responding in an indirect way through the production of volatile substances attractive to natural enemies of the infesting phytophagous. Another route would be the direct response from the plant through the synthesis of proteinase inhibitors produced post-injury, which can affect the development and growth of the infesting phytophagous. The plants can present specificity in the induced responses, that is, the defenses may intimidate a subsequent herbivory; however, in some cases the re- infesting species do not have their performance affected. Recent studies have shown resistance mechanisms in plants of commercial interest against the attack of pests. Strawberry plants which are cultivated in large scale in Brazil have suffered serious damage by the two spotted mite Tetranychus urticae, which is a primary pest for the culture. Therefore, the present study had as an aim to study induced direct resistance in strawberry plants (Fragaria x ananassa Duch.) upon the population dynamics of the two-spotted mite T. urticae. In the experimental studies clean strawberry plants (control), plants that were mechanically injured as well as plants pre-infected with the two-spotted mite T. urticae were used. In order to determine the proteinase inhibitors, samples of each treatment were used. Based on these methods, in test 1 the hypothesis that the pre-infestation of T. urticae would induce the production of proteinase inhibitors reducing the population growth of their co-specifics was tested. In test 2, the specificity of the defensive compounds was studied, testing then the hypothesis that the pre- infestation of T. urticae would induce the production of proteinase inhibitors which would affect the development of red mite Tetranychus mexicanus, a species of spider mite that also occur in strawberry plants. In test 3, the hypothesis that the infestation by T. urticae in the mother strawberry plants would induce the production of proteinase inhibitors and these would be translocated through stolons unt il the strawberry runners injuring the development of T. urticae in these daughter plants was tested. According to the results a smaller number of individuals of T. urticae were found in plants previously infected with the co-specific. The spider mite T. mexicanus did not have its development affected by the induced response due to the pre-infestation of T. urticae. The plant response had contrasting effect to T. mexicanus, apparently the induced defenses in strawberry plants do not act in reinfestations of hetero-specifics, ate least for T. mexicanus. The population growth of T. urticae was also smaller in the strawberry runners of strawberry plants. The induced defense by T. urticae in mother strawberry plants presented systemic defense signals through the stolon, affecting the performance of the phytophagous of the strawberry runners. In the results of the concentrations of proteinase inhibitors, one could verify that they varied among the treatments in the experiments, but were not correlated to phytophagous performance. Possibly, other phytochemicals compounds produced by the plants might be involved in the induced responses by T. urticae. These results support the hypothesis that the plants that present direct defense can reduce the performance of co-specific phytophagous in the following generation. / Plantas previamente atacadas por herbívoros podem ter o seu sistema de defesa ativado. As formas de defesa podem ocorrer por diferentes rotas. Algumas das rotas desencadeadas ocorrem logo após a herbivoria, quando a planta passa a responder de forma indireta através da produção de substâncias voláteis atrativas aos inimigos naturais dos fitófagos infestantes. Uma outra rota seria a resposta direta da planta através da síntese de inibidores de proteases produzidos após a injúria, o que pode afetar o desenvolvimento e crescimento de fitófagos infestantes. As plantas, por sua vez, podem apresentar especifidade nas respostas induzidas, ou seja, as defesas podem intimidar a herbivoria posterior, porém em alguns casos as espécies re- infestantes não tem o desempenho afetado. Estudos recentes têm demonstrado mecanismos de resistência em plantas de interesse comercial contra o ataque de pragas. Plantas de morangueiro que são cultivadas em larga escala no Brasil têm sofrido sérios danos pelo ácaro-rajado Tetranychus urticae, que é praga primária para a cultura. Desse modo, o presente estudo teve como objetivo estudar a resistência induzida direta em plantas de morangueiro (Fragaria x ananassa Duch.) sobre populações de T. urticae. Nos estudos experimentais foram utlizadas plantas de morangueiro limpas (controle), plantas injuriadas mecanicamente e plantas pré-infestadas por T. urticae. Para determinação dos inibidores de proteases foram utilizadas amostras de folhas limpas de cada tratamento. Baseado nestes métodos, testou-se no ensaio 1 a hipótese de que a pré-infestação de T. urticae induziria a produção de inibidores de proteases reduzindo o crescimento populacional de seus coespecíficos. No ensaio 2, estudou-se a especificidade dos compostos defensivos, testando a hipótese de que a pré-infestação de T. urticae induziria a produção de inibidores de proteases que afetariam o desenvolvimento do ácaro-vermelho Tetranychus mexicanus, uma espécie de ácaro que também ocorre em morangueiro. No ensaio 3, foi testada a hipótese de que a infestação por T. urticae nas plantas matrizes de morangueiro induziria a produção de inibidores de proteases e estes seriam translocados através dos estolões até as plantas-filhas prejudicando o desenvolvimento de T. urticae nestes propágulos. De acordo com os resultados, menor número de indíviduos de T. urticae foram encontrados em plantas previamente infestadas com o coespecífico. O ácaro T. mexicanus não teve seu desenvolvimento afetado pela resposta induzida decorrente da pré-infestação de T. urticae. A resposta da planta teve efeito contrastante a T. mexicanus , aparentemente as defesas induzidas em morangueiro não atuam em re-infestações de heteroespecíficos, pelo menos para T. mexicanus. O crescimento populacional de T. urticae também foi menor nos propágulos de morangueiro. A defesa induzida por T. urticae em plantas matrizes de morangueiro apresentou sistemicidade, através do estolão, afetando o desempenho dos fitófagos nos propágulos. Nos resultados das concentrações de inibidores de proteases, verificou-se em geral, que as mesmas variaram entre os tratamentos nos experimentos, mas não foram correlacionados ao desempenho dos fitófagos. Possivelmente, outros compostos fitoquímicos produzidos pelas plantas estejam envolvidos nas respostas induzidas por T. urticae. Estes resultados suportam a hipótese de que as plantas que apresentam defesa direta podem reduzir o desempenho de fitófagos coespecíficos na geração seguinte.

Base teórica: O processo de implantação do embrião no ser humano é extremamente complexo e, ao mesmo tempo, essencial para que a mulher possa engravidar. Neste processo, em que o endométrio precisa sofrer uma série de mudanças para tornar-se receptivo, a adequada expressão de MFG-E8 (milk fat globule epidermal growth factor 8), seu receptor a integrina αvβ3 e LIF (leukemia inhibitory factor) parecem ter um papel importante. Além do mais, mulheres com infertilidade e endometriose podem apresentar a falha de implantação como uma grande barreira para obter seu sucesso terapêutico. Objetivos: Avaliar o papel de MFG-E8 e do seu receptor integrina αvβ3 em um modelo de implantação in vitro com uma linhagem celular trofoblástica e outra de epitélio endometrial. Comparar a expressão de MFG-E8, de integrina αvβ3 e de LIF no endométrio de pacientes férteis e inférteis com endometriose durante a janela de implantação. Métodos: No primeiro ensaio, utilizando-se uma linhagem celular bem diferenciada de adenocarcinoma de endométrio (células Ishikawa) e uma linhagem de coriocarcinoma de trofoblasto, o modelo in vitro de implantação humana foi estabelecido. Para investigação do impacto do bloqueio de MFG-E8 e integrina αvβ3, ambas linhagens celulares foram pré-tratadas com anticorpos contra estas proteínas em diferente concentrações antes do ensaio de adesão. No ensaio subsequente, para comparar a expressão de MFG-E8, de integrina αvβ3 e de LIF no endométrio humano, foram realizadas biópsias no período da janela de implantação (LH+7 a LH+10) com cateter de Pipelle. As amostras foram submetidas a imunohistoquímica, e analisadas através do HSCORE. Resultados: Na avaliação in vitro observamos que as células Ishikawa pré-tratadas com anticorpo anti-MFG-E8 causaram diminuição da adesão das esferas Jar dose-dependente. Por outro lado, o pré-tratamento das esferas Jar não resultou em diminuição significativa da adesão. Pré-tratamento com anticorpos anti-integrina αvβ3, tanto de células Ishikawa como de esferas Jar, causaram inibição significativa, dose-dependente, da adesão das esferas. A análise imunohistoquímica das biópsias realizadas durante a janela de implantação mostrou uma expressão aumentada de MFG-E8 em pacientes com endometriose e infertilidade. Além do mais, houve expressão diminuída de LIF no grupo em estudo. Contudo, não houve diferença estatisticamente significativa na expressão de integrina αvβ3 entre os grupos em estudo. Conclusão: Este estudo demonstrou que, quando se bloqueia MFG-E8 ou seu receptor integrina αvβ3 em células Ishikawa em um modelo in vitro, ocorre uma diminuição de adesão das células Jar. Além do mais, bloqueando-se a integrina αvβ3 nas esferas Jar, também ocorre uma diminuição da adesão destas nas células Ishikawa. No entanto, quando estudamos o endométrio in vivo de pacientes com endometriose e infertilidade, encontramos a expressão aumentada de MFG-E8 e diminuída de LIF durante a janela de implantação no endométrio. / Background: The human implantation process is very complex and, at the same time, it is essential for women to achieve pregnancy. In this process, where the human endometrium must go through a lot of changes in order to become receptive, an adequate expression of MFG-E8 (milk fat globule epidermal growth factor 8), integrin αvβ3 and LIF (leukemia inhibitory factor) appear to play an important role. Furthermore, women with endometriosis and infertility may have in their implantation process the key to achieve pregnancy. Objectives: To investigate the role of MFG-E8 and its receptor integrin αvβ3 in the attachment of trophoblast cells to the endometrial epithelium, in an in vitro model. To compare endometrial expression of MFG-E8, integrin αvβ3 and LIF between fertile patients and patients with endometriosis and infertility during the window of implantation. Methods: In our first assay, by using a well-differentiated endometrial adenocarcinoma cell line (Ishikawa cells) and choriocarcinoma human trophoblast cells (Jar cells), an in vitro model mimicking human implantation was established. To investigate the impact of blocking MFG-E8 and integrin αvβ3, the cell lines were pretreated with antibodies against those proteins at different concentrations before the attachment assay. Moreover, to compare endometrial expression of MFG-E8, integrin αvβ3 and LIF, endometrial biopsies were performed during the window of implantation (LH+7 to LH+10) with the Pipelle catheter. The samples were submitted immunochemistry, and analyzed with HSCORE. Results: Pretreatment of Ishikawa cells with anti-MFG-E8 antibody caused a dosedependent and significant inhibition of attachment is our in vitro assay. On the other hand, pretreatment of Jar spheroids did not result in a significant effect on the attachment rate. Pretreatment of Ishikawa cells as well as Jar spheroids with anti-integrin avb3 antibodies resulted in a dose-dependent, significant inhibition of attachment. The immunochemistry analysis of the endometrial biopsies performed during the window of implantation showed increased MFG-E8 expression in patients with endometriosis and infertility. Moreover, there was lower LIF expression in the study group. Conclusion: This study showed that blocking MFG-E8 and its receptor integrin αvβ3 in Ishikawa cells diminishes Jar spheroid attachment in an in vitro model. Moreover, blocking integrin αvβ3 in the trophoblastic cells also diminished their attachment to the Ishikawa monolayer. Nevertheless, when we studied the endometrium of patients with endometriosis and infertility, we saw an increased expression of MFG-E8 and decreased expression of LIF during the window of implantation.

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