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Efecto de la estimulación con los distintos serotipos de Porphyromonas gingivalis y Aggregatibacter actinomycetemcomitans en la actividad de los linfocitos TCD4+ y la reabsorción ósea in vitro

Melgar Rodríguez, Samanta Azucena January 2014 (has links)
Tesis Magister en Ciencias Odontológicas con Mención en Periodontologia / Las periodontitis son un conjunto de enfermedades de naturaleza inflamatoria y etiología infecciosa cuya causa es la biopelícula subgingival. Esta biopelícula está conformada por una amplia variedad de bacterias Gram-negativas anaerobias, entre ellas, Porphyromonas gingivalis y Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Sobre la base de la antigenicidad de la cápsula de P. gingivalis y del lipopolisacárido de A. actinomycetemcomitans se describen distintos serotipos bacterianos y se ha demostrado que entre estos distintos serotipos existe una potencialidad inmunogénica distinta en los linfocitos TCD4+. En particular, ante los serotipos K1 o K2 de P. gingivalis o el serotipo b de A. actinomycetemcomitans se describe un patrón de respuesta predominantemente tipo Th1 y Th17. En este estudio, linfocitos TCD4+ naïve humanos fueron activados por células dendríticas autólogas estimuladas con los serotipos K1-K6 de P. gingivalis o a-c de A. actinomycetemcomitans. Ante los serotipos K1 o K2 de P. gingivalis se detectaron mayores niveles de expresión de los factores de transcripción T-bet (Th1) y RORC2 (Th17), de secreción de RANKL y de diferenciación de osteoclastos TRAP+ en comparación a los otros serotipos bacterianos. Ante el serotipo b de A. actinomycetemcomitans se detectaron mayores niveles de expresión de T-bet y RORC2 y de secreción de RANKL en comparación a los serotipos a o c. Además, se analizó la frecuencia de proliferación de linfocitos TCD4+ de memoria obtenidos de pacientes con periodontitis y se detectó mayor respuesta ante los serotipos K1 o K2 de P. gingivalis o b de A. actinomycetemcomitans. Estos resultados confirman que los serotipos K1 o K2 de P. gingivalis o b de A. actinomycetemcomitans inducen un patrón de respuesta inmune predominantemente tipo Th1 (pro-inflamatorio) y Th17 (osteo-destructivo). Este patrón de respuesta Th1/Th17 se asoció a un incremento en la diferenciación de osteoclastos TRAP+ mediada por la producción de mayores niveles de RANKL. Finalmente, la mayor frecuencia de proliferación de linfocitos T de memoria ante los serotipos K1 o K2 de P. gingivalis o b de A. actinomycetemcomitans permite especular su participación durante la patogenia de la periodontitis, reflejada por la inducción de memoria inmunológica antígeno-específica. En conclusión, se demuestran diferencias en la respuesta de los linfocitos TCD4+ ante los distintos serotipos de P. gingivalis o A. actinomycetemcomitans y una mayor asociación de los serotipos K1 o K2 de P. gingivalis o b de A. actinomycetemcomitans a los fenómenos celulares y moleculares que explican la reabsorción ósea característica de las periodontitis.
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Pesquisa de subpopulações de linfócitos T em lesões perirradiculares de denters decíduos humanos

Nunes, Ana Cristina Gerent Petry January 2007 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Odontologia / Made available in DSpace on 2012-10-23T02:08:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 244520.pdf: 540334 bytes, checksum: db7a21776a96a6d14966374af4f37a60 (MD5) / O objetivo deste estudo foi observar a presença de sub-populações de linfócitos T marcados em teste imuno-histoquímico com anticorpos anti-CD3, anti-CD4 e anti-CD8 em lesões perirradiculares de 10 molares decíduos. As células foram quantificadas através da análise dos cortes histológicos. Os resultados revelaram que a média de células positivas foi de 6,6% para CD3, 2,2% para CD8 e 0,05% para CD4. As amostras estavam relacionadas com lesões crônicas com o predomínio de LT CD8. Conclui-se que em lesão periapical de dentes decíduos há a presença de células da imunidade específica, caracterizando a necessidade de viabilizar precocemente uma conduta mais adequada para minimizar danos para saúde do paciente infantil.
