Orientador: Angelo Berchieri Junior / Coorientador: Oliveiro Caetano de Freitas Neto / Banca: Wanderley Dias da Silveira / Banca: Gerson Nakazato / Banca: Manoel Victor Franco Lemos / banca: Marcos tulio de Oliveira / Resumo: O tifo aviário, causado por Salmonella Gallinarum biotipo Gallinarum, é uma infecção caracterizada pela alta mortalidade nos lotes de aves suscetíveis acometidos, enquanto S. Gallinarum biotipo Pullorum, o agente da pulorose, infecta as aves de produção industrial com as quais desenvolve relação mais branda. Ainda é escasso o conhecimento sobre os mecanismos moleculares que sustentam essas diferentes interações patógeno-hospedeiro. Nesse estudo, objetivou-se investigar o efeito de deleção parcial das sequências codificantes dos genes idnT (transportador de L-idonato ou D-gluconato), idnO (5-cetogluconato redutase) e ccmH (heme liase necessária na montagem de citocromos do tipo C) sobre a patogenicidade de S. Gallinarum 287/91 (SG287/91), uma vez que seus ortólogos são pseudogenes conservados em S. Pullorum. Os clones mutantes SG∆idnTO, SG∆ccmH e SG∆ccmHidnTO foram obtidos por meio da técnica de mutação sítio-dirigida, denominada de recombinação Lambda-Red e testados em dois experimentos independentes com aves comerciais semipesadas de postura suscetíveis ao tifo aviário. No 1º experimento não se observou alteração da patogenicidade dos clones mutantes após inoculação oral, pois todos os animais infectados desenvolveram sinais clínicos típicos do tifo aviário e vieram a óbito ao longo de 12 dias pós-infecção (dpi). Apesar dos 100% de mortalidade, as infecções desenvolvidas pelos clones SG∆idnTO e SG∆ccmHidnTO levaram os animais a óbito dentro de 48 horas desde o aparecimento d... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Fowl typhoid, caused by Salmonella Gallinarum biovar Gallinarum, is an infectious disease which elicits high mortality into a flock of susceptible birds whereas S. Gallinarum biovar Pullorum, the aetiological agent of pullorum disease, infects poultry of commercial importance with which such a bacterium sets off a more permissive host-pathogen interaction. Little is known about the molecular mechanisms driving these distinct interplays with the host. Herein, we aimed at investigating the effect of partial deletions in the idnT (L-idonate / D-gluconate transporter), idnO (5-ketogluconase reductase) and ccmH (heme liase involved in the c-type cytochrome maturation) coding sequences on S. Gallinarum 287/91 (SG287/91) pathogenicity since they are conserved pseudogenes in S. Pullorum genomes. SG∆idnTO, SG∆ccmH and SG∆ccmHidnTO mutant strains were constructed through a one-step inactivation technique, known as Lambda-Red-mediated recombination, and tested on two independent experiments by using a commercial brown egg-producing layer line susceptible to fowl typhoid. On the experiment 1, no changing was observed in the pathogenicity of the mutant strains upon oral inoculation as the infected animals developed typical fowl typhoid clinical signs and died along 12 days post-infection (dpi). In spite of causing 100% mortality, SG∆idnTO and SG∆ccmHidnTO killed all the animals within 48 hours since the clinical signs appearance while SG287/91 did so in 6 days, indicating an increased virulence by these mutant strains. On the experiment 2 every mutant strain were able to invade the host system from the intestine albeit SG∆idnTO and SG∆ccmHidnTO were recovered from livers and SG∆idnTO alone from spleens at higher numbers than was SG287/91, supporting the hypothesis of increased virulence for those clones ha... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-21T19:36:18Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 289907 bytes, checksum: 064b336b9358c9fa4209a400488d4491 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-21T19:36:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 289907 bytes, checksum: 064b336b9358c9fa4209a400488d4491 (MD5) Previous issue date: 2003-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / No Brasil, as plantações de eucalipto ocupam, de modo geral, solos de baixa fertilidade e com limitada reserva de nutrientes, o que torna a fertilização mineral prática comum. Além disso, são escassos os trabalhos relacionados à biomassa microbiana do solo (BMS) em plantações florestais nos trópicos. Com o intuito de avaliar métodos de determinação do P da biomassa microbiana do solo e estimar o C, o N e o P deste compartimento, dois ensaios foram conduzidos. Inicialmente, procurou-se avaliar três métodos para determinação do P da biomassa microbiana do solo (PBM): fumigação-extração (FE), irradiação com microondas- extração (IE) e irradiação com microondas-extração com membrana de troca aniônica (EMTA). Amostras de um Latossolo Vermelho-Amarelo distrófico muito argiloso (LVAd) foram coletadas nas profundidades de 0 - 5 e de 5 - 10 cm, em áreas com pínus, eucalipto e floresta nativa. Em termos gerais, menores teores de PBM foram obtidos com o método IE, os quais corresponderam a 30 % do obtido pelo método FE, nas áreas com eucalipto e floresta nativa, especialmente na camada superficial, e, apenas 17 %, na área com pínus. O PBM encontrado com o método EMTA foi ligeiramente superior ao observado com FE, na camada superficial, nas áreas com pínus (9,8 %) e floresta nativa (10,4 %), enquanto, com eucalipto, foram, em média, 46 % inferiores, nas duas camadas. Independente do método utilizado, o PBM variou significativamente entre as coberturas vegetais (1,74 a 8,93 mg kg -1 de P no solo), decrescendo em profundidade. Entre métodos, menores coeficientes de variação (CV) foram obtidos com o FE, retratando maior precisão do método. Porém, para as condições estudadas, o método IE mostrou-se, em termos operacionais, o mais adequado à determinação do PBM quando se tem maior número de amostras a serem analisadas. Com relação às coberturas vegetais, a grande variabilidade observada nos CV obtidos para cada cobertura, nos três métodos testados, inviabiliza a escolha de um único método que apresente