O presente estudo é uma coorte contemporânea de 49 pacientes (51 quadris) submetidos à reconstrução acetabular com enxerto ósseo liofilizado humano ou bovino, picado e impactado, associado a reforço acetabular. Foi realizado no Serviço de Ortopedia e Traumatologia do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), no período de maio de 1997 a fevereiro de 2005. Os pacientes foram divididos em dois grupos: o grupo 1 (n=26) foi composto pelos que receberam enxerto ósseo liofilizado de origem humana e o grupo 2 (n=25), por aqueles que receberam enxerto de origem bovina. O reforço utilizado em todos os casos foi da MDT® (SP-Brasil). O tempo médio de seguimento foi de 55 e 49 meses respectivamente. Os enxertos ósseos purificados e liofilizados foram produzidos pelo Banco de Tecidos do HCPA. A análise clínica baseou-se no escore de Merle d’Aubigné e Postel e a radiográfica, nos critérios de Conn et al.para osteointegração dos enxertos que avalia a radiolucência, a densidade, a formação de trabeculado ósseo e a migração do componente. Não foram encontradas diferenças clínicas ou radiográficas relevantes entre os grupos, obtendo-se em torno de 88,5 e 76% de integração do enxerto. Estes resultados são comparáveis aos relatados na literatura com o uso de enxerto alógeno congelado e estimulam a continuidade da pesquisa sobre enxertos liofilizados de origem humana e bovina. / Background: this is a cohort trial of 49 patients (51 hips) submitted to revision acetabular component of total hip arthroplasty, using impacted human and bovine freeze-dried cancellous bone grafts and reinforcement device. The study was carried out in the Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA) from May 1997 to February 2005. The aim of the study was to compare clinical and radiographic graft incorporation capability between human and bovine freeze-dried bone grafts. Patients and Methods: the patients were divided in two groups: Group 1 (n=26) was composed by those receiving human grafts, and Group 2 (n=25), bovine grafts. The follow-up average was 55 and 49 months. The grafts were purified and freeze-dried at the Tissue Bank of the HCPA.The clinical analysis was based on the score of Merle d’Aubigné and Postel; and the radiographic analysis in an established score based in Conn’s et al. criteria for radiographic bone incorporation. Results: no clinical or radiographic differences were observed between the groups and both groups showed an overall rate of 88.5 and 76% of graft integration. Conclusion: these results are comparable to those reported in the literature with the use of deep-frozen grafts. Therefore, bovine and human freeze-dried grafts can be safely and adequately used in acetabular revision in total hip arthroplasty.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-21Bitstream added on 2014-06-13T19:35:11Z : No. of bitstreams: 1 espiritosanto_ef_me_araca.pdf: 607997 bytes, checksum: b1cd5bfcd6380a159d28631a6bc8de1e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A cor de um alimento é de suma importância para a sua aceitação, pois serve como critério de qualidade. Os pigmentantes, ao serem adicionados na produção animal melhoram a coloração dos produtos e a aceitação pelo mercado consumidor. Tais aditivos podem ser elaborados a partir de diversas origens, inclusive de resíduos industriais, e podem ser processados por diferentes técnicas de secagem. Este estudo teve como objetivo comparar dois métodos de retirada de umidade da biomassa de Rubrivivax gelatinosus produzida em efluente de indústria de processamento de pescado, liofilização e atomização, em relação a rendimento do processo e recuperação, cor, composição químico-bromatológica e concentração de oxicarotenóides dos produtos. A bactéria foi cultivada nas águas residuárias citadas, sob condições de anaerobiose, temperatura e luminosidade controladas. Ao final do processo, a biomassa bacteriana foi processada por microfiltração e transformada em pó por meio de liofilização ou atomização. As técnicas não diferiram entre si em relação ao rendimento. A maior recuperação do produto (p = 0,004) e a mais elevada umidade (p = 0,0022) foram obtidas pela técnica de liofilização. As porcentagens de matéria mineral (p < 0,0001) e todos os parâmetros de cor (p < 0,0001) foram maiores para o produto obtido por atomização. Os outros constituintes analisados não diferiram significativamente entre as técnicas. Os resultados obtidos demonstraram que, apesar de resultar em menor recuperação, a atomização foi um processo mais rápido que a liofilização, apresentou rendimento equivalente a esta e originou um produto semelhante ao liofilizado em relação à composição químico-bromatológica e pigmentante. Este novo produto pode ser alvo de estudos posteriores para avaliar sua aplicação como componente pigmentante de ração animal / The color of a food is parameter of acceptance, because it serves as a quality criterion for the consumers. Pigments are added to animal feeding in order to improve the color of the products and, so, its acceptance. These additives can be made from various sources, including industrial wastes, and can be processed by different drying techniques. This study aimed at comparing two methods of water removal from Rubrivivax gelatinosus biomass produced in the effluent from fish processing industry, lyophilization and spray drying. Parameters analyzed were: process yield, recuperation, color, proximate composition and oxycarotenoids concentration of the products. The bacterium was grown in the wastewater under anaerobiosis and controlled temperature and light conditions. At the end of the process, the bacterial biomass was prepared by microfiltration and dried by freeze and spray drying. No difference was detected for yield between the drying techniques. The higher recuperation of the product (p = 0.004) and the higher moisture content (p = 0.0022) were achieved with lyophilization. The percentages of ash (p < 0.0001) and all color parameters (p < 0.0001) were higher for the product obtained by spray drying. The other constituents analyzed did not differ significantly. The results showed that, although resulting in less recuperation, the spray drying process was faster than lyophilization, had the same yield and produced a biomass similar to the lyophilized one in relation to composition and pigment concentration. This new product can be subjected to further studies to evaluate its use as a pigmenting component of animal feed

