Orientador: Edson Rosa Pimentel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-06T17:20:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_FernandaMartinsde_M.pdf: 1290451 bytes, checksum: c386eaff7996cd60bd0cc59338f8718f (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Os tendões servem para realizar a transferência de força dos músculos para os ossos, sendo capazes de suportar altas forças de tensão. Muitos trabalhos descreveram alterações nas propriedades estruturais, bioquímicas e biomecânicas dos tendões de animais que foram submetidos a exercícios prolongados, porém pouco se sabe sobre o que ocorre no tendão que passa por um processo de alongamento, um procedimento bastante comum em academias e clínicas de Fisioterapia. Assim, nosso trabalho teve como objetivo avaliar os aspectos morfológicos e bioquímicos dos tendões de ratos submetidos ao alongamento três e cinco vezes por semana. Os ratos tiveram seus músculos alongados por um período de 30 segundos intercalados com 30 segundos de relaxamento, com 10 repetições, 3 e 5 vezes por semana durante 21 dias. Os tendões foram removidos e utilizados para os procedimentos de morfologia e de bioquímica. Os tendões também foram submetidos ao ensaio mecânico sob tração a fim de avaliar suas propriedades biomecânicas. Nos cortes corados com AT, na entese dos tendões dos grupos alongados, observou-se um aumento na quantidade de células com morfologia arredondada. Já na região próxima à entese pode ser observado metacromasia mais intensa nos grupos alongados. Observações feitas nos cortes corados com HE, nas regiões de tensão, mostraram que as células apresentaram-se mais alinhadas. Nos grupos alongados, em ambas regiões ocorreu aumento na quantidade de células. Nos cortes que foram submetidos à Reação de Von Kossa, observou-se uma região calcificada em todos os grupos, porém esta apresentou uma MEC mais densa nos tendões dos grupos alongados três e cinco vezes. Análise do gel de SDS-PAGE revelou uma maior quantidade de colágeno nos grupos alongados e a presença do componente de 65 kDa nas regiões de tensão e compressão em todos os grupos. A quantidade de proteínas, de glicosaminoglicanos e de hidroxiprolina também foi superior nos animais alongados. O gel de agarose revelou a presença de dermatam sulfato nas regiões de tensão e de compressão e de condroitim sulfato somente nesta última. Durante o ensaio mecânico, os tendões dos grupos alongados suportaram valores de tensão máxima superiores, com deslocamentos semelhantes, sugerindo que estes tendões são mais resistentes à ruptura. Esses resultados mostraram que o estímulo do alongamento acarretou modificações nas características estruturais, bioquímicas e biomecânicas, confirmando o caráter adaptativo do tendão em resposta à aplicação dos procedimentos de alongamento / Abstract: The tendons are structures that transmit forces from the muscles to the bone, and are capable of supporting high tensile strenghts. Many studies have shown alterations in tendons of animals submitted to strenuous exercises, however, just a little is known about what happens in tendons when they are under a stretching program, a common procedure in academies and phisiotherapy institutes. So our objective was to evaluate the morphological, biochemical and biomechanical aspects of tendons submitted to stretching exercises. Rats had their muscles stretched for a period of 30 seconds with 30 seconds of resting, with 10 repetitions, three and five times a week during 21 days. The tendons were used for morphological and biochemical procedures. They were also submitted to mechanical tensile strain test and their mechanical properties were evaluated. Analysis of AT stained sections of enthesis from stretched tendons, showed a high amount of rounded cells. In the region next to enthesis, which passes close to the calcaneous, the metachromasy was more intense in stretched groups. In the tension region, in the HE stained sections, it was found a larger alignment of the cells in the stretched group. In both regions occurred an increase on the amount of cells. In the sections submitted to Von Kossa reaction, was observed, a calcified region in all groups, but the extracellular matrix were denser in stretched ones. Analysis of SDS-Page showed a high amount of collagen and the presence of a polidisperse component of 65 kDa in the tension and compression regions in all groups. The amount of proteins, glycosaminoglycans and hydroxiproline was higher in the tendons of three and five times stretched groups. The agarose gel revealed the presence of dermatan sulfate in the tension and compression regions and chondroitin sulfate only in this last one. During the mechanical tensile strain test, the stretched tendon supported high values of maximum stress with the same strain, when compared to the control group, suggesting that the stretched tendons were more resistant to the failure. These results show that the stimulus of stretching leads to alterations in the structural, biochemical and biomechanical characteristics, confirming the adaptative character of tendons, in response to the application of stretching exercises / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Benedicto Campos Vidal / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-06T22:37:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vilela_AntonellaSachsidaBraga_D.pdf: 2767480 bytes, checksum: 9a51cd19ed225ec83edcd8d932e07114 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Tecido pericardial tem sido utilizado na confecção de biopróteses empregadas na reparação de diferentes lesões. Entretanto, calcificações e falência mecânica têm sido as principais causas de durabilidade limitada de biopróteses cardíacas fabricadas com pericárdio bovino. Nesse trabalho foi realizado um estudo do pericárdio fibroso porcino em sua estrutura microscópica e sua natureza bioquímica. A morfologia geral e a arquitetura das fibras colágenas e elásticas foram estudadas em tecido seccionado e também em montagens totais, corados por diferentes métodos histoquímicos e analisados em microscopia de luz convencional, de polarização, de fluorescência e confocal. O estudo bioquímico da matriz pericardial foram realizados de acordo com procedimentos bioquímicos pertinentes. O pericárdio mostrou-se um tecido altamente celularizado com características de tecido jovem. Os feixes colagênicos apresentaram-se arranjados em camadas multidirecionalmente orientadas, formando uma rede de trama fechada, com um número maior de fibras orientando-se obliquamente, partindo da região central inferior em direção súpero-lateral esquerda em relação ao coração. Uma discreta predominância de fibras