maior precisão na avaliação do PBM. Para a estimativa do C, do N e do P da biomassa microbiana do solo (CBM, NBM, PBM), amostras de dois Latossolos Vermelhos, um de textura média (Lvd1) e outro argiloso (LVd2), nas profundidades de 0 - 5 e 5 - 10 cm, foram coletadas em plantações de Eucalyptus grandis que receberam, na primeira rotação, os tratamentos: (a) testemunha - sem adição de P; (b) 500 kg ha -1 de fosfato natural de Carolina do Norte (FCN); (c) 600 kg ha -1 de fosfato de Araxá (FA); e (d) 334 kg ha -1 de superfosfato triplo (ST), os quais equivalem a 150 kg ha -1 de P 2 O 5 . Menores valores de CBM foram encontrados no LVd1, textura média, porém, observou-se aumento da biomassa microbiana com a adubação fosfatada. Com relação às fontes de P aplicadas, não foi observada diferença significativa no CBM nas parcelas que receberam ST e FCN. No LVd2, argiloso, na parcela testemunha, o CBM foi superior e, entre fontes, não foram observadas diferenças significativas entre as de menor reatividade. O NBM seguiu as mesmas tendências, de acréscimos ou decréscimos, do CBM, nos dois solos, nas profundidades avaliadas. No LVd1, o PBM foi superior na parcela com FCN, entretanto, nas parcelas com ST e FA, não foi observada diferença significativa entre os valores encontrados, nas duas profundidades. No LVd2, apesar do PBM ser superior na parcela com FCN, esses valores não diferiram significativamente daqueles encontrados com FA. Nessa área, o PBM não diferiu significativamente entre tratamento, na camada subsuperficial. As relações entre o CBM e o PBM mostraram que o teor de P imobilizado na BMS foi, de modo geral, superior no LVd1, especialmente na camada subsuperficial. Todavia, maior percentagem do P total do solo encontrava- se incorporado à biomassa microbiana, no LVd2. Nas condições avaliadas, os resultados obtidos não permitem concluir sobre a influência da adubação fosfatada na BMS. Contudo, os maiores teores de C, N e P da biomassa microbiana foram observados no solo argiloso (LVd2) evidenciando a proteção física exercida pela argila sobre a BMS. / Usually, soils of low fertility with a restricted nutrient potential that require mineral fertilization are used for plantations of eucalypt in Brazil. Moreover, research into the microbial biomass of soils (MBS) in tropical forest plantations is rare. For an evaluation of the methods used to determine the P and to estimate the C, N, and P contents of the microbial soil biomass, two experiments were conducted. At an initial stage, three methods determination of the microbial biomass P content in the soil (PMB) were evaluated: fumigation-extraction (FE); radiation with microwave-extraction (RE); and radiation by microwave-extraction with a membrane for anionic exchange (EMAE). Samples of a very clayey dystrophic Red-Yellow Latosol (LVAd) were collected at depths of 1 - 5 cm and 5 - 10 cm in soils under pine and, eucalypt plantations, and native forest. In general, lower PMB contents were obtained by the RE than by the FE method; 30 % in the areas with eucalypt plantations and xinative forest, especially in the surface layer and only 17 % in the area with pine. The PMB contents established by the EMAE method were slightly higher than those determined by FE in the areas with pine (9.8 %) and native forest (10.4 %), while for eucalypt they were 46 % lower in both layers. Independent of the method in use, the PMB values varied significantly among the stands (1,74 to 8,93 mg kg -1 of P in the soil) and decreased with depth. The smallest coefficients of variation (CV) were obtained by FE, expressing the greater precision of this method. Under the studied conditions, however, where a large-scale analysis of samples is required, the RE method turned out to be, in terms of functionality, most adequate for the PMB determination. In relation to the stands, none of the three tested methods could be indicated as uniquely most precise method for the evaluation of the MPB, due to the great variability of the CV-s for each forest type. To estimate the C, N, and P of the microbial soil biomass (CMB, NMB, PMB), samples of two Red Latosols a medium texture (LVd1) and a clayey (LVd2), were collected at depths of 0 - 5 and 5 - 10 cm in plantations of Eucalyptus grandis, treated in the first rotation with: a) control with no additional P; b) 500 kg ha -1 of natural phosphate from North Carolina (PCN); c) 600 kg ha -1 of phosphate from Araxá (PA); and d) 334 kg ha -1 of triple superphosphate (TS), with 150 kg ha -1 of P 2 O 5 . Lower CMB values were found in the LVd1 of medium texture, although the phosphate fertilization entailed an increase of the microbial biomass. In relation to the applied P sources, no significant differences of the PMB were observed in the plots where TS and PCN had been applied. In the control treatment of the clayey LVd2, the PMB was higher, and no significant differences were observed among the sources of lower reactivity. NMB followed the same behavior pattern in relation to increases and decreases as observed for CMB in both soils and evaluated soil depths. In the LVd1, the PMB was higher in the PCN plot, while in the plots with TS and PA, no significant differences were observed among the observed values at both soil depths. These values did not differ xiisignificantly from those found with PA in the LVd2, although the PMB was higher in the plot with PCN. There was no significant difference among the treatments in the surface layer in this area. The relations between the CMB and the PMB showed that, in general, the content of immobilized P in the MBS was higher in the LVd1, especially in the surface layer. Still, a higher percentage of total soil P was incorporated in the microbial biomass, in the LVd2. Under the studied conditions, the obtained results do not allow conclusions about the influence of the phosphate fertilization on the MBS. However, higher contents of C, N, and P of the microbial biomass were observed in the clayey soil (LVd2), indicating the physical protection that clay exerts on the MBS.