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:51:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 243475 bytes, checksum: 08375cc332ea6491435cc3b67f4a34e9 (MD5) Previous issue date: 2010-03-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Programs of control and management of the quality in laboratories, the necessity of standardization of the analysis methods and repeatability of the experimental data have stimulated the increase of the use of Reference Material (RM) in the microbiological analyses. Considering that the stages of preparation and storage of the MR are stress processes that causes to injuries to the microorganism test the preparation of the cells becomes necessary to tolerate the variation of temperature and humidity the one that is submitted during the frezze- drying and storage. It was objectified, in this work, to get resistant cells of Salmonella enterica the frezze-drying for the RM preparation and to evaluate the stability of these cells throughout the stockage. The growth of enteric Salmonella sorotipo Enteritidis PT4 578 was folloied in broth brain heart infusion (BHI) and mineral salts medium (MMS) increased of 0,5 M sodium chloride (NaCl), 3 mM of trehalose e, or 0,05 mM of glucose. The survival after the frezze-drying was determined by the counting of the number of form units of colonies (UFC.g-1). The effect of the thermal shock in the cells of Salmonella Enteritidis PT4 578 was evaluated the 50 °C in the increase of the resistance to the frezze- drying. Also the influence of substrata of dehydration in the resistance of cells of Salmonella Enteritidis PT4 578 and the stability of the RM was evaluated during 90 days of stockage in the 4 °C the - 20 °C. The way of culture that guaranteed the biggest survival of the cells of Salmonella Enteritidis PT4 578 to the frezze-drying was the MMS, added of the evaluated solutos indicating it nutricional stress confers resistance crossed to the frezze-drying. The thermal shock diminishes the cellular viability, after the frezze-drying. The addition of 100 mM of trealose e, or sacarose to skimmed milk reconstituted (LDR) the 10%, increased the stability of the cells of Salmonella Enteritidis PT4 578 in the storaged MR the 4 °C and - 20 °C. The temperature of stockage of 4 °C resulted in loss of the cellular viability in about 2 logarithmic cycles after 90 days stockage while the -20 °C the loss in the cellular viability was ten times lesser. The results detach that, for the attainment of MR with bigger stability, it has the necessity of the preparation of the cells of Salmonella Enteritidis PT4 578 to present greater resistance the frezze-drying, considering conditions of nutricional stress and osmotic during the culture and the inclusion of osmoprotectant in the dehydration substratum. / Programas de controle e gestão da qualidade em laboratórios, a necessidade de padronização dos métodos de análise e repetibilidade dos dados experimentais têm impulsionado o aumento da utilização de Material de Referência (MR) nas análises microbiológicas. Considerando que as etapas de preparo e armazenamento do MR são processos estressantes que ocasionam injúrias ao micro-organismo teste faz-se necessário a preparação das células para tolerar a variação de temperatura e umidade a que são submetidas durante a liofilização e o armazenamento. Objetivouse, neste trabalho, obter células de Salmonella enterica resistentes a liofilização para o preparo de MR e avaliar a estabilidade destas células ao longo da estocagem. O crescimento de Salmonella enterica sorotipo Enteritidis PT4 578 foi acompanhado em caldo infusão cérebro coração (BHI) e meio mínimo de sais (MMS) acrescido dos solutos 0,5 M de cloreto de sódio (NaCl), 3 mM de trealose e, ou 0,05 mM de glicose. A sobrevivência após a liofilização foi determinada pela contagem do número de unidades formadoras de colônias (UFC.g-1). Avaliou-se o efeito do choque térmico nas células de Salmonella Enteritidis PT4 578 a 50 °C por 30 min no aumento da resistência à liofilização. Foi também avaliada a influência dos substratos de desidratação na resistência de células de Salmonella Enteritidis PT4 578 e a estabilidade do MR preparado durante 90 dias de estocagem a -20 °C e 4 °C. O meio de cultivo que garantiu a maior sobrevivência das células de Salmonella Enteritidis PT4 578 à liofilização foi o MMS, adicionado de NaCl, trealose e sacarose indicando que o estresse nutricional confere resistência cruzada à liofilização. O choque térmico diminui a viabilidade celular, após a liofilização. A adição de 100 mM de trealose e, ou sacarose ao leite desnatado reconstituído (LDR 10 %) como substrato de desidratação, aumentou a estabilidade das células de Salmonella Enteritidis PT4 578 no MR estocado a 4 °C e - 20 °C. A temperatura de estocagem de 4 °C resultou em perda da viabilidade celular em cerca de 2 ciclos logarítmicos após 90 dias de estocagem enquanto a -20 °C não houve perda na viabilidade celular significativa. Os resultados indicam que, para a obtenção de MR com maior estabilidade, há a necessidade do preparo da células de Salmonella Enteritidis PT4 578 para apresentar maior resistência a liofilização, submetendo estas células a condições de estresses nutricional e osmótico durante o cultivo e a inclusão de osmoprotetores (trealose ou sacarose) no substrato de desidratação.