colágenas no sentido base-ápice foi verificada na região anterior direita do pericárdio. A matriz extracelular apresentou-se pouco metacromática. Observaram-se finas fibrilas elásticas intimamente associadas às fibras colágenas, entrelaçadas em direções diversas ou paralelas entre si. Extração comparativa de componentes da matriz não revelou diferenças entre proteínas extraídas das regiões direita e esquerda e também entre material fresco e congelado. A análise em SDS-PAGE revelou dezesseis proteínas com valores de massa molecular aparente entre 11 e 109 kDa. Análises realizadas sugerem que o GAG encontrado possivelmente é o dermatam sulfato. Os dados obtidos podem subsidiar novos procedimentos direcionados à obtenção de biomembranas melhor preparadas e funcionalmente mais adequadas à construção de biopróteses. / Abstract: Pericardial tissue has been used to construct bioprostheses employed in the repair different kinds of injuries. However, calcification and mechanical failure have been the main causes of limited durability of cardiac bioprostheses constructed with bovine pericardium. In the course of this work a study has been conducted on the porcine fibrous pericardium and its microscopic structure and its biochemical nature. The general morphology and the architecture of the collagen and elastic fibers have been studied in sectioned tissue and also total assemblies, stained by diverse histochemical methods and analyzed by conventional light, polarizing light, fluorescence and confocal microscopy. Biochemical study of the pericardial matrix was conducted according to pertinent procedures. The pericardium was shown as a highly cellularized tissue with a vascular tree very ramified and collagen fibers arranged in multidirectionally oriented layers. A predominant direction was verified, with a larger number of fibers obliquely oriented, starting at the lower central region towards high-lateral-left relatively to the heart. A discreet predominance of collagen fibers is the base-apex direction was verified in the right-front region of the pericardium. Extracellular matrix with little metachromasy was observed, indicating small quantities of acid glycosaminoglycans. Fine elastic fibrils were observed, intimately associated to collagen fibers, interlaced in various directions or parallel to themselves. No differences were found between proteins extracted from the right or left regions and between fresh or frozen material. The quantities of extracted GAGs were too small to be detected by the method used. The SDS-PAGE showed proteins with values of apparent molecular mass between 11 and 109 kDa included two polydisperse bands around 71 and 85kDa. The ectrophoretic analysis showed that the found GAG is possibly dermatan sulfate. / Doutorado / Histologia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Sergio Luis Felisbino / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-07T07:36:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Delella_FlaviaKarina_M.pdf: 11309280 bytes, checksum: ef8a102f72cd9b9373b2ad5df1fdea29 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: As células do câncer prostático são geralmente dependentes, para o seu crescimento e sobrevivência, do estímulo androgênico mediado pelos receptores de andrógeno (RA). Conseqüentemente, a manipulação hormonal, como a castração e/ou o uso de antagonistas de RA, resulta na regressão do câncer. Entretanto, esses tratamentos raramente levam à cura da doença em estágios mais avançados e o câncer, conseqüentemente, torna-se independente de andrógeno. Importantes evidências sustentam a hipótese de que as metaloproteinases de matriz (MMPs) têm papel fundamental nos múltiplos passos da progressão tumoral, incluindo a promoção tumoral, angiogênese, invasão e metástase. As MMPs constituem uma ampla família de endopeptidases dependentes de zinco e cálcio e atuam na degradação da matrix extracelular e da membrana basal. Dois importantes membros da família das MMPs, MMP-2 e MMP-9, pertencentes à subfamília das gelatinases, são conhecidas por degradarem especificamente o colágeno do tipo IV, principal componente das membranas basais. Recentemente, o PCPT (Prostate Cancer Prevention Trial) mostrou que a finasterida, um inibidor da enzima 5_-redutase amplamente usado no tratamento da hiperplasia prostática benigna, diminuiu significativamente a incidência do câncer prostático quando comparado ao grupo que recebeu apenas placebo. Porém, tumores com gradação de Gleason entre 7 e 10 foram significativamente mais comuns no grupo tratado com finasterida que no grupo placebo. Nesse sentido, o papel da finasterida na quimioprevenção do câncer prostático necessita de mais investigação. Assim, este trabalho examinou se as alterações induzidas pela finasterida na morfologia e na fisiologia prostáticas têm impacto na expressão e atividade das MMPs 2 e 9. Ratos machos Wistar (90 dias de idade) foram tratados diariamente com injeções subcutâneas de finasterida (25mg/Kg) durante 3, 7, 30 e 90 dias. Um grupo de animais controle recebeu diariamente injeções subcutâneas do veículo farmacológico (óleo de milho). Os lobos ventrais (PVs), dorsolaterais (PDLs) e anteriores (PAs) foram dissecados, pesados e processados para as análises citoquímicas, imunocitoquímicas, morfométrico-estereológicas e de zimografias. A finasterida promoveu involução progressiva no compartimento epitelial e luminal, redução na altura e na proliferação das células epiteliais e aumentou o índice apoptótico e a área estromal dos três lobos prostáticos. A análise das zimografias mostrou que o tratamento com finasterida altera de modo lobo específico o padrão gelatinolítico da próstata do rato, com o aumento da pró- MMP-9 no dia 30 e da forma ativa da MMP-9 nos dias 30 e 90 na PV, aumento da pró- MMP-9 na PDL nos dias 7 e 30 e o aumento da forma intermediária da MMP-2 na PA no dia 7. Porém, a atrofia induzida pela finasterida não promoveu um aumento significativo na atividade das MMPs, em contraste com o que é encontrado na ablação hormonal pela castração. Isso se deve, provavelmente, ao fato das alterações promovidas pela finasterida na próstata constituírem um processo mais lento em comparação com a castração. Assim, os nossos resultados sugerem que a finasterida é eficaz no tratamento das afecções prostáticas sem promover um ambiente favorável para o crescimento de tumores invasivos e metástase / Abstract: Prostate cancer cells are generally dependent on androgen stimulation mediated by the androgen receptor (AR) for growth and survival. Therefore, hormonal manipulation, such as castration and/or the use of AR antagonists, results in a regression of the cancer. However, these treatments