Leveduras oleaginosas possuem a capacidade de sintetizar grande quantidade de lipídeos em suas células, gerando produtos de alto valor agregado através de um processo sustentável. Um perfil de ácidos graxos poli-insaturados é de grande interesse por parte das industrias alimentícia e farmacêutica e têm sido alvo de diversos estudos em relação à sua produção e efeitos benéficos à saúde. O presente trabalho teve como objetivo produzir ácidos graxos poli-insaturados pela levedura Meyerozyma guilliermondii BI281 utilizando glicose, glicerol residual e permeado de soro de queijo como fontes de carbono. Avaliou-se o metabolismo da levedura em meios de cultivo com diferentes composições (“meio A” e “base YM”) e comparou-se o seu desempenho em razões C/N 100: 1 e 50:1. A levedura foi capaz de metabolizar todos os substratos testados e o meio de cultivo “A” com glicerol residual e razão C/N 50:1 mostrou-se o mais adequado, obtendo valores de 5,67 g.L-1 de biomassa e 1,04 g.L-1 de lipídeos, representando aproximadamente 18 % do peso da massa seca de biomassa. Esta condição foi escalonada para biorreator de 2 L, onde condições de aeração e controle de pH puderam ser avaliadas, apresentando quantidade semelhante de lipídeos (1,08 g.L-1) e uma maior produção de biomassa (7,05 g.L-1). Os ácidos graxos sintetizados apresentaram em sua composição ácido láurico (C12:0), ácido mistírico (C14:0), ácido palmítico (C16:0), ácido pamitoleico (C16:1), ácido esteárico (C18:0), ácido oleico (C18:1 n-9), ácido linoleico (C18:2 n-6) e ácido linolênico (C18:3 n-3). / Oleaginous yeasts are able to synthesize high amounts of lipids in their cells, producing high added-value products through a sustainable process. Food and pharmaceutical companies have great interest in polyunsaturated fatty acids depending on their profiles and many studies related to their production and health benefits have been carried out. The aim of this study was to produce polyunsaturated fatty acids by the yeast Meyerozyma guilliermondii BI281A using glucose, crude glycerol, and cheese whey permeate as carbon sources. Yeast metabolism was evaluated in different compositions of culture media (“A” and “YM”) and at different C/N ratios (100:1 and 50:1). The yeast was able to assimilate all substrates tested, and medium “A” with crude glycerol as carbon source at a C/N ratio of 50:1 had the most efficient result with biomass production of 5.67 g.L-1 and lipid production of 1.08 g.L-1, which represented 18 % of dry cell weight. This composition was scaled-up to a 2 L bioreactor, where it was possible to measure pH and aeration conditions, and showed similar lipid production (1.08 g.L-1) and higher biomass production (7.05 g.L-1). Fatty acids profile obtained was composed by lauric acid (C12:0), myristic acid (C14:0), palmitic acid (C16:0), palmitoleic acid (C16:1), stearic acid (C18:0), oleic acid(C18:1), linoleic acid (C18:2 n-6), and linolenic acid (C18:3 n-3).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-10Bitstream added on 2014-06-13T19:14:44Z : No. of bitstreams: 1 botelho_aaa_me_jabo.pdf: 299640 bytes, checksum: e82d7c36c6135c74da78cba583a23175 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / No manejo integrado da cana-de-açúcar são utilizados fungos entomopatogênicos para o controle de insetos e também diversos agroquímicos visando aumento de produtividade. Porém, vários destes agroquímicos podem interferir na sobrevivência de Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a toxicidade dos agroquímicos mais utilizados no manejo da cana-de-açúcar para B. bassiana e M. anisopliae em experimentos feitos com a utilização em meio de cultura e de solo. Nos ensaios com meio de cultura, os fungos foram inoculados em meio de batata, dextrose e ágar (BDA) contendo diversos inseticidas (4), herbicidas (7) e maturadores (3). Avaliou-se o crescimento, a esporulação e a viabilidade, e com base nesses parâmetros fez-se a classificação toxicológica dos agroquímicos. Para verificar se o efeito encontrado em meio de cultura se mantém no ambiente do solo, foram usados os agroquímicos que apresentaram maior toxicidade no ensaio com meio de cultura. Nesta etapa os fungos foram inoculados nos solos argiloso e arenoso esterilizados, contendo os agroquímicos nas doses recomendadas pelos fabricantes, observando-se as seguintes formas de aplicação: T1 - inoculação do fungo no solo 1 hora antes da aplicação do agroquímico; T2 - inoculação do fungo no solo 1 hora após a aplicação do agroquímico; T3 - inoculação do fungo no solo 48 horas após a aplicação do agroquímico. Avaliou-se a sobrevivência dos fungos por um período de sete dias através das unidades formadoras de colônias (UFC) em placas de Petri. Nos ensaios com meios de cultura, os inseticidas à base de Fipronil (Regente®) e Thiametoxan (Actara®) foram compatíveis com os fungos, mas Aldicarbe (Temik®) foi considerado tóxico. A maior parte dos herbicidas avaliados foram classificados como tóxicos aos entomopatógenos, mas aqueles formulados com Imazapir... / In the management of sugarcane are used entomopathogenic fungi to control insects; and various agrochemicals aimed at increasing productivity. However, several of these agrochemicals may interfere with survival of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae. Therefore, this research had the objective to evaluate the toxicity of agrochemicals used in handling of sugarcane to B. bassiana and M. anisopliae in experiments in culture medium and soil. In tests in culture medium, the fungi were inoculated on potato dextrose agar (PDA) containing various insecticides (4), herbicides (7) and ripeners (3). It were evaluated the growth, sporulation and viability, and based on these parameters became the toxicological classification of agrochemicals. To examine whether the effect found in the culture medium remains in the soil environment, were used agrochemicals