A liofilização - ou secagem a frio (freeze drying em inglês) - é um complexo processo multiestágios, onde o produto é primeiramente congelado e sua secagem feita através de sublimação. Devido a esta forma de secagem a liofilização se torna um processo atrativo particularmente importante para a estabilização de componentes orgânicos hidratados e lábeis, de origem biológica. O processo de liofilização é amplamente empregado na indústria farmacêutica, porém em termos de gestão de processo, deve-se evitar a liofilização a todo custo, pois o processo possui diversas desvantagens como: equipamentos de alto investimento, alta demanda energética, processo que demanda tempos longos e produtos com facilidade de hidratar e frágeis, necessitando ser cuidadosamente embalados e armazenados. Este trabalho tem como objetivo a diminuição do ciclo de liofilização de uma vacina viral e analisar a possibilidade de carregamento desse produto no liofilizador a temperaturas negativas, de forma a possibilitar o aumento de produtividade. Para tal, foram realizados três experimentos com ciclos de liofilização com 17 e 20h a menos que o ciclo de liofilização da vacina comercial. Os experimentos foram realizados com a mesma formulação do lote comercial e utilizando um liofilizador piloto. As modificações foram realizadas nas propriedades físicas do ciclo de liofilização atual (temperatura, pressão e tempo) e na temperatura de carga do produto, sem alteração na formulação da vacina ou embalagem primária. Amostras do produto liofilizado experimental foram analisadas quanto ao seu aspecto, desempenho, umidade residual, potência e termoestabilidade acelerada segundo os Mínimos Requerimentos da Organização Mundial da Saúde. Todos os resultados analisados estiveram dentro das especificações e próximos ou melhores quando comparados aos lotes comerciais de origem / Lyophilization or Freezing drying is a complex multistage process - where the product is first frozen and dried by sublimation. Do to this process, the lyophilization becames an attractive process particularly important to stabilizing hydrated and labile organic compounds of biological origins. The lyophilization process is widely used in pharmaceutical industry, however in terms of process management, the process must be avoided at all cost This process has several disadvantages, such as costly equipment investment, high energy demand, a process that requires long times and products easily to moisturize and fragile and needs to be carefully packed and stored. This work aims at reducing the lyophilization cycle time of a viral vaccine and consider loading this product at subzero temperatures in order increase productivity. To this end, experiments were carried out with lyophilization cycles with 17 and 20h unless the original cycle of commercial vaccine. The experiments were performed with the same formulation of the commercial batch and using a pilot freeze dryer. The modifications were made in the physical properties of the current lyophilization cycle (temperature, pressure and time) and the load temperature of the product, without changing the formulation of the vaccine or original packing. Samples of the lyophilized product trial were analyzed for their appearance, performance, residual moisture, strength and accelerated thermostability and compared due to Minimum Requirements of Health Word Organization. All the analyzed results were within the specifications and the results were close to or better when compared to commercial batches of origin

A artroplastia é, em última análise, a opção final para o tratamento da osteoartrose. Com o aumento do número de indicações deste procedimento, a troca (artroplastia total de quadril de revisão – ATQR) dos componentes também passou a ser mais frequente. Os defeitos ósseos ou falhas ósseas são problemas que podem ser encontrados quando se realiza uma ATQR e, eles devem ser reparados, ou seja, o quadril do paciente a receber outra prótese necessita ser reconstruído. Para isto a grande maioria das técnicas empregadas requer o uso de enxerto ósseo e, devido a este motivo este tecido tem se tornado um dos tecidos mais transplantados na atualidade. Porém a demanda para utilização dos enxertos, na maioria provenientes de bancos de tecidos ósseos, tem aumentado, mas o suprimento é insuficiente. Portanto faz-se necessário a busca por novas tecnologias e alternativas aos bancos de tecidos. O enxerto bovino liofilizado (EBL) é uma destas opções, sua produção em livre demanda suas características físicas e químicas semelhantes ao osso humano e sua boa repercussão clínico-radiológica o torna uma alternativa viável. Este estudo tem o objetivo de verificar e quantificar a neoformação óssea com o uso do EBL pelo uso da avaliação histológica. Realizou-se um estudo de casos de Julho de 2000 a Abril de 2013 no Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), onde se incluíram sujeitos que foram submetidos a uma cirurgia prévia cirurgia de ATQR onde foi utilizado o EBL os quais internaram posteriormente para uma segunda cirurgia de ATQR não relacionada a falha do enxerto e sim a falha da prótese. Nesta segunda cirurgia realizou-se a biópsia óssea. Quatorze sujeitos foram analisados, sendo 64,3% do sexo feminino. A média de idade dos pacientes foi 52,36±18,55. Neoformação óssea estava presente em 85,7% dos sujeitos, e constituiu 61,79% da área total de matriz óssea. O diagnóstico de absorção do EBL estava presente em 12 sujeitos. Uma forte correlação de proporção inversa foi constatada pelo teste de Pearson entre a porcentagem de osso neoformado e a porcentagem de EBL na área total de matriz óssea (p=0,001). Nenhuma resposta inflamatória foi encontrada. Concluiu-se que houve neoformação óssea adequada na grande maioria dos casos sendo o EBL uma boa estrutura osteocondutora, podendo ser considerado uma alternativa aos outros enxertos ósseos no tratamento das falhas ósseas. / Arthroplasty is, ultimately, the final option for the treatment of osteoarthritis. With the increasing number of indications of this procedure, the exchange (total hip arthroplasty revision surgery- THARS) also became more frequent. The bone defects are problems that can be encountered when conducting a THARS and this defect must be repaired, in other words, the patient's hip needs to be rebuilt before receive a new prosthesis. Most of techniques used to rebuild requires the use of bone graft, and because of this reason, this tissue has become one of the most transplanted tissues today. However the demand for the use of grafts, mostly from bone tissue banks, has increased, but the supply is insufficient. Therefore it is necessary to search for new technologies and alternatives to tissue banks. The bovine lyophilized xenograft (BLX) is one of these options; the production on free demand, its physical and chemical characteristics similar to human bone and its good clinical and radiological outcomes makes it a viable alternative. The aim of this study was to verify and quantify new bone formation by the histological analysis in subjects who received the BLX. This was a case series from July 2000 to April 2013 realized in the Hospital de Clínicas de Porto Alegre. This study included patients who underwent to a THARS where was used the BLX, which later was admitted to a second THARS surgery, not related to the xenograft failure but a mechanical failure of the implant. In this second surgery was performed the bone biopsy. Fourteen subjects were analyzed, 64.3% were female. The average age of patients was 52.36 ± 18.55 years. New bone formation was present in 85.7% of subjects, and constituted 61.79% of the total bone matrix. The diagnosis of BLX absorption was present in 12 subjects. A strong inverse correlation founded by the Pearson's test was observed between the proportion of new bone and the proportion of BLX (p=0.001). No inflammatory response was found. Was concluded that there was suitable bone formation in the vast majority of the cases, as well as the BLX is a good osteoconductive scaffold and can be considered an alternative to other bone graft in the treatment of bone defects.