very rarely lead to the ''cure¿¿ of advanced disease and cancer eventually become androgen-independent. A substantial amount of evidence supports the hypothesis that Matrix Metalloproteinases (MMPs) play a key role in multiple steps of tumor progression, including tumor promotion, angiogenesis, invasion, and metastasis. MMPs constitute a broad family of zinc-binding endopeptidases that play a key role in degradation of the extracellular matrix and basement membrane. Two important members of the MMP family, MMP-2 and MMP-9, belonging to the gelatinase subfamily, are known to specifically cleave type IV collagen, the major component of basement membranes. Recently, The Prostate Cancer Prevention Trial (PCPT) showed that finasteride, a 5 alphareductase inhibitor widely employed in the treatment of benign prostatic hyperplasia, significantly decreased the incidence of prostate cancer versus placebo. However, Gleason score 7-10 tumors were significantly more common in the finasteride versus the placebo group. In this sense, the role of finasteride for prostate cancer chemoprevention needs further examination. Thus, this study examined whether the finasteride-induced changes on prostate morphology and phisiology has an impact on MMP-2 and MMP-9 expression and activity. Male Wistar rats (90 days of age) were treated daily with finasteride subcutaneously injected (25mg/Kg) during 3, 7, 30 and 90 days. A control group of animals received daily doses of vehicle (corn oil). The ventral (VPs), dorsolaterals (DLPs) and anterior (APs) lobes had been dissected, weighed and processed for citochemistry, immunocitochemistry, morphometric-stereological, and zymography analyses. Finasteride promoted a progressive involution in the epithelium and lumen compartments, reduced of the epithelial cell heights and proliferation and increased apoptosis and the stromal area in the three prostatic lobes. Gelatin zymography analysis showed that finasteride treatment changed the gelatinolitic profile in the prostatic lobes, with an increase in the pro-MMP-9 at day 30 and in the active-MMP-9 at days 30 and 90 in VP, increase in the pro-MMP-9 inDLP at days 7 and 30 and an increase in the intermediate-MMP-2 in PA at day 7. However, finasteride induced-atrophy did not cause a significant increase in MMPs activity, in contrast with is found in androgen ablation by castration. This is probably due to the fact that finasteride changes in prostate are a slow process in comparison with castration. Take together, our results suggest that finasteride is effective in treating prostate diseases without creating a most favorable environment for tumor growth invasion and metastasis / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Submitted by Fernanda Weschenfelder (fernanda.weschenfelder@uniceub.br) on 2018-05-28T18:08:30Z No. of bitstreams: 1 61250396.pdf: 1959393 bytes, checksum: 136cc2094fba55d4e15ebaf6413e5ab9 (MD5) / Approved for entry into archive by Fernanda Weschenfelder (fernanda.weschenfelder@uniceub.br) on 2018-05-28T18:08:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 61250396.pdf: 1959393 bytes, checksum: 136cc2094fba55d4e15ebaf6413e5ab9 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-28T18:08:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 61250396.pdf: 1959393 bytes, checksum: 136cc2094fba55d4e15ebaf6413e5ab9 (MD5) Previous issue date: 2016 / O presente trabalho aborda a abrangência base de cálculo das contribuições previdenciárias, definindo o alcance da expressão “folha de salários e demais rendimentos do trabalho pagos ou creditados, a qualquer título, à pessoa física”, expressão esta adotada na Constituição e, consequentemente, conceitua “remuneração”, definida pelo legislador ordinário como base tributável destas contribuições, que são destinadas ao financiamento da seguridade social e, especificamente, ao custeio do regime geral da previdência social. Para tanto, o estudo tomou por base os preceitos abarcados pela Constituição e legislação regedora da matéria, bem como pela doutrina e jurisprudência específica aplicável, sendo certo que o estudo da doutrina especializada enveredará pelos ramos do Direito Tributário, Direito Previdenciário e Direito do Trabalho, vez que que para definir a abrangência do conceito de remuneração, faz-se necessária a apreciação de abalizada doutrina destes três ramos do Direito. O estudo culminará com a adoção do modelo denominado “regra matriz de incidência”, para que seja atingido o objetivo de formulação do conceito de remuneração, que permitirá definir a abrangência da base de cálculo das contribuições previdenciárias. Formulado o conceito de “remuneração” e, por via de consequência, identificadas as características necessárias para que determinada parcela paga ao trabalhador, pelo empregador, ou até mesmo por terceiros, possa ser considerada de natureza remuneratória e, consequentemente, sujeitas à incidência de contribuições previdenciárias, o estudo aprofundarse-á na abordagem das controvérsias que envolvem a adoção das mais variadas parcelas pagas pelos empregadores aos trabalhadores que lhes prestam serviços, concluindo-se, para cada uma destas parcelas, de per si, acerca de sua natureza jurídica, se remuneratória ou não remuneratória, ou seja, se encontram-se ou não abarcadas pelo conceito de remuneração para fins de incidência de contribuições previdenciárias, tais como os planos de participação de lucros ou resultados, as stock options, os hiring bonus, dentre outros.

Orientadores: Liana Verinaud, Wilson Savino / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-13T05:50:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gameiro_Jacy_D.pdf: 7674475 bytes, checksum: 85104c8f2befe30630bf49436c0fb352 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O timo é o órgão linfóide primário responsável pelo amadurecimento dos linfócitos T. O processo de maturação é dependente da integridade do microambiente e da migração coordenada por elementos de matriz e quimiocinas dos precursores hematopoiéticos nos distintos nichos tímicos. Entretanto, a literatura mostra que profundas alterações no microambiente tímico, e conseqüentemente no desenvolvimento e amadurecimento dos linfócitos T, podem ocorrer como resultado de algumas patologias. No presente trabalho, analisamos a indução de atrofia e as alterações no microambiente tímico frente a três diferentes agentes indutores de atrofia, sendo dois agentes patogênicos, P.brasiliensis e P.berghei e uma doença metabólica, a diabetes induzida por aloxana. Nos três modelos estudados foi observada a atrofia do órgão com diferente intensidade nas alterações de componentes do microambiente tímico. Importantes