that showed higher toxicity in culture medium assays. At this stage the fungi were inoculated in clay and sandy soils sterilized, containing the chemicals in the recommended dosages, observing the following application forms: T1 - inoculation of the fungi in soil 1 hour before to herbicide application, T2 - inoculation fungi in the soil 1 hour after herbicide application, T3 - inoculation of the fungi in the soil 48 hours after herbicide application. It was evaluated the survival of the fungi for a period of seven days through the colony forming units (CFU) in Petri dishes. Insecticides based on Fipronil (Regente®) and Thiamethoxan (Actara®) are compatible with the fungi, but Aldicarbe (Temik®) proved to be toxic. Most of the herbicides evaluated were classified as toxic to entomopathogenic fungi, but those made with Imazapir (Contain®), Glyphosate (Glifosato®) and Metribuzin (Sencor®) were considered compatible. Among the ripeners only Glyphosate (Round up®) showed compatibility with B. bassiana and M. anisopliae... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-07-10Bitstream added on 2014-06-13T18:56:04Z : No. of bitstreams: 1 yoshida_l_me_jabo.pdf: 663799 bytes, checksum: 4dc9e1d64b26d27a609814b1eb9e7c39 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente estudo investigou, em condições de laboratório, a atividade patogênica de diferentes isolados dos fungos Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana e Paecilomyces fumosoroseus, aplicados nas concentrações de 1 x1 06 e 1 x1 08 conídios/mL nos estágios de ovo, larva L2, pupa e adulto de Chrysomya puloria. Grupos de 30 ovos, 20 larvas L2 e 20 pupas foram banhados com as suspensões de conídios e no ensaio com adultos, grupos de 30 moscas, foram pulverizados com as mesmas suspensões. Em todos os ensaios, utilizaram-se quatro repetições por tratamento. Os três fungos e seus respectivos isolados apresentaram baixa atividade patogênica para a fase de ovo. Os isolados de B. bassiana e M. anisopliae, aplicados na concentração de 108 conídios/mL, promoveram 100% de mortalidade de larvas de C. puloria. O tratamento de pupas com o isolado JAB 07 de B. bassiana, na concentração de 108 conídios/mL, reduziu significativamente a emergência de adultos. O efeito dose¬resposta foi melhor evidenciado no ensaio com adultos, pois os isolados de M. anisopliae e B. bassiana dimimuiram a sobrevivência somente quando aplicados na concentração de 108 conídios/mL. Todos os fungos se mostraram patogênicos para C. putoria, havendo diferença entre os isolados quanto a ação patogênica. Os isolados de B. bassiana e M. anisopliae foram mais eficientes, atuando principalmente nas fases de larva e adulto. P. fumosoroseus evidenciou menor atividade patogênica, apenas reduzindo a sobrevivência de adultos emergidos a partir de pupas inoculadas. A eficiência do controle foi influenciada pela concentração de conidios, obtendo-se os melhores resultados com as suspensões mais concentradas. / The present study investigated, in laboratory conditions, the pathogenic activity of different isolates of the fungi Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana and Paecilomyces fumosoroseus, applied in the concentrations of 1 x1 06 and 1 x1 08 conidia/ml in the stages of egg, L2 larvae, pupa and adult of Chrysomya putoria. Groups of 30 eggs, 20 L2 larvae e 20 pupae were bathed with the conidia suspensions and in the assay with adult, graups of 30 f1ies were pulverized with the same suspensions. In ali the assays there were used four repiicates per treatment. The three fungus and their respective isolates presented low pathogenic activity for the egg stage. The isolates B. bassiana and M. anisopliae, applied in the concentration of 108 conidia/ml, promoted a 100% of C. puloria larvae morta!ity. The pupae treatment with the isolate JAB 07 of B. bassiana, in the concentration of 108 conidia/ml, decreased significantly adult emergence. The dose-response effect was better evidenced in the assay with adults, because the isolates of M. anisopliae and B. bassiana only reduced the survival when applied in the concentration of 108 conidia/ml. All fungus demonstrated to be pathogenic to C. puloria, although there is a difference between the isolates in their pathogenic activity. The isolates of B. bassiana and M. anisopliae were more efficient, mainly acting in the larva and adult stages. P. fumosoroseus evidenced lower pathogenic activity, decreasing the survival of emerged adult only through inoculated pupae. The control efficiency was influenced by the conidia concentration, obtaining the best results with the most concentrated suspension.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 308082 bytes, checksum: e30aa6dee1e9497438ca76f699ba5715 (MD5) Previous issue date: 2011-03-11 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The objective was to estimate the urinary excretion of purine from the TDN consumption and determine the endogenous contribution in dairy cows. The experiment was conducted at the Unidade de Ensino, Pesquisa e Extensão em Gado de Leite (UEPE-GL) during the month of March 2010. Twelve Holstein cows purebred and crossbred, allocated in a completely randomized design with three treatments based on production of milk, which were assessed as high, medium and low bands by taking the following production: 33,50; 18,42 and 11.07 kg of milk / day, respectively.The diet consisted of corn silage ad libitum and concentrate fed at a rate of one kilogram for every three pounds of milk produced. The experimental period lasted 15 days, se ven to eight days for adaptation and implementation of collection of urine, faeces, blood and milk, as well as to evaluate the consumption and digestibility. Milkings were carried out in two hours, from 6:00 h and 16:00 h. The results were evaluated by analysis of variance, using the 5% level of probability of type I error, through