Introdução: A engenharia tecidual óssea com utilização de células-tronco mesenquimais é um campo de pesquisas com potencial para aplicação clínica em cirurgia plástica reparadora. Suas vantagens seriam ampliar as opções de reconstrução e diminuir a morbidade cirúrgica nas zonas doadoras. Não está definida na literatura médica a possibilidade de utilizar o osso liofilizado bovino nãodesmineralizado como estrutura tridimensional e carreadora celular para engenharia tecidual óssea. Objetivo: Avaliar o uso de células da medula óssea, com potencial osteogênico, agregadas a estrutura tridimensional de osso liofilizado bovino nãodesmineralizado para engenharia tecidual óssea, em modelo experimental heterotópico. Materiais e Métodos: Os animais doadores de células da medula óssea, assim como os animais receptores dos construtos ósseos, foram camundongos de linhagem isogênica C57Bl/6. Os construtos ósseos consistiram em osso liofilizado bovino não-desmineralizado (OL) associado a diferentes grupos celulares com potencial osteogênico, e foram implantados no plano subcutâneo no dorso dos animais, em procedimento cirúrgico compatível com a primeira etapa da confecção de retalho osteocutâneo pré-fabricado. Grupos de comparação (n=10 em cada grupo): 1) OL isoladamente (controle); 2) OL + células mononucleares da medula; 3) OL + células-tronco mesenquimais; 4) OL + células-tronco mesenquimais diferenciadas em meio osteoindutor. A aferição foi realizada após 5 semanas, com avaliação histológica e determinação da atividade de fosfatase alcalina. Resultados: A avaliação histológica não mostrou diferença entre os grupos de comparação. Em todas as amostras observou-se processo inflamatório crônico, com nítida reabsorção óssea, e com tecido conjuntivo fibroso circunjacente ao implante estendendo-se por entre as trabéculas ósseas. Não foram visualizados osteoblastos ou osteócitos viáveis, nem neoformação óssea, em nenhum dos cortes histológicos examinados. Os resultados da atividade de fosfatase alcalina também não mostraram diferença entre os grupos de comparação, com análise de variância entre grupos mostrando p=0,867. Discussão: No modelo estudado, a adição de células da medula óssea com potencial osteogênico sobre estrutura de osso liofilizado bovino não-desmineralizado não agregou propriedades osteogênicas ao material. Com isso, não se confirmou a perspectiva inicial de utilizá-lo como estrutura tridimensional e carreadora celular na engenharia tecidual óssea em sítio heterotópico. Para melhor definir o papel deste material, sugerem-se estudos subseqüentes que o avaliem em outros modelos experimentais, comparando com outros materiais de uso já estabelecido, e explorando separadamente cada etapa metodológica que possa influir no sucesso da engenharia tecidual óssea. / Introduction: Bone tissue engineering using mesenchymal stem cells is a research area with potential applicability in reconstructive plastic surgery, aiming to broaden surgical choices and decrease morbidity in donor sites. It has not been established in the medical literature whether bovine non-demineralized lyophilized bone can be used as a scaffold and cell carrier for bone tissue engineering. Objective: To assess the use of bone marrow cells with osteogenic potential seeded on a bovine non-demineralized lyophilized bone scaffold for bone tissue engineering in a heterotopic experimental model. Materials and Methods: The donors of bone marrow cells, as well as the receptors of the osseous constructs were isogenic line C57BI/6 mice. The constructs consisted on bovine non-demineralized lyophilized bone (LB) with addition of different cell groups with osteogenic potential, and they were implanted into subcutaneous sites on the backs of the animals in a surgical procedure compatible with an osteocutaneous flap pre-fabrication. Comparison groups (n=10 each group): 1) LB alone (control group); 2) LB + marrow mononuclear cells 3) LB + mesenchymal stem cells; 4) LB + mesenchymal stem cells differentiated in an osteoinductive medium. The constructs were harvested at 5 weeks after implantation for histological analysis and alkaline phosphatase activity test. Results: The histological analysis did not show differences among the comparison groups. In all samples, chronic inflammatory process was observed, with evident osseous resorption, and with adjacent fibrous connective tissue rich in neovessels extending through bone trabeculae. Viable osteoblasts or osteocytes , as well as new bone formation, were not observed. Likewise, results of the alkaline phosphatase activity test have not shown any difference among comparison groups, with analys of variance between groups showing p value=0.867. Discussion: In this experimental model, the addition of bone marrow cells with osteogenic potential to a bovine non-demineralized lyophilized bone scaffold did not add osteogenic properties to the material. Therefore, the initial perspective of using it as a scaffold for bone tissue engineering in heterotopic sites could not be confirmed. In order to better define the role of this material, further studies should be conducted, assessing it in other experimental models, comparing it with other materials currently in use and separately exploring each methodological step that might influence the success of bone tissue engineering.

O presente estudo é uma coorte contemporânea de 49 pacientes (51 quadris) submetidos à reconstrução acetabular com enxerto ósseo liofilizado humano ou bovino, picado e impactado, associado a reforço acetabular. Foi realizado no Serviço de Ortopedia e Traumatologia do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), no período de maio de 1997 a fevereiro de 2005. Os pacientes foram divididos em dois grupos: o grupo 1 (n=26) foi composto pelos que receberam enxerto ósseo liofilizado de origem humana e o grupo 2 (n=25), por aqueles que receberam enxerto de origem bovina. O reforço utilizado em todos os casos foi da MDT® (SP-Brasil). O tempo médio de seguimento foi de 55 e 49 meses respectivamente. Os enxertos ósseos purificados e liofilizados foram produzidos pelo Banco de Tecidos do HCPA. A análise clínica baseou-se no escore de Merle d’Aubigné e Postel e a radiográfica, nos critérios de Conn et al.para osteointegração dos enxertos que avalia a radiolucência, a densidade, a formação de trabeculado ósseo e a migração do componente. Não foram encontradas diferenças clínicas ou radiográficas relevantes entre os grupos, obtendo-se em torno de 88,5 e 76% de integração do enxerto. Estes resultados são comparáveis aos relatados na literatura com o uso de enxerto alógeno congelado e estimulam a continuidade da pesquisa sobre enxertos liofilizados de origem humana e bovina. / Background: this is a cohort trial of 49 patients (51 hips) submitted to revision acetabular component of total hip arthroplasty, using impacted human and bovine freeze-dried cancellous bone grafts and reinforcement device. The study was carried out in the Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA) from May 1997 to February 2005. The aim of the study was to compare clinical and radiographic graft incorporation capability between human and bovine freeze-dried bone grafts. Patients and Methods: the patients were divided in two groups: Group 1 (n=26) was composed by those receiving human grafts, and Group 2 (n=25), bovine grafts. The follow-up average was 55 and 49 months. The grafts were purified and freeze-dried at the Tissue Bank of the HCPA.The clinical analysis was based on the score of Merle d’Aubigné and Postel; and the radiographic analysis in an established score based in Conn’s et al. criteria for radiographic bone incorporation. Results: no clinical or radiographic differences were observed between the groups and both groups showed an overall rate of 88.5 and 76% of graft integration. Conclusion: these results are comparable to those reported in the literature with the use of deep-frozen grafts. Therefore, bovine and human freeze-dried grafts can be safely and adequately used in acetabular revision in total hip arthroplasty.

A artroplastia é, em última análise, a opção final para o tratamento da osteoartrose. Com o aumento do número de indicações deste procedimento, a troca (artroplastia total de quadril de revisão – ATQR) dos componentes também passou a ser mais frequente. Os defeitos ósseos ou falhas ósseas são problemas que podem ser encontrados quando se realiza uma ATQR e, eles devem ser reparados, ou seja, o quadril do paciente a receber outra prótese necessita ser reconstruído. Para isto a grande maioria das técnicas empregadas requer o uso de enxerto ósseo e, devido a este motivo este tecido tem se tornado um dos tecidos mais transplantados na atualidade. Porém a demanda para utilização dos enxertos, na maioria provenientes de bancos de tecidos ósseos, tem aumentado, mas o suprimento é insuficiente. Portanto faz-se necessário a busca por novas tecnologias e alternativas aos bancos de tecidos. O enxerto bovino liofilizado (EBL) é uma destas opções, sua produção em livre demanda suas características físicas e químicas semelhantes ao osso humano e sua boa repercussão clínico-radiológica o torna uma alternativa viável. Este estudo tem o objetivo de verificar e quantificar a neoformação óssea com o uso do EBL pelo uso da avaliação histológica. Realizou-se um estudo de casos de Julho de 2000 a Abril de 2013 no Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), onde se incluíram sujeitos que foram submetidos a uma cirurgia prévia cirurgia de ATQR onde foi utilizado o EBL os quais internaram posteriormente para uma segunda cirurgia de ATQR não relacionada a falha do enxerto e sim a falha da prótese. Nesta segunda cirurgia realizou-se a biópsia óssea. Quatorze sujeitos foram analisados, sendo 64,3% do sexo feminino. A média de idade dos pacientes foi 52,36±18,55. Neoformação óssea estava presente em 85,7% dos sujeitos, e constituiu 61,79% da área total de matriz óssea. O diagnóstico de absorção do EBL estava presente em 12 sujeitos. Uma forte correlação de proporção inversa foi constatada pelo teste de Pearson entre a porcentagem de osso neoformado e a porcentagem de EBL na área total de matriz óssea (p=0,001). Nenhuma resposta inflamatória foi encontrada. Concluiu-se que houve neoformação óssea adequada na grande maioria dos casos sendo o EBL uma boa estrutura osteocondutora, podendo ser considerado uma alternativa aos outros enxertos ósseos no tratamento das falhas ósseas. / Arthroplasty is, ultimately, the final option for the treatment of osteoarthritis. With the increasing number of indications of this procedure, the exchange (total hip arthroplasty revision surgery- THARS) also became more frequent. The bone defects are problems that can be encountered when conducting a THARS and this defect must be repaired, in other words, the patient's hip needs to be rebuilt before receive a new prosthesis. Most of techniques used to rebuild requires the use of bone graft, and because of this reason, this tissue has become one of the most transplanted tissues today. However the demand for the use of grafts, mostly from bone tissue banks, has increased, but the supply is insufficient. Therefore it is necessary to search for new technologies and alternatives to tissue banks. The bovine lyophilized xenograft (BLX) is one of these options; the production on free demand, its physical and chemical characteristics similar to human bone and its good clinical and radiological outcomes makes it a viable alternative. The aim of this study was to verify and quantify new bone formation by the histological analysis in subjects who received the BLX. This was a case series from July 2000 to April 2013 realized in the Hospital de Clínicas de Porto Alegre. This study included patients who underwent to a THARS where was used the BLX, which later was admitted to a second THARS surgery, not related to the xenograft failure but a mechanical failure of the implant. In this second surgery was performed the bone biopsy. Fourteen subjects were analyzed, 64.3% were female. The average age of patients was 52.36 ± 18.55 years. New bone formation was present in 85.7% of subjects, and constituted 61.79% of the total bone matrix. The diagnosis of BLX absorption was present in 12 subjects. A strong inverse correlation founded by the Pearson's test was observed between the proportion of new bone and the proportion of BLX (p=0.001). No inflammatory response was found. Was concluded that there was suitable bone formation in the vast majority of the cases, as well as the BLX is a good osteoconductive scaffold and can be considered an alternative to other bone graft in the treatment of bone defects.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The eggs are of great nutritional value. Its biochemical composition indicates the source of proteins, lipids, vitamins and minerals. However, undesirable chemical compounds can form part of this constitution. The pesticides, when applied irregularly, can represent a serious health risk to consumers if detected above the maximum residue limits, can be identified in egg white and yolk. The objective of this study was to develop and to validate an analytical method for matrix solid phase dispersion and gas chromatography coupled with mass spectrometry for determination of atrazine, pirimicarb, lindane, permethrin, deltamethrin, cypermethrin, ethion, bifenthrin and alachlor in chicken eggs (Gallus gallus domesticus) marketed in the city of Aracaju-SE, Brazil. Among the sorbents were tested: silica, neutral alumina, Florisil® and C18. The various combinations matrix/dispersant/co-column were analyzed. The system: matrix of lyophilized egg (0,25 g)/dispersant Florisil® (1,5 g)/auxiliary column C18 (0,5 g) was more efficient. The acetonitrile (10 mL) was chosen as the eluting solvent. The recoveries (n = 3) ranged from 69,6 a 103,8% with relative standard deviation ranging from 16,2 a 45,5%. The validation of the analytical method was performed through the following parameters: the selectivity, it s showing that the method is selective for all pesticides; the linearity, in terms of linear coefficient of the calibration curve, above 0,99 for all pesticides, for a given concentration range from 0,01 to 2,0 μg g-1; the sensibility, with the pesticide bifenthrin as the more sensitive and less sensitive to cypermethrin; the limits of detection and quantification limits in the intervals of 0,003 to 0,015 μg g-1 and 0,01 to 0,05 μg g-1, respectively; the recovery (n = 3), to levels 0,5, 1,0 and 1,5 μg g-1 ranged from 61,6 to 95%; the accuracy in terms of relative standard deviation (RSD) in the range of 0,13 to 29,92%; and application in real samples that showed in one of samples the pesticide bifenthrin in a concentration of 0,004 μg g-1, below the limit of quantification (<LQ). Therefore the union of technical MSPD-GC/MS provided a quick, easy and efficient extraction for determination of selected pesticides in chicken eggs. / O ovo é um alimento de grande valor nutritivo. Sua composição bioquímica o indica como fonte de proteínas, lipídios, vitaminas e minerais. No entanto, compostos químicos indesejáveis podem fazer parte desta constituição. Os pesticidas, quando aplicados de forma irregular, podem representar um sério risco à saúde dos consumidores se detectados acima dos limites máximos de resíduos, podendo ser identificados na gema e na clara do ovo. O objetivo desse trabalho foi desenvolver e validar um método analítico por dispersão da matriz em fase sólida e cromatografia em fase gasosa acoplada a espectrometria de massas para determinação de atrazina, pirimicarbe, lindano, permetrina, deltametrina, cipermetrina, etiona, bifentrina e alacloro em ovos de galinha (Gallus gallus domesticus) comercializados na cidade de Aracaju-SE, Brasil. Dentre os sorventes, foram testados: sílica, alumina neutra, Florisil® e C18. As diversas combinações matriz/dispersante/co-coluna foram avaliadas. O sistema: matriz de ovo liofilizado (0,25 g)/dispersante Florisil® (1,5 g)/coluna auxiliar C18 (0,5 g), foi o mais eficiente. A acetonitrila (10 mL) foi escolhida como solvente de eluição. As recuperações (n = 3) variaram de 69,6 a 103,8%, com desvio padrão relativo na faixa de 16,2 a 45,5%. A validação do método analítico foi realizada através dos parâmetros: seletividade, mostrando que o método é seletivo para todos os pesticidas; linearidade, em termos de coeficiente linear da curva analítica, superiores a 0,990 para todos os pesticidas, numa dada faixa de concentração de 0,01 a 2,0 μg g-1; sensibilidade, apresentando o pesticida bifentrina como o mais sensível e a cipermetrina como menos sensível; limites de detecção e limites de quantificação, nos intervalos de 0,003 a 0,015 μg g-1 e 0,01 a 0,05 μg g-1, respectivamente; exatidão (n = 3), para os níveis 0,5, 1,0 e 1,5 μg g-1 variaram entre 61,6 a 95%; precisão, em termos de desvio padrão relativo (DPR) na faixa de 0,13 a 29,92%; e aplicação em 8 amostras reais, que apresentou a identificação do pesticida bifentrina em uma das amostras na concentração de 0,004 μg g-1, abaixo do limite de quantificação do método. Portanto a união das técnicas DMFS-CG/EM proporcionou uma rápida, fácil e eficiente extração para determinação dos pesticidas selecionados em ovos de galinha.