moléculas associadas com a migração intratímica mostraram-se alteradas com modificações significativas nos elementos de matriz e nas quimiocinas bem como na expressão dos seus respectivos receptores. Ainda, a migração ex vivo também se mostrou alterada na atrofia induzida pelos agentes patogênicos, mas não no modelo de atrofia induzido por aloxana, sugerindo que as alterações desencadeadas são específicas de cada condição patológica analisada. As modificações nos elementos estudados sugerem alterações no padrão de migração intratímica e na exportação de timócitos, com comprometimento da função tímica, levando a maturação desequilibrada dos timócitos, com conseqüências para a resposta imune periférica. / Abstract: Thymus is the primary lymphoid organ responsible for differentiation of Tlymphocytes. This process is dependent of thymic microenvironment integrity and coordinated migration of hematopoietic precursors by chemokines and extracellular matrix elements. However, the literature shows that deep alterations in thymus microenvironment with modifications in thymocyte development may occur such as result of some pathological disorders. In this study we analyzed the atrophy induction and alterations in thymic microenvironment in three different models of thymus atrophy. We studied two models of infectious diseases, P.brasiliensis and P.berghei, and a metabolic disorder, alloxan induced diabetes. We have observed thymus atrophy in all models with different alterations levels in thymus microenvironment elements. Important molecules associated with intrathymic migration were been altered with significant modifications in extracellular matrix elements, chemokines and their specific receptors. Besides, ex vivo migration was altered in thymus atrophy induced by pathogenic agents, but no alterations were observed in diabetic mice suggesting that different pathological conditions studied, leads to singular alterations in thymus compartment. The modifications in thymic molecules observed in our models, suggest impaired thymus functionality and alterations in thymocyte migration patterns These alterations can lead T cell maturation imbalance with consequences in Tlymphocyte immune response. / Doutorado / Imunologia / Doutor em Genetica e Biologia Molecular

Orientador: Sergio Luis Felisbino / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Insituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-13T04:30:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JustulinJunior_LuisAntonio_D.pdf: 17091914 bytes, checksum: 15d52dabcde65a4f842895fd71f92ccd (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Finasterida (Fin), um inibidor da enzima 5a-redutase do tipo II e a Doxazosina (Dox), um inibidor do receptor a1-adrenérgico, tem sido amplamente utilizados no tratamento dos sintomas da Hiperplasia Prostática Benigna (HPB). Recentemente, dados clínicos demonstraram que a combinação destas drogas foi mais efetiva em prevenir o desenvolvimento de retenção urinária aguda. Além disso, tem sido demonstrado que tanto as drogas isoladas, como em associação também podem ser utilizadas na prevenção e tratamento do câncer de próstata, devido ao seu potencial de induzir apoptose em células epiteliais normais e tumorais. Apesar disso, pouco se conhece sobre os efeitos da Fin e da Dox administradas isoladas ou em associação sobre a morfofisiologia prostática, incluindo proliferação, morte celular, e indução de remodelação da matriz extracelular pelas metaloproteinases de matriz. Ratos wistar machos adultos (13 semanas) foram tratados com Dox (25mg/kg/dia) ou com a combinação de Fin+Dox (25mg/kg/dia). Após a eutanásia, os lobos prostáticos (ventral, dorsolateral e anterior) foram retirados, pesados e imersos em fixador para análises morfológicas ou congelados em nitrogênio líquido para posterior análises bioquímicas. Os resultados morfológicos e estereológicos demonstraram que o tratamento com a Dox isoladamente por 3 dias resultou em aumento do peso da próstata ventral, com acúmulo de secreção na luz glandular. Os pesos absoluto e relativo das próstatas dorsolateral e anterior não sofreram alteração neste período de tratamento. Entretanto, após 30 dias de tratamento, observou-se uma redução de aproximadamente 20% nos pesos absoluto e relativo de todos os lobos prostáticos e um aumento do volume glandular ocupado pelo colágeno no estroma nos três lobos prostáticos. O tratamento com doxazosina também reduziu o índice de proliferação celular e aumentou o índice apoptótico em todos os períodos analisados. A próstata ventral de ratos tratados com a combinação de Fin+Dox apresentou perda de peso após 30 dias de tratamento. Nos dois períodos de tratamento ocorreu diminuição do índice de proliferação celular, aumento de apoptose e do volume estromal de colágeno, mais evidentes quando comparados ao tratamento com as drogas isoladas. O tratamento combinado também provocou aumento da imunomarcação para o TGF-ß1 demonstrado por imunohistoquímica, principalmente no epitélio. A expressão dos RNAms para MMP-2, TIMPs-1 and - 2 dimunuiu após 30 dias de tratamento, enquanto o RNAm para a MMP-9 não foi detectado em nenhum grupo experimental. O tratamento com Fin+Dox por 30 dias promoveu uma diminuição na atividade gelatinolítica da MMP-2 e um aumento na atividade da MMP-9. Em conjunto, os resultados deste estudo demonstram que tanto o tratamento com doxazosina quanto o tratamento combinado de Fin+Dox induzem grandes alterações glandulares que levam a atrofia prostática, sendo ainda mais significativa com o tratamento combinado, possivelmente pela ação complementar destas duas drogas sobre o parênquima e o estroma glandulares. Nesta atrofia, a MMP-9 e o TGF-ß 1parecem desempenhar um papel importante. Desta forma, nossos resultados auxiliam o entendimento dos dados clínicos, demonstrando que a combinação dos dois fármacos pode ser mais eficaz no tratamento da HPB. / Abstract: Finasteride (Fin), an inhibitor of type II 5-a reductase, and Doxazosin (Dox), an a1- adrenergic blocker, have been widely used in treatment of Benign Prostate Hyperplasia (BPH) symptoms. Recently, clinical data have demonstrated that the combined therapy with Fin+Dox reduced the long-term risk of acute urinary retention and the need for invasive therapies than either drug alone. Moreover, both drugs, alone or in combination have been suggested to be effective in the treatment of prostate cancer by inducing apoptosis in normal and tumoral cells. However, little is known about the effects of these drugs administrated alone or their combination on prostate tissue morphohysiology, including prostate morphology, cell proliferation, apoptosis and matrix metalloproteinases