the SAS, by using the t test to compare means. Relations between the daily excretion of purine derivatives and the consumption of total digestible nutrients (TDNI), digestible organic matter intake (DOMI) and dry matter intake (DMI) were assessed using linear regression. No significant differences (P>0.05) for lactose and milk fat, however, the percentage of protein was higher for cows with low production (P<0.05). Intakes of all nutrients, except for neutral detergent fiber corrected for ash and protein (NDF) and neutral detergent fiber indigestible (NDFi) were higher for animals for higher production. The digestibility of dry matter (DM), organic matter (OM), crude protein, and non-fiber carbohydrates and contents of total digestible nutrients (TDN) did not differ between treatments (P> 0.05), whereas the digestibility of ether extract and NDF were influenced by the level of milk production, and lower for cows of high production. The levels of urea nitrogen in plasma and milk and excretion of nitrogenous (N) in urine were highly correlated and higher (P<0.05) for more productive animals, indicating that the concentration varied with the level of milk production. Urinary excretions of purine derivatives (PD) and urea, as well as the relations of allantoin: creatinine, uric acid, creatinine, purine derivatives, creatine and urea, creatinine, when compared between different times of collection and spot urine collection total urine for 24 hours, no significant difference (P>0.05). The synthesis of ruminal microbial crude protein and excretion of PD were associated with intake of TDN and digestible organic matter (DOM), being raised from 23.48 mmol of SD for each kg of TDN consumed, 25.50 mmol SD for each kg of digestible organic matter, revealing that both relations can be used to make these estimates. The gathering spot can be used to estimate the daily excretion of purine derivatives and urea in the urine of cows, regardless of the level of production. Both the use of TDN intake and consumption of MOD can be used in order to estimate the urinary purine derivatives. Whereas the excretion of PD in mmol/kgPC0,75 and dry matter intake expressed as g/kg PC0,75, obtained the value of the fraction of endogenous DP mmol/kgPC0.2370,75. / Objetivou-se estimar a excreção urinária de derivados de purinas a partir do consumo NDT e determinar a contribuição endógena em vacas de leite. O experimento foi realizado na unidade de ensino, pesquisa e extensão em gado de leite (UEPE-GL) durante o mês de março de 2010. Utilizaram-se doze vacas da raça Holandesa, puras e mestiças, alocadas em delineamento inteiramente casualizado, com três tratamentos em função da produção de leite, que foram determinadas como Alta, Média e Baixa seguindo as seguintes faixas de produção: 33,50, 18,42 e 11,07 kg de leite/dia, respectivamente. A dieta foi constituída de silagem de milho à vontade e concentrado fornecido na proporção de um kg para cada três kg de leite produzido. O período experimental teve duração de 15 dias, sendo sete para adaptação e oito dias para realização das coletas de urina, fezes, sangue e leite, bem como para avaliação do consumo e digestibilidade aparente. As ordenhas foram realizadas em dois horários, às 6:00 h e 16:00 h. Os resultados foram avaliados por meio de análises de variância, utilizando-se nível de 5% de probabilidade para o erro tipo I, por intermédio do programa SAS, sendo utilizado o teste de T para comparação de médias. As relações entre as excreções diárias dos derivados de purinas e os consumos de nutrientes digestiveis totais (CNDT), de matéria orgânica digestível (CMOD) e de matéria seca (CMS) foram avaliadas através do modelo de regressão linear simples. Não houve diferença (P>0,05) para os teores de lactose e gordura do leite, porém, o percentual de proteína foi superior para vacas de baixa produção (P<0,05). Os consumos de todos os nutrientes, exceto o de fibra insolúvel em detergente neutro corrigida para cinzas e proteína (FDNcp) e fibra insolúvel em detergente neutro indigestível (FDNi), foram maiores para os animais de maior produção. As digestibilidades da matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), proteína bruta, e carboidratos não fibrosos e os teores de nutrientes digestíveis totais (NDT) não diferiram entre os tratamentos (P>0,05), enquanto que as digestibilidades do extrato etéreo e da FDNcp, foram influenciadas pelo nível de produção de leite, sendo menores para vacas de Alta produção. Os teores de nitrogênio uréico no plasma e no leite e a excreção de compostos nitrogenados (N) na urina foram altamente correlacionados e superiores (P<0,05) para animais mais produtivos, indicando que a concentração variou com o nível de produção de leite. As excreções urinárias dos derivados de purinas (DP) e uréia, bem como as relações de alantoina:creatinina, ácido úrico:creatinina, derivados de purina:creatina e uréia:creatinina, quando comparadas entre os diferentes tempos de coleta spot de urina e coleta total de urina durante 24 horas, não apresentaram diferença significativa (P>0,05). A síntese ruminal de proteína bruta microbiana e a excreção de DP foram relacionadas com o consumo de NDT e de matéria orgânica digestível (MOD), sendo obtidos 23,48 mmol de DP para cada kg de NDT consumido e 25,50 mmol de DP para cada kg de MO digestível, sendo possível observar que ambas as relações podem ser utilizadas para realizar estas estimativas. A coleta spot pode ser utilizada para estimar a excreção diária de derivados de purinas e de uréia na urina em vacas, independentemente do nível de produção. Tanto a utilização do consumo de NDT quanto de MOD podem ser utilizados com o intuito de estimar os derivados de purinas urinários. Considerando a excreção de DP em mmol/kgPC0,75 e o consumo de matéria seca expresso em g/kg PC0,75, obteve-se o valor da fração endógena de DP de 0,237 mmol/kgPC0,75.

Submitted by Caroline Varella Rodrigues null (carolvr61@hotmail.com) on 2016-09-13T20:21:24Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de mestrado - Caroline.pdf: 2303536 bytes, checksum: 62bf73f0ff7f989aa65a89bf8593fc5f (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-09-16T20:39:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 rodrigues_cv_me_araiq.pdf: 2303536 bytes, checksum: 62bf73f0ff7f989aa65a89bf8593fc5f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-16T20:39:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 rodrigues_cv_me_araiq.pdf: 2303536 bytes, checksum: 62bf73f0ff7f989aa65a89bf8593fc5f (MD5) Previous issue date: 2016-08-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A produção de biodiesel levou ao aumento do coproduto gerado desse processo, o glicerol bruto, que devido ao seu excesso, tem ganhado interesse nas transformações biotecnológicas visando à formação de produtos com valor agregado, sendo H2 de maior interesse. Este estudo avaliou o potencial da bioconversão do glicerol bruto, proveniente da produção de biodiesel a partir de óleo de cozinha usado, a hidrogênio por meio de consórcios de bactérias anaeróbias fermentativas. O glicerol bruto foi submetido ao pré-tratamento ácido (pH 3,0, HCl 1,0M) para converter sabões solúveis, considerados inibitórios ao crescimento microbiano, à ácidos graxos insolúveis. Consórcios bacterianos provenientes de estação de tratamento de água residual industrial (I) e sanitária (II e III), além da cultura pura Enterobacter sp. (inóculo IV) foram utilizados como inóculos e reativados em meio de cultivo, pH 7,0, a 37°C por 7 dias, sob condições anaeróbias. Para a obtenção de consórcios bacterianos produtores de H2, o pré-tratamento nos inóculos I, II e III foi realizado por meio do choque térmico (100°C por 15 minutos) com posterior enriquecimento por diluições seriais em meio PYG modificado e pH 5,5. Bacilos Gram positivos e formadores de endósporos foram predominantes. Os consórcios enriquecidos que apresentaram melhores desempenhos quanto à geração de H2, (I) e (II), foram utilizados para as realizações de ensaios, em batelada, em proporções crescentes de glicerol bruto pré-tratado. Nos ensaios de geração de H2, 20% do meio reacional era composto pelos inóculos (I) e (II), separadamente, em meio PYG modificado, mantidos a 37°C, pH inicial 5,5, headspace de N2 (100%) sob as seguintes condições: (a) 10 g DQO L-1 de glicerol bruto pré-tratado e 10 g DQO L-1 de glicerina; (b) 4 g DQO L-1 de glicerina e 16 g DQO L-1 de glicerol bruto pré-tratado e (c) 20 g DQO L-1 de glicerol bruto pré-tratado. Os rendimentos de H2 foram de 2,21, 1,63, 0,83, 1,05, 0,57 e 0,31 mol H2 mol-1 glicerol, respectivamente para Ensaio (I)-a (envolvendo o inóculo (I) sob a condição a), Ensaio (I)-b, Ensaio (I)-c, Ensaio (II)-a (envolvendo o inóculo (II) sob a condição a), Ensaio (II)-b e Ensaio (II)-c, com o consumo de glicerol de 26,9%, 45,8%, 56,2%, 31,7%, 59,0% e 91,0% para os respectivos ensaios citados. Foi detectado principalmente etanol em maior concentração em todos os ensaios envolvendo o inóculo (I), bem como para o inóculo (II) envolvendo os ensaios (II)-a e b, e ácido butírico em maior concentração no ensaio (II)-c. Por meio da análise de biologia molecular, a abundância relativa da ordem Clostridiales para o inóculo (I) e (II) foi, respectivamente, 91,81% e 94,70%, bem como de representantes da família Peptostreptococcaceae com alta abundância relativa para ambos os inóculos, de 85,29% e 70,26% para inóculo (I) e (II) respectivamente. Foi realizado um ensaio comparativo com cultura pura Enterobacter sp. com 20 g DQO L-1 de glicerol bruto pré-tratado e o rendimento obtido foi de 0,13 mol H2 mol-1 glicerol. Além disso, a cultura pura mostrou-se ser mais sensível nos ensaios de geração de hidrogênio devido à presença de contaminantes no glicerol bruto. Os resultados de geração de H2 envolvendo consórcios foram eficientes do ponto de vista em que foram atingidos rendimentos equivalentes, ou até mesmo superiores, aos reportados por outros trabalhos, mostrando que é possível obter hidrogênio por meio do glicerol bruto proveniente de transesterificação do óleo de cozinha usado. / The biodiesel production has led to increase co-product generated in this process, the crude glycerol, which due to its excess, has gained interest in the biotechnological transformations for aimed at formation of value-added products, considering H2 the most interest bioproduct. This study evaluated the potential of bioconversion of crude glycerol from the biodiesel production from used cooking oil, to generate hydrogen through consortia of fermentative anaerobic bacteria. The crude glycerol has been subjected to the acid pretreatment (pH 3.0, 1.0M HCl) to convert soluble soaps, considered inhibitory to microbial growth, to insoluble fatty acids. Consortia from sewage treatment of industrial waste (I) and sanitary waste (II and III), and the pure culture Enterobacter sp. (inoculum IV) were used as inocula and reactivated in growth medium, pH 7.0, at 37°C for 7 days, under anaerobic conditions. To obtain H2-producing bacterial consortia, pretreatment in inocula I, II and III was carried through the thermal shock (100°C for 15 minutes) with subsequent enrichment by serial dilutions in modified PYG and pH 5.5. Gram positive bacillis and spores-forming were predominant. The enriched consortia that showed better performances for the H2 generation, (I) and (II), were used for the assays, in batch mode, varying concentrations in increasing proportions of the crude glycerol pretreated. In the H2 generation assays, 20% of the reaction medium was composed of inoculum (I) and (II) separately in modified PYG medium, kept at 37 ° C, initial pH 5.5, headspace N2 (100%) under the following conditions: (a) 10 g COD L-1 crude glycerol pretreated and 10 g COD L-1 glycerine; (b) 4 g COD L-1 of glycerin and 16 g COD L-1 crude glycerol pretreated and (c) 20 g COD L-1 crude glycerol pretreated. H2 yields were 2.21, 1.63, 0.83, 1.05, 0.57 and 0.31 mol H2 mol-1 glycerol, respectively, for the Assay (I)-a (involving the inoculum (I) under the condition a), Assay (I) -b, Assay (I)-c, Assay (II)-a (involving the inoculum (II) under the condition a), Assay (II) -b Assay (II)-c with glycerol consumption of 26.9%, 45.8%, 56.2%, 31.7%, 59.0% and 91.0% for the respective assays cited. Ethanol was mainly detected in a higher concentration in all assays involving the inoculum (I), as well as for the inoculum (II) involving the assays (II)-a and b, and butyric acid in higher concentrations in the assay (II)-c. Through molecular biology, the relative abundance of the Clostridiales order for the inoculum (I) and (II) were, respectively, 91.81% and 94.70% as well as the Peptostreptococcaceae family showed high relative abundance for both inocula of 85.29% and 70.26% for inoculum (I) and (II) respectively. A comparative assay with a pure culture Enterobacter sp., with 20 g COD L-1 crude glycerol pretreated and the yield obtained was 0.13 mol H2 mol-1 glycerol was performed. In addition, the pure culture was shown to be more sensitive to hydrogen generation assays due to the presence of contaminants in the crude glycerol. The results of generation of H2 evolving consortia were efficient from the point of view that equivalent yields have been achieved, or even superior, to those reported by other studies showing that it is possible to obtain hydrogen by crude glycerol from cooking oil transesterification used.

Orientador: Antonio Batista Filho / Resumo: Com o objetivo de avaliar a patogenicidade e a virulência de fungos entomopatogênicos ao gorgulho aquático do arroz irrigado, Oryzophagus oryzae, foram testados 24 isolados de Metarhizium anisopliae e 2 de Beauveria bassiana. Os bioensaios foram realizados em condições controladas (26+1°C e 12 horas de fotofase). Nos testes para determinar a concentração adequada, a espécie M. anisopliae, isolado E9, apresentou maior patogenicidade quando comparado aos isolados de B. bassiana. A mortalidade confirmada, provocada pelo M. anisopliae, teve início no 4º dia, aumentando em seguida até estabilizar-se no 8º dia. Para a seleção dos isolados de M. anisopliae, adultos dos insetos foram inoculados com 1 mL de suspensão fúngica a 5x108 conídios/mL (1,6x104 conídios/mm2). Todos os isolados foram patogênicos ao inseto, sendo que a mortalidade variou entre 9,3 e 85,3 %. Os isolados de M. anisopliae mais patogênicos foram CB-103, CB-104, CB-233, E9 e CB-10. No teste de produção, os isolados CB-104, CB-233 e CB-103 foram superiores ao padrão E9, apresentando-se promissores para a utilização no controle de Oryzophagus oryzae. / Abstract: Strains of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana were evaluated concerning their pathogenicity and virulence for control of the rice water weevil, Oryzophagus oryzae. Bioassay conditions were 26+1ºC and 12 h. light. M. anisopliae (E9 strain) was been more pathogenic than two Beauveria bassiana strains (CB-66 and CB-74). For Metarhizium anisopliae (E9 strain), the mean mortality started at 4th day, increasing soon after until stabilize at 8 th day. A screening of M. anisopliae isolates was done inoculating adults of the insect with 1 mL of spore suspension containing 5x108 conídia/mL (1.6x104 conídia/mm2). All isolates were pathogenic to the insect, causing mortality between 9.3 and 85.3%. The most pathogenic isolates were CB-103, CB-104, CB-233, E9 and CB-10. These 6 isolates were evaluated concerning their spore production on cooked rice. The isolates CB-104, CB-233 and CB-103 afforded the highests spores production, significantly higher compared to E9, showing potential to be used for Oryzophagus oryzae control. / Mestre

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-01-27T13:44:02Z No. of bitstreams: 1 CarolineGabrielaBezerraDeMoura_TESE.pdf: 2231934 bytes, checksum: 890994db2e35bf07a5f1e900da0830e5 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-01-31T14:50:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CarolineGabrielaBezerraDeMoura_TESE.pdf: 2231934 bytes, checksum: 890994db2e35bf07a5f1e900da0830e5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-31T14:50:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CarolineGabrielaBezerraDeMoura_TESE.pdf: 2231934 bytes, checksum: 890994db2e35bf07a5f1e900da0830e5 (MD5) Previous issue date: 2015-12-14 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / O objetivo desta tese ? compreender os fatores que influenciam o balan?o de carbono em reservat?rios do semi?rido do nordeste brasileiro e avaliar o efeito de peixes com diferentes h?bitos alimentares no balan?o de carbono destes ambientes. Os resultados desta tese nos mostraram que peixes com diferentes h?bitos alimentares podem influenciar o balan?o de carbono em reservat?rios (Cap?tulo I; Cap?tulo II; Capitulo III). Demonstramos atrav?s de experimentos de mesocosmos que peixes bent?voros (detrit?voros) aumentam a heterotrofia e emiss?o de CO2 para atmosfera, atrav?s da ressuspens?o de mat?ria org?nica e nutrientes presos ao sedimento, que estimulam as taxas de respira??o planct?nica e microbiana, assim como os processos de metanotrofia (Cap?tulo II). Por outro lado, peixes on?voros como a Til?pia do Nilo, favorecem a diminu??o da emiss?o de CO2 para a atmosfera, atrav?s do est?mulo da biomassa fitoplanct?nica ocasionado principalmente via cascata tr?fica pela diminui??o da biomassa de zoopl?ncton (Cap?tulo III). Al?m disso, reservat?rios que apresentam uma domin?ncia de s?lidos inorg?nicos em suspens?o pode indicar que o ambiente est? emitindo CO2 para a atmosfera. Em contrapartida, reservat?rios que apresentam uma domin?ncia de s?lidos org?nicos em suspens?o pode indicar que o ambiente esteja apreendendo CO2 da atmosfera (Cap?tulo I). Podemos concluir, que alguns fatores como a domin?ncia de s?lidos em suspens?o pode ser um indicativo da fun??o do ecossistema aqu?tico frente ao balan?o de carbono. Al?m disso, peixes com diferentes h?bitos alimentares podem influenciar o balan?o de carbono em reservat?rios. / The objective of this thesis is to understand the factors that influence the carbon balance in semi-arid reservoirs in northeastern Brazil and to evaluate the effect of the feeding characteristics in the carbon balance of these environments. The results of this thesis have shown that fish with different feeding characteristics can influence carbon balance in reservoirs (Chapter I, Chapter II, Chapter III). We have demonstrated through experiments mesocosms that benthivorous fish enhance heterotrophic and emission of CO2 to the atmosphere, through the suspension of organic matter and nutrients attached to sediment, which stimulate plankton and microbial respiration rates as well as methanotrophy processes (Chapter II). On the other hand, omnivorous fish like Nile Tilapia favor decrease CO2 emissions to the atmosphere by stimulating phytoplankton biomass mainly caused via trophic cascade by decrease in zooplankton biomass (Chapter III). In addition, reservoirs which have a predominance of inorganic suspended solids may indicate that the environment is emitting CO2 to the atmosphere. However, reservoirs have a dominance of organic suspended solids may indicate that the environment is uptake CO2 by the atmosphere (Chapter I). We can conclude, that some factors such as the dominance of suspended solids may be indicative of the of carbon balance function by aquatic ecosystem. In addition, fish with different feeding characteristics can influence the carbon balance in reservoirs.

Leveduras oleaginosas possuem a capacidade de sintetizar grande quantidade de lipídeos em suas células, gerando produtos de alto valor agregado através de um processo sustentável. Um perfil de ácidos graxos poli-insaturados é de grande interesse por parte das industrias alimentícia e farmacêutica e têm sido alvo de diversos estudos em relação à sua produção e efeitos benéficos à saúde. O presente trabalho teve como objetivo produzir ácidos graxos poli-insaturados pela levedura Meyerozyma guilliermondii BI281 utilizando glicose, glicerol residual e permeado de soro de queijo como fontes de carbono. Avaliou-se o metabolismo da levedura em meios de cultivo com diferentes composições (“meio A” e “base YM”) e comparou-se o seu desempenho em razões C/N 100: 1 e 50:1. A levedura foi capaz de metabolizar todos os substratos testados e o meio de cultivo “A” com glicerol residual e razão C/N 50:1 mostrou-se o mais adequado, obtendo valores de 5,67 g.L-1 de biomassa e 1,04 g.L-1 de lipídeos, representando aproximadamente 18 % do peso da massa seca de biomassa. Esta condição foi escalonada para biorreator de 2 L, onde condições de aeração e controle de pH puderam ser avaliadas, apresentando quantidade semelhante de lipídeos (1,08 g.L-1) e uma maior produção de biomassa (7,05 g.L-1). Os ácidos graxos sintetizados apresentaram em sua composição ácido láurico (C12:0), ácido mistírico (C14:0), ácido palmítico (C16:0), ácido pamitoleico (C16:1), ácido esteárico (C18:0), ácido oleico (C18:1 n-9), ácido linoleico (C18:2 n-6) e ácido linolênico (C18:3 n-3). / Oleaginous yeasts are able to synthesize high amounts of lipids in their cells, producing high added-value products through a sustainable process. Food and pharmaceutical companies have great interest in polyunsaturated fatty acids depending on their profiles and many studies related to their production and health benefits have been carried out. The aim of this study was to produce polyunsaturated fatty acids by the yeast Meyerozyma guilliermondii BI281A using glucose, crude glycerol, and cheese whey permeate as carbon sources. Yeast metabolism was evaluated in different compositions of culture media (“A” and “YM”) and at different C/N ratios (100:1 and 50:1). The yeast was able to assimilate all substrates tested, and medium “A” with crude glycerol as carbon source at a C/N ratio of 50:1 had the most efficient result with biomass production of 5.67 g.L-1 and lipid production of 1.08 g.L-1, which represented 18 % of dry cell weight. This composition was scaled-up to a 2 L bioreactor, where it was possible to measure pH and aeration conditions, and showed similar lipid production (1.08 g.L-1) and higher biomass production (7.05 g.L-1). Fatty acids profile obtained was composed by lauric acid (C12:0), myristic acid (C14:0), palmitic acid (C16:0), palmitoleic acid (C16:1), stearic acid (C18:0), oleic acid(C18:1), linoleic acid (C18:2 n-6), and linolenic acid (C18:3 n-3).