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-15T14:23:12Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_KellyCristineZatta.pdf: 2655855 bytes, checksum: 40a81657cb3b6d7945a2bc834a0dacb6 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-15T14:23:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_KellyCristineZatta.pdf: 2655855 bytes, checksum: 40a81657cb3b6d7945a2bc834a0dacb6 (MD5) Previous issue date: 2011-03-21 / Keeping in mind the problematic that photoaging and hyperpigmentation represent, the development of a topical formulation containing vitamin C (ascorbyl palmitate) and açai oil associated to nanoparticules may represent a protection of the cellular membrane against oxidation, due to a better permeation and the synergic acting of both active. This study has as its objective the development and the characterization of cream-gel formulations containing ascorbyl palmitate associated to nanocarriers, in the presence or absence of the açai oil as the oily nucleus. Associated to that, the stability of the freeze-dried nanocoated active was tested after the incorporation in a silicon basis. Suspensions containing the AP associated t o the nanocapsules (NCAP), nanoemulsions (NEAP) and nanodispersions (NDAP) were developed, being the latter used as active protection comparative parameter without the active (NCBC). With the purpose of assessing the influence of the water on the stability of the active, AP was incorporated in a methanolic solution (SMAP), to which was put in an aging study during 30 days in environment temperature (22 ºC + 2 ºC), refrigeration (4 ºC + 2 ºC), greenhouse (40 ºC + 2 ºC) and chamber UVC (254 nm), along with the formulations cited previously. The sample characterizations was carried out soon after its obtaining and on days 7, 15, 21 and 30, as to the AP content quantification, average particle diameter, polydispersity index, zeta potential and pH. The NCAP, NEAP, NCBC suspensions were incorporated in semi-solid basis of Hostacerin SAF® cream-gel and later stored for the accelerated aging study (21 days) and alternated cycles of heating-cooling, which were analysed at the beginning and end of this period through the determination of the particle average diameter, polydispersity index, zeta potential, pH, active content quantification, organoleptic characteristic determination, spreadability determination and rheological behavior, and centrifugation test. NCAP and NCBC suspension samples were freeze-dried and incorporated to the silicon base (CSNCAPLIO and CSNBCLIO, respectively), and stored in heating-freezing cycles. In this same basis, the active in the free form (CSAP) was incorporated. Soon after its obtaining, the suspensions presented active content equal to 97,51%±0,93 to NCAP, 80,68% + 1,25 to NEAP and 83,10% + 3,10 to NDAP, and remaining desirable paramaters to nanometric systems. However, in the 30th day of storing, all the physical-chemical characteristics suffered significant alteration, being evident in the active loss, which was detected only in the NCAP and NEAP samples conditioned under refrigeration (24,42 % + 1,0 e 21,37 % + 1,27,, respectively). Contrasting with these results, the SMAP kept the active stable and in effective concentrations during 90 days of storing, revealing the fragility of the AP structure in the presence of an aqueous environment. As to the cream-gel formulations, all presented physical-chemical parameters appropriate for the nanoparticle formulations and slightly acid pH, satisfactory for the structure of the active in the non-dissociated form (smaller than the AP pKa value), homogeneous aspect of the sensorial optimum. For those, a proper spreadability was obtained, considering the function and action local, intended. The formulation rheogram demonstrated to have a non-Newtonian character and pseudoplastic flux, which is desired in pharmaceutical formulations, for the initial resistance for the semi-solid formulation to flow diminished, reflecting the application easiness. The greatest active concentration for the samples containing the nanocoated active was obtained, suggesting a greater initial protection of the active in the presence of polymer film and the açai oil. However, at the end of the 21-day period, it was verified the destabilization of the formulation containing the active by the total freeze-drying of those, not being possible to carry out the final tests. The cream in silicone basis samples were analyzed only according to the active content soon after the incorporation of the freeze-dried, which demonstrated an average initial loss of 30% under the previous to the freeze-drying quantification, while for the sample containing the free active, the initial content was superior. This result may be justified possibly by the prolonged exposition to humidity and light during the freeze-drying process. After the 7-day storing in ES, the essay was repeated, obtaining for the CSNAPLIO an average of 15 % + 2,03 of AP content, being that for the CSAP the quantification due to the active oxidation total was not possible. These data restate the destabilization of the active faced with the heat, even for the water free formulation. From the obtained results it was possible to verify the AP instability faced with the heat, light and water conditions. However, keeping in mind its therapy potentiality t is considered relevant to the continuity of this research with the purpose of searching for more ascorbyl palmitate stability keeping it viable for topical application. It is suggested the incorporation to the drying of the suspensions for nano-spry-drying and the incorporation of those in different semi-solid basis, with emulsions, silicones and non-ionic bases for the long-term stability study, searching for evidences which take to definite conclusions on the product stability. / Tendo-se em vista a problemática que o fotoenvelhecimento e a hiperpigmentação representam, o desenvolvimento de uma formulação tópica contendo vitamina C (palmitato de ascorbila) e óleo de açaí associada à nanopartículas pode representar a proteção das membranas celulares contra a oxidação, devido à melhor permeação e a atuação sinérgica de ambos os ativos. Este estudo teve por objetivo o desenvolvimento e caracterização de formulações de creme-gel contendo palmitato de ascorbila associado à nanocarreadores, na presença e ausência do óleo de açaí como núcleo oleoso. Associado a isso, foi testada a estabilidade de liofilizados do ativo nanoencapsulado após incorporação em base de silicone. Foram desenvolvidas suspensões contendo o AP associado à nanocapsulas (NCAP), nanoemulsões (NEAP) e nanodispersões (NDAP), tendo sido esta última utilizada como parâmetro comparativo de proteção do ativo pela total ausência de filme polimérico e núcleo oleoso. Como branco utilizou-se uma suspensão de nanocápsulas sem o ativo (NCBC). A fim de avaliar a influência da água sobre a estabilidade do ativo, incorporou-se AP em uma solução metanólica (SMAP), a qual foi colocada em estudo de envelhecimento durante 30 dias em temperatura ambiente (22 ºC + 2 ºC), refrigeração (4 ºC + 2 ºC), estufa (40 ºC + 2 ºC) e câmara climatizada UVC (254 nm), juntamente com as formulações citadas anteriormente. A caracterização das amostras foi realizada logo após sua obtenção e nos dias 7, 15, 21 e 30, quanto à quantificação do teor de AP, diâmetro médio de partícula, índice de polidispersão, potencial zeta e pH. As suspensões de NCAP, NEAP, NCBC foram incorporadas em bases semissólidas de creme-gel Hostacerin SAF® e posteriormente armazenadas para estudo de envelhecimento acelerado (21 dias) em ciclos alternados de aquecimento – resfriamento, as quais foram analisadas ao início e final deste período através das determinações de diâmetro médio de partícula, índice de polidispersão, potencial zeta, pH, quantificação do teor de ativo, determinação das características organolépticas, determinação da espalhabilidade e comportamento reológico, e teste de centrifugação. Amostras de suspensões de NCAP e NCBC foram liofilizadas e incorporadas em base de silicone (CSNCAPLIO e CSNCBCLIO, respectivamente), e armazenadas em ciclos de aquecimento-resfriamento. Nesta mesma base, foi incorporado o ativo na forma livre (CSAP). Logo após sua obtenção, as suspensões apresentaram teor de ativo iguais a 97,51% + 0,93 para NCAP, 80,68% + 1,25 para NEAP e 83,10% + 3,10 para NDAP, e demais parâmetros desejáveis para sistemas nanométricos. Contudo, no 30o dia de armazenamento, todas as características físico-químicas sofreram significativa alteração, sendo evidente a perda de ativo, o qual foi detectado somente apenas nas amostras de NCAP e NEAP acondicionadas sob refrigeração (24,42 % + 1,0 e 21,37 % + 1,27, respectivamente). Contrastando com estes resultados, a SMAP manteve o ativo estável e em concentrações efetivas durante 90 dias de armazenamento, revelando a fragilidade da estrutura do AP em presença de meio aquoso. Quanto às formulações de creme-gel, todas apresentaram parâmetros físico-químicos adequados para formulações de nanopartículas e pH levemente ácido, satisfatório para a estrutura do ativo na forma não-dissociada (menor que o valor de pKa do AP), aspecto homogêneo de ótimo sensorial. Para as mesmas obteve-se espalhabilidade adequada, considerando a função e local de ação, pretendidos. O reograma das formulações demonstrou haver caráter não-newtoniano e fluxo pseudoplástico, o qual é desejado em formulações farmacêuticas, pois a resistência inicial para a formulação semissólida fluir diminui, refletindo a facilidade de aplicação. Obteve-se a maior concentração de ativo para as amostras contendo o ativo nanoencapsulado, sugerindo a maior proteção inicial do ativo em presença do filme polimérico e do óleo de açaí. Contudo, ao final do período de 21 dias, verificou-se desestabilização das formulações contendo o ativo pela total liquefação das mesmas, não sendo possível a realização dos testes finais. As amostras de creme em base de silicone foram analisadas somente segundo o teor de ativo logo após a incorporação do liofilizado, o qual demonstrou uma perda inicial média de 30 % sob a quantificação anterior à liofilização, enquanto que para a amostra contendo o ativo livre, o teor inicial foi superior. Este resultado pode ser justificado possivelmente pela exposição prolongada à umidade e luz durante o processo de liofilização. Após os primeiros 7 dias de armazenamento em ES, o ensaio foi repetido, obtendo-se para o CSNCAPLIO uma média de 15 % + 2,03 de teor de AP, sendo que para o CSAP não foi possível a quantificação devido a total oxidação do ativo. Estes dados reafirmam a desestabilização do ativo frente ao calor, mesmo para formulação isenta de água. A partir dos resultados obtidos foi possível verificar a instabilidade do AP frente a condições de calor, luz e água. Contudo, tendo em vista sua potencialidade terapêutica considera-se relevante a continuidade desta pesquisa de forma a buscar maior estabilidade do palmitato de ascorbila mantendo-o viável para aplicação tópica. Sugere-se a incorporação a secagem das suspensões por nano-spray-drying e incorporação das mesmas em diferentes bases semissólidas, como emulsões, silicones e bases não-iônicas para estudo de estabilidade de longo prazo, buscando indícios que levam a conclusões definitivas sobre a estabilidade do produto.