activities. Male adult Wistar rats (13 weeks old) were treated with doxazosin (25mg/kg/day) or with finasteride (25mg/kg/day) or with the combination of both drugs. The ventral (VP), dorsolateral (DLP) and anterior prostate (AP) were excised and processed for histochemical, morphometric and biochemical analysis. The results of morphological and stereological analyses demonstrate that Dox treatment for 3 day resulted in an increased in ventral prostate absolute and relative weight with secretion accumulation. The weight of dorsolateral and anterior prostate did not change in this period of treatment. However, after 30 days, the prostate exhibited an absolute and relative weight reduction of about 20% and an increase in collagen volume fraction in the stromal space in the three prostatic lobes. Dox also reduced epithelial cell proliferation and increased apoptosis in the three prostatic lobes in all periods of tretament. Rat VP treated with Fin+Dox also presented a reduction in absolute and relative weight, decrease in epithelial cell proliferation, increase in apoptosis and collagen volume fraction in the stroma in all periods analyzed, more than Dox alone. Fin+Dox treatment also increased the TGF-ß 1 immunoreaction in the epithelium and in the stroma of VP. The mRNA for MMP-2, TIMPs-1 and - 2 expression after 30 days of treatment were decreased. The mRNA for MMP-9 was not detected in any groups analyzed. Fin+Dox treatment for 30 days promoted a decrease in gelatinolitic activity of MMP-2 and an increase in MMP-9. Take together, these results demonstrated that both Dox alone or in combination with Fin induced changes in glandular histoarchitecture, leading to a prostate atrophy, being the combined treatment more effective in inducing glandular atrophy, possibly to the complementary action of the Fin and Dox on prostate parenchyma and stroma, respectively. In this process, the MMP-9 and TGF-ß1 appear to participate effectively. Our results contribute to a better understanding of the clinical data, demonstrating that the combined treatment can be more effective in the BPH treatment. / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Marcela Rocha de Oliveira Carrilho, Caio Cezar Randi Ferraz / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-13T08:00:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_JulianaNascimento_D.pdf: 1975919 bytes, checksum: 2c0bf72bcc8b2c20101ceb2474690583 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Conceitos da odontologia restauradora adesiva vêm sendo empregados em endodontia na cimentação de pinos intrarradiculares e na obturação dos condutos. O primeiro estudo que compõe este trabalho teve como objetivo comparar a qualidade e durabilidade do selamento promovido por materiais obturadores endodônticos que se aderem à dentina (Epiphany/ Resilon) àquelas obtidas com materiais convencionais (AH Plus/ guta-percha) e verificar a influência da existência de uma barreira coronária neste selamento. Dentes humanos unirradiculares receberam tratamento endodôntico e obturação com uma das combinações de materiais em estudo (Epiphany/ Resilon ou AH Plus/ guta-percha). Os condutos obturados receberam selamento coronário com Coltosol, Clearfil SE Bond/ Filtek Z-250 ou foram deixados sem barreira coronária. A qualidade do selamento proporcionada por cada combinação de material foi avaliada por um método de transporte de fluidos em dois períodos: após a presa do cimento endodôntico (imediato) e depois de 180 dias de armazenamento. Espécimes obturados com Epiphany/Resilon apresentaram maior permeabilidade (selamento menos efetivo) independentemente do tipo de selamento coronário e do período de avaliação. Ambos materiais utilizados como barreira coronária (Coltosol ou Clearfil SE Bond/ Filtek Z-250) aumentaram significativamente o selamento dos espécimes. Após o armazenamento, observou-se redução nos níveis de permeabilidade dos espécimes obturados com AH Plus/guta-percha sem selamento coronário ou selados com Coltosol e dos espécimes obturados com Epiphany/Resilon que não receberam selamento coronário. Concluiu-se que a capacidade de selamento de materiais obturadores adesivos é inferior àquela dos materiais obturadores convencionais e que o armazenamento por 180 dias não interferiu negativamente nesse selamento. A presença de uma barreira coronária contribuiu para a efetividade do selamento radicular. O segundo estudo teve como objetivo investigar a expressão de enzimas metaloproteinases da matriz (MMPs) na dentina radicular uma vez que tais enzimas têm sido implicadas na perda da estabilidade da união dente-material restaurador. Fragmentos de dentina humana coronária e radicular foram triturados e transformados em pó e as proteínas dentinárias extraídas com o uso de hidrocloreto de guanidina e EDTA. A análise por zimografia revelou atividade gelatinolítica na dentina coronária e radicular correspondente à MMP-2 e MMP-9. A metaloproteinase 2 foi mais intensamente detectada na dentina radicular desmineralizada e a MMP-9 foi, em sua maioria, recuperada do compartimento mineralizado do tecido, antes do uso do EDTA. Através do ensaio de Western Blot detectou-se ainda MMP-8 em ambos os substratos. Concluiu-se que metaloproteinases são expressas em dentina radicular de maneira semelhante à dentina coronária. No terceiro estudo a mesma metodologia foi empregada para a detecção de metaloproteinases no substrato dentinário bovino, uma vez que este é frequentemente utilizado como um substituto à dentina humana em ensaios de resistência de união. As proteínas da dentina bovina coronária apresentaram atividade gelatinolítica em zimografia correspondente à MMP-2 e MMP-9, enquanto a dentina radicular apresentou atividade compatível com MMP-2 somente. Pode-se concluir que o substrato dentinário bovino expressa metaloproteinases com atividade gelatinolítica e que existem diferenças no perfil de expressão entre coroa e raiz. / Abstract: Restorative strategies involving dentin bonding have been increasingly applied to endodontics. The first study evaluated the immediate and long-term sealing ability of adhesive versus conventional endodontic filling materials and investigated the influence of a coronal seal on leakage rates. After chemo-mechanical preparation/irrigation, human roots were filled with either AH Plus/gutta-percha or Epiphany/Resilon. Coronal sealing was performed with Coltosol or Clearfil SE Bond/Filtek Z250, and some samples received no material. The quality of root canal sealing was assessed by a fluid transport method, performed after sealer setting and 180 days of storage. Specimens filled with Epiphany/Resilon exhibited higher leakage than specimens