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Detección de quimioquinas homeostáticas, sus receptores e interleuquina-7 en periodontitis crónica

Yáñez Del Río, Paula Andrea January 2018 (has links)
Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Las enfermedades periodontales son un conjunto de patologías de etiología infecciosa y naturaleza inflamatoria que incluyen las gingivitis y periodontitis. Durante las periodontitis, si bien las bacterias que colonizan la bio-película subgingival pueden generar un daño directo al periodonto, es su interacción con el hospedero lo que provoca la formación del infiltrado inmuno-inflamatorio que lleva a la destrucción de los tejidos de soporte de los dientes y eventualmente a la pérdida de ellos. Durante la constitución de este infiltrado immuno-inflamatorio, los linfocitos T migran desde los linfonodos hacia los tejidos periodontales siguiendo la señalización de quimioquinas inflamatorias, las que aumentan localmente durante las periodontitis. En la última década, las quimioquinas homeostáticas han sido el foco de investigación de la patogénesis de varias enfermedades inflamatorias crónicas, tal como la artritis reumatoide y el síndrome de Sjögren, en las cuales participarían en la formación de estructuras linfoides ectópicas. La presencia de quimioquinas y citoquinas homeostáticas en estas agrupaciones linfoides lleva al incremento en la migración de células indiferenciadas hacia los tejidos inflamados, favoreciendo la presentación antigénica y diferenciación linfocitaria in situ, perpetuándose el proceso inflamatorio. En este trabajo de investigación se analizó la expresión de varias quimioquinas homeostáticas y sus receptores durante la periodontitis crónica. A partir de biopsias obtenidas de pacientes con periodontitis crónica e individuos sanos, se cuantificó mediante RT-qPCR la expresión de los mRNA de las quimioquinas CXCL12, CXCL13, CCL19 y CCL21, de los receptores CCR7, CXCR4 y CXCR5, y de la citoquina IL-7. Además, se cuantificó la secreción de CCL19, CCL21 y CXCL12 en el fluido gingival crevicular mediante ELISA. Finalmente, la expresión de CCR7 fue analizada usando Western Blot en homogeneizados tisulares. En las lesiones periodontales de pacientes con periodontitis crónica se expresaron mayores niveles de CCL19, CCL21, CXCL12, CCR7, CXCR4 y CXCR5 en comparación a los tejidos periodontales de individuos sanos, lo que contribuiría a explicar, al menos en parte, la cronicidad y sitioespecificidad de las periodontitis. / Adscrito a Proyecto de FONDECYT regular 1140904.
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Determinação dos valores de referência das populações linfocitárias em sangue periférico de indivíduos adultos

Oliveira, Renata Cristina Messores Rudolf de January 2013 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:05:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 317914.pdf: 3287867 bytes, checksum: 384318c7ee62dcef59b7569f7b16fc5e (MD5) Previous issue date: 2013 / Os resultados dos testes laboratoriais devem ser comparados o intervalo de referência com o objetivo de se obter um diagnóstico e/ou uma decisão terapêutica. Por isso, os laboratórios de análises clínicas necessitam de intervalos de referência confiáveis e aplicáveis a sua população para todos os parâmetros analisados. De maneira geral, os intervalos de referência aplicados nas rotinas laboratoriais são obtidos da literatura ou de informações contidas nas bulas dos fabricantes dos reagentes; não sendo obtidos com resultados referentes à população ao qual será aplicado. Dessa forma, preconiza-se que cada laboratório estabeleça o intervalo de referência referente a sua população, baseado na metodologia utilizada na rotina. Para isso, foi analisado 238 amostras de sangue periférico de indivíduos adultos saudáveis, não fumantes, doadores de sangue do Serviço de Hemoterapia do Hospital Universitário Polydoro Ernani de São Thiago da Universidade Federal de Santa Catarina. Para a identificação e quantificação das células linfoides foi utilizado o seguinte painel de anticorpos monoclonais anti-: CD4/CD8/CD3/CD45, CD20/CD19/CD45, CD16/CD56/CD3/CD45 e TCRaB/TCRyd/CD3/CD45. Os intervalos de referência para encontrados foram CD3+ de 51,3 a 83,5% e de 718 a 2494 células/mm3; CD4+ de 24,4 a 54,2% e de 456 a 1492 células/mm3; CD8+ de 12,8 a 40,2% e de 272 a 1144 células/mm3; relação T CD4+/T CD8+ de 0,68 a 3,61; CD4+ CD8+ de 0,01 a 3,6% e de 2 a 88 células/mm3; TCR aB+ de 44,3 a 77% e de 855 a 2384 células/mm3; TCR yd de 0,99 a 15,9% e de 19 a 345 células/mm3; CD3+ CD4-CD8- de 1,2 a 13,3% e de 28 a 292 células/mm3; CD19+CD20+ de 6,3 a 20,8% e de 110 a 618 células/mm3; CD19+CD20- de 0,001 a 1,3% e de 0 a 23 células/mm3; NK maduras de 3,1 a 27,4% e de 70 a 745 células/mm3; NK imaturas de 0,08 a 1,1% e de 1 a 23 células/mm3; NK totais de 3,7 a 28,5% e de 82 a 760 células/mm3 e NKT de 0,9 a 21,4% e de 18 a 488 células/mm3. Com relação aos gêneros, as células T CD3+, T CD4+, CD4+CD8+, TCR aB+, TCR yd+, CD19+CD20-, NK maduras e imaturas e NKT apresentaram diferenças significativas na contagem de linfócitos tanto para o valor relativo quanto para o absoluto entre homens e mulheres. Por outro lado, as células T CD8+ e CD19+ apresentaram diferenças apenas relacionadas ao valor absoluto e na relação T CD4+/T CD8+ não foram observadas diferenças estatísticas. A comparação entre o intervalo de referência obtido em indivíduos naturais do Estado de Santa Catarina com os de indivíduos de outros Estados do país e de outros países do mundo confirmou a necessidade de se estabelecer intervalos de referência próprios para essa população.<br> / Abstract : The results of laboratory tests should be compared with the reference range in order to obtain a diagnosis and/or treatment decision. Thus, clinical laboratories need reliable and applicable reference intervals for its population for all parameters analyzed. In general, the reference ranges used in clinical laboratories are obtained from literature or information provided by the reagents manufacturers'. Thus, the reference range are not obtained with results concerning the population which will be applied, since few laboratories establish their own reference ranges. Thus, it is recommended that each laboratory establish reference range refeferente its population, based on the methodology used in the routine.With this purpose, we have analyzed 238 peripheral blood samples from healthy adult subjects, nonsmokers, who donated blood in the Hemotherapy Service of Hospital Universitário Polydoro Ernani de São Thiago da Universidade Federal de Santa Catarina. The panel of monoclonal antibodies employed was composed by anti-: CD4/CD8/CD3/CD45, CD20/CD19/CD45, CD16/CD56/CD3/CD45 e TCRaß/TCRyd/CD3/CD45. The reference ranges obtained were: CD3+ 51,3 to 83,5% and 718 to 2494 cells/mm3; CD4+ 24,4 to 54,2% and 456 to 1492 cells/mm3; CD8+ 12,8 to 40,2% and 272 to 1144 cells/mm3; T CD4+/T CD8+ ratio 0,68 to 3,61; CD4+ CD8+ 0,01 to 3,6% and 2 to 88 cells/mm3; TCR aß+ 44,3 to 77% and 855 to 2384 cells/mm3; TCR ?d 0,99 to 15,9% and 19 to 345 cells/mm3; CD3+CD4-CD8- 1,2 to 13,3% and 28 to 292 cells/mm3; CD19+CD20+ 6,3 to 20,8% and 110 a 618 cells/mm3; CD19+CD20- 0,001 to 1,3% and 0 to 23 cells/mm3; mature NK cells 3,1 to 27,4% and 70 to 745 cells/mm3; immature NK cells 0,08 to 1,1% and 1 to 23 cells/mm3; total NK cells 3,7 to 28,5% and 82 to 760 cells/mm3 and NKT cells 0,9 to 21,4% and 18 to 488 cells/mm3. In relation to genders, the CD3+, CD4+, CD4+ CD8+, TCR aß+, TCR yd+, CD19+CD20-, mature and immature NK and NKT cells showed significant differences for both relative and absolute values. Moreover, CD8+ and CD19+ cells differ only when related to absolute values and T CD4+/ T CD8+ ratio had no statistical differences. Comparison between reference ranges obtained in subjects born in Santa Catarina State and individuals from other states of the country or other countries of the world affirmed the need to establish reference intervals for this population.
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Impacto da recuperação linfocitária na ocorrência de recaída pós-transplante em crianças e adolescentes com leucemia aguda

Morando, Juliane 27 February 2012 (has links)
Resumo: Introdução: A leucemia aguda é a neoplasia mais comum da infância (PIZZO, 2006). Apesar da melhoria atingida na sobrevida, com o avanço da QT, muitos pacientes apresentam recaída da doença ou fatores de alto risco e necessitam ser submetidos a TCTH (THOMAS, 2004). Estudos recentes revelam que a recuperação precoce de linfócitos (no dia +30) pode ser um preditor de recaída e sobrevida para estes pacientes (SAVANI, 2007; KIM 2004). Objetivo: analisar o impacto da recuperação linfocitária precoce na ocorrência de recaída da leucemia após o TCTH e na sobrevida dos pacientes. Métodos: Estudo descritivo, retrospectivo de 143 pacientes menores de 21 anos, submetidos a TCTH por leucemia aguda, no período de 1995 a 2008. Foi analisada a contagem de linfócitos no hemograma do dia+30 pós-transplante. Os pacientes com contagem linfocitária inferior a 300/mm3 foram considerados com recuperação linfocitária precoce (RLP) ruim e os pacientes com linfócitos ³300/mm3 foram considerados com RLP adequada. Também foi avaliada a recuperação linfocitária no dia +100 (RL+100), sendo considerados com RL+100 ruim aqueles que apresentaram linfócitos <750x109/L e adequada os com RL+100 ³750/mm3. Resultados: Não foi observado impacto da RLP no dia +30 na ocorrência de recaída pós-TCTH. A MRT foi significativamente superior no grupo de pacientes com RLP ruim. Os pacientes que apresentaram RLP<300/mm3 apresentaram pior SG e SLE que aqueles com RLP³300/mm3. Não foi observada diferença significativa na ocorrência de infecções oportunistas e de DECH aguda ou crônica entre os grupos. Quando analisados somente os pacientes com LMA, observamos diferença significativa na SG e SLE entre os grupos de RLP ruim x adequada. Os pacientes com RL+100<750/mm3, apresentaram pior SG, SLE e maior ocorrência de recaída que os pacientes com RL+100 adequada. Conclusão: A avaliação de RLP no dia +30 não se mostrou um bom preditor de recaída nos pacientes com leucemia aguda pós-TCTH, entretanto, os pacientes com RLP no dia +30 <300/mm3 evoluíram com pior SG e SLE. A análise dos linfócitos no dia+100 pode ser correlacionada com maior risco de recaída e pior SG e SLE nos pacientes com RL+100 ruim.
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Efeito da suplementação com oleo de figado de tubarão sobre o sistema imunitario de ratos treinados

Vitorino, Daniele Cristina January 2009 (has links)
Orientador : Prof. Dr. Luiz Claudio Fernandes / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Educação Física. Defesa: Curitiba, 09/04/2009 / Inclui bibliografia / Área de concentração: Exercício e esporte / Resumo: Estudos prévios têm demonstrado que a suplementação crônica com óleo de fígado de tubarão (OFT) melhora a resposta imunitária de linfócitos, macrófagos e neutrófilos. De forma semelhante, o treinamento físico também tem a capacidade de estimular o sistema imunitário. Nosso principal objetivo foi investigar o efeito da suplementação crônica com OFT sobre parâmetros imunitários de ratos treinados. Ratos Wistar machos foram divididos em quatro grupos: sedentários (SED, n= 20), sedentários suplementados com OFT (SEDoft, n= 20), exercitados (EX, n= 17) e exercitados suplementados (EXoft, n= 19). Os animais nadaram por 6 semanas, 90 min por dia, 4 vezes por semana em meio liquido a temperatura de 32± 1 C, com uma sobrecarga correspondente a 6% do massa corporal presa ao tórax de cada rato. Os animais foram ortotanasiados 48 h após a última sessão de treinamento. A suplementação com OFT não alterou a fagocitose, volume lisossomal, a produção de ânion superóxido e peróxido de hidrogênio dos macrófagos peritoneais e neutrófilos sanguíneos. A proliferação de linfócitos do timo e baço foi significativamente maior nos grupos SEDoft, EX e EX oft quando comparadas à do grupo SED (P < 0.05). A proliferação de linfócitos associados ao intestino, por outro lado, foi similar entre os quatro grupos experimentais. Nossos achados demonstram que o OFT e o EX são realmente hábeis em aumentar a proliferação linfocitária, porém sua associação não induziu a um efeito sinergista sobre a resposta imunitária adaptativa. Em adição não encontramos qualquer efeito sobre a resposta imunitária inata. / Abastract: Previous studies have reported that shark liver oil (SLO) chronic supplementation improves immune response of lymphocyte, macrophage, and neutrophil. Likewise exercise training also has been shown to stimulate the immune system. We are not aware of any study about the association of exercise and SLO supplementation on immune response. Our main goal was to investigate the effect of chronic supplementation with SLO on immune innate and adaptive response of exercise-trained rats. Male Wistar rats were divided into four groups: sedentary (SED, n = 20), sedentary with SLO supplementation (SEDslo, n = 20), exercised (EX, n = 17) and exercised supplemented with SLO (EXslo, n = 19). Rats swam for 6 weeks, 90 min h/day, 4 times per week in water at 32 ± 1 C, witha load of 6.0% body weight attached to the torax of rat. Animals were killed 48 hours after the last exercise session. SLO supplementation did not change phagocytosis, lysosomal volume, superoxide anion and hydrogen peroxide production by peritoneal macrophages and blood neutrophils. Thymus and spleen lymphocyte proliferation were significantly higher in SEDslo, EX, and EXslo groups when compared to SED group (P < 0.05). Gut associated lymphocyte proliferation, on the other hand, was similar between the four experimental groups. Our findings show that SLO and EX indeed are able to increase lymphocyte proliferation but their association did not induce further stimulation in the adaptive immune response and also did not modify innate immunity.
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Ações antioxidantes e imunológicas do selênio em cães

Putarov, Thaila Cristina [UNESP] 08 August 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-12-02T11:16:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-08Bitstream added on 2014-12-02T11:21:18Z : No. of bitstreams: 1 000791765.pdf: 1879553 bytes, checksum: 60bed6e7ae5968f591931ddd672ad404 (MD5) / Os objetivos do trabalho foram avaliar o efeito de níveis e fontes de selênio na resposta imune de cães adultos, para isto cinco dietas foram avaliadas. Os tratamentos foram: CO - dieta basal com adição de selenito de sódio, totalizando 0,13 ppm de Se; SO33 - dieta basal + Se-levedura totalizando 0,33 ppm de Se; SO66 - dieta basal + Se-levedura totalizando 0,66 ppm de Se; SO99 - dieta basal + Se-levedura totalizando 0,99 ppm de Se; SI66 - dieta basal + selenito de sódio totalizando 0,66 ppm de Se. Os animais foram submetidos a um período de adaptação de 90 dias com a ração CO seguidos de 120 dias de fase experimental e recebendo as dietas testes, totalizando 210 dias. Amostras de sangue foram colhidas nos dias 0, 30, 60, 90 e 120 da fase experimental para: imunofenotipagem de leucócitos (IF), atividade fagocítica (AF) de monócitos e neutrófilos, índice de proliferação de células mononucleares do sangue periférico (IPCM), produção de intermediários reativos do oxigênio (H2O2) e do nitrogênio (NO-3). Para a determinação de anticorpos IgG e IgM específicos contra eritrócito de carneiro (SRBC) foram coletadas amostras de sangue 5, 10, 15 e 20 dias após inoculações de soluções de SRBC que ocorreram nos dias 60 e 90 da fase experimental. Fezes frescas foram colhidas para determinação da IgA fecal nos dias 0 e 120, e foi realizado o teste de hipersensibilidade cutânea tardia (DTH) aos 120 dias. O IPCM diminuiu em todos os tratamentos ao longo do experimento, porém aos 120 dias os animais do tratamento SO33 apresentaram a maior IPCM comparado aos demais (P<0,05). A AF de neutrófilos e monócitos foi menor aos 120 dias (P<0,0001) e houve tendência de maior AF por neutrófilos nos cães suplementados com 0,33 ppm de Se orgânico (P=0,0863). O número de linfócitos CD5+ aumentou após 60 dias de experimento para todos os tratamentos. Houve uma tendência para maior ... / The aims of this study were to evaluate the effects of selenium sources and levels on the immune response of adult dogs. Treatments were: CO - control diet with sodium selenite addition, totalizing 0.13 ppm of Se; SO33 - control diet + Se-yeast, totalizing 0.33 ppm of Se; SO66 - control diet + Se-yeast, totalizing 0.66 ppm of Se; and SO99 - control diet + Se-yeast, totalizing 0.99 ppm of Se; SI66 - control diet + sodium selenite, totalizing 0.66 ppm of Se. Animals underwent though an adaptation period of 90 days and received the CO diet; the experimental phase lasted 120 days when animals received the tested diets and samples were taken. Blood samples were collected on days 0, 30, 60, 90 e 120 of experimental phase to identify the leukocyte population (IF), to determine the phagocyte activity (FA) of neutrophils and monocytes, the proliferation of peripheral blood mononuclear cells (PIMC), the production of reactive oxygen (ROS) and nitrogen (NOS) intermediate species. Serum samples were also taken at 5, 10, 15 and 20 days after SRBC solution inoculation to determine the levels of IgG and IgM anti-SBRC. Fresh stool were obtained to evaluate the fecal IgA on days 0 and 120. Delayed-type hypersensitivity skin test (DTH) was conducted with the animals on day 120. The PICM reduced within time for all treatments, but on day 120th SO33-fed animals had the higher proliferation than the other treatments (P<0.05). The FA of neutrophils and monocytes was lower at 120th (P<0.0001) and a trend was observed for higher AF of neutrophils from SO33-fed dogs (P=0.0863). The population of CD5+ lymphocytes increased after 60 days and there was a trend for higher CD5+CD8+ lymphocytes count for animals fed CO, SO99 and SI66. The CD4+/CD5+ ratio was higher for animals fed SO33 and SO66 (P<0.0001). The values of IgG, IgM, IgA, ROS and NOS, and the DTH response were not influenced by treatments. Dose of ...
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Ações antioxidantes e imunológicas do selênio em cães /

Putarov, Thaila Cristina, 1983. January 2014 (has links)
Orientador: José Roberto Sartori / Coorientador: Aulus Cavalieri Carciofi / Coorientador: Silvio Luis de Oliveira / Banca: Márcia de Oliveira Sampaio Gomes / Banca: Ricardo Souza Vasconcellos / Banca: Ricardo de Oliveira Orsi / Banca: Margarida Maria de Barros / Resumo: Os objetivos do trabalho foram avaliar o efeito de níveis e fontes de selênio na resposta imune de cães adultos, para isto cinco dietas foram avaliadas. Os tratamentos foram: CO - dieta basal com adição de selenito de sódio, totalizando 0,13 ppm de Se; SO33 - dieta basal + Se-levedura totalizando 0,33 ppm de Se; SO66 - dieta basal + Se-levedura totalizando 0,66 ppm de Se; SO99 - dieta basal + Se-levedura totalizando 0,99 ppm de Se; SI66 - dieta basal + selenito de sódio totalizando 0,66 ppm de Se. Os animais foram submetidos a um período de adaptação de 90 dias com a ração CO seguidos de 120 dias de fase experimental e recebendo as dietas testes, totalizando 210 dias. Amostras de sangue foram colhidas nos dias 0, 30, 60, 90 e 120 da fase experimental para: imunofenotipagem de leucócitos (IF), atividade fagocítica (AF) de monócitos e neutrófilos, índice de proliferação de células mononucleares do sangue periférico (IPCM), produção de intermediários reativos do oxigênio (H2O2) e do nitrogênio (NO-3). Para a determinação de anticorpos IgG e IgM específicos contra eritrócito de carneiro (SRBC) foram coletadas amostras de sangue 5, 10, 15 e 20 dias após inoculações de soluções de SRBC que ocorreram nos dias 60 e 90 da fase experimental. Fezes frescas foram colhidas para determinação da IgA fecal nos dias 0 e 120, e foi realizado o teste de hipersensibilidade cutânea tardia (DTH) aos 120 dias. O IPCM diminuiu em todos os tratamentos ao longo do experimento, porém aos 120 dias os animais do tratamento SO33 apresentaram a maior IPCM comparado aos demais (P<0,05). A AF de neutrófilos e monócitos foi menor aos 120 dias (P<0,0001) e houve tendência de maior AF por neutrófilos nos cães suplementados com 0,33 ppm de Se orgânico (P=0,0863). O número de linfócitos CD5+ aumentou após 60 dias de experimento para todos os tratamentos. Houve uma tendência para maior ... / Abstract: The aims of this study were to evaluate the effects of selenium sources and levels on the immune response of adult dogs. Treatments were: CO - control diet with sodium selenite addition, totalizing 0.13 ppm of Se; SO33 - control diet + Se-yeast, totalizing 0.33 ppm of Se; SO66 - control diet + Se-yeast, totalizing 0.66 ppm of Se; and SO99 - control diet + Se-yeast, totalizing 0.99 ppm of Se; SI66 - control diet + sodium selenite, totalizing 0.66 ppm of Se. Animals underwent though an adaptation period of 90 days and received the CO diet; the experimental phase lasted 120 days when animals received the tested diets and samples were taken. Blood samples were collected on days 0, 30, 60, 90 e 120 of experimental phase to identify the leukocyte population (IF), to determine the phagocyte activity (FA) of neutrophils and monocytes, the proliferation of peripheral blood mononuclear cells (PIMC), the production of reactive oxygen (ROS) and nitrogen (NOS) intermediate species. Serum samples were also taken at 5, 10, 15 and 20 days after SRBC solution inoculation to determine the levels of IgG and IgM anti-SBRC. Fresh stool were obtained to evaluate the fecal IgA on days 0 and 120. Delayed-type hypersensitivity skin test (DTH) was conducted with the animals on day 120. The PICM reduced within time for all treatments, but on day 120th SO33-fed animals had the higher proliferation than the other treatments (P<0.05). The FA of neutrophils and monocytes was lower at 120th (P<0.0001) and a trend was observed for higher AF of neutrophils from SO33-fed dogs (P=0.0863). The population of CD5+ lymphocytes increased after 60 days and there was a trend for higher CD5+CD8+ lymphocytes count for animals fed CO, SO99 and SI66. The CD4+/CD5+ ratio was higher for animals fed SO33 and SO66 (P<0.0001). The values of IgG, IgM, IgA, ROS and NOS, and the DTH response were not influenced by treatments. Dose of ... / Doutor
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Maturação da resposta secretoria de insulina em ilhotas de rato : diferenças entre os estimulos com glicose, teofilina, carbamilcolina e potassio

Mendonça, Ana Cristina dos Santos 11 November 1997 (has links)
Orientador: Antonio Carlos Boschero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T09:57:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mendonca_AnaCristinadosSantos_M.pdf: 2984469 bytes, checksum: 05ad25856a10ccc3e82024835a6de424 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Este trabalho objetivou avaliar a maturação do sistema secretor de insulina em ratos, através de um estudo, temporal da resposta secretória frente a diferentes estímulos. Para isso, fragmentos de pâncreas - (0,5 à 1 mm3) de fetos e neonatos e ilhotas adultas, foram incubados por 1 hora à ¿37 GRAUS C¿ em atmosfera de 95% 'O IND. 2¿ /5% 'C¿O IND. 2¿. As incubações foram realizadas em. solução de Krebs-Ringer contendo diferentes concentrações de glicose,potássio, teofilina e carbamilcolina. Após o período de incubação, a insulina secretada no meio, bem como, a extraída dos fragmentos de pâncreas ou de ilhotas isoladas, foram medidas por radioimunoensaio, sendo a secreção expressa como percentagem do conteúdo total de insulina ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The aim of this work was to study, in rats, the maturation process of the secretory response of insulin following several stimuli. For that, pieces of pancreas (0,5-1 mm3) from rat fetuses and newborns or isolated adults islets, were incubated for 1 .hour at ¿37 GRAUS C¿ in 95% 'O IND. 2¿ /5% 'C¿O IND. 2¿ atmosphere with differents concentrations of glucose, potassium;. theophylline and carbamylcholine. Following the incubation,. the insulin secreted into the medium and extracted from the tissues, were measured hy radioimmunoassay,and were expressed as percentage of total insulin content ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas
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La adhesión de linfocitos B a células endoteliales induce la migración preferencial de linfocitos T de memoria central

Neira Villegas, Jocelyn Cecilia January 2008 (has links)
Memoria para optar al título profesional de Bioquímico / La migración de los linfocitos a los órganos linfoides secundarios es un paso crucial en la iniciación de la respuesta inmune adquirida. Este fenómeno es caracterizado por múltiples eventos que requieren de interacciones entre el endotelio y el linfocito, e involucra la participación de diversas moléculas que favorecen la migración de los linfocitos a través de las células endoteliales columnares (HEC). La transmigración es un proceso activo que depende del estado de activación y diferenciación de los linfocitos y de señales específicas de las células endoteliales. Diversos estudios han demostrado que los linfocitos T de memoria migran selectivamente a través de células endoteliales a sitios de inflamación y/o infección. Además, ciertas evidencias sugieren que la expresión de moléculas MHC-II por células endoteliales facilitan el reclutamiento de linfocitos T antígeno específicos, hacia un tejido. Por otra parte, en nuestro laboratorio hemos demostrado que la adhesión de linfocitos B a células endoteliales columnares derivadas de amígdalas humanas (HUTEC) induce la activación endotelial, conduciendo a la producción de diversas citoquinas y quimioquinas. En esta tesis determinamos que la adhesión de linfocitos B a HUTEC permite la presencia de moléculas MHC-II en la superficie endotelial, además de la producción de un patrón de expresión diferencial de quimioquinas, las cuales podrían estar involucradas en la transmigración de los linfocitos. Los resultados muestran que la presencia de moléculas MHC-II en la superficie de las células endoteliales depende de la adhesión de los linfocitos B, pero no de linfocitos T. Sin embargo, MHC-II no se induce a nivel transcripcional, sugiriendo que las HUTEC adquieren moléculas MHC-II de los linfocitos B humanos durante el proceso de adhesión celular. Además, el contacto de los linfocitos B a HUTEC induce la expresión del mRNA de las quimioquinas CCL2, CCL3, CCL5, CCL7, CXCL8, entre otras. Demostramos que el efecto de la adhesión de linfocitos B a HUTEC induce la transmigración de linfocitos T de memoria central. Por otra parte, investigamos el efecto de factores soluble secretados por HUTEC y/o linfocitos B, después del contacto, en la migración transendotelial. Nuestros resultados muestran que no son necesarios los factores solubles para un incremento en la transmigración, aunque estos factores permiten una migración más eficiente de los linfocitos T. En conclusión, estos resultados sugieren que la interacción de linfocitos B con células endoteliales modula la respuesta inmune, favoreciendo la transmigración preferencial de linfocitos T CD4+ de memoria central / Lymphocytes migration to secondary lymphoid organs is a crucial step in the initiation of the acquired immune response. This phenomenon is characterized by multiple events that require interactions between the endothelium and lymphocytes, and involves diverse molecules that favor the migration of T lymphocytes across the high endothelial cells (HEC). Transmigration is an active process that depends on the state of activation and differentiation of T lymphocytes and specific signals of endothelial cells. Diverse studies have demonstrated that memory T lymphocytes selectively migrate across endothelial cells to sites of inflammation and/or infection. In addition, certain evidences suggest that expression of MHC-II molecules by endothelial cells facilitate the recruitment of antigen specific T lymphocytes towards a tissue. On the other hand, in our laboratory we have demonstrated that the adhesion of B lymphocytes to high endothelial cells derived from human tonsils (HUTEC) induces endothelial activation, leading to the production of several cytokines and chemokines. In this thesis we determined that the adhesion of B lymphocytes to HUTEC cells allows the presence of MHC-II molecules on the endothelial surface, in addition to the production of a differential expression pattern of chemokines, which could be involved in the lymphocytes’ transmigration. These results show that the presence of MHC-II molecules on the surface of endothelial cells depends on the adhesion of B lymphocytes, but not T lymphocytes. However, MHC-II is not induced at transcriptional level, suggesting that HUTEC cells acquire MHC-II molecules from human B lymphocytes during the process of cellular adhesion. In addition, the contact of B lymphocytes to HUTEC cells induces the mRNA expression of chemokines such as CCL2, CCL3, CCL5, CCL7, CXCL8, among others. We demonstrated that the effect of the adhesion of B lymphocytes to HUTEC cells induces the memory central T lymphocytes transmigration. In the other hand, we investigated the effect of soluble factors secreted by HUTEC cells and/or B lymphocytes, after the contact between them, in the transendotelial migration. Our results show that although soluble factors are not necessary to increase the transmigration, these factors allow a more efficient migration of T lymphocytes. In conclusion, these results suggest that the interaction of B lymphocytes with endothelial cells modulates the immune response, favoring the preferential transmigration of central memory CD4+ T lymphocytes

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