filled with AH Plus/gutta-percha regardless of experimental condition. Coronal sealing reduced leakage significantly, but no difference was detected between Coltosol and Clearfil/Filtek Z250. After storage, significant decrease in leakage was observed in roots filled with AH Plus/gutta-percha either without coronal sealing or sealed with Coltosol, as well as in roots filled with Epiphany/Resilon without coronal sealing. It was concluded that adhesive filling materials did not provide better sealing than the conventional materials and that this sealing was not disturbed by storage of root filled specimens The presence of a coronary seal contributed to reduce leakage. Matrix metalloproteinases (MMPs) found in coronary dentin may play a role in the loss of stability of bonded restorations. The second study aimed to investigate whether these enzymes can also be detected in root dentin. Crown and root sections of human teeth were pulverized into powder and dentin proteins were extracted by using guanidine-HCl and EDTA. Zymography revealed gelatinolytic activity in both crown and root dentin samples, with bands corresponding to MMP-2 and MMP-9. MMP-2 activity was more evident in demineralized root dentin whereas MMP-9 was mostly extracted from the mineralized compartment of dentin. Western Blot analysis was able to detect MMP-8 equally distributed in crown and root dentin. In conclusion, MMPs are expressed in radicular dentin similarly to crown dentin. Using the same methodology, the third study assessed whether metalloproteinases are expressed in bovine dentin since this substrate has been frequently used as a substitute to human dentin in bond strength evaluations. Protein extracts obtained from bovine crown dentin exhibited gelatinolytic activity in zymography corresponding to MMP-2 and MMP-9. A similar pattern could be observed in root dentin proteins regarding the expression of MMP-2 isoforms, but no gelatinolytic activity was observed in the molecular weight area corresponding to MMP-9. It could be concluded that bovine sound dentin can express MMPs with gelatinolytic activity, but differences may occur in the expression profile of crown and root dentin substrates. / Doutorado / Endodontia / Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Rosiane Lopes Cunha / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-13T14:14:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sato_AnaCarlaKawazoe_D.pdf: 2187954 bytes, checksum: 9f67420e2e9bb6fdb40e51d15be43b4e (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A influência das características físicas e químicas do meio dispersante sobre a reologia de suspensões-modelo foi avaliada visando o entendimento do comportamento de sistemas reais como as polpas de frutas. Para isto, o trabalho foi dividido em duas etapas: 1) estudo do efeito da composição de sistemas-modelo de soro de polpas de frutas no comportamento reológico, e 2) estudo de suspensões-modelo de diferentes partículas dispersas em matrizes com diferentes propriedades físicas e químicas. Na primeira etapa, foi verificado o efeito da presença de pectinas de alto e baixo grau de metoxilação, assim como de suas misturas. Os resultados mostraram um efeito sinergístico da mistura destes diferentes tipos de pectinas, devido à maior viscosidade e pseudoplasticidade dos sistemas mistos quando comparados aos sistemas com um único tipo de pectina. Assim, ressaltou-se a importância dos diferentes tipos de ligação no comportamento reológico destes sistemas. A segunda etapa permitiu a compreensão das interações entre partículas e partícula-solvente e a sua influência no comportamento reológico de suspensões-modelo. De um modo geral, as interações entre partículas e partícula-solvente foram maiores nos meios menos viscosos e polares. Tais resultados foram refletidos pelo valor ajustado da fração máxima de empacotamento (fm) por diferentes modelos, dado que foi possível a adição de maior quantidade de sólidos para os sistemas com menos interações. Xantana foi adicionada às matrizes dispersantes para promover pseudoplasticidade, indicando comportamentos distintos quando adicionadas em água pura e em soluções aquosas de glicerina. No primeiro caso, as matrizes apresentaram comportamento altamente pseudoplástico, enquanto que a adição de mesma quantidade de xantana nas soluções aquosas de glicerina levou a um grande aumento na viscosidade, com menor influência no valor do índice de comportamento de escoamento. A adição de sólidos nestes dois tipos de matrizes levou a comportamentos distintos. No primeiro caso verificou-se uma leve desestruturação do sistema, refletido principalmente pela maior influência do módulo complexo com a freqüência e menor variação na viscosidade relativa das suspensões. Por outro lado, o aumento na fração de sólidos nos sistemas compostos com xantana, glicerina e água levou a suspensões mais estruturadas. Assim, os resultados apresentados mostram que além das características das partículas, as propriedades químicas e reológicas da matriz dispersante são essenciais na determinação do comportamento estrutural e de escoamento de suspensões e portanto, não deveriam ser desprezadas pelos modelos existentes / Abstract: The influence of the physical and chemical properties of dispersing matrices on the rheological behavior of model-suspensions was evaluated, aiming the understanding of real suspensions such as fruit pulps. The present research was divided into two parts: 1) influence of composition of serum of fruit pulps on their rheological characteristics, through the study of model-systems, and 2) evaluation of model-suspensions of different particles dispersed into matrices with distinct characteristics (physical and chemical). In the first part, the effects of low and high methoxy pectins were evaluated, as well as their mixture. Results indicated a synergistic effect on the mixture of different sorts of pectin, which was observed by the higher viscosity and pseudoplasticity of mixed systems as compared to pure pectin ones. Such results allowed emphasizing the importance of different binding characteristics on the rheological properties of these systems. The second part allowed for the comprehension of interparticle and particle-matrix interactions, and their influence on the rheological behavior of model suspensions. Generally, interactions were more pronounced at low viscous and polar matrices, which reflected the lower maximum packing fraction (fm) fitted by different models. Xanthan was added to dispersing matrices to impart pseudoplasticity, showing distinct behaviors when mixed in pure water and aqueous glycerin solutions. In the first case, matrices showed highly shear thinning behavior, while the addition of the same amount of xanthan in glycerin aqueous solutions promoted a significant increase on viscosity, with lower influence on the flow index behavior (n). Thus, distinct behavior was observed when increasing solids concentration on these two matrices. In the first case, the increase of the dependency of complex modulus with frequency and the lower influence of the relative viscosity reflected a slight loss of structure with solids addition. On the other hand, increasing solids content on systems composed with xanthan, glycerin and water increased structuring. Thus, results indicated that beyond particles characteristics, which have already been widely studied in literature, the knowledge of the chemical and rheological properties of dispersing matrix is of great importance on structural behavior of suspensions / Doutorado / Doutor em Engenharia de Alimentos

Orientador: Paulo Pinto Joazeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T07:41:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rosa_RenataGiardini_M.pdf: 17497902 bytes, checksum: 703ffbe86316dbd66437c0d105646fed (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Durante a prenhez de alguns roedores ocorre um acentuado processo de remodelação da sínfise púbica (SP). No camundongo, esta articulação fibrocartilaginosa é gradativamente formada por um tecido conjuntivo fibroso, resultando no ligamento interpúbico (LI) entre os coxins de cartlagem na etapa final da prenhez. Logo após o parto, este ligamento é rapidamenteremodelado e o espaço entre os ossos púbicos se fecha por volta do quinto dia pós-parto. Sabe-se que o hormônio relaxina facilita o crescimento e remodelação dos órgãos do trato reprodutor feminino, alterando a regulação dos processos bioquímicos envolvidos na remodelação da matriz extracelular (MEC) do útero gravídico e da cérvice. Porém pouco se conhece sobre a sínfise em relação ao envolvimento de metaloproteinases (MMPs) nessa remodelação. Assim como, da participação de células inflamatórias, que poderiam estar envolvidas no processo de remodelaçãoda sínfise púbica do camundongodurantea prenhez. Neste estudo, foram utilizadas sínfises de camundongos virgens e ligamento interpúbico de animais prenhes para a detecção de MMPsin vivo e in vitro (explante de 24 horas). As MMPs da família das gelatinases (MMP-2 e MMP-9) foram caracterizadas pela zimografia e por meio de ensaios imunohistoquímicos,assim como a MMP-8 (colagenase2) associada,quase que exclusivamente, com o processo inflamatório. Também foram utilizadas microscopia eletrônica de transmissão e microspia de luz associada às colorações seletivas para evidenciar os tipos celulares que poderiam estar participandodo processo de remodelaçãoda sínfise púbica. A zimografia demonstrou a presença das gelatinases MMP-2 e MMP-9, ambas como pré e pró-enzimas, na SP e no LI. Imunohistoquímicadetectou a reação positivade gelatinasese também de MMP-8em células seme~hantesaos fibroblastos. A caracterização morfológica evidenciou que as células semelhantesa fibroblastos na sínfise de animais virgens estão próximasa matriz pericelular, ao passo que durante a prenhez, há um aumento deste subcompartimento, entre célula e matriz. As análises qualitativas e quantitativas, mostramum reduzido númerode granulócitosna sínfise de animaisvirgens e no ligamento intepúbico durante a prenhez. Dados obtidos neste trabalho suportam a hipótese de que as gelatinases estão envolvidas na remodelação da sínfise por processos intrínsecos, evidenciando que tanto as modificaçõesdo fenótipo de células semelhantes a fibroblastos, como as modificaçõesquímicas da MEC, são fundamentais para o rearranjo desta articulação durante a prenhez, parto e pós-parto no camundongo. A extensão da remodelação da MEC sugere o papel dos hormônios da prenhez na modulação da interação célula-matriz independentemente de uma reação do tipo inflamatória descrita em outros órgãos durante a prenhez / Abstract: During pregnancy of some rodents a deep remodeling occurs in the pubic symphysis (PS). In the mouse, these fibrocartilagenousarticulation are gradually replaced by a dense connective tissue, forming the interpubic ligament (IL) at the end of pregnancy. Right after birth, this ligament is rapidly remodeled and the space between the two bones is quickly closed, five days after birth. It is well known that hormones such as relaxin, facilitates the growth and remodeling of organs in female reproductive tract, changing the regulation of biochemical processes that are involved in the remodeling of the extracellular matrix (ECM) of the uterus and cervix during pregnancy. However, little are known about pubic symphysis in when the subject is the involvement of metalloproteinases (MMPs) in this remodeling, as well as the participation of inflammatorycells that could be involved in the remodeling process of the mouse pubic symphysisduring pregnancy. In this study were used pubic symphysis of virgin mice and interpubic ligament in pregnant animais for the detection of MMPs in vivo and at in vitro (24h explants). MMPs from the gelatinase family (MMP-2 and MMP-9) were characterized by zymography and by immunohistochemistryessays, also MMP-8 (collagenase 2) that is believed to be associated almost exclusively with an inflammatory processoTransmission electron microscopy and light microscopy was also used associated with selectively staining, to evidence type of cells that could be involved in the pubic symphysis remodeling. Zymographydemonstratedthe presenceof gelatinases MMP-2 and MMP- 9 both in inactive and active forms, at the PS and IL. Immunohistochemistry,at the pubic symphysis and interpubic ligament, detected the expression of gelatinases and also MMP-8 in cells that were similar to fibroblasts. Morphological characterization evidenciated that cells that are similar to fibroblasts in the pubic symphysis of virgin animais are closely related to the pericellular region, being that during pregnancy,these spaces suffers an increase in this sub-compartment between cell and matrix. Qualitative and quantitative , analysis demonstratedlittle granulocytes in the pubic symphysis of virgin animais and in the interpubic ligament during pregnancy. Results that were obtained from this work support the hypothesis that the gelatinases could be involved in pubic symphysis remodeling through intrinsic processes, being evident that, both cellular phenotype modifications and also chemical modifications of the ECM, are fundamental to the rearrange of this articulation during mouse pregnancy, birth and pos-partum. The extensive remodeling of the ECM suggests hormonal role of the pregnancy in the modulation of the interaction between cell-matrix independently of an inflammatoryreaction in other organs during pregnancy / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Jose Mauro Granjeiro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-14T17:09:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paiva_KatiuciaBatistadaSilva_D.pdf: 3483379 bytes, checksum: 7c286d954d5465463a66555914cbdafc (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi delinear o perfil de expressão temporal e espacial das MMP-2 e -9, TIMP-1 e -2 e RECK durante os eventos de formação de tecidos mineralizados (osso, esmalte e dentina) em camundongos em fase embrionária, recém nascidos e indivíduos adultos através de imunohistoquímica e hibridização in situ. Durante a amelogênese em incisivos de rato adulto, na fase de secreção, as MMPs e RECK foram imunocoradas na região infracelular dos ameloblastos de secreção e RECK foi ainda detectado difuso no citoplasma destas células. MMP-9 foi localizada nas células do retículo estrelado e RECK nas células do epitélio externo. Na fase de transição, detectados uma fraca imunomarcação ao nível da membrana dos ameloblastos de transição para as MMPs e RECK esteve difuso no citoplasma destas células. Na camada papilar, as MMPs e RECK foram imunomarcadas nos macrófagos ou células dendríticas. Do início ao final da fase de maturação, a expressão de RECK foi aumentando nos ameloblastos de maturação e nas células da camada papilar, enquanto que a expressão das MMPs foi diminuindo nestas células. AS TIMPs foram detectadas somente nos ameloblastos na fase de maturação. Nós observamos RECK e a MMP-9 no citoplasma do odontoblastos, provavelmente, no complexo de Golgi ou na rede do retículo endoplasmático rugoso. Durante a ossificação intramembranosa da mandíbula e maxila, os osteoblastos foram imunocorados pelas MMPs, TIMPs e RECK. Na degradação da cartilagem de Meckel, MMPs, TIMPs e RECK foram imunomarcadas nas células do pericôndrio, bem como o mRNA de RECK. Durante a odontogênese, RECK foi imunocorado nas células do epitélio oral migrando ao ecto-mesênquima, na fase de broto, no epitélio interno do órgão do esmalte, na fase de capuz e em odontoblastos e ameloblastos na fase final de campânula. Transcritos de RECK foram localizados em todo o germe dentário na fase de capuz, mais concentrado no nó-do-esmalte secundário, na fase de campânula inicial e nos odontoblastos e ameloblastos, na fase final de campânula. O osso alveolar foi marcado em todos os períodos. Durante a ossificação endocondral, os condrócitos foram imunopositivos para as MMPs, TIMPs e RECK, na fase de diferenciação dos condrócitos (E13). Na fase de molde cartilaginoso (E14) os condrócitos hipertróficos foram imunocorados para as MMPs e RECK. RECK e TIMPs foram também encontradas no pericôndrio. Na fase de invasão vascular e celular (E15), MMPs, TIMPs e RECK foram expressos por células que migram do colar ósseo para o centro da diáfise, bem como por osteoclastos/condroclastos próximos ao septo transverso. Os condrócitos hipertróficos continuam imunocorados. De E16 a PN1, as MMPs, TIMPs e RECK foram expressas por osteoblastos e condrócitos hipertróficos na placa de crescimento e pelas células do periósteo e pericôndrio. Os resultados obtidos apontam para a expressão diferenciada de MMPs, TIMPs e RECK nos diversos eventos estudados, sugerindo que a atividade biológica destas proteínas regula a degradação da matriz extracelular tanto durante o desenvolvimento dos tecidos como sua manutenção. Além disso, pela primeira vez, demonstra-se a expressão de RECK pelas células formadoras de tecido ósseo e dentário. / Abstract: Our objective was to analyse the spatial-temporal distribution of MMP-2, MMP-9, TIMP-1, TIMP-2 and RECK during development of mineralized tissue (bone, enamel, and dentine) in embryos, newborn, and adult mice by immunohistochemistry and in situ hybridization. During rat amelogenesis, at the secretion phase, MMPs and RECK were immunostained in the ameloblast infracelular region and RECK was also detected in the cytoplasm of these cells. MMP-9 was localized in the stellated cells and RECK in the outer enamel epithelium cells. At the transition phase, a weak immunostaining was observed at the ameloblast membranes for MMPs and RECK. RECK was also detected in the cytoplasm of these cells. At the papillary layer, MMPs and RECK have been observed in macrophages and/or dendritic cells. At early and late maturation phases, MMPs and Reck profiles were similar to the transition phase, but the immunostaining was less pronounced. TIMPs were identified exclusively in maturation ameloblasts throughout the maturation phase. We also observed that the cytoplasm of odontoblasts, probably at the Golgi apparatus and/or the RER network were immunostained for Reck and MMP-9. During mandible and maxillae intramembranous ossification, osteoblasts were immunostained for MMPs (early stage), TIMPs (late stage) and RECK. In Meckel cartilage degradation, MMPs, RECK and TIMPs mRNA and protein were found in perichondrial cells. During odontogenesis migrating epithelial cells in bud stage, enamel inner epithelial cells in cap stage, and ameloblasts and odontoblasts in bell stage were immunostained for RECK. Also, RECK mRNA was found difuse in all tooth germ in cap stage, mainly localized in primary enamel knout in early bell stage, and in ameloblasts and odontoblasts in late bell stage. The alveolar bone was immunolabelled in all periods. During endochondral ossification, chondrocytes were immunopositive for MMPs, RECK, and TIMPs during chondrocyte differentiation (E13). At the cartilaginous template (E14), the hypertrophic chondrocytes (HC) were immunostained for MMPs and RECK. RECK and TIMPs immunopositive cells were found in the perichondrium. At the vascular and cellular invasion (E15), MMPs, RECK and TIMPs were expressed by migrating cells from bone collar as well as by osteoclasts/chondroclasts close to the transverse septum. HC remained immunostained. From E16 to PN1, MMPs, TIMPs, and RECK were expressed by osteoblasts and HC in the growth plate and by cells in the perichondrium and periosteum. The results show the differential expression of MMPs, TIMPs, and RECK during the processess studied, sugesting that the biological activity these proteins regulates the MEC degradation and its maintenance in tissue development. Our results show for the first time that RECK is expressed by bone-forming and tooth-forming cells during mouse endochondral and intramembranous and in embryonic and adult odontogenesis, even if these cells are from